Maimun Z Arthamin Lab Patologi Klinik FKUB/RSSA
Maimun Z Arthamin Lab Patologi Klinik FKUB/RSSA
Maimun Z Arthamin Lab Patologi Klinik FKUB/RSSA
10
Teknik Pemeriksaan Imunoserologi
1. Imunopresipitasi
Non
Labellin 2. Aglutinasi, flokulasi
g 3. Fiksasi komplemen
4. Radioimmunoassay (RIA)
5. Enzyme immunoassay (EIA) atau
Enzyme linked immunosorbent
Labelling assay (ELISA)
6. Immunofluorescent (IF)
7. Immunochromatographic
technique (ICT)
11
Interaksi Antigen-Antibodi
Interaksi primer:
– Pengikatan Ag-Ab tingkat molekuler
– Memerlukan indikator/label (isotop, enzim, floresen)
– Sesuai utk pengukuran Ag/Ab dgn kadar yg rendah
Interaksi sekunder:
– Reaksi Ag-Ab bisa secara langsung atau dgn bantuan
komplemen
– Prinsip dasar : reaksi presipitasi/ aglutinasi
– Bila partikel Ag terikat latex atau eritrosit →
aglutinasi
Primary immune phenomena
Ag Ab Kompleks Imun
Tahap I
+
Tahap II Aglutinasi
Contoh-contoh pemeriksaan
aglutinasi
1. Aglutinasi direk
4. Hambatan aglutinasi
3. Fiksasi komplemen
Tahap :
1. Pengikatan sejumlah komplemen oleh kompleks Ag –
Ab
2. Penghancuran Eritrosit yg telah dilapisi hemolisin oleh
komplemen
Interpretasi :
+
tidak hemolisis
_
hemolisis
Contoh : Deteksi tripanosoma, virus
Tes Fiksasi Komplemen
Fiksasi komplemen Sistem hemolitik
Eritrosit
Ag
+
c ++
+ Hemolisin tidak hemolisis
? Ab
Eritrosit
Ag
++
+ +
c Hemolisin
C - Komplemen
hemolisis
Imunoasai berlabel
1. Radioimunoassai (RIA/IRMA)
2. Imunofloresen (IF)
4. Imunokromatografi (ICT)
1. Radioimunoasai
● Keuntungan:
Presisi baik and high sensitivity
Isotope conjugation lebih mudah
Signal detection tanpa optimalisasi
Lebih stabil terhadap interferensi environment
(pH, suhu)
Prinsip dasar RIA
E
+
E
E + E
E
E E
E
cuci
Ab pd fase Ag
padat berlabel Ag
Radiaton
counter
2. Imunofloresen assay (IFA)
Keuntungan:
Mudah dikerjakan
Relatif murah, simultan dgn pemeriksaan yg lain
Bahaya radioaktif (-)
One-step sandwich EIA
Imunokromatografi
Imunokromatografi
Lateral flow test
Membacanya cukup dgn mata saja
Tidak membutuhkan substrat
Penggunaan colloidal gold waktu inkubasi pendek (<15
menit)
Kerugian :
Nitrocelulose membrane tdk stabil pada suhu ↑
Keuntungan :
Prosedur cepat (<15 menit) dan praktis
Nilai diagnostik baik
Stabil untuk jangka panjang
Relatif tidak mahal
Prinsip dasar ICT