Este documento describe un procedimiento para extraer y aislar ADN de chicharos. El objetivo es romper las membranas celulares con detergentes para liberar el ADN y luego precipitarlo con alcohol para su visualización. Primero se prepara un tampón con detergente, sal y jugo de piña para destruir las membranas. Luego se licuan los chicharos en este tampón y se filtra la mezcla. Finalmente, se añade alcohol frío para hacer precipitar el ADN, que puede observarse en la interfase entre el alcohol y el agua
Este documento describe un procedimiento para extraer y aislar ADN de chicharos. El objetivo es romper las membranas celulares con detergentes para liberar el ADN y luego precipitarlo con alcohol para su visualización. Primero se prepara un tampón con detergente, sal y jugo de piña para destruir las membranas. Luego se licuan los chicharos en este tampón y se filtra la mezcla. Finalmente, se añade alcohol frío para hacer precipitar el ADN, que puede observarse en la interfase entre el alcohol y el agua
Este documento describe un procedimiento para extraer y aislar ADN de chicharos. El objetivo es romper las membranas celulares con detergentes para liberar el ADN y luego precipitarlo con alcohol para su visualización. Primero se prepara un tampón con detergente, sal y jugo de piña para destruir las membranas. Luego se licuan los chicharos en este tampón y se filtra la mezcla. Finalmente, se añade alcohol frío para hacer precipitar el ADN, que puede observarse en la interfase entre el alcohol y el agua
Este documento describe un procedimiento para extraer y aislar ADN de chicharos. El objetivo es romper las membranas celulares con detergentes para liberar el ADN y luego precipitarlo con alcohol para su visualización. Primero se prepara un tampón con detergente, sal y jugo de piña para destruir las membranas. Luego se licuan los chicharos en este tampón y se filtra la mezcla. Finalmente, se añade alcohol frío para hacer precipitar el ADN, que puede observarse en la interfase entre el alcohol y el agua
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PRCTICA NO.
6 Extraccin y aislamiento de ADN OBJETIVOS
Romper con detergentes la pared celular, la membrana plasmtica y la membrana
nuclear, para liberar el ADN. Precipitar en alcohol el ADN, para su visualizacin.
INTRODUCCIN ADN es la abreviacin del Acido Desoxirribonucleico, es el material gentico de todos los organismos vivos y de casi todos los virus. Es el ADN quien lleva la informacin necesaria para dirigir la sntesis de protenas y la duplicacin de la misma molcula, la cual es la molcula de la vida, ya que constituye el material gentico de todos los organismos vivos y se encuentra en el interior del ncleo de las clulas. El ADN es el componente qumico primario de los cromosomas y el material que constituye los genes, su funcin primordial es conservar la informacin durante la divisin celular, trasmitirla de generacin en generacin y hacer efectiva la informacin gentica que contiene. Para estudiar el ADN es imprescindible aislarlo e identificarlo. Existen diferentes mtodos de aislamiento, dependiendo del tipo de estudios o investigacin que se quiera realizar. Sin embargo todos comparten el hecho de que, debido a que la molcula se encuentra al interior de estructuras membranosas y est asociada con protenas, se requiere usar sustancias adecuadas para obtener al ADN de la forma ms purificada posible. PROCEDIMIENTO Preparacin de la muestra 1. Colocar en un vaso de precipitados: 5 ml de detergente, 2 gr de sal comn y 3 ml de jugo de pia. 2. Aadir posteriormente 30 ml de agua destilada, a esta mezcla se le conoce como tampn de extraccin. 3. Mezclar los chicharos con el tampn de extraccin en una licuadora. 4. Licuar a velocidad mxima durante 30 s. 5. Filtrar la mezcla utilizando un colador y gasa en un vaso de precipitados. Trasferir a la probeta no graduada aproximadamente 10 ml.
6. Adicionar 10 ml de alcohol fro, hacindolo resbalar por las paredes del tubo, para que se forme una copa sobre el filtrado. 7. Reposar de 2 a 3 min y observar. RESULTADOS
CUESTIONARIO 1. Para qu se utiliza el detergente y el NaCl en la extraccin? SAL: La sal en disolucin acta disminuyendo la solubilidad de las protenas, lo que hace que precipiten y se separen ms fcilmente del ADN. DETERGENTE: El detergente utilizado, tiene como funcin destruir las membranas celulares del tejido vivo; el detergente disuelve las grasas, que es el componente principal de la membrana plasmtica y nuclear de las clulas (es el mismo principio por el que el gel limpia la grasa de nuestra piel). Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior.
2. Qu componente aporta el jugo de pia o de papaya y cul es su utilidad?
Los zumos de pia y papaya contienen un enzima, la papana, que contribuye a eliminar las protenas que puedan contaminar el ADN. 3. Por qu se incorpora finalmente el etanol muy fro en el medio? El ADN es una molcula muy larga y tiende agruparse. De ah la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. Adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa. FUENTES DE INFORMACIN http://learn.genetics.utah.edu/es/extraction/ (consulta: 31 de octubre) http://www.syngenta.com.mx/que-es-adn.aspx (consulta: 31 de octubre)
