Location via proxy:   [ UP ]  
[Report a bug]   [Manage cookies]                

Easicult Combi 37335-23

Download as pdf or txt
Download as pdf or txt
You are on page 1of 6

37335-23

Easicult® Combi Instructions for use ● English

Intended use 5 Incubate the slide at 27…30°C (80…86°F) for 24–48 hours
Easicult Combi slides are intended for monitoring of microbial for detection of bacteria. Yeasts and moulds need three days’
contamination in various industrial environments. The test can incubation before the result can be read. If the incubation is
be performed on-site, or the slides can be used as convenient carried out at room temperature, the incubation times are
transport media for samples. 2–4 days and 4–7 days, respectively.
The slide is covered on one side with TTC Agar (yellowish), If the normal temperature for the fluid tested differs
which supports growth of most common bacteria, and on the substantially from the above incubation temperatures, it may
other side with Rose-Bengal Agar (pink), which supports growth result in slow growth of bacteria. An incubation temperature
of fungi. closer to the normal temperature of the fluid is then
The main significance of the test is that elevation of total recommended.
microbial counts can be detected.
Interpretation of results (Fig. 6)
Contents of the kit Cautiously remove the slide from its tube after incubation and
determine the microbial count (number of colony forming units,
Easicult Combi Cat. Nos. 67987, 05984
CFU) by comparing the density of growth on the slide with the
Test slides 10 pcs model chart. Note the separate model charts for TTC and Rose-
Labels 10 pcs Bengal.
Instructions for use 1 pc If the sample was diluted, the dilution factor must be taken
into account in the evaluation. For example, if a dilution of
Typical formulation 1 + 100 ml (1 ml of sample in 100 ml of water) shows a density
of 106 CFU/ml, the actual result for the sample is 108 CFU/ml.
TTC Agar Rose-Bengal Agar
Tryptone Peptone Rose-Bengal medium, determination of fungi
Soy peptone Dextrose Growth on Rose-Bengal Agar may consist exclusively of either
Disodium succinate Potassium hydrogen phosphate yeasts or moulds, or mixed growth of both. Mould colonies are
TTC solution Magnesium sulphate soft and fluffy and usually pale, green or black in colour. Yeasts
Agar-agar Sodium chloride usually grow in dome-shaped colonies but may sometimes be
Water Rose Bengal flat and dry. Since mould colonies may originate from fragments
Sodium hydroxide of mycelium or from individual spores, the model chart is not
Gentamycin sulphate quantitative. The chart indicates whether the contamination
Chloramphenicol is slight (+), moderate (++) or heavy (+++). Colonies can be
Agar-agar removed from the slides and examined under microscope if
Water needed. Fungal contamination is sometimes apparent to the
naked eye as a coating on the fluid surface.
Warnings and precautions
Do not use the product beyond the expiry date marked on the TTC Agar, determination of total bacterial count
kit. Most aerobic bacteria grow on TTC Agar as red colonies. Moulds
Do not touch the unused growth media. and yeasts may also grow slowly on this medium. Even though
Do not use the slide if you notice the bacterial growth is almost always in the form of red colonies,
● discoloration or dehydration of the growth medium any colourless colonies should also be taken into account when
● detachment of the growth media from the plastic slide the density is estimated. In cases where large colonies are
● evidence of microbial growth. present, it should be borne in mind that colony density, not the
Because any growth on the Easicult Combi slide may be size of individual colonies, should be considered.
pathogenic, do not touch the used slide. If the bacterial count is very high (more than 107 CFU/ml),
the growth is confluent. This can appear as a uniformly red
Storage surface layer. Very rarely there is totally colourless growth. It
Store Easicult Combi at room temperature (approx. 20°C/68°F) is advisable to compare slides exhibiting an apparently uniform
protected from draught, temperature fluctuations and light surface with an unused slide to avoid misinterpretation.
sources. Avoid storage near heat-generating appliances. Do not As no universally applicable limits exist, limit values have to
allow to freeze. The expiry date (year-month-date) is marked on be determined by experience. For bacterial contamination in
the box and on the cap of each slide. coolants, the following guide may be used:

Sampling and procedure (Fig. 1–5) Bacteria


To avoid contamination, the growth medium should not come CFU/ml Contamination
into contact with any other material than the one to be tested.
< 104 slight usually no problems1
On the other hand, it is important that the growth medium
104 – 106 moderate
makes full contact with the material to be tested.
> 106 heavy not acceptable1
Viscose fluids and fluids with high bacterial content Limitations of the method
(>107 CFU/ml) If the bacterial count exceeds 107 CFU/ml, or the viscosity is
If the viscosity or bacterial content of the sample is high, the high, the sample should be diluted.
sample should be diluted. For dilution, put 100 or 1000 ml of Very rarely the bacteria grow on the TTC medium as colourless
drinkable tap water in a clean, well-rinsed and dried bottle with colonies.
a cap. The bacterial content of the water for dilution should not The reliable lower detection limit for bacteria is 103 CFU/ml.
exceed 100 CFU/ml. Before filling the bottle, let the water run The growth of some coccoid bacteria may be weakened by
for 5 minutes or boil it for 15 minutes and then let it cool. Using TTC.
a clean (disposable) pipette, add 1 ml of sample to the bottle.
Close and mix thoroughly by shaking the bottle about 30 times. Disposal
Dip the slide in the dilution and proceed as described for fluid Any growth on slides may be pathogenic. Used slides must
samples. therefore be disposed of by burning or, after opening the tube,
either by autoclaving (a pressure cooker can be used for this)
Fluid samples or immersing in a disinfectant overnight, always following local
1 Unscrew the tube and withdraw the slide without touching laws and regulations.
the agar surfaces.
2 Dip the slide in the liquid. Alternatively, wet the slide under a
running stream of the liquid or spray the liquid on the slide.
If the liquid is under pressure, the slide must be handled
carefully to avoid unfastening of the agar. If the sample is in
a container, mix the contents and dip the slide in it.
Both agar sides should get completely wet. The slide must
be in contact with the fluid for 5 to 10 seconds.
3 Allow excess fluid to drain off the slide. Blot the last drops
from the lower end of the slide on absorbent paper.
4 After sampling, screw the slide tightly back into the tube. Fill
in the label and affix it to the tube. Distributed in the USA:

LifeSign LLC
85 Orchard Road
Skillman, NJ 08558 USA
Tel: 800-526-2125
Fax: 732-246-0570
www.lifesignmed.com

Easicult® Combi Gebrauchsanleitung ● Deutsch

Verwendungszweck 5 Die Nährbodenträger bei 27…30°C für 24–48 Stunden für


Easicult Combi Keimindikatoren sind für das Monitoring von den Nachweis von Bakterien inkubieren. Hefen und Pilze
mikrobieller Kontamination in unterschiedlichen industriellen benötigen drei Tage Inkubationszeit, bevor die Auswertung
Umgebungen bestimmt. Easicult Combi ermöglicht eine erfolgen kann. Erfolgt die Inkubation bei Raumtemperatur,
einfache Probennahme vor Ort. Die wieder verschlossenen beträgt die Inkubationszeit 2–4 Tage, respektive 4–7 Tage.
Keimindikatoren sind ein praktisches Transportmedium für die Wenn die normale Temperatur der zu testenden Flüssigkeit
gezogenen Proben. deutlich von der angegebenen Inkubationstemperatur
Der Keimindikator ist auf einer Seite mit TTC-Agar (gelblich) abweicht, kann es zu einem verlangsamten Wachstum
beschichtet, der das Wachstum der häufigsten Bakterienarten der Bakterien führen. Es wird eine Inkubationstemperatur
fördert, und auf der anderen Seite mit Rose-Bengal Agar (pink), nahe der normalen Temperatur der zu testenden Flüssigkeit
der das Wachstum von Pilzen fördert. empfohlen.
Die Hauptbedeutung des Tests besteht darin, dass die
Gesamtkeimzahl bestimmt werden kann. Interpretation der Ergebnisse (Fig. 6)
Den Keimindikator nach der Inkubation vorsichtig aus
Packungsinhalt seinem Röhrchen nehmen und die Keimzahl (Anzahl der
koloniebildenden Einheiten, KBE) bestimmen, indem
Easicult Combi Kat. Nr. 67987, 05984
die Wachstumsdichte auf dem Keimindikator mit dem
Keimindikatoren/ Nährbodenträger 10 St. Auswertungstableau verglichen wird. Beachten Sie dabei
Etiketten 10 St. die separaten Auswertungstableau für die verschiedenen
Gebrauchsanleitung 1 St. Nährböden (TTC und Rose-Bengal).
Wenn die Probe verdünnt wurde, muss der Verdünnungsfaktor
Typische Zusammensetzung für die Auswertung berücksichtigt werden. Beispiel: Wenn das
Ergebnis bei einer Verdünnung von 1 + 100 ml (1 ml von der
TTC Agar Rose-Bengal Agar Probe in 100 ml Wasser) eine Dichte von 106 KBE/ml ergibt, ist
Trypton Pepton das tatsächliche Ergebnis 108 KBE/ml.
Sojapepton Dextrose
Dinatriumsuccinat Kaliumhydrogenphosphat Rose-Bengal medium, Bestimmung von Pilzen
TTC Lösung Magnesiumsulfat Wachsende Kolonien auf dem Rose-Bengal Agar können
Agar-Agar Natriumchlorid entweder Hefen oder Schimmelpilze oder eine Mischung aus
Wasser Rose Bengal beidem sein. Schimmelpilzkolonien sind weich und flockig und
Natriumhydroxid gewöhnlich blass, grün oder schwarz gefärbt. Hefen wachsen
Gentamycinsulfat gewöhnlich in gewölbten Kolonien, können aber manchmal
Chloramphenicol auch flach und trocken sein. Hefekolonien sind oft rot oder
Agar-Agar weiss. Fadenpilze (“Schimmelpilze”) bilden ihre Kolonien
Wasser aus Fadenteilen oder Fadenaggregaten (Mycelium) oder
einzelnen Sporen. Der Vergleich mit den Musterbildern gibt
Warnhinweise und Vorsichtsmaßnahmen daher nur angenäherte Werte. Die Beurteilung wird anhand
Das Produkt nicht nach dem auf dem Kit angegebenen der Musterbilder wie folgt angegeben: die Kontamination ist
Verfallsdatum verwenden. schwach (+), mässig (++) oder stark (+++). Zur mikroskopischen
Die unbenutzten Nährböden nicht mit den Fingern berühren. Abklärung können Kolonien von dem Nährboden abgenommen
Den Keimindikator nicht verwenden, falls Sie folgendes werden. Pilzbefall ist manchmal mit dem bloßen Auge als eine
feststellen: Schicht auf der Flüssigkeitsoberfläche zu sehen.
● Verfärbung oder Austrocknung des Nährbodens
● Ablösung des Nährbodens vom Plastikträger TTC Agar, Bestimmung der Bakterien Gesamtkeimzahl
● Anzeichen von mikrobiellem Wachstum. Die meisten aerob wachsenden Bakterien wachsen auf TTC
Die wachsenden Kolonien nicht berühren, da jede auf dem Agar als rote Kolonien. Auch Pilze und Hefen können unter
Easicult Combi wachsende Kolonie pathogen (krankheits- Umständen langsam auf diesem Medium heranwachsen.
erregend) sein kann. Zwar wächst die Mehrzahl der Bakterien zu roten Kolonien,
aber auch farblose Kolonien müssen bei der Bestimmung der
Lagerung Keimdichte berücksichtigt werden. Für Fälle, bei denen sich der
Easicult Combi bei einer Raumtemperatur (etwa 20°C), Bewuchs aus sehr grossen Kolonien zusammensetzt, muss
geschützt vor Zugluft, Temperaturschwankungen und Licht- daran erinnert werden, dass es auf die Koloniendichte, und
quellen lagern. Lagerung in der Nähe von hitzeerzeugenden nicht auf ihre Grösse der einzelnen Kolonien ankommt.
Vorrichtungen vermeiden. Frostfrei lagern. Das Verfallsdatum Bei einer hohen Bakterienzahl (über 107 KBE/ml) kann es
(Jahr-Monat-Tag) steht auf der Schachtel und auf der zu einem konfluenten Bakterienbewuchs kommen, der als
Verschlusskappe jedes Keimindikators. gleichförmige rote Oberfläche erscheinen mag. In seltenen
Fällen kann es auch zu einem völlig farblosen Bewuchs
Probennahme (Fig. 1–5) kommen. In Zweifelsfällen wird daher empfohlen, den
Um eine Fremdkontamination zu vermeiden, sollten die bebrüteten Nährbodenträger mit einem unbenutzten Produkt
Nährböden nicht mit irgendeinem anderen Material außer dem zu vergleichen, um Fehlinterpretationen zu vermeiden.
zu testenden in Kontakt kommen. Es ist wichtig, die Nährböden Allgemein gültige Grenzwerte, die den Einsatz von
mit dem zu testenden Material vollkommen in Kontakt zu Konservierungsmitteln rechtfertigen, können nicht angegeben
bringen. werden, sondern müssen sich aus der Erfahrung ergeben. Als
Richtwerte gelten:
Viskose Flüssigkeiten und Flüssigkeiten mit
hoher mikrobieller Belastung (>107 KBE/ml) Bakterien
Ist die Viskosität oder die mikrobielle Belastung der Probe sehr KBE/ml Kontamination
hoch, sollte die Probe verdünnt werden. Für die Verdünnung
< 104 schwache generell keine Probleme1
sollten 100 oder 1000 ml Leitungswasser von Trinkwasser-
104 – 106 mässige
qualität in eine saubere, mehrmals sorgfältig ausgespülte und
> 106 starke nicht akzeptabel1
ausgetrocknete Flasche mit Verschlusskappe gefüllt werden.
Die bakterielle Belastung des Wassers zur Verdünnung sollte Einschränkung der Methode
den Wert von 100 KBE/ml nicht überschreiten. Das Wasser Bei Übersteigung der Bakterienanzahl von 107 KBE/ml, oder
sollte 5 Minuten lang ablaufen oder 15 Minuten lang abkochen einer hohen Viskosität, sollte die Probe verdünnt werden.
und anschließend abkühlen, bevor es zur Verdünnung in die Äusserst selten wachsen die Bakterien auf dem TTC Medium
Flasche abgefüllt wird. Mit einer sauberen Pipette, z.B. einer als farblose Kolonien.
Einmalpipette, 1 ml von der zu untersuchenden Flüssigkeit in Die zuverlässige Untergrenze für den Nachweis von Bakterien
die Flasche geben. Nach Verschluss der Flasche die Mischung liegt bei 103 KBE/ml.
schütteln (30 Mal). Anschließend den Keimindikator in die ver- Das Wachstum von Kokken kann durch TTC abgeschwächt
dünnte Probe eintauchen und wie bei der Probennahme von sein.
flüssigen Proben beschrieben fortfahren.
Entsorgung
Probennahme von flüssigen Proben Jede auf den Keimindikatoren wachsende Kolonie kann
1 Deckel des Behälters abschrauben und den Nährbodenträger pathogen sein. Gebrauchte Keimindikatoren müssen deshalb
entnehmen, ohne die Agarflächen zu berühren. durch Verbrennen, oder nach Öffnung des Röhrchen durch
2 Den Nährbodenträger in die zu prüfende Flüssigkeit Autoklavieren (ein Dampfkocher kann hierfür benutzt
eintauchen. Alternativ kann der Nährbodenträger auch in werden) vernichtet werden. Alternativ ist ein Einlegen in ein
den Strahl der Flüssigkeit gehalten oder besprüht werden. Desinfektionsmittel über Nacht möglich, wobei immer die
Steht die Flüssigkeit unter Druck, sollte man vorsichtig örtlichen Gesetze und Verordnungen zu befolgen sind.
mit dem Nährbodenträger umgehen, um ein Ablösen des
Nährbodens zu vermeiden. Wenn sich die Probe in einem
Behälter befindet, dann die Flüssigkeit mischen und den
Nährbodenträger direkt eintauchen.
Beide Seiten des Nährbodenträgers sollten mit der zu
prüfenden Flüssigkeit 5 bis 10 Sekunden in Kontakt sein und
vollständig benetzt werden.
3 Überflüssige Flüssigkeit vom Nährbodenträger abtropfen
lassen. Die letzten Tropfen auf absorbierendem Papier
abstreifen.
4 Nach der Probennahme den Nährbodenträger fest in das
Röhrchen schrauben. Beiliegendes Selbstklebeetikett aus-
füllen und auf das Röhrchen kleben.
Easicult® Combi

1 2a b c

3 4 5 6

Model Density Chart ● Auswertungstableau ● Tableau de référence ● Диаграмма сравнения частоты


роста образца ● Tabla comparativa ● Tabella comparativa ● Modelkaart ● Tolkningsmall ● Mallitaulu

Rose-Bengal Agar

Mould
Schimmel-
pilze
Moisissures + ++ +++
Плесневые slight moderate heavy
грибки schwach mässig stark
Mohos faible modérée forte
Muffe слабую умеренную сильную
Schimmels débil moderada elevada
Mögel leggera moderata massiccia
Homeet gering matig zwaar
låg måttlig kraftig
vähäinen kohtalainen voimakas

Yeast
Hefe
Levures
Дрожжи
Levaduras
Lieviti
Gisten
Jäst
Hiivat

103 104 105 106 CFU/ml

TTC Agar

Bacteria
Bakterien
Bactéries
Бактерия
Bacterias
Batteri
Bacteriën
Bakterier
Bakteerit

103 104 105 106 107 CFU/ml

The charts provide the approximate microbial count in powers of ten.


Die Abbildungen zeigen die ungefähre Belastung in Zehnerpotenzen.
Les tableaux indiquent la concentration microbienne approximative en puissances de dix.
Диаграмма обеспечивает приблезительный подсчёт микробов с точностью до десяти.
La tabla comparativa muestra un recuento microbiano aproximado en potencias decimales.
Le tabelle forniscono il valore della carica microbica approssimata in potenze decimali.
De kaart geeft bij benadering de telling van het aantal micro-organismen aan in een veelvoud van 10.
Mallen anger den ungefärliga bakteriehalten i tal upphöjt till tio.
Mikrobimäärät ilmoitetaan mallitaulussa kymmenpotensseina.

Literature ● Literatur ● Littérature ● Литература ● Literatura ● Letteratura ● Literatuur


Litteratur ● Kirjallisuus
1 Siegert W. The use of biocides with regard to the new Biocidal Products Directive – future aspects. Industrial Lubrication and
Tribology. 2002; Vol 54, No. 3:136–140.

Explanation of symbols ● Erläuterung der Symbole ● Объяснение символов


Signification des symboles ● Simbología ● Legenda ● Uitleg van de symbolen
Forklaring af symboler ● Förklaring av symboler ● Symbolien selitykset

Batch code Expiry date Manufacturer Tube (clear) Tube (mat) Cap Slide
Charge Verwendbar bis Hersteller Röhrchen (klar) Röhrchen (matt) Deckel Keimindikator
Numéro de lot Date de péremption Fabricant Tube (transparente) Tube (mate) Bouchon Lame
Код партии Срок годности Производитель Туба (прозрачная) Туба (матовая) Крышка Слайд
Número de lote Fecha de caducidad Fabricante Tubo (transparente) Tubo (mate) Tapón Laminocultivo
Lotto Data di scadenza Produttore Provetta (trasparente) Provetta (opaco) Tappo Slide (Lastrina)
Charge nr. Houdbaarheidsdatum Producent Buis (klaar) Buis (mat) Dop Afdrukplaatje
Batch nr. Utgångsdatum Tillverkare Rör (transparent) Rör (matt) Kork Slide/Tryckplatta
Eräkoodi Käytettävä ennen Valmistaja Putki (kirkas) Putki (samea) Korkki Levy

Easicult® is a registered trademark of Orion Diagnostica Oy.

Orion Diagnostica Oy
Koivu-Mankkaan tie 6 B
P.O.Box 83, FI-02101 Espoo, Finland
Tel. +358 10 4261, Fax +358 10 426 2794 Printed
www.oriondiagnostica.com 7/2011
Easicult® Combi Instructions d’utilisation ● Français

Application 5 Laisser incuber la lame à 27...30°C pendant 24 à 48 heures


Les tests Easicult Combi sont destinés au contrôle de la pour la détection des bactéries. Les levures et moisissures
contamination microbienne dans différents environnements nécessitent trois jours d’incubation avant que l’on puisse
industriels. Les tests peuvent être utilisés sur site, mais les lire les résultats. Si l’incubation est réalisée à température
lames constituent également un mode de transport efficace ambiante, les temps d’incubation deviennent respectivement
pour les prélèvements. 2 à 4 jours et 4 à 7 jours.
La lame est recouverte d’un côté par une gélose TTC Agar Si la température habituelle du fluide testé diffère de façon
(jaunâtre), qui permet le développement de la plupart des significative des températures d’incubation indiquées ci-
bactéries courantes. L’autre face est couverte d’une gélose dessus, on peut observer une croissance lente des bactéries.
Rose-Bengal Agar (rose) qui permet la croissance des Une température d’incubation proche de la température
moisissures. habituelle du fluide est donc recommandée.
La principale fonction du test est la détection d’une éventuelle
élévation de la concentration microbienne totale. Interprétation des résultats (Fig. 6)
Avec précaution, ôter la lame de son tube après incubation
Contenu du kit et déterminer la concentration microbienne (nombre de
colonies formant des unités, CFU) en comparant la densité de
Easicult Combi Cat. Nos. 67987, 05984
croissance sur la lame avec le tableau de référence. Il y a deux
Tests 10 pièces tableaux de référence différents pour la gélose TTC et la gélose
Etiquettes 10 pièces Rose-Bengal.
Instructions d’utilisation 1 pièce Dans le cas où l’échantillon a été dilué, le facteur de dilution
doit être pris en compte dans l’évaluation. Par exemple,
Formulation typique si une dilution de 1+100 ml (1 ml d’échantillon dans 100 ml
d’eau) montre une densité de 106 CFU/ml, le résultat réel pour
TTC Agar Rose-Bengal Agar l’échantillon est de 108 CFU/ml.
Tryptone Peptone
Peptone de soja Dextrose Gélose Rose-Bengal, détection des moisissures
Disodium succinate Phosphate de potassium hydrogène La croissance sur la gélose Rose-Bengal peut être due
Solution TTC Sulfate de magnesium exclusivement aux levures ou aux moisissures, ou à un
Agar-agar Chlorure de sodium mélange des deux. Les colonies de moisissures sont molles
Eau Rose Bengal et duveteuses, généralement pâles, de couleur verte ou noire.
Hydroxyde de sodium Les levures donnent généralement des colonies en forme de
Sulfate de gentamycin dôme mais peuvent parfois être plates et sèches. Comme les
Chloramphenicol colonies de moisissures peuvent être issues de fragments de
Agar-agar mycelium ou de spores individuels, le tableau de référence
Eau n’est pas quantitatif. Le tableau indique si la contamination est
légère (+), modérée (++) ou lourde (+++). Les colonies peuvent
Recommandations et précautions être ôtées des lames et examinées à l’aide d’un microscope
Ne pas utiliser le produit au-delà de la date d’expiration indiquée si nécessaire. La contamination par moisissure peut parfois
sur le kit. apparaître à l’œil nu comme une peau à la surface du fluide.
Ne pas toucher la gélose vierge.
Ne pas utiliser la lame si vous remarquez: TTC Agar, détermination de la concentration bactérienne
● une décoloration ou une déshydratation de la gélose totale
● un décollement de la gélose La plupart des bactéries aérobies se développent sur la gélose
● des traces de croissance microbienne. TTC Agar sous la forme de colonies rouges. Les moisissures
Ne pas toucher les lames utilisées car les colonies microbiennes et levures peuvent également se développer lentement sur ce
éventuellement présentes sur le test Easicult Combi peuvent se milieu. Même si la croissance bactérienne se présente presque
révéler pathogènes. toujours sous la forme de colonies rouges, toute colonie
incolore doit également être prise en compte lorsque la densité
Stockage est estimée. Dans le cas où de larges colonies apparaissent, il
Stocker les tests Easicult TTC à température ambiante ne faut pas oublier de considérer la densité de colonies et non
(environ 20°C) à l’abri des courants d’air, des fluctuations de pas la taille des colonies individuelles.
température et des sources de lumière. Eviter le stockage à Si la concentration bactérienne est très élevée (plus de 107 CFU/
proximité de matériel dégageant de la chaleur. Protéger du gel. ml), la croissance est confluente. Elle peut prendre l’apparence
La date d’expiration (année-mois-jour) est inscrite sur la boîte d’une surface rouge uniforme. Très rarement peut se produire
et sur le capuchon de chaque tube. une croissance totalement incolore. Il est conseillé de comparer
les lames présentant une surface apparemment uniforme avec
Ensemencement et procédure (Fig. 1–5) une lame vierge afin d’éviter toute erreur d’interprétation.
Pour éviter toute contamination non souhaitée, la gélose ne doit Comme il n’existe pas de limites applicables de façon
pas entrer au contact de matériaux autres que celui à tester. En universelle, les valeurs limites doivent être déterminées
revanche il est important que la gélose entre entièrement en par l’expérience. Pour la contamination bactérienne dans
contact avec ce dernier. les liquides réfrigérants, les valeurs suivantes peuvent être
utilisées:
Fluides visqueux et fluides à concentration bactérienne
élevée (>107 CFU/ml) Bactéries
Si la viscosité ou la concentration bactérienne de l’échantillon CFU/ml Contamination
est élevée, l’échantillon doit être dilué. Pour la dilution,
< 104 faible ne pose généralement pas problème1
introduire 100 ou 1000 ml d’eau de ville potable dans une
104 – 106 modérée
bouteille nettoyée, soigneusement rincée et séchée, munie d’un
> 106 lourde non acceptable1
capuchon. La concentration bactérienne de l’eau de dilution ne
doit pas dépasser 100 CFU/ml. Avant de remplir la bouteille, Limites de la méthode
laisser couler l’eau pendant 5 minutes, ou la faire bouillir 15 Si la concentration bactérienne dépasse 107 CFU/ml, ou si la
minutes puis la laisser refroidir. A l’aide d’une pipette jetable viscosité est élevée, l’échantillon doit être dilué.
propre, ajouter 1 ml de l’échantillon dans la bouteille. Fermer Très rarement les bactéries se développent sur la gélose TTC
et mélanger énergiquement en secouant la bouteille environ sous la forme de colonies incolores.
30 fois. Plonger la lame dans la dilution et procéder ensuite La limite basse de détection fiable pour les bactéries est de
comme indiqué pour les échantillons liquides. 103 CFU/ml.
La croissance de certaines bactéries coccoides peut être
Echantillons liquides affaiblie par la gélose TTC.
1 Dévisser le tube et ôter la lame sans toucher les surfaces de
gélose. Destruction
2 Tremper la lame dans le liquide. Il est également possible de Les croissances microbiennes sur les lames peuvent être
mouiller la lame sous un filet de liquide ou pulvériser le liquide pathogènes. Les lames utilisées doivent donc être détruites
sur la lame. Si le liquide est sous pression, la lame doit être par incinération, ou, après ouverture du tube, par passage à
manipulée avec précaution pour éviter le décollement de la l’autoclave (il est possible d’utiliser une cocotte minute), ou par
gélose. Si l’échantillon est dans un récipient, mélanger le immersion pendant une nuit dans un désinfectant, toujours en
contenu et y tremper la lame. conformité avec les lois et réglementations locales.
Les deux faces de la lame doivent être totalement
humidifiées. La lame doit rester en contact avec le fluide
pendant 5 à 10 secondes.
3 Laisser l’excès de liquide s’écouler de la lame. Eponger
les dernières gouttes au bas de la lame à l’aide de papier
absorbant.
4 Après ensemencement, revisser soigneusement la lame
dans le tube. Remplir l’étiquette et l’apposer sur le tube.

Easicult® Combi (Изикульт Комби) Инструкция по использованию ● По-русски

Предназначение 5 Инкубируйте слайды при температуре 27…30°C в


Слайды Easicult Combi предназначены для контроля течение 24–48 часов для определения бактерий.
микробной контаминации жидкостей и различных Дрожжи и плесени нуждаются в трех днях инкубации до
поверхностей на индустриальных предприятиях. того момента, когда результаты могут быть прочитаны.
Слайд-тест может быть использован непосредственно по Если инкубация происходит при комнатной температуре,
назначению или может использоваться как удобная среда то результаты можно оценить на 2–4 сутки и 4–7 сутки
для транспортировки образцов. соответственно.
Одна сторона слайд-теста покрыта агаром TTC (желтого Если нормальная температура тестируемой жидкости
цвета), который поддерживает рост наиболее общих существенно отличается от инкубационной температуры,
бактерий и другая сторона слайда агаром Розовый указанной выше, то это может привести к медленному
Бенгальский (розового цвета), который поддерживает рост бактериальному росту. Рекомендуется инкубировать
грибов. слайды при температуре соответствующей температуре,
Главное предназначение теста состоит в определении и при которой обычно находится тестируемая жидкость.
подсчете общего количества аэробных бактерий.
Интерпретация результатов (Рис. 6)
Состав набора После инкубации выньте слайд из тубы и определите
бактериальный рост (число колонии, колоне - формирующие
Easicult Combi Кат № 67987, 05984
единицы, КОЕ) путем сравнения частоты (плотности)
Тест – слайды 10 штук роста колоний на вашей среде с приведенными данными
Наклейки 10 штук на модельной картинке в инструкции. Имеется отдельный
Инструкция по использованию 1 штука модельный ряд для ТТС и Розового Бенгальского.
Если было произведено разведение образца, фактор
Типичный состав разведения следует принимать во внимание при оценке
результатов. К примеру, если 1 мл образца добавлен к 100
Cреды TTC Cреды Розовый Бенгальский мл воды и после инкубации было определено 106 КОЕ/мл,
Триптон Пептон значит истинный результат содержания бактерий 108 КОЕ/
Соевый пептон Декстроза мл.
Соды сукцинат K2HPO4
ТТС раствор MgSO4 Розовый бенгальский агар для определения дрожжей
Агар-агар Соды хлорид и плесеней
Вода Розовый бенгальский Рост колоний, на данной стороне слайда может состоять
Соды гидрооксид из грибов, либо из дрожжей, либо из комбинации того и
Гентамицина сульфат другого. Грибы дают колонии мягкие и в виде пуха, цвет
Хлорамфеникол колоний может быть бледный, зеленый или черный. Дрожжи
Агар-агар дают шарообразные блестящие колонии, но иногда они
Вода могут быть плоскими и сухими.
Поскольку колонии грибов могут состоять из фрагментов
Предупреждения и предосторожности мицелия или из индивидуальных спор, получаемые
Не используйте продукт позже даты окончания срока результаты не количественные, а качественные. Они
хранения, отмеченной на комплекте. показывают слабую (+), умеренную (++) или сильную (+++)
Не трогайте неиспользованную среду, на которой есть контаминацию. Колонии можно более подробно оценить под
признаки бактериального роста. микроскопом. Грибная инфекция может быть обнаружена
Не используйте слайды, если вы замечаете невооруженным взглядом, в виде пленки, покрывающей
● обесцвечивание или обезвоживание среды поверхность тестируемой жидкости.
● отделение агаризованной среды от пластиковой
поверхности ТТС агар для определения общего бактериального
● есть признаки микробного роста. числа.
Поскольку любой рост на слайде Easicult Комби может быть Практически все аэробные бактерии растут на среде ТТС и
патогенным, не прикасайтесь к использованному слайду. дают красные колонии. Грибы и дрожжи также могут расти
на данной среде, только медленно. Большинство бактерий
Условия хранения на данной среде дают колонии красного цвета, однако
Тесты Easicult Combi храняться при комнатной температуре в случае если также имеются бесцветные колонии, то их
(+20°С) в защищенном от света и высыхания месте. также необходимо учитывать при оценке плотности роста
Избегайте хранения слайдов вблизи от нагревательных В случае, когда вырастают большие по размеру колонии,
приборов. Не позволяйте замораживать тесты. Дата следует обращать внимание на их количество, а не на
окончания срока годности (год-месяц-дата) отмечена на размер.
коробке и на крышке каждого слайда. Если бактерий очень много (свыше 107 КОЕ/мл), то
наблюдается сливной бактериальный рост. Это может
Взятие пробы и процедура (Рис. 1–5) выглядеть, как полностью красная поверхность агара.
Чтобы избежать контаминации, поверхность среды не Очень редко бывает полностью бесцветный рост. В
должна войти в контакт с любым другим материалом, данной ситуации рекомендуется произвести сравнение
кроме того, который будет тестирован. С другой стороны, инкубированного слайда с одним из неиспользованных,
важно, чтобы поверхность среды была в полном контакте с чтобы исключить неверное истолкование результата.
материалом, который будет тестирован. Так как нет универсальных уровней по оценке роста
колоний, предел уровней определяется опытным путем на
Вязкие жидкости или жидкости с высоким практике. Для бактериальной контаминации может быть
содержанием бактерий (> 107 КОЕ/мл) использована следующая общая рекомендация:
Если содержание бактерий в исследуемом образце
превышает 107 KOE/мл, или плотность образца высокая, то Бактерия
образец необходимо развести. При разведении поместите CFU/ml Инфицированность
100 или 1000 мл водопроводной воды в чистую, и сухую
< 104 слабая обычно нет проблем1
емкость с крышкой. Вода используемая для разведения
104 – 106 средняя
должна содержать не более 100 бактерий/ мл. Необходимо,
> 106 сильная неприемлемый результат1
чтобы вода из крана стекала в течение 5 минут до забора
для разведения, или ее можно прокипятить в течение 15 Ограничения метода
минут, а затем охладить. Используя чистую (одноразовую) Если при подсчете бактериальный рост превышает 107 КОЕ/
пипетку добавьте 1 мл тестируемого образца, закройте мл, или исследуемый раствор имеет высокую вязкость,
крышкой и смешайте осторожно с помощью встряхивания образец должен быть растворен.
в течение 30 раз. Погрузите слайд в разведенный образец Очень редко бактерии растут на среде TTC как бесцветные
и произведите все процедуры, как описано для жидких колонии.
образцов. Приемлемый нижний определяемый предел для бактерий
– 103 КОЕ/ мл.
Жидкие образцы Рост некоторых кокковых бактерий может быть ослаблен
1 Откройте контейнер и выньте осторожно слайд не TTC.
прикасаясь к поверхности агара.
2 Погрузите слайд в исследуемую жидкость. Альтер- Утилизация используемых слайдов
нативно, смочите слайд под струей с исследуемой Любой рост бактерий на слайде может быть патогенным.
жидкостью или спрея. Если жидкость находится под Использованные слайды должны быть утилизированы
давлением, слайд следует смачивать осторожно, чтобы посредством сжигания или после открытия тубы, также
исключить отделение агара. Если образец в контейнере, уничтожения в автоклаве (можно также использовать
то перемешайте содержимое контейнера и погрузите в прессование) или погружение в дезинфицирующий раствор,
него слайд. всегда следуя нормативам местного законодательства и
Обе поверхности агара должны быть полностью регулирования.
смочены. Слайд должен контактировать с жидкостью в
течение 5–10 секунд.
3 Позвольте избытку жидкости стечь с поверхности слайда.
Чтобы убрать последние капли образца, поместите
нижний конец слайда на чистую фильтровальную
бумагу.
4 После взятия образца, осторожно поместите слайд в
тубу и закрутите крышку. Сделайте учетную запись на
стикере и приклейте его на тубу.
Easicult® Combi Instrucciones de uso ● Español

Uso 5 Incubar el laminocultivo a 27…30°C (80...86°F) durante


Los laminocultivos Easicult Combi son usados para analizar 24–48 horas para la detección de bacterias. Los mohos y
la contaminación bacteriana de diferentes ambientes en la levaduras necesitan tres días de incubación antes de poder
industria. El test puede realizarse “in-situ”, y también puede ser realizar la lectura del resultado. Si la incubación se realiza
un sistema apropiado para el transporte de muestras. a temperatura ambiente, el tiempo de incubación es de 2–4
El laminocultivo está cubierto por un lado con Agar TTC días y 4–7 días respectivamente.
(amarillo), que permite el crecimiento de la mayoría de las Si la temperatura normal del líquido analizado varía
bacterias, y por el otro lado está cubierto con Agar Rosa de substancialmente de las temperaturas de incubación,
Bengala (rosa) para el crecimiento de mohos y levaduras. puede provocar un crecimiento lento de las bacterias. Se
La principal ventaja del test es que se puede detectar cantidades recomienda una temperatura de incubación cercana a la
elevadas de bacterias. temperatura del líquido.

Contenido del kit Interpretación de los resultados (Fig. 6)


Después de la incubación sacar con cuidado el laminocultivo
Easicult Combi Cat. Nos. 67987, 05984
y contar las bacterias (número de unidades formadoras de
Laminocultivos 10 und colonias, CFU) comparando la densidad del crecimiento del
Etiquetas 10 und laminocultivo con las fichas modelos de crecimiento. Ver las
Instrucciones 1 und diferentes fichas para TTC y Rosa-Bengala.
Si la muestra es diluida, se tiene que tener en cuenta el factor
Formulación típica de dilución para calcular el resultado. Por ejemplo, si la dilución
de 1 + 100 ml (1 ml de muestra en 100 ml de agua) muestra
Agar TTC Agar Rosa-Bengala una densidad de 106 CFU/ml, el resultado de la muestra será
Triptona Peptona de 108 CFU/ml.
Peptona de Soja Dextrosa
Succinato disódico Hidrogenfosfato de Potasio Medio Rosa-Bengala , determinación de mohos y
Solución TTC Sulfato de Magnesio levaduras
Agar-agar Cloruro sódico El crecimiento en el Agar Rosa-Bengala consiste exclusiva-
Agua Rosa Bengala mente en mohos o levaduras o una mezcla de los dos.
Hidróxido sódico Los mohos aparecen como colonias suaves y blandas y
Sulfato de Gentamicina normalmente pálidas de color verde o negro. Las levaduras
Cloramfenicol tienen forma de bola ligeramente hinchada, aunque en
Agar-agar ocasiones aparecen planas y secas. Dado que las colonias
Agua de mohos pueden originarse de fragmentos de micelio o bien
por esporas individuales, la carta modelo no es cuantitativa.
Precauciones La carta indica si la contaminación es débil (+), moderada
No usar el producto después de la fecha de caducidad indicada (++) o elevada (+++). Las colonias pueden ser retiradas de
en la caja. la superficie del agar y examinadas baja un microscopio si
No tocar el medio sin usar. es necesario. La contaminación por mohos a veces puede
No usar el kit si detecta: observarse directamente sobre la superficie del líquido.
● decoloración o deshidratación del medio de crecimiento
● desprendimiento del medio de crecimiento del soporte Agar TTC, recuento de bacterias totales
plástico La mayoría de las bacterias aerobias crecen en el medio
● evidencia de crecimiento microbiano. TTC como colonias rojas. Los mohos y las levaduras pueden
No tocar el crecimiento en los Laminocultivos ya que cualquiera también crecer lentamente en el medio. A pesar que el
de las colonias pueden ser patógenas. crecimiento bacteriano suele ser casi siempre como colonias
rojas, cualquier colonia incolora debe ser tomada en cuenta
Almacenaje cuando se estima la densidad. En caso de aparecer colonias
Almacenar el kit a temperatura ambiente (aprox. 20°C/68°F) grandes, se tiene que considerar la densidad de las colonias,
protegidos de la luz, corrientes de aire y fluctuaciones de no el tamaño de las colonias individuales.
temperatura. No almacenar los kits cerca de fuentes de calor. Si el recuento bacteriano es muy elevado (más de 107 CFU/ml),
No congelar el kit. La fecha de caducidad (año-mes-fecha) hay una concurrencia en el crecimiento de las bacterias. Esto
viene impresa en cada caja y en cada lámina. provoca que la superficie del laminocultivo sea uniformemente
roja. Raramente puede producirse un crecimiento totalmente
Muestreo y procedimiento (Fig. 1–5) incoloro. Se recomienda comparar los laminocultivos que
Para evitar contaminación, el medio de crecimiento no debe muestran una superficie uniforme con un laminocultivo sin usar
ponerse en contacto con otro material que no sea el material para evitar equivocaciones.
objeto de análisis. Es importante que el medio de crecimiento Como no existen límites universales aplicables, los valores
entre plenamente en contacto con el material a analizar. límites tienen que determinarse con la experiencia. Para la
contaminación bacteriana en líquidos refrigerados, se debe
Líquidos viscosos y líquidos con elevado contenido seguir la siguiente guía:
bacteriano (>107 CFU/ml)
Si la viscosidad o el contenido bacteriano es elevado, la Bacterias
muestra debe ser diluida. Para diluir poner 100 o 1000 ml de CFU/ml Contaminación
agua del grifo en una botella con tapón, limpia, bien enjuagada 4
y seca. El contenido bacteriano del agua para diluir no debe ser < 10 débil normalmente sin problemas1
superior a 100 CFU/ml. Antes de llenar la botella, dejar correr 104 – 106 moderada
el agua durante 5 minutos o hierva el agua durante 15 minutes > 106 fuerte no aceptable1
y déjela enfriar. Use una pipeta limpia (desechable), añada
1 ml de la muestra a la botella. Cierre la botella y mézclela Limitaciones del método
completamente sacudiéndola unas 30 veces. Introduzca el Si el recuento bacteriano excede de 107 CFU/ml, o la viscosidad
laminocultivo en esta disolución y proceda como se indica para es elevada, la muestra debe ser diluida.
muestras líquidas. En muy pocas ocasiones puede producirse un crecimiento
bacteriano con colonias incoloras en el medio TTC.
Muestras líquidas El Límite inferior de Cuantificación de confianza para bacterias
1 Desenrosque el tapón y saque el laminocultivo sin tocar la es de 103 CFU/ml.
superficie del agar. El crecimiento de ciertas bacterias cocales puede ser debilitado
2 Introduzca el laminocultivo en el líquido. O bien, mojar el por el TTC.
laminocultivo poniéndolo bajo la corriente del líquido o rociar
el líquido por la superficie. Si el líquido se encuentra bajo Eliminación
presión, el laminocultivo debe ser manipulado con cuidado Cualquier crecimiento en el laminocultivo puede ser patogénico.
para evitar que el agar se desprenda. Si la muestra se Los laminocultivos usados deben ser eliminados mediante
encuentra en un recipiente, mezcle el contenido y sumerja incineración o, después de abrir el tubo, llevar al autoclave
el laminocultivo dentro. (también puede usarse una olla a presión) o sumergirlo en
Los dos lados del laminocultivo deben quedar completamente desinfectante durante toda la noche, siempre siguiendo las
mojados. El laminocultivo debe estar en contacto con el normativas locales.
líquido durante 5 o 10 segundos.
3 Dejar que el exceso de líquido fluya por el laminocultivo.
Seque las ultimas gotas de la punta del laminocultivo con
papel absorbente.
4 Después del muestreo, introduzca el laminocultivo de nuevo
en el tubo. Rellene la etiqueta y engánchela en el tubo.

Easicult® Combi Istruzioni per l’uso ● Italiano

Indicazioni d’uso 5 Incubare le lastrine a 27…30°C per 24–48 ore per la


Le lastrine Easicult Combi sono state sviluppate per il determinazione dei batteri. Lieviti e muffe hanno bisogno
monitoraggio della contaminazione batterica in vari settori di tre giorni di incubazione prima che si possano leggere
industriali. Il test può essere eseguito direttamente sul posto, i risultati. Se l’incubazione viene condotta a temperatura
oppure le lastrine possono essere usate come terreno adatto ambiente il tempo di incubazione è rispettivamente di 2–4
per il trasporto dei campioni. giorni e 4–7 giorni.
La lastrina è ricoperta su un lato da Agar TTC (giallo) che Se la temperatura normale del fluido testato è molto differente
supporta la crescita dei batteri più comuni, sull’altro da Agar dalle temperature indicate si può avere una crescita lenta dei
Rose-Bengal (Rosa) che supporta la crescita di muffe e lieviti. batteri. Si raccomanda una temperatura vicina alla normale
La caratteristica principale di questo test è la capacità di temperatura del fluido.
determinare l’innalzamento delle conte batteriche totali.
Interpretazione dei risultati (Fig. 6)
Contenuto del kit Rimuovere accuratamente la lastrina dal tubo dopo
l’incubazione e determinare la conta batterica (numero di unità
Easicult Combi Cat. Nos. 67987, 05984
formanti colonie, CFU) confrontando la densità della crescita
Tests 10 pezzi sulla lastrina con la tabella di riferimento. Si noti che vi sono due
Etichette 10 pezzi tabelle di referenza separate per il TTC ed il Rose-Bengal.
Istruzioni per l’uso 1 pezzo Se il campione è stato diluito bisogna tenere conto del fattore
di diluizione nella valutazione. Per esempio se una diluizione
Formulazione tipica di 1 + 100 (1 ml. del campione in 100 ml. di acqua) mostra
una densità di 106 CFU/ml, il risultato reale del campione è 108
TTC Agar Rose-Bengal Agar CFU/ml.
Tryptone Peptone
Soy peptone Dextrose Terreno Rose-Bengal, determinazione dei funghi
Disodium succinate Potassium hydrogen phosphate La crescita che appare sulla lastrina può essere esclusivamente
TTC solution Magnesium sulphate di lieviti o muffe o una crescita mista di entrambi. Le colonie di
Agar-agar Sodium chloride muffe sono soffici e lanuginose e normalmente di colore chiaro,
Water Rose Bengal verde o nero. I lieviti normalmente crescono in colonie a forma
Sodium hydroxide di cupola, ma a volte possono essere piatte e asciutte. Le
Gentamycin sulphate colonie di lieviti sono spesso rosse o bianche. Poichè le colonie
Chloramphenicol di muffe possono essere originate da frammenti di micelio o
Agar-agar da spore individuali, la tabella di referenza non è quantitativa.
Water La tabella indica se la contaminazione è leggera (+), moderata
(++) o massiccia (+++). Le colonie, se occorre, possono
Avvertenze e precauzioni essere rimosse dalle lastrine e esaminate al microscopio. La
Non usare il prodotto oltre la data di scadenza riportata sul kit. contaminazione fungina appare a volte a occhio nudo come un
Non toccare il terreno di coltura. rivestimento su una superficie fluida.
Non utilizzare la lastrina se si nota:
● colorazione o disidratazione del terreno di coltura Agar TTC, determinazione della conta batterica totale
● distacco del terreno di coltura dalla lastrina di plastica La maggior parte dei batteri aerobi crescono su Agar TTC
● crescita microbica evidente. come colonie rosse. Le muffe e lieviti possono anche crescere
Poichè la crescita sulla lastrina Easicult Combi può essere lentamente su questo terreno. Quando si esegue la valutazione
patogena, non toccare la lastrina usata. della densità, bisogna prendere in considerazione anche
le colonie incolori, anche se la crescita batterica, di solito,
Stoccaggio avviene sotto forma di colonie rosse. Nel caso siano presenti
Stoccare Easicult Combi a temperatura ambiente (circa 20°C), delle colonie di maggiori dimensioni bisogna tener conto della
proteggere da correnti d’aria, fluttuazioni di temperatura e densità delle colonie e non della loro dimensione.
sorgenti di luce. Evitare lo stoccaggio nelle vicinanze di sorgenti Se la conta batterica è molto elevata (maggiore di 107 CFU/
di calore. Non congelare. La data di scadenza (anno-mese- ml) si verifica una crescita confluente. Questa può apparire
giorno) è riportata sulla scatola e sul tappo di ogni lastrina. come uno strato superficiale uniforme di colore rosso. Molto
raramente si verifica una crescita completamente incolore.
Campionamento e procedimento (Fig. 1–5) Si consiglia di confrontare le lastrine che presentano una
Per evitare contaminazioni, il terreno di coltura non deve superficie apparentemente uniforme con una lastrina nuova
entrare in contatto con altri materiali oltre quello da testare. per evitare errori di interpretazione.
D’altra parte è importante che il terreno di coltura venga posto Poiché non esistono limiti applicabili universalmente, i valori
completamente a contatto con il materiale da testare. limite devono essere determinati sulla base dell’esperienza.
Nel caso della contaminazione batterica dei lubrorefrigeranti,
Fluidi viscosi e fluidi con elevata conta batterica possono essere usate le seguenti indicazioni:
(>107 CFU/ml)
Se la viscosità o la conta batterica del campione sono elevate, Batteri
diluire il campione. Per la diluizione porre in una bottiglia CFU/ml Contaminazione
pulita con tappo, accuratamente risciacquata e asciugata
100 ml. o 1.000 ml. di acqua potabile. La conta batterica < 104 leggera normalmente non ci sono problemi1
dell’acqua di diluizione non deve superare 100 CFU/ml. 104 – 106 moderata
Prima di riempire la bottiglia, lasciare scorrere l’acqua per > 106 elevata non accettabile1
5 minuti oppure bollirla per 15 minuti e lasciarla raffreddare.
Usare una pipetta pulita (monouso), aggiungere alla bottiglia Limiti del metodo
1 ml. del campione. Chiudere e miscelare accuratamente Se la conta batterica eccede 107 CFU/ml, o la viscosità è
agitando la bottiglia circa 30 volte. Immergere la lastrina nel elevata, occorre diluire il campione.
campione diluito e procedere come descritto per i campioni Molto raramente i batteri crescono sul terreno TTC come
fluidi. colonie incolori
Il limite inferiore attendibile di rilevazione dei batteri è 103 CFU/
Campioni fluidi ml.
1 Svitare il tubo ed estrarre la lastrina senza toccare le superfici La crescita di alcuni batteri cocci può essere indebolita dal
dell’agar. TTC.
2 Immergere la lastrina nel liquido. In alternativa, porre la
lastrina sotto il flusso del liquido o spruzzare il liquido sulla Smaltimento
lastrina. Se il liquido è sotto pressione, maneggiare la lastrina Qualunque crescita sul terreno può essere patogena. Le lastrine
con cura per evitare il distacco dell’agar. Se il campione si usate devono pertanto essere smaltite tramite incenerimento o,
trova in un contenitore, miscelare il contenuto e immergervi dopo aver aperto il tubo, tramite autoclave (può essere usata
la lastrina. una pentola a pressione) o per immersione in un disinfettante
Gli agar devono essere completamente bagnati su entrambi per una notte, seguendo sempre le leggi e i regolamenti locali.
i lati. La lastrina deve rimanere in contatto con il fluido per
5–10 secondi.
3 Lasciar scorrere dalla lastrina il fluido in eccesso. Assorbire
le ultime gocce dal lato inferiore della lastrina mediante carta
assorbente.
4 Dopo il prelievo del campione riporre la lastrina nel tubo
avvitandola accuratamente. Compilare l’etichetta ed
incollarla sul cilindro.
Easicult® Combi

1 2a b c

3 4 5 6

Model Density Chart ● Auswertungstableau ● Tableau de référence ● Диаграмма сравнения частоты


роста образца ● Tabla comparativa ● Tabella comparativa ● Modelkaart ● Tolkningsmall ● Mallitaulu

Rose-Bengal Agar

Mould
Schimmel-
pilze
Moisissures + ++ +++
Плесневые slight moderate heavy
грибки schwach mässig stark
Mohos faible modérée forte
Muffe слабую умеренную сильную
Schimmels débil moderada elevada
Mögel leggera moderata massiccia
Homeet gering matig zwaar
låg måttlig kraftig
vähäinen kohtalainen voimakas

Yeast
Hefe
Levures
Дрожжи
Levaduras
Lieviti
Gisten
Jäst
Hiivat

103 104 105 106 CFU/ml

TTC Agar

Bacteria
Bakterien
Bactéries
Бактерия
Bacterias
Batteri
Bacteriën
Bakterier
Bakteerit

103 104 105 106 107 CFU/ml

The charts provide the approximate microbial count in powers of ten.


Die Abbildungen zeigen die ungefähre Belastung in Zehnerpotenzen.
Les tableaux indiquent la concentration microbienne approximative en puissances de dix.
Диаграмма обеспечивает приблезительный подсчёт микробов с точностью до десяти.
La tabla comparativa muestra un recuento microbiano aproximado en potencias decimales.
Le tabelle forniscono il valore della carica microbica approssimata in potenze decimali.
De kaart geeft bij benadering de telling van het aantal micro-organismen aan in een veelvoud van 10.
Mallen anger den ungefärliga bakteriehalten i tal upphöjt till tio.
Mikrobimäärät ilmoitetaan mallitaulussa kymmenpotensseina.

Easicult® Combi Gebruiksaanwijzing ● Nederlands

Beoogd gebruik 5 Bebroed de buis 24–48 uur bij 27…30ºC om het aantal
Easicult Combi dipslides zijn ontwikkeld voor het vaststellen bacteriën vast te stellen. Gisten en schimmels hebben drie
van microbiologische verontreiniging in verschillende industriële dagen bebroeding nodig voor het resultaat afgelezen kan
vloeistoffen. De test kan op locatie worden uitgevoerd, worden. Als de bebroeding bij kamertemperatuur plaatsvindt
of de dipslides kunnen worden gebruikt als gemakkelijk zijn de bebroedingstijden respectievelijk 2–4 en 4–7 dagen.
transportmiddel voor micro-organismen. Als de normale temperatuur van de geteste vloeistof sterk
De dipslide is aan één zijde bedekt met een TTC Agar verschilt van de bovengenoemde bebroedingstemperaturen,
(geelachtig) die de groei van de meest gangbare bacteriën kan dit leiden tot een langzamere groei van bacteriën. Een
bevordert, en aan de andere kant met Rose-Bengar Agar bebroedingstemperatuur dichter bij de normale temperatuur
(roze), die de groei van schimmels bevordert. van de vloeistof wordt dan aangeraden.
De voornaamste eigenschap van de test is dat de aanwezigheid
van het totaal aantal micro-organismen kan worden bepaald. Aflezen en interpreteren (Fig. 6)
Verwijder de dipslide na de bebroeding voorzichtig uit het buisje
Inhoud van de kit en bepaal de concentratie micro-organismen (aantal kolonie
vormende eenheden, KVE) door de dichtheid van de groei op
Easicult Combi Cat. Nos. 67987, 05984
de dipslide te vergelijken met de dichtheid op de modelkaart.
Dipslides 10 st. Let op de verschillende modelkaarten voor TTC en Rose
Labels 10 st. Bengal.
Gebruiksaanwijzing 1 st. Als het monster verdund is, moet er in de evaluatie rekening
gehouden worden met de verdunningsfactor. Als bijvoorbeeld
Karakteristieke formulering een verdunning van 1 + 100 ml (1 ml van het monster in 100 ml
water) een dichtheid van 106 KVE/ml laat zien, is het werkelijke
TTC Agar Rose Bengal Agar resultaat voor het monster 108 KVE/ml.
Tryptoon Peptoon
Soja Peptoon Dextrose Rose Bengal middel, bepaling van schimmels
Dinatrium succinaat Kalium hydrogeen fosfaat De groei op de Rose-Bengal Agar kan alleen uit gist bestaan,
TTC oplossing Magnesium sulfaat alleen uit schimmel of een mix hiervan. Schimmelkolonies zijn
Agar-agar Natrium chloride zacht en pluizig en gewoonlijk bleek, groen of zwart van kleur.
Water Rose Bengal Gisten groeien gewoonlijk in wat verheven kolonies, maar
Natrium hydroxide kunnen soms ook plat en droog zijn. Omdat schimmelkolonies
Gentamycin sulfaat kunnen ontstaan uit mycelium fragmenten of uit individuele
Chloramphenicol sporen, is de modelkaart niet kwantitatief. De kaart duidt aan of
Agar-agar de besmetting gering (+), matig (++) of zwaar (+++) is.
Water Kolonies kunnen van de voedingsbodem worden genomen
en onder een microscoop worden onderzocht indien dit
Waarschuwingen en voorzorgsmaatregelen noodzakelijk is. Schimmelverontreiniging is soms zichtbaar met
Product niet gebruiken na de op de doos aangegeven het blote oog als een laag op de vloeistofoppervlakte.
houdbaarheidsdatum.
Ongebruikte voedingsbodem niet aanraken. TTC Agar, bepaling van de totale concentratie bacteriën
Dipslide niet gebruiken wanneer: De meeste aërobe bacteriën groeien op TTC Agar als rode
● verkleuring of uitdroging van de voedingsbodem wordt kolonies. Schimmels en gisten kunnen ook langzaam groeien
geconstateerd op dit medium. Ondanks dat bacteriële groei bijna altijd in de
● de voedingsbodem van de dipslide losgelaten is vorm van rode kolonies te zien is, moeten eventuele kleurloze
● bacteriële groei zich reeds ontwikkeld heeft. kolonies ook meegeteld worden wanneer men de dichtheid
Omdat de groei op de Easicult Combi dipslide ziekteverwekkend van de kolonies gaat schatten. In het geval dat grote kolonies
kan zijn, moet men de gebruikte dipslide niet aanraken. aanwezig zijn, moet in gedachten gehouden worden dat de
koloniedichtheid, niet de grootte van individuele kolonies, in
Opslag aanmerking genomen moet worden.
Bewaar de Easicult Combi kit bij kamertemperatuur (ong. 20ºC). Als het aantal bacteriën erg hoog is (meer dan 107 KVE/ml), is de
Bescherm het product tegen tocht, temperatuurswisselingen en groei samenvloeiend. Dit kan zich voordoen als een uniforme
lichtbronnen. Vermijd opslag nabij warmtegevende apparaten. rode oppervlaktelaag. Af en toe is er een totale kleurloze groei.
Niet laten bevriezen. De houdbaarheidsdatum (jaar-maand-dag) Het is aan te raden om dipslides die een schijnbaar uniform
is aangegeven op de doos en op de dop van elke dipslide. oppervlak vertonen te vergelijken met een ongebruikte dipslide
om een verkeerde interpretatie te voorkomen.
Bemonsteren en werkwijze (Fig. 1–5) Daar er in het algemeen niet is aan te geven welke aantallen
Om verontreiniging te voorkomen mag de voedingsbodem niet (grenswaarden) goed of slecht zijn, zullen grenswaarden
in contact komen met enig ander materiaal dan het te testen door ervaring bepaald moeten worden. Voor bacteriële
materiaal. Daarentegen is het belangrijk dat de voedingsbodem verontreinigingen in koelvloeistoffen kan de volgende richtlijn
volledig in contact komt met het te testen materiaal. aangehouden worden:

Viscose vloeistoffen en vloeistoffen met een Bacteriën


hoge concentratie bacteriën (>107 KVE/ml) CFU/ml Besmetting
Indien de viscositeit of de concentratie bacteriën in het
< 104 geringe gewoonlijk geen problemen1
monster hoog is, zal het monster verdund moeten worden.
104 – 106 matige
Om het monster te verdunnen, neem 100 of 1000 ml drinkbaar
> 106 zware onacceptabel1
kraanwater in een schone, goed gereinigde en droge fles met
dop. Het bacteriën aantal van het water dat gebruikt wordt voor Beperkingen van de methode
de verdunning mag 100 KVE/ml niet overschrijden. Laat het Indien het bacteriën aantal hoger is dan 107 KVE/ml, of bij een
water 5 minuten uit de kraan stromen of kook het 15 minuten hoge viscositeit, zal het monster moeten worden verdund.
en laat het daarna afkoelen, alvorens de fles te vullen. Gebruik Af en toe groeien de bacteriën op het TTC medium als kleurloze
een schone (wegwerp) pipet en voeg hiermee 1 ml van het kolonies.
monster toe aan de fles. Sluit de fles en mix het grondig door De laagste betrouwbaarheidsvaststellingsgrens voor bacteriën
de fles ongeveer 30 keer te schudden. Dompel de dipslide in is 103 KVE/ml.
de verdunning en ga verder als beschreven voor vloeibare De groei van sommige coccoïde bacteriën kan door TTC
monsters. worden afgezwakt.
Vloeibare monsters Vernietigen
1 Schroef het buisje los en haal de dipslide er uit zonder de De groei op de dipslide kan ziekteverwekkend zijn. Daarom
agar oppervlaktes aan te raken. moeten de gebruikte dipslides vernietigd worden door middel
2 Dompel de dipslide in de vloeistof. Als alternatief kan de van verbranding, of na het openen van het buisje, ofwel door
voedingsbodem onder het stromende materiaal van de autoklaveren (hiervoor kan een snelkookpan gebruikt worden),
te bemonsteren vloeistof gehouden worden of besproeid ofwel door het onderdompelen in desinfectiemiddel gedurende
worden. Indien de vloeistof onder druk staat, dient de een nacht, waarbij altijd de locale wettelijke bepalingen en
dipslide met zorg behandeld te worden om loslaten van de geldende regels in acht worden genomen.
agar te voorkomen. Indien het te bemonsteren materiaal
zich in een container bevindt, zorg er dan voor dat de inhoud
goed gemixt wordt en dompel daarna de dipslide erin.
Beide agar kanten moeten volledig nat worden. De dipslide
moet 5 tot 10 seconden in contact komen met de vloeistof.
3 Laat overvloedige vloeistof van de dipslide afdruipen. Dep
de laatste druppels aan de onderkant van de dipslide op
absorberend papier.
4 Schroef de dipslide na het testen stevig terug in het buisje.
Vul het label in en plak het op het buisje.
Easicult® Combi Bruksanvisning ● Svenska

Avsedd användning Tolkning av resultat (Bild 6)


Easicult Combi slider är avsedda för kontroll av mikrobiologisk Ta försiktigt ut sliden från röret efter inkubering och fastställ den
förorening i olika industriella omgivningar. Testet kan utföras på mikrobiella halten (antal koloniformationer, CFU) genom att
plats, alternativt användas som bekvämt transportsystem för jämföra tätheten av växt på sliden med tolkningsmallen. Notera
prover. de separata tolkningsmallarna för TTC och Rose-Bengal.
Sliden är på en sida täckt med TTC Agar (gulaktig), vilken Om provet var utspätt, måste spädningsfaktorn tas i beaktande
gynnar växt av de vanligaste bakterierna. Den andra sidan har vid uppskattningen. Till exempel, om en spädning på 1 + 100 ml
Rose-Bengal Agar (rosa), vilken gynnar växt av svamp. (1 ml av provet i 100 ml vatten) visar ett resultat på 106 CFU/ml,
Den främsta användningen av testet är att förhöjda totala är det verkliga resultatet för provet 108 CFU/ml.
mikrobiella halter kan upptäckas.
Rose-Bengal medium, bestämmande av svamp
Innehåll I förpackningen Växt på Rose-Bengal Agar kan bestå av enbart jästsvamp,
enbart mögelväxt eller en blandning av dessa. Mögelkolonier
Easicult Combi Cat. Nos. 67987, 05984
är mjuka och luddiga och vanligtvis ljusa, gröna eller svarta i
Testslider 10 st färgen. Jäst växer vanligtvis i bollformade kolonier men platta
Etiketter 10 st och torra kolonier förekommer också. Då mögelkolonier kan
Bruksanvisning 1 st härstamma från fragment av mycel eller från individuella
sporer, är tolkningsmallen inte kvantitativ. Mallen indikerar om
Sammansättning föroreningen är låg (+), måttlig (++) eller kraftig (+++). Kolonier
kan vid behov tas från sliden och undersökas under mikroskop.
TTC Agar Rose-Bengal Agar Förorening av mögel är ibland synbar för blotta ögat som en
Trypton Pepton hinna på vätskans yta.
Sojapepton Glukos
Dinatriumsuccinat Kaliumvätefosfat TTC Agar, bestämmande av total bakteriehalt
TTC lösning Magnesiumsulfat De flesta aeroba bakterier växer på TTC Agar som röda
Agar-agar Natriumklorid kolonier. Jäst och mögel kan också växa långsamt på detta
Vatten Rose Bengal medium. Trots att bakterieväxt nästan alltid är i form av röda
Natriumhydroxid kolonier, skall även färglösa kolonier tas i beaktande när
Gentamycinsulfat tätheten bedöms.
Chloramphenicol Om stora kolonier uppstått, bör man ha i åtanke att kolonitätheten,
Agar-agar inte storleken på enskilda kolonier, skall beaktas.
Vatten Om bakteriehalten är mycket hög (mer än 107 CFU/ml), är
växten sammanhängande. Denna kan framträda som ett
Att tänka på enhetligt rött ytskikt. Endast i undantagsfall förekommer en helt
Använd inte produkten efter passerat utgångsdatum märkt på färglös växt. Slider som visar en till synes jämn yta bör jämföras
förpackningen. med en oanvänd slide för att undvika misstolkning.
Vidrör ej de oanvända tillväxtmedierna. Då allmänna tillämpliga gränsvärden ej existerar, får gränsvärden
Använd inte testerna om du noterar bestämmas genom erfarenhet. För bakteriekontamination i
● missfärgning eller intorkning av tillväxtmediet kylvätskor, kan följande guide användas:
● att tillväxtmedierna lossnat från plastsliden
● förekomst av mikrobiell växt. Bakterier
Vidrör ej använd Easicult Combi slide, då all växt på sliden kan CFU/ml Kontamination
vara patogen.
< 104 lätt vanligtvis inga problem1
104 – 106 måttlig
Förvaring > 106 hög ej acceptabelt1
Förvara Easicult Combi i rumstemperatur (ca 20°C) i skydd
från drag, temperaturväxlingar och ljuskällor. Undvik förvaring Begränsningar av metoden
i närheten av värmekällor. Testerna får ej frysa. Om bakteriehalten överskrider 107 CFU/ml, eller om viskositeten
Utgångsdatum (år-månad-dag) är märkt på förpackningen och är hög, bör provet spädas.
på korken till varje rör. I undantagsfall växer bakterier på TTC mediet som färglösa
kolonier.
Provtagning och förfarande (Bild 1–5) Den lägsta tillförlitliga detektionsgränsen för bakterier är
För att undvika kontaminering, får tillväxtmediet ej komma i 103 CFU/ml.
kontakt med något annat material än det som skall testas. Växt av en del coccoidbakterier kan försvagas av TTC.
Å andra sidan, är det viktigt att tillväxtmediet kommer helt i
kontakt med materialet som skall testas. Avfall
All växt på sliderna kan vara patogen. Använda slider skall
Trögflytande vätskor och vätskor med hög bakteriehalt därför förstöras genom bränning eller, efter öppnande av röret,
(>107 CFU/ml) antingen genom autoklavering (en tryckkokare kan användas
Om viskositeten eller bakteriehalten är hög, bör provet spädas. för detta) eller nedsänkning i en desinfektionslösning över
Vid spädning, fyll 100 eller 1000 ml med drickbart kranvatten i en natten. Lokala lagar och föreskrifter skall alltid följas.
ren, välsköljd och torkad flaska med kork. Vattnet som används
för utspädning får ej ha en bakteriehalt överstigande 100 CFU/
ml. Innan fyllning av flaskan, låt vattnet rinna i 5 minuter eller
koka det i 15 minuter och låt sedan svalna. Använd en ren
(engångs-)pipett, tillsätt 1 ml av provet i flaskan. Tillslut flaskan
och blanda väl genom att skaka den ca 30 gånger. Doppa sliden
i lösningen och fortsätt enligt beskrivning för flytande prover.

Flytande prover
1 Ta ut sliden från röret utan att vidröra agarytorna.
2 Doppa sliden i vätskan. Alternativt kan sliden hållas under
en rinnande stråle av vätskan eller vätska sprejas på sliden.
Om vätskan är under tryck, måste sliden hanteras varsamt
för att undvika att agarn lossnar. Om provet är i en behållare,
blanda innehållet och doppa sliden i den.
Båda agarsidorna bör vätas helt. Sliden måste vara i kontakt
med vätskan i 5 till 10 sekunder.
3 Låt överskottsvätska rinna av sliden. Sug upp de sista
dropparna från nedre delen av sliden med ett absorberande
papper.
4 Efter provtagning, skruva tillbaka sliden tätt i röret. Fyll i
etiketten och fäst den på röret.
5 Inkubera sliden i 27…30°C i 24–48 timmar för upptäckt av
bakterier. Jäst och mögel behöver tre dagars inkubation
innan resultat kan avläsas. Vid inkubering i rumstemperatur,
är inkubationstiden 2–4 dygn respektive 4–7 dygn.
Om normaltemperatur för testade vätskor skiljer sig väsentligt
från inkubationstemperaturer enligt ovan, kan det resultera
i långsam växt av bakterier. En inkubationstemperatur
närmare vätskans normaltemperatur rekommenderas då.

Easicult® Combi Käyttöohje ● Suomi

Käyttötarkoitus Tuloksen tulkinta (kuva 6)


Easicult Combi on tarkoitettu mikrobiologisen puhtauden Kasvatuksen jälkeen testilevy otetaan pois putkesta ja
tarkkailuun eri tyyppisissä teollisuusympäristöissä. Testi mikrobimäärä (CFU = PMY, pesäkkeitä muodostava yksikkö)
voidaan tehdä paikan päällä ja se soveltuu hyvin myös näytteen määritetään vertaamalla levyn kasvitiheyttä käyttöohjeen
kuljetusalustaksi. mallitauluun. Huomaa, että TTC- ja Rose Bengal -elatusaineilla
Testilevyn toinen puoli on päällystetty kellertävällä TTC- on omat tulkintataulukot.
elatusaineella, jolla useimmat yleisimmistä bakteereista Jos näytettä on laimennettu, pitää laimennuskerroin ottaa
kasvavat. Toinen puoli on päällystetty punaisella Rose-Bengal huomioon tuloksessa seuraavan esimerkin mukaisesti: kun
-elatusaineella, jolla kasvavat sekä hiivat että homeet. laimennoskerroin on 1:100 (1 ml näytettä 100 ml:aan vettä)
Testin säännöllisellä käytöllä saadaan tärkeää tietoa kokonais- ja kasvutiheys on 106 PMY/ml, näytteen lopullinen tulos on
bakteerimääristä sekä hiivojen ja homeiden määristä ja niissä 108 PMY/ml. Vastaavasti laimennoksessa 1:1000 se olisi 109.
tapahtuvista muutoksista.
Rose-Bengal -agar, hiivojen ja homeiden toteamiseen
Testipakkauksen sisältö Rose-Bengal -elatusaineella näkyvä kasvu voi olla puhtaasti
homekasvua, puhtaasti hiivakasvua tai näiden kahden
Easicult Combi Tuotenumero 67987, 05984
sekakasvua. Homepesäkkeet ovat pehmeitä ja nukkaisia
Testiputket 10 kpl ja väriltään tasaisen vaaleita, vihreitä tai mustia. Hiivat taas
Näytetarrat 10 kpl kasvavat tavallisesti pallomaisina pesäkkeinä, mutta voivat
Käyttöohje 1 kpl joskus olla litteitä ja kuivia. Koska homepesäkkeet voivat saada
alkunsa rihmaston osista tai yksittäisistä itiöistä, ei vertailutaulun
Tyypillinen koostumus avulla saatu tulos ole kvantitatiivinen vaan osoittaa onko
kontaminaatio lievä (+), kohtalainen (++) vai voimakas (+++).
TTC Agar Rose-Bengal Agar Pesäkkeitä voidaan ottaa levyltä ja tarkastella mikroskoopilla.
Tryptoni Peptoni Hiiva- tai homekontaminaatio voidaan joskus nähdä paljaalla
Soijapeptoni Dextroosi silmällä mattomaisena kasvuna nesteen pinnalla.
Dinatriumsukkinaatti Kaliumvetyfosfaatti
TTC-liuos Magnesiumsulfaatti TTC-agar, kokonaisbakteerien määrittämiseen
Agar agar Natriumkloridi Useimmat aerobiset bakteerit kasvavat TTC-elatusaineella
Vesi Rose Bengal punaisina pesäkkeinä. Tulosten tulkinnassa tulee kuitenkin
Natriumhydroksidi huomioida myös värittöminä kasvavat pesäkkeet. Tulokseen
Gentamysinsulfaatti vaikuttaa ainoastaan pesäketiheys, ei pesäkkeiden koko. Myös
Kloramfenikoli hiivat ja homeet voivat kasvaa hitaasti tällä elatusaineella.
Agar agar Hyvin korkea bakteeripitoisuus (> 107 PMY/ml) muodostaa testi-
Vesi levylle mattomaisen kasvuston, joka näkyy tasaisen punaisena
pintana. Täysin väritön kasvusto on hyvin harvinainen. Koska
Turvamääräykset ja varotoimenpiteet väritön yhtenäinen kasvusto voidaan helposti tulkita väärin
Älä käytä tuotetta pakkaukseen merkityn vanhenemispäivä- negatiiviseksi tulokseksi, epäilyttävissä tapauksissa on
määrän jälkeen. suositeltavaa verrata ko. levyä käyttämättömän elatusaineen
Älä koske käyttämätöntä elatusainetta. pintaan tuloksen varmistamiseksi.
Älä käytä tuotetta, jos Koska mitään yleispäteviä raja-arvoja kriittisille mikrobimäärille
● elatusaineen väri on muuttunut tai se on kuivunut ei ole olemassa, ne määräytyvät yleensä tapauskohtaisesti
● elatusaine on irronnut levyltä käytännön kokemuksen mukaan. Seuraavia raja-arvoja1
● elatusaineella näkyy pesäkkeitä. voidaan pitää karkeana perustana arvioitaessa jäähdytysvesien
Kasvustoa ei tule koskettaa, koska elatusaineella kasvavat kontaminaatiota:
pesäkkeet saattavat olla tauteja aiheuttavia.
Bakteerit
Säilytys PMY/ml Kontaminaatio
Säilytä testipakkaus huoneenlämmössä (noin 20°C) vedolta,
< 104 lievä yleensä ei ongelmia1
lämpötilan vaihteluilta ja valonlähteiltä suojattuna. Vältä
104 – 106 kohtalainen
säilytystä lämpöä tuottavien laitteiden läheisyydessä. Levyt
> 106 voimakas ei hyväksyttävä1
eivät saa jäätyä. Vanhenemispäivämäärä (vuosi-kk-pv) on
merkitty sekä pakkaukseen että testiputken korkkiin. Menetelmän rajoitukset
Mikäli näytteen bakteerimäärä ylittää 107 PMY/ml, tai sen
Näytteenotto ja testin suorittaminen (kuvat 1–5) viskositeetti on suuri, näyte pitää laimentaa.
Näytteenoton yhteydessä on tärkeää, ettei elatusaine Bakteerit voivat kasvaa TTC-elatusaineella myös värittöminä
joudu kosketuksiin muun kuin varsinaisen näytteen tai pesäkkeinä, vaikkakin hyvin harvoin.
näytteenottokohdan kanssa. Toisaalta on tärkeää, että koko Testin herkkyysraja on 103 PMY/ml.
elatusainepinta joutuu kosketuksiin tutkittavan kohteen Joidenkin Coccoid-bakteerien kasvu voi heikentyä TTC-
kanssa. elatusaineella.
Viskoosit nesteet ja nesteet, joiden bakteeripitoisuus Testien hävittäminen
on korkea (>107 PMY/ml) Koska elatusaineella kasvavat pesäkkeet voivat olla tauteja
Jos näyte on hyvin viskoosi tai sen bakteeripitoisuus on korkea, aiheuttavia, käytetyt testilevyt on hävitettävä joko polttamalla,
näyte on ensin laimennettava. Ota laimennusta varten 100 tai autoklavoimalla tai pitämällä levyjä desinfektoivassa liuoksessa
1000 ml kylmää vesijohtovettä puhtaaseen, hyvin huuhdeltuun yön yli noudattaen paikallisia ohjeita ja määräyksiä.
ja kuivattuun korkilliseen pulloon. Koska käytettävän veden
bakteerimäärä ei saisi ylittää 100 pmy/ml, anna veden valua
hanasta 5 min ennen käyttöä TAI keitä vettä 15 min ja anna
jäähtyä. Lisää 1 ml tutkittavaa näytettä pulloon käyttäen
puhdasta (kertakäyttö)pipettiä. Sulje korkki ja sekoita kunnolla
kääntämällä pulloa ylösalaisin n. 30 kertaa. Kasta testilevy
laimennokseen ja jatka ohjeen mukaan (nestemäinen näyte).

Nestemäinen näyte
1 Kierrä testilevy ulos putkesta koskematta elatusaineeseen.
2 Kasta testilevy näytteeseen. Vaihtoehtoisesti voit kastella
levyn nestesuihkussa tai suihkuttaa nestettä levylle. Jos
neste on paineistettu, käsittele testilevyä varovaisesti, ettei
elatusaine pääse irtoamaan levyltä. Sekoita astiassa oleva
näyte huolellisesti ja upota testilevy siihen.
Testin molempien elatusainepintojen tulee kastua kokonaan.
Pidä testilevy näytteessä 5–10 sekuntia.
3 Anna ylimääräisen nesteen valua pois levyltä. Imeytä levyltä
valuva ylimääräinen neste puhtaaseen imupaperiin.
4 Kierrä testilevy näytteenoton jälkeen huolellisesti takaisin
putkeen. Täytä näytetarra ja kiinnitä putkeen.
5 Bakteerimääritystä varten levyjä kasvatetaan 24–48 tuntia
27…30°C lämpötilassa. Hiivat ja homeet tarvitsevat 3 päivän
kasvatuksen. Jos kasvatus tehdään huoneenlämmössä,
kasvatusaika on bakteereille 2–4 päivää ja hiivoille sekä
homeille 4–7 päivää.
Bakteerien kasvu voi olla hitaampaa, jos kasvatuslämpötila
eroaa paljon näytteen normaalista lämpötilasta. Siksi on
suositeltavaa, että kasvatuslämpötila on mahdollisimmin
lähellä näytteen normaalilämpötilaa.

You might also like