GAMBARAN UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK DAUN

SIRIH HIJAU (Piper betle L.) TERHADAP BAKTERI

Pseudomonas aeruginosa

ARTIKEL
KARYA TULIS ILMIAH

CHOLIF ILHAM TOHARI

13.131.0046

PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALIS KESEHATAN

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN
INSAN CENDEKIA MEDIKA
JOMBANG
2016
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Bakteri merupakan salah satu mikroba yang mempengaruhi kehidupan

manusia. Di daerah tropis seperti Indonesia, penyakit yang disebabkan oleh

bakteri patogen memiliki peringkat yang cukup tinggi dalam urutan penyakit yang

banyak diderita oleh masyarakat (Dzen, Sjoekoer. Et al, 2013). Pada saat ini

penggunaan antibiotik terhadap bakteri sudah banyak yang resisten karena

pemakaian yang tidak sesuai aturan sehingga merubah pola kerja dari bakteri

tersebut. Sebagai alternatif dari penggunaan antibiotik tersebut, bisa digunakan

antibakteri yang berasal dari alam, yang diharapkan tidak menimbulkan resistensi,

lebih alami dan meminimalisir masuknya zat-zat kimia dalam tubuh (Salleh,

2011).

Dengan semakin banyaknya efek samping penggunaan obat sintetis jangka

panjang, masyarakat mulai banyak melirik obat-obatan tradisional dalam

mengobati, menjaga kesehatan dan mencegah penyakit itu sendiri. Sebuah data

menyebutkan bahwa di beberapa negara Asia dan Afrika sebanyak 80% dari

jumlah populasi menggunakan obat obatan tradisional sebagai primary health

care sebanyak 70-80% dari populasi di negara maju menggunakan obat

tradisional sebagai alternatif pengobatan maupun pelengkap pengobatan (WHO,

2010).

Penyakit infeksi masih menjadi salah satu masalah kesehatan serius yang

dihadapi oleh dunia. Hampir 14 juta orang tiap tahunnya meninggal dunia akibat

menderita penyakit infeksi (Schlein, 2011). Angka kematian akibat infeksi oleh

bakteri ini diduga mencapai 50% tergantung jenis infeksinya (Kulkarni, 2010).
1
 Data terakhir yang didapatkan di Laboratorium Mikrobiologi RSUP M.

Djamil Padang dari bulan Juli hingga Desember 2012, pasien yang mengalami

infeksi akibat kuman Pseudomonas aeruginosa ini adalah sebanyak 80 pasien dari

683 pasien infeksi nosokomial, dimana dari bahan pus sebanyak 27 pasien,

sputum 27 pasien, urin 6 pasien, cairan 8 pasien, swab tenggorokan 8 pasien,

darah 3 pasien, dan feses sebanyak 1 pasien.

Pseudomonas aeruginosa merupakan patogen utama bagi manusia. Bakteri

ini kadang-kadang mengkoloni pada manusia dan menimbulkan infeksi apabila

fungsi pertahanan inang abnormal. Oleh karena itu, Pseudomonas

aeruginosa disebut patogen oportunistik, yaitu memanfaatkan kerusakan pada

mekanisme pertahanan inang untuk memulai suatu infeksi. Bakteri ini dapat juga

tinggal pada manusia yang normal dan berlaku sebagai saprofit pada usus normal

dan pada kulit manusia. Tetapi, infeksi Pseudomonas aeruginosa menjadi

problema serius pada pasien rumah sakit yang menderita kanker, fibrosis kistik

dan luka bakar. Angka fatalitas pasien-pasien tersebut mencapai 50 %. Infeksinya

biasanya gawat, sulit diobati dan biasanya merupakan infeksi nosokomial. Infeksi

nosokomial akibat Pseudomonas aeruginosa salah satunya melalui kateter yang

dapat menyebabkan infeksi saluran kemih. Genus Pseudomonas mempunyai

spesies paling sedikit 10-12 yang penting dalam klinik (Teenoz, 2012).

Penyakit infeksi diduga menjadi salah satu masalah utama yang

menyebabkan kecacatan dan kematian di negara berkembang (Ambrus, 2004).

Infeksi dapat terjadi karena dipengaruhi oleh faktor-faktor utama, yaitu

kerentanan hospes, kemampuan mikroba untuk menimbulkan infeksi dan keadaan

lingkungan yang sesuai untuk perkembangan mikroba. Salah satu bakteri

penyebab infeksi yang dapat menimbulkan kesakitan dan kematian yang tinggi,

yaitu bakteri Pseudomonas aeruginosa.

 Salah satu obat tradisional yang banyak dikenal sebagian masyarakat

memiliki khasiat yang bermanfaat bagi tubuh adalah daun sirih (Piper Betle L).

Daun sirih yang telah lama dikenal sebagai antiseptik, juga diketahui mengandung

zat-zat aktif yang mampu menghambat aktivitas bakteri. Kandungan kimia

minyak atsiri dalam daun sirih antara lain kadinen, kavikol, sineol, eugenol,

karvakol, tanin dan zat samak dapat menghambat aktivitas bakteri dengan cara

menghambat proses pembentukan dinding sel atau dengan melisiskan dinding sel

yang sudah terbentuk (Mursito, 2000).

Menurut Sebih (2012) menunjukan bahwa ekstrak daun sirih memberikan

batas daerah hambatan dengan diameter rata-rata 2,3 mm pada konsentrasi ekstrak

1%, diameter rata-rata 3,3 mm pada konsentrasi ekstrak 2%, diameter rata-rata 4,3

mm pada konsentrasi 4%, diameter rata-rata 5,6 mm pada konsentrasi 6%,

diameter rata-rata 7,3 mm pada konsentrasi 8%, diameter rata-rata 9 mm pada

konsentrasi 10% untuk menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas

aeruginosa.

Hasil uji farmakologi menunjukkan bahwa infusa daun sirih dapat

menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa (Mursito, 2000).

Kandungan fenol yang terkandung dalam sirih hijau diyakini memiliki kandungan

fenol lebih banyak dibanding fenol pada umumnya. Fenol dapat menghambat

aktivitas bakteri (Tristika, 2015). Pada penelitian Suliantari (2008), ekstrak daun

sirih hijau yang diperoleh dengan pelarut etanol mempunyai aktivitas antibakteri

terhadap beberapa bakteri gram positif dan gram negatif yang salah satunya

adalah Pseudomonas aeruginosa (Tristika, 2015).

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka peneliti merumuskan suatu

permasalahan " Apakah daun sirih hijau (Piper betle L) dapat menghambat

pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa? ”.

1.3 Tujuan Penelitian

Mengetahui gambaran daya hambat daun sirih hijau (Piper betle L) dalam

pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa.

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat Teoritis

1. Menambah pengetahuan tentang daya anti bakteri ekstrak daun sirih hijau

(Piper betle L).

2. Dapat dijadikan sebagai referensi dan bahan bacaan bagi mahasiswa atau

mahasiswi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Insan Cendekia Medika

Jombang.

1.4.2 Manfaat Praktis

Memberikan informasi baru kepada masyarakat bahwa ekstrak daun

sirih hijau (Piper betle L) dapat digunakan untuk menghambat pertumbuhan

bakteri Pseudomonas aeruginosa.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Daun Sirih

 Daun sirih merupakan salah satu jenis tanaman dari suku Piperaceae dengan

nama latin Piper Betle L. atau Chavica auriculata Miq atau Chavica betle Miq.

Tanaman ini bisa merambat mencapai tinggi 15 meter. Batang sirih berwarna cokelat

kehijauan, berbentuk bulat, beruas dan merupakan tempat keluarnya akar. Daunnya

yang tunggal berbentuk jantung, berujung runcing, tumbuh berselang-seling,

bertangkai dan mengeluarkan bau yang sedap bila diremas (Samroatul, 2011).

Selama berabad-abad tanaman obat telah digunakan untuk pengobatan

penyakit. Pengakuan terhadap obat tradisional sebagai pengobatan alternatif dan

adanya resistensi mikroba terhadap antibiotika yang tersedia memicu pencarian

aktivitas antimikrobia dari tanaman obat tersebut. Salah satu tanaman obat yang

biasa dipakai adalah daun sirih. Tanaman sirih (Piper betle L.) tumbuh secara luas

pada daerah yang mempunyai kelembapan tinggi seperti di Asia Tenggara. Daunnya

menghasilkan bau dan aroma yang kuat dan banyak dipakai untuk menyegarkan

mulut. Daun sirih juga dikenal untuk menyembuhkan luka, stimulasi digesti dan

mempunyai aktivitas antimikroba (Ramji, 2010).

Menurut Moeljanto dan Mulyono (2003) tanaman sirih dalam tata nama

tumbuhan kingdom plantae (Tumbuhan), Subkingdom tracheobionta (tumbuhan

berpembuluh), Sub divisi spermatophyta (Menghasilkan biji), Divisi magnoliophyta

(Tumbuhan berbunga), Kelas magnoliopsida (berkeping dua / dikotil), Sub kelas

magnoliidae, Ordo piperales, Famili piperaceae (suku sirih-sirihan), Genus piper,

Spesies piper betle L. Daun sirih yang telah lama dikenal sebagai antiseptik, juga
5
diketahui mengandung zat-zat aktif yang mampu menghilangkan bau badan. Sirih

dikenal ampuh menghilangkan bau badan terutama yang ditimbulkan bakteri atau

jamur. Kandungan kimia minyak atsiri dalam daun sirih antara lain kadinen, kavikol,

sineol, eugenol, karvakol dan zatsamak (Seilla, 2010).

 Gambar 2.1 Daun sirih hijau (Piper betle L)

2.2 Kandungan pada daun sirih hijau

Karvakol bersifat sebagai desinfektan dan anti jamur sehingga bisa digunakan

sebagai antiseptik, euganol dapat digunakan untuk mengurangi sakit gigi (Syukur,

2011). Saponin dan tanin bersifat sebagai antiseptik, bekerja sebagai bakteriostatik

yang biasanya digunakan untuk infeksi pada kulit, bakteriostatik juga berfungsi

sebagai anti inflamasi (Kartasapoetra, 1992 dikutip Syukur, 2011). Minyak atsirinya

pada daun sirih antara lain mengandung kavikol dan kavibekol yang merupakan

turunan dari fenol yang mempunyai daya antibakteri lima kali lipat dari fenol biasa.

Cara kerja fenol dalam membunuh suatu mikroorganisme yaitu dengan cara

mendenaturasi protein sel, dengan terdenaturasinya protein sel maka semua aktivitas

metabolisme sel dikatalisis oleh enzim yang merupakan suatu protein (Syukur, 2011)

2.3 Pseudomonas aeruginosa

2.3.1 Klasifikasi

Klasifikasi bakteri Pseudomonas aeruginosa : Kingdom bacteria,

Phylum proteobacteria, Class gamma proteobacteria, Ordo

Pseudomonadales, Family Pseudomonadadaceae, Genus Pseudomonas,

Species aeruginosa (Rahayu, 2013).

2.3.2 Morfologi

Genus Pseudomonas terdiri dari sejumlah bakteri gram negatif, aerob,

bergerak dengan flagel, katalase positif, bersifat patogen oportunistik, yaitu

memanfaatkan kerusakan pada mekanisme pertahanan inang untuk memulai

 suatu infeksi pada manusia dengan ketahanan tubuh menurun. Bakteri

berbentuk batang, bergerak aktif dengan flagel monotrika (flagel tunggal pada

katub) tidak berspora, tidak mempunyai selubung dan bersifat gram negatif

(Rahayu, 2013).

2.3.3 Sifat biakan

Tumbuh secara obligat aerob pada pembenihan gizi sederhana pada

suhu 37oC-42oC. Suhu optimum untuk pertumbuhan Pseudomonas adalah

42oC. Bakteri ini mudah tumbuh pada berbagai media pembiakan karena

kebutuhan nutrisinya sangat sederhana. Bentuk koloni bulat, tepi tidak rata,

transparan, berperan dalam infeksi campuran. Kuman ini menyebabkan luka

termasuk luka bakar, membentuk nanah yang berwarna biru hijau, meningitis

bila dimasukkan pada punksi lumbal, dan infeksi saluran air kemih bila

dimasukan oleh kateter dan alat-alat dalam larutan (Rahayu, 2013).

2.3.4 Struktur antigen

Pseudomonas aeruginosa dapat dibedakan secara serologis dengan

antisera polisakarida dengan kepekaan terhadap pyosin. Sebagian besar

Pseudomonas aeruginosa yang dipisahkan dari infeksi klinis memproduksi

enzim ekstraseluler, termasuk protease dan dua hemolisin, sebuah fosfolifase

C yang tidak tahan panas dan glikolipid yang tahan panas (Rahayu, 2013).

Pseudomonas aeruginosa memproduksi eksotoksin A yang

menyebabkan nekrosis jaringan dan jika bentuk murni disuntikkan pada

binatang bisa mematikan (Rahayu, 2013).

2.3.5 Patogenitas

Pseudomonas aeruginosa menjadi patogenik hanya jika berada pada

tempat dengan daya tahan tidak normal, misalnya di selaput lendir dan kulit

yang rusak akibat kerusakan jaringan. Bakteri menempel dan menyerang

selaput lendir atau kulit, menyebar dari tempat tersebut dan berakibat penyakit
 sistemik. antitoksin A ditemukan dalam beberapa serum manusia, termasuk

serum penderita yang telah sembuh dari infeksi yang berat, lipopolisakarida

mempunyai peranan sebagai penyebab timbulnya demam, syok, oliguria dan

leukositosis (Rahayu, 2013).

Pseudomonas aeruginosa tahan terhadap berbagai anti mikroba dan

karena itu menjadi dominan dan penting. Jika bakteri yang lebih peka dari

flora normal ditekan (Rahayu, 2013).

2.4 Daya Antibakteri Ekstrak Daun Sirih Hijau (Piper betle L)

Daun sirih dapat digunakan sebagai antibakteri karena mengandung 4,2%

minyak atsiri yang sebagian besar terdiri dari betephenol yang merupakan isomer

dari Euganol allypyrocatechine, Cineol methyl euganol, Caryopyllen (siskuiterpen),

kavikol, kavibekol, estragol dan terpinan (Seilla, 2010).

Daya antibakteri minyak atsiri daun sirih disebabkan oleh adanya senyawa

fenol dan turunannya yang dapat mendenaturasi protein sel bakteri. Komponen

utama minyak atsiri terdiri dari fenol dan senyawa turunannya. Salah satu senyawa

turunan itu adalah kavikol yang memiliki daya bakterisidal lima kali lebih kuat

dibandingkan dengan fenol.

Ekstrak kasar daun sirih dilaporkan dapat berfungi sebagai anti bakteri

terhadap Pseudomonas aeruginosa dengan mempengaruhi pertumbuhan dan

pembentukan glucan (Nalina dan Rahim, 2011). Komponen kimia daun sirih pada

minyak atsiri, seskuiterpen, triterpen, terpenoid sitosterol neolignan dan krotepoksid.

Aktivitas anti cendawan diduga berasal dari minyak atsiri daun sirih yaitu

isoeugenol, limonene dan kariofilena (Hertiana dan Purwanti, 2011). Kehadiran

fenol yang merupakan senyawa toksik mengakibatkan struktur tiga dimensi protein

terganggu dan terbuka menjadi struktur acak tanpa adanya kerusakan pada struktur

kerangka kovalen. Hal ini menyebabkan protein terdenaturasi, namun aktivitas

 biologisnya menjadi rusak sehingga protein tidak dapat melakukan fungsinya

(Purwanti, 2011).

Penggunaan larutan etanol pada ekstrak daun siih hijau dikarenakan etanol

mempunyai polaritas yang tinggi sehingga dapat mengekstrak bahan yang lebih

banyak dibanding dengan jenis pelarut organik yang lain dan mudah untuk

melarutkan senyawa-senyawa organik, etanol mempunyai titik didih rendah dan

cenderung aman (Gamse, 2002).

2.5 Ekstraksi

Ekstraksi adalah penarikan kandungan kimia yang dapat larut

sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair.

Simplisia yang diekstrak mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan

senyawa yang tidak dapat larut seperti serat, karbohidrat, protein dan lain-

lain. Senyawa aktif yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat

digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-

lain. Dengan diketahuinya senyawa aktif yang terkandung dalam simplisia

akan mempermudah pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat.

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi

senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani mengggunakan

pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan

dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga

memenuhi baku yang telah ditetapkan (DitJen POM, 2000).

Ada beberapa cara metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut

yaitu :

1. Cara Dingin

a. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan

menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau

 pengadukan pada temperatur kamar. Remaserasi berarti dilakukan

pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan

maserat pertama dan seterusnya.

b. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru

sampai sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan

pada temperatur ruangan. Prosesnya terdiri dari tahapan

pengembangan bahan, tahapan maserasi antara, tahap perkolasi

sebenarnya (penetesan/penemapungan ekstrak), terus menerus

sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan.

2. Cara Panas

a. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik

didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang

relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan

pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga

proses ekstraksi sempurna.

b. Soxhletasi

Soxhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu

baru yang umumnya dikakukan dengan alat khusus sehingga terjadi

ekstrak kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan

adanya pendingin balik.

c. Digesti
 Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan

continue) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur kamar,

yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40oC-50oC.

d. Infus

Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur

penangas air 96oC-98oC (bejana infus tercelup dengan penangas

air mendidih selama 15-20 menit).

e. Dekok

Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥ 30oC) dan

temperatur sampai titik didih air (DitJen POM, 2000).

2.6 Antimikroba

2.6.1 Senyawa Antimikroba

Antimikroba adalah zat yang mampu membunuh atau

menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Antimikroba secara

umum digunakan dalam pengobatan medis infeksi bakteri. Antimikroba

yang ideal menunjukkan toksisitas selektif. Hal ini secara tidak

langsung menjelaskan bahwa obat berbahaya bagi bakteri dan tidak

membahayakan inang. Toksisitas selektif mungkin merupakan fungsi

reseptor spesifik yang dibutuhkan untuk melekatnya obat-obatan, atau

bisa karena hambatan biokimia yang bisa terjadi bagi organisme

namun tidak bagi inang (Brooks dkk., 2001, h. 223-224).

Senyawa antimikroba yang berasal dari tanaman sebagian besar

diketahui merupakan metabolit sekunder tanaman, terutama dari

golongan fenolik dan terpen dalam minyak atsiri. Sebagian besar

metabolit sekunder dibiosintesis dari banyak metabolit primer seperti

asam-asam amino, asetil ko-A, asam mevalonat, dan metabolit antara.

Selain itu, beberapa senyawa yang bersifat antimikroba alami berasal

 dari tanaman diantaranya adalah fitoaleksin, asam organik, minyak

esensial (atsiri), fenolik dan beberapa kelompok pigmen tanaman atau

senyawa sejenis (Nychas dan Tassou, 2000 dikutip dari Nuraini, 2007).

2.6.2 Mekanisme Kerja Obat Antimikroba

Antimikroba yang ideal menunjukkan toksisitas selektif yang

berarti bahwa obat berbahaya bagi parasit dan tidak berbahaya bagi

hospes (Brooks dkk,. 2001, h. 224).

Mekanisme aksi obat antimikroba tidak sepenuhnya dimengerti.

Namun mekanisme aksi ini dapat dikelompokkan menjadi 4 kelompok

utama yaitu :

1. Penghambatan terhadap sintesis dinding sel.

Bakteri mempunyai lapisan luar yang rigid, yakni dinding sel.

Mempertahankan bentuk mikroorganisme dan pelindung sel bakteri,

yang mempunyai tekanan osmotik internal yang tinggi. Tekanan

interal tersebut tiga hingga lima kali lebih besar pada bakteri gram

positif daripada bakteri gram negatif. Trauma pada dinding sel

(misalnya, oleh lisozim) atau penghambatan pembentukannya

menimbulkan lisis pada sel. Pada lingkungan yang hipertonik

(sukrosa 20%), dinding sel yang rusak menimbulkan bentuk

protoplast bakteri sferik dari bakteri gram positif atau asferoplas dari

bakteri gram negatif, bentuk-bentuk ini dibatasi oleh membran

sitoplasma yang fragil. Jika protoplas atau sferoplas diletakkan pada

lingkungan dengan tekanan osmotik tertentu, mereka akan

mengambil cairan dengan cepat, mengembang dan dapat pecah

(Brooks dkk., 2001, h. 224).

2. Penghambatan terhadap fungsi membran sel.

 Sitoplasma semua sel hidup dibatasi oleh membran sitoplasma,

yang berperan sebagai barrier permeabilitas selektif, membawa

fungsi transport aktif, dan kemudian mengontrol komposisi internal

sel. Jika fungsi integritas membran sitoplasma dirusak,

makromolekul dan ion keluar dari sel, kemudian sel rusak atau

terjadi kematian. Membran sitoplasma bakteri dan fungi mempunyai

struktur berbeda dibanding sel binatang dan dapat dengan mudah

dirusak oleh agen tertentu (Brooks dkk., 2001, h. 226).

3. Penghambatan terhadap sintesis protein.

Mekanisme kerja antimikroba melalui penghambatan terhadap

sintesis protein misalnya penghambatan translasi dan transkripsi

material genetik. Zat-zat yang antimikroba yang bekerja dengan

menghambat sintesis protein misalnya: kloramfenikol, makrolida

dan azalida (erytromycin, azithromycin, clarithromicyn,

dirithromicyn), linkomisin (klindamisin), tetrasiklin, aminoglikosida

(Brooks dkk., 2001, h. 226-227).

4. Penghambatan terhadap sintesis asam nukleat.

Mekanisme kerja antimikroba melalui penghambatan terhadap

sintesis asam nukleat misalnya quinolon, pyrimethamin, rifampin,

sulfonamid, trimethropin, trimethrexat) (Brooks dkk., 2001, h. 227-

228).

2.6.3 Resistensi Mikroba terhadap Obat Antimikroba

Terdapat beberapa mekanisme yang menyebabkan suatu bakteri

menjadi resisten terhadap antimikroba, diantaranya adalah:

1. Mikroba memproduksi enzim dan merusak obat yang aktif.

2. Mikroba mengubah permeabilitas membran selnya terhadap obat.

3. Mikroba merubah struktur target terhadap obat.

 4. Mikroba mengembangkan jalur metabolisme baru dan menghindari

jalur yang biasa dihambat oleh obat.

5. Mikroba mengembangkan enzim baru yang masih dapat berfungsi

untuk metaboliknya, tetapi sedikit dipengaruhi oleh obat (Brooks

dkk., 2001, h. 229).

2.6.4 Pengendalian Resistensi Obat Antimikroba

Munculnya resistensi obat antimikroba pada infeksi dapat

dikurangi dengan cara berikut:

1. Mempertahankan kadar yang cukup di dalam jaringan untuk

menghambat populasi asli dan mutasi tingkat rendah.

2. Memberi dua obat yang tidak memberi resistensi silang secara

simultan, masing-masing menunda timbulnya mutan resisten

terhadap obat yang lain.

3. Mencegah penampakan mikroorganisme terhadap obat dengan

membatasi penggunaannya, khususnya di rumah sakit (Brooks

dkk., 2001, h. 231).

2.6.5 Uji Antibiotik Antimikroba

Menurut Pratiwi (2008, h. 188) uji antibiotik antimikroba dilakukan

dengan mengukur respon pertumbuhan populasi mikroorganisme

terhadap agen antimikroba. Tujuan assay antimikroba adalah untuk

menentukan potensi dan kontrol kualitas selama proses produksi

senyawa antimikroba di pabrik, untuk menentukan farmakokinetik obat

pada hewan atau manusia, dan untuk memonitor dan mengontrol

kemoterapi obat. Kegunaan uji antimikroba adalah diperolehnya suatu

sistem pengobatan yang efektif dan efisien. Terdapat beberapa

metode uji antimikroba diantaranya:

1. Metode Difusi
a. Metode Disc Diffusion (tes Kirby-Bauer)

Metode yang paling sering digunakan adalah metode difusi

agar. Prinsip dari metode difusi Agar/cakram adalah obat

dijenuhkan ke dalam kertas saring (cakram kertas) yang

kemudian ditanam pada media perbenihan agar padat yang telah

dicampur dengan mikroba uji, kemudian diinkubasi pada suhu

37oC selama 18-24 jam. Selanjutnya amati adanya area (zona)

jernih disekitar cakram kertas yang menunjukkan tidak adanya

pertumbuhan mikroba (Brooks dkk,. 2001, h. 235).

Pada metode Disc Diffusion (tes Kirby-Bauer) dilakukan

dengan cara membandingkan diameter dari area jernih (zona

hambat) di sekitar cakram dengan tabel standar yang dibuat oleh

NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standard).

Dengan tabel ini dapat diketahui kriteria sensitif, sensitif

intermediet, dan resisten (Dzen et al. 2003 dikutip dari Siregar,

2007).

b. E-test

Metode E-test digunakan untuk mengestimasi MIC

(Minimum Inhibitory Concentration) atau KHM (Kadar Hambat

Minimum), yaitu konsentrasi minimal suatu agen antimikroba

untuk dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme (Pratiwi,

2008, h. 189).

Pada metode ini digunakan strip plastik yang mengandung

agen antimikroba dari kadar terendah hingga tertinggi dan

diletakkan pada permukaan media agar yang telah ditanami

mikroorganisme. Pengaamatan dilakukan pada area jernih yang

ditimbulkan yang dapat menunjukkan kadar agen antimikroba

 yang menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada media

agar (Pratiwi, 2008, h. 189).

c. Ditch-plate Technique

Pada metode ini sampel uji berupa agen antimikroba yang

diletakkan pada parit yang dibuat dengan cara memotong media

agar dalam cawan petri pada bagian tengah secara membujur

dan mikroba uji digoreskan ke arah parit yang berisi agen

antimikroba (Pratiwi, 2008, h.189).

d. Cup-plate Technique

Metode ini serupa dengan metode disc diffusion, dimana

dibuat sumur pada media Agar yang telah ditanam dengan

mikroorganisme dan pada sumur tersebut diberi agen

antimikroba yang akan diuji (Pratiwi, 2008, h.189).

e. Gradient-plate Technique

Pada metode ini, konsentrasi agen antimikroba pada media

Agar secara teoritis bervariasi dari 0 hinggga maksimal. Media

Agar dicairkan dan larutan uji ditambahkan. Campuran kemudian

dituang ke dalam cawan petri dan diletakkan dalam posisi miring.

Nutrisi kedua selanjutnya dituang di atasnya. Plate diinkubasi

selama 24 jam untuk memungkinkan agen antimikroba berdifusi

dan permukaan media mengering. Mikroba digoreskan pada

arah mulai dari konsentrasi tinggi ke rendah (Pratiwi, 2008, h.

189).

Metode difusi agar dipengaruhi oleh beberapa faktor fisik

dan kimia, selain faktor antara obat dan organisme (misalnya

sifat medium dan kemampuan difusi, ukuran molekular, dan

stabilitas obat)(Brooks dkk., 2001, h. 235).

2. Metode Dilusi

Metode dilusi dibedakan menjadi dua yaitu :

a. Dilusi Cair (Broth Dilution Test/Serial Dilution)

Metode ini digunakan untuk mengukur MIC (Minimum

Inhibitory Concentration atau kadar hambat minimum, KHM), dan

MBC (Minimum Bactericidal Concentration atau Kadar Bunuh

Minimum, KBM). Cara yang digunakan adalah dengan membuat

seri pengenceran agen antimikroba uji. Larutan uji agen

antimikroba pada kadar terendah akan terlihat jernih tanpa

adanya pertumbuhan mikroba uji ditetapkan sebagai KHM.

Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut selanjutnya

dikultur ulang pada media padat tanpa penambahan mikroba uji

ataupun agen antimikroba, dan diinkubasi selama 18-24 jam.

Media padat yang tetap terlihat jernih ditetapkan sebagai KBM.

b. Metode Dilusi Padat (Solid Dilution Test)

Metode ini serupa dengan metode dilusi cair namun

menggunakan media padat. Keuntungan metode ini adalah satu

konsentrasi agen antimikroba yang diuji dapat digunakan untuk

menguji beberapa mikroba uji (Pratiwi, 2008, h. 190-191)

 BAB III

KERANGKA KONSEPTUAL

3.1 Kerangka Konseptual

Kerangka konseptual merupakan suatu uraian dan visualisasi

hubungan atau kaitan antara konsep satu terhadap konsep yang lainnya,

atau antara variabel yang satu dengan variabel yang lainnya dari masalah

yang ingin diteliti (Notoatmodjo 2012, h. 83).

Daun sirih hijau (Piper betle L.)

Daun Batang Akar

Ekstrak

Tanin Saponin Kavikol

Bakteriostastik Melisiskan Mendenaturasi

protein sel
Aktivitas

Bakteri

Uji Dilusi
 Keterangan :

: Variabel yang diteliti

: Variabel yang tidak diteliti

Gambar 3.1 Kerangka konseptual tentang gambaran uji daya hambat ekstrak
daun sirih hijau (Piper betle L) terhadap bakteri Pseudomonas
aeruginosa.

3.2 Penjelasan Kerangka Konseptual

19
Sirih hijau (Piper betle L.) merupakan sejenis tumbuhan yang memiliki

akar, daun, dan batang. Pada bagian daun sirih hijau (Piper betle L.)

kemudian diekstrak sehingga didapatkan ekstrak yang mengandung

senyawa antimikroba diantaranya kadinen, kavikol, tanin, sineol, eugenol,

karvakol dan zat samak. Pengujian uji daya hambat daun sirih hijau

dilakukan menggunakan Uji Dilusi metode Dilusi Padat untuk mengetahui

Kadar Hambat Minimum (KHM) dari ekstrak daun sirih (Piper betle L.)

terhadap pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa.

 BAB IV

METODE PENELITIAN

Metode penelitian sebagai suatu cara untuk memperoleh kebenaran

ilmu pengetahuan atau pemecahan suatu masalah (Notoatminodjo 2010).

Pada bab ini akan diuraikan hal-hal yang meliputi :

4.1 Waktu dan Tempat Penelitian

4.1.1 Waktu Penelitian

Waktu penelitian ini dilakukan (mulai dari penyusunan proposal

sampai dengan penyusunan laporan akhir) pada bulan Januari sampai

dengan bulan Juni 2016.

4.1.2 Tempat Penelitian

Tempat pelaksanaan penelitian ini dilakukan di Laboratorium

Mikrobiologi Program Studi D-III Analis Kesehatan Sekolah Tinggi Ilmu

 Kesehatan Insan Cendekia Medika Jombang Jalan Kemuning No. 57 A

Candimulyo, Kabupaten Jombang, Provinsi Jawa Timur.

4.2 Desain Penelitian

Desain penelitian merupakan sesuatu yang sangat penting dalam

penelitian. Desain penelitian digunakan sebagai petunjuk dalam

merencanakan dan melaksanakan penelitian untuk mencapai suatu tujuan

atau menjawab pertanyaan penelitian (Nursalam, 2011). Penelitian yang

digunakan adalah deskriptif.

4.3 Kerangka Kerja (Frame Work)

Kerangka kerja merupakan langkah-langkah yang akan dilakukan

dalam penelitian yang berbentuk kerangka atau alur penelitian, mulai dari

desain hingga analisis datanya (Hidayat, 2012). Kerangka kerja penelitian

tentang uji daya hambat ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.) terhadap

bakteri Pseudomonas aeruginosa sebagai

21 berikut :

Penentuan Masalah

Penyusunan Proposal

Populasi, Sampel
Bakteri Pseudomonas aeruginosa

Desain Penelitian
Deskriptif

Pengumpulan Data

Pengolahan Data
Coding, dan tabulating

Analisa Data

Penyajian Data

Penyusunan Laporan Akhir

Gambar 4.1 Kerangka kerja penelitian tentang uji daya hambat ekstrak daun sirih
hijau (Piper betle L.) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa.

4.3.1 Rancangan penelitian

Daun sirih hijau

Dipotong

kecil-kecil

Maserasi selama
3 hari

Ekstrak Kontrol negatif

5% 10% 15 % aquadestilasi

+ 1ml + 1ml + 1ml + 1ml

suspensi suspensi suspensi suspensi

bakteri bakteri bakteri bakteri

Dilusi padat

KHM
Gambar 4.2 Rancangan penelitian gambaran uji daya hambat ekstrak daun sirih hijau
(Piper betle L.) terhadap pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa.

4.4 Populasi, Sampel dan Sampling penelitian

4.4.1 Populasi Penelitian

Populasi adalah keseluruhan objek penelitian atau objek yang

akan diteliti (Notoatmodjo 2010, h. 115). Pada penelitian ini

populasinya adalah bakteri Pseudomonas aeruginosa.

4.4.2 Sampling

Sampling adalah proses menyeleksi porsi dan populasi untuk

dapat mewakili populasi (Nursalam 2008, h. 93).

4.4.3 Sampel

Sampel adalah objek yang diteliti dan dianggap mewakili seluruh

populasi (Notoatmodjo 2010, h. 115). Pada penelitian ini sampel yang

digunakan adalah bakteri Pseudomonas aeruginosa yang didapatkan

dari Laboratorium Mikrobiologi Balai Besar Laboratorium Kesehatan

Surabaya.
4.5 Definisi Operasional Variabel

4.5.1 Variabel

Variabel adalah sesuatu yang digunakan sebagai ciri, sifat, atau

ukuran yang dimiliki atau didapatkan oleh satuan penelitian tentang

sesuatu konsep pengertian tertentu (Notoatmodjo 2010, h. 103).

Variabel pada penelitian ini adalah gambaran uji daya hambat ekstrak

daun sirih hijau (Piper betle L.) Terhadap bakteri Pseudomonas

aeruginosa.

4.5.2 Definisi Operasional Variabel

Definisi operasional variabel adalah uraian tentang batasan

variabel yang dimaksud atau tentang apa yang diukur oleh variabel

yang bersangkutan (Notoatmodjo 2010, h. 112). Definisi operasional

variabel pada penelitian ini dapat digambarkan pada tabel 4.1

Tabel 4.1 Definisi Operasional uji daya hambat ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.)
terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa.

Alat
Variabel Definisi Operasional Parameter Kategori
ukur

Daya Kemampuan untuk Jumlah Colony  Positif : Tidak ada

hambat membunuh atau koloni counter koloni yang
ekstrak menghambat bakteri tumbuh
daun sirih pertumbuhan bakteri  Negatif : Tumbuh
hijau (Piper Pseudomonas koloni
betle L.) aeruginosa

4.6 Instrumen Penelitian dan Cara Penelitian

4.6.1 Instrumen Penelitian

Instrumen penelitian adalah alat atau fasilitas yang akan

digunakan oleh peneliti dalam mengumpulkan data agar pekerjaannya

lebih mudah dan hasilnya lebih baik (cermat, lengkap dan sistematis)

sehingga lebih mudah diolah (Saryono, 2011). Instrumen yang

digunakan untuk uji daya hambat ekstrak daun sirih hijau (Piper betle
L.) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa secara in vitro adalah

sebagai berikut:

A. Alat yang digunakan:

1. Autoclave

2. Batang pengaduk

3. Beaker glass

4. Blue tip

5. Cawan petri

6. Centrifuge

7. Colony Counter

8. Corong gelas

9. Erlenmeyer

10. Hot plate

11. Inkubator

12. Kertas koran

13. Kompor gas

14. Mikropipet 1000 uL

15. Neraca analitik

16. Oven

17. Pembakar spiritus

18. Rak tabung reaksi

19. Refrigerator

20. Tabung reaksi

21. Tabung reaksi

22. Termometer

B. Bahan yang digunakan:

1. Alkohol 96%
 2. Aluminium foil

3. Aquades steril

4. Handscoon

5. Isolat bakteri Pseudomonas aeruginosa yang diperoleh dari

Laboratorium MIkrobiologi Balai Besar Laboratorium Kesehatan

Surabaya.

6. Kapas

7. Kertas label

8. Larutan NaCl

9. Masker

10. Media padat Nutrient agar (NA)

11. Daun sirih hijau (Piper betle L.)

4.6.2 Cara Penelitian

a. Membuat ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L)

1. Daun sirih yang digunakan adalah daun sirih hijau.

2. Daun sirih segar yang telah dipetik sebanyak 800 gram

dipotong-potong dan di bersihkan dari kotoran, dicuci dengan

air sampai bersih dan ditiriskan.

3. Selanjutnya daun sirih tersebut dikeringkan dengan

menggunakan oven pada suhu 40-50o C.

4. Daun sirih yang telah dikeringkan kemudian ditimbang dengan

menggunakan timbangan simplisa sebanyak 140 gram.

5. Pembuatan cara ini menggunakan cara maserasi yaitu dengan

merendam daun sirih kedalam bejana maserasi secara terpisah

kemudian diberi larutan etanol 96% sampai daun terendam

sempurna.
 6. Bejana maserasi tersebut ditutup rapat dan didiamkan selama 3

hari sambil diaduk satu kali setiap hari.

7. Hasil yang diperoleh disaring dan diulang sebanyak tiga kali.

8. Memanaskan di atas hot plate hingga volumenya berkurang

dan agak mengental.

9. Memekatkan hasil ekstraksi dengan menggunakan centrifuge.

10. Memasukkan ke oven hingga bentuknya kental menyerupai

pasta.

11. Menghitung nilai rendemen dengan menggunakan rumus:

Rendemen = W x 100%
W0
Keterangan :

W : bobot ekstrak murni (g)

W0 : bobot bahan yang di ekstrak (g)

b . Sterilisasi

1. Memasukkan blue tip ke dalam beaker glass yang berisi kapas,

menutup dengan aluminium foil dan mensterilisasi dengan

autoclave pada suhu 121oC selama 15 menit.

2. Mengisi erlenmeyer dengan 1000 ml aquadest, menutup mulut

erlenmeyer dengan kapas yang dipadatkan, membungkus

dengan aluminium foil dan mensterilisasi dengan autoclave pada

suhu 121oC selama 15 menit.

3. Membungkus tabung reaksi, batang pengaduk, pinset dan cawan

petri dengan aluminium foil/kertas koran kemudian mensterilisasi

dengan autoclave pada suhu 121oC selama 15 menit.

c . Membuat Media Padat Nutrient agar (NA)

1. Menimbang Nutrient agar (NA) serbuk sebanyak 1,2 gram.

2. Melarutkan dengan 50 ml aquades di dalam beaker glass.

 3. Menghomogenkan campuran.

4. Memanaskan di atas hot plate dan mengaduk hingga mendidih,

lalu dibiarkan beberapa saat.

5. Dipipet sebanyak 4 mL dan dimasukkan ke dalam 3 buah tabung

reaksi.

6. Tabung reaksi disumbat dengan kertas dan ditutup dengan

kertas yang diikat dengan karet gelang.

7. Mensterilisasi menggunakan autoclave pada suhu 1210C selama

15 menit.

8. Membiarkan dingin dan memasukkan ke dalam refrigerator untuk

disimpan.

d . Pembuatan suspensi bakteri

1. Meremajakan bakteri Pseudomonas aeruginosa dengan cara

menggoreskan bakteri Pseudomonas aeruginosa menggunakan

ose ke media agar miring Nutrient Agar dan menginkubasi

selama 24 jam pada suhu 37oC.

2. Mengambil 1 mata ose bakteri Pseudomonas aeruginosa dari

media agar miring Nutrient Agar. Mensuspensikan bakteri

Pseudomonas aeruginosa ke dalam larutan NaCl 0,9%,

kemudian mengukur absorbansinya menggunakan

spektrofotometer dengan panjang gelombang 540 nm sehingga

diketahui kepadatan bakterinya (OD = Optical Density) yang

setara dengan kepadatan bakteri 1 x 108 bakteri/ml, kemudian

diencerkan dengan menggunakan rumus pengenceran :

V1 x N1 = V2 x N2

Keterangan:

N1 = OD bakteri hasil spektrofotometri.

 N2 = OD bakteri dengan kepadatan 1 x 108 bakteri/ml.

V1 = Volume keseluruhan dalam tabung.

V2 = Volume bakteri yang dibutuhkan untuk pengenceran.

Kepadatan bakteri tersebut diencerkan 3 kali dengan NaCl

0,9% hingga menjadi 1 x 106 bakteri/ml.

e . Menguji Efektivitas Antimikroba Metode Dilusi Padat

1. Mencairkan media padat Nutrient agar di atas hot plate.

2. Mempersiapkan 4 cawan petri dan memberi label pada masing-

masing cawan petri.

3. Membuat suspensi bakteri Pseudomonas aeruginosa dengan

konsentrasi 1 x 106 bakteri/ml.

4. Menyiapkan larutan uji ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.)

Konsentrasi 5%, 10%, 12,5% dengan mengencerkan ekstrak

kental daun sirih hijau (Piper betle L.) dengan 4 ml aquades.

Larutan kontrol negatif menggunakan 1 ml aquadest.

5. Memasukkan 1 ml masing-masing konsentrasi ekstrak daun

sirih hijau dan larutan kontrol ke dalam cawan petri steril.

6. Menambahkan 9 ml media Nutrient agar (NA) cair yang masih

hangat dengan suhu 40-500C ke dalam masing-masing cawan

petri tersebut.

7. Menambahkan 1 ml suspensi bakteri dengan konsentrasi 1 x

106 bakteri/ml.

8. Menghomogenkan semua campuran dengan cara

menggoyangkan cawan petri.

9. Menginkubasi dalam inkubator selama 24 jam pada suhu 370C.

10. Menghitung jumlah koloni bakteri dengan menggunakan colony

counter.
 11. Menentukan KHM (Kadar Hambat Minimum) dengan melihat

konsentrasi ekstrak terendah yang tidak ditumbuhi bakteri pada

cawan petri.

4.7 Teknik Pengolahan Data dan Analisa Data

4.6.1 Teknik Pengolahan Data

Setelah data terkumpul, maka dilakukan pengolahan data melalui

tahapan Coding, dan Tabulating.

a. Coding

Adalah kegiatan mengubah data berbentuk kalimat atau huruf

menjadi data angka atau bilangan (Notoatmodjo 2010, h. 177).

Pada penelitian ini, peneliti memberikan kode sebagai berikut:

1) Data Umum

Ekstrak Daun sirih hijau kode PK1

Ekstrak Daun sirih hijau 5% kode PK2

Ekstrak Daun sirih hijau 10% kode PK3

Ekstrak Daun sirih hijau 15% kode PK4

Kontrol Negatif kode PK5

2) Data Khusus

Negatif kode N

Positif kode P

b. Tabulating

Tabulating (pentabulasian) meliputi pengelompokan data

sesuai dengan tujuan penelitian kemudian dimasukkan ke dalam

tabel-tabel yang telah ditentukan yang mana sesuai dengan tujuan

penelitian atau yang diinginkan oleh peneliti (Notoatmodjo, 2010).

Dalam penelitian ini data disajikan dalam bentuk tabel yang

 menggambarkan hasil uji daya hambat ekstrak daun sirih hijau

(Piper betle L.) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa.

4.6.2 Analisa data

Prosedur analisis data merupakan proses memilih dari beberapa

sumber maupun permasalahan yang sesuai dengan penelitian yang

dilakukan (Notoatmodjo, 2010). Prosedur analisa data yang saya

gunakan menggunakan Analisis Univariate.

Analisis univariate bertujuan untuk menjelaskan dan

mendeskripsikan karakteristik setiap variabel penelitian. Bentuk

analisis univariate tergantung dari jenis datanya. Pada umumnya

dalam analisis ini hanya menghasilkan distribusi frekuensi dan

presentase dari tiap variabel (Notoatmodjo, 2010). Analisa unvariate

pada penelitian ini yaitu untuk mengidentifikasi gambaran daya hambat

ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.) terhadap bakteri Pseudomonas

aeruginosa.

4.8 Etika Penelitian

4.8.1 Anonimity (Tanpa nama)

Responden tidak perlu mencantumkan namanya pada lembar

pengumpulan data. Cukup menulis nomor responden atau inisial saja

untuk menjamin kerahasiaan identitas.

4.8.2 Confidentiality (Kerahasiaan)

Kerahasiaan informasi yang diperoleh dari responden akan

dijamin kerahasiaan oleh peneliti. Penyajian data atau hasil penelitian

hanya ditampilkan pada forum akademis.

 BAB V

HASIL DAN PEMBAHASAN

5.1 Waktu dan tempat penelitian

5.1.1 Waktu penelitian

Penelitian dimulai dari perencanaan (penyusunan proposal)

sampai dengan penyusunan laporan akhir, yaitu dari bulan Mei 2016

sampai bulan Juni 2016.

5.1.2 Tempat penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi STIKes Insan

Cendekia Medika Jl.Kemuning 57 Jombang.

5.2 Hasil penelitian

Jangka waktu penelitian Gambaran daya hambat ekstrak daun sirih

hijau (Piper betle L.) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa selama

24 jam berdasarkan uji pendahuluan dengan melihat pada konsentrasi

 berapa bakteri Pseudomonas aeruginosa yang dihambat

pertumbuhannya oleh ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.)

Tabel 5.1 Distribusi frekuensi daya hambat ekstrak daun sirih hijau (Piper betle
L.) pada pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa dengan uji
dilusi pada konsentrasi yang telah di tentukan.

Seri konsentrasi Jumlah koloni

5% 79 koloni
10% Tidak ada koloni
15% Tidak ada koloni

Berdasarkan tabel 5.1 jumlah koloni yang tumbuh pada konsentrasi 5 %

sebanyak 79 koloni, pada konsentrasi 10 % tidak tumbuh koloni, dan pada

konsentrasi 15% tidak tumbuh koloni.

5.3 Pembahasan
33
Pada penelitian ini dilakukan uji antibakteri ekstrak daun sirih hijau

(Piper betle L.). Daun sirih hijau (Piper betle L.) diuji terhadap bakteri

Pseudomonas aeruginosa dengan menggunakan metode dilusi padat. Hasil

penelitian menunjukkan dengan konsentrasi ekstrak daun sirih hijau (Piper

betle L.) 10 % dapat menghambat bakteri Pseudomonas aeruginosa yang

dilakukan dengan perhitungan koloni menggunakan alat koloni counter.

Menurut peneliti, adanya kandungan saponin, tanin, kavikol dan

minyak atsiri pada daun sirih hijau (Piper betle L.) dapat menghambat

pertumbuhan aktivitas bakteri. Kandungan tanin yang bersifat bakteriostastik,

saponin yang mampu melisiskan bakteri, dan kavikol yang mampu

mendenaturasi protein sel, kejadian ini dapat mengganggu aktivitas bakteri

sehingga bakteri akan mati.

Menurut Syukur (2011) kandungan karvakol, saponin dan tanin

dalam daun sirih hijau bersifat sebagai desinfektan dan anti jamur sehingga
bisa digunakan sebagai antiseptik dan bekerja sebagai bakteriostatik,

bakteriostatik juga berfungsi sebagai anti inflamasi. Minyak atsiri pada daun

sirih juga mengandung kavikol dan kavibekol yang merupakan turunan dari

fenol yang mempunyai daya antibakteri lima kali lipat dari fenol biasa. Cara

kerja fenol dalam membunuh suatu mikroorganisme yaitu dengan cara

mendenaturasi protein sel.

Berdasarkan tabel 5.1 pada konsentrasi 5% jumlah koloni yang

tumbuh sebanyak 78 koloni, konsentrasi 10 % tidak tumbuh koloni, dan

konsentrasi 15% juga tidak tumbuh koloni. Terlihat bahwa pada konsentrasi

rendah ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.) belum mampu menghambat

pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa.

Sehingga menurut peneliti semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun

sirih hijau (Piper betle L.) maka pertumbuhan bakteri semakin terhambat.

Pada konsentrasi ekstrak daun sirih hijau yang pekat atau tinggi maka

kandungan saponin, tanin sebagai antibakteri bekerja efektif untuk

menghambat pertumbuhan bakteri.

Pada penelitian sebelumnya, menurut Sebih (2012) menunjukan

bahwa ekstrak daun sirih hijau memberikan batas daerah hambatan dengan

diameter rata-rata 2,3 mm pada konsentrasi ekstrak 1%, diameter rata-rata

3,3 mm pada konsentrasi ekstrak 2%, diameter rata-rata 4,3 mm pada

konsentrasi 4%, diameter rata-rata 5,6 mm pada konsentrasi 6%, diameter

rata-rata 7,3 mm pada konsentrasi 8%, diameter rata-rata 9 mm pada

konsentrasi 10% untuk menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas

aeruginosa, jadi semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun sirih hijau semakin

besar untuk menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa.

Pada penelitian ini untuk melarutkan kandungan kimia pada daun

sirih hijau menggunakan pelarut etanol karena menurut peneliti etanol lebih
mudah melarutkan senyawa organik. Menurut teori Gamse (2002) etanol

mempunyai polaritas yang tinggi sehingga dapat mengekstrak bahan yang

lebih banyak dibanding jenis pelarut organik yang lain dan mudah untuk

melarutkan senyawa-senyawa organik, etanol mempunyai titik didih yang

rendah dan cenderung aman.

Pada penelitian Suliantari (2008) ekstrak daun sirih hijau yang

diperoleh dengan pelarut etanol mempunyai aktivitas antibakteri terhadap

beberapa bakteri gram positif dan gram negatif yang salah satunya adalah

Pseudomonas aeruginosa.

BAB VI

KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan, maka dapat diambil

kesimpulan bahwa ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.) dapat

menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa pada

konsentrasi 10% dan 15%.

6.2 Saran

a. Bagi masyarakat

Menyampaikan informasi ke masyarakat bahwa daun sirih hijau

(Piper betle L.) dapat digunakan antibakteri yang bersifat herbal,

dengan efek samping yang lebih ringan dari pada obat kimia.

b. Institusi pendidikan (Stikes ICME)

Sebagai data untuk pengabdian masyarakat

c. Bagi peneliti selanjutnya

 Sebagai data untuk penelitian selanjutnya dengan metode yang

berbeda

36

DAFTAR PUSTAKA
Ambrus, J.L. Sr And Ambrus, J.L. Jr. 2004. Nutrition and Infectious Diseases in
Developing Countries and Problems of Acquired
ImmunodeficiencySyndrome. Experimental Biology and Medicine.
Online.(http://www.ebmonline.org/cgi/content/full/229/6/464, diakses
tanggal 1 Mei 2016)

Brooks, G.F., Butel, J.S., Morse, S.A. 2001. Jawetz, Melnick, & Adelberg’s
Medical Microbiology Twenty Second Ed. London: McGraw-Hill
Companies Inc.

Dzen, S.M., Roekistiningsih, Santoso, S., Winarsih, S (ed). 2003. Bakteriologi

Medik. Malang: Bayumedia Publishing.

Gamse, 2002. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun Kemangi.

Hamiza. 2010. Ekstrak etanol menunjukkan aktivitas antibakteri tertinggi

terhadap Pseudomonas aeruginosa.

Hidayat, 2012. Metode Penelitian Keperawatan Tehnik Analisa Data. Jakarta:

Salemba Medika.

Inayatullah, Seila. Efek Ekstrak Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus.Skripsi. Pendidikan
Dokter FKIK UIN, Jakarta. 2012.
Jawetz E, Melnick, Adelberg. Medical Microbiology. 2001. Jakarta: Salemba
Medika. Hlm 373-374.

Kulkarni, M. 2010. Pseudomonas Aeruginosa Infection: Symptoms and

Treatment. Online. (http://www.buzzle.com/articles/pseudomonas-
aeruginosa-infection-symptoms-and-treatment.html, diakses tanggal
3 Mei 2016).

Mulyono,HAM.2003.Kamus kimia. Cetakan ke-3 Jakarta : Bumi aksara

Mursito, 2010, Ekstraksi Daun Sirih, http://mujamu.co.id/2010/07/ekstraksi-daun-

sirih.html, dilihat 29 april 2016.

Mursito, B. 2000. Tampil Percaya Diri dengan Ramuan Tradisional. 2thed.

Jakarta: Penebar Swadaya, pp: 86-7.

Nalina T, Rahim ZHA.2011. The crude aqueous extract of Piper betle L. And its
antibacterial effect toward.

Notoatmodjo, 2012. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: Rineka Cipta

Nursalam, 2011. Konsep dan penerapan metodologi penelitian. Jakarta:

Salemba Medika.

Pratiwi, S.T., 2008, Mikrobiologi Farmasi, Penerbit Erlangga, Jakarta,pp. 180.

Purwanti, S. 2011. Tumbuhan penghasil minyak atsiri Family Compositae.

Surakarta : Universitas Sebelas Maret.

Rahayu, S., 2013, Managemen Pengendalian Penyakit Jamur Akar Putih Pada
Tanaman Karet

Salleh. 2011. In vitro antiproliferative and antioxidant activities of the extracts of

Muntingia calabura leaves. American Journal of Chinese Medicine
39: 183-200

Samroatul, F., 2011, Efektifitas ekstrak daun sirih hijau (Piper bete L.) terhadap
pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes in vitro.

Santi. 2007. 8th Jakarta Antimicrobial Update (JADE)2007: Polimicrobial Infection

and Multidrugs Resistance Between Evidence and Reality, , Jakarta
28-29 April 2007. Online. (http://www.kalbe.co.id/articles/18976/8th-
jakarta-antimicrobial-update-jade-2007-jakarta-28-29-april-
2007.html, diakses tanggal 9 Mei 2016).

Saryono, 2011. Metodologi Penelitian Kesehatan: Penuntun Praktis Bagi Pemula

Schlein, L. 2010. Infectious Disease Burden Developing Country. Online.

(http://voanews.com/english/news/a-13-2009-07-06
voa1668746417.html, diakses tanggal 5 Mei 2016).

Sebih, N. 2012. Uji Aktivitas Ekstrak Daun Sirih (Piper Betle Linn.) dalam
Menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa.
Seilla, 2010. Efek daun sirih hijau (Piper betle L.) terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus.

Siregar, 2007. Uji antimikroba ekstrak daun brotowali (Tinospora crispa L.)
terhadap Pseudomonas aeruginosa secara in vitro.

Suliantari. 2010. Aktivitas antibakteri ekstrak sirih hijau (Piper betle l.) terhadap
bakteri patogen pangan:Jurnal,Teknol,dan Industri Pangan.

Syukur C. dan Hernani. 1999. Budidaya Tanaman Obat Tradisional. Jakarta: PT.
Penebar Swadaya.

Teenoz, 2012, Identifikasi Pseudomonas aeruginosa,

http://teenozhealthanalyst.blogspot.co.id/2012/04/identifikasi-
proteus.html dilihat 29 april 2016.

Todar, K. 2002. Pseudomonas aeruginosa. USA: University of Wisconsin-

Madison Departement of Microbiology.

Tristika, 2015. Perbedaan daya hambat ekstrak daun sirih hijau (Piper betle L.)
dan daun sirih merah (Piper crocatum ruiz) terhadap pertumbuhan
escherichia coli.
WHO. 2010. Traditional Medicine. Online.
(http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs134/en, diakses
tanggal 10 Mei 2016)

Wiladatika, M. 2013. Aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak etanol daun sirih

merah (Piper crocatum ruiz) dan siprofloksasin terhadap
Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, dan Klebsiella
pneumoniae beserta bioautografinya.