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    Roteiro 3 Extração de DNA para Biologia

    Enviado por

    mariana rubia
    Este documento descreve um procedimento para extrair DNA de morangos usando reagentes domésticos em uma aula prática de biologia celular e molecular. O procedimento envolve macerar morangos, adicionar sal e detergente para quebrar as células, filtrar a solução, e adicionar álcool para precipitar o DNA, que pode ser removido com um palito. O objetivo é ensinar os princípios básicos da extração de DNA e suas propriedades.

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    Este documento descreve um procedimento para extrair DNA de morangos usando reagentes domésticos em uma aula prática de biologia celular e molecular. O procedimento envolve macerar morangos, adicionar sal e detergente para quebrar as células, filtrar a solução, e adicionar álcool para precipitar o DNA, que pode ser removido com um palito. O objetivo é ensinar os princípios básicos da extração de DNA e suas propriedades.

    Descrição original:

    extração de dna de morango

    Título original

    Roteiro 3 Extração de DNA Para Biologia

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    Este documento descreve um procedimento para extrair DNA de morangos usando reagentes domésticos em uma aula prática de biologia celular e molecular. O procedimento envolve macerar morangos, adicionar sal e detergente para quebrar as células, filtrar a solução, e adicionar álcool para precipitar o DNA, que pode ser removido com um palito. O objetivo é ensinar os princípios básicos da extração de DNA e suas propriedades.

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    CURSO: LICENCIATURA EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

    UTFPR – Campus Ponta Grossa


    DISCIPLINA: Biologia Celular e Molecular e Noções de Biotecnologia

    Roteiro da aula Prática 3: Extração de DNA com reagentes domésticos

    Introdução:

    O DNA é a estrutura que identifica os seres vivos e apresenta características


    próprias que permite distinguir até indivíduos de uma mesma espécie. A sigla DNA
    coresponde a abreviatura do termo em inglês para ácido desoxirribonucleico (ADN, em
    português). Em organismos procariontes essa macromolécula está dispenso na célula,
    enquanto em eucariontes encontra-se no núcleo.
    O DNA é formado a partir da união de compostos químicos chamados
    nucleotídeos e constitui-se na maior macromolécula celular. Cada nucleotídeo é
    formado por 3 substâncias: Base nitrogenada, que pode ser adenina (A), guanina
    (G), timina (T) ou citosina (C), sendo que estas bases são complementares,
    produzindo as seguintes ligações no DNA: A-T e G-C; um grupamento fosfato e um
    glicídio do grupo das pentoses, que no caso do DNA é a desoxirribose. Internamente
    à fita dupla, os desoxirribonucleotídeos estão unidos por ligações de hidrogênio
    (pontes de hidrogênio), produzindo uma cadeia torcida em forma de hélice.
    Para a análise do DNA, uma etapa importante é o seu isolamento. O
    procedimento utilizado nessa aula prática possibilita extrair grandes quantidades de
    DNA a partir de morango, banana ou cebola. Protocolos similares são usados nas
    extrações de DNA de outras fontes, como amostras de sangue, tecidos, etc.

    Material:
    Dois morangos;
    Álcool 70% gelado;
    Sal de Cozinha;
    Saco plástico (”Zip Loc”);
    Peneira;
    Palito de madeira (para churrasco);
    Detergente líquido incolor;
    Funil, Erlenmeyer (ou copo) e tubo de vidro.

    Objetivos:
    1. Conhecer os princípios básicos da extração do material genético;
    2. Observar a grande quantidade de DNA existente nas células;
    3. Evidenciar a localização intracelular do DNA;
    4. Discutir algumas propriedades químicas do DNA;
    5. Demonstrar a simplicidade do experimento e sua viabilidade de execução pelo
    professor de ciências, em sala de aula.

    Procedimento:
    A extração de DNA de células eucariontes vegetais consta fundamentalmente de
    três etapas: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do
    material genético; desmembramento dos cromossomos em seus componentes
    básicos: DNA e proteínas; separação do DNA dos demais componentes celulares.

    1
    1. Coloque dois morangos (sem pétalas) no saco plástico e macere (esmague
    com o punho) por cerca de 2 minutos;
    2. Adicione meia colher de sopa de sal de cozinha (misture por 1 minuto);
    3. Adicione uma colher de detergente líquido. Misture tudo, apertando com as
    mãos por 1 mim;
    4. Coe o material no copo, com o auxílio da peneira e da colherzinha plástica;
    5. Transfira o volume total para o tubo e deixe descansar por 5 minutos,
    envolvendo o tubo com uma das mãos.
    6. Adicione um volume igual de álcool (gelado) delicadamente pela parede e vá
    observando o que acontece (de 3-5 minutos);
    7. Decorrido este tempo, introduzir o palito de sorvete na parte de cima
    (sobrenadante) e retire o material de aspecto viscoso que se formou (com
    aspecto de cola transparente) = DNA

    Resultado:
    Desenhos ou fotos do tubo (item 7) evidenciando a solução e o DNA extraído.

    Questões:
    1. Por que macerar o morango?
    2. Como quebrar a membrana celular?
    3. Por que aquecer a solução?
    4. Por que usar o detergente?
    5. Qual a função do álcool e do sal?
    6. Faça a comparação do tamanho do DNA com o tamanho da célula.

    Referências Bibliográficas

    1. LEHNINGER, A. L., COX, N., YARBOROROUH, K. Princípios de Bioquímica.


    4ª ed. São Paulo: Editora Sarvier, 2006;
    2. http://cbme.usp.br/inbeqmedi;
    3. http://lameducacional.com.br

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