UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E MUCURI

UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA

Curso de Pós-Graduação em Biocombustíveis

Daniela Cristina Souza Oliveira

OTIMIZAÇÃO DA PRODUÇÃO DE BIOGÁS A PARTIR DA BIODIGESTÃO DE

VINHAÇA DA FABRICAÇÃO DE CACHAÇA ARTESANAL

Diamantina
2019
 Daniela Cristina Souza Oliveira

OTIMIZAÇÃO DA PRODUÇÃO DE BIOGÁS A PARTIR DA BIODIGESTÃO DE

VINHAÇA DA FABRICAÇÃO DE CACHAÇA ARTESANAL

Dissertação apresentada ao programa de Pós-

Graduação em Biocombustíveis da Universidade
Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, como
requisito parcial para a obtenção de título de Mestre.

Orientador: Prof. Dr. David Lee Nelson.

Coorientador: Prof. Dr. Marcus Henrique Canuto.
Coorientadora: Prof.a Dr.a Arlete Barbosa dos Reis.

Diamantina
2019
 DANIELA CRISTINA SOUZA OLIVEIRA

OTIMIZAÇÃO DA PRODUÇÃO DE BIOGÁS A PARTIR DA BIODIGESTÃO DE

VINHAÇA DA FABRICAÇÃO DE CACHAÇA ARTESANAL

Dissertação apresentada ao programa de Pós-

Graduação em Biocombustíveis da
Universidade Federal dos Vales do
Jequitinhonha e Mucuri, nível de MESTRADO
como parte dos requisitos para obtenção do
título de MESTRA EM BIOCOMBUSTÍVEIS.

Orientador: Prof. Dr. David Lee Nelson

Coorientador: Prof. Dr. Marcus Henrique Canuto

Data de aprovação: 27/06/2019.

Prof. Dr. DAVID NELSON LEE - UFVJM

Prof. Dr. MARCUS HENRIQUE CANUTO - UFVJM

Prof.ª Dr.ª ARLETE DOS REIS BARBOSA - UFVJM

Prof.ª Dr.ª VÍVIAN MACHADO BENASSI - UFVJM

Prof.ª Dr.ª JULIANA ROCHA DE MEIRA PIRES - IFNMG

DIAMANTINA
 Aos meus pais, Silvio e Maria do Socorro,
pelo exemplo de vida e incentivo nos momentos difíceis,
por tantas vezes que deixaram de realizar os vossos sonhos para realizar os meus,
pelo apoio e confiança depositada em mim.
Dedico.
 AGRADECIMENTOS

A Deus, princípio de tudo, por ter me iluminado e guiado nos momentos difíceis e
pelo dom da vida.
Aos meus pais, Silvio e Maria do Socorro, por mostrarem sempre o caminho da
verdade, e pelo amor incondicional a mim dedicado com tamanho carinho. Ao meu irmão
Cristiano, pelo apoio e estímulo. Aos demais familiares, vô Ozorio, vó Mariinha, Tios, Tias e
primos pelo estímulo e companheirismo.
À Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri -UFVJM, à
Coordenação e equipe de professores do Programa de Pós-Graduação em Biocombustíveis –
Campus Diamantina, pela oportunidade, convívio e ensinamentos que me ajudaram a ser uma
profissional melhor.
Ao professor Dr. Marcus Henrique Canuto (Marquinhos), que dispensa
comentários, uma pessoa maravilhosa com quem tive o imenso prazer de trabalhar durante 8
anos da minha estadia na UFVJM, um dos maiores exemplos de profissionalismo, além de uma
capacidade incrível de passar adiante o conhecimento, o meu eterno agradecimento pela
excelente orientação, amizade, incentivo, paciência, por ter acreditado em mim e no meu
trabalho e, principalmente, pelo aprendizado que me proporcionou.
Ao Professor Dr. David Lee Nelson, pela orientação, paciência e disponibilidade.
À professora Dra. Arlete dos Reis Barbosa, pela orientação, confiança e pelas
inúmeras ajudas nos momentos difíceis. Agradeço também pela acolhida no Laboratório de
Processos Biológicos e Tecnologia Ambiental.
À professora Dra. Nísia Andrade Vilella Dessimoni Pinto pelos ensinamentos,
disponibilidade e acolhimento no Laboratório de Biomassa e Tecnologia do Cerrado.
Aos professores e técnicos do laboratório de pesquisa da UFVJM, por toda a ajuda
na realização deste trabalho. E aos amigos e alunos de Iniciação Cientifica: José Adão, Gustavo,
Ludimilla pela amizade e contribuição nessa pesquisa.
Ao meu companheiro Júnior, pela amizade, paciência e todo amor dedicado.
Aos meus amigos Luciana, Marclenio, Maria e Jack, que ouviram muitas vezes
minhas reclamações, obrigada pela amizade, paciência e as risadas proporcionadas nos
momentos difíceis.
A todos que contribuíram, direta ou indiretamente, para a realização deste trabalho,
a minha eterna gratidão.
Não pretendemos que as coisas mudem, se sempre fazemos o mesmo.
A crise é a melhor benção que pode ocorrer com as pessoas e países,
porque a crise traz progressos. A criatividade nasce da angústia, como
o dia nasce da noite escura. É na crise que nascem as invenções, os
descobrimentos e as grandes estratégias (EINSTEIN, Albert).
 RESUMO

A fabricação artesanal da cachaça é uma importante fonte de renda para pequenos e médios
produtores agrícolas do estado de Minas Gerais. Na produção da bebida, um dos principais
subprodutos gerados é a vinhaça, rica em matéria orgânica e com significativo teor de enxofre.
Consequentemente, apresenta alto potencial poluidor. Para cada litro de cachaça produzido são
gerados, em média, 10 a 14 litros de vinhaça. A biodigestão anaeróbia apresenta grande
potencial de aplicação no tratamento da vinhaça, pois ocorre a redução de sua carga orgânica
poluente concomitantemente à recuperação de bioenergia a partir do biogás. O presente estudo
teve como objetivo avaliar as potencialidades da aplicação da biodigestão anaeróbia para o
tratamento da vinhaça provinda da fabricação de cachaça artesanal, bem como o
desenvolvimento de um biodigestor para implantação em propriedades rurais produtoras da
bebida. Para testar o desempenho do processo, realizou-se oito ensaios de biodigestão da
vinhaça em escala de bancada utilizando reatores de 250 mL, variando a quantidade de inóculo,
temperatura e diluição da vinhaça. Em seguida, o processo foi otimizado em um biorreator de
bancada anaeróbio com capacidade de 7,5 litros, e com um sistema de monitoramento e controle
do pH, dióxido de carbono, temperatura e pressão. A vinhaça in natura foi caracterizada quanto
a umidade, matéria seca, cinzas sólidos suspensos voláteis e totais, pH, DQO, proteínas,
lipídeos e nitrogênio total. O efluente da biodigestão foi caracterizado quanto a DQO e pH. A
composição do biogás gerado foi determinada através da quantificação de dióxido de carbônico,
metano, amônia e ácido sulfídrico. O processo de biodigestão da vinhaça para a produção de
biogás se mostrou eficiente no tratamento desse resíduo. O volume de biogás gerado e
acumulado, nos ensaios de bancada, durante o período de 25 dias variaram entre 2,08 mL e
347,90 mL. Quanto à remoção de carga orgânica, os ensaios mostraram-se uma boa alternativa
para o tratamento da vinhaça, visto que a eficiente redução de DQO na vinhaça biodigerida foi
em torno de 74%, fato que evidencia a transformação de matéria orgânica em biogás. A
principal contribuição desse experimento consistiu na disponibilização de novos métodos de
obtenção de energia a partir de uma matriz já disponível aos pequenos e médios produtores de
cachaça artesanal.

Palavras chave: Vinhaça 1. Biodigestão anaeróbica 2. Metano 3. Bioenergia 4

 ABSTRACT

The artisanal production of cachaça is an important source of income for small and medium-
sized agricultural producers in the state of Minas Gerais. In the production of the beverage, one
of the main by-products generated is vinasse, rich in organic matter and with significant sulfur
content. Consequently, it presents high polluting potential. For each liter of cachaça produced,
an average of 10 to 14 liters of vinasse is generated. Anaerobic biodigestion presents great
potential for application in the treatment of vinasse, because the reduction of its organic
pollutant load occurs concomitantly with the recovery of bioenergy from the biogas. The
present study aimed to evaluate the potential of the application of anaerobic biodigestion for
the treatment of vinasse from the manufacture of artisanal cachaça, as well as the development
of a biodigester for implantation in rural properties that produce the beverage. To test the
performance of the process, eight batch-scale biodigestion tests were carried out using a 250
mL reactor, varying the amount of inoculum, temperature and dilution of the vinasse. The
process was optimized in a 7.5-liter anaerobic bench bioreactor with a monitoring and control
system for pH, carbon dioxide temperature and pressure. The crude vinasse was characterized
with respect to the moisture, dry matter, suspended volatile substances, total suspended ash,
pH, COD, proteins, lipids and total nitrogen contents. The biodigestion effluent was
characterized as COD and pH. The composition of the biogas generated was determined by the
quantification of carbon dioxide, methane, ammonia and hydrogen sulfide. The biodigestion
process of the vinasse for biogas production was efficient in the treatment of this residue. The
volume of biogas generated and accumulated in laboratory tests over a 25-day period ranging
from 2.08 mL to 347.90 mL. Regarding the removal of the organic load, the tests proved to be
a good alternative for the treatment of vinasse because the reduction of COD in biodigested
vinasse was around 74%, a fact that demonstrates the transformation of organic matter into
biogas. The main contribution of this experiment consisted in the availability of new methods
of obtaining energy from a matrix already available to small and medium producers of artisanal
cachaça.

Keywords: Vinasse 1. Biodigestion 2. Metano 3. Bioenergy 4.

 LISTA DE ILUSTRAÇÕES

Figura 1 - Fluxograma do processo .......................................................................................... 45

Figura 2 – Aparelho de destilação para produção de cachaça .................................................. 46
Figura 3 - Fluxograma das análises realizadas ......................................................................... 47
Figura 4 - Representação esquemática do sistema e fotografia do sistema de biodigestão...... 55
Figura 5 – Ensaios da Biodigestão da vinhaça ......................................................................... 57
Figura 6 – Biorreator automatizado .......................................................................................... 58
Figura 7 - Biodigestor anaeróbio de vinhaça ............................................................................ 60
Figura 8 – Kit de análise de Biogás .......................................................................................... 60
Figura 9 – Mini-orsat: suporte analisador de gás carbônico ..................................................... 61
Figura 10 – Fotocolorímetro para análise de Amônia e Gás Sulfídrico ................................... 62
Figura 11 – Gráfico de Superfície 3D ...................................................................................... 82
Figura 12 – Gráfico de Superfície 2D ...................................................................................... 82
Figura 13 – Gráfico dos valores preditos e observados ............................................................ 83
Figura 14 - Gráfico dos scores e loadings das duas primeiras componentes principais .......... 86
Figura 15 - Gráfico dos scores e loadings das duas primeiras componentes principais .......... 87
 LISTA DE TABELAS

Tabela 1 – Matriz de planejamento fatorial 23. ........................................................................ 56

Tabela 2 - Parâmetros utilizados dos ensaios de biodigestão ................................................... 59
Tabela 3 - Ficha técnica e limite de detecção do kit de análise do biogás. .............................. 61
Tabela 4 - Caracterização físico-química da vinhaça bruta. ..................................................... 65
Tabela 5 – Resultados dos pré-testes de biodigestão................................................................ 69
Tabela 6 - Volume Acumulado de Biogás Produzido. ............................................................. 72
Tabela 7 – Dados obtidos nos ensaios da biodigestão de vinhaça de cachaça. ........................ 75
Tabela 8 – Caracterização físico-química ................................................................................ 83
Tabela 9 - Resultados da produção e composição do biogás ................................................... 85
Tabela 10 – Coeficiente do modelo estático ........................................................................... 105

LISTA DE GRÁFICOS

Gráfico 1 – Curva Padrão para determinação de Açúcares Redutores ..................................... 50

Gráfico 2 – Curva de calibração DQO ..................................................................................... 52
Gráfico 3 - Volume diário de Produção de Biogás em 12 dias ................................................ 70
Gráfico 4 - Monitoramento da formação de biogás .................................................................. 72
Gráfico 5 – Comparação da DQO da vinhaça bruta e vinhaça tratada ..................................... 79
Gráfico 6 – Produção de Biogás ............................................................................................... 84
 LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

ABRABE Associação Brasileira de Bebidas

ABNT Associação Brasileira de Normas Técnicas
IBGE Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística
INMETRO Instituto Nacional de Metrologia, Normalização e Qualidade Industrial
ºGL Grau Gay Lussac (fração em volume ou percentual em volume (%V/V))
pH Potencial hidrogeniônico
ppmV Partes por milhão em volume
APHA American Public Health Association (Associação Americana de Saúde Pública)
ART Açúcares redutores totais
CSTR Continuously stirred-tank reactor (reator anaeróbio continuamente agitado)
DBO Demanda Bioquímica de Oxigênio
DQO, DQOt Demanda Química de Oxigênio total
DQOs Demanda Química de oxigênio solúvel
UASB Upflow Anaerobic Sludge Blanket Reactor (reator anaeróbio de fluxo ascendente)
 SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO ......................................................................................................................... 23
2 OBJETIVOS .............................................................................................................................. 25
2.1 Objetivos específicos ......................................................................................................... 25
3 JUSTIFICATIVA ...................................................................................................................... 27
4 REFERENCIAL TEÓRICO ...................................................................................................... 29
4.1 Definição de Cachaça ......................................................................................................... 29
4.2 Importância da Produção de Cachaça Artesanal ................................................................ 30
4.3 Vinhaça: composição, produção e uso no Brasil................................................................ 31
4.4 Biodigestão Anaeróbica ..................................................................................................... 33
4.4.1 Etapas do processo de digestão anaeróbica ................................................................... 33
4.4.2 Fatores que interferem na biodigestão anaeróbica ........................................................ 36
4.5 Uso da biodigestão anaeróbica para tratamento da vinhaça ............................................... 39
4.6 Digestores........................................................................................................................... 40
4.7 Uso de biodigestores em propriedades rurais..................................................................... 41
4.8 Biogás................................................................................................................................. 42
4.9 Análises físico-químicas .................................................................................................... 43
4.10 Análise Quimiométrica – Análise dos Componentes Principais ........................................ 43
5 METODOLOGIA...................................................................................................................... 45
5.1 Características gerais .......................................................................................................... 45
5.2 Local do experimento ......................................................................................................... 46
5.3 Substrato............................................................................................................................. 46
5.4 Caracterização da vinhaça bruta e do subproduto da biodigestão ...................................... 46
5.4.1 pH .................................................................................................................................. 47
5.4.2 Densidade ...................................................................................................................... 48
5.4.3 Sólidos Solúveis Totais – SST ...................................................................................... 48
5.4.4 Umidade e Matéria Seca ............................................................................................... 48
5.4.5 Sólidos Fixos Totais (Cinzas) - SFT ............................................................................. 49
5.4.6 Sólidos Voláteis Totais - SVT ...................................................................................... 49
5.4.7 Açúcares Redutores -AR ............................................................................................... 49
5.4.8 Acidez Total Titulável - ATT ....................................................................................... 50
5.4.9 Lipídeos ......................................................................................................................... 51
5.4.10 Nitrogênio total e Proteínas........................................................................................... 51
5.4.11 Demanda Química de Oxigênio – DQO ....................................................................... 52
5.5 Crescimento microbiano na vinhaça bruta ......................................................................... 53
5.6 Inóculo ............................................................................................................................... 54
5.7 Pré-testes da biodigestão de vinhaça .................................................................................. 54
5.8 Delineamento experimental ............................................................................................... 55
5.9 Ensaios da Biodigestão em escala laboratorial .................................................................. 56
5.10 Ensaios da biodigestão em um biorreator automatizado .................................................... 57
5.11 Desenvolvimento e construção de um biodigestor industrial ............................................ 59
5.12 Análises da composição do Biogás .................................................................................... 60
5.12.1 Determinação de Gás Carbônico e Gás Metano ........................................................... 61
5.12.2 Determinação de Amônia ............................................................................................. 61
5.12.3 Determinação de Ácido Sulfídrico................................................................................ 62
5.13 Análise estatística............................................................................................................... 62
5.13.1 Análise de componentes principais ............................................................................... 63
5.13.2 Otimização .................................................................................................................... 63
6 RESULTADOS E DISCUSSÃO .............................................................................................. 65
6.1 Caracterização da vinhaça .................................................................................................. 65
6.1.1 Umidade e matéria seca ................................................................................................ 66
6.1.2 Cinzas e Matéria Orgânica ............................................................................................ 66
6.1.3 pH.................................................................................................................................. 67
6.1.4 Densidade Relativa ....................................................................................................... 67
6.1.5 Sólidos totais, Fixos e Voláteis ..................................................................................... 67
6.1.6 Açúcares Redutores Totais e Sólidos Solúveis Totais .................................................. 68
6.1.7 Proteínas e Lipídios....................................................................................................... 68
6.1.8 DQO .............................................................................................................................. 69
6.2 Pré-testes da biodigestão de vinhaça .................................................................................. 69
6.3 I Estágio: Ensaios da Biodigestão em escala laboratorial .................................................. 71
6.4 Otimização da produção de biogás .................................................................................... 81
6.5 II Estágio: Ensaios da Biodigestão no biorreator anaeróbico ............................................ 83
6.6 Análises Quimiométricas ................................................................................................... 86
6.7 III Estágio: Construção do biodigestor .............................................................................. 88
7 CONSIDERAÇÕES FINAIS .................................................................................................... 89
8 PERSPECTIVAS FUTURAS ................................................................................................... 91
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ........................................................................................... 93
ANEXO I...................................................................................................................................... 105
 23

1 INTRODUÇÃO

A Cachaça exerce importante papel econômico, social e cultural no Brasil. É de

fundamental importância que seus produtores possam agregar valor e qualidade à esta bebida
sem necessitarem abrir mão da competitividade e sustentabilidade (NOGUEIRA LIZ et al.,
2016).
O Brasil possui menos de 2.000 produtores devidamente registrados, com 4.000
marcas. Estima-se que esses produtores possuam uma capacidade instalada de produção de
aproximadamente 1,4 bilhão de litros anuais da bebida. Porém, anualmente são produzidas
menos de 800 milhões de litros, distribuídos entre 12 mil unidades produtivas presentes em
todo o país. Dentre os estados fabricantes, destacam-se: São Paulo, Pernambuco, Ceará, Minas
Gerais e Paraíba (IBRAC, 2019).
A fabricação artesanal da cachaça é uma importante fonte de renda para pequenos
e médios produtores agrícolas do estado de Minas Gerais, e este estado é o principal produtor
da bebida no cenário nacional, sendo responsável por 50% da fabricação total dessa variante da
bebida. Além disso, estima-se que existam 9.000 unidades produtivas no estado, fabricando 200
milhões de litros por ano (SEBRAE, 2013). Segundo Campelo (2002), 85% dessas unidades
operam nas margens da ilegalidade, ou seja, não possuem registro no Ministério da Agricultura,
Pecuária e Abastecimento. Do total de estabelecimentos em Minas Gerais, 53% encontram-se
localizados nas mesorregiões do Norte de Minas, Vale do Jequitinhonha e Mucuri. Isto
demonstra uma forte influência da produção nestas regiões, visto as graves restrições
socioeconômicas que atravessam. Contudo, pode-se verificar que o setor de cachaças em geral,
têm sido responsável por geração de renda, emprego, exportações e divisas para o país
(BORGES; TAKEMOTO, 2019).
Entretanto, as atividades agroindustriais geram grande quantidade de resíduos.
Promover a gestão adequada dos resíduos e efluentes produzidos é um dos principais desafios
enfrentados pela sociedade moderna. Dentre os diversos tipos de resíduos e efluentes
industriais, aqueles com altos teores orgânicos têm se destacado como uma significante fonte
de contaminação ambiental, pois, quando não são tratados de forma adequada, poluem solo e
corpos hídricos, proliferam vetores e doenças e emitem gases causadores do efeito estufa
(INOVAGRID, 2017).
24

As etapas da produção de cachaça envolvem corte de cana-de-açúcar, moagem,

diluição do caldo, fermentação e destilação. Do processo de destilação resultará o produto final
– cachaça – e ficará retido na panela do alambique um resíduo líquido – que é o vinhaça,
também chamado de vinhoto (CAMPOS, 2009). Entretanto, cada litro produzido da bebida,
gera em torno de 10 a 14 litros de vinhaça. A vinhaça hoje é um dos principais resíduos em
capacidade de poluição nas indústrias sucroalcooleiras, pois seu volume se mostra o principal
empecilho para tratamento (LAMONICA, 2006).
Em termos gerais, a vinhaça apresenta elevado conteúdo orgânico, bem como
concentrações significativas de potássio e sulfato, características ácidas e corrosivas, as quais
resultam de processos relacionados ao preparo da matéria-prima para a fermentação. O
aproveitamento da vinhaça para a produção de biogás aparece como uma alternativa viável do
ponto de vista econômico e ambiental devido a três fatores: tratamento do resíduo, produção de
biogás para a geração de eletricidade e ainda sobra o fertilizante tratado, contendo menor carga
de contaminantes, usado em aplicação nas lavouras (PINTO, 1999).
A tecnologia de digestão anaeróbia é um processo com ampla aplicabilidade para a
conversão de resíduos e efluentes orgânicos em biogás, associando o tratamento adequado a
uma fonte perpétua de energia renovável. O processo de biodigestão se desenvolve sobre
resíduos rurais (esterco), agroindustriais (vinhaça, efluentes das indústrias de laticínios e dos
matadouros), domésticos ou comunitários (lama de esgotos) e, também, sobre plantas (aguapé)
(MALAJOVICH, 2012; TUNES, 2017).
Diversos desafios existem para a disposição adequada da vinhaça. E na busca por
finalidades mais racionais, a composição característica da vinhaça permite que ela não seja,
necessariamente, tratada como efluente, mas sim como potencial fonte de biomassa para outros
processos. No caso da digestão anaeróbia para produção de biogás, já se tem diversos estudos
dessa tecnologia no tratamento da vinhaça. A utilização de resíduos agroindustriais na geração
de bioenergia já se mostra como um setor muito expressivo em outros países. E por meio da
vinhaça, o setor sucroenergético se encontra na posição de expandir sua importância como ator
no cenário da energia renovável.
 25

2 OBJETIVOS

O presente estudo tem como principal objetivo otimizar e avaliar a produção

anaeróbica de biogás originado da biodigestão de vinhaça oriunda da fabricação de cachaça
artesanal.

2.1 Objetivos específicos

● Analisar a carga orgânica da vinhaça in natura e dos produtos de biodigestão anaeróbia

da vinhaça;
● Realizar o processo de Biodigestão anaeróbica da vinhaça em um biorreator de bancada,
com sistema de monitoramento e controle de nível, velocidade de rotação, pressão,
temperatura, oxigênio e pH;
● Controlar e monitorar a digestão anaeróbia através dos principais parâmetros
operacionais: pH, temperatura, Sólidos Totais (ST), Sólidos Voláteis Totais (SVT) e
Demanda Química de Oxigênio (DQO);
● Medir o volume e a composição do biogás gerado;
● Avaliar a eficiência do Reator Anaeróbio Continuamente Agitado (CSTR) em batelada
para a produção de biogás a partir da vinhaça de cana-de-açúcar;
● Determinar a eficiência do processo por meio do rendimento de biogás e remoção da
carga orgânica através da demanda química de oxigênio e do conteúdo de sólidos
voláteis totais;
● Construir um sistema de biodigestão de baixo custo em escala compatível para
utilização de pequenos produtores de cachaça artesanal.

.
 27

3 JUSTIFICATIVA

O conceito de desenvolvimento sustentável ocorre nos âmbitos social, econômico

e ambiental e considera o avanço tecnológico e o crescimento populacional em conjunto com
as atividades humanas. Contudo, para se obter esse desenvolvimento, é necessário pensar nas
diferentes matrizes energéticas disponíveis. A adoção de fontes de energia alternativas e o uso
de combustíveis fósseis de modo mais eficiente são algumas das formas de se reduzir a emissão
de CO2. Nesse sentido, buscam-se novas alternativas para mitigar tais emissões e dar maior
sustentabilidade à matriz energética (SIKARWAR et al., 2017).
Com a crescente preocupação com o meio ambiente, acentuou-se a procura de ações
com o intuito de diminuir ou anular os efeitos negativos advindos das atividades produtivas. Na
produção de cachaça, não é diferente, pois apresenta uma ameaça ao meio ambiente através do
principal resíduo gerado na sua produção: a vinhaça. A cachaça de alambique ou artesanal é
uma atividade importante para geração de renda dos pequenos e micro produtores rurais como
a agricultura familiar mineira. Portanto, faz-se necessário a busca de melhoria na produção da
bebida, bem como no tratamento adequado dos resíduos.
Devido às suas características e por apresentar um custo relativamente baixo, a
vinhaça vem sendo amplamente utilizada na fertirrigação de áreas cultivadas com cana
(SZYMANSKI; BALBINOT; SCHIRMER, 2010). De fato, concentrações apreciáveis de
cálcio, magnésio e, sobretudo potássio, são usualmente observadas na vinhaça, característica
usada como justificativa para sua aplicação agrícola (FUESS, 2017). Entretanto, Silva,
Griebeler e Borges (2007) afirmam que a aplicação de vinhaça tem sido contestada pelos seus
efeitos no solo e nas águas subterrâneas, podendo tornar a água do lençol freático impotável, o
que sugere o controle da quantidade aplicada de acordo com a área de cultivo, ou o tratamento
antes de utilizada para a fertirrigação.
Neste sentido, a tecnologia de digestão anaeróbia, é um processo com extensa
aplicabilidade para a conversão de resíduos e efluentes orgânicos em biogás, associando o
tratamento adequado a uma fonte inesgotável de energia renovável. O processo de biodigestão
anaeróbia da vinhaça consiste na biodegradação de sua carga orgânica. Este processo gera
biogás e biofertilizante com reduzida carga orgânica sem, no entanto, alterar suas propriedades
fertilizantes (LAMONICA, 2006). Além dos benefícios decorrentes do tratamento adequado
dos resíduos de biogás, o efluente digerido, incluindo a matéria orgânica tratada, pode ser
28

aplicado como fertilizante, reduzindo o uso de fertilizantes artificiais e, consequentemente,

diminuindo os custos (BRAMLEY et al., 2011).
Contudo, apesar de ser considerada uma estratégia promissora, o processo de
digestão anaeróbia deve ser cuidadosamente avaliado antes de ser implementado em larga
escala, especialmente em relação às características dos substratos, como matéria orgânica e
valor nutricional, macro nutrientes, elementos traços e produção específica de biogás. Esses
parâmetros influenciam diretamente alguns outros parâmetros importantes do processo tais
como o pH, a acumulação de inibidores potenciais, macro nutrientes, deficiências de elementos
traços e também as taxas de degradação (JANKE, L. et al., 2016).
Este estudo contribui com pesquisas e avanços tecnológicos em desenvolvimento
sustentável, pois o biogás é uma fonte renovável de energia, podendo ser uma alternativa viável
na obtenção de calor e eletricidade que descentraliza a fonte hídrica como matriz energética.
Além disso, o tratamento da vinhaça a partir da biodigestão produz fertilizantes com
características mais adequadas ao solo, uma vez que a utilização desse subproduto como é feita
atualmente, tem contaminado o solo e o lençol freático. Outro ganho que justifica o estudo da
geração de energia a partir do biogás é o valor de mercado dessa fonte energética, que pode ser
comercializada.
Por outro lado, esse trabalho também colabora na disponibilização de novos
métodos de obtenção de energia a partir de uma matriz já disponível aos pequenos e médios
produtores de cachaça artesanal, bem como no saneamento, no atendimento de uma demanda
energética e na utilização do material biodigerido como fertilizante. A geração de energia
elétrica a partir da queima do biogás produzido no processo de biodigestão anaeróbica da
vinhaça torna-se uma alternativa vantajosa para utilização de formas renováveis de energia
pelos produtores rurais. Os pequenos produtores de cachaça podem suprir suas próprias
demandas de energia elétrica, ou realizar a queima do metano para aquecer o mosto e destilar a
cachaça, ou vender o excedente para concessionárias de energia. Ao melhorar as condições do
produtor de cachaça artesanal, estará indiretamente fixando o homem no campo, o pequeno
produtor rural com incentivo ao seu agronegócio, bem como, desta forma, também estará
evitando o êxodo rural. Isto demonstra o cunho social deste trabalho de pesquisa que não só
promoverá o desenvolvimento científico como também poderá implementar melhores
condições para os pequenos agricultores familiares.
 29

4 REFERENCIAL TEÓRICO

Neste item serão discutidas as bases em que estão fundamentadas o processo de

digestão anaeróbia da vinhaça provinda da fabricação de cachaça artesanal, as colocações mais
importantes sobre a maneira de abordar o problema da destinação da vinhaça, e o uso do biogás,
apresentando as experiências mais significativas no uso de biodigestão no tratamento deste
resíduo.

4.1 Definição de Cachaça

Cachaça é a bebida destilada que tem a seguinte definição legal:

“Cachaça é a denominação típica e exclusiva da Aguardente de Cana produzida no

Brasil, com graduação alcoólica de 38 % V/V a 48% V/V a 20º C, obtida pela destilação do mosto
fermentado do caldo de cana-de-açúcar com características sensoriais peculiares, podendo ser
adicionada de açúcares até 6 g L-1, expressos em sacarose” (BRASIL. MINISTERIO DA
AGRICULTURA, 2005).

“Aguardente de Cana é a bebida com graduação alcoólica de 38% vol. (trinta e oito
por cento em volume) a 54% vol. (cinquenta e quatro por cento em volume) a 20 ºC (vinte graus
Celsius), obtida do destilado alcoólico simples de cana-de-açúcar ou pela destilação do mosto
fermentado do caldo de cana-de-açúcar, podendo ser adicionada de açúcares até 6 g L-1 (seis
gramas por litro), expressos em sacarose” (BRASIL. MINISTERIO DA AGRICULTURA,
2005).

Além disso, há distinção entre a bebida industrializada e a artesanal. A cachaça

artesanal é produzida em alambiques de cobre, e em bateladas, ou seja, enche-se o equipamento
com o mosto, destila-se e depois o esvazia completamente. Produzem-se, em batelada,
pequenos volumes de cada vez. Já a aguardente de cana industrial é produzida em colunas de
aço inoxidável e o fluxo é constante: entra por um lado o mosto fermentado e do outro lado sai
cachaça já destilada (processo contínuo), acelerando a produção da bebida. No processo
contínuo é produzida uma grande quantidade da bebida (FEIJÓ; MACIEL, 2002; FEITOSA,
2005; TAVARES, 2010).
Em Minas Gerais, a cachaça artesanal é definida conforme a Lei Estadual Nº
13.949, de 11 de julho de 2001, regulamentada pelo Decreto 42.644, de 5 de junho de 2002,
como Cachaça de Minas, da seguinte forma:
30

Cachaça de Alambique é a bebida com graduação alcoólica de 38% a 54% V/V, à

temperatura de 20 ºC, obtida pela destilação do mosto fermentado de cana-de-açúcar, em
alambique de cobre, sem adição de açúcar, corante ou outro ingrediente qualquer. A Cachaça de
Minas corresponde à fração denominada “coração”, que vem a ser a parte destilada, de mais ou
menos 80% do volume total que fica entre as frações “cabeça” e “cauda” ou “água fraca”.

4.2 Importância da Produção de Cachaça Artesanal

A cachaça, uma típica bebida brasileira, surgiu nos engenhos do Brasil Colônia em
meados do século XVI. Esse destilado tem apresentado crescimento no consumo tanto no
mercado internacional como no nacional. Segundo a ABRABE (2015), a bebida ocupa a
terceira posição no ranking mundial (mercado de destilados) e é o segundo maior mercado de
bebidas alcoólicas no Brasil, atrás apenas da cerveja.
A capacidade instalada de produção de cachaça no Brasil é de, aproximadamente,
1,4 bilhão de litros por ano; todavia apenas 1% da produção é exportada. São 40 mil produtores
(quatro mil marcas), sendo que 98% correspondem a pequenas e microempresas, mas 70% da
produção consiste de cachaça de coluna ou industrial e 30% de cachaça de alambique. O setor
movimenta anualmente em sua cadeia produtiva 7 bilhões de reais, sendo responsável pela
geração de 600 mil empregos diretos e indiretos (PAULO et al., 2016).
Mesmo sendo a padronização uma característica positiva da cachaça industrial em
relação à artesanal, requisito básico para uma bebida de exportação, a cachaça artesanal
conquista os consumidores do mercado internacional por seu aroma mais complexo e
rebuscado, alcançando maior valor agregado. Segundo a Federação Nacional das Associações
de Produtores de cachaça de Alambique FENACA, enquanto a cachaça industrial é vendida a
US$ 0,60/litro, a artesanal tem preço de US$ 3,50/litro, significando uma agregação de valor
próxima de 480% (TAVARES, 2010; VERDI, 2006).
Atualmente, no Brasil, o estado de São Paulo é o maior produtor de cachaça
industrial, enquanto em Minas Gerais prevalece como o maior de cachaça artesanal, com mais
de 8500 alambiques e 200 milhões de litros por ano. Existem diversos problemas relacionados
à produção da cachaça, sendo a vinhaça o principal resíduo deste processo. É gerada uma
quantidade de 2,6 milhões de litros de vinhaça por ano, sem contar os cerca de 300 bilhões de
litros gerados pela fabricação de álcool no país. Com isso, a vinhaça tida como rejeito ou
subproduto do processo de fabricação da cachaça tem gerado problemas quanto ao seu destino.
Nesse contexto, a aplicação de novas tecnologias de gestão no processo de fabricação de
 31

cachaça pode proporcionar um sistema produtivo bastante sustentável e com alto rendimento
na geração de energia e administração dos resíduos (como o vinhaça) durante a produção
(NIGRI et al., 2011).
Em relação às exportações, no ano de 2018, a Cachaça foi exportada para 77 países,
com mais de 50 empresas exportadoras, gerando receita de US$ 15,61 milhões (8,41 milhões
de litros). Esses números representam um decréscimo de 1,24% em valor e de 3,80% em
volume, em comparação a 2017. Em 2018, os principais países de destino em valor foram:
Estados Unidos, Alemanha, Paraguai, Portugal e Itália (IBRAC, 2019).
O mercado mundial e também o brasileiro com melhor poder aquisitivo estão ávidos
por produtos denominados “naturais”. O produto artesanal tem maior apelo comercial,
permitindo ao micro, pequeno e médio produtor a chance de atingir um público consumidor de
aguardente mais refinado e exigente, que se distingue da parcela de consumidores tradicionais
de cachaças industrializadas, por consumirem o produto sem misturas, reverenciando a
importância de seu gosto, sendo imprescindível para isso que ele apresente qualidade
(AZEVEDO et al., 2003).

4.3 Vinhaça: composição, produção e uso no Brasil

A vinhaça pode ser definida como o resíduo final obtido durante a produção de
etanol por fermentação de cana-de-açúcar (BARROS et al., 2015). Este resíduo das indústrias
sucroalcooleira é caracterizado por ser uma suspensão ácida, ter altos valores de DQO, odores
desagradáveis e coloração marrom escuro (CHRISTOFOLETTI et al., 2013; ESPANA-
GAMBOA et al., 2011). Além disso, a vinhaça possui uma alta carga poluidora, baixo pH e é
composta por 94-97% de água e nutrientes como potássio, nitrogênio, fósforo, cálcio, magnésio
(PINTO, M. P. M. et al., 2018).
A vinhaça, também denominada de vinhaça e restilo, compreende o principal
resíduo do processo produtivo do etanol, gerado especificamente na etapa de destilação a uma
taxa média de 13 L por litro de etanol produzido (NOGUEIRA et al., 2008). Segundo dados de
produção nacional de etanol (UNICA, 2013), pode calcular-se a produção de vinhaça no Brasil,
que resulta ser de aproximadamente 250 milhões de m3 por ano nas últimas safras (MORAES;
ZAIAT; BONOMI, 2015). Entre 1,0 e 1,7 milhões de m3 de vinhaça são reciclados anualmente
para campos de cana-de-açúcar por fertirrigação no Brasil (MORAES et al., 2017).
As características da vinhaça são amplamente dependentes da matéria-prima e das
condições de fermentação e destilação aplicadas (ESPAÑA-GAMBOA et al., 2012). De acordo
32

com Cortez et al. (1996), a composição química da vinhaça depende das características do solo,
variedade de cana, período de safra e processo industrial usado na produção de etanol. Segundo
Oliveira (2012), a composição química da vinhaça pode variar dentro de largos limites, sendo
influenciada por diversos fatores, em que pode ser destacada a natureza e composição da
matéria-prima.
No Brasil, a vinhaça de cana-de-açúcar é comumente devolvida aos canaviais via
fertirrigação para reciclar a água e nutrientes, predominantemente o potássio, para a cultura
(FUESS; GARCIA, 2014). Embora estudos tenham associado resultados benéficos à
fertirrigação (JIANG et al., 2012; SIVALOGANATHAN et al., 2013), incluindo redução de
gastos com fertilizantes inorgânicos, a disposição da vinhaça em terra pode gerar vários
impactos negativos para o sistema solo-água-planta ao longo prazo (DE OLIVEIRA et al.,
2013). O conceito de biorrefinaria indica que a aplicação direta da vinhaça na terra reflete a
subutilização de uma matéria-prima altamente energética, porque as abordagens
biotecnológicas são potencialmente adequadas para o processamento de tais efluentes,
particularmente por meio de processos anaeróbios (FUESS et al., 2018).
A utilização da vinhaça in natura como fertilizante causa preocupação devido ao
seu alto grau de impacto quando distribuída no meio ambiente, isso ocorre devido suas
características de baixo pH e elevada demanda química de oxigênio. A DQO pode reduzir os
níveis de oxigênio, afetando assim a sobrevivência dos organismos presentes no solo
(DAMIANO, 2005). Barros et al. (2009) relatam que a carga de DQO da vinhaça é cerca de
27000 mg/L e essa descarga de vinhaça nos cursos d’água, tem ameaçado a fauna e flora devido
a diminuição do oxigênio dissolvido na água.
A vinhaça oferece um grande potencial para a produção de biogás, embora este uso
alternativo seja atualmente subexplorado. No Brasil, bem como no Japão, na Europa e nos
Estados Unidos (EUA), a vinhaça foi tradicionalmente administrada como um aditivo para
alimentação animal, ou aplicado a campos como um nitrogênio-fósforo-potássio (NPK) adubo
para produção agrícola ou utilizado para melhorar a matéria orgânica do solo. As preocupações
com os potenciais impactos ambientais nas águas superficiais e nas águas subterrâneas
resultaram na proibição do uso de vinhaça como fertilizante nos EUA e no Uruguai. Em
contraste, a aplicação da vinhaça ainda é recomendada e legal no Brasil, na União Europeia e
no Canadá.
 33

4.4 Biodigestão Anaeróbica

A biodigestão anaeróbia pode ser definida como um processo biológico natural no

qual um consórcio de diferentes tipos de micro-organismos interagem promovendo a
transformação de compostos orgânicos complexos em compostos simples, resultando
principalmente, na produção de metano e dióxido de carbono. Como resultado desta
fermentação ocorre a liberação de biogás e a produção de biofertilizante (MORAES et al.,
2015).
Para Fuess (2017), a (bio)digestão anaeróbia compreende um processo biológico
natural que ocorre na ausência de oxigênio livre, no qual a matéria orgânica é convertida em
uma mistura gasosa a partir da atividade sintrófica de diversas populações de micro-
organismos. Esta mistura gasosa, conhecida como biogás, é formada principalmente por metano
e dióxido de carbono), além de menores frações de hidrogênio nitrogênio e sulfeto de
hidrogênio, apresentando grande potencial energético devido à presença do CH4 e de H2. Isso
acontece devido ao fato de que estes gases no presente no biogás possuem elevado calor de
combustão.
Esta tecnologia permite o tratamento de resíduos com alta carga orgânica de forma
a reduzir seu volume produzindo um biofertilizante rico em nutrientes, e ainda obter um
aproveitamento energético através da recuperação dos gases gerados no processo (NEVES,
2016).
Segundo Morais et al (2015), a digestão anaeróbica oferece vantagens ambientais e
energéticas. Do ponto de vista ambiental, ela reduz a conteúdo de matéria orgânica presente nos
resíduos tornando-os menos poluentes quando descartados no meio ambiente. Em relação ao
aspecto energético, o processo anaeróbio possibilita a geração de um biogás que pode ser
utilizado como fonte alternativa de energia.

4.4.1 Etapas do processo de digestão anaeróbica

A conversão anaeróbia da matéria orgânica pode ser dividida em quatro etapas

principais, de acordo com as transformações bioquímicas às quais os compostos orgânicos são
submetidos: hidrólise, acidogênese, acetogênese e metanogênese, de modo que pelo menos
cinco grupos de micro-organismos participam do processo (FUESS, 2017).
34

Nesse processo é um consórcio de micro-organismos (bactérias acidogênicas,

bactérias acetogênicas e arqueas metanogênicas) que são responsáveis por cada fase do
processo e que devem estar em perfeito equilíbrio dentro do sistema para a produção de biogás
a partir de materiais orgânicos (KOTHARI et al., 2014a). Os microrganismos fermentativos são
os primeiros a atuar nesse complexo processo de degradação de substratos e são aqueles que
obtêm o maior benefício energético (MORAES et al., 2015).

4.4.1.1 Hidrólise

A primeira etapa na digestão anaeróbia é a hidrólise dos polímeros de cadeia longa,

realizada pelas bactérias fermentativas hidrolíticas. Devido à incapacidade de bactérias em
assimilar a matéria orgânica particulada, ocorre a hidrólise de materiais particulados complexos
(polímeros) em materiais dissolvidos mais simples (moléculas menores). Os principais
compostos a serem hidrolisados são a celulose, as proteínas e os lipídios. A hidrólise destes
polímeros complexos, alguns dos quais são insolúveis, é catalisada por enzimas extracelulares
que são excretadas pelas bactérias fermentativas, tais como proteases e lipases (CASTRO E
SILVA, 2014).
Os pré tratamentos biológicos, químicos, mecânicos ou uma combinação destes
podem ser utilizados para acelerar a etapa da hidrólise, pois eles podem causar a lise ou
desintegração das células de lodo e permitir a liberação de matéria intracelular permitindo maior
acessibilidade dos micro-organismos anaeróbios, reduzindo assim o tempo de retenção no
digestor (FERRER et al., 2008).
Múltiplos fatores influenciam na taxa de hidrólise do substrato, como temperatura
operacional do reator, tempo de residência e composição do substrato, tamanho das partículas,
pH do meio e, até mesmo, a concentração de ácidos orgânicos voláteis provenientes da
hidrólise. As bactérias fermentativas hidrolíticas se constituem numa grande mistura de
espécies, muitas são anaeróbias estritas, como as do gênero Clostridium, e algumas são
facultativas, como as do gênero Citrobacter, Enterobacter e Escherichia (CASTRO E SILVA,
2014).
 35

4.4.1.2 Acidogênese

Nesta fase, a maioria das bactérias acidogênicas converte os produtos de hidrólise

da matéria orgânica complexa em ácidos orgânicos voláteis (principalmente acético, propiônico
e butírico), álcoois (principalmente etanol), corpos cetônicos (principalmente acetona), dióxido
de carbono e hidrogênio. Tais reações biológicas são termodinamicamente favoráveis, e assim,
os micro-organismos acidogênicos apresentam o menor tempo de geração mínimo e as maiores
taxas de crescimento. Portanto, a acidogênese limitará o processo apenas se o substrato a ser
degradado não for prontamente hidrolisado (MORAES et al., 2015).
Os principais gêneros de bactérias fermentativas acidogênicas são: Clostridium,
Bacteroides, Ruminococcus, Butyribacterium, Propionibacterium, Eubacterium,
Lactobacillus, Streptococcus, Pseudomonas, Bacillus, Escherichia, Desulfobacter e
Micrococcus (CASTRO E SILVA, 2014).

4.4.1.3 Acetogênese

Na acetogênese, bactérias acetogênicas transformam ácidos orgânicos e álcoois em

ácido acético, H2 e CO2 (FUESS, 2017). As bactérias acetogênicas responsáveis por essa fase
são: Syntrophobacter wolinii e Sytrophomonos wolfei. Outras bactérias são: Clostridium spp.,
Peptococcus anerobus, Lactobacillus e Actinomyces (MOLINO et al., 2013; TUNES, 2017).

4.4.1.4 Metanogênese

Nesta etapa, o acetato, o hidrogênio e o dióxido de carbono são convertidos em gás

metano e dióxido de carbono, através da ação de micro-organismos metanogênicos, que
também são classificados como arqueas metanogênicas, responsáveis pela fase limitante do
processo (TUNES, 2017).
As arqueas metanogênicas são anaeróbias estritas que incluem: Methanobacterium,
Methanobacillus, Methanococcus e Methanosarcina (MOLINO et al., 2013). Os principais
gêneros do grupo das metanogênicas acetoclásticas são: Methanosarcinas e as Methanosaetas.
Os gêneros mais comuns de metanogênicas hidrogenotróficas em reatores anaeróbios são:
Methanobacterium, Methanospirillum, Methanobrevibacter, Methanoculleus e
Methanocorpusculum (CASTRO E SILVA, 2014)
36

4.4.2 Fatores que interferem na biodigestão anaeróbica

O processo de digestão anaeróbica pode ser afetado por condições operacionais e

ambientais, o que consequentemente influenciará na formação do metano. Logo, é necessário
assegurar uma melhor condição ambiental aos microrganismos estabelecendo os melhores
parâmetros operacionais para assegurar que o processo autorregulador ocorra de maneira
estável (RAJESHWARI et al., 2000).
Os fatores ambientais que influenciam a digestão anaeróbia envolvem,
principalmente, temperatura, pH, alcalinidade, macro nutrientes adequados (N, P, SO4-2) e
micronutrientes (traços de metais), tempo metabólico adequado e uma fonte de carbono (para
síntese e energia) (MORAES et al., 2015).

4.4.2.1 Temperatura

A temperatura causa efeitos significativos nas comunidades microbianas,

interferindo na estabilidade do processo e na produção do biogás (KWIETNIEWSKA; TYS,
2014). De acordo Pinto (1999), as várias experiências já realizadas indicam uma correlação
entre a produtividade do processo de digestão anaeróbia e a faixa de temperatura de operação.
Os micro-organismos devem ser adaptados à faixa de temperatura de trabalho, o que permite
classificá-los também com relação a este parâmetro.
Em relação à temperatura, a biodigestão anaeróbia é geralmente classificada em
processos psicrófilos (10 a 20 °C), mesofílicos (20 a 45 °C) e termófilos (45 a 65 °C)
(KWIETNIEWSKA; TYS, 2014). Abaixo de 10 °C o processo é, em geral, interrompido, sendo
que a produção de gás aumenta com a elevação da temperatura (PINTO, C. P., 1999). Devido
aos gastos com energia e estabilidade do processo a digestão anaeróbia mesofílica é mais
utilizada. No entanto, a digestão anaeróbia termofílica é mais eficiente em termos da remoção
da matéria orgânica e produção de metano (FERRER et al., 2008).

4.4.2.2 pH

O pH mede a concentração de ácidos em sistemas aquosos, ou seja, a concentração

de íons de hidrogênio (KOTHARI et al., 2014b). Cada micro-organismo cresce a uma faixa de
 37

pH característica e o máximo crescimento microbiano ocorre em um valor de pH ótimo. A faixa

de pH ideal para a digestão anaeróbia é bem estreita, sendo esta de 6,8 a 7,2 (WARD et al.,
2008).
Quando se trata de valores de pH, as bactérias acetogênicas e metanogênicas são as
mais exigentes e com maiores dificuldades de se adaptar às mudanças de alterações ambientais.
Isso porque as bactérias acetogênicas produzem ácidos orgânicos voláteis que são convertidos
em ácido acético, hidrogênio e dióxido de carbono, o que resulta em uma acidificação do meio
que influencia negativamente a atividade dos micro-organismos metanogênicos (MONTAÑÉS;
PÉREZ; SOLERA, 2014). A taxa de crescimento de bactérias metanogênicas é reduzida em
ambientes com pH inferiores a 6,6, ao passo que um pH muito alcalino pode levar a
desintegração dos grânulos microbianos e subsequente fracasso do processo, portanto o pH
ideal para a fase metanogênica está em torno de 7,0 (WARD et al., 2008).

4.4.2.3 Tempo de retenção hidráulica

O tempo de retenção hidráulica (TRH) pode ser definido como o tempo necessário
para a completa degradação da matéria orgânica ou o tempo que a matéria orgânica permanece
no digestor, sendo diretamente proporcional a sua taxa de degradação. Varia conforme a
temperatura e a composição do resíduo. Kothari et al. (2014) relatam um TRH de 10 a 40 dias
para biodigestão em condições mesofílicas e que resíduos compostos por celulose e
hemicelulose exigem maior TRH.
É o tempo necessário para a mistura ser totalmente digerida no digestor e ocorre
quando a produção de gás é máxima, definindo a melhor qualidade digestora. Seu valor depende
do substrato, tipo de digestor, além de outros fatores, e pode variar de 50 dias, em alguns tipos
de digestores rurais, em apenas algumas horas, em certos digestores industriais (SALOMON,
KARINA RIBERIO, 2007).

4.4.2.4 Inóculo

Como a biodigestão compreende num processo complexo que exige a presença de

diferentes espécies microbianas, faz-se necessário utilizar um inóculo apropriado, que contenha
os microrganismos necessários para que o processo de degradação possa ser estabelecido. O
inóculo não só proporciona um consórcio microbiano variado, como também macro e micro
nutrientes e capacidade de neutralização (YANG et al., 2015).
38

A concentração de inóculo é importante para o processo e varia de acordo com o

material utilizado para ativar a população microbiana. De fato, o tipo de inóculo afeta a
população microbiana no processo, bem como a diferença na composição físico-química e na
capacidade de produção de biogás (DE VRIEZE et al., 2015; SILVA, C. E. D. F.; ABUD,
2016)
O inóculo deve possuir uma ampla composição trófica de modo a garantir a
biodegradação de qualquer tipo de substrato. Frequentemente, as lamas digeridas constituem o
tipo de inóculo mais usados em processos de biodigestão. No entanto, a utilização do material
digerido (produto final resultante do processo) é preferível relativamente a outras fontes de
inóculo, como lamas ativadas (suspensas ou granulares), esterco de gado e fluidos de
ruminantes, pois possuem populações microbianas metanogénicas já perfeitamente
desenvolvidas e adaptadas ao ambiente anaeróbio, reduzindo assim o risco de inibição. Inóculos
provenientes de reatores com composições de alimentação específicas deverão ser misturados
com diferentes tipos de inóculo, inclusivamente inóculos mesofílicos e termofílicos
(ANGELIDAKI et al., 2009; YANG et al., 2015).
O esterco já biofertilizado de bovinos, aves, suínos pode ser utilizado como inóculo,
principalmente quando os resíduos são materiais difíceis de serem digeridos em decorrência
dos elevados teores de celulose e lignina, como os presentes na cama de frango (COSTA et al.
2011). Vale ressaltar que o esterco bovino é um inóculo em potencial, uma vez que as Archaeas
metanogênicas representam cerca de 40% de sua microfauna (FERREIRA, N. A. D. L. et al.,
2017)
Barcelos (2009) investigou o potencial de aplicação do esterco bovino, suíno e
rúmen bovino como inóculo da digestão anaeróbia de resíduos sólidos urbanos (RSU).
Comparou-se o desempenho desses diferentes inóculos e também com biorreator testemunha,
na qual o meio de reação consistia apenas de FORSUP (fração orgânica de resíduos sólidos
urbanos preparada), água e tampão. E observou que a maior produção total de biogás aconteceu
no biodigestor inoculado com rúmen bovino (144 L), seguido da testemunha (137 L), esterco
suíno (122 L) e, por último, esterco bovino (117 L). Concluiu que, apesar da partida da digestão
anaeróbia não ter sido acelerada, os inóculos podem ser utilizados, pois auxiliaram na
manutenção do pH e umidade e favoreceram a elevada produção de biogás.
Bueno (2010) comparou dois biodigestores em batelada para a produção de biogás
utilizando esterco bovino em duas concentrações 1:2 e 1:1 (esterco: água). E, para a
aclimatação, os substratos foram colocados em biodigestores vedados e, para a remoção de
 39

traços de O2, permaneceram em repouso por 24 horas, à temperatura de 20 °C. O autor concluiu
que o volume produzido de biogás foi maior para a diluição 1:2, evidenciando que a diluição
tem papel fundamental na produção de biogás.
Syaichurrozi (2018) utilizou fluído ruminal como inóculo na co-digestão do
Salvinia molesta e palha de arroz. Neste estudo, o líquido do rúmen em condições frescas foi
obtido do matadouro de vacas na Serang City, província de Banten, na Indonésia. O líquido
ruminal continha Clostridium sp., Clostridium sporogenes, Clostridium butyricum e bactérias
metanogênicas ricas. (SYAICHURROZI, 2018).
Barros e colaboradores (2016) utilizaram resíduos de suinocultura para arranque de
reator UASB (Upflow Anaerobic Sludge Blanket), em experimento com processo de digestão
anaeróbia com posterior alimentação dos reatores utilizando-se vinhaça natural, proveniente de
plantio de cana em Ribeirão Preto, São Paulo. O volume de lodo de resíduos da suinocultura
atingiu 30% do volume de cada reator, com o restante sendo preenchido pela vinhaça natural.
A média da eficiência de remoção de DQO foi de aproximadamente 70 a 80%, tendo atingido
até 82% de eficiência máxima pelos reatores UASB. Este estudo, que também analisou a
conversão anaeróbia da vinhaça em biometano com aumento gradual da carga orgânica em dois
reatores UASB, com volumes de 40,5 e 21,5 litros e com operação em temperatura mesófila,
verificou produções máximas de metano na ordem de 0,19 L (g DQO total removido)-,
alcançadas após 140 dias de operação dos reatores. (BARROS, V. G. D. et al., 2016)

4.5 Uso da biodigestão anaeróbica para tratamento da vinhaça

A aplicação da digestão anaeróbia no tratamento de vinhaça, assim como de outras

águas residuais com alta carga orgânica, está intimamente relacionada ao aperfeiçoamento deste
processo nas últimas décadas, considerando o desenvolvimento de tecnologias que permitiram
o aumento do tempo de retenção de sólidos (biomassa) nos reatores (VAN LIER et al., 2015).
A aplicação de tecnologias de biodigestão anaeróbica para tratar a vinhaça de cana-
de-açúcar não se mostrou ser vantajosa por causa dos pequenos ganhos envolvidos no uso de
biogás para gerar eletricidade. Atualmente está recebendo mais atenção principalmente por
ganhos ambientais, mas o progresso científico neste tópico ainda é insatisfatório, com vários
estudos questionáveis ou conflitantes. Um relatório anterior sobre os aspectos econômicos e
energéticos da biodigestão anaeróbia da vinhaça em fábricas de processamento de cana-de-
açúcar apontou os ganhos consideráveis em termos de eletricidade ou cogeração, bem como
combustíveis alternativos de veículos. O potencial energético da vinhaça, que se perdeu por
40

aplicação deste subproduto "in natura" ao solo, pode ser comparável às demandas elétricas de
algumas cidades, ou a capacidade de geração de algumas usinas hidrelétricas e, em alguns
casos, excedeu a energia obtida da combustão do bagaço de cana-de-açúcar. Portanto, os
conceitos de sustentabilidade envolvidos na biodigestão anaeróbia da vinhaça ainda necessitam
ser melhor explorados em biorefinarias de cana-de-açúcar no Brasil (MORAES et al., 2015).
As vantagens da digestão anaeróbica da vinhaça incluem baixa produção de lodo
biológico, menor necessidade de nutrientes e produção de hidrogênio e / ou metano, que pode
ser usado como fonte de energia. Tal processo se encaixa no conceito de biorrefinaria,
integrando a produção etanol, a recuperação de energia e o uso de efluente tratado na
fertirrigação de plantações de cana-de-açúcar (VOLPINI et al., 2018).
Satyawali & Balakrishnan (2008) relataram que o sistema de reatores em batelada
tem futuro promissor no tratamento de vinhaça, principalmente nas pequenas fábricas, o qual
seria composto por um tanque receptor, um tanque de retenção intermediária, 2 tanques de
armazenamento e um tanque de tratamento aeróbio.
A tecnologia de digestão anaeróbia aplicada a vinhaça foi implementada em
algumas destilarias de grande porte, no qual demonstrou uma eficiência de conversão de mais
de 80% em taxas de carregamento orgânico de mais de 20 kg DQO/ m3/ d. Para a quantidade
de DQO em vinhaça, cerca de 100 kg de metano é produzido com uma eficiência de remoção
de 80% (TUNES, 2017; VAN HAANDEL, 2005).

4.6 Digestores

A Índia foi o primeiro país a instalar biodigestores para a produção de biogás, de

maneira sistemática. A primeira unidade foi construída por volta de 1908. Este país começou
seu programa de implantação de biodigestores em 1951 e contava até 1992 com cerca de 160
mil unidades instaladas. A China iniciou seu programa de implantação de biodigestores na
década de cinquenta e contava até 1992 com cerca de 7,2 milhões de unidades (ANDRADE;
RANZI; MUNIZ, 2002; BAUMANN; KARPE, 1980).
No Brasil os biodigestores rurais tiveram maior desenvolvimento na década de 80
quando contaram com grande apoio dos Ministérios da Agricultura e de Minas e Energia. Cerca
de 8.000 unidades, principalmente os modelos chinês e indiano, além de alguns de plástico
tinham sido construídos até 1988, dos quais 75% estavam funcionando adequadamente
(COELHO; PALETTA; FREITAS, 2000) .
 41

A constituição básica de um digestor é a câmara de fermentação, onde ocorre a

biodigestão da matéria orgânica, uma campânula que armazena o gás produzido, ou se permite
a saída deste gás, a entrada do substrato a ser fermentado e a saída para o efluente produzido
pelo processo. Trata-se de uma tecnologia simples, onde a principal preocupação é a
manutenção das propriedades fermentativas da biomassa bacteriana. São muitos os modelos de
biodigestores, alguns com importantes detalhes construtivos, que dependem do tipo de
aplicação a que são destinados e, também, do nível tecnológico disponível. Na construção do
biodigestor eficiente com alta produtividade, deve-se atender basicamente a três requisitos: o
saneamento, o atendimento de uma demanda energética e a utilização do material biodegradado
como fertilizante (GRANATO; SILVA, 2002).
Segundo Pinto (1999), classificam-se os digestores quanto ao tipo de construção,
modo de operação, forma de armazenamento do gás, fluxo das substâncias em fermentação,
temperatura de operação, com ou sem agitação e com ou sem dispositivos para agregar a
biomassa bacteriana.
Dotto & Wolff (2012) desenvolveram um biodigestor anaeróbio em escala
experimental e de alimentação intermitente. O biodigestor foi alimentado inicialmente com 80
kg de esterco bovino, proveniente de um abatedouro, misturado com 374 L de água, e
observaram que o esterco bovino apresentou bom desempenho como inóculo de
microrganismos e matéria orgânica de partida do biodigestor.

4.7 Uso de biodigestores em propriedades rurais

Segundo Deganutti e colaboradores (2002), existem uma gama de modelos de

biodigestores, sendo cada um adaptado a uma realidade e uma necessidade de biogás. No
entanto os biodigestores mais utilizados em pequenas propriedades no meio rural são o modelo
indiano, chinês e batelada.
O biodigestor modelo Indiano é caracterizado possuir uma campânula que é uma
espécie de tampa conhecida como gasômetro, a qual pode estar mergulhada sobre a biomassa
em fermentação ou pode estar em um selo d’agua externo. Sua estrutura é composta de uma
parede central que serve para dividir o tanque de fermentação de duas câmaras, para assim
permitir que o material possa circular pelo interior da câmara de fermentação (TARRENTO;
MARTINEZ, 2006).
O biodigestor modelo Chinês é formado por uma câmara cilíndrica em alvenaria
onde ocorre a fermentação, apresenta um teto impermeável e abobado que é destinado ao
42

armazenamento do biogás. O seu funcionamento é com base no princípio de prensa hidráulica,

ocorrendo então aumentos de pressão em seu interior devido ao acúmulo de biogás resultando
em deslocamento do efluente da câmara de fermentação para a caixa de saída em sentido
contrário quando ocorre descompressão (JORGE & OMENA, 2012)
Já o biodigestor modelo Batelada trata-se de um sistema bastante simples e de
pequena exigência operacional. Sua instalação poderá ser apenas um tanque anaeróbio, ou
vários tanques em série. Esse tipo de biodigestor é abastecido de uma única vez, portanto não
é um biodigestor contínuo, mantendo-se em fermentação por um período conveniente, sendo o
material descarregado posteriormente após o término do período efetivo de produção de biogás
(DE LUCA BONTURI; VAN DIJK, 2012).
Neste modelo, a biomassa permanece no reservatório fechado até que o ciclo da
digestão anaeróbio esteja completo. Ou seja, o fim da produção de biogás indica que o ciclo
está completo e o biodigestor está apto a receber uma nova carga de matéria orgânica (JORGE
& OMENA, 2012).

4.8 Biogás

O biogás é composto principalmente por metano e gás carbônico, e pode ser

utilizado na geração de energia elétrica, mecânica e no aquecimento (CALZA et al., 2016). A
geração de energia elétrica pode ser feita pela queima do biogás em turbinas e em motores do
ciclo de Otto e diesel, devidamente adaptados, sendo considerada uma fonte de energia limpa e
própria para uso em propriedades rurais. O biofertilizante por outro lado trata-se de um adubo
natural rico em nitrogênio (MARCUCCI, 2018).
De acordo com Granato et al. (2002) o biogás proveniente da biodigestão anaeróbia
da vinhaça pode ser explorada das seguintes maneiras: (i) queimá-lo completamente na caldeira,
gerando vapor para operar todo o mecanismo para esmagar a cana-de-açúcar. Neste caso, os
estudos mostram que existe um excedente de 25-28% de todo o bagaço que é geralmente
queimado em caldeiras e poderia ser utilizado para outros fins; (ii) um terço do biogás poderia
ser purificado, produzindo metano para substituir todos os combustíveis utilizados na indústria
agrícola durante a colheita, e os restantes dois terços seriam queimados em caldeiras que
fornecem um excedente de 18% do bagaço; (iii) utilizar a totalidade do biogás para acionar uma
turbina a gás, conjugada a um gerador elétrico.
 43

O aumento do gás metano é considerado um dos componentes do aquecimento

global. Portanto, é essencial reduzir a auto decomposição da biomassa e utilizar o biometano
gerado por biomassa para fins úteis sem liberá-lo na atmosfera (DE BHOWMICK; SARMAH;
SEN, 2018).
O poder calorífico do biogás é variável estando na faixa de 22.500 a 25.000 kJ/m3,
admitindo o metano com cerca de 35.800 kJ/m3. Isto significa um aproveitamento de 6,25 a 10
kWh/m3 (JORDÃO et al., 1995). Sua potencialidade é demonstrada quando tratado, pois o seu
poder calorífico pode chegar a 60% do poder calorífico do gás natural (SALOMON, KARINA
RIBEIRO; LORA, 2009)
Há um alto potencial na produção de biogás globalmente. Moreda (2016), avaliou
um potencial elétrico mínimo de 0,162 TWh/ano no Uruguai, considerando a digestão anaeróbia
de resíduos agrícolas, esterco animal, vinhaça, lodo de tratamento de efluentes e resíduos
sólidos urbanos (MOREDA, 2016).
Lamo (1991), demonstrou o potencial energético de uma tonelada de cana. Segundo
este, uma tonelada de cana pode gerar 909,90 x 10³ kcal de energia (álcool e biogás). Porém,
caso não se aproveite o biogás resultante da biodigestão da vinhaça, deixa-se de recuperar 7,5%
do total de energia disponível em uma tonelada de cana.

4.9 Análises físico-químicas

De acordo com Instituto Mineiro de Gestão das Águas - IGAM, (2004), os

parâmetros que aferem a qualidade do efluente podem ser divididos em físicos e químicos. Os
parâmetros físicos são representados pela condutividade elétrica, sólidos totais, sólidos
dissolvidos, sólidos suspensos, cor, turbidez, alcalinidade bicarbonato, dureza. Já, nos
parâmetros químicos, encontram-se pH, oxigênio dissolvido, DBO, DQO, nitrogênio total,
nitrogênio amoniacal, nitrato, fósforo, cloretos, ferro, potássio, sódio, magnésio, manganês,
zinco, cobre.

4.10 Análise Quimiométrica – Análise dos Componentes Principais

Análise dos Componentes Principais – PCA (Principal Component Analysis) é um

método estatístico linear que encontra os autovalores e auto vetores da matriz de covariância
dos dados. Tal método serve de base fundamental da maioria dos métodos modernos para
tratamento de dados multivariados. O PCA consiste numa manipulação da matriz de dados com
44

objetivo de representar as variações presentes em muitas variáveis, através de um número

menor de "fatores". Constrói-se um novo sistema de eixos (denominados rotineiramente de
fatores, componentes principais, variáveis latentes ou ainda autovetores) para representar as
amostras, no qual a natureza multivariada dos dados pode ser visualizada em poucas dimensões
(FERREIRA, M. M. C. et al., 1999).
A ferramenta multivariada de análise de componentes principais (PCA) foi
empregada para a classificação das imagens. PCA consiste em uma mudança de base dos dados
multivariados, representados pela matriz X, contendo os histogramas médios das imagens
digitalizadas para cada categoria, encontrando o vetor N o, chamado autovetor, e um escalar,
T, chamado autovalor, para o qual a igualdade cov(X)No = T. No é satisfeita. cov(X) é o auto-
sistema da covariância dos dados multivariados, de maneira que transforme um espaço
multidimensional em um subespaço menor, como por exemplo, de dimensão um, gerado por
um autovetor. Ou seja, X (multivariável) representada por muitos vetores, passa a ter as
informações relevantes, representadas por um ou mais autovetores. Esse subsistema deve reter
as informações relevantes e representar, de modo mais adequado, cada variável
individualmente. Desse modo, PCA descreve, em termos geométricos das componentes
principais, a covariância das variáveis (no presente caso, os canais RGB) usando o menor
número de autovetores. O novo subsistema consiste, então, dos eixos das componentes
principais, sendo as coordenadas das amostras nesses novos eixos denominados de scores.
Como cada componente principal é uma combinação linear das variáveis originais, os
coeficientes dessas variáveis (ou seja, os autovetores) são chamados de loadings (GODINHO
et al., 2008).
 45

5 METODOLOGIA

Neste tópico, são apresentadas as metodologias que foram utilizadas neste

experimento.

5.1 Características gerais

A pesquisa foi conduzida em quatro etapas, conforme Figura 1, sendo a terceira

etapa subdividida em três estágios: inicialmente realizaram-se testes de biodigestão da vinhaça
em escala de bancada utilizando reatores de 250 mL, para testar o desempenho da biodigestão,
variando a quantidade de inóculo, temperatura e diluição da vinhaça. Na segunda etapa, os
ensaios da Biodigestão foram realizados em um biorreator de bancada anaeróbio, da marca
TECNAL, com capacidade total de 4,5 litros e com um sistema de monitoramento e controle
que permitiu o acompanhamento do pH, CO2, temperatura e nível de volume do reator. A
terceira etapa consistiu na construção de um biodigestor de 450 litros, dimensionado conforme
a realidade dos pequenos produtores de cachaça da região e construído com tecnologias atuais,
utilizando material de baixo custo, acessível e de fácil manuseio.

Figura 1 - Fluxograma do processo

Esquema do experimento

2ª Etapa:
1ª Etapa: 4ª Etapa:
Obtenção e 3ª Etapa:
Desenho e montagem Análise e interpretação
caracterização da Digestão Anaeróbia
dos sistemas dos resultados
vinhaça

Caracterização 1° Estágio:
Físico-química Ensaios de bancada

2° Estágio: Ensaios
no Biorreator

1° Estágio: Ensaios
no Biodigestor
projetado
46

5.2 Local do experimento

O experimento foi realizado no laboratório de Processos Biotecnológicos e

Tecnologia Ambiental, no laboratório de Microbiologia do Campus I e no laboratório de
Tecnologia de Biomassas do Cerrado, da Universidade Federal dos vales do Jequitinhonha e
Mucuri- UFVJM / Campus Diamantina.

5.3 Substrato

O substrato utilizado no experimento foi vinhaça proveniente da produção de

Cachaça Artesanal, produzida no Laboratório de Tecnologia de Biomassas do Cerrado pela
equipe de pesquisa “Cachaça Artesanal de Qualidade”. A vinhaça foi coletada diretamente na
saída do alambique ao longo da safra de cana-de-açúcar, onde foi armazenada em reservatórios
plásticos (volumes de 2, 5 e 20 L) e congeladas (-20 °C), de acordo com a Figura 2, buscando-
se preservar as suas características físico-químicas, especialmente quanto à concentração de
carboidratos.

Figura 2 – Aparelho de destilação para produção de cachaça

Alambique de cobre , com serpentina de aço inox.

Fonte: Autora.

5.4 Caracterização da vinhaça bruta e do subproduto da biodigestão

A vinhaça in natura foi caracterizada quanto a umidade, matéria seca, cinzas sólidos
suspensos voláteis e totais, densidade, potencial hidrogeniônico, demanda química de oxigênio
 47

(DQO), proteínas, lipídeos e nitrogênio total. O efluente da biodigestão foi caracterizado quanto
a DQO e pH. As análises descritas acima foram realizadas nos Laboratórios da UFVJM e as
técnicas utilizadas obedeceram os procedimentos estabelecidos pelo Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater (APHA, 2012). A Figura 3 apresenta um fluxograma
das análises realizadas.

Figura 3 - Fluxograma das análises realizadas

Fonte: Autora.

5.4.1 pH

A determinação do pH é usada para quantificar a concentração de íons hidrogênio

de uma solução, e se refere a acidez e alcalinidade desta solução. A concentração
hidrogeniônica é reguladora de muitas reações químicas e microbiológicas, fazendo com que
esse parâmetro tenha grande importância na atividade enzimática e no desempenho do
biodigestor. Além disso, a taxa de crescimento de micro-organismos é significativamente
afetada pela mudança de pH.
A determinação do pH se deu por meio de um pHmetro digital de bancada
(microprocessado), modelo MPA-210 da marca TECNOPON, dotado de um eletrodo de vidro
48

com sonda de correção automática de temperatura, de acordo com o método 4500-H+ B

proposto por Standard Methods for Examination of Water and Wastewater (APHA, 2012).

5.4.2 Densidade

Densidade absoluta ou massa específica de uma substância qualquer de massa m e

volume V é definida por:
𝑚
𝜌= (1)
𝑉
ou seja, é a razão entre a massa de um corpo pelo volume que o mesmo ocupa.
A densidade foi determinada por meio da Equação (1), onde a massa foi
determinada em uma balança analítica modelo M214Ai da marca Bel Engineering, com
capacidade máxima para 210 g e mínima de 10 mg e o volume da amostra pesada foi
determinado por um picnômetro de 25 mL. As determinações de densidade foram feitas em
triplicata e os resultados obtidos como a média das repetições.

5.4.3 Sólidos Solúveis Totais – SST

A determinação de sólidos solúveis totais nas amostras de vinhaça foi avaliada

usando um refratômetro da marca Hand Hel Refractometer, modelo RHB–18ATC. O resultado
foi expresso em °Brix.

5.4.4 Umidade e Matéria Seca

A determinação da matéria seca, também chamada de sólidos totais (ST) foi

realizada seguindo o método 2540B proposto por Standard Methods for Examination of Water
and Wastewater (APHA, 2012). Como a vinhaça possui compostos termolábeis, deixou-se a
amostra na estufa a 60ºC até peso constante. A quantidade de sólidos totais foi determinada pela
Equação (2). As análises de ST foram feitas em triplicata e os resultados obtidos como a média
das repetições.
𝑃1 − 𝑃0
𝐹𝑇(𝑔.𝑘𝑔−1 ) = × 1000 (2)
𝑘𝑔𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎
 49

Onde:
P0= Peso da capsula de porcelana (g)
P1 = Peso do resíduo seco + capsula de porcelana (g).
Uma vez calculado o teor de sólidos totais a umidade foi calculada pela diferença
entre 100 e o conteúdo de sólidos totais (U(%) = 100-ST(%)).

5.4.5 Sólidos Fixos Totais (Cinzas) - SFT

A quantificação dos sólidos fixos totais (SFT) foi feita em triplicata, utilizando-se
o método 2540E da metodologia proposta por Standard Methods for Examination of Water and
Wastewater (APHA, 2012). O conteúdo de sólidos totais fixos foi determinado a partir da
incineração em mufla a 550°C e o conteúdo de SFT foi obtido com a Equação (3).

𝑃2 − 𝑃0
𝑆𝐹𝑇(𝑔.𝑘𝑔−1) = × 1000
𝑘𝑔𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎 (3)

Onde:
P0= Peso da capsula de porcelana (g)
P2 = Peso do resíduo após ignição + capsula de porcelana (g).

5.4.6 Sólidos Voláteis Totais - SVT

Os sólidos voláteis totais (SVT) foram determinados de acordo com o método

2540E da metodologia proposta por Standard Methods for Examination of Water and
Wastewater (APHA, 2012), através da diferença entre os ST e os SFT, conforme mostrado pela
Equação (4). Estas análises foram feitas em triplicata e os resultados obtidos como a média das
repetições.
𝑆𝑇𝑉(𝑔.𝑘𝑔−1 ) = 𝑆𝑇 − 𝑆𝑇𝐹
(4)

5.4.7 Açúcares Redutores -AR

A quantificação de açúcares redutores nas análises foi determinada pelo método do

ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS), como proposto por Miller (1959). Inicialmente, preparou-se
uma solução padrão de glicose 1g L-1, para ser utilizada na construção de uma curva padrão de
glicose (Gráfico 1). A curva continha 6 pontos e as diluições, em triplicata.
50

A análise foi feita pela adição de 800 μL do reagente DNS, 400 μL da amostra
(centrifugada, ou agitada) e 400 μL da H2O em um microtubo tipo Eppendorf de 2 mL, seguido
de incubação a 100 °C por 5 minutos e resfriamento em banho de água com gelo por mais 10
minutos. A seguir, transferiu-se a solução para um tubo de vidro e acrescentou 8000 μL de água
destilada, e posteriormente, realizou-se a leitura em espectrofotômetro a 540 nm.

Gráfico 1 – Curva Padrão para determinação de Açúcares Redutores

1,6
y = 1,4792x
1,4 R² = 0,9994
Absorbância (540 nm)

1,2

0,8

0,6

0,4

0,2

0
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2
Glicose (g.L-1)

A partir da equação da reta 𝑦 = 𝑎𝑥 + 𝑏, foi calculada a concentração de açúcar

redutor nas amostras de vinhaça, onde: x é o valor da concentração de glicose; y é o valor da
absorbância; e a é a constante 1,4792.

5.4.8 Acidez Total Titulável - ATT

Para a determinação de acidez total titulável foram medidas cerca de 20 mL das

amostras de vinhaça, transferidas para frascos Erlennmeyers de 125 mL. Em seguida,
adicionaram-se 3 gostas da solução de fenolftaleína a 1%, e fez-se a titulação com solução de
hidróxido de sódio 0,01 M, sob agitação até mudança de cor da solução para levemente róseo.
A acidez titulável pode ser expressa como volume gosto da solução de NaOH 1,0
N por 100 g de amostra (mL %), como mostrado na equação (5):

(𝑉 × 𝑓 × 100)
𝐴𝑇𝑇(𝑚𝐿%) =
(𝑃 × 𝑐) (5)
 51

Onde:
V = nº. de mL gasto na titulação; f = fator de correção;
P = g de amostra;
c = correção p/ NaOH 1M (c=10 p/ NaOH 0,1M e c=100 p/NaOH 0,01M)

5.4.9 Lipídeos

A determinação do teor de lipídeos nas amostras de vinhaça foi realizada pelo

método gravimétrico, baseado na perda de peso do material submetido a extração com éter
etílico, segundo a Association of Official Analytical Chemists (AOAC., 1990). Foram pesadas
0,5 g das amostras, previamente secas em estufa a 60°C, em cartucho de papel e transferidas
para o aparelho extrator tipo Soxhlet, da marca QUIMIS Q388-268. O extrator foi conectado
ao balão de fundo chato previamente calcinado a 105°C em estufa e pesado. A amostra foi
extraída com éter etílico durante, aproximadamente, 6 horas com manta aquecedora. Ao
término da extração, o solvente foi evaporado e recuperado. Posteriormente, fez-se a secagem
do balão com o resíduo lipídico (extrato etéreo) em estufa por 105ºC por 2 horas, em seguida
foi resfriado em dessecador até a temperatura ambiente e pesado para obtenção da massa de
lipídeos presentes na amostra.

5.4.10 Nitrogênio total e Proteínas

O nitrogênio total e proteínas foram determinados de acordo metodologia proposta

por Standard Methods for Examination of Water and Wastewater (APHA, 2012). O nitrogênio
da amostra foi convertido em sulfato de amônio, sem prévia remoção da amônia, por digestão
com ácido sulfúrico, sulfato de potássio e sulfato de cobre. Em seguida, o material foi tratado
com tiossulfato de sódio em meio alcalino (adição de NaOH 30 a 50 %) e a amônia restante foi
destilada por arraste de vapor em um destilador de nitrogênio tipo Kjeldahl, da marca Solab,
modelo SL 74, e recolhida em solução saturada de ácido bórico como solução indicadora,
vermelho de metila + verde de bromocresol. Por titulação com ácido clorídrico, determinou-se
a quantidade de amônio que reagiu com ácido bórico, conforme as equações (6) e (7).

(𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑜 𝐻𝐶𝑙)(𝑚𝐿) × 𝑁𝐻𝐶𝑙 × 𝐹𝑎𝑡𝑜𝑟 × 14

𝑁𝑖𝑡𝑟𝑜𝑔ê𝑛𝑖𝑜(%) = × 100
𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑎 𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎(𝑚𝑔) (6)
52

(𝑉𝑜𝑙. 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑜 𝐻𝐶𝑙)(𝑚𝐿) × 𝑁𝐻𝐶𝑙 × 𝐹𝑎𝑡𝑜𝑟 × 14 × 𝐹𝑎𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑣𝑒𝑟𝑠ã𝑜

𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎(%) = × 100
𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑎 𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎(𝑚𝑔) (7)

Onde o fator utilizado foi de 6,25.

5.4.11 Demanda Química de Oxigênio – DQO

A determinação de DQO foi realizada pelo método Colorimétrico: DR2000 -

Standard Methods 5220 D (APHA, 2012). O método de digestão do dicromato, trata-se de uma
reação de oxidação em meio fortemente ácido e elevada temperatura na presença de um
catalisador (o sulfato de prata). É usado o dicromato de potássio (cromo na forma de Cr 6+)
devido a sua forte capacidade oxidante, facilidade de manipulação e aplicabilidade, além de ser
um padrão primário. A utilização de um catalisador, como o sulfato de prata, é necessária para
tornar possível a oxidação de compostos alifáticos de cadeia reta. Após a oxidação da matéria
orgânica presente, a DQO é obtida diretamente (mg O2/L) no espectrofotômetro.
Dessa forma, as amostras foram preparadas acrescentando-se os reagentes
supracitados e, em seguida, os tubos contendo as amostras foram colocados no bloco digestor,
marca SOLAB SL -25/40, para fazer a digestão das mesmas a 150 °C por 2 horas. Após a
digestão, retiraram-se os tubos do bloco digestor, estes foram em banho de gelo, e em seguida,
fez-se a leitura da absorbância, no espectrofotômetro da marca FEMTO, modelo Cirrus 80PE,
utilizando 600 nm de comprimento de onda.
A calibração do método foi feita por meio de uma curva padrão utilizando biftalato
de potássio. A curva analítica foi construída conforme evidenciado no Gráfico 2.

Gráfico 2 – Curva de calibração DQO

0,25
y = 0,0004x
R² = 0,9912
0,2
Absorbância (nm)

0,15

0,1

0,05

0
0 100 200 300 400 500 600
Concentração de DQO (mgO2/L)
 53

5.5 Crescimento microbiano na vinhaça bruta

O crescimento de microrganismos foi desenvolvido no laboratório de microbiologia

do Campus I, da UFVJM, utilizando-se a técnica de cultivo por isolamento de colônias em meio
sólido, tal técnica possibilita a imobilização das células, o que torna possível a visualização do
crescimento em massas celulares isolados, o que permite a contagem direta no microscópio. Os
meios de cultura utilizados foram ágar sabouraud 2%, para isolamento de fungos, e o agar
nutriente, para isolamento e identificação de bactéria.
O meio de cultivo ágar sabouraud 2% (Sb) é utilizado para o isolamento e
identificação de fungos. A composição desse meio é 5,0 g L-1 de peptona de carne, 20 g L-1 de
glicose, 5,0 g L-1 de peptona de caseína e 15 g L-1 de ágar bacteriológico. Para o preparo,
pesaram-se 45 g do meio e diluí-as em 1000 mL de água destilada, misturando até que uma
solução uniforme fosse obtida. Esta solução foi aquecida até dissolução completa. Em seguida,
o meio foi esterilizado em autoclave por 15 minutos a 121ºC. Posteriormente, foi vertido em
placas de Petri esterilizadas.
Já o meio ágar nutriente (AN), utilizado para isolamento e identificação de bactéria,
tem a composição de 1,0 g L-1 de extrato de carne, 2,0 g L-1 de extrato de levedura, 5,0 g L-1 de
peptona, 5,0 g L-1 de cloreto de sódio e 15 g L-1 de ágar. O preparo foi realizado conforme o
meio de cultivo ágar sabouraud, utilizando 28 g do pó em 1 litro de água.
O método utilizado para a contagem das colônias foi o de espalhamento em placa.
Fez-se uma placa inoculando a vinhaça pura, sem diluição, e oito com diferentes diluições, que
foram: 1:10; 1:25; 1:50; 1:100; 1:103; 1:104; 1:105 e 1:106. Todas as diluições foram feitas em
triplicas para os dois meios. Dessa forma, após fazer as diluições, fez-se o plaqueamento das
amostras. Respeitando-se um raio de 15 cm da chama do bico de Bunsen, pipetou-se 0,1 mL da
solução de vinhaça, por meio de uma pipeta automática, com a ponteira esterilizada, e a
transferiu para a placa de Petri contendo o meio de cultura sólido. Logo após, flambou-se uma
alça de Drigalsky na chama, e espalhou-se a vinhaça em toda a superfície.
Em seguida, as placas contendo o meio ágar Nutriente foram transferidas para uma
BOD, com temperatura a 37 °C, e as placas com o meio ágar sabouraud foram mantidas em
temperatura ambiente. As observações e contagens das colônias foram feitas em intervalos de
12 em 12 horas, por 7 dias, totalizando 14 observações. As observações foram realizadas através
de um lupa, para análise dos aspectos morfológicos e contagem das colônias.
54

5.6 Inóculo

Nos ensaios de biodigestão da vinhaça, foi necessário o uso de um inóculo com

fonte de microrganismos exigidos para degradação da matéria orgânica durante o processo de
biodiestão, uma vez que a vinhaça in natura coletada diretamente do alambique não houve
presença de microrganismo pelo teste de crescimento de colônia. O esterco bovino é
considerado uma fonte promissora de inóculo para a biodigestão, pois é rico em microrganismos
anaeróbios capazes de acelerar o tempo de biodegradação da matéria orgânica, além de ser uma
fonte de fácil aquisição aos produtores de cachaça artesanal.
Dessa forma, utilizou-se como inóculo o estrume bovino fresco oriundo de fazendas
de produtores rurais da região de Diamantina/MG. O esterco foi coletado, homogeneizado via
mistura manual, acondicionado em embalagem plásticas e mantidos sob temperatura de -20 °C,
em freezer. Para preparação dos inóculos, o estrume bovino foi descongelado em temperatura
ambiente, em seguida, pesado e diluído com água destilada, até atingir as concentrações do
experimento. Para os ensaios de bancada utilizou-se 50 mL de inóculo variando as
concentrações em 100 g L-1, 200 g L-1 ou 300 g L-1 de esterco, utilizado, respectivamente, 5, 10
e 15 g do esterco e completava o volume para 50 mL.

5.7 Pré-testes da biodigestão de vinhaça

Inicialmente, os protótipos dos reatores a serem utilizados no processo de

biodigestão foram desenhados com auxílio do software ChemDraw Ultra 12 e depois montados
em laboratório, conforme apresentado na Figura 4a. Foi desenvolvido um reator do tipo
batelada para realizar testes de produção do biogás. O sistema de biodigestão foi montado e
operado no Laboratório de Processos Biotecnológicos e Tecnologia Ambiental da UFVJM.
Esse sistema foi composto por um reator, uma câmara de lavagem e depósito de armazenamento
de gás. O reator foi constituído por um kitassato de vidro com capacidade de 500 mL acoplado
em um banho-maria para que o substrato pudesse ser aquecido à temperatura de operação, 20 a
35 °C, conforme metodologia empregada por Silva e Abud (2016). A mistura de gases
produzido nesse reator foi conduzida, por uma mangueira de silicone, passava por uma válvula
de coleta de amostra, e entrava em uma unidade de solução de lavagem (Solução de hidróxido
de sódio a 5%), onde o dióxido de carbono foi fixado. Ao sair da câmara de lavagem, o biogás
era dirigido, por uma mangueira de silicone conectada a um kitassato invertido contendo água,
 55

que quantificava o volume de biogás produzido pela expansão do gás e deslocamento da coluna
de líquido dentro do kitassato. A água deslocada foi coletada em um recipiente graduado, neste
caso, utilizou-se uma proveta de vidro graduada.
Nos experimentos iniciais, o reator foi testado utilizando vinhaça de cachaça com
pH neutralizado como substrato e esterco bovino fresco como inóculo. A faixa de pH ideal para
a digestão anaeróbica é relatada, por Mao et al. (2015), como sendo entre 6,8-7,4. Como a
vinhaça in natura possui uma faixa de pH inferior, foi necessária a sua neutralização para
realização dos ensaios. O pH da vinhaça foi neutralizado utilizando solução de NaOH 5%.
Por meio de teste iniciais determinou-se um processo de referência, ou seja o
processo na qual foi obtido maior produção de biogás. Este foi utilizado como ponto central
para comparação de parâmetros. Assim, se determinou o delineamento experimental, a ser
utilizado no 2° estágio do processo de biodigestão.

Figura 4 - Representação esquemática do sistema e fotografia do sistema de biodigestão

D
A

(a) (b)
(A) Reator controlado por temperatura com um agitador; (B) Câmara de lavagem do biogás; (C) Depósito de Gases; (D)
Proveta para quantificar o biogás produzido por deslocamento de líquido.

Fonte: Autora.

5.8 Delineamento experimental

Os experimentos foram executados de acordo com um planejamento fatorial 23

completo com três repetições no ponto central, de acordo a Tabela 1. Este experimento foi
dimensionado com 3 fatores, que são: A – concentração de inóculo; B – temperatura e C –
diluição da vinhaça; e dois níveis em cada fator, ou seja, duas variações em cada fator, sendo
para o A, a variação de 100 g L-1 e 300 g L-1 na concentração do inóculo; para o B: variação da
56

temperatura em 25 e 35 °C e para o C variação de 25 e 50% na diluição da vinhaça. O

experimento possuiu um total de 11 tratamentos.

Tabela 1 – Matriz de planejamento fatorial 23.

Variáveis codificadas Variáveis reais
Concentração Diluição da Concentração Diluição da
Ensaio Temperatura Temperatura
de Inóculo vinhaça de Inóculo* vinhaça
1 -1 -1 -1 10% 25 °C 25%
2 1 -1 -1 30% 25 °C 25%
3 -1 -1 1 10% 25 °C 50%
4 1 -1 1 30% 25 °C 50%
5 -1 1 -1 10% 35 °C 25%
6 1 1 -1 30% 35 °C 25%
7 -1 1 1 10% 35 °C 50%
8 1 1 1 30% 35 °C 50%
9 0 0 0 20% 30 °C 0%
10 0 0 0 20% 30 °C 0%
11 0 0 0 20% 30 °C 0%
* Concentração expressa em % m.v-1 de inóculo (massa de esterco por volume de inóculo).

5.9 Ensaios da Biodigestão em escala laboratorial

Os ensaios da biodigestão de vinhaça conforme o delineamento proposto foram

executados em três conjuntos, agrupados de acordo com a temperatura. O sistema de
biodigestão foi montado conforme descrito no item 5.7, mudado apenas o reator, que nestes
ensaios foram utilizados frascos de vidro boro silicato 3.3 com anel antigota e tampa azul de
rosca com duas conexões de mangueira, com capacidade de 250 mL, da marca Larboglas. Estes
foram mantidos em banho-maria ultra com controle de temperatura e circulação, da marca
Lucadema, demonstrado na Figura 5.
Antes de cada batelada, os biorreatores, as mangueiras e as vidrarias foram
esterilizadas a 121°C e 15 psi por 20 minutos, na autoclave vertical da marca Prismatec. Uma
vez montado e devidamente esterilizado, em cada biorreator (4 no total) foi adicionado 200 mL
de substrato (vinhaça diluída). As condições do ponto central (ensaios 09, 10 e 11) foram
determinadas através dos dados obtidos nos pré-testes, citado no item 5.7. Dessa forma, aos 200
mL de substrato foram acrescentados 50 mL de inóculo com concentração de 100 g L-1, 200 g
L-1 e 300 g L-1 de esterco bovino fresco. Resultando as concentrações finais de: 20 g L-1, 40 g
L-1 e 60 g L-1.
 57

Figura 5 – Ensaios da Biodigestão da vinhaça

Fonte: Autora.

Os fatores temperatura, concentração de inóculo e diluição da vinhaça foram

estudados quanto à sua influência na DQO e na formação de biogás. O término da produção de
biogás (volume constante de biogás formado) foi utilizado como critério para interromper os
ensaios de biodigestão.
Ao final de cada processo a vinhaça biodigerida com o inóculo foram centrifugados
a 3.500 rpm por 10 min, conforme metodologia proposta por Dias e colaboradores (2016),
utilizando a centrifuga da marca Thermo Scientific Sorvall, modelo Legend Mach 1.6 (Figura
6). Em seguida, as amostras de vinhaça tratada foram separadas e armazenadas (congeladas)
em recipientes previamente higienizados com solução de Ácido Nítrico 50%.

5.10 Ensaios da biodigestão em um biorreator automatizado

Para a otimização da produção de biogás através da biodigestão da vinhaça, os

ensaios de bancada (descrito no item 5.9) com melhor destaque foram reproduzidos em um
Biorreator de bancada automatizado com capacidade de 7,5 litros, e com um sistema de
monitoramento e controle que permitiu o acompanhamento do pH, CO2, temperatura, pressão
e nível de volume.
O equipamento consiste em um vaso de reação de vidro encamisado, um módulo
de aeração, um módulo de bombas peristálticas, um módulo de medição e atuação, um módulo
de banho termostatizado, um módulo de suporte do vaso, uma tampa em aço inox, um motor e
um software de controle do sistema, demostrado na Figura 6.
58

Figura 6 – Biorreator automatizado

A: biorreator anaeróbio com vinhaça; B: câmara de lavagem do biogás; C: reservatório de biogás; D: proveta
para coleta de agua.
Fonte: Autora.

O sistema foi montado e operado no Laboratório de Processos Biotecnológicos e

Tecnologia Ambiental da UFVJM. Foram realizadas dois ensaios montados conforme os
parâmetros da Tabela 2, e sistemas da Figura 6. A caracterização físico-química da vinhaça e
dos produtos da biodigestão foi realizada em triplicata conforme metodologia apresentada no
item 5.4. Fez-se análises de pH, umidade, matéria seca, cinzas, sólidos totais, sólidos totais
fixos e DQO. Ao final dos processos de digestão anaeróbica foi realizada a quantificação do
CO2,CH4, H2S e NH3.
 59

Tabela 2 - Parâmetros utilizados dos ensaios de biodigestão

Parâmetros Ensaio 1 Ensaio 2
Vol. de vinhaça 2 litros 2 litros
Vol. de água 2 litros 2 litros
Inóculo 300g de esterco bovino e 700ml de água 300g de esterco bovino e 700ml de água
pH Não controlado Controlado (7)
Tem. média 20 °C 26 °C
Tempo 25 dias 25 dias

Essas condições (Tabela 2) de diluição de vinhaça e quantidade de inóculo foram

determinadas, por meio dos resultados obtidos nos ensaios de biodigestão de bancada. Ou seja,
os ensaios que se destacaram com maior produção de biogás no experimento anterior foram
reproduzidos conforme os parâmetros que indicavam uma melhor resposta, produção de biogás,
pela análise no gráfico de superfície na etapa de otimização.
Conforme apresentado na Tabela 2, foram realizados dois ensaios utilizando, em
cada, 2 litros de vinhaça bruta, pH (3,5), 2 litros de água e 1 litro de inóculo (composto por 300
g de esterco bovino e 700 mL de água). Em seguida, foram misturados e neutralizados (pH 7)
com solução de NaOH (20%), o processo de biodigestão durou por 25 dias e o volume de
produção de gás foi monitorado diariamente.
O primeiro ensaio foi conduzido a temperatura média de 20 °C e o pH não foi
controlado, já no segundo ensaio a temperatura média foi de 26 °C e o pH foi controlado através
da adição de solução de NaOH (20%), visando manter o mesmo em torno de 7, pois nessa
condição o metabolismo dos microrganismos fermentativos e metanogênicos é favorecido e a
produção de biogás otimizada.

5.11 Desenvolvimento e construção de um biodigestor industrial

O biodigestor em batelada anaeróbio foi construído e instalado no galpão do

laboratório de Biomassa do Cerrado da UFVJM, conforme demostrado na Figura 7. Esse
aparelho foi divido em três compartimentos, contendo em cada, uma câmara de fermentação
com capacidade de 240 litros, que consiste em um recipiente fechado feito PVC, com uma
entrada do substrato a ser fermentado, e uma saída para efluentes produzidos pelo processo,
vinhaça biodigerida. Acoplado às essas câmeras foi instalado um registro para saída de gases
que é ligado ao depósito de gases, construído com mangueira hidráulica de alta pressão e com
60

6” de diâmetro. Esse depósito, possui um manômetro para leitura da pressão e uma saída de gás
com válvula de segurança.

Figura 7 - Biodigestor anaeróbio de vinhaça

Depósito de Saída de gases e

gases válvula de
segurança

Registro

Entrada do
efluente

Câmera de
fermentação

Descarga do
subproduto

Fonte: Autora.

5.12 Análises da composição do Biogás

A composição do biogás gerado foi determinada utilizando o kit de análise de

Biogás com Biofoto Microprocessado (Figura 8), desenvolvido pela empresa Alfakit Ltda em
colaboração com a Embrapa Suínos e Aves, e que apresenta precisão conforme Tabela 3. As
análises foram feitas seguindo o método de Orsat com algumas adaptações.

Figura 8 – Kit de análise de Biogás

Fonte: Autora.
 61

Tabela 3 - Ficha técnica e limite de detecção do kit de análise do biogás.

Parâmetro Método Informações
Metano ORSAT 0 – 100 % Resolução de 2,5 %
Dióxido de carbono ORSAT 0 – 100 % Resolução de 2,5 %
Concentração leitura em ppmV de gás (mg m-3);
Azul de
Amônia Resolução: 0,01 para absorbância;
Indofenol
Espectro de emissão de 619 - 630 nm, pico em 633 nm.

Concentração leitura direta em de gás (mg m-3);

Ácido Sulfídrico Azul de Metileno Resolução: 0,01 para absorbância;
Espectro de emissão de 619 - 630 nm, pico em 633 nm.
Fonte: Manual de Análise: biogás (KUNZ; OLIVEIRA; PICCININ, 2013).

5.12.1 Determinação de Gás Carbônico e Gás Metano

A determinação de gás carbônico e metano foram realizados por diferença de

volume, pelo método de Orsat. Este é um método volumétrico envolvendo absorção e oxidação
seletivas. Ele é geralmente utilizado para detectar CO2, O2 e CO (KUNZ et al., 2013). O
Analisador Orsat (Figura 9) é utilizado para se determinar a composição e peso molecular de
gases.

Figura 9 – Mini-orsat: suporte analisador de gás carbônico

Fonte: Autora.

5.12.2 Determinação de Amônia

As análises colorimétricas para quantificação de amônia presente no biogás foram

realizadas de acordo com o método “Azul de Indofenol”. O método consiste no burbulhamento
de uma amostra do biogás em uma solução diluída de ácido sulfúrico, formando sulfato de
amônia. O sulfato de amônia formado na amostra é analisado colorimetricamente pela reação
62

com fenol e hipoclorito de sódio alcalino, produzindo indofenol, um corante azul. A reação é
acelerada pela adição de nitroprussiato de sódio, um catalisador (LODGE, 1989). A leitura
colorimétrica foi feita através do fotocolorímetro, da linha alfa kit com faixa de onda de 621 –
638 nm, e com as curvas de calibração, para amônia, já inseridas, conforme apresentado na
Figura 10.

Figura 10 – Fotocolorímetro para análise de Amônia e Gás Sulfídrico

Fonte: Autora.

5.12.3 Determinação de Ácido Sulfídrico

Os testes colorimétricos para determinar as concentrações de H2S no biogás foram

realizadas pelo método “Azul de Metileno”. Também chamado de método do corante azul de
metileno. A amostra de biogás é submetida em reações físico-químicas, após faz-se a análise
colorimétrica utilizando o fotocolorímetro (KUNZ et al., 2013). Este equipamento já contém
as curvas de calibração para H2S inseridas. Os resultados do gás sulfídrico são fornecidos em
ppmv.

5.13 Análise estatística

Os valores médios dos dados obtidos foram comparados usando o teste de Tukey
em níveis de confiança de 95%. Todos os cálculos estatísticos foram feitos com os softwares
"Statistica", versão 10.0 e o “The Unscrambler X, versão 10.5.1”.
 63

5.13.1 Análise de componentes principais

Avaliou-se a estrutura de correlação do volume de biogás gerado com os resultados

das variáveis físico-químicas, variação de pH, demanda química de oxigênio (DQO), % de CH4,
NH3 e H2S, mediante uma análise de componentes principais (ACP), utilizando o programa
estatístico, o Software The Unscrambler X 10.1 (The Unscrambler X são marcas registradas da
CAMO Software).
Neste programa realizou-se a análise de componentes principais (PCA). Na PCA
os dados foram projetados através de combinações lineares das variáveis originais (variação de
pH, demanda química de oxigênio (DQO), % de CH4, NH3 e H2S), formando as componentes
principais (PC). Foram então obtidos os gráficos de scores e de loading, isto é, a distribuição
das amostras em função da importância das variáveis.
Para a realização dos cálculos quimiométricos, uma matriz de dados X foi
construída colocando-se as amostras nas linhas e as respectivas variáveis nas colunas. Dessa
forma, a matriz de dados (11x6) foi organizada com 3 variáveis e 11 casos (amostras), para
cada parâmetro

5.13.2 Otimização

Para a etapa de otimização na produção de biogás utilizaram-se os planejamentos

compostos centrais e Doehlert, que se baseiam na metodologia de superfície de resposta. Os
coeficientes foram obtidos utilizando-se o método dos quadrados mínimos.
A metodologia de superfície de resposta baseia-se na construção de modelos
matemáticos empíricos que geralmente empregam funções polinomiais lineares ou quadráticas
para descrever o sistema estudado e, consequentemente, dão condições de explorar (modelar e
deslocar) o sistema até sua otimização (TEÓFILO; FERREIRA, 2006).
 65

6 RESULTADOS E DISCUSSÃO

6.1 Caracterização da vinhaça

As características físico-químicas da vinhaça são importantes à serem avaliadas

porque este efluente foi utilizado com substrato para a produção de biogás, e as suas
características podem proporcionar um melhor crescimento e atividade microbiana ao sistema
anaeróbico. Os resultados referentes às características físico-químicas da vinhaça in natura
estão apresentados na Tabela 4. Observa-se que a vinhaça exibiu parâmetros considerados
prejudiciais ao meio ambiente, principalmente a alta DQO, baixo pH e grande conteúdo sólido
total (MORAES et al., 2015; SALOMON, KARINA RIBEIRO; LORA, 2009).

Tabela 4 - Caracterização físico-química da vinhaça bruta.

Características Nesse estudo Outros estudos Referência
Umidade (%) 97,700 ± 0,08 95,85 (PINTO, M. P. M. et al., 2018)
Matéria Seca (%) 2,300 ± 0,05 2,08 ± 0,04 (NEVES, 2016)
Cinzas (%) 23,94 ± 0,18 21,54 (PIRES et al., 2018)
pH 3,330 ± 0,097 3,7 –4,6 (SALOMON, KARINA RIBEIRO; LORA, 2009)
Densidade Relativa (g cm-3) 1,003 ± 0,0001 1,015 ± 0,005 (SILVA, C. E. D. F.; ABUD, 2016)
SST (°Brix) 3,000 ± 0,01 1,20 (PIRES et al., 2018)
Matéria Orgânica (%) 76,06 ± 0,18 26,80 (UENO et al., 2013)
-1
ST (g.kg ) 32,770 ± 0,79 20,82 ± 0,44 (NEVES, 2016)
-1
STF (g.kg ) 07,140 ± 0,08 6,33 ± 0,065 (NEVES, 2016)
-1
SVT (g.kg ) 25,620 ± 0,42 29,64 (PINTO, M. P. M. et al., 2018)
AR (g.L-1) 13,70 ± 0,21 10,61 (PIRES et al., 2018)
Proteínas (% total de MS) 55,94 ± 3,01 3.155 ± 0.32* (PINTO, M. P. M. et al., 2018)
Lipídios (%) 1,630 ± 1,1 9,51 (PIRES et al., 2018)
-1
DQO (mg O2.L ) 31.559 ± 1.180 30.732,8 (SILVERIO, 2017)
Observações: ST, sólidos totais; STF, sólidos totais fixo; STV, sólidos voláteis totais; MS, matéria seca; AR,
açúcares redutores; *expresso em matéria úmida.

A diferença entre os valores obtidos por outros trabalhos referenciados na Tabela 4

e os valores encontrados neste experimento, pode ser justificada por variações nas operações
de processos de produção, composição da cana-de-açúcar, tipo de fermento utilizado, entre
outros, que influenciam a composição química da vinhaça. Moraes et al. (2015) relataram que
as características da vinhaça dependem da matéria-prima e, portanto, das práticas agrícolas que
influenciam a composição da cana. No caso da vinhaça de cana-de-açúcar, sua composição
também varia de acordo com a matéria-prima de fermentação, ou seja, caldo de cana e/ou
melaço. Nas plantas autônomas, que produzem apenas etanol, a vinhaça é proveniente do caldo
66

de cana, assim como na produção de cachaça artesanal. Nas plantas anexas, que produzem
açúcar e etanol, a vinhaça deriva do melaço e do suco.

6.1.1 Umidade e matéria seca

A vinhaça representa uma mistura de água, compostos orgânicos e inorgânicos

(BAEZ-SMITH, 2006). A determinação da umidade se faz necessária porque esse parâmetro
influencia na troca de oxigênio entre os micro-organismos e o meio (ALBUQUERQUE et al.,
2006). A vinhaça utilizada neste estudo apresentou um percentual de umidade e matéria seca,
respectivamente, de 97,7 e 2,3%. Estes valores corroboram com resultados de outros autores.
Carrilho et al. (2016) descreveram que a vinhaça é composta predominantemente de água e de
sólidos, respectivamente 93 % e 7 %. Já Pinto et al. (2018), obtiveram 2,47% de sólidos totais,
e 97,53 % de umidade na vinhaça de cana-de-açúcar.
Observa-se, que a vinhaça da fabricação de cachaça, possui alta porcentagem de
água. Segundo Khalid et al. (2011), elevadas taxas de umidade facilitam o processo da digestão
anaeróbia. A água é um componente essencial no processo de degradação da matéria orgânica,
pois ela atua como solvente e contribui para a transferência de massa e a difusão de micro-
organismos, permitindo a interação entre a superfície do substrato com os microrganismos
envolvidos no processo (SHEWANI et al., 2015).

6.1.2 Cinzas e Matéria Orgânica

Pelos dados obtidos de matéria seca e cinzas é possível observar que maior parte da
vinhaça que está presente em matéria seca possui característica orgânica, sendo 23,94 %
inorgânica, restando 76,06 % de matéria orgânica que será utilizada para a produção de biogás.
Valores próximos ao encontrados por Pires e colaboradores (2018) na caracterização de vinhaça
de etanol: 97,49 % de umidade, 0,040 g 100 g-1 de matéria seca e 21,54% de cinzas. A
determinação das cinzas indica a quantidade de minerais presentes na matéria prima utilizada
nos processos biotecnológicos. Segundo Fick (1976), as cinzas contém, principalmente, os
seguintes cátions: cálcio, potássio, sódio, magnésio, ferro, cobre, cobalto e alumínio; e ânions:
sulfato, cloreto, silicato e fosfato.
 67

6.1.3 pH

A vinhaça in natura de cachaça, utilizada neste experimento, apresentou pH ácido

de 3,330 ± 0,097, o que não favorece o processo de biodigestão anaeróbica. Dessa forma foi
necessário neutralizar esse pH com uma solução de NaOH antes de alimentar os biorreatores.
Sydney e colaboradores (2014), relataram o valor de pH de 4,52 para a vinhaça que estudaram.
Já Cruz-Salomón et al. (2017) obtiveram o valor de pH 3,9 em uma vinhaça de uma bebida
nativa do México. Para o uso na biodigestão anaeróbica, está vinhaça foi neutralizada com uma
solução de Ca(OH)2.
Os microrganismos envolvidos no processo de biodigestão anaeróbica têm um pH
ótimo de operação de acordo com a fase de produção do biogás. A maioria das bactérias cresce
melhor em uma faixa estreita de pH perto da neutralidade, entre pH 6,5 e 7,5. Poucas bactérias
crescem em um pH ácido abaixo de 4,0 (TORTORA; FUNKE; CASE, 2012). De acordo com
Ferreira (2017), a formação do metano ocorre em um intervalo de pH relativamente estreito, de
aproximadamente 6,5 a 8,5 com uma faixa ótima entre 7,0 e 8,0. Salomon (2007) relata que a
atividade das bactérias metanogênicas, produtoras de biogás, tem um rendimento ótimo na faixa
de pH entre 6,6 e 7,4. Granato (2016), em uma biodigestão cujo pH do afluente vinhaça foi
corrigido para 7, obteve uma produção de biogás 97,5% maior do que em um processo na qual
a vinhaça operou com pH in natura, ou seja, exatamente como produzido na coluna de
destilação. Observa-se desta maneira que a biodigestão anaeróbia da vinhaça apresenta maior
produção de biogás quando o pH é neutralizado, ou seja, corrigido para 7.

6.1.4 Densidade Relativa

A densidade relativa obtida na vinhaça in natura foi de 1,003 ± 0,0001 g cm-3. Valor
próximo foi encontrado por Silva e Abud (2016) em vinhaça de etanol, de 1,015 ± 0,005 g cm-
3
.

6.1.5 Sólidos totais, Fixos e Voláteis

A vinhaça de cachaça apresentou 32,770 ± 0,79 g kg-1 de sólidos totais, 07,140 ±

0,08 g kg-1 de sólidos fixos totais e 25,620 ± 0,42 g kg-1 de sólidos voláteis totais. Valores de
sólidos semelhantes aos obtidos neste trabalho foram observados por Neves (2016), que obtive
68

para vinhaça um teor de 20,82 ± 0,44 g kg-1 de sólidos totais e 6,33 ± 0,065 g kg-1 de sólidos
fixos totais. Pires e colaboradores (2018) obtiveram 29,64 g.kg-1 de sólidos voláteis totais na
vinhaça de etanol.
A análise de sólidos totais (ST) interpreta quantitativamente a presença total de
matéria que não seja água (dissolvida, coloidal ou em suspensão). Segundo Goularte (2014),
quanto maior for o conteúdo de sólidos voláteis, os quais representam a quantidade de sólidos
orgânicos presentes na amostra, e a disponibilidade de nitratos e fosfatos, maior será a produção
de biogás. Logo, os valores de sólidos observados na vinhaça deste estudo, potencializa seu uso
na biodigestão anaeróbica.

6.1.6 Açúcares Redutores Totais e Sólidos Solúveis Totais

A determinação de açúcares redutores totais (ART) e sólidos solúveis totais (SST)

se fez necessária porque esses componentes são excelentes fontes de carbono para os
microrganismos presentes no processo de biodigestão. Os SST são usados como índices de
açúcares totais em diversos substratos. A vinhaça utilizada neste trabalho apresentou
concentração de açúcares redutores e SST de 13,70 ± 0,21 g.L-1 e 3° Brix, respectivamente.
Valores semelhantes foram obtidos por Pires et al. (2018), 1.015 ° Brix de sólidos solúveis
totais e 10,61 g.L-1 de açúcares redutores.

6.1.7 Proteínas e Lipídios

As proteínas são fontes de nitrogênio. Segundo Zheng et al. (2005), o nitrogênio é

um elemento determinante para o cultivo de microrganismos. A presença de nitrogênio durante
a digestão anaeróbia é importante quando o objetivo é a produção de biogás, pois as bactérias
precisam de nutrientes para converter a matéria orgânica em biogás (KHALID et al., 2011).
A vinhaça in natura estudada era composta por 55,94 % de proteína expressa em
matéria seca e 1,630 % de lipídios. A quantidade destes composto no substrato são importantes
para a produção de biogás. Pois, na primeira etapa do processo de biodigestão, a matéria
orgânica complexa, tais como carboidratos, proteínas e lipídios são hidrolisados pelas bactérias
fermentativas hidrolíticas em compostos orgânicos simples.
 69

6.1.8 DQO

Conforme a Tabela 4, observa-se que a vinhaça utilizada neste trabalho apresentou

uma demanda química de oxigênio de 31.559 ±1.180 mg O2 L-1. Sydney e colaboradores
(2014), relataram valores de DQO de 29.600 mg O2 L-1 para a vinhaça que estudaram. De
acordo com Freire & Cortez (2000), a vinhaça apresenta elevadas taxas de DQO 10.000 a
210.000 mg O2 L-1. Solomon (2007) relata que a vinhaça de cana-de-açúcar possui uma DQO
em torno de 30.000 a 40.000 mg O2 L-1 . Com essas altas taxas de demanda bioquímica de
oxigênio e o baixo pH, a vinhaça se encontra entre os dejetos industriais de maior potencial
poluidor. O motivo desse poder impactante se deve ao elevado teor de matéria orgânica
coloidal, o que leva a oxidação de praticamente todo o oxigênio disponível na água.
As análises da DQO demonstram que a vinhaça estudada é um efluente de alto teor
de matéria orgânica. Embasado nestas determinações, optou-se por avaliar a influência da
diluição desta no processo de biodigestão. Esta decisão foi tomada a fim averiguar que, ao se
utilizar a vinhaça bruta, os microrganismos eram submetidos a um choque capaz de incapacitá-
los de exercerem a digestão anaeróbia.

6.2 Pré-testes da biodigestão de vinhaça

Os resultados obtidos nos pré-testes, realizados conforme descritos no item 5.7,

estão apresentados na Tabela 5.

Tabela 5 – Resultados dos pré-testes de biodigestão

Tempo Volume
Ensaios de Diluição Inóculo Temper. de biogás CH4 CO2 NH3 H2S4
pHIncial
Operação (%) (% v/v) (°C) produzido (%) (%) (ppmV) (ppmV)
(dias) (mL)
A 48 - 7,10 - 21 a 25 0 - - - -
B 7 - 7,10 10 25 249 - - - -
C 12 30 7,10 10 35 265 70 30 43,24 8,82

O pré-teste inicial, nomeado como ensaio A, teve um período de incubação de 48

dias, utilizando apenas a vinhaça bruta com o pH neutralizado, sem diluição e sem adição
inóculo. Por meio dos resultados obtidos, notou-se que não houve formação de biogás no ensaio
A; isso pode ter ocorrido pela ausência da microbiota envolvida no processo de biodigestão,
uma vez que a vinhaça utilizada foi coletada diretamente na saída no destilador, e está sai com
temperatura em torno de 80 à 100 °C, motivo que pode ter levado a ausência de microrganismo.
Afirmação que pôde ser comprovada pelo teste de crescimento de colônia na vinhaça bruta, que
70

demostraram a ausência de fungos e bactérias, pois não teve crescimento significativo de

colônias no experimento montado, conforme descrito no item 5.5.
A ausência de um inóculo neste ensaio foi um fator determinante para a taxa de
geração de biogás. De fato, segundo Oliveira et al. (2012), é indispensável o uso de um inóculo
para se ter um tratamento anaeróbio eficiente. O inóculo funciona como catalisador da reação,
acelerando o processo de decomposição da matéria orgânica e, consequentemente, reduzindo o
tempo necessário para geração de biogás. Para contribuir com o bom funcionamento da
biodigestão anaeróbia, o inóculo deve apresentar quantidade considerável de biomassa
(PENTEADO et al., 2018; SILVA, G. A., 2012).
O segundo pré-teste, denominado como ensaio B (Tabela 5), também foi utilizado
apenas a vinhaça bruta neutralizada (pH 7,10), sem diluição da vinhaça e com adição de 10%
(v/v) do inóculo, o esterco bovino fresco. Neste ensaio o período de incubação foi de 7 dias, e
houve uma produção de 249 mL de biogás. O período de incubação foi inferior ao ensaio A
devido ao sistema montado não ter suportado o volume de biogás gerado, motivo que levou a
interrupção do processo de biodigestão. Observa-se, que com a adição do inóculo, houve uma
aceleração o processo de decomposição da matéria orgânica e, consequentemente, auxiliou na
geração de biogás
Dentre os pré-testes, o ensaio C foi considerado o processo com melhor
desempenho para a biodigestão da vinhaça. Esta biodigestão teve duração de 12 dias, utilizando
350 mL de vinhaça e 10% (v/v) de inóculo, o esterco bovino fresco, e se obteve 265 mL de
biogás composto por 70% de metano e 30% CO2, conforme apresentado no Gráfico 3.

Gráfico 3 - Volume diário de Produção de Biogás em 12 dias

300,00
35°C
250,00
Volume de Biogás (mL)

200,00

150,00

100,00

50,00

0,00
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Tempo (dias)
 71

Nota-se, no Gráfico 3, que o início da produção de biogás ocorreu a partir do quarto

dia, descrevendo, inicialmente, um crescimento da taxa de produção de gases, seguido de um
período de taxa constante. Esses resultados estão de acordo com Silva &Abud (2016) que
obtiveram o início da fase exponencial no quinto dia da biodigestão de vinhaça em sistema
mesofílicos.
Comparando os pré-testes, nota-se que a adição do inóculo auxiliou na ativação do
potencial de geração de biogás pela vinhaça de cachaça. O mesmo foi observado por Santos et
al. (2014), onde, utilizando lodo de esgoto como inóculo para a biodigestão da vinhaça,
comprovaram que a produção máxima de biogás foi atingida rapidamente nos primeiros dias.

6.3 I Estágio: Ensaios da Biodigestão em escala laboratorial

Os dados obtidos nos ensaios realizados conforme o delineamento apresentado no

item 5.8 estão descritos nas Tabelas 6 e 7. O processo de biodigestão durou por 25 dias em
todos os ensaios. Este tempo de retenção foi determinado após um estudo prévio na literatura.
Segundo Salomon (2007), o tempo de retenção é definido pela relação entre o volume do
digestor e o volume da carga diária, e pode variar em função da adição de nutrientes, ou pela
agitação e variação da temperatura da mistura no digestor. Bouallogui e colaboradores (2003)
obtiveram um tempo de retenção de 20 dias na biodigestão de resíduos vegetais. Já Lastella et
al (2002), relataram um tempo de retenção de 22,5 à 33,7 dias em biodigestão de resíduos
orgânicos semissólidos. Para Silva & Abud (2016), o tempo de retenção hidráulica foi de 25
dias em seus ensaios de biodigestão anaeróbia da vinhaça, mas relataram que não houve
produção significativa de biogás após 15 a 20 dias. Nesse sentido, considerou-se que este
intervalo de tempo, de 25 dias, representa um tempo de retenção hidráulica ideal para a
biodigestão anaeróbia da vinhaça.
Os volumes acumulados de biogás produzido nos onzes ensaios do planejamento
experimental estão expressos na Tabela 6. Os volumes totais de biogás produzido nestes ensaios
variaram entre 2,08 mL e 347,90 mL. Os ensaios de 01 a 04, conduzidos a temperatura de 25
°C, produziram um volume de biogás acumulado de, respectivamente, 64,65; 347,90; 29,56 e
261,08 mL. Sendo os ensaios 02 e 04 com as maiores produções de biogás dentre os onzes
ensaios. Já os processos de biodigestão conduzidos na temperatura de 35 °C, ensaios 05 ao 08,
geraram, respectivamente, 2,08; 2,29; 18,47 e 123,15 mL de biogás. Os pontos centrais, ensaios
09 ao 11, que foram mantidos numa temperatura de 30 °C, obtiveram um volume de biogás de
215,51; 73,89 e 231,52 mL, respectivamente.
72

Tabela 6 - Volume Acumulado de Biogás Produzido.

Ensaio Volume de Biogás (mL)
1 64,65
2 347,90
3 29,56
4 261,08
5 2,08
6 2,29
7 18,47
8 123,15
9 215,51
10 73,89
11 231,52

O Gráfico 4 apresenta as curvas da produção acumulada de biogás gerado durante

um período de 25 dias nos 8 ensaios, e a curva da média dos pontos centrais, conforme o
delineamento apresentado na Tabela 1.

Gráfico 4 - Monitoramento da formação de biogás

400

350
Volume acumulado de Biogás (mL)

300

250

200

150

100

50

0
0 5 10 15 20 25
Tempo (dias)

Ensaio 01 Ensaio 02 Ensaio 03 Ensaio 04 Ensaio 05

Ensaio 06 Ensaio 07 Ensaio 08 Ponto Central

Pelo Gráfico 4, é possível observar como ocorreu a formação do biogás nos ensaios,
ao longo do tempo de incubação. Os ensaios mantidos a 25 °C com as maiores concentrações
de inóculo, ensaios 02 e 04, tiveram um destaque maior na quantidade de biogás acumulado.
Dessa forma, pode se inferir que a concentração de inóculo tem grande interferência no volume
 73

de biogás produzido, sendo um parâmetro que merece estudos mais aprofundados. Notou-se
ainda, que o ensaio 04 possui um processo mais estável em relação ao ensaio 02. Este
apresentou pequenas fases estacionárias durante o período de operação. Este fato pode ser
atribuído à formação de substâncias intermediárias que pode ser inibidoras para as bactérias
fermentativas e as acetogênicas que estão envolvidas nas etapas de acidogênese e acetogênese,
respectivamente.
Speece (1996) afirma que a instabilidade do processo anaeróbio ocorre quando a
velocidade de produção de ácidos for maior que seu consumo, acarretando queda do pH e
inibição das atividades das arqueias metanogênicas, altamente sensíveis a mudanças nas
condições ambientais. Segundo Rajagopal et al (2013) e Syaichurrozi (2018), o baixo pH pode
perturbar a estabilidade da biodigestão anaeróbica, que depende da manutenção de um
equilíbrio bioquímico delicado entre os microrganismos acidogênicos e metanogênicos. Os
microrganismos metanogênicos são mais sensíveis com baixo pH do que os microrganismos
acidogênicos.
No ensaio 04, com diluição de 50% da vinhaça, a formação de biogás teve início
no terceiro dia de biodigestão, e estabilizou a produção a partir do sétimo dia de incubação. Já
no ensaio 02, a formação do biogás teve início no quinto dia; entretanto, este produziu um
volume maior de biogás no período de 25 dias, ou seja, cerca de 25 % a mais que o ensaio 04.
Por outro lado, comparando-se estes dois ensaios em termos de gasto de energia e tempo de
biodigestão versus volume de biogás gerado, nota-se, que a reprodução do ensaio 02 numa
empresa seria mais viável. Pois, como neste processo a produção do biogás foi estabilizada no
oitavo dia com um volume de 253 ml, num período de 25 dias poderia realizar-se até três
bateladas, obtendo, no final, um volume total de aproximadamente 760 ml de biogás.
Em relação ao ponto central, verificou-se que houve início da formação de biogás
com 24 horas da biodigestão. O mesmo foi relatado por Budiyono e colaboradores (2014)
quando previram o rendimento de biogás a partir de resíduos de vinhaça contendo alto teor de
carboidratos. Em seus experimentos, o biogás foi gerado no primeiro momento da fermentação
da vinhaça (1 dia).
Os ensaios 01, 03, 05, 06 e 07, conforme apresentado no Gráfico 4, tiveram baixa
produção de biogás. No ensaio 01, o biogás começou a ser produzido no décimo nono dia de
biodigestão; a partir daí teve uma taxa de geração crescente até o 25º dia. Já no ensaio 03 teve
a formação de biogás em torno de 3 mL no terceiro dia e estabilizou a produção entre o quarto
e décimo terceiro dia com a formação de 8,7 ml. A partir desse dia, voltou a produzir com uma
velocidade de formação constante e lenta.
74

Nos ensaios 05 e 06, a formação de biogás iniciou-se a partir do segundo dia de

biodisgestão, produzindo cerca de 2 ml; entretanto, teve a produção paralisada durante todo o
período de incubação. E no ensaio 7, o deslocamento de líquido iniciou-se no segundo dia, e a
formação biogás se encerrou por volta do decimo primeiro dia.
Os ensaios 05 e 06 foram os que tiveram uma menor produção de biogás,
respectivamente, 2,08 e 2,29 mL de biogás. Está baixa produção pode estar atribuída a presença
de algum inibidor. É sabido que a presença de agentes inibidores pode ocasionar baixa produção
de biogás, o que inclui amônia, sulfeto, metais pesados, etc. (CHEN, J. L. et al., 2014; CHEN,
Y.; CHENG; CREAMER, 2008a; KARHADKAR et al., 1987; PENTEADO et al., 2018;
RAJAGOPAL et al., 2013; SILES et al., 2010).
No entanto, de acordo com avaliações de energia realizados, mostraram que, na
biodigestão anaeróbia da vinhaça, é possível realizar ainda uma maior produção de metano,
alcançando valores de 6,97-14,23 m3 de CH4 por m3 de vinhaça (SALOMON, KARINA
RIBEIRO; LORA, 2009; TUNES, 2017).
A Tabela 7 apresenta os valores dos parâmetros: pH, variação de pH, volume de
gás acumulado, composição do biogás, DQO e percentual de remoção de DQO, avaliados nos
experimentos de biodigestão de bancada utilizando o planejamento experimental fatorial
completo 23 em diferentes temperaturas, concentrações de inóculo e diluição da vinhaça.
Em relação a variação e influência da temperatura na biodisgestão, conforme
apresentado na Tabela 7, nota-se que no grupo dos ensaios (01 ao 04) mantidos com temperatura
de 25 °C obtiveram uma média de produção de biogás de 175,80 mL, que foi superior aos
demais. Os ensaios conduzidos na temperatura de 30 °C (pontos centrais) produziram uma
média de 173,64 mL, e o grupo acondicionado na temperatura de 35 °C, ensaios do 05 ao 08,
teve uma média de produção de 36,50 mL. Esse fato demonstrou que a temperatura de 25 °C
influenciou positivamente a produção de biogás, possibilitando o aproveitamento energético da
vinhaça.
Estes resultados estão de acordo com Morell e colaboradores (2015) quem
avaliaram a influência da temperatura na produção de biogás proveniente da vinhaça de
destilaria de álcool, utilizando como inóculo efluente de suinocultura. Eles realizaram dois
ensaios com temperatura de 25 °C e 35 °C. A biodigestão foi favorecida sob a temperatura de
25 °C, alcançando-se volumes de biogás superiores aos obtidos sob a temperatura de 35 °C.
Speece (1996) considera a temperatura ótima na faixa de 25 a 30 ºC para processos mesofílicos.
 75

Tabela 7 – Dados obtidos nos ensaios da biodigestão de vinhaça de cachaça.

Massa de Volume de Composição do Biogás Percentual de

Diluição Temperatura pH DQO final
Ensaio Esterco ΔpH Gás CH4 CO2 NH3 H2S Remoção de
(%) (°C) Final (mg O2.L-1)
(g) (mL) (%) (%) (mL/m³) (mL/m³) DQO
1 25 5 25 5,91 ± 0,5 1,09 64,65 85 15 0,00 4,72 8.225 ± 944 74%
2 25 15 25 6,22 ± 0,5 0,78 347,90 87,5 12,5 0,00 7,18 5.833 ± 1.168 82%
3 50 5 25 6,19 ± 0,5 0,81 29,56 92,5 7,5 0,00 2,71 3.972 ± 118 87%
4 50 15 25 5,18 ± 0,5 1,82 261,08 95 5 24,23 3,60 3.877 ± 2017 88%
5 25 5 35 6,28 ± 0,5 0,72 2,08 95 5 69,44 0,54 6.513 ± 453 79%
6 25 15 35 7,02 ± 0,5 0,05 2,29 90 10 1,03 0,00 4.632 ± 12 85%
7 50 5 35 7,03 ± 0,5 0,03 18,47 95 5 34,08 0,00 4.424 ±756 86%
8 50 15 35 5,69 ± 0,5 1,31 123,15 95 5 17,23 0,00 4.228 ± 255 87%
9 0 10 30 6,38 ± 0,5 0,62 215,51 85 15 4,43 0,00 10.162,50 ± 1.500 68%
10 0 10 30 6,5 ± 0,5 0,50 73,89 90 10 0,00 0,00 18.893,75 ± 1.595 40%
11 0 10 30 5,56 ± 0,5 1,44 231,52 87,5 12,5 0,00 0,00 17.925,00 ± 1.480 43%

75
76

No presente experimento, as menores taxas de produção de biogás foram obtidas

nos ensaios realizados à 35 °C. De acordo Soares (1990), o grupo de bactérias metanogênicas
são os que mais sofrem com a influência da temperatura, pois apresentam um intervalo de
temperatura muito restrito de operação, podendo causar o aumento de ácidos voláteis em baixas
temperaturas, e, consequentemente, uma queda de pH.
Nota-se que nos ensaios 02 e 04, que foram conduzidos na temperatura de 25 °C, a
proporção maior de inóculo influenciou positivamente na produção de biogás. Enquanto que,
no ensaio 02, a proporção menor de diluição (25%) favoreceu ainda mais a produção de biogás,
atingindo um aumento de 25 % no volume de biogás gerado, se comparado com o ensaio 04.
No ensaio 2 foi utilizando 150 mL de vinhaça bruta, adicionado 50 mL de água
destilada, em reator com 250 mL de volume total. Dessa forma, para cada mL de vinhaça bruta
foi possível obter em torno de 0,036 g de biogás. Morell e colaboradores (2018), estudando a
influência da matéria prima na produção de biogás por diferentes tipos de vinhaça, obtiveram
um volume de biogás acumulado entre 127 mL e 200 mL nos ensaios utilizando a vinhaça de
cana de açúcar em reatores de 120 mL com 10 mL de inóculo de efluente de suinocultura.
Todos os processos de biodigestão da vinhaça foram iniciados com o pH
neutralizado, e todos sofreram uma redução de pH ao final do processo. De acordo a Tabela 7,
nota-se que essa redução variou entre 0,03 a 1,88 durante o período de incubação. Essa redução
no pH ocorre devido à produção de substâncias ácidas na fase acidogênica. Para Silva & Abud
(2016), essa produção de substâncias ácidas pode ser atribuída ao fato de que a vinhaça de cana
não contém matéria orgânica recalcitrante, como celulose, hemicelulose ou lignina, além,
também, de passar por temperaturas elevadas (104 - 107 °C) no processo de destilação.
Os ensaios 01, 04, 08 e 11 tiveram as maiores reduções do pH, atingindo os valores
finais de 5,91; 5,18; 5,69 e 5,56, respectivamente. O processo de biodigestão é severamente
inibido se o pH decresce para valores inferiores a 6,0 ou aumento acima de 8,5 (WEILAND,
2010). Segundo Deublein e Steinjauser (2011), quando o pH diminui, a produção de ácidos
orgânicos leva a uma futura redução do pH pelas bactérias hidrolíticas e pode causar a
interrupção do processo de fermentação (DEUBLEIN; STEINJAUSER, 2008).
De acordo com Aquino & Chernicharo (2005), em estudo que avaliaram causas e
estratégias de controle em reatores anaeróbios sob estresse, apontam que a inibição dos
microrganismos sintróficos pela acumulação de produtos acidogênicos levará a uma contínua
acumulação de ácidos graxos voláteis, o que contribuirá para a diminuição de alcalinidade e
decréscimo do pH. Essa redução do pH afetará principalmente o crescimento de
 77

microrganismos metanogênicos e sintróficos, compondo o problema de acumulação de ácidos

graxos voláteis e podendo levar à falha do processo.
As colunas de 08 a 11, da Tabela 7, apresenta a composição do biogás em relação
aos percentuais de metano e dióxido de carbono e as quantidades de amônia e ácido sulfídrico.
De acordo com Starr et al (2012), a proporção de cada gás na mistura do biogás depende de
vários parâmetros, como o tipo do biodigestor e o substrato utilizado, sendo basicamente
constituído de metano, dióxido de carbono, oxigênio, nitrogênio, água e ácido sulfídrico.
Segundo Drosg (2013), a composição do biogás é um parâmetro útil para o
monitoramento do processo. Uma diminuição no teor de metano pode ser um primeiro sinal de
sobrecarga orgânica. Do mesmo modo, um aumento súbito de H2S pode provocar instabilidade
do processo. Nos ensaios realizados, o conteúdo de CO2 variou entre 2,5% e 15%, indicando
um rendimento teórico de CH4 de 85 a 97,5% (Tabela 7). Segundo Silva & Abud (2016), essa
redução de CO2 poderia ser explicado pelo fato de que o gás carbônico é utilizado como um
substrato para a síntese de metano.
Nos ensaios 04, 05, 07 e 08, tiveram um rendimento teórico de metano de 95%, e o
ensaio 03 teve 92,5%; já os ensaios 06 e 10 tiveram 90%, os experimentos 02 e 11, 87,2% de
CH4 e os 01 e 09, 85% de CH4. Estes valores foram superiores aos obtidos por Rajendran et al.
(2012), Amon et al. (2007) e Bouallagui et al. (2004), que relataram um rendimento médio de
CH4 em processos de biodigestão anaeróbica de 55 - 70%. Nota-se que as variações na diluição
da vinhaça, quantidade de esterco e temperatura da biodigestão não houve diferença
significativa na composição de metano e dióxido de carbono do biogás gerado, mas sim no
volume do biogás.
A produção de biogás a partir da biodigestão em m3 DQO-1 depende da composição
do substrato. O valor calorífico do biogás varia, em torno de 22,5 a 25 MJ m³, assumindo o
metano com cerca de 35.800 kJ m³. Isso significa de 6,25 a 10 kWh m3. Portanto, a
potencialidade do biogás é melhor demonstrada quando este é tratado (remoção de CO2) e seu
poder calorífico pode atingir 60% do valor calorífico do gás natural (SALOMON, KARINA
RIBEIRO; LORA, 2009). Dessa forma, o biogás obtido apresenta alto poder calorífico devido
à sua alta concentração de metano.
Com relação aos componentes indesejáveis no biogás, todos os ensaios
apresentaram baixas concentrações de ácido sulfídrico (H2S) (inferiores a 10 ppmV), e amônia
(NH3) (inferiores a 70 ppmV), como pode ser visualizado na Tabela 7, colunas 10 e 11. As
baixas concentrações de gases não comburentes como o ácido sulfídrico, aumenta o potencial
energético do biogás, além de facilitar sua compressão e armazenagem.
78

O gás sulfídrico é produzido no processo de digestão anaeróbia através da quebra

de sais de e enxofre presentes na alimentação. A quantidade de H2S efluente dependerá da
composição afluente. Salomon & Lora (2005) relatam que a vinhaça de cana-de-açúcar pode
conter sulfato em níveis de 600 a 760 mg L-1 SO4. Segundo Kaltschmitt & Streicher (2009), a
composição média de ácido sulfídrico no biogás varia de 20 a 20000 ppm.
Traços de gás sulfídrico foi detectado no biogás produzidos nos ensaios 01 ao 05,
respectivamente, 4,72; 7,18; 2,71; 3,60 e 0,54 ml m-3 (ppmV). Estes baixos valores são
favoráveis, pois segundo Salomon (2007), o H2S, além de ser perigoso ao ambiente por
apresentar características tóxicas e corrosivas, pode inibir o processo de biodigestão anaeróbia.
Observa-se que o ácido sulfídrico teve maior ocorrência nos ensaios mantidos na
temperatura de 25 °C; isso pode indicar que essa temperatura propiciou a presença de os
microrganismos produtores de sulfetos. Por outro lado Park et al (2002), utilizando
microrganismo na biofiltração, constatou que o desempenho máximo da atividade de remoção
do H2S no biogás foi atingida em temperaturas entre 30 e 35 °C. Janke e colaboradores (2015)
descrevem que a co-digestão da vinhaça com resíduos ricos em lignina e celulose, como é o
caso do bagaço, pode acarretar na produção em excesso de ácido sulfídrico.
Em geral, a produção de H2S em sistemas anaeróbios tratando água residuária é um
processo considerado indesejado, dado que sua produção causa uma série de problemas, como
toxicidade, corrosão, emissão de compostos odorantes, aumento da DQO no efluente líquido,
bem como redução da qualidade e quantidade de biogás.
No biogás gerado neste experimento, houve a presença de amônia nos ensaios 04
ao 09, com concentração variando entre 1.03 a 69,44 ppmV. Estes ensaios, com exceção do
ensaio 04, foram mantidos na temperatura de 35 ºC, O aumento da temperatura pode ter
contribuído para o aumento da concentração de amônia no biogás, e, consequentemente,
contribuído para a baixa taxa de produção de biogás neste ensaios. O ensaio 5 foi o que
apresentou maior concentração de NH3 e, logo, a menor produção de biogás, 2,08 mL. A amônia
é produzida pela degradação biológica da matéria nitrogenada, principalmente na forma de
proteínas e ureia (KAYHANIAN, 1999). Entre os quatro tipos de microrganismos anaeróbios,
os metanogênicos são os menos tolerantes e os mais prováveis de cessar o crescimento devido
à inibição da amônia (KAYHANIAN, 1994). Com o aumento do pH ou da temperatura, a
porcentagem de nitrogênio amoniacal apresenta amônia livre (NH3(aq)). A amônia livre é
considerada a principal causa de inibição, uma vez que passa livremente através da membrana
celular dos microrganismos (CHEN, Y.; CHENG; CREAMER, 2008b).
 79

Segundo Kabdasli et al. (2000), para remover a amônia do substrato, dois métodos
físico-químicos podem ser utilizados: remoção de ar e precipitação química. Ambos provaram
ser tecnicamente viáveis em altas concentrações de amônia e em uma complexa matriz de
efluentes. Uma abordagem comum à inibição da amônia depende da diluição do esterco a um
nível total de sólidos de 0,5 a 3,0%. No entanto, o aumento resultante no volume de resíduos
que deve ser processado torna este método economicamente pouco atraente (CALLAGHAN et
al., 2002).
Na Tabela 7, os valores de demanda química de oxigênio ao final da biodigestão e
o percentual de remoção de DQO são apresentados nas colunas 12 e 13. A demanda química
de oxigênio nos 11 ensaios foram, respectivamente, 8.225, 5.833, 3.972, 3.877, 6.513, 4.632,
4.424, 4.228, 10.162, 18.893 e 17.925 mg O2 L-1.
A vinhaça de cachaça in natura apresentou uma DQO de 31.559 mg O2 L-1. Este
valor está de acordo com os estudos de Rossette (1987), na qual relata que a DQO da vinhaça
pode variar de 20.000 a 35.000 mg O2 L-1. Segundo Lyra et al. (2003), a Demanda Química de
Oxigênio do resíduo in natura da vinhaça para o uso em fertirrigação apresentou um valor de
21.000 mg O2 L-1 em seus estudos. Estes altos valores de DQO prejudica o crescimento das
plantas, especialmente em solos pobres.
O Gráfico 5 apresenta os valores da DQO na vinhaça bruta, ou seja, antes do
processo de biodigestão e após a biodigestão, vinhaça tratada.

Gráfico 5 – Comparação da DQO da vinhaça bruta e vinhaça tratada

35000 31.559,38

30000
DQO (mg O2.L-1)

25000
20000 15.660,42

15000
8.225,00
10000 5.833,75 6.513,75
3.972,50 3.877,50 4.632,50 4.424,38 4.228,75
5000
0

Na digestão anaeróbia, o material orgânico que é representado pelo valor da DQO

foi convertido em biogás. Dessa maneira, a matéria orgânica do substrato foi decomposta por
microrganismos durante o processo de fermentação no digestor. O valor da percentagem de
80

decomposição da DQO é chamado de remoção de DQO (TUNES, 2017). De acordo com as

verificações, pode-se observar na Tabela 7 e no Gráfico 5 que foram obtidas eficiências de
remoção de DQO de 74, 82, 87, 88, 79, 85, 86, 87, 68, 40 e 43% nos onze ensaios,
respectivamente. Nota-se, ainda, que os menores valores de remoção foram obtidos nos pontos
centrais, uma média de 50%. Nestes ensaios a vinhaça foi utilizada sem diluição, ou seja, in
natura. Por outro lado, as melhores remoções da DQO foram alcançadas nos ensaios 03, 04, 07
e 08, onde a biodigestão foi realizada utilizando uma diluição de 50% na vinhaça. Logo,
verifica-se que a diluição do substrato foi um fator que contribuiu positivamente para a
degradação da matéria orgânica pelos microrganismo envolvidos no processo de biodigestão.
Conforme Rabelo (2010), a elevada remoção se deu devido à produção de gás, ou
seja, grande parte da matéria orgânica presente nestes reatores foi consumida. Neste estudo, a
eficiência de remoção de DQO nos ensaios variou de 40 a 89%, tendo uma média de 74% de
redução da DQO. A diminuição deste parâmetro também é relatada por outros autores.
Valores de remoção de DQO muito próximos aos obtidos neste estudo foram
obtidos por Pompermayer e Junior (2000) ao avaliar a biodigestão da vinhaça, onde
conseguiram taxas de remoção de DQO de 72%. Já Tian et al. (2013) produziram biogás
utilizando somente vinhaça como substrato, alcançaram taxas de remoção de DQO de 80 %.
Pugliano e colaboradores (2014), utilizando reatores UASB para biodigestão de
vinhaça, operando na faixa de temperatura mesofílica, alcançaram eficiência de remoção de
DQO de 54 a 60 %. Já Silva & Abud (2016), também no tratamento de vinhaça, obtiveram
redução de DQO e teores sólidos totais de 54 a 83% e 52 a 87%, respectivamente, com tempo
de retenção hidráulico de 23 dias. Tunes (2017), utilizando um reator UASB para tratamentos
de efluentes orgânicos, apresentou eficiência de remoção de DQO de 71% para carga orgânica
volumétrica.
Segundo Wilkie, Riedesel e Owens (2000), é possível obter uma eficiência de
remoção de DQO superior a 70% com a digestão mesofílica, bem como um rendimento médio
de metano superior a 0,25 m3 /kg DQO. Santos e colaboradores (2018) estudaram a produção
de biogás em reator UASB em série tratando vinhaça suplementada com a torta de filtro, e
foram obtidas eficiências de remoção de DQO de até 41%.
Dessa forma, a biodigestão anaeróbica da vinhaça mostrou-se uma eficiente
alternativa para tratamento do resíduo, além do sub-aproveitamento do biogás. O biogás gerado
a partir da biodigestão anaeróbia da vinhaça pode ser usado na queima direta do metano para
 81

substituir o gás de cozinha ou para geração de calor e eletricidade nas propriedades rurais
produtoras de cachaça artesanal.

6.4 Otimização da produção de biogás

Com a realização dos ensaios, foi possível observar que os ensaios que obtiveram
uma maior produção de biogás foram os ensaios 02 e 04, respectivamente, com 347,90 e 261,08
mL de biogás formado num período de 25 dias. Ambos possuíam um inóculo com concentração
de 300 g.L-1 de esterco bovino. Entretanto, faz-se necessário otimizar o processo para encontrar
as melhores condições para a biodigestão de vinhaça de cachaça de acordo com um estudo
matemático, ou seja, qual os melhores valores das variáveis estudadas: concentração de inóculo.
Otimizar significa encontrar os valores das variáveis que irão produzir a melhor
resposta desejada, isto é, encontrar a região ótima na superfície definida pelos fatores. Isso
indicará com quais os valores de variáveis irá se obter o melhor desempenho na produção de
biogás. Para o otimização do experimento, fez-se o gráfico de superfície 3D e 2D, no software
Estática, Figuras 11 e 12.
Os gráficos de superfície foram construídos relacionando a correção da diluição da
vinhaça e concentração de inóculo na produção de biogás para uma temperatura de 25 °C (ponto
central). Nota-se que o área vermelha é onde teremos o maior volume de biogás, região dos
valores críticos. Dessa forma, de acordo o modelo proposto, na região vermelho escuro, estará
localizado o ponto ótimo para a biodigestão da vinhaça para se alcançar o maior volume de
biogás, que é na faixa de 22 a 33 % de concentração de inóculo e sem diluição da vinhaça.
A equação (8) representa o modelo matemático do modelo proposto, onde Z é o
volume de biogás, x a concentração de inoculo, e y a diluição da vinhaça. Os coeficientes
detalhado deste modelo está demonstrado no Anexo I.

𝒁(𝒙,𝒚) = 𝟏𝟓𝟏, 𝟓𝟐𝟑 + 𝟔𝟓, 𝟖𝟎𝒙 − 𝟎, 𝟕𝟑𝟐𝒙𝟐 − 𝟏𝟔, 𝟒𝟓𝟏𝒚 − 𝟏, 𝟎𝟐 × 𝟐𝟓𝒙 + 𝟎, 𝟎𝟓𝟐𝟕𝒙𝒚 + 𝟎, 𝟓𝟏𝟖 × 𝟐𝟓𝒚 − 𝟑𝟐𝟏, 𝟖𝟒 (8)
82

Figura 11 – Gráfico de Superfície 3D

Figura 12 – Gráfico de Superfície 2D

 83

A Figura 13 apresenta o gráfico dos valores previstos e obtidos, dado uma resposta
se o modelo está bem calibrado. A linha vermelha representa a equação do modelo matemático
do experimento, e os pontos azuis são os resultados obtidos. Logo, quando mais próximo estes
pontos azuis estiverem da linha vermelha, mais eficiente é esse modelo. Pelo gráfico, nota-se
que o modelo obtido foi bem preditivo, o que demostra sua confiabilidade.

Figura 13 – Gráfico dos valores preditos e observados

Obs erved vs . Predic ted Values
3 fac tors , 1 Bloc ks , 11 Runs ; MS Pure Error=7526,9
DV: Volume de Gás (mL)
400

350

300

250
Predicted Values

200

150

100

50

-50

-100
-50 0 50 100 150 200 250 300 350 400
Obs erved Values

6.5 II Estágio: Ensaios da Biodigestão no biorreator anaeróbico

Os resultados da caracterização físico-química da vinhaça e dos produtos da

biodigestão estão apresentados na Tabela 8.

Tabela 8 – Caracterização físico-química

Características Vinhaça Bruta Ensaio 01b* Ensaio 02b*
pH 3,7 ± 0,00 4,85 ± 0,00 6,15 ± 0,00
Umidade (%) 95,75 ± 0,41 98,89 ± 0,40 99,12 ± 0,01
Matéria Seca (%) 4,25 ± 0,41 1,10 ± 0,40 0,87 ± 0,01
Cinzas (%) 25,33 ± 3,38 38,06 ± 0,65 39,78 ± 2,66
-1
ST (g L ) 31,57 ± 1.78 6,83 ± 2,53 5,23 ± 0,21
STF (g L-1) 10,14 ± 1,34 4,19 ± 1,52 3,46 ± 0,25
-1
STV (g L ) 21,43 ± 0,44 2,64 ± 1,01 1,77 ± 0,23
DQO (mg O2.L-1) 31559 ± 1179 4665 ± 815 4012 ± 296
* Dados do subproduto da biodigestão da vinhaça.

Neste experimento, vinhaça bruta utilizada apresentou pH de 3,7. O processo de

biodigestão foi iniciado com pH 7. Ao final, se obteve um pH de 4,85 no ensaio 01b e 6,15 no
84

ensaio 02b. O não controle do pH no ensaio 01b, resultando numa diminuição de 30% deste
durante o período de incubação, pode ter ocasionado a baixa produção de biogás no
experimento. O processo de biodigestão é severamente inibido se o pH decresce para valores
inferiores a 6,0.
Conforme observado na Tabela 8, a vinhaça utilizada nessa fase do estudo e os
subprodutos dos ensaios 01b e 02b apresentaram um percentual de umidade, respectivamente,
de 95,75; 98,89 e 99,12%. E um percentual de matéria seca de 4,25; 1,1% e 0,87%,
respectivamente. Esse aumento da umidade nos subprodutos dos ensaios ocorreu devido a
diluição da vinhaça.
Após o processo de biodigestão anaeróbia da vinhaça, houve redução considerável
da DQO e elevação do pH final do subproduto. No ensaio 01b, a diminuição na DQO foi de
85,21% e no ensaio 02b foi 87,28%. Esse fato se deve a conversão da matéria orgânica em
biogás. Essa conversão da matéria orgânica pode ser observada, também, na redução do
conteúdo dos sólidos voláteis. A vinhaça bruta apresentou 21,43 g L-1 de SVT, já os subprodutos
dos ensaios 01b e 02b tiveram, respectivamente, 2,64 e 1,77 g L-1 de SVT. Os sólidos voláteis
representam a quantidade de sólidos orgânicos presentes na amostra. Logo, quanto maior for o
conteúdo de sólidos voláteis, maior será a produção de biogás. O ensaio 02b teve uma maior
redução dos sólidos orgânicos, cerca de 91%, e, consequentemente, este ensaio teve uma maior
produção de biogás, se comparado com o ensaio 01b.
O Gráfico 06 apresenta a produção do biogás ao longo do período de incubação nos
ensaios 01b e 02b.

Gráfico 6 – Produção de Biogás

10000
Volume de biogás (ml)

1000

100

10
ensaio 1
ensaio 2
1
0 5 10 15 20 25 30
Tempo (dias)
 85

Fazendo uma análise comparativa dos ensaios 01b e 02b, pode-se verificar que, ao
ser realizar o controle do pH e aumentar a temperatura média em 6 °C, houve um aumento em
29 vezes no volume de biogás produzido entre um ensaio e outro. Isso comprova que o controle
de pH influencia positivamente no processo de biodigestão, sendo está variável relevante na
manutenção da produtividade de biogás. Dessa forma, o controle do pH foi importante para o
aumento da produtividade de biogás, bem como, a temperatura ambiente influenciou no
resultado, uma vez que os microrganismos apresentam parâmetros ótimos para o crescimento.
Em termos de aplicabilidade, devido ao baixo custo e facilidade de realização, o
controle do pH pode ser melhor estudado e adaptado ao sistema de biodigestão em larga escala,
bem como a temperatura, e assim viabilizar o tratamento da vinhaça pelos pequenos produtores
de cachaça, destinando de forma sustentável os resíduos da produção.
A Tabela 9 apresenta as configurações do processo e composição do biogás gerado
nos dois ensaios realizados no biorreator automatizado.

Tabela 9 - Resultados da produção e composição do biogás

Parâmetros Ensaio 01b Ensaio 02b
Volume de Vinhaça (L) 2 2
Diluição 50% 50%
Inoculo (g L-1) 60 60
pH Não controlado Controlado (7)
Temperatura (°C) 20 26
Volume de gás produzido (mL) 42 1245
CH4 (%) 87,5 95
CO2 (%) 12,5 5
NH3 (ppmV) 33,4 11,65
H2S (ppmV) 9,84 2,07

Ao final do período de incubação, no ensaio 01b foi obtido 42 mL de biogás,

composto por, aproximadamente, 12,5% de CO2, 87,5% de CH4, 33,4 ppmV de NH3 e 9,84
ppmV de H2S4. Já no segundo ensaio (02b), obteve-se 1245 mL de biogás com 95% de CH4,
5% de CO2, 11,65 ppmV de NH3 e 2,07 ppmV de H2S4.
86

6.6 Análises Quimiométricas

Os gráficos demonstrados na Figura 14 apresentam a correlação do volume de

biogás gerado com o percentual de CH4 na composição do biogás. O gráfico dos scores das
duas primeiras componentes principais explica a variância total dos dados, sendo que 100% é
explicada por PC1. Ao fazer um agrupamento dos ensaios no gráfico dos scores, observa-se
que os ensaios 02 e 04 foram agrupados juntos, confirmando a aproximação de ambos, sendo o
volume de biogás o fator de maior peso em PC1, o que pode ser observado pelo gráfico dos
loadings.

Figura 14 - Gráfico dos scores e loadings das duas primeiras componentes principais
 87

Na análise de componente principal (PCA) avaliando a correlação do volume

biogás gerado com a DQO, Figura 15, a PC1 foi responsável por explicar 100% da variação
dos dados, formando três agrupamentos, contendo os ensaios 01, 03, 05, 06, 07 e 10 em um
grupo; o segundo agrupou os ensaios 02 e 04, e o ultimo, os ensaios 08, 09 e 10. Os grupos com
coloração vermelha e verde estão contribuindo negativamente em PC2. O gráfico de Loadings,
dos pesos para PC1 e PC2, mostrado no segundo gráfico desta figura, indica que a DQO é o
principal fator de peso na variância em PC1.

Figura 15 - Gráfico dos scores e loadings das duas primeiras componentes principais
88

Com os resultados obtidos nesse trabalho, observa-se que os ensaios 02 e 04, que
tiveram a melhor produção de biogás, apresentaram aproximação na influência das variáveis
estudadas. No entanto, são necessários estudos mais aprofundados que levem em consideração
a variação de outros parâmetros para identificação daqueles paramentos que possuem influência
direta na produção de biogás.

6.7 III Estágio: Construção do biodigestor

O desenvolvimento do biodigestor para tratamento de vinhaça de cachaça é uma

tecnologia que contribui para criar possibilidades de permanência de trabalhadores no meio
rural, propiciando um melhor aproveitamento e tratamento dos resíduos, além de contribuir com
desenvolvimento sustentável.
Em relação ao uso do biodigestor desenvolvido para ser empregado nas unidades
produtoras de cachaça artesanal, ainda está em fase de validação, pois existem muitas melhorias
e modificações à se fazer, como por exemplo, instalar um coletor de amostra e adaptar uma
entrada para correção do pH durante o período de incubação, sem interromper o processo.
O biodigestor construído possui muitas vantagens, entre as quais, resumidamente,
destacam-se a fácil aquisição, baixo custo, fácil manuseio e versatilidade. O emprego deste nas
propriedades rurais produtoras de cachaça para geração de biogás e/ou eletricidade é uma forma
de incluí os produtores no meio tecnológico, favorecendo assim, os que muitas vezes estão à
margem dos benefícios do desenvolvimento científico e tecnológico.
 89

7 CONSIDERAÇÕES FINAIS

As aplicações de novas fontes de tecnologias para produção de energia renovável,

combinadas com fontes de energia convencionais, no caso da produção de bioetanol,
desempenham um papel crucial no processamento de biomassa para geração de bioenergia.
Dessa forma, a utilização da vinhaça provinda da fabricação de cachaça artesanal, matéria-
prima consideradas desperdício, resíduo, se mostrou eficiente para a produção de biogás e no
tratamento da vinhaça.
A vinhaça de cachaça artesanal foi biodigerida em condições anaeróbicas mesófilas
com redução de DQO. Os ensaios que obtiveram uma maior produção de biogás foram os
ensaios 02 e 04, respectivamente, com 347,90 e 261,08 mL de biogás formado num período de
25 dias; ambos possuíam um inóculo com concentração de 300 g.L-1 de esterco bovino. Dessa
forma, as melhores condições operacionais para a biodigestão foram a temperatura de 25 °C,
concentração de inóculo de 300 g.L-1 com 50% de diluição da vinhaça e pH de 6 a 7, pois
apresentou maior produção de biogás e melhor estabilidade do processo.
Quanto à remoção de carga orgânica, os ensaios mostraram-se uma boa alternativa
para o tratamento e disposição da vinhaça, visto que a eficiente redução de carga orgânica na
vinhaça biodigerida, a média em torno de 74%, evidencia a transformação desta matéria
orgânica em biogás. Estas descobertas enfatizam o uso promissor da vinhaça de cachaça
biodigerida como biofertilizante para aplicações agrícolas, sem contaminar o solo.
O biogás obtido nesse trabalho apresentou, em sua composição, uma média de 90%
de metano e 10% de CO2. Este biogás pode ser usado na própria fábrica de produção de cachaça
para suprir suas próprias demandas de energia elétrica, ou realizar a queima do metano para
gerar calor nos estágios de fermentação ou destilação, como por exemplo, aquecer o mosto e
destilar a cachaça, ou até mesmo, para manter o biodigestor aquecido (no caso de optar por
aquecer o biodigestor ao longo do processo). Além disso, existe a possibilidade de vender o
excedente de energia elétrica para concessionárias de energia.
Em todos os ensaios, o biogás produzido apresentou baixas concentrações de gases
não comburentes como o ácido sulfídrico e amônia. Isso aumenta o potencial energético do
biogás, além de facilitar sua compressão e armazenagem.
90

Na etapa de otimização da produção de biogás, apontou maior viabilidade em se

realizar a biodigestão da vinhaça com as seguintes condições operacionais: temperatura de 25
°C, sem diluição da vinhaça e com 22 a 33 % v/v de concentração de inóculo.
Durante o período de incubação, notou-se a mudança de coloração do meio
conforme ocorria uma redução de pH e a degradação da matéria orgânica. Tal fato, carece de
mais estudos para, se possível, futuramente desenvolver uma escala de cores relacionando a
tonalidade do substrato com a degradação da matéria orgânica e redução da DQO. Esta tabela
de cores poderia auxiliar os produtores na condução do processo de biodigestão da vinhaça.
O biodigestor construído, como se viu, tem muitas vantagens, entre quais,
destacam-se a fácil aquisição, baixo custo, fácil manuseio e versatilidade, pois no período da
entressafra da produção da bebida, os produtores podem utilizá-lo com outro substrato, tais
como, resto alimentares, estrume bovino ou suíno, etc.
As vantagens da digestão anaeróbica da vinhaça são inúmeras, conforme
apresentado neste estudo, e a produção do biogás e/ou metano pode ser usado como fonte de
energia. Este estudo se adéqua no conceito de biorrefinaria, integrando a produção de cachaça
artesanal, a recuperação de energia e o uso de efluente tratado na fertirrigação de plantações de
cana-de-açúcar, se tornando uma atraente alternativa para os produtores de cachaça artesanal.
 91

8 PERSPECTIVAS FUTURAS

O processo de biodigestão da vinhaça provinda da fabricação cachaça artesanal,

para a produção de biogás e tratamento deste subproduto industrial, apresentado nesta
dissertação deu apenas os seus primeiros passos, com a demonstração de suas etapas e da
qualidade do biogás final.
Em relação aos estudos fundamentais, é necessário compreender melhor e modelar
o processo de biodigestão, tanto na vertente de bioquímica como microbiológica. É necessário
realizar um estudo microbiológico mais aprofundado, com intuito de identificar e caracterizar
os microrganismos envolvidos no processo, bem como a microbiota presente no inóculo de
estrume bovino.
Ainda, relativamente ao processo de biodigestão, é necessário realizar mais estudos
de outros tipos de inóculos e sua eficiência, como por exemplo dejetos suínos e lodo de estação
de tratamentos de esgotos. Bem como, estudar novos parâmetros operacionais que permitam
um melhor rendimento de biogás, como por exemplo o uso de tampões para manutenção do pH
do sistema, entre outros.
Em relação ao biodigestor projetado e construído para ser empregado nas unidades
produtoras de cachaça artesanal, existem muitas melhorias e modificações à se fazer, sobretudo
na perspectiva de torná-lo mais adaptável as rotinas de um processo de digestão, com por
exemplo instalar um coletor de amostra e adaptar uma entrada para a manutenção e correção do
pH durante o período de incubação, sem interromper o processo. Instalar um sistema de
visualização do meio para análise colorimétrica da biodigestão.
Dessa forma, este estudo demonstra uma alternativa para se integrar a produção de
cachaça com geração de energia, aumento a renda dos produtores e preservação o meio
ambiente.
Por fim, exterioriza a esperança de que este trabalho possa cumprir sua missão e
seus objetivos, vindo a tornar-se um guia de orientação e consulta a ser utilizado por
pesquisadores e pelos produtores de cachaça artesanal. Estes que, frequentemente, se deparam
com a difícil tarefa de produzir uma bebida de qualidade, mantendo as tradições e fazendo o
manejo adequado dos seus resíduos.
Quanto a mim, é com muito orgulho que participei no nascimento deste projeto e
dele fiz parte durante 4 anos.
 93

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 105

ANEXO I

Dados
Regr. Coefficients;
Var.: Volume de Gás (mL)
R-sqr = 0,87482;
Adj:,58274 (analise 1)
3 fatores, 1 Bloco, 11 amostras;
MS Residual=6034,446
Variável dependente: Volume de Gás (mL)

Tabela 10 – Coeficiente do modelo estático

Coef. -95,% +95,%

Fatores Std.Err. t(3) p
Regres. Cnf.Limt Cnf.Limt
Mean/Interc. 151,5231 741,0362 0,20447 0,851069 -2206,78 2509,831
(1) Concentração de Inóculo (%)(L) 65,8062 43,3094 1,51944 0,225968 -72,02 203,636
Concentração de Inóculo (%)(Q) -0,7324 0,9775 -0,74932 0,508070 -3,84 2,378
(2) Temperatura (ºC)(L) -12,8737 20,5526 -0,62638 0,575490 -78,28 52,534
(3) Diluição da vinhaça (%)(L) -16,4518 14,0688 -1,16938 0,326709 -61,22 28,321
1L by 2L -1,0247 0,5493 -1,86548 0,158963 -2,77 0,723
1L by 3L 0,0527 0,2197 0,24007 0,825747 -0,65 0,752
2L by 3L 0,5183 0,4394 1,17956 0,323199 -0,88 1,917

ANOVA
Fator SS df MS F p
(1) Concentração de Inóculo (%)(L) 20086,8 1 20086,83 3,328694 0,165580
Concentração de Inóculo (%)(Q) 3388,2 1 3388,21 0,561478 0,508070
(2) Temperatura (ºC)(L) 41653,5 1 41653,53 6,902627 0,078508
(3) Diluição da vinhaça (%)(L) 29,4 1 29,38 0,004869 0,948762
1L by 2L 21000,1 1 21000,08 3,480034 0,158963
1L by 3L 347,8 1 347,78 0,057632 0,825747
2L by 3L 8396,1 1 8396,07 1,391357 0,323199
Error 18103,3 3 6034,45
Total SS 144622,0 10