FD - Determinarea Titrului Proteic Al Proteinelor Din Lapte
FD - Determinarea Titrului Proteic Al Proteinelor Din Lapte
FD - Determinarea Titrului Proteic Al Proteinelor Din Lapte
Principiul metodei
Grupele aminice libere ale proteinelor (-NH2) reacţionează cu formaldehida
formând grupări (N=CH2) caracteristice bazelor Schiff în care bazicitatea grupei
amino este mult atenuată. În acest fel aciditatea datorată grupărilor carboxilice (-
COOH) se poate măsura prin titrare cu soluţie de hidroxid de sodiu şi se poate corela
cu conţinutul de proteine prin înmulţirea cu un factor empiric. Reacţiile chimice sunt
următoarele:
NH2 N CH2
R CH + HCHO R CH + H2O
COOH COOH
N CH2
R CH N CH2
+ NaOH R CH + H2O
COOH COONa
Reactivi şi ustensile
-NaOH 0,143 N;
-aldehidă formică, soluţie 40%, proaspăt preparată, neutralizată cu soluţie
NaOH 0,1 N în prezenţa fenolftaleinei ca indicator;
-oxalat de potasiu, soluţie 28 %;
-sulfat de cobalt (CoSO4·7 H2O), soluţie 5%;
-fenolftaleină, soluţie alcoolică 2%.
Ustensile şi aparate
-pahare Erlenmeyer;
-pipete gradate;
-microbiuretă.
Modul de lucru
1. Pregătirea probei de comparaţie
Într-un pahar Erlenmeyer de 100 ml se introduc 25 ml lapte, 1 ml soluţie de
oxalat de potasiu 28 % şi 0,5 ml soluţie de sulfat de cobalt 5 %.
Se omogenizează bine conţinutul paharului. Amestecul din pahar prezintă o
coloraţie roz, stabilă care constituie proba de comparaţie.
3. Calculul rezultatelor
Volumul soluţiei de soluţie de NaOH 0,143 N, în ml folosit la a doua titrare
reprezintă conţinutul procentual de proteină al probei de lapte supusă titrării (titrul
proteic).
Titrul proteic =V ,
unde V este volumul de soluţie NaOH 0,143N (în ml) folosit la a doua titrare.
Rezultatul se exprimă prin media a două determinări efectuate pe aceeaşi probă.
Această metodă de determinare a conţinutului de proteine este rapidă, putând fi
efectuată în 5-10 minute spre deosebire de metoda Kjeldahl care necesită 5 ore.
Dar, metoda se poate folosi doar orientativ deoarece prin adaosul de aldehidă
formică se blochează doar grupele amino terminale ale ale proteinelor, iar structura
acestora variază în funcţie de sezon, de perioada de lactaţie sau de natura furajării.
4. Interpretarea rezultatelor
Titrul proteic al laptelui de vacă are o valoare medie de 3,4%. Se consideră că
valoarea minimă este de 3,2% pentru laptele de vacă, 4,5% pentru laptele de bivoliţă
şi de 5% pentru laptele de oaie.