Insertos Varios

Diagno sticadores para Qu mica Clni ca Microbiologa
Empres a de Produccin de Biolgicos Carlos J. Finlay
2003
ALT-test
DIAGNOSTICOS
Test Enzimtico (200 determinaciones)

JUEGOS
TCNICA DE ANLISIS
ENSAYO Blanco 2 mL ENSAYO Muestra 2 mL 200L
CONTENIDO DEL ESTUCHE:

Reactivo 1: ALT/Buffer (3 frascos por 122 mL ) Reactivo 2: ALT/NADH (3 frascos por 14 mL )
ALT-test
APLICACIN:
Para la determinacin de Alanina-aminotransferasa en suero por mtodo enzimtico. "PARA USO IN VITRO".
Reactivo de trabajo Agua purificada Muestra
Mezclar e incubar a 37 C durante 1 min . Medir la variacin de densidad ptica por minuto ( DO/min) durante 3 min a 37 C contra el blanco a 340 nm .
MATERIALES ADICIONALES: Espectrofotmetro UV para lecturas a 340 nm, bao termostatado, micropipetas, pipetas y cronmetro PRINCIPIO DEL MTODO:
Reaccin enzimtica de la Alanina-aminotransferasa presente en la muestra, cuya actividad es proporcional a la oxidacin del NADH que se cuantifica por espectrofotometra, segn las reacciones que se describen a continuacin:
L- alanina + -cetoglutarato Piruvato + NADH + H+ ALT Piruvato + L-glutamato LDH Lactato + NAD+ + H 2O
CLCULO DE LA ACTIVIDAD DE ALT:

Actividad (U/L) = DO/min x 1746 Donde: Actividad (U/L): actividad de ALT de la muestra. DO/min : variacin de densidad ptica obtenida en los 3 min 1746: factor de actividad enzimtica.
INTERVALO DE REFERENCIA: Hasta 49 U/L a 37 C

CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Suero Control para enzimas de origen humano con valores conocidos de actividad de Alanina-aminotransferasa.
CV 7 %
ALT = Alanina-aminotransferasa NADH = Dihidronicotinamida-adenina-dinucletido LDH = Lactato deshidrogenasa NAD+ = Nicotinamida-adenina-dinucletido
MATERIALES DE REFERENCIAS UTILIZADOS:

Suero Control Suero Control Suero Control Suero Control Suero Control Precipath U Boehringer Cat. No.188 006 Biorad Normal Cat. No. 310-5 Biorad Patolgico Cat. No. 315-5 Elitrol Normal Cat. No. 104 Elitrol Patolgico Cat. No 203 ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C PRECAUCIONES: Los componentes del juego
CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL MTODO: Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de actividad de ALT de 15 a 250 U/L Lmite de deteccin: 3 U/L Lmite de cuantificacin: 15 U/L Densidad ptica del blanco reactivo a 340 nm: De 1,100 a 1,850 Interferencias: Concentraciones de hemoglobina
superiores a 2g/L y de colesterol superiores a 10,4 mmol/L, disminuyen la actividad de ALT. Concentraciones de triglicridos superiores a 11,4 mmol/L sobrestiman los valores normales de ALT .
contienen azida sdica, maniplense con cuidado. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. 2. 3. 4. Bergmeyer,H.U., Horder, M., J. Clin Chem. Clin. Biochem., 18, (1980), 521. Siest, G. ,Schiele, F.,Galteau M.M et coll., Clin Chem., 21, (1975), 1077. Vassault, A. Gafmeyer, D. et coll., Ann. BIOL. Clin., 44 (1986),686. Wrobleskwski, F. et Ladue, J.S., Proc. Soc. Exp. Biol. Med.,91 (1956),569.
PREPARACIN DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:

Reactivo de trabajo: Mezclar 10 volmenes del Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2. Deseche el resto del reactivo de trabajo preparado. Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses conservados de 2 a 8 C
MUESTRA : Suero
AST-test
DIAGNOSTICOS

AST-test
MUESTRA: Suero
TCNICA DE ANLISIS ENSAYO Blanco 2 mL ENSAYO Muestra 2 mL 200L

Reactivo 1: AST/Buffer ( 3 frascos por 122 mL ) Reactivo 2: AST/NADH ( 3 frascos por 14 mL )
APLICACIN :
Para la determinacin de Aspartato-aminotransferasa en suero por mtodo enzimtico. "PARA USO IN VITRO".
MATERIALES ADICIONALES:
Espectrofotmetro UV para lecturas a 340 nm bao termostatado, micropipetas, pipetas y cronmetro
Mezclar e incubar a 37 C durante 1 min . Medir la variacin de densidad ptica por minuto ( DO/min) durante 3 min a 37 C contra el blanco a 340 nm .
CLCULO DE LA ACTIVIDAD DE AST:

Actividad (U/L) = DO/min x 1746 Donde: Actividad (U/L): actividad de AST de la muestra. DO/min : variacin de densidad ptica obtenida en los 3 min 1746: factor de actividad enzimtica.
PRINCIPIO DEL MTODO:

Reaccin enzimtica de la Aspartato-aminotransferasa presente en la muestra, cuya actividad es proporcional a la oxidacin del NADH que se cuantifica por espectrofotometra, segn las reacciones que se describen a continuacin:
AST L- aspartato + -cetoglutarato oxalacetato + NADH + H+ MDH oxalacetato + L-glutamato L-malato +NAD+ + H 2O
INTERVALO DE REFERENCIA: Hasta 46 U/L a 37 C CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:

Suero Control para enzimas de origen humano con valores conocidos de actividad de Aspartato-aminotransferasa.
AST = Aspartato-aminotransferasa NADH = Dihidronicotinamida-adenina-dinucletido MDH = Malato deshidrogenasa NAD+ = Nicotinamida-adenina-dinucletido
CV 7 %
MATERIALES UTILIZADOS:
Suero Control Suero Control Suero Control Suero Control Suero Control
DE
REFERENCIAS
CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL METODO:

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de actividad de AST de 5 a 250 U/L Lmite de deteccin: 3 U/L Lmite de cuantificacin: 5 U/L Densidad ptica del blanco reactivo a 340 nm: De 1,10 a 1,85 Interferencias: Concentraciones de hemoglobina
superiores a 1 g/L y de colesterol superiores a 9 mmol/L disminuyen la actividad de AST Concentraciones de triglicridos superiores a 6,9 mmol/L sobrestiman los valores normales de AST.
Precipath U Boehringer Cat. No.188 006 Biorad Normal Cat. No. 310-5 Biorad Patolgico Cat. No. 315-5 Elitrol Normal Cat. No. 104 Elitrol Patolgico Cat. No 203
ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C PRECAUCIONES: Los componentes

contienen azida sdica, maniplense con cuidado
del juego
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
1. 2. 3. IFCC/EPE Provisional recomendations.Part 2.Clin. Chim. Acta 80,(1977),F21. Siest, G. ,Schiele, F.,Galteau M.M et coll., Clin Chem., 21, (1975), 1077. Vassault, A. Gafmeyer, D. et coll., Ann. Biol. Clin., 44 (1986),686.

Reactivo de trabajo: Mezclar 10 volmenes del Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2. Deseche el resto del reactivo de trabajo preparado. Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses conservados de 2 a 8 C
Calcio en suero
DIAGNOSTICOS 120 determinaciones
Calcio en suero
Dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente y homogeneizar perfectamente ante de usar. MUESTRA: Suero TECNICA DE ANALISIS Ensayo Ensayo Ensayo Blanco Muestra Referencia Reactivo 3 0,05 mL Muestra 0,05 mL Reactivo 1 2,00 mL 2,00 mL 2,00 mL Reactivo 2 2,00 mL 2,00 mL 2,00 mL Agua 0,05 mL Purificada Leer los valores de absorbancia contra blanco a 570 nm. El color desarrollado es estable 30 min. CALCULO DE LA CONCENTRACION DE CALCIO Am Cm = ----------- x Cr Ar Donde:
Cm: Concentracin de Calcio en la muestra (mmol/L)

Reactivo 1: 2, 2 Aminometilpropanol 3,5 mol/L (2 frascos x 120 mL) Solucin Reguladora Reactivo 2: Solucin reactivo de color (2 frascos por 120 mL) Reactivo 3: Calcio 2,5 mmol/L. Solucin de referencia (1 frasco por 3 mL)
APLICACIN:
Para la determinacin de Calcio en suero por mtodo colorimtrico de ocresolftalena complexona. PARA USO IN VITRO
Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 570 nm Solucin de Acido clorhdrico 0,5 mol/L
PRINCIPIO DEL METODO:

El Calcio forma un complejo violeta con ocresolftalena complexona en medio alcalino que se mide por espectrofotometra a 570 nm.

Linealidad: El reactivo es lineal de 1,98 mmol/L a 3,5 mmol/L Especificidad: No se reportan interferencias con los compuestos siguientes: Hemoglobina Hasta 1,5 g/L Bilirrubina Hasta 0,2 g/L 342 mol/L Magnesio Hasta 0,1 g/L 4,113 mmol/L Fosfatos Hasta 0,2 g/L 6,458 mmol/L Protenas Hasta 1,5 g/L Los anticoagulantes quelantes de Calcio (EDTA, oxalato, etc) interfieren en la determinacin Recuperacin: 99,5 % de recobro Precisin: Repetibilidad CV = 1,72% Reproducibilidad: CV = 2,29% Exactitud: y= 0,924x + 0,31 r= 0,983 Limitaciones del mtodo : Debe emplearse una curva de calibracin con valores entre 0,1 y 0,2 g/L para evitar desviaciones de la Ley Lambert-Beer al realizar los clculos. PREPARACION DE LOS REACTIVOS: Los reactivos estn listos para usar NOTA:
Am: Absorbancia de la muestra Ar: Absorbancia de la referencia Cr: Concentracin de Calcio en la referencia (mmol/L)
INTERVALO DE REFERENCIA:
De 2,02 a 2,60 mmol/L CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Suero control con valores conocidos de Calcio CV 5%. ADVERTENCIA: Tratar toda la cristalera con cido clorhdrico 0,5 mol/L antes de ser utilizada ya que esta reaccin puede dar interferencia con otros iones metlicos. ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS :
Barnett, R.N. etal (1973) Amer. J. Clin. Path. 59:8
CK
DIAGNOSTICOS

CK
TCNICA DE ANLISIS
Ensayo Muestra

Reactivo 1: CK/HK (3 frascos por 80 mL) Reactivo 2: CK/G6PDH (3 frascos por 20 mL)
Reactivo de trabajo Muestra
1 mL 40 L
Mezclar e incubar a 37 0 C durante 2 min. Leer la variacin de absorbancia de la muestra durante 3 min contra agua purificada a 340 nm a 37 C CLCULO DE LA CONCENTRACIN DE CK U/L = Abs/min x 4127 Donde: U/L: Actividad enzimtica de CK en la muestra Abs/min: Variacin de la absorbancia de la muestra por minuto 4127: Factor de actividad enzimtica INTERVALO DE REFERENCIA: Hombres: 24 a 195 U/L (37 o C) Mujeres: 24 a 170 U/L (37 o C) CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Suero Control para enzimas de origen humano con valores de actividad de Creatina-cinasa comprendidos dentro del intervalo de referencia declarado. CV 10 % MATERIALES DE REFENCIA UTILIZADOS
Elitrol I Cat. No CONT - 0060 Elitrol II Cat. No CONT - 0160 CK LINTROL SIGMA C-1773 CK ISOTROL SIGMA C-0153
APLICACIN PROPUESTA:
Para la determinacin de Creatina-cinasa en suero por mtodo enzimtico."PARA USO IN VITRO".
Espectrofotmetro para lecturas a 340 nm, micropipetas, pipetas, bao termostatado y cronmetro

Determinacin de la actividad de Creatina-cinasa (CK) en suero, midiendo la velocidad de formacin de NADPH a 340 nm, segn el siguiente esquema de reacciones:
Creatina-cinasa Creatina fosfato + ADP Creatina + ATP Hexocinasa ATP + Glucosa ADP + Glucosa 6 fosfato
Glucosa-6-fosfato-1-deshidrogenasa Glucosa 6 fosfato + NADP Gluconato 6 fosfato + NADPH + H+

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de concentracin de Creatina-cinasa de 10 a 1800 U/L Lmite de deteccin: 1 U/L Lmite de cuantificacin: 10 U/L Densidad ptica del blanco reactivo a 340 nm:
ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C
PRECAUCIONES: Los componentes del juego contienen azida sdica, maniplense con cuidado. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
1. 2. Muller, m., Sterz, f., Binder, m., Hirsch, m.m. et coll. Creatine kinase and creatine kinase-mb: release after nontraumatic cardiac arrest. Am. J. Cardiol. 1996, 77, 581 . Lott, J. A., Heinz, J.W. et Reger, K. A. Time Changes of Creatine Kinase and Creatine Kinase-MB Isoenzyme versus Discrimation Values in the Diagnosis of Acute Myocardial Infarction: What is the Optimal Method for Displaying the Data?. Eur.J.Clin.Chem. Clin. Biochem. 1995, 33/8, 491
Menor que 0,600

Interferencias: Concentraciones de triglicridos mayores de 6,84 mmol/L y de inmunoglobulinas de 40 g/L o ms, disminuyen la concentracin de Creatina-cinasa en el suero humano PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO Y ESTABILIDAD DEL MISMO: Aadir el contenido del frasco del Reactivo 2 al frasco del Reactivo 1 .Estabilidad 15 das de 2 a 8 C. Mezclar 4 volmenes del Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2.
Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses conservados de 2 a 8 C
MUESTRA : Suero
CK-MB
DIAGNOSTICOS

CK-MB
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO Y ESTABILIDAD DEL MISMO:

Aadir el contenido del frasco del Reactivo 2 al frasco del Reactivo1 Mezclar 4 volmenes del Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2. Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses conservados de 2 a 8 C

Reactivo 1: CK-MB/AB (3 frascos por 80 mL) Reactivo 2: CK-MB/G6PDH (3 frascos por 20 mL)
APLICACIN :
Para la determinacin de Creatina-cinasa 2 (CK-MB) en suero por mtodo enzimtico."PARA USO IN VITRO". MATERIALES ADICIONALES : Espectrofotmetro para lecturas a 340 nm, micropipetas, pipetas, bao termostatado y cronmetro. PRINCIPIO DEL MTODO: La determinacin de Creatina-cinasa 2 en suero se basa en la inhibicin especfica de las subunidades CK-M por anticuerpos policlonales anti CK-MM. Los anticuerpos inhiben tanto la isoenzima MM como las subunidades M correspondientes a la CK-MB. La determinacin de la actividad enzimtica de las subunidades B se realiza midiendo la velocidad de formacin de NADPH a 340 nm segn el esquema de reacciones siguiente:
Creatina-cinasa Creatina fosfato + ADP Creatina + ATP Hexocinasa ATP + Glucosa ADP + Glucosa 6 fosfato Glucosa-6-fosfato-1-deshidrogenasa Glucosa 6 fosfato + NADP Glucosa 6 fosfato + NADPH + H+
MUESTRA : Suero TCNICA DE ANLISIS

Ensayo Muestra Reactivo de trabajo 1 mL Muestra 40 L Mezclar e incubar a 37 C durante 2 min y leer la variacin de absorbancia de la muestra durante 3min a 340 nm contra agua purificada a 37 C
CLCULO DE LA CONCENTRACIN DE CK-MB. U/L = Abs/min x 8254 Donde: U/L: Actividad de CK-MB en la muestra Abs/min: Variacin de absorbancia de la muestra por minuto 8254: Factor de actividad enzimtica
(CK-MB x 100) % CK-MB =----------------------: 6-25% Total CK

Precisin: CV 10 % Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de concentracin de CK-MB de 10 a 600 U/L Lmite de deteccin: 1 U/L Densidad ptica del blanco reactivo a 340 nm:< 0,600
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Suero Control para enzimas de origen humano con valores de actividad de CK-MB comprendidos dentro del rango declarado. CV 10 %
MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS :
CK-MB LINTROL SIGMA C-5803 CK-MB ISOTROL SIGMA C-5410
Interferencias: Concentraciones de triglicridos

mayores de 6,84 mmol/L y de inmunoglobulinas de 40 g/L o ms, disminuyen la concentracin de CK-MB en el suero humano. El nivel posible de interferencia por presencia de la macro CK tipo 2 y la CK-BB es menor que el 0,48 % o sea, en no ms de 5 muestras de cada 100, que correspondan a pacientes con intervenciones quirrgicas de corazn o con enfermedades neoplsicas, se detecta incremento en los niveles de estas isoenzimas .
ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 0C PRECAUCIONES: Los componentes del juego

contienen azida sdica, maniplense con cuidado.
1. 2. Wong, S.S. Strategic Utilization of Cardiac Markers for the Diagnosis of Acute Myocardial Infarction. Annals of Clinical Laboratory Science. 1996, 26/4, 301. Wu, A.H.B., Feng, Y.J., Contois, J.H. et Pervaiz, S. Comparison of Myoglobin, CreatineKinase-MB, and Cardiac Troponin I for Diagnosis of Acute Myocardial Infarction. Annals of Clinical and Laboratory Science. 1996, 26/4, 291.
Colestest
DIAGNOSTICOS
Test Enzimtico Colorimtrico (360 Determinaciones)

Colestest
Tcnica de Anlisis
ENSAYO ENSAYO Blanco Muestra 2 mL 2 mL 20L 20L ENSAYO Referencia 2 mL 20L -
CONTENIDO DEL ESTUCHE Reactivo 1: Reactivo de Colesterol (6 frascos por 120 mL) Reactivo 2: Colesterol 5,17 mmol/L Solucin de referencia (1 frasco por 5 mL) APLICACIN PROPUESTA Para la determinacin de Colesterol en suero por mtodo enzimtico. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 500 nm (492 a 550) PRINCIPIO DEL METODO: Reaccin enzimtica del Colesterol presente en la muestra, segn las reacciones que se describen a continuacin, formndose un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.
CE Esteres de Colesterol grasos CO Colesterol + O 2 Colesterol + cidos
Reactivo de trabajo Agua purificada Solucin de referencia Muestra
Mezclar e incubar a 37C, durante 5 min. Leer los valores de absorbancia de la muestra y la referencia contra el blanco a 500 nm (492 a 550). El color desarrollado es estable 60 min CALCULO DE LA CONCENTRACION DE COLESTEROL. Cm = Am x Cr/Ar Donde: Cm: Concentracin de la muestra (mmol/L) Am: Absorbancia de la muestra Ar: Absorbancia de la referencia Cr: Concentracin de la referencia (mmol/L) INTERVALO DE REFERENCIA: De 3,87 a 6,71 mmol/L CONTROL INTERNO DE LACALIDAD: Suero Control de lpidos. CV 5%
MATERIALES DE REFENCIA UTILIZADOS
4-colesten-3-ona + H2O 2 POD
2H2 O2 + Fenol + 4 aminoantipirina quinonimina roja + 4H 2O

CE: Colesterol esterasa CO: Colesterol oxidasa POD: Peroxidasa
ELICAL. Firma Elitech Cat. No Cali-0500 Elitrol I Cat. No CONT-0060 Elitrol II Cat. No CONT-0160 ALMACENAMIENTO: Para el producto intacto: de 2 a 8 C Y El reactivo en uso es estable al menos un mes de 2a8C REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. Allain C. C y colaboradores., Clin. Chem., 20, (1974), 470
CRITERIO DE DESEMPEO LIMITACIONES DEL METODO:
LINEALIDAD : El reactivo es lineal en rango de concentracin de Colesterol de 0,5 a 15,51 mmol/L Limite de deteccin: 0,07 mmol/L Interferencias : No hay interferencia de triglicridos hasta una concentracin de 5,7 mmol/L, glucosa 55 mmol/L, cido ascrbico hasta 0,28 mmol/L y hemoglobina hasta 5 g/L.
PREPARACION DEL REACTIVO:

Los reactivos estn listos para usar
MUESTRA: Suero
FAL-test
DIAGNOSTICOS TCNICA DE ANLISIS

FAL-test

Reactivo 1: FAL /Dietanolamina 1,427 mol/L (3 frascos por 80 mL) Reactivo 2: FAL/p-nitrofenilfosfato 50 mmolL (3 frascos por 20 mL)
ENSAYO ENSAYO Blanco Muestra 2 mL 2 mL 40L
APLICACIN :
Para la determinacin de Fosfatasa alcalina en suero por mtodo cintico. "PARA USO IN VITRO".
Mezclar e incubar a 37 C durante 1 min. Medir la variacin de densidad ptica por minutos ( DO/min) durante 3 min a 37 C contra el blanco a 405 nm.
CLCULO DE LA ACTIVIDAD DE FOSFATASA ALCALINA:

Actividad (U/L) = DO/min x 2750 Donde: Actividad (U/L): actividad de Fosfatasa alcalina en la muestra. DO/min : variacin de densidad ptica obtenida en los 3 min. 2750: factor de actividad enzimtica.
Espectrofotmetro UV para lecturas a 405 nm, Bao termostatado, Micropipetas, pipetas y Cronmetro

Reaccin cintica de la Fosfatasa alcalina presente en la muestra, cuya actividad es proporcional al pnitrofenol que se produce debido a la hidrlisis del p-nitrofenilfosfato, que se determina espectrofotometricamente segn las reacciones que se describen a continuacin:
Fosfatasa alcalina
Nios : De 180 a 1200 U/L ( 37 C) Adultos: De 100 a 290 U/L ( 37 C)

Suero Control para enzimas de origen humano con valores conocidos de actividad de Fosfatasa alcalina. CV 5 %
p-nitrofenilfosfato + H 2O
p- nitrofenol + fosfato inorgnico

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de actividad de Fosfatasa alcalina de 10 a 700 U/L. Lmite de deteccin: 7,5 U/L Lmite de cuantificacin: 10 U/L Densidad ptica del blanco reactivo a 405 nm : De 0,200 a 1,100 Interferencias: Concentraciones de hemoglobina superiores a 4g/L, disminuyen la actividad de Fosfatasa alcalina en sueros normales.
MATERIALES DE REFERENCIAS UTILIZADOS:

Suero Control Precinorm U Boehringer Cat. No.188 027 Suero Control Precipath U Boehringer Cat. No.188 006 Suero Control Seronorm de Nycomed Cat. No.406 067 Suero Control Elitrol Normal Cat. No. 104 Suero Control Elitrol Patolgico Cat. No 203
ALMACENAMIENTO:
De 2 a 8 C
PRECAUCIONES: Los componentes del juego

contienen azida sdica, maniplense con cuidado

Aadir el contenido del frasco del Reactivo 2 al frasco de Reactivo 1. Estabilidad 30 das de 2 a 8 C o Mezclar 4 volmenes del Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2. Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses conservados de 2 a 8 C
1. 2. 3. Bessey,O.,Lowry, O.H. y Brock, M.J. J. Biol. Chem. 164 (1946),321. Kuwana, T. y Rosalki,S.B.J.Clin. Pathol.44, (1991),817. Vassault, A. Gafmeyer, D. et coll., Ann. Biol.. Clin., 44 (1986),686.
MUESTRA : Suero. Evitar el uso de anticoagulantes

como el citrato, el oxalato y el EDTA.
Hierro
DIAGNOSTICOS
Test Colorimtrico 480 determinaciones

Hierro
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Reactivo 1: Guanidina HCl 4,5 mol/L (4 frascos por 120 mL) Reactivo 2: Acido ascrbico (1 frasco por 2 g) Reactivo 3: Ferrozina 41,0 mmol/L (1 frasco por 26 mL) Reactivo 4: Hierro 17,9 mol/L Solucin de referencia ( 1 frasco por 5 mL ) APLICACIN : Para la determinacin de Hierro en suero por mtodo colorimtrico." PARA USO IN VITRO". MATERIALES ADICIONALES: Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 560 nm, micropipetas, pipetas, bao termostatado y cronmetro PRINCIPIO DEL MTODO:
El hierro srico se libera de su unin con su protena transportadora especfica, la transferrina; el mtodo se basa en la presencia de guanidina en el reactivo, en forma de hidrocloruro, con el objetivo de desnaturalizar las protenas, particularmente la transferrina, con la liberacin de la cantidad mxima de Fe (III), el cual es reducido por el cido ascrbico a Fe (II), quien reacciona con el cromgeno Ferrozina basado en el siguiente esquema reaccionante: Protenas + Guanidina HCl Acido ascrbico Fe 3+ + 1eFe 2+ + Ferrozina Protenas + Fe 3+ desnaturalizadas Fe 2+ Complejo coloreado mx = 560 nm
Reactivo de trabajo Agua purificada Muestra Reactivo 4
ENSAYO ENSAYO Blanco Muestra 1 mL 1 mL 200L 200L -
ENSAYO Referencia 1 mL 200L
Mezclar y leer la densidad ptica de la muestra (DO2) y la referencia (DO1) contra blanco a 560 nm
ENSAYO ENSAYO Blanco Muestra ENSAYO Referencia
Reactivo 3
50 L
50 L
50 L
Mezclar y leer la densidad ptica de la muestra (DO4) y la referencia (DO3) contra blanco a 560 nm El color es estable 1 hora . CLCULO DE LA CONCENTRACIN DE HIERRO:
(DO4 - DO2) Conc = ------------------- x n (DO3 - DO1) Donde: n = 17,9 mol/L
INTERVALO DE REFERENCIA: Hombres y Mujeres de 8,95 a 30 mol/L CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Suero Control con valores de concentracin conocidos de Hierro a niveles normales y patolgicos. CV 5 % MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS :
PN: Suero Control Precinorm U Boehringer Cat. No 188 027 PP: Suero Control Precipath U Boehringer Cat. No 188 006 EN: Suero Control Normal SEPPIM Cat. No 104 EP: Suero Control Patolgico SEPPIM Cat. No 203 SN: Suero Control SERONORM de NYCOMED Cat. No 406 067 ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C PRECAUCIONES: Tratar la cristalera con solucin de HCl 1,2 mol/L y no trabajar con materiales metlicos. El reactivo 1 contiene guanidina por lo que debe usarse guantes para su manipulacin. Mantener el frasco del Reactivo 2 hermeticamente cerrado . REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
1. 2. Stookey,L.L. Ferrozine-a new spectrophotometric reagent for iron. Anal. Chem. 1970,42,779. Yamanishi, H., Kimura, S., Yamaguchi, Y. and Yanagihara, T. Fully automated measurement of total iron-binding capacity in serum. Clin. Chem. 1997, 43:12,2413.

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de concentracin de Hierro de 5,549 a 161,1 mol /L Lmite de deteccin: 0,150 mol /L Lmite de cuantificacin: 2,685 mol/L Densidad ptica del blanco reactivo a 560 nm: menor que 0,050 Interferencias: Concentraciones de colesterol mayores de 2g/L y la presencia de hemoglobina interfieren considerablemente en la determinacin de Hierro en el suero humano.
PREPARACIN DEL REACTIVO Y ESTABILIDAD DEL MISMO: Reactivo de trabajo: Disolver 150 mg del Reactivo 2 con 50 mL del Reactivo 1 Estabilidad del reactivo de trabajo: 15 das de 2 a 8C Reactivos 3 y 4: Listos para usar Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses conservados de 2 a 8 C MUESTRA: Suero TCNICA DE ANLISIS
Juego de Reactivos para la determinacn de Cloruro en suero

100 determinaciones
Juego de Reactivos para la determinacin de Cloruro en suero

Reactivo 1: Difenilcarbazona (1 frascos por 30 mg) Reactivo 2: Nitrato de Mercurio (2 frascos por 100 mL) Reactivo 3: Cloruro (1 frasco por 50 mL)
CALCULO DE LA CONCENTRACION DE CLORURO

Cr x Vm Cm = ---------------- x 10 Vr Donde: Cm: Concentracin de la muestra (mmol/L) Vm: Volumen de la solucin de nitrato de mercurio consumido por la solucin por la muestra Vr: Volumen de la solucin de nitrato de mercurio consumido por la solucin de referencia Cr: Concentracin de la referencia 10: Factor de dilucin
APLICACIN:
Para la determinacin de Cloruro en suero por mtodo de Schales, O. And Schales. PARA USO IN VITRO
Pipetas, tubos para ensayos
De 98 a 108 mmol/L

El Cloruro presente en el plasma o suero se titula con una solucin de nitrato de mercurio en presencia de difenilcarbazona como indicador. El punto final se aprecia por la aparicin de una coloracin azul violeta estable.

Suero control de parmetros qumicos.
ALMACENAMIENTO:
De 2 a 8 C
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:

Reactivo de trabajo: Completar el Reactivo 1 con 30 mL de alcohol etlico clase A. Guardar en frasco mbar de 2 a 8 C. Estable 1 mes Los Reactivos 2 y 3 estn listos para usar
Manual of Routine Methods in Clinical Chemestry for use in intermediate Laboratories. Lab 78/
NOTA:
Dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente y homogeneizar perfectamente ante de usar.
MUESTRA: Suero o plasma TECNICA DE ANALISIS

1. Pipetear en tubos para ensayos o en frascos de fondo plano 0,2 mL de suero y 1,8 mL de agua purificada Aadir 4 gotas del reactivo de trabajo y titular con el Reactivo 2 hasta la aparicin de una coloracin azul violeta estable. Repetir los pasos 1 y 2 pero usando 2 mL del Reactivo 3 en lugar de suero y agua purificada. Este paso debe efectuarse diariamente y cuando cambie el analista
2.
3.
RapiGluco-Test
Enzimtico - Colorimtrico 100 determinaciones
RapiGluco-test
TECNICA DE ANALISIS
Ensayo Blanco Reactivo de Trabajo Muestra Solucin de referencia Agua purificada 4,0 mL 0,04 mL Ensayo Muestra 4,0 mL 0,04 mL Ensayo Referencia 4,0 mL 0,04 mL -

4 frascos por 120 mL
APLICACIN:
Para la determinacin de Glucosa en suero por mtodo enzimtico colorimtrico. PARA USO IN VITRO
Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 620 nm Solucin de referencia de Glucosa Bao termostatado
Mezclar e incubar a 37 C durante 10 min. Leer los valores de absorbancia del suero y la referencia contra blanco a 505 nm. Color desarrollado estable 1 h.

Reaccin enzimtica de la Glucosa presente en la muestra, segn las reacciones que se describen a continuacin, formndose un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra. GOD Glucosa + O2 Acido glucnico + H2 O2 POD H2 O2 + 4 aminofenazona Quinonimina + H2 O
CALCULO DE LA CONCENTRACION DE GLUCOSA

Am Cm = ----------- x Cr Ar Donde: Cm: Concentracin de la muestra (mmol/L) Am: Absorbancia de la muestra Ar: Absorbancia de la referencia Cr: Concentracin de la referencia (mmol/L)
De 4,20 a 6,11 mmol/L

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de 2,0 a 22,0 mmol/L

Suero control de parmetros qumicos. CV < 5
PREPARACION DE LOS REACTIVOS:

El reactivo est listo para usar
ALMACENAMIENTO:
De 2 a 8 C
ADVERTENCIA:
El reactivo puede desarrollar una ligera coloracin rosada que no afecta su funcionamiento. Se recomienda no usarlo cuando las lecturas del blanco sean superiores a 0,16
1. Trinder, P. Ann. Biochem 6.24, (1969) Henry, RJ,: Cannon, D.C; Winkelman, J. W.: Qumica Clnica. Bases yy Tcnicas. Editorial Jims. 2da Edicin. Tomo II (1980)
MUESTRA: Suero
SalicUrea-test
Test Enzimtico Colorimtrico 50 determinaciones
SalicUrea-test
MUESTRA: Suero o plasma TECNICA DE ANALISIS

Ensayo Blanco Ensayo Muestra Ensayo Referencia

Reactivo 1: Urea, solucin de referencia ( 1 frasco por 2 mL) Reactivo 2: Ureasa, liofilizada de 4 a 10 U/mL (1 bulbo) Reactivo 3: Solucin reactivo color (1 frasco por 100 mL) Reactivo 4: Solucin reactivo alcalino ( 1 frasco por 100 mL)
APLICACIN:
Para la determinacin de Urea en suero por mtodo enzimtico colorimtrico. PARA USO IN VITRO
Agua 0,02 mL purificada Muestra 0,02 mL Reactivo 1 0,02 mL Reactivo de 2,0 mL 2,0 mL 2,0 mL Trabajo Mezclar e incubar a 37 C durante 5 min. Reactivo 4 2,0 mL 2,0 mL 2,0 mL Mezclar e incubar a 37 C durante 5 min. Leer los valores de absorbancia de la muestra y la referencia contra blanco a 620 nm. Color desarrollado estable 1h. CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 620 nm, bao termostatado, pipetas.
UREA
Am Cm = ----------- x Cr Ar Donde: Cm: Concentracin de la muestra (mmol/L) Am: Absorbancia de la muestra Ar: Absorbancia de la referencia Cr: Concentracin de la referencia (mmol/L)

Reaccin enzimtica de la Urea presente en la muestra, segn las reacciones que se describen a continuacin, formndose un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra. Ureasa Urea + 2H2 O 37 C
NH3 + NaCLO + Salicilato de sodio
Acido Carbnico + 2NH3 Na 2 Fe (CN)5 NO Indofenol NaOH + H2 O De 1,7 a 8,3 mmol/L

Suero control de parmetros qumicos. CV < 7 %

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de 1,5 a 26,0 mmol/L
ALMACENAMIENTO:
De 2 a 8 C REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
Tabbacco. A, Melattini, F; Moda, E; Tarli, P: Clin. Chemn, 25, 336 a 337, (1979) Henry, RJ,: Cannon, D.C; Winkelman, J. W.: Qumica Clnica. Bases yy Tcnicas. Editorial Jims. 2da Edicin. Tomo II (1980) 1.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS:

Reactivo de trabajo: Tomar un bulbo de la enzima (Reactivo 2) y restituir con el contenido de un frasco de Solucin Reactivo Color (Reactivo 3). Mezclar suavemente por inversin. Reactivo 1 y 4: Listos para usar
ADVERTENCIA:
Al preparar el reactivo de trabajo no debe agitarse pues podra causar la desnaturalizacin de la enzima.
Triglitest
DIAGNOSTICOS

Triglitest
Mezclar 20 volmenes del Reactivo 1 con un volumen del Reactivo 2. Estabilidad: 1 mes de 2 a 8 C
CONTENIDO DEL ESTUCHE Reactivo 1: Triglicridos/LPL (4 frascos por 122 mL) Reactivo 2: Triglicridos/GPO (1 frasco por 26 mL) Reactivo 3: Glicerol 2,28 mmol/L Solucin de referencia (1 frasco por 5 mL) APLICACIN PROPUESTA Para la determinacin de Triglicridos en suero por mtodo enzimtico. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 546 nm (520 a 570) PRINCIPIO DEL METODO:
Reaccin enzimtica de los Triglicridos presente en la muestra, segn las reacciones que se describen a continuacin, formndose un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.
LPL Triglicridos + H2O Glicerol + cidos grasos GK Glicerol + ATP Glicerol-3-fosfato +ADP Mg + + GPO Glicerol-3-fosfato + O 2
MUESTRA: Suero
TCNICA DE ANLISIS
ENSAYO ENSAYO Blanco Muestra 2 mL 2 mL 20L 20L ENSAYO Referencia 2 mL 20L -
Reactivo de trabajo Agua purificada Solucin de referencia Muestra
Fosfato Dehidroxiacetona
+H2 O2
POD 2H2 O2 + 4 aminoantipirina +ADPS quinonimina roja + 4H2 O ADPS=N-Ethyl-N-sulfopropyl-n-methoxyaniline LPL = lipoprotein lipasa GK = Glicerol Kinasa GPO = Glicerol-3-fosfato oxidasa POD = Peroxidasa
Mezclar e incubar a 37C, durante 5 min. Leer los valores de absorbancia de la muestra y la referencia contra el blanco a 546 nm (520 a 570). El color desarrollado es estable 30 min CALCULO DE LA CONCENTRACION DE TRIGLICERIDOS. Cm = Am x Cr/Ar Donde: Cm: Concentracin de la muestra (mmol/L) Am: Absorbancia de la muestra Ar: Absorbancia de la referencia Cr: Concentracin de la referencia (mmol/L) INTERVALO DE REFERENCIA: Hombres: de 0,68 a 1,88 mmol/L Mujeres: de 0,46 a 1,60 mmol/L CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Suero Control de lpidos. CV 5% MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS ELICAL. Firma Elitech Cat. No Cali-0500 Elitrol I Cat. No CONT-0060 Elitrol II Cat. No CONT-0160 ALMACENAMIENTO: Para el producto intacto: de 2 a 8 C REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. 2. Buccolo G., David M, Clin Chem., 19, (1973), 476 Werner M., Grabielson D. G., Eastman G., Clin. Chem., 21, (1981) Annoi G., Bottasso B.M., Ciaci D., Donato M.F., Tripoli A., Lab J. J. Res. Lab Med., (1982), 115
CRITERIO DE DESEMPEO LIMITACIONES DEL METODO:
LINEALIDAD : El reactivo es lineal en un rango
de concentracin de Triglicridos de 0,7 a 15,10 mmol/L Limite de deteccin : 0,09 mmol/L Interferencias :Concentraciones de bilirrubina de 150,5 mol/L o ms y de 0,28 mmol/L de cido ascrbico o ms, disminuye la concentracin de triglicridos en el suero humano.
PREPARACION DEL REACTIVO ESTABILIDAD DEL MISMO:
URACID
DIAGNOSTICOS

URACID

Reactivo 1: Urato-oxidasa/POD (2 bulbos liofilizados) Reactivo 2: Solucin reguladora HEPES 50 mmol/L (2 frascos por 60mL) Reactivo 3: Acido rico 297 mol/L Solucin de referencia (1 frasco por 2 mL)
Reactivo de trabajo: Restituir el volumen de 1 bulbo de Reactivo 1 con 60 mL de Reactivo 2. Mezclar suavemente por inversin. Estabilidad: 10 das de 2 a 8 C MUESTRA: Suero
TCNICA DE ANLISIS
Ensayo Blanco 1 mL 25 L Ensayo Muestra 1 mL 25 L Ensayo Referencia 1 mL 25 L
APLICACIN :
Para la determinacin de Acido rico en suero por mtodo enzimtico. "PARA USO IN VITRO".
Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 505 nm, Micropipetas, pipetas, tubos para ensayo y cronmetro PRINCIPIO DEL MTODO: Mtodo enzimtico especfico para la determinacin de Acido rico en suero, medido espectrofotometricamente a 505 nm , donde intervienen las enzimas Urato-oxidasa y Peroxidasa. El mismo se basa en el siguiente esquema de reacciones: Urato-oxidasa Acido rico + 2 H2 O + O2 Alantona + H2 O2 + CO2 Peroxidasa H2 O2 + 4 aminofenazona + DHBS Quinoneimina roja
Reactivo de Trabajo Agua Purificada Muestra Reactivo 3
Mezclar y dejar en reposo durante 15 min de 20 a 25 C Leer la densidad ptica de la muestra y la referencia contra Reactivo de trabajo a 505 nm El color es estable 1 h.
CLCULO DE LA CONCENTRACIN DE ACIDO URICO.

Cm = Am x Cr / Ar Donde: Cm: Concentracin de Acido rico en la muestra (mol/L) Am: Absorbancia de la muestra Cr: Concentracin de Acido rico en la Solucin de referencia (mol/L) Ar: Absorbancia de la Solucin de referencia
Hombres : 202,26 - 356,93 mol/L Mujeres: 142,77 - 339,08 mol/L

Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de concentracin de Acido rico de 119 a 714 mol/L Lmite de deteccin: 60 mol/L Densidad ptica del blanco reactivo a 505 nm: Menor que 0.160 Interferencias: Sueros ictricos o con hemlisis visible o intensa producen valores falsamente aumentados; el fluoruro inhibe la uricasa, y medicamentos como calmantes o analgsicos fuertemente reductores (cido ascrbico) interfieren en la reaccin consumiendo el perxido de hidrgeno, lo que provoca la obtencin de valores falsamente disminuidos. En este caso debe suspenderse la medicacin 12 h antes de la toma de muestra.

Suero control con valores conocidos de Acido rico
CV 7 % MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS: Suero control Ex (EPB "Carlos J Finlay") Suero control Precipath U (Boehringer Manheim
Ref 171760)
ALMACENAMIENTO : De 2 a 8 C
1. 2. 3. Trinder P., Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969) Triverdi R.C., Rebar L., Berka E., Strong L., Clin. Chem., 24, (1978), 1908 International Federation of Clinical Chemistry-Clin.Chim.Acta 87/3:459 F(1978)
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO Y ESTABILIDAD DEL MISMO:
Juego de Soluciones de Referencia de Calcio

CONTENIDO DEL ESTUCHE: 5 frascos de soluciones de referencia concentraciones diferentes.
Juego de Soluciones de Referencia de Calcio
de Calcio de
En el caso que se determine la concentracin de una muestra realice los siguientes clculos:
R1 R2 R3 R4 R5
Calcio 1,75 referencia Calcio 2,00 referencia Calcio 2,25 referencia Calcio 2,50 referencia Calcio 2,75 referencia
mmol/L Solucin de mmol/L Solucin de mmol/L Solucin de mmol/L Solucin de mmol/L Solucin de
1x5 mL 1x5 mL 1x5 mL 1x5 mL 1x5 mL
cot( ) = i5 =1 Cr i5 =1 Ar
Donde: Cr: Concentracin de las soluciones de referencia en mmol/L Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia Cm= Am x cot()=mmol/L de Calcio Donde: Cm: Concentracin de Calcio Am: Absorbancia de la muestra cot()=Cotangente de la curva de calibracin. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Linealidad: el coeficiente de determinacin debe ser r2 > 0,98 para un rango de concentraciones de Calcio de 1,75 a 2,75 mmol/L MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS: Se asigna el valor de la concentracin de las soluciones de referencia, utilizando una solucin patrn de nitrato de calcio 6,09 mmol/L calidad Spectrosol, BDH; a partir de la cual se prepara una curva de calibracin y se evala por Espectrofotometra de absorcin atmica. PRECAUCIONES: No introducir pipetas dentro de los frascos de soluciones de referencia. Tratar toda la cristalera con Acido clorhdrico 0,5 mol/L antes de ser utilizada, para eliminar posibles interferencias con otros iones metlicos. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: El producto en uso es estable 4 meses BIBLIOGRAFA: 1. J. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 2. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman. Qumica Clnica. Bases y Tcnicas. 3. - K. Widman. Interpretacin Clnica de las Pruebas de Laboratorio.
APLICACIN PROPUESTA: Para preparar curvas de calibracin en la determinacin de Calcio, por el mtodo de oCresolftalena complexona . PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: Juego de reactivos para la determinacin de Calcio en suero Agua purificada Solucin de Acido clorhdrico 0,5 mol/L Espectrofotmetro visible o colormetro fotoelctrico PRINCIPIO DEL MTODO El mtodo se basa en que el Calcio forma un complejo violeta con la o-Cresolftalena complexona en medio alcalino que se mide espectrofotomtricamente a 570 nm. Para preparar la curva de calibracin, realice el ensayo de referencia con cada una de las cinco soluciones de Calcio por triplicado. PREPARACIN DE REACTIVOS: Dejar que las soluciones de referencia y los reactivos del juego alcancen la temperatura ambiente y homogeneizar antes de usar. Desarrollar el mtodo de o-Cresolftalena complexona, segn la tcnica descrita en la literatura interior del Juego de reactivos para la determinacin de Calcio en suero, sustituyendo el suero por cada una de las soluciones de referencia que componen este juego. CALCULOS DE LOS RESULTADOS ANALTICOS: Verifique la linealidad de la curva de calibracin obtenida entre las concentraciones de cada punto de las soluciones de referencia y sus correspondientes 2 absorbancias, comprobando el valor de r sea > 0,98 para un rango de concentraciones de Calcio de 1,75 a 2,75 mmol/L
Juego de Soluciones de Referencia de Creatinina

CONTENIDO DEL ESTUCHE: 5 frascos de soluciones de referencia de Creatinina de concentraciones diferentes .
Juego de Soluciones de Referencia de Creatinina
R1 R2 R3 R4 R5
Creatinina 66,3 mol/L Solucin de referencia Creatinina 132,6 mol/L Solucin de referencia Creatinina 265,2 mol/L Solucin de referencia Creatinina 442,0 mol/L Solucin de referencia Creatinina 618,0 mol/L Solucin de referencia
absorbancias, comprobando el valor del coeficiente de determinacin: ste debe ser r2 > 0,98 para un rango de concentracin es de Creatinina de 66,3 a 618,0 mol/L En el caso que se determine la concentracin de una muestra realice los siguientes clculos:
cot() =
Cr Ar
5 i =1 5 i =1
APLICACIN PROPUESTA: Para preparar curvas de calibracin en la determinacin de Creatinina, por el mtodo de Jaff. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: Juego de reactivos para la determinacin de Creatinina en Suero. Reactivo 1: Acido Pcrico 0,04 mol/L. Reactivo 2: Hidrxido de Sodio 2,5 mol /L. Agua purificada. Espectrofotmetro visible o Colormetro fotoelctrico
Donde: Cr: Concentracin de las soluciones de referencia en mol/L Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia Cm= Am x cot() = mol/L de Creatinina Donde: Am: Absorbancia de la muestra Cm: Concentracin de Creatinina cot()= Cotangente de la curva de calibracin. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Linealidad: el coeficiente de determinacin debe ser r2 > 0,98 para un rango de concentracin de Creatinina de 66,3 a 618,0 mol/L MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS : Se asigna el valor a la solucin de referencia utilizando un Preciset de 66,3 a 618,0 mol/L, de la firma Boehringer Mannheim, utilizando el mtodo analtico de Jaff para la determinacin de Creatinina. PRECAUCIONES: No introducir pipetas dentro de los frascos de soluciones de referencia TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO :

El mtodo de Jaff se basa en que la Creatinina forma con el picrato alcalino un complejo de color amarillo rojizo, que se mide espectrofotomtricamente a 500 nm. Para preparar la curva de calibracin, realice el ensayo de referencia con cada una de las cinco soluciones de Creatinina por triplicado.
PREPARACIN DE REACTIVOS:
Dejar que las Soluciones de referencia alcancen la temperatura ambiente y homogeneizar . Tomar 1 mL de cada una de las soluciones de referencia y diluir con 10 mL de agua purificada en matraz de un trazo. Homogeneizar. Desarrollar el mtodo de Jaff segn la tcnica descrita en la Literatura interior del Juego de reactivos para la determinacin de Creatinina en suero, sustituyendo el suero por cada una de las soluciones de referencia que componen este juego.
De 2 a 8 C.
ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
El producto en uso es estable 4 meses.

BIBLIOGRAFA:
Henry, R. J. Qumica Clnica. Bases y principios Editoria Hims. Barcelona, 1980
CALCULOS DE LOS RESULTADOS ANALTICOS:

Verifique la Linealidad de la curva de calibracin obtenida entre las concentraciones de cada punto de las soluciones de referencia y sus correspondientes
Juego de Soluciones de Referencia de Fsforo

CONTENIDO DEL ESTUCHE: 5 frascos de soluciones de referencia inorgnico de concentraciones diferentes.
Juego de Soluciones de Referencia de Fsforo
de Fsforo
para un rango de concentraciones de Fsforo inorgnico de 0,8 a 4,0 mmol/L En el caso que se determine la concentracin de una muestra realice los siguientes clculos: cot() =
R1 R2 R3 R4 R5
Fsforo inorgnico 0,8 Solucin de referencia Fsforo inorgnico 1,6 Solucin de referencia Fsforo inorgnico 2,4 Solucin de referencia Fsforo inorgnico 3,2 Solucin de referencia Fsforo inorgnico 4,0 Solucin de referencia
mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L
i =1 5 i =1
Cr Ar
Donde: Cr: Concentracin de las soluciones de referencia en mmol/L Ar: Absorbancias de las soluciones de referencia Cm= Am x cot()=mmol/L de Fsforo inorgnico Donde: Cm: Concentracin de Fsforo inorgnico Am: Absorbancia de la muestra cot()= Cotangente de la curva de calibracin. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Linealidad: El coeficiente de determinacin debe ser r2 > 0,98, para un rango de concentraciones de Fsforo inorgnico de 0,8 a 4,0 mmol/L MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS: Se asigna el valor de las soluciones de referencia, utilizando una curva de calibracin preparada a partir de una solucin de dihidrgeno fosfato de potasio 161,0 mmol/L, cuya concentracin es verificada por valoracin con solucin de hidrxido de sodio, evaluada contra un estndar primario de biftalato de potasio p.a. PRECAUCIONES: No introducir pipetas dentro de los frascos de soluciones de referencia. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: El producto en uso es estable 4 meses. BIBLIOGRAFA: 1. L. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 2. K. Widman. Interpretacin clnica de las pruebas de laboratorio 3. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman. Qumica Clnica. Bases y Tcnicas
APLICACIN PROPUESTA: Para preparar curvas de calibracin en la determinacin de Fsforo inorgnico por el mtodo de Fiske Subarow. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: Juego de reactivos para la determinacin de Fosfato (Fsforo inorgnico) en suero. Agua purificada Espectrofotmetro visible o colormetro fotoelctrico. PRINCIPIO DEL MTODO: El mtodo ms utilizado para la determinacin de Fsforo inorgnico es la reaccin de Fiske Subarow donde el Fsforo presente en el suero reacciona con el molibdato de amonio y el p metilaminofenol sulfato para obtener el azul de molibdeno, que se mide espectrofotomtricamente a 640 nm. Para preparar la curva de calibracin, realice el ensayo de referencia con cada una de las cinco soluciones de Fsforo inorgnico por triplicado. PREPARACIN DE REACTIVOS: Dejar que las Soluciones de referencia alcancen la temperatura ambiente y homogeneizar perfectamente. Hacer dilucin 1:10 a las soluciones de referencia antes de ser utilizadas. Desarrollar el mtodo de Fiske Subarow, segn la tcnica descrita en la literatura interior del Juego de reactivos para la determinacin de Fosfato (Fsforo
inorgnico), sustituyendo el suero por cada una de las soluciones de referencia que componen este juego.
CALCULOS DE LOS RESULTADOS ANALTICOS: Verifique la linealidad de la curva de calibracin obtenida entre las concentraciones de cada punto de las soluciones de referencia y sus correspondientes absorbancias, comprobando que el valor de r2 > 0,98,
Juego de Soluciones de Referencia de Glucosa

CONTENIDO DEL ESTUCHE: 5 frascos de soluciones de referencia de Glucosa de concentraciones diferentes.
Juego de Soluciones de Referencia de Glucosa
Cot ( ) =
R1 R2 R3 R4 R5
Glucosa 2,77 mmol/L Solucin de referencia. Glucosa 5,55 mmol/L Solucin de referencia. Glucosa 8,32 mmol/L Solucin de referencia Glucosa 11,10 mmol/L Solucin de referencia. Glucosa 16,65 mmol/L Solucin de referencia.
Cr Ar
5 i =1 5 i =1
Donde: Cr: Concentracin de las soluciones de referencia en mmol/L Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia Cm = Am x cot() = mmol/L de Glucosa Donde: Cm: Concentracin de Glucosa Am: Absorbancia de la muestra cot() = Cotangente de la curva de calibracin. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Linealidad: el coeficiente de determinacin debe ser r2 > 0,98 para un rango de concentraciones de Glucosa de 2,77 a 16,65 mmol/L. MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS: Se asigna el valor a la solucin de referencia, utilizando Preciset de 2,77 a 16,65 mmol/L de la Firma Boehringer Mannheim, utilizando el mtodo analtico de Hexoquinasa para la determinacin de Glucosa. PRECAUCIONES : No introducir pipetas dentro de los frascos de soluciones de referencia. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO :
APLICACIN PROPUESTA: Para preparar curvas de calibracin en la determinacin de Glucosa, por el mtodo de Glucosa Oxidasa. PARA USO IN VITRO. MATERIALES ADICIONALES: RapiGluco Test Agua purificada Espectrofotmetro visible o Fotoelctrico. Bao de agua (37+1) C
Colormetro
PRINCIPIO DEL MTODO: El mtodo de Glucosa Oxidasa es una reaccin enzimtica de la Glucosa en la que se forma un complejo coloreado de color rosado, que se cuantifica por espectrofotometra. Para preparar la curva de calibracin, realice el ensayo de referencia con cada una de las cinco soluciones de Glucosa por triplicado. PREPARACIN DE REACTIVOS: Las soluciones de referencia estn listas para usarlas. Desarrollar el mtodo de Glucosa Oxidasa segn la tcnica descrita para el RapiGluco-Test, sustituyendo el suero por cada una de las soluciones de referencia CALCULOS DE LOS RESULTADOS ANALTICOS: Verifique la Linealidad de la curva de calibracin obtenida entre las concentraciones de cada punto de las soluciones de referencia y sus correspondientes absorbancias, comprobando que el valor de r2 sea > 0,98 para un rango de concentraciones de Glucosa de 2,77 a 16,65 mmol/L.
De 25 a 30 C
ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: El producto en uso es estable 6 meses. BIBLIOGRAFA: 1. L. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 2. K. Widman. Interpretacin clnica de las pruebas de laboratorio 3. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman. Qumica Clnica. Bases y Tcnicas.
En el caso que se determine la concentracin de una muestra realice los siguientes clculos:
Juego de Soluciones de Referencia de Urea

Juego de Soluciones de Referencia de Urea
6 frascos de soluciones de referencia de Urea de concentraciones diferentes por 10 mL APLICACIN PROPUESTA: Para preparar curvas de calibracin en la determinacin de Urea, por el mtodo de Berthelot. PARA USO IN VITRO. MATERIALES ADICIONALES: Reactivo 1: Fenol Reactivo 2: Hipoclorito de sodio Reactivo 3: Ureasa 100 U Reactivo 4: Fosfato y EDTA Espectrofotmetro PRINCIPIO DEL MTODO: El mtodo de Berthelot es una reaccin enzimtica de la Urea presente en la muestra en la que se forma un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra Para preparar la curva de calibracin, realice el ensayo de referencia con cada una de las seis soluciones de Urea por triplicado. PREPARACIN DE REACTIVOS: Reactivo 1: Trasvasar cuantitativamente el contenido del reactivo 1 a un frasco volumtrico de 500 mL, diluir con agua purificada, enrasar y homogeneizar. La concentracin del reactivo despus de reconstituido es de 0,11 mol/L. Estable durante 6 meses en frasco mbar a un a teperatura de 2 a 8 C Las soluciones de referencia estn listas para usarlas. Reactivo 2 : Trasvasar cuantitativamente el contenido del reactivo 2 a un frasco volumtrico de 500 mL, diluir con agua purificada, enrasar y homogeneizar. La concentracin del reactivo despus de restituido es de 11 mol/L. Estable durante 6 meses en frasco plstico a una temperatura de 2 a 8 C. Reactivo 3: Tomar una frasco del reactivo 3, reconstituir con 20 mL del reactivo 4. Estable durante 6 das como mnimo a temperatura de 2 a 8 C Reactivo 4: Listo para usar Nota : Dejar que los reactivos alcancen la temperatura de 25 a 30 C y homogeneizar perfectamente antes de usar.
Ensayo en Ensayo en muestra blanco Agua purificada 1,0 mL 1,0 mL Reactivo 3 100,0 L 100,0 L Suero 20,0 L Mezclar, tapar y dejar en reposo por 15 min. A 37 C Reactivo 1 1,5 mL 1,5 mL Reactivo 2 1,5 mL 1,5 mL Mezclar y dejar en reposo por 15 min. A 37 C Agua purificada 5,0 mL 5,0 mL Leer la absorbancia a 620 nm contra ensayo en blanco CALCULOS ANALTICOS:
6
DE
LOS
RESULTADOS
Cot ( ) =
Cr Ar
i =1 6 i =1
Donde: Cr: Concentracin de las soluciones de referencia en mmol/L Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia Cm = Am x cot() = mmol/L de Urea Donde: Cm: Concentracin de Urea Am: Absorbancia de la muestra cot() = Cotangente de la curva de calibracin. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Puede emplearse como estndar soluciones de referencia controladas por el Bur Nacional de Standar (NBS) de Estados Unidos. PRECAUCIONES : No introducir pipetas dentro de los frascos de soluciones de referencia. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO :
2 a 8 C
1. 2.
BIBLIOGRAFA:
L. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnstico Clnico por el Laboratorio. K. Widman. Interpretacin clnica de las pruebas de laboratorio R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman. Qumica Clnica. Bases y Tcnicas.
3.
TECNICA DE ANALISIS:
Acido Sulfosaliclico 0,0786 mol/L

Solucin reactivo
100 determinaciones APLICACION:
ALMACENAMIENTO: De 25 a 30 C.
BIBLIOGRAFIA: Reactivo para la determinacin cualitativa de protenas en orina R..J. Henry. Qumica Clnica. Bases y Tcnicas. 1980. 2da Edicin.
PRINCIPIO DE LA DETERMINACIN:
EL cido sulfosaliclico reacciona con las protenas presentes en la orina produciendo un precipitado blanco.
TCNICA DE ANALISIS:
Colocar 2 mL de orina previamente filtrada o centrifugada en un tubo para ensayos, aadir 4 gotas de la solucin reactivo. Mezclar y dejar en reposo durante 5 min.
Comparar el tubo que contiene la mezcla de reaccin con otro que contenga orina no tratada, contra un fondo negro.
EXPRESIN DE LOS RESULTADOS:
Los resultados se expresaran en cruces: Turbidez discreta (trazas) + Precipitado moderado ++ Precipitado abundante +++
Acido Sulfosaliclico 0,118 Mol/L

Solucin reactivo
30 determinaciones
A temperatura ambiente.
APLICACION:
Reactivo para la determinacin cuantitativa de protenas en lquido cefalorraqudeo
BIBLIOGRAFIA:
R.J. Henry. Qumica Clnica. Bases y Tcnicas. 1980. 2da Edicin.
PRINCIPIO DE LA DETERMINACIN:
EL cido sulfosaliclico provoca la precipitacin de las protenas del lquido cefalorraqudeo, determinndose estas por turbidemetra.
TCNICA DE ANALISIS:
Tomar un 1 mL del lquido cefalorraqudeo en un tubo para ensayos, adicionar 4 mL de la solucin reactivo, dejar en reposo durante 10 min, pasado este tiempo agitar y leer a 420 nm contra blanco reactivo. Procesar de igual forma una solucin de referencia de albmina de 0,3 g/L
CALCULOS:
Cm =
Cr x Am Ar
Donde : Cm = Concentracin de la muestra (g/L) Cr = Concentracin de la solucin de referencia Am = Absorbancia de la muestra Ar = Absorbancia de la solucin de referencia INTERVALO DE REFERENCIA:
0,2 - 0,4 g/L
ALMACENAMIENTO:
Benedict Cualitativo
Solucin reactivo (24 determinaciones)
Benedict Cualitativo
LECTURA Y RESULTADOS:
EXPLICACION
DE
LOS
APLICACIN PROPUESTA: Solucin reactivo cualitativa para la determinacin de sustancias reductoras en la orina. Reactivo nico para uso in vitro.
Reaccin Expresin del Resultado Concentracin aproximada de glucosa (mg 100mL)
MATERIALES ADICIONALES: Tubo para ensayo. Gotero.
Azul transparente o enturbiamiento verde no precipitado Verde con precipitado amarillo Amarillo verde oliva
<100
1+ 2+ 3+ 4+
250 800 1400 2000 ms
PRINCIPIO DEL METODO: El reactivo cualitativo de Benedict para la Glucosa tiene Cu 2+, el cual es reducido por la Glucosa y otras sustancias reductoras y precipitado en forma de Cu 2 O de color amarillo a rojo. La sensibilidad de la determinacin es en condiciones ptimas de aproximadamente 50 a 80 mg/100mL de Glucosa. Sustancias existentes en la orina tales como la fructosa, lactosa, galactosa, etc pueden interferir en la reaccin del cobre con la glucosa.
Marrn Naranja rojo LEYENDA
0 Negativo 1+ Ligeros indicios 2+ Dbilmente positivo 3+ Positivo 4+ Fuertemente positivo En caso de resultados inesperados repita el anlisis.
TECNICAS DE ANALISIS: Solucin reactivo Muestra 5.0mL 8 gotas
ACCION DE SEGUIMIENTO Si persisten resultados positivos consulte a su mdico.
PRECAUCIONES Hervir sobre una llamada durante 2 min o colocar en un bao de agua hirviente durante 3 min. Leer inmediatamente despus. No ingerir. Almacnese a una temperatura de 25 a 30 C.
BIBLIOGRAFIA
1. Henry R. J. Cannon D.C., Winkelman J.W. Qumica Clnica, bases y tcnicas.
BIURET
Solucin reactivo (20 determinaciones)
BIURET
Muestra Suero 50 L 50 L Referencia
Presentacin: Estuche por 1 frasco x 120 mL

APLICACION:
Reactivo para la determinacin de protenas totales en suero. Reactivo nico PARA USO IN VITRO. MATERIALES ADICIONALES: Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 530 nm. Solucin de referencia de Albmina de 4 a 8%.
Solucin de referencia de Albmina Solucin de reactivo Biuret
3 mL
3 mL
Agite cada tubo y djelos en reposo durante 30 min. Lea en espectrofotmetro a 530mn contra blanco reactivo
CALCULOS DE ANALITICOS: Cm= A m x Cr Ar Donde: Cm: Concentracin de Biuret en la muestra (g/100mL) Cr: Concentracin de la solucin de referencia de Albmina (g/100mL) A m: Absorbancia de la muestra A r: Absorbancia de la referencia LOS RESULTADOS
La reaccin del Biuret se basa en que al reaccionar un reactivo alcalino da cobre con una sustancia que contiene dos o ms enlaces peptdicos, se forman un complejo entre el in cprico y los enlaces peptdicos adyacentes de color violeta. La intensidad del color es directamente proporcional al nmero de enlaces peptdicos.
LIMITACIONES DEL METODO:
No es una reaccin muy sensible y por tanto, no es adecuada para el anlisis de muestras que contienen poca cantidad de protenas (orina, lquido cefalorraqudeo). PREPARACION DE REACTIVOS: El reactivo est listo para usar.
INTERVALOS DE REFERNCIA:
De 4 a 8 g/100mL
ALMACENAMIENTO: De 25 a 30 C BIBLIOGRAFIA:
Henry R. J., Cannon D. C., Winkelman J. W. Qumica Clnica, bases y tcnicas. Edicin JIMS. Barcelona. Davidsohn J., Henry J. B. Diagnstico Clnico por el laboratorio. Edicin Revolucionaria.
Erlich
Semicuantitativo (100 Determinaciones)
Erlich
ALMACENAMIENTO: De 25 a 30 C REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Reactivo 1: Erlich. Solucin reactivo. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA: Para la determinacin de la produccin de Indol de los microorganismos Gram negativos. PARA USO IN VITRO PREPARACIN DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar
MUESTRA: Sangre fresca .
1. Manual de Marchas Tcnicas del Laboratorio de Microbiologa del Hospital Hermanos Ameijeiras.
TCNICA DE ANLISIS Tome un tubo con crecimiento de 24 h en medio de indol-motilidad del germen Gram negativo. Aada 0.5 mL de la solucin reactivo de Erlich y espere 1 min a que se produzca la reaccin. El resultado ser positivo si se observa un anillo de color rosado cereza en la superficie del medio de cultivo inoculado previamente .
Imbert
Imbert
ALMACENAMIENTO : De 25 a 30 C
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Reactivo 1: Imbert. Solucin reactivo. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA: Para la determinacin de cetonas en orina. PARA USO IN VITRO PREPARACIN DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar
MUESTRA: Orina fresca.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS: 1. Manual de tcnica de laboratorios
TCNICA DE ANLISIS Tome un tubo para ensayos aada 5 mL de orina y 2 mL del reactivo, lentamente por las paredes del tubo. Observe la superficie de contacto entre los dos lquidos el resultado ser positivo si se observa un anillo de color violeta en la superficie de contacto.
Oxalato de Amonio 0,0703 mol/L

Oxalato de Amonio 0,0703 mol/L
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Reactivo 1: Oxalato de amonio 0,0703 mol/L Solucin reactivo. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN : Para el conteo de plaquetas o eritrocitos." PARA USO IN VITRO". MATERIALES ADICIONALES: Microscopio ptico, pipeta de glbulos rojos, cmara de Neubauer. PREPARACIN DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar
MUESTRA: Sangre fresca.
Coloque la cmara cargada dentro de la cpsula de Petri, sobre el soporte y el papel de filtro humedecido. Djela reposar durante 10 min Observe al microscopio que las plaquetas se distingan con cierta resfringencia.
ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS: 1. Manual de Tcnicas de Laboratorio Clnico. Instituto del Libro, 1969.
TCNICA DE ANLISIS Utilizando la pipeta de glbulos rojos, tome sangre hasta la marca 1. Introduzca la pipeta cargada con la sangre en la solucin muestra de oxalato de amonio 0.0703 mol/L y absorba sta hasta llegar a la marca 101. Homogeneice el contenido de la pipeta. frotando esta con ambas manos. Djelo en reposo durante 10 min Deseche las primeras gotas y posteriormente cargue la cmara de Neubauer.
Sulfato de cobre D- 1052

DIAGNOSTICOS Solucin reactivo (45 determinaciones)
Sulfato de cobre D-1052
Presentacin: frasco con 120 mL
Para la determinacin cualitativa de hemoglobina en sangre. Seleccin del donante femenino. PARA USO IN VITRO.
Densmetro Cilindro graduado de 50 mL

La densidad de la solucin de Sulfato de cobre es equivalente a la de la sangre con nivel mnimo aceptable de hemoglobina. Con la inmersin, las gotas de sangre se cubren con una capa de proteinato de cobre, permanecen aisladas de 15 a 20 s y se hunden si su densidad es mayor que la de la solucin de Sulfato de cobre, si la densidad es menor suben o quedan suspendida. La gota de sangre debe descender rpidamente al fondo del cilindro graduado si la hemoglobina es igual o mayor que 125 g/L.
estrujar el dedo ni el lbulo de la oreja, para evitar que se diluya la gota de sangre con lquido tisular, lo que dara una falsa lectura. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Se debe comprobar la densidad de la solucin antes de realizar la prueba con ayuda de un densmetro. La densidad a (25 + 1) C de la solucin reactivo Sulfato de cobre D 1052 debe estar en el intervalo de 1,052 a 1,053 g/cm3 . Medir la temperatura de la solucin antes de realizar el anlisis, la cual debe estar de 24 a 26 C INTERVALO DE REFERENCIA: Solo podrn donar sangre los que presenten valores iguales o superiores a 125 g/L PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS: El producto es nocivo por ingestin, no pipetear con la boca La muestra con que se trabaja es Potencialmente infecciosa, usar medios complementarios para la proteccin del personal como guantes y bata. Pueden presentarse resultados errneos: Si se evalan ms de 20 donantes por cada 50 mL de reactivo Si la gota no se deja caer a una distancia de 1 cm de la superficie del reactivo Si los cilindros no se mantienen cubiertos entre las pruebas, puede afectarse el peso especfico de las soluciones No apretar ni estrujar el dedo o lbulo de la oreja para evitar que se diluya la gota de sangre con lquido tisular, lo que dara una falsa lectura Desechar el volumen de trabajo al trmino del da aunque se hayan evaluado menos de 20 donantes. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 25 a 30 C ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: Un da BIBLIOGRAFA:
1. 2. Davidsohn, Israel, Henry John Bernard. Diagnstico Clnico por el Laboratorio, 1992 Dotres Martnez Carlos. Resolucin Ministerial No. 148 97. Requisitos para la donacin de donantes de sangre. Ministerio de Salud Pblica, Octubre 1997

Sensibilidad del reactivo: 100 % Especificidad: 85 %
TCNICA DE ANLISIS:
Adicionar al cilindro graduado 50 mL de Sulfato de cobre D 1052. Solucin reactivo Limpiar el dedo o lbulo de la oreja del posible donante con alcohol y realizar una puncin capilar en el dedo o lbulo de la oreja y extraer sangre. Dejar caer una gota de sangre (a una altura de aproximadamente 1 cm de la superficie de la solucin). En el caso de la mujer si la gota baja ininterrumpidamente hacia el fondo del cilindro graduado, la hemoglobina es igual o mayor de 125 g/L, si va a la superficie para despus caer al fondo o mantenerse en ella, la hemoglobina es menor de 125 g/L no pudiendo admitirse como donante. Nota : Se admiten como mximo 20 gotas de sangre por cada 50 mL de la solucin reactivo. MUESTRA: Despus de limpiar el rea con alcohol, se hace una puncin capilar en el dedo o lbulo de la oreja del donante y se extrae sangre. Es importante no apretar ni
Sulfato de cobre D- 1054

DIAGNOSTICOS Solucin reactivo (45 determinaciones)
Sulfato de cobre D-1054
MUESTRA:
Despus de limpiar el rea con alcohol, se hace una puncin capilar en el dedo o lbulo de la oreja del donante y se extrae sangre. Es importante no apretar ni estrujar el dedo ni el lbulo de la oreja, para evitar que se diluya la gota de sangre con lquido tisular, lo que dara una falsa lectura .
Presentacin: frasco con 120 mL
Para la determinacin cualitativa de hemoglobina en sangre. Seleccin del donante masculino. PARA USO IN VITRO.
Densmetro Cilindro graduado de 50 mL

Se debe comprobar la densidad de la solucin antes de realizar la prueba con ayuda de un densmetro. La densidad a (25 + 1) C de la solucin reactivo Sulfato de cobre D 1054 debe estar en el intervalo de 1,054 a 1,055 g/cm3 . Medir la temperatura de la solucin antes de realizar el anlisis, la cual debe estar de 24 a 26 C .

La densidad de la solucin de Sulfato de cobre es equivalente a la de la sangre con nivel mnimo aceptable de hemoglobina. Con la inmersin, las gotas de sangre se cubren con una capa de proteinato de cobre, permanecen aisladas de 15 a 20 s y se hunden si su densidad es mayor que la de la solucin de Sulfato de cobre, si la densidad es menor suben o quedan suspendida. La gota de sangre debe descender rpidamente al fondo del cilindro graduado si la hemoglobina es igual o mayor que 135 g/L. -
Solo podrn donar sangre los que presenten valores iguales o superiores a 135 g/L
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
El producto es nocivo por ingestin, no pipetear con la boca La muestra con que se trabaja es Potencialmente infecciosa, usar medios complementarios para la proteccin del personal como guantes y bata. Pueden presentarse resultados errneos: Si se evalan ms de 20 donantes por cada 50 mL de reactivo Si la gota no se deja caer a una distancia de 1 cm de la superficie del reactivo Si los cilindros no se mantienen cubiertos entre las pruebas, puede afectarse el peso especfico de las soluciones No apretar ni estrujar el dedo o lbulo de la oreja para evitar que se diluya la gota de sangre con lquido tisular, lo que dara una falsa lectura Desechar el volumen de trabajo al trmino del da aunque se hayan evaluado menos de 20 donantes. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 25 a 30 C ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: Un da BIBLIOGRAFA:
1. Davidsohn, Israel, Henry John Bernard. Diagnstico Clnico por el Laboratorio, 1992 Dotres Martnez Carlos. Resolucin Ministerial No. 148 97. Requisitos para la donacin de donantes de sangre. Ministerio de Salud Pblica, Octubre 1997

Sensibilidad del reactivo: 100 % Especificidad: 85 %
TCNICA DE ANLISIS:
Adicionar al cilindro graduado 50 mL de Sulfato de cobre D 1054 Solucin reactivo. Limpiar el dedo o lbulo de la oreja del posible donante con alcohol y realizar una puncin capilar en el dedo o lbulo de la oreja y extraer sangre. Dejar caer una gota de sangre (a una altura de aproximadamente 1 cm de la superficie de la solucin). - En el caso del hombre si la gota baja ininterrumpidamente hacia el fondo del cilindro graduado, la hemoglobina es igual o mayor de 135 g/L, si va a la superficie para despus caer al fondo o mantenerse en ella, la hemoglobina es menor de 135 g/L, no pudiendo admitirse como donante. Nota : Se admiten como mximo 20 gotas de sangre por cada 50 mL de la solucin reactivo.
Azul Brillante Cresil

Reactivo para tincin (240 Determinaciones)
Azul Brillante Cresil
El resultado es positivo si se observa los hemates reticulados en al menos 2 de las 3 lminas preparadas.

ALMACENAMIENTO: Reactivo 1: Azul brillante cresil 1g/100 mL. Solucin colorante. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA: 1. Para la determinacin de reticulocitos y siderocitos (en Hematologa). PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: . Manual de tcnicas de laboratorio clnico. Instituto Cubano del Libro, 1969 De 25a 30 C REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Microscopio ptico, cronmetro y pipeta.
lmina
portaobjeto,
PREPARACION DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar MUESTRA: Sangre fresca
Tcnica de Anlisis :
En una lmina portaobjetos, deposite una gota de azul brillante cresil. Djela secar al aire. Con un algodn con alcohol, limpie la yema del dedo. Djelo secar. Con la lanceta, haga una puncin rpida. Deposite una gota de sangre sobre la lmina portaobjetos. Mezcle minuciosamente la sangre con el colorante durante 1 min utilizando un agitador de vidrio. De la mezcla antes mencionada, realice extensiones en 3 portaobjetos, deje que la misma se seque. Vierta sobre la lmina 1 gota de aceite de inmersin. Observe las lminas al microscopio con lente de inmersin
Conteo de Eosinfilos
Conteo de Eosinfilos
Obsrvela al microscopio con lente de 10 y 40. El resultado es positivo si se observan los eosinfilos teidos de rojo resfringente en contraste con el azul verdoso del resto de los dems leucocitos
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Reactivo 1: Conteo de Eosinfilos. Solucin reactivo. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA: Para la determinacin de eosinfilos (en Hematologa). PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: Microscopio ptico, cronmetro y pipeta. . lmina portaobjeto,
ALMACENAMIENTO : De 25 a 30C
2. Manual de tcnicas de laboratorio clnico. Instituto Cubano del Libro, 1969
PREPARACIN DEL REACTIVO:

El reactivo est listo para usar MUESTRA: Sangre fresca.
TCNICA DE ANLISIS:
Limpie con un algodn impregnado en alcohol la yema del dedo. Con la lanceta haga una puncin en el dedo. Deseche la primera gota. Cargue la pipeta de glbulos blancos hasta la marca 0.5 con sangre. Llnela con el diluente (solucin reactivo conteo de eosinfilos) hasta la marca 11. Mezcle bien haciendo girar la pipeta entre las dos manos y deje en reposo la mezcla durante 15 min para que los eosinfilos queden bien coloreados. Ponga el cubreobjetos sobre la cmara de Neubauer. Introduzca la muestra preparada que contiene la pipeta entre los bordes de la cmara y el cubreobjetos. Djela 5 min en reposo.
GIEMSA, solucin colorante

60 Determinaciones
GIEMSA, solucin colorante

Reactivo 1: Giemsa. Solucin colorante
Eosinfilos Basfilos Linfocitos Monocitos
0.02-0.04 0.00-0.01 0.25-0.35 0.03-0.06
(1 frasco x 120 mL) APLICACIN PROPUESTA:

Reactivo para la determinacin de la fraccin de nmero y el examen de leucocitos. PARA USO IN VITRO PRINCIPIO DE LA DETERMINACION: Los principales tipos de leucocitos son identificados y se calcula la proporcin de cada uno de ellos, esta proporcin se denomina fraccin de nmeros del tipo de leucocitos.
OBSERVACIONES:
Este reactivo tambin se usa para la determinacin de la fraccin de nmero de reticulocito.
ALMACENAMIENTO:
De 25 a 30 C temperatura ambiente y protegido de la luz.
BIBLIOGRAFIA:
1. OPS, Publicacin Cientfica. No. 439.
MATERIALES ADICIONALES: Microscopio ptico, cronmetro y pipeta. lmina portaobjeto,
Colocar una gota de sangre sobre un portaobjeto, realizar la extensin de la misma y dejar secar la preparacin. Fijar la extensin con metanol durante dos o tres minutos y luego cubrirla con la solucin colorante Giemsa previamente diluida a razn de 8 mL de agua purificada y 16 gotas de la solucin Giemsa. Dejar en reposo la preparacin por espacio de 15 a 20 min. Lavar la lmina con agua corriente y colocarla en posicin inclinada para que se seque al aire libre. Realizar el recuento de los diferentes tipos de leucocitos con el objetivo x 100 depositando previamente una gota de aceite de inmersin sobre la parte de la preparacin que se ve a examinar. Contar un total de 100 leucocitos.
EXPRESION DE LOS RESULTADOS:
La proporcin de cada tipo de leucocito se expresa como una fraccin decimal. La suma de todas las fracciones debe ser igual a 1.
INTERVALO DE REFERNCIA:
Neutrfilos 0.55-0.65
Antgeno VDRL
Antgeno VDRL
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Estuche por 10 ampolletas por 0,5 mL (2900 determinaciones) APLICACIN PROPUESTA: Para el pesquisaje y diagnstico serolgico de la sfilis. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: Lminas portaobjeto de serologa Tubos para ensayo (100 x 13) mm Solucin reguladora de Cardiolipina Solucin cloruro de sodio 9 g/L Frasco de fondo plano con tapa de rosca Pipeta automtica para medir 10 y 50 L Pipeta de 1 y 5 mL Rotor Microscopio ptico Bao de agua hasta 100 C Jeringuillas de 2 mL Aguja No. 18, 19 y 23 sin punta Cronmetro PRINCIPIO DEL MTODO: El antgeno VDRL es capaz de mostrar una reaccin de floculacin en lmina en presencia de los anticuerpos de Wassermann que se observa al microscopio ptico. CRITERIO DEL DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL MTODO: La sensibilidad del producto disminuye cuando el mismo se somete a bajas temperaturas. En fases tempranas y latentes de la infeccin pueden ocurrir falsos resultados. Pueden presentarse falsos positivos cuando el paciente padece de enfermedades como mononucleosis infecciosa, lupus eritematoso y neumona vrica. Si el resultado es positivo, se debe confirmar con una prueba treponmica. MUESTRA: Suero: debe ser transparente e inactivarse por calentamiento en bao de agua a 56 C durante 30 min . Las pruebas deben realizarse dentro de las cuatro horas que siguen al calentamiento . Si fuera necesario realizar las pruebas despus de transcurrido este tiempo, habr que repetir el calentamiento a 56 C pero durante 10 min .
La muestra debe desecharse si presenta hemlisis, turbidez, partculas y si los sueros se encuentran lipmicos, ya que todo esto puede dar lugar a aglutinaciones inespecficas. De no usar la muestra en el da, conservarla a 20 C . Todas las muestras deben estar a temperatura ambiente cuando vayan a examinarse. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Suero control reactivo Suero control dbilmente reactivo Suero control no reactivo PREPARACIN DE REACTIVOS: 1. Solucin cloruro de sodio 9 g/L 2. Emulsin de antgeno: La solucin reguladora de Cardiolipina y el antgeno deben estar a una temperatura de 23 a 29 C antes de mezclarlos. La emulsin se prepara de la siguiente manera: a) Deposite 0,4 mL de la solucin reguladora de Cardiolipina en el fondo de un frasco de alrededor de 20 mL de fondo plano para prevenir que el lquido se localice en la periferia. b) Mida con la pipeta de 1 mL; 0,5 mL del antgeno y descrguelo gota a gota sobre la solucin reguladora de Cardiolipina, rotando constantemente el frasco. La descarga de la pipeta debe transcurrir en seis segundos, sople la pipeta al final teniendo cuidado de no tocar la emulsin . c) Contine rotando el frasco diez segundos ms. d) Aada 4,1 mL de solucin reguladora de Cardiolipina, tape y agite por inversin 30 veces en 10 s aproximadamente; con esto queda lista la emulsin del antgeno. Cada nueva emulsin que se prepare debe probarse con suero control reactivo, dbilmente reactivo y no reactivo, que con la tcnica de prueba cualitativa deben dar su reaccin tpica. Solo pueden emplearse las emulsiones que proporcionen los resultados correctos con los sueros de reactividad conocida. PROCEDIMIENTO: Operaciones preliminares: Comprobacin de las agujas. Antes de efectuar la determinacin compruebe las agujas No. 18 y 19 de la siguiente forma. Cargue la jeringuilla con 1 mL de la emulsin de antgeno recin preparada con aguja No. 18 sin punta. Cuente las gotas hasta que se consuma el mL completo, dejando caer las mismas en el interior del propio frasco donde se prepara la emulsin. Para una aguja de este calibre deben obtenerse 60 gotas por mililitro, de no cumplirse esta condicin
Antgeno VDRL
puede repetir el conteo una vez ms, cambiar la jeringuilla o la aguja hasta obtenerse lo establecido. Repita estas operaciones con la aguja No. 19 sin punta, en este caso deben obtenerse 75 gotas por mililitro, de no ser as proceda de la misma forma que en el punto anterior. Ensayo cualitativo del suero: Deposite en uno de los hoyuelos de la lmina de serologa 50 L del suero inactivado. Homogenice la emulsin de antgeno y auxilindose de la jeringuilla con aguja No. 18, cargue una porcin de sta y vierta una gota en el hoyuelo que contiene el suero. Repita esta operacin con todos los sueros. Coloque la lmina en el rotor y accione el equipo a 120 min -1 durante 4 min. Observe inmediatamente despus de la rotacin en un microscopio ptico con el lente de menor aumento. El suero se considera reactivo si se observan agrupaciones o flculos pequeos, adems de partculas en forma de agujas pequeas distribuidas uniformemente y no reactivo si se observan muchas partculas en forma de agujas pequeas uniformemente distribuidas sin formar agrupacin. Ensayo cuantitativo del suero Prepare una dilucin 1:8 del suero de referencia inactivado en un tubo para ensayo adicionando 0,1 mL de suero a 0,7 mL de solucin de cloruro de sodio 9 g/L con pipeta de Kahn. Mezcle enrgicamente el suero y la solucin de cloruro de sodio y deje la pipeta dentro del tubo. En una lmina para serologa vierta 0,04; 0,02; y 0,01 mL de la dilucin del suero 1: 8 en los hoyuelos 4, 5 y 6 y seguidamente 0,04; 0,02 y 0,01 mL de suero sin diluir en los hoyuelos 1, 2 y 3 . Adicione 2 gotas de solucin de cloruro de sodio 9 g/L verticalmente, con aguja No. 23 sin punta en los hoyuelo 2 y 5. Adicione 3 gotas de solucin de cloruro de sodio 9 g/L a los hoyuelos 3 y 6. Gire la lmina de serologa manualmente de forma suave durante 5 s para mezclar el suero y la solucin de cloruro de sodio. Homogenice la emulsin de antgeno preparada a partir de la muestra en anlisis de VDRL agitndola y vierta verticalmente una gota con aguja No. 19 sin punta en cada uno de los 6 hoyuelos. Coloque la lmina en el rotor y accione el equipo a 120 min -1 durante 4 min. Observe inmediatamente despus de la rotacin en un microscopio ptico con el lente de menor aumento. El ttulo viene dado por la ms alta dilucin donde se observen flculos de mediano y gran tamao. La dilucin de cada hoyuelo se indica en la siguiente tabla: Hoyuelo Dilucin
1 2 3 4 5 6 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO: Las ampolletas de antgeno deben guardarse en un lugar oscuro a una temperatura de 25 a 30 C, protegidas de la luz. PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS: Una vez preparada la emulsin se utilizar en el da para esta determinacin Las lminas deben lavarse cuidadosamente eliminndose todo residuo de grasa. Deposite las puntas y lminas utilizadas en un recipiente con solucin alcohlica 70 %, para evitar contaminaciones al fregar. La solucin reguladora de Cardiolipina para preparar el antgeno, debe estar en el momento del uso a temperatura ambiente El suero muestra debe ser manipulado como material potencialmente infeccioso No inyectar BIBLIOGRAFA:
1.
2.
3.
Diagnstico clnico por laboratorio. 872-922, 4 ta Edicin Revolucionaria. La Habana. 1971. NC26-212. Buenas Prcticas de Laboratorio. Marzo.1992, Cuba. K. D .Piatkin, YU. S. Krivoshein. Microbiologa. 2da Edicin. 417-423. Editorial MIR Mosc. 1981
Antisueros de Enterobacterias
Antisueros monovalentes Salmonellas ( A; B; C1 ; C2 ; D; E; F ).Antisuero polivalente Salmonella. Antisueros polivalentes Shigellas ( A; B; C 1 ; D ). Antisuero polivalente Citrobacter. Antisuero Vi
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Antisueros monovalentes Estuche conteniendo 4 Salmonellas bulbos por 5 mL para 400 determinaciones Antisuero polivalente Estuche conteniendo 4 Salmonella bulbos por 10 mL para 800 determinaciones Antisueros polivalentes Estuche conteniendo 4 Shigellas bulbos por 5 mL para 400 determinaciones Antisuero polivalente Estuche conteniendo 4 Citrobacter bulbos por 10 mL para 800 determinaciones Antisuero Vi Estuche conteniendo 4 bulbos por 5 mL para 400 determinaciones APLICACIN: Antisueros monovalentes Salmonellas: Para el diagnstico serolgico grupo especfico de Salmonella por aglutinacin en lmina. Antisuero polivalente Salmonella: Para el diagnstico serolgico del gnero Salmonella por aglutinacin en lmina. Antisueros polivalentes Shigellas: Para el diagnstico serolgico gnero y grupo especfico de Shigella por aglutinacin en lmina. Antisueros polivalentes Citrobacter: Para el diagnstico serolgico del gnero Citrobacter por aglutinacin en lmina. Antisuero Vi: Para la deteccin del antgeno Vi en Salmonella typhi por aglutinacin en lmina. PARA USO IN VITRO
Se obtienen a partir de heces fecales, en nios menores de 5 aos por hisopo rectal, fluidos corporales (sangre, orina), aguas y alimentos contaminados. Estas muestras se procesan utilizando medios de cultivos enriquecidos, selectivos y diferenciales, se incuban a 37 C de 18 a 24 h. Se seleccionan colonias tpicas y se transfieren al medio kligler se incuban de 18 a 24 h a 37 C , identificndose el microorganismo aislado de forma presuntiva, el crecimiento bacteriano obtenido es suspendido en solucin de Cloruro de sodio 0,85 % para realizar el estudio serolgico con el antisuero por medio de la reaccin de aglutinacin en lmina que es la prueba confirmativa de gnero o grupo especfico. Nota : En caso de cepas sospechosas de Shigellas calentar la suspensin bacteriana en bao de agua a 100 C de 15 a 30 min (para eliminar sustancias inhibitorias que puedan interferir con la aglutinacin somtica). Dejar atemperar dicha suspensin y enfrentarla al antisuero en el estudio serolgico.
PROCEDIMIENTO:
Prueba cualitativa 1. Deposite sobre una lmina portaobjeto una gota de antisuero. 2. Coloque sobre la gota de antisuero una gota de antgeno (suspensin del microorganismo aislado en solucin de Cloruro de sodio 0,85 %) 3. Mezcle ambos con el asa de platino. 4. Aplique a la lmina un suave movimiento circular para homogeneizar. 5. Efecte la lectura frente a una lmpara de iluminacin tangencial durante 1 min Positivo: Aglutinacin con el antgeno homlogo en un tiempo no mayor de 1 min con una intensidad de 3 a 4 cruces. Negativo: No se produce aglutinacin en 1 min
MATERIALES ADICIONALES :
Lminas portaobjeto. Asa de platino. Lmpara de iluminacin tangencial. Mechero. Solucin de Cloruro de sodio 0,85 %

Probar con cepas de referencias de los diferentes grupos del banco de cepas de cada entidad. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: Almacnese a una temperatura de 2 a 8 C ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: El producto en uso es estable por 3 meses
PRINCIPIO DEL MTODO :

El diagnstico serolgico de estas enterobacterias por aglutinacin en lmina, est basado en la reaccin entre los anticuerpos presentes en el antisuero y los antgenos propios del microorganismo en ensayo. CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL MTODO: Reaccin de aglutinacin en 1 min, con una intensidad de 3 a 4 cruces La deteccin del antgeno somtico especfico o del antgeno Vi dependen del microorganismo aislado. PREPARACIN DEL REACTIVO: Dejar que el bulbo alcance la temperatura ambiente. MUESTRAS:
BIBLIOGRAFA:
1. 2. 3. 4. 5. Cowan and Steel. Identification of Bacterium. Edwards and Wh-Ewinb. Identification of Enterobacterias, 1962. Jawetz E. Manual de Microbiologa Mdica, Tercera Edicin, 1966. K. Piatkin, Microbiologa, 1968. Martn Frobisher, Microbiologa, 1969.
CODIGOS
337.2.030825 337.2.031401 337.2.031402 337.2.031403 337.2.031404 337.2.031405 337.2.031406 337.2.031407 337.2.031408 337.2.031409 337.2.031410 337.2.031411 337.2.031412 337.2.031414 Antisuero Polivalente de Citrobacter Antisuero Polivalente de Shigella A Antisuero Polivalente de Shigella B Antisuero Polivalente de Shigella C Antisuero Polivalente de Shigella D Antisuero Polivalente de Salmonella Antisuero Monovalente de Salmonella A Antisuero Monovalente de Salmonella B Antisuero Monovalente de Salmonella C1 Antisuero Monovalente de Salmonella C2 Antisuero Monovalente de Salmonella D Antisuero Monovalente de Salmonella E Antisuero Monovalente de Salmonella F Antisuero Vi
Antisueros Flagelares Salmonellas

Antisueros Flagelares Salmonellas (b; i; 1,2; 1,5; c; fg; gm; eh; enx; y; lw; r; k; gms; z29; 1,7; d; lv; enz15; lz13; lz28; mt; 1,6)
Antisueros Flagelares Salmonellas
cultivndose en medios de cultivos lquidos o semilquidos, realizndose nuevamente la reaccin, donde se observar la avidez en la aglutinacin. MUESTRA: Se obtiene por heces fecales, hisopo rectal en nios menores de 5 aos, fluidos corporales, agua y alimentos contaminados. Las muestras se procesan utilizando medios de cultivos selectivos y diferenciales, los cuales una vez sembrados son incubados a 37 C de 18 a 24 h. Colonias tpicas son coleccionadas y cultivadas en medio Kliger y tambin cuas agarizadas incubndose a 37 C de 18 a 24 h. Posteriormente se le realizan pruebas bioqumicas incubndose de la misma forma que en los casos anteriores. Identifique el microorganismo aislado, confirmndose el diagnstico especfico de gnero con los sueros somticos de Salmonella. Una vez identificado el microorganismo como Salmonella y grupo a que pertenece, se realizarn las pruebas serolgicas que nos darn el tipo, utilizando los Antisueros Flagelares Salmonellas tipo especficos. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Probar con cepas de referencia de los diferentes serotipos del banco de cepas de cada entidad.
MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
CONTENIDO DEL ESTUCHE: 4 frascos por 2 mL para 160 determinaciones APLICACIN PROPUESTA: Para la serotipificacin de Salmonellas por aglutinacin en lmina.PARA USO IN VITRO. MATERIALES ADICIONALES: - Lmina portaobjeto de excavacin - Asa de platino - Lmpara de iluminacin tangencial - Mechero PRINCIPIO DEL MTODO:
La serotipificacin de Salmonella por aglutinacin en lmina est basada en la reaccin antgeno anticuerpo.
CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL MTODO: Reaccin de aglutinacin en 1 min , con una intensidad de 3 a 4 cruces. Deteccin de antgeno especfico flagelar de Salmonella. PREPARACIN DE REACTIVOS: Dejar que el producto alcance la temperatura ambiente. PROCEDIMIENTO: Prueba cualitativa: Depositar una gota de Antisuero sobre una lmina portaobjeto o excavada. Tomar una asada del microorganismo aislado. Mezclar ambos con el asa de platino. Aplicar a la lmina un suave movimiento circular con el objetivo de homogeneizar. Efectuar la lectura frente a una lmpara de iluminacin tangencial durante un minuto. Positivo: Aglutinacin con el antgeno homlogo. Negativo: No se produce aglutinacin en un minuto. En caso que la aglutinacin no sea bien definida o est ausente, debe estimularse el desarrollo de los flagelos al microorganismo,
Antisueros con cepas de Salmonellas de estructura antignica homloga a los antisueros.
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C. ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: El producto en uso es estable 30 d.

BIBLIOGRAFA:
1. 2. 3. 4. 5. Cowan and Steel. Identification of Bacteri. Edwards and Wh-Ewinb. Identification of Enterobacterias, 1962. era Jawetz E. Manual de Microbiologa Mdica, 3 Edicin, 1966. K. Piatkin, Microbiologa, 1968. Martin Frobisher, Microbiologa, 1969.
COD IGO S
337.2.031420 337.2.031421 337.2.031422 337.2.031423 337.2.031424 337.2.031425 337.2.031426 337.2.031427 337.2.031428 337.2.031429 337.2.031430 337.2.031431 337.2.031432 337.2.031433 337.2.031434 337.2.031435 307.2.001436 337.2.031437 337.2.031438 337.2.031439 337.2.031440 337.2.031441 337.2.031442 Antisuero Flagelar Salmonella b Antisuero Flagelar Salmonella i Antisuero Flagelar Salmonella 1,2 Antisuero Flagelar Salmonella 1,5 Antisuero Flagelar Salmonella c Antisuero Flagelar Salmonella fg Antisuero Flagelar Salmonella gm Antisuero Flagelar Salmonella eh Antisuero Flagelar Salmonella enx Antisuero Flagelar Salmonella y Antisuero Flagelar Salmonella lw Antisuero Flagelar Salmonella r Antisuero Flagelar Salmonella k Antisuero Flagelar Salmonella gms Antisuero Flagelar Salmonella z-29 Antisuero Flagelar Salmonella 1,7 Antisuero Flagelar Salmonella d Antisuero Flagelar Salmonella lv Antisuero Flagelar Salmonella enz15 Antisuero Flagelar Salmonella lz13 Antisuero Flagelar Salmonella lz28 Antisuero Flagelar Salmonella mt Antisuero Flagelar Salmonella 1,6
Azul de Metileno 0,1%

Azul de Metileno 0,1%
CONTENIDO DEL ESTUCHE

Reactivo 1: Azul de metileno 0,1%. Solucin colorante. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA Para tincin de estafilococos Gram positivos, Bacilos Acidos Alcohol resistente. .PARA USO IN VITRO. . MATERIALES ADICIONALES
Vierta sobre la lmina 1 gota de aceite de inmersin. Observe las lminas al microscopio con lente de inmersin El resultado es positivo si se observan los St. aureus teidos de azul
ALMACENAMIENTO: Para el producto intacto: de 25a 30 C REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: 1. Manual de tcnicas de laboratorio clnico. Instituto Cubano del Libro, 1969.
lmina
portaobjeto,
PREPARACION DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar. MUESTRA: Cepa de estafilococo.
TCNICA DE ANLISIS:
Tome un tubo con crecimiento de estafilococo y del mismo tome una asada, utilizando un asa de platino. Realice un frotis en una lmina portaobjetos y fjelo al calor de la llama. Deje secar la lmina. Cubra la lmina con la solucin colorante Azul de metileno 0,1% durante 1 min. Enjuague con agua corriente. Deje secar la lmina.
Eosina 1 %
Eosina 1%

Reactivo 1: Eosina 1%. Solucin colorante. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA
Repetir estas operaciones con la gota de eosina. Examinar en el microscopio con objetivo 10 x y 40 x. El resultado es positivo si la sustancia crmica de los quistes se ve de un rosado intenso
ALMACENAMIENTO: Para el producto intacto: de 25a 30 C Para la determinacin de siderositos y sideroblastos en heces fecales. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. Manual de tcnicas de laboratorio clnico.

Instituto Cubano del Libro, 1969.
lmina
portaobjeto,
PREPARACION DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar MUESTRA: Heces fecales. TCNICA DE ANLISIS: Ponga en un porta objeto por separado (en cada extremo) una gota de la solucin de Eosina y otra de Lugol. Con un aplicador de madera tomar una muestra de heces (en muestra con mucus y sangre elegir esa parte para estudiarla). Mezclar con el Lugol concentrado procurando hacer una suspensin y no un frotis. Quitar de la suspensin fibras y otros elementos slidos. Colocar un cubre objeto.
Fuschina Bsica
Fuschina Bsica
Fije con calor pasando suavemente la lmina 3 veces por la llama del quemador. Seque la lmina. Aada el reactivo, psele la llama del quemador por debajo hasta que observe la emisin de vapores sin que hierva. Lave con agua corriente; aada solucin decolorante de alcohol clorhdrico para arrastrar el exceso de la muestra y lave nuevamente con agua corriente. Cubra la lmina con solucin colorante Azul de metileno 0,1 %, djela secar durante 2 min. Lave con agua corriente y deje secar la lmina. Vierta sobre la lmina 1 gota de aceite de inmersin. Observe la lmina al microscopio con lente de inmersin El resultado es positivo si se observan los bacilos cido - alcohol resistentes teidos de rojo sobre un fondo azul.

Reactivo 1: Fuschina Bsica de Ziehl Neelsen. Solucin colorante. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA Para la tincin de Ziehl Neelsen en el diagnstico de Bacilos cido Alcohol resistentes. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES
Microscopio ptico. PREPARACION DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar MUESTRA: Esputo. TCNICA DE ANLISIS: En una lmina portaobjetos, extienda la muestra de esputo utilizando un asa de platino. Fije con calor pasando suavemente la lmina 3 veces por la llama del quemador. Seque la lmina. Aada el reactivo, psele la llama del quemador por debajo hasta que observe la emisin de vapores sin En una lmina portaobjetos, extienda la muestra de esputo utilizando un asa de platino. 1. Manual de tcnicas de laboratorio clnico. Instituto Cubano del Libro, 1969.
ALMACENAMIENTO: Para el producto intacto: de 25a 30 C REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Juego de Tincin de Gram

Para 100 determinaciones
Juego de Tincin de Gram
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Reactivo 1. Violeta Cristal. Solucin colorante (120mL) Violeta Cristal 2% Oxalato de Amonio monohidratado 0.8% Alcohol etlico 20% Reactivo 2.
Hacer la extensin de la muestra sobre un portaobjeto, dejar secar al aire y fijar con calor y alcohol. 2. Tincin: - Cubrir el portaobjeto con el Reactivo 1, dejar en contacto 30 s y lavar suavemente con agua. - Cubrir con el Reactivo 2, dejar en contacto 30 s y lavar suavemente con agua. - Efectuar la decoloracin con alcohol y lavar suavemente con agua. - Cubrir con el Reactivo 3, dejar en contacto 30 s, lavar suavemente con agua y secar. - Observar con objetivo de inmersin. ALMACENAMIENTO:
Lugo de Gram. solucin colorante (120mL) Yodo metlico 20% Yoduro de Potasio 1% Reactivo 3. Safanina. Solucin colorante (120 mL) Safanina 0.25% Alcohol etlico 10%
De 25 a 30 C.
PRECAUCIONES: Se deben utilizar portaobjetos muy limpios. La Tincin de Gram debe hacerse sobre cultivos recientes (24 a 48 h) ya que con el tiempo, estos se hacen mas sensibles a la decoloracin.
BIBLIOGRAFIA: APLICACIN: Mtodo para la deteccin y diferenciacin de grmenes Gram (+) y Gram (-). 1. 2. 3. J. Salle, Bacteriologa E. Merck, Certistain Standard M. Frobisher, Microbiologa
Portaobjetos Microscopio ptico
PRINCIPIO DEL METODO: Los grmenes se tien con la solucin colorante Violeta Cristal que se fija con el yodo liberado por el Lugol de Gram, luego se aade una solucin que provoca la decoloracin de los Gram (-). A continuacin se utiliza la solucin de Safranina como colorante de contraste presentndose los grmenes Gram (-) de color rosado y los Gram (+) se mantienen violeta.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS: El juego de reactivos est listo para usar. PROCEDIMIENTO: 1. Preparacin y fijacin de las muestras:
Lugol Concentrado
Lugol Concentrado
Examinar en el microscopio con objetivo 10 x y 40 x. El resultado es positivo si la sustancia crmica de los diversos quistes se destacan sobre el citoplasma pardo amarillento.

Reactivo 1: Lugol concentrado. Solucin colorante. (1 frasco por 120 mL) APLICACIN PROPUESTA: Para buscar trofozoitos de protozoos, huevos y larvas de Helmintos. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: Microscopio ptico. PREPARACION DEL REACTIVO: El reactivo est listo para usar MUESTRA: Heces fecales.
ALMACENAMIENTO: Para el producto intacto: de 25a 30 C REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: 1. Manual de tcnicas de laboratorio clnico. Instituto Cubano del Libro, 1969.
TCNICA DE ANLISIS:
Ponga en un porta objeto por separado (en cada extremo) una gota de la solucin de Eosina y otra de Lugol. Con un aplicador de madera tomar una muestra de heces (en muestra con mucus y sangre elegir esa parte para estudiarla). Mezclar con el Lugol concentrado procurando hacer una suspensin y no un frotis. Quitar de la suspensin fibras y otros elementos slidos. Colocar un cubre objeto. Repetir estas operaciones con la gota de eosina.
Discos para Antibiograma

Smbolo/Color >> >> > >> > _________ +++++++ - - - - - -- - 0000000 Negro Penicilina 6 g Eritromicina 15 UI Meticlina 5 g Gentamicina 10 UI Kanamicina 30 UI Vancomicina 30 UI Rojo Colimicina 10 g Carbenicilina 100 g Ampicilina 10 g Cefaloridina 30 UI Ceftriaxona 30 g Cefotaxima 30 g Verde Estreptomicina 10 UI Tetraciclina 30 UI Cloranfenicol 30 g Novobiocina 30 UI Amikacina 30 g Sulfametoxazol/ Trimetroprim (23,75 g/1,25 g) Azul Oxacilina 1g Cefuroxima 30 g Azlocilina 75 g Cefazolina 30 g Ciprofloxacina 5g Ceftazidima 30 g
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Estuche por 4 bulbos por 90 discos para 360 determinaciones APLICACIN: Para la determinacin de la sensibilidad bacteriana a los agentes antimicrobianos. PARA USO IN VITRO MATERIALES ADICIONALES: u Incubadora bacteriolgica (37 C) u Nevera de 2 a 8 C u Hisopo u Placa Petri 90 mm 150 mm u Pinza u Regla milimetrada Vd: 1 mm u Solucin patrn de turbiedad Standard de Mc Farland u Agar Mueller Hinton u Solucin Cloruro de sodio 0,85 % u Caldo de cultivo u Tubos para ensayo u Mechero u Timer u Desecadora u Asa o aguja de inoculacin u Caldo cultivo Triptona Soya o Caldo corazn u Cepas controles PRINCIPIO DEL MTODO: El ensayo se basa en el enfrentamiento de un disco impregnado con el antibitico, en la superficie de un medio de cultivo donde crece el microorganismo aislado en el laboratorio microbiolgico. Este medio, permite la difusin del antibitico. A medida que aumenta el radio de difusin, hay una reduccin logartmica de la concentracin del antibitico hasta que se alcanza un punto en el que el desarrollo bacteriano en la superficie del agar ya no es inhibido. El resultado es una zona de inhibicin del desarrollo del microorganismo con bordes bien delineados (halo de inhibicin), el cual permite al analista determinar si el antibitico en cuestin es adecuado para el tratamiento de la enfermedad infecciosa. El halo de inhibicin se mide utilizando una regla milimetrada Vd: 1mm FRECUENTES CAUSAS DE ERROR QUE PUEDEN INFLUIR EN LOS RESULTADOS: I- Medio de cultivo: Preparacin incorrecta del Mueller Hinton agar. Uso de medios en mal estado o placas mal almacenadas. Uso de placas con signos de deterioro en la superficie del agar. II- Preparacin del inculo Uso de cultivos mezclados o contaminados.

Inadecuada normalizacin de la densidad del inculo. Suspensin del inculo demasiado fuertes o demasiado dbil. Inadecuada preparacin y/o almacenaje del patrn de turbiedad (Debe ser almacenado en tubos muy bien tapados y mantenido en la oscuridad). Inadecuada agitacin del cultivo antes de ser utilizado con la comparacin (debe ser agitado vigorosamente). Tiempo excesivo transcurrido entre los pasos de la manipulacin desde la preparacin del inculo a la incubacin de las placas.
III- Inoculacin Hisopo muy saturado cuando se inoculan las placas. Incubacin a temperaturas inferiores a la ptima. Uso del mtodo para bacterias anaerobias o de crecimiento lento. Secado incorrecto de las placas (deben secarse durante 15 min a de la aplicacin de los discos).
37 C antes
IV- Aplicacin de los discos Inadecuada conservacin de los discos, tape firmemente el bulbo y gurdelo nuevamente de 2 a 8 C en un ambiente seco. Al sacar el bulbo para su uso, espere una o dos horas a que este alcance temperatura ambiente para su aplicacin. Los discos deben colocarse a una distancia no menor de 15 mm del centro del mismo al borde de la placa y una separacin entre ellos no menor de 25 mm para evitar la superposicin de halos de inhibicin. Procurar no colocar discos de antibiticos bactericidas (Ej: Penicilina, Cefalosporina, Aminoglucsidos, Vancomicina) al lado de antibiticos bacteriostticos (Ej. Cloranfenicol, Tetraciclina, Sulfonamidas) para evitar el antagonismo antibitico. V- Prueba de control de los resultados Lecturas prematuras antes de las 16 a 18 h. de incubacin Fallas en la lectura de la zona de inhibicin Fallas en el uso de las cepas control MUESTRA: Inculo. Preparacin del inculo: Tomar 5 10 colonias de morfologa similar, provenientes de un cultivo puro del microorganismo aislado, valindose de un asa aguja de inocular y transferir a un tubo para ensayo que contiene de 3 a 5 mL de un caldo de cultivo adecuado (Triptona Soya o Caldo corazn) e incubar de 35 a 37 C durante 2 a 5 h . La turbiedad producida durante este tiempo corresponde al comienzo del crecimiento (Fase exponencial) del microorganismo. Ajuste la opacidad del inculo con caldo o solucin de cloruro de sodio 0,85 %. El ajuste se realiza contra la Solucin patrn de turbiedad Standard de Mc Farland obtenido, aadiendo 0,5 mL de Solucin de cloruro de bario dihidratado 0,048 M (1,175 % M/V) a 99,6 mL de Acido sulfrico 0,36 N (1 % V/V). Este patrn deber agitarse para una adecuada homogeneidad antes de ser usado y deber descartarse y volver a prepararse mensualmente. Se almacena en unos tubos bien tapados y mantenidos en la oscuridad. La suspensin bacteriana se ajusta al % de transmitancia segn microorganismo, teniendo en cuenta lo establecido en los procedimientos de laboratorio, usando un colormetro a una longitud de onda de 580 nm.

PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO: El disco para Antibiograma est listo para usar. Sacar de refrigeracin y esperar a que alcance temperatura ambiente por una o dos horas. Despus de utilizar el bulbo tpelo firmemente y gurdelo nuevamente de 2 a 8 C en un ambiente seco. Nunca deje un bulbo que contenga discos para Antibiograma expuesto innecesariamente a la humedad ambiental para evitar la degradacin del antibitico. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Los valores individuales de los tamaos de la zona de inhibicin de las cepas de referencia deben quedar comprendidos dentro del intervalo de variacin previsto. Para verificar el estado de los discos de sensibilidad utilice las siguientes cepas: S. aureus ATCC 25923, E. coli ATCC 25922 y Ps. aeruginosa ATCC 27853. Producto Amikacina 30 g Ampicilina 10 g Azlocilina 75 g Carbenicilina 100 g Cefaloridina 30 UI Cefazolina 30 g Cefotaxima 30 g Ceftazidima 30 g Ceftriaxona 30g Cefuroxima 30 g Ciprofloxacina 5g Cloranfenicol 30 g Colimicina 10 g Eritromicina 15 UI Estreptomicina 10 UI Gentamicina 10 UI Kanamicina 30 UI Meticilina 5 g Novobiocina 30 UI Oxacilina 1g Penicilina 6 g Sulfametoxazol/ Trimetroprim (23,75 g/1,25 g) Tetraciclina 30 UI Vancomicina 30 UI Intervalos de variacin previsto para el dimetro (mm) S. aureus E. coli Ps. Aeruginosa ATCC 25923 ATCC 25922 ATCC 27853 20-26 19-26 18-26 27-35 16-22 24-30 23-29 18-24 29-37 15-21 29-35 23-29 25-31 29-35 18-22 16-20 25-32 22-29 22-28 29-35 17-23 27-35 20-26 22-30 30-40 25-33 19-26 21-27 11-15 22-30 14-22 12-20 19-27 19-26 16-21 19-26 17-25 17-22 22-31 18-24 26-37 24-32 24-32 19-28 15-19 18-25 -
PROCEDIMIENTO: 1Preparacin del medio de cultivo Mueller Hinton el cual se considera el ms satisfactorio para la realizacin del Antibiograma por el bajo contenido de inhibidores y su elevado ndice de reproducibilidad. Preparar segn indicaciones del proveedor. La calidad del agua es determinante ya que la misma debe estar libre de iones metlicos. Variaciones de cationes divalentes, principalmente Calcio y Magnesio, afectar los resultados con aminoglucsidos, y Tetraciclina, cuando se prueba ante Ps. aeruginosa . Un contenido excesivo en catin, puede dar un inaceptable aumento en el tamao de la zona. 2Servir el agar en placas petri de 90 150 mm de dimetro interior. La temperatura del medio antes de verterlo debe estar de 48 a 50 C. u Volumen medio: 25 mL para placas de 90 mm de dimetro interior u Volumen medio: 60 mL para placas de 150 mm de dimetro interior u Profundidad del agar: 4 mm

34Las placas que contienen el medio deben secarse durante 15 min. a 37 C antes de su uso para eliminar el exceso de humedad para no diluir el inculo bacteriano El medio Mueller Hinton puede enriquecerse con el 5% de sangre desfibrinada cuando se cultivan bacterias de difcil crecimiento ( Streptococcus, haemophilus, Neisseria patgenas, etc) No usar placas que muestren signos de deterioro en la superficie del agar Las placas con el medio Agar Mueller Hinton se inoculan utilizando un hisopo de algodn sobre aplicador de madera de la manera siguiente: Sumerja el hisopo en el inculo ajustado. Elimine el exceso de lquido rotando y presionando el hisopo sobre las paredes internas del tubo, por encima del nivel del lquido. Estre toda la superficie del agar en tres direcciones, girando la placa alrededor de 60 cada vez para garantizar una inoculacin uniforme. Deje secar la placa durante 15 min previo a la inoculacin de los discos Aplicacin de los discos: Los discos se colocan con pinzas, flameando cada vez, a una distancia no menor de 15 mm del centro del mismo al borde de la placa y una separacin entre ellos no menor de 25 mm para evitar superposicin de los halos de inhibicin. Incubar a 37 C y realizar la lectura a partir de las 16 h. de aplicado el disco hasta las 48 h.
56u
u u
7u
LECTURA E INTERPRETACIN: La zona de inhibicin es el rea que rodea al disco donde el crecimiento ha sido completamente inhibido, sin embargo con las cepas de Proteus, la zona puede aparecer invadida aunque se define claramente. No se debe tener en cuenta esta invasin. Existe un sistema de lectura directa, muy fcil de reproducir, que funde la lectura e interpretacin en un solo paso: Se confeccionan lminas circulares transparentes con crculos concntricos cuyos dimetros delimitan zonas que se corresponden con las categoras: Sensible, Intermedio y Resistente que aparece en la tabla de interpretacin de Bauer Kirby. Basta con hacer coincidir el disco cuyo halo de inhibicin se debe leer con el crculo central de la lmina de lectura. El lmite de la zona de inhibicin, caer en una de las tres zonas concntricas. CRITERIOS DE ACEPTACIN BASADOS EN EL MTODO DE BAUER KIRBY: Antimicrobiano Resistente Intermedio (mm) (mm) 14 menos 15-16 Amikacina 30 g 14-16 Ampicilina 10 g en pruebas con microorganismos entricos Gram - 13 menos negativos 28 menos Ampicilina 10 g en pruebas con Estafilococos 16 menos Ampicilina 10 g en pruebas con enterococos 21 menos 22-29 Ampicilina 10 g en pruebas con Streptococcus (no enterococos) 19 menos Ampicilina 10 g en pruebas con Listeria monocytogenes 17 menos Azlocilina 75 g en pruebas con Pseudomona 18-22 Carbenicilina 100 g en pruebas con especies de Proteus y con 17 menos Escherichia coli 13 menos 14-16 Carbenicilina 100 g en pruebas con Pseudomonas aeruginosas Cefaloridina 30 UI cuando se le registra la sensibilidad a la 14 menos 15 -17 cefaloridina, cefaclor, cefadroxil, cefalotina, cefalexina, cefapirina, cefazolina, cefacetrilo y cefradina 14 menos 15-17 Cefazolina 30 g Cefotaxima 30 g 14 menos 15-22 14 menos 15-17 Ceftazidima 30 g 13 menos 14-20 Ceftriaxona 30g 14 menos 15-17 Cefuroxima 30 g 15 menos 16-20 Ciprofloxacina 5g 12 menos 13-17 Cloranfenicol 30 g 8 menos 9-10 Colimicina 10 g
Sensible (mm) 17 ms 17 ms 29 ms 17 ms 30 ms 20 ms 18 ms 23 ms 17 ms 18 ms
18 ms 23 ms 18 ms 21 ms 18 ms 21 ms 18 ms 11 ms

Antimicrobiano Resistente (mm) Eritromicina 15 UI 13 menos Estreptomicina 10 UI 11 menos Gentamicina 10 UI cuando se registra la sensibilida a la gentamicina 12 menos y a la sisomicina Kanamicina 30 UI 13 menos 9 menos Meticilina 5 g en pruebas con Staphylococcus Novobiocina 30 UI 17 menos 10 menos Oxacilina 1g en pruebas con Staphylococcus y neumococos 19 menos Oxacilina 1g en pruebas para Penicilina G susceptibles 10 menos Penicilina 6 g en pruebas con Estafilococos 11 menos Penicilina 6 g en pruebas con otros microorganismos Sulfametoxazol / Trimetroprim 10 menos (23,75 g/1,25 g) Tetraciclina 30 UI 14 menos Vancomicina 30 UI en pruebas con otros Gram - positivos 9 menos Vancomicina 30 UI en pruebas con enterococos 14 menos TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C. Protjase de la humedad ubicando en desecadora. ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: 12 das de 2 a 8 C. Protjase de la humedad PRECAUCIONES: Al sacar el bulbo para su uso, espere a que este alcance temperatura ambiente. Siempre que un disco haya sido extrado del bulbo, este deber guardarse en un desecador que cierre perfectamente. Los discos deben colocarse a una distancia no menor de 15 mm del centro del mismo al borde de la placa . Manipule las cepas aisladas utilizando las medidas de proteccin y Bioseguridad para evitar que el microorganismo entre en contacto con la piel y las mucosas y provoque infeccin BIBLIOGRAFA: 1. Informe 32 OMS Comit de expertos de la OMS en Patrones Biolgicos: P 153 190. Serie de informes Tcnicos No. 673. Ginebra 1982 2. Gavan, T. Prueba in vitro de susceptibilidad antimicrobiana Clin. Med. Nort. AMER. 58:493-504, 1974 3. Ericsson, A. M. y Sherris., J. D. Acta Patkol. Microbiol. Scond. Suppl 217 (B), 1971 4. Sdigmon, S. J. Post Grad Med. J. 40 (Suppl), 1964 5. Antibiotics in Laboratory Medicine. Victor Lorian M. D. Editor Williams & Welkins. Baltimore London. Los Angeles. Sydney Pg 27 60 Second Edition 1986 Intermedio (mm) 14 -22 12-14 13-14 14 - 17 10-13 18-21 11-12 21-28 12-21 11-15 15-18 10-11 15-16 Sensible (mm) 23 ms 15 ms 15 ms 18 ms 14 ms 22 ms 13 ms 20 ms 29 ms 22 ms 16 ms 19 ms 12 ms 17 ms
COD IGO S
337.2.032545 337.2.032590 337.2.034077 337.2.090950 337.2.091015 337.2.154181 337.2.094223 337.2.094161 337.2.094211 337.2.094232 337.2.091095 337.2.185900 337.2.186500 337.2.242500 337.2.364500 337.2.488005 337.2.544632 337.2.573990 337.2.154763 337.2.692450 337.2.154864 AMIKACINA 30 g AMPICILINA 10 g AZLOCILINA 75 g CARBENICILINA 100 g CEFALORIDINA 30 UI CEFOTAXIMA 30 g CEFTRIAXONA 30 g CEFAZOLINA 30 g CEFTAZIDINA 30 g CEFUROXIMA 30 g CLORANFENICOL 30 g ERITROMICINA 15 UI ESTREPTOMICINA 10 UI GENTAMICINA 10 UI KANAMICINA 30 UI NOVOBIOCINA 30 UI OXACILINA 1 g PENICILINA 6 g Sulfametoxasol Trimetropina 23.75 g/1,25g TETRACICLINA 30 UI VANCOMICINA 30 UI
Ltex-FR
DIAGNOSTICOS (60 determinaciones)
Ltex-FR
Prueba semicuantitativa por diluciones seriadas:

Colocar en una gradilla 10 tubos para ensayo (13 x 100) mm, enumerados del 1 al 10. Pipetear 1,9 mL de solucin de cloruro de sodio 0,85 % en el tubo No. 1 y 1 mL en el resto de los tubos. Aadir 0,1 mL de suero problema al tubo No. 1, mezclar bien y transferir 1 mL de la mezcla al tubo No. 2. Mezclar bien y transferir 1 mL de la mezcla del tubo No. 2 al tubo No. 3 y as sucesivamente hasta el ltimo tubo. De cada dilucin realizada en tubo se toma una gota y se deposita en una lmina portaobjeto y se procede de igual forma que en la prueba cualitativa. Tubo No. 1 2 3 4 5 1,9 1 1 1 1 Solucin de cloruro de sodio Suero Problema Dilucin Tubo No. Solucin de cloruro de sodio Suero Problema Dilucin 0,1 9 1/20 6 1 = 9 1/640 = 9 1/40 7 1 = 9 1/1280 = 9 1/80 8 1 = 9 1/2560 = 9 1/160 9 1 = 9 1/5120 = 9 1/320 10 1 =

R1: Ltex FR. Frasco por 4 mL R2: Suero control positivo. Frasco por 0,5 mL (de origen humano) R3: Suero control negativo. Frasco por 0,5 mL (de origen humano)
Para la determinacin del Factor Reumatoideo en suero por aglutinacin en lmina. PARA USO IN VITRO
Lminas portaobjeto, aplicador, solucin cloruro de sodio 0,85 %, gradilla, tubos para ensayo (13x100) mm y pipetas

La deteccin del Factor Reumatoideo en suero por aglutinacin en lmina, es una reaccin inmunoqumica que se basa en la capacidad de unin del Factor Reumatoideo (FR) con la Inmunoglobulina G adsorbida sobre un portador. Si el suero muestra es positivo al FR se debe observar la reaccin de aglutinacin a simple vista antes de 2 min y si es negativo no ocurre aglutinacin. CRITERIO DEL DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL MTODO: El intervalo en que debe aparecer la aglutinacin es de 2 min. y el tamao de los agregados lo podemos clasificar de +, ++, +++, ++++. Todas las pruebas de Ltex para la determinacin de Factor Reumatoideo son de gran sensibilidad, pero al mismo tiempo pueden dar algunos falsos positivos, a pesar de la dilucin inicial 1:20, por lo que deben tenerse siempre presente.
MUESTRA:
Suero: Cuando no pueda efectuarse la prueba inmediatamente despus de obtenido el suero, ste puede conservarse en refrigeracin de 2 a 8 C durante 3 das como mximo. De lo contrario el suero debe congelarse.

Los reactivos R2 y R 3 son los controles internos, donde el R1 debe aglutinar con R2 y no R3.
PROCEDIMIENTO:
Prueba cualitativa: Diluir el suero problema 1:20 en solucin de cloruro de sodio 0,85 % (1mL de solucin de cloruro de sodio 0,85 % ms una gota (0,05 mL) de suero problema) Depositar una gota del suero diluido sobre una lmina portaobjeto. Aadir una gota de reactivo de Ltex FR Mezclar ambas gotas con un aplicador Homogeneizar moviendo de forma circular y suavemente el portaobjeto. Efectuar la lectura frente a una lmina de iluminacin tangencial en un intervalo de 2 min. y sobre una superficie negra. Positivo: Aglutinacin claramente visible Negativo: No se produce aglutinacin en el perodo de tiempo antes mencionado. De acuerdo a la rapidez con que se inicia la aglutinacin y el tamao de los agregados dentro del perodo de tiempo sealado (2 min.) se puede efectuar un estimado de clasificacin de +,++, +++, ++++. Para una valoracin ms precisa puede recurrirse a:
Interpretacin : El ttulo del suero es el recproco de la ms alta dilucin en la que se observa una clara aglutinacin. Los ttulos de 1/20 y 1/40 deben ser considerados como dbilmente positivos. Ttulos de 1/ 80 o superiores deben considerarse francamente positivos. Recomendaciones: No utilizar suero contaminado. Cuando no puede efectuarse la prueba inmediatamente despus de obtenido el suero, este puede conservase a una temperatura de 2 a 8 C durante 3 das como mximo. De lo contrario el suero debe congelarse. Los controles positivo y negativo deben usarse directamente sin diluir TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C. No congelar el reactivo R1. ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO: 30 das de 2 a 8 C. No congelar el reactivo R1. PRECAUCIONES: R2 y R 3 son POTENCIALMENTE INFECCIOSOS BIBLIOGRAFA:
Sonnerwirth Alex C., Jarret Leonard. Mtodos y Diagnsticos del laboratorio. Tomo 3. 1983. Editorial Cientfico Tcnica. Bernabei Dante. Seguridad Manual para el Laboratorio. Merck. Editorial E. Merck. 1994.
Ltex-STAF
DIAGNOSTICOS (80 determinaciones)
Ltex-STAF

Estuche por un frasco con 4 mL.
Tcnica indirecta:
Sobre una lmina portaobjeto, deposite una pequea cantidad (25 L) de solucin salina, a continuacin y procediendo tal y como se seal para el cultivo en el mtodo directo, homogenice perfectamente en la solucin de cloruro de sodio 8,5 g/L . Aadir una gota de reactivo Ltex-STAF. Mezcle ambas gotas mediante un suave movimiento de balanceo y con el empleo de la aguja de siembra. Efecte la lectura frente una lmina de iluminacin tangencial en un intervalo de un minuto y sobre una superficie negra para observar la reaccin.
Para la identificacin rpida del Staphylococcus aureus (coagulasa positivo) por aglutinacin en lmina PARA USO IN VITRO
Lminas portaobjeto Asa de siembra o aguja Solucin Cloruro de sodio 8,5 g/L Cronmetro Lmpara de iluminacin tangencial Pipetas de 50 y 25 L
Interpretacin:
Positivo: aparicin de una franca aglutinacin con agregados de tamao considerable Negativo: No se produce aglutinacin y la mezcla se mantiene homognea con aspecto lechoso, transcurrido el tiempo de observacin. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C. NO CONGELAR.

La identificacin del Staphylococcus aureus por aglutinacin en lmina, es una reaccin inmunoqumica.
CRITERIO DEL DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL MTODO:

El intervalo en que debe aparecer la aglutinacin es de 1 min. y el tamao de los agregados deben ser considerables.
ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:

El producto en uso es estable 30 d.
MUESTRA:
La muestra consiste en una o ms colonias del microorganismo aislada en un medio de cultivo y comprobado por microscopa ptica, que se corresponde con un estafilococo. A partir de esta colonia o un subcultivo de la misma, se procede a realizar la reaccin de acuerdo al procedimiento que se describe a continuacin.
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
La muestra debe ser manipulada como material infeccioso y se deben cumplir las regulaciones establecidas en los laboratorios de microbiologa.
BIBLIOGRAFA:
1. Klein, F. Et al. Characterization of two diferent agglutinators in the latex fixation test occuring in normal human sera. Inmunol. 10:87, 1966. 2. Atwater, E. et al: The latex fixation test patients with liver disease. Ann. Int. Med. 58:419, 1963 3. K. D .Piatkin, YU. S. Krivoshein. Microbiologa. 2da Edicin. 271. Editorial MIR Mosc. 1981. 4. J. Vandepitte, K. Engbaek, P. Piot, C. C. Heuk. Mtodos bsicos de laboratorio en bacteriologa clnica. OMS. Ginebra. 1993. El control de las enfermedades transmisibles. OMS. Informe oficial de la asociacin Estadounidense de Salud Pblica. Pag 161.Dcimosptima edicin. 2001

Reaccin positiva: Staphylococcus aureus ATCC 25923 Reaccin negativa: Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
PROCEDIMIENTO:
Tcnica directa:
Se deposita una gota (50 L) del reactivo LtexSTAF, sobre una lmina portaobjeto Del cultivo que queremos identificar, ya sea de colonias sobre una placa de petri, o del crecimiento sobre una cua de medio agarizado, tome el equivalente a tres o cuatro colonias con aguja o asa de siembra y lo homogeneizamos perfectamente en la gota de reactivo Ltex-STAF. Efecte la lectura frente a una lmpara de iluminacin tangencial en un intervalo de un minuto y sobre una superficie negra para observar la reaccin.

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Diagno sticadores para Qu mica Clni ca Microbiologa

Empres a de Produccin de Biolgicos Carlos J. Finlay

Test Enzimtico (200 determinaciones)

CONTENIDO DEL ESTUCHE:

Reactivo de trabajo Agua purificada Muestra

CLCULO DE LA ACTIVIDAD DE ALT:

INTERVALO DE REFERENCIA: Hasta 49 U/L a 37 C

ALT = Alanina-aminotransferasa NADH = Dihidronicotinamida-adenina-dinucletido LDH = Lactato deshidrogenasa NAD+ = Nicotinamida-adenina-dinucletido

MATERIALES DE REFERENCIAS UTILIZADOS:

contienen azida sdica, maniplense con cuidado. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

PREPARACIN DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:

Test Enzimtico (200 determinaciones)

CONTENIDO DEL ESTUCHE:

Reactivo de trabajo Agua purificada Muestra

CLCULO DE LA ACTIVIDAD DE AST:

PRINCIPIO DEL MTODO:

INTERVALO DE REFERENCIA: Hasta 46 U/L a 37 C CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:

AST = Aspartato-aminotransferasa NADH = Dihidronicotinamida-adenina-dinucletido MDH = Malato deshidrogenasa NAD+ = Nicotinamida-adenina-dinucletido

CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL METODO:

ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 C PRECAUCIONES: Los componentes

PREPARACIN DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:

CONTENIDO DEL ESTUCHE:

PRINCIPIO DEL METODO:

CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL METODO:

Test Enzimtico (300 determinaciones)

CONTENIDO DEL ESTUCHE:

Reactivo de trabajo Muestra

PRINCIPIO DEL MTODO:

Glucosa-6-fosfato-1-deshidrogenasa Glucosa 6 fosfato + NADP Gluconato 6 fosfato + NADPH + H+

CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL METODO:

Menor que 0,600

Test Enzimtico (300 determinaciones)

PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO Y ESTABILIDAD DEL MISMO:

CONTENIDO DEL ESTUCHE:

MUESTRA : Suero TCNICA DE ANLISIS

CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL METODO:

Interferencias: Concentraciones de triglicridos

ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 0C PRECAUCIONES: Los componentes del juego

Test Enzimtico Colorimtrico (360 Determinaciones)

Reactivo de trabajo Agua purificada Solucin de referencia Muestra

4-colesten-3-ona + H2O 2 POD

2H2 O2 + Fenol + 4 aminoantipirina quinonimina roja + 4H 2O

CRITERIO DE DESEMPEO LIMITACIONES DEL METODO:

PREPARACION DEL REACTIVO:

Test Enzimtico (150 determinaciones)

CONTENIDO DEL ESTUCHE:

Reactivo de trabajo Agua purificada Muestra

ENSAYO ENSAYO Blanco Muestra 2 mL 2 mL 40L

CLCULO DE LA ACTIVIDAD DE FOSFATASA ALCALINA:

PRINCIPIO DEL MTODO:

CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:

p- nitrofenol + fosfato inorgnico

CRITERIO DE DESEMPEO Y LIMITACIONES DEL METODO:

MATERIALES DE REFERENCIAS UTILIZADOS:

PRECAUCIONES: Los componentes del juego

PREPARACIN DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:

MUESTRA : Suero. Evitar el uso de anticoagulantes

Test Colorimtrico 480 determinaciones

Reactivo de trabajo Agua purificada Muestra Reactivo 4