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    Extraccion de Adn

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    SantanderhValeriano ChristianhAndree
    Este documento describe los pasos para extraer ADN de células de hígado de pollo. Primero, el tejido se tritura para romper las células y liberar su contenido. Luego, se añaden soluciones salinas y detergente para romper membranas y separar el ADN de las proteínas. Finalmente, se hace precipitar el ADN añadiendo alcohol, obteniéndose hebras blancas de ADN.

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    SantanderhValeriano ChristianhAndree
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    Este documento describe los pasos para extraer ADN de células de hígado de pollo. Primero, el tejido se tritura para romper las células y liberar su contenido. Luego, se añaden soluciones salinas y detergente para romper membranas y separar el ADN de las proteínas. Finalmente, se hace precipitar el ADN añadiendo alcohol, obteniéndose hebras blancas de ADN.

    Descripción original:

    quimica

    Derechos de autor

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    Este documento describe los pasos para extraer ADN de células de hígado de pollo. Primero, el tejido se tritura para romper las células y liberar su contenido. Luego, se añaden soluciones salinas y detergente para romper membranas y separar el ADN de las proteínas. Finalmente, se hace precipitar el ADN añadiendo alcohol, obteniéndose hebras blancas de ADN.

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    Este documento describe los pasos para extraer ADN de células de hígado de pollo. Primero, el tejido se tritura para romper las células y liberar su contenido. Luego, se añaden soluciones salinas y detergente para romper membranas y separar el ADN de las proteínas. Finalmente, se hace precipitar el ADN añadiendo alcohol, obteniéndose hebras blancas de ADN.

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    EXTRACCION DE ADN EN HIGADO DE POLLO

    Objetivo

    En esta prctica realizaremos la extraccin del ADN de clulas animales, su estructura


    fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en
    el ncleo celular de largusimas cadenas de esta molcula.

    Material necesario

    Tejido animal (hgado de pollo)


    Trozo de tela para filtrar
    Pipeta
    Alcohol 96

    solucin de detergente
    Varilla de vidrio
    Solucin de NaCl 2M
    Embudo
    Probeta
    Vaso de precipitados
    Detergente tipo lavavajillas

    Fundamento

    El ADN se encuentra en el interior del ncleo celular, disperso y muy replegado, unido
    a protenas para formar la cromatina. As, para extraerlo ser necesario homogeneizar
    el tejido y romper las clulas para separar el ncleo, romper tambin la envoltura
    nuclear para liberar su contenido, luego separar el ADN de las protenas que lo
    protegen y, por ltimo, precipitarlo para extraerlo de la solucin. Una vez realizado
    esto, el ADN aparecer como un agregado de fibras blanquecinas que se adhieren a la
    varilla de vidrio. Por ltimo, se puede situar sobre un porta, teirlo con un colorante
    bsico y observarlo al microscopio.

    Procedimiento

    1. Triturar en fro la muestra de hgado en el mortero junto con arena o mediante


    la batidora para homogeneizar el tejido. Este procedimiento tambin rompe
    muchas clulas liberando su contenido. Parecer ser ms eficaz el empleo de
    una batidora, con la que se obtiene una mezcla ms homgnea y fcil de filtrar
    despus.

    2. Aadir unos 10 ml de agua destilada o, en su defecto,y remover


    suavemente pero mezclando a fondo.
    3. Filtrar varias veces el resultado a travs de un pedazo de tela. Un pauelo viejo
    de algodn va bien. Este filtrado es lento y difcil, pero retendr en el pauelo
    restos de tejido.

    4. Aadir al filtrado resultante un volumen igual de solucin de NaCl 2M. Esta


    disolucin tan concentrada tiene varios efectos. En primer lugar provoca un
    choque osmtico que es capaz de romper algunas membranas no afectadas
    por el tratamiento anterior. Adems, las cargas positivas de los iones
    Na+ atraern luego las cargas negativas del ADN mantenindolo en la
    disolucin.

    5. Aadir ahora 1 ml de detergente y remover suavemente, mezclando bien pero


    evitando que se forme espuma. Dejando reposar un minuto cada vez.
    El detergente completa la rotura de las membranas al disolver y separar los
    lpidos de las mismas. Tambin interviene en la separacin de las protenas
    que rodean al ADN. Si es posible volver a filtrar, se obtendr una solucin ms
    limpia de restos.
    6. Con los pasos anteriores hemos conseguido tener el ADN libre en la disolucin
    acuosa (la cual contendr tambin diversos restos tisulares y celulares en
    funcin de la bondad del filtrado). A continuacin hay que separar el ADN
    hacindolo precipitar.

    7. Ahora se aaden alcohol. Es muy importante evitar que se mezclen ambas


    soluciones, pues ser en la interfase donde precipitar el ADN.
    1. El ADN ir apareciendo poco a poco en la interfase agua-alcohol en forma
    de grumos blancos.

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