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Guía 3

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Ayudanta 3 Cintica Qumica y Biolgica

1. La actividad de la Acetil-CoA carboxilasa, medida con tres diferentes concentraciones de enzima


y a diferentes concentraciones de sustrato fue la siguiente:

[Enz] (g de protena) 0,1 0,2 0,5
[AcetilCoA] (mol) Velocidad (mol/ min)
0,05 0,275 0,55 1,37
0,14 0,482 1,00 2,50
0,23 0,58 1,19 2,89
0,32 0,642 1,39 3,46
0,5 0,755 1,49 3,66
0,59 0,766 1,50 3,81

Calcular para cada experimento el valor de Km y el valor de Vmax.
Son los valores de Km y Vmax iguales o diferentes?
Sabiendo que la enzima pesa 220 000 grs/mol, haga una grfica de Vmax vs mol
de enzima.
Qu representa la pendiente de esta grfica?

2. Considere a la enzima Invertasa, que cataliza la hidrlisis de Sacarosa a fructosa y glucosa. Esta
enzima posee una Km para sacarosa de 0.5 mM y una constante cataltica de 175 min-1. Si se
mide su actividad en presencia de 0.25 mM de sacarosa con 25 pmol de enzima en la cubeta -
qu velocidad de catlisis se observar? - qu fraccin representa esto de la Vmax que se
podra calcular en esta reaccin si se variase la cantidad de sacarosa? - Cunto sustrato habra
que aadir para que la velocidad observada alcanzase 0.95% de la Vmax? - Qu importancia
podra tener esto para la posible aplicacin industrial de la enzima? - Explique sus respuestas.

3. La enzima Aspartato transaminasa, que cataliza la reaccin:

Aspartato + Oxoglutarato --> Glutamato + Oxaloacetato
se realizaron los siguientes tres experimentos :
[Asp]= 1mM [Oxg]= 0,02 mM [Oxg]= 0,05 mM
[OxG] (mM) Vel (mol/min) [Asp](Mm) Vel (mol/min) [Asp](Mm) Vel (mol/min)
0,002 0,444 0,007 0,411 0,007 0,468
0,018 2,031 0,048 1,268 0,048 2,017
0,037 2,781 0,171 1,722 0,171 3,317
0,063 3,336 0,335 1,850 0,335 3,866
0,094 3,756 0,547 1,983 0,547 4,123
0,493 4,324 1,016 2,031 1,016 4,324

Calcule Km y Vmax para cada sustrato.
Cambian las Vmax? Explique su respuesta
Explique que pas en el segundo experimento, con respecto al tercero.
Cuntos y cules valores de Km debo considerar para describir la afinidad de la
enzima por sus substratos?
Qu conclusin se podra sacar de esos datos?

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