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    Mmi Pruebas

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    Jesús Loreto
    El documento describe diversas pruebas bioquímicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología para el diagnóstico microbiológico, incluyendo pruebas de catalasa, nitratos, fermentación de carbohidratos, coagulasa, sensibilidad a antibióticos y más. Explica los pasos para el diagnóstico microbiológico y cómo estas pruebas pueden ayudar a identificar diferentes géneros y especies de microorganismos.

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    El documento describe diversas pruebas bioquímicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología para el diagnóstico microbiológico, incluyendo pruebas de catalasa, nitratos, fermentación de carbohidratos, coagulasa, sensibilidad a antibióticos y más. Explica los pasos para el diagnóstico microbiológico y cómo estas pruebas pueden ayudar a identificar diferentes géneros y especies de microorganismos.

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    El documento describe diversas pruebas bioquímicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología para el diagnóstico microbiológico, incluyendo pruebas de catalasa, nitratos, fermentación de carbohidratos, coagulasa, sensibilidad a antibióticos y más. Explica los pasos para el diagnóstico microbiológico y cómo estas pruebas pueden ayudar a identificar diferentes géneros y especies de microorganismos.

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    El documento describe diversas pruebas bioquímicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología para el diagnóstico microbiológico, incluyendo pruebas de catalasa, nitratos, fermentación de carbohidratos, coagulasa, sensibilidad a antibióticos y más. Explica los pasos para el diagnóstico microbiológico y cómo estas pruebas pueden ayudar a identificar diferentes géneros y especies de microorganismos.

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    UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL LISANDRO ALVARADO DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL SECCION DE MICROBIOLOGA

    Microbiologa Mdica I

    TALLER DE PRUEBAS BIOQUMICAS BSICAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA


    Yudy Aranguren, octubre 2011

    PASOS PARA EL DIAGNOSTICO: 1.- MUESTRA:

    2.- DIRECTO: Coloraciones: Gram

    3.- CULTIVO

    4.- PRUEBAS BIOQUIMICAS

    PRUEBAS BSICAS PARA EL DIAGNSTICO

    MICROBIOLGICO DE
    COCOS GRAM POSITIVO

    PRUEBA DE LA CATALASA
    La determinacin de la presencia de catalasa Se pone en contacto una pequea cantidad de cultivo bacteriano de 24-48 horas de incubacin, con en perxido de hidrgeno (H2O2) al 3%. La liberacin de O2 indica la presencia de catalasa.

    H2O2 + catalasa = H2O + O2

    Son catalasa negativo: Son catalasa positivo:

    PRUEBA DE LA REDUCCIN DE NITRATOS A NITRITOS


    Permite determinar la capacidad de un organismo de reducir el nitrato en nitritos
    por algunas especies bacterianas que poseen la enzima nitrato-reductasa

    Se agrega a un cultivo en caldo unas gotas de:


    - Reactivo A: solucin de dimetilnaftilamina 0,6%. - Reactivo B: solucin de cido sulfanlico 0,8%.

    Se observa un cambio de color: Positivo: Rojo ladrillo Negativo: Sin cambio de color

    FERMENTACIN DE CARBOHIDRATOS
    La fermentacin de un carbohidrato (azucares) por

    un microorganismo en
    identificacin.

    particular ayuda a su

    La acidez que se produce en el medio se pone en evidencia a travs del cambio de color de un indicador de pH

    Se puede evidenciar la produccin de gas

    AGAR SALADO MANITOL

    PRUEBAS SEGUNDARIAS 1.- COAGULASA

    2.- SENSIBILIDAD O RESISTENCIA A LA NOVOBIOCINA

    PRUEBA DE LA COAGULASA
    La determinacin de la presencia de la enzima coagulasa: Se pone en contacto una pequea cantidad de cultivo bacteriano con plasma con anticoagulante e

    incubar 4 horas a 37C.


    COAGULASA POSITIVA Staphylococcus aureus NEGATIVA Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus

    PRUEBA DE SENSIBILIDAD

    SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA
    SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA

    SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO

    RESISTENTE-CON CRECIMIENTO

    Staphylococcus epidermidis

    Staphylococcus saprophyticus

    NOVOBIOCINA

    NOVOBIOCINA

    Sin crecimiento alrededor del disco de Novobiocina

    Con crecimiento alrededor del disco de Novobiocina

    CRECIMIENTO EN ALTAS CONCENTRACIONES DE SAL


    COCOS GRAM POSITIVOS

    Gnero Staphylococcus crece a altas


    concentraciones de sal (7% NaCl)

    Gnero Streptococcus NO crece a


    altas concentraciones de sal (7% NaCl)

    Gnero Enterococcus crece a altas concentraciones de sal de 6,5% per o NO a 7% NaCl

    CRECIMIENTO EN ALTAS CONCENTRACIONES DE SAL Agar Salado Manitol: Crecimiento con o sin fermentacin de manitol
    1.- Gnero Streptococcus no crece a 7% de NaCl 2.- Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus saprophyticus Crecen y NO fermentan el manitol (color rosado del medio) 3.- Staphylococcus aureus crece y fermenta el manitol (color amarillo del medio)

    PATRONES DE HEMLISIS

    PATRONES DE HEMLISIS

    AGAR SANGRE ALFA: Lisis parcial de los glbulos rojos BETA: Lisis total de los glbulos rojos

    ALFA BETA

    GAMMA
    GAMMA: Sin lisis

    PRUEBA DE CAMP
    Prueba de CAMP: Las especies del genero Streptococcus del grupo B ( BETA
    HEMOLITICOS) produce un factor que aumenta la beta hemlisis de una cepa indicadora de Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus

    Streptococcus agalactiae

    Streptococcus pyogenes

    AUTOEVALUACIN

    TIPO DE HEMLISIS

    NO HEMOLITICO

    CLASIFICACION DE LANCEFIELD PARA ESTREPTOCOCOS BETA HEMOLITICOS

    http://www.youtube.com/watch?v=Zks-2AZuZ1Y&feature=related

    Extracto soluble de la pared celular por accin enzimtica

    Partculas de ltex cubiertos de anticuerpos especficos

    CLASIFICACION DE LANCEFIELD PARA BETA HEMOLITICOS

    PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LA BACITRACINA


    Pruebas para diferenciar estreptococos Beta hemolticos (Grupo A y Grupo C)

    Con crecimiento alrededor del disco de Bacitracina

    Sin crecimiento alrededor del disco de Bacitracina

    PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LA OPTOQUINA


    Pruebas para diferenciar Streptococcus pneumoniae y otros estreptococos Alfa hemolticos (Streptococcus mitis)
    Streptococcus pneumoniae Streptococcus mitis

    DISCO DE OPTOQUINA

    DISCO DE OPTOQUINA

    Sin crecimiento alrededor del disco de Optiquina

    Con crecimiento alrededor del disco de Optiquina

    PRUEBA DE SENSIBILIDAD A BILIS


    Pruebas para diferenciar Streptococcus pneumoniae y otros estreptococos Alfa hemolticos (Streptococcus mitis)

    Streptococcus mitis NO lisado en presencia de Bilis

    Streptococcus pneumoniae lisado en presencia de Bilis

    PRUEBAS BSICAS PARA EL DIAGNSTICO

    MICROBIOLGICO DE
    BACILOS GRAM NEGATIVOS

    PASOS PARA EL DIAGNOSTICO:

    1.- MUESTRA:

    2.- DIRECTO: Coloraciones: Gram

    3.- CULTIVO

    4.- PRUEBAS BIOQUIMICAS

    FERMENTACIN DE LACTOSA EN MEDIO MAC CONKEY

    PRUEBA DE MOVILIDAD
    Permite conocer si las bacterias en estudio son mviles o no, eso ayuda en el proceso de clasificacin Se realiza una siembra pinchando el medio con la aguja bacteriolgica, y tras incubar 24 h, se observa si se ha producido crecimiento entorno a la zona inoculada.

    PRUEBA DEL INDOL


    Se cultiva la especie en estudio en un caldo rico en triptofano para que se produzca el Indol Se agrega al cultivo tres gotas del reactivo de Kovack (P-dimetil-aminobenzaldehido ) Se determina la presencia de Indol a travs de la formacin de un anillo rojo en la superficie del caldo

    PRUEBA DEL CITRATO


    Determina si el organismo bacteriano en cuestin se desarrolla o no en un medio que contiene citrato como nica fuente de carbono.

    Medio citrato de Simmons

    KLIGLER: Agar triple azucar hierro

    PRUEBA DE LA OXIDASA
    Prueba secundaria Permite conocer la presencia o ausencia del citocromo C en bacterias y es una caracterstica fisiolgica muy utilizada en taxonoma Se toma una pequea cantidad de cultivo bacteriano de 24-48 horas de edad y se transfiere a un trozo de papel filtro previamente embebido en n,n-dimetil p-fenilendiamina Este reactivo es rpidamente transformado a un
    Prueba de oxidasa

    producto oxidado de color prpura dentro de 30


    segundos en presencia de citocromo oxidasa.

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