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Aislamiento de Bacteriofagos

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Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Aislamiento de
Bacteriófagos

Grupo 2752
Equipo 8
 El
alumno al término de la práctica sabrá el
manejo y el aislamiento de bacteriófagos.

 Elalumno sabrá que es un bacteriófago, un


virus y el efecto de parasitismo intracelular
que producen en una célula huésped.

 El
alumno sabrá las etapas de la multiplicación
de los bacteriófagos.
 Son los seres más simples y pequeños
que se conocen.

 Básicamente son moléculas de ácido


nucleico envueltas por una cubierta
proteica.

 Son acelulares, (no tienen organización


celular).
Propiedades definitivas de virus:

 Sonparásitos intracelulares obligados,


carecen de enzimas con las que
desarrollar su propio metabolismo,
siendo su única función transportar el
ácido nucleico viral de una célula
hospedadora a otra.
 El
genoma viral será solamente ADN ó
ARN, pero no ambos.

 Semiden en nanómetros y van de 25 a


300nm.
ADN virus ARN virus
 Tipo de material genético

 Forma

 Si son desnudos o envueltos

 Tamaño
Familia Envoltura Simetría de la Tamaño (nm) Estructura Virus
cápside DNA humanos
importantes

Parvovirus No Icosaédrico 22 TS lineal Virus B19

Papovavirus No Icosaédrico 55 TD circular Virus


papiloma
Adenovirus Si Icosaédrico 75 TD lineal Adenovirus

Herpesvirus Si Icosaédrico 100 o mas TD lineal Herpes,


Varicela
Zoster
Poxvirus Si Compleja 250 a 400 TD lineal Virus Viruela
Adenovirus

Virus de la viruela
Varicela Zoster
Familia Envoltura Simetría de la Tamaño (nm) Estructura Virus
cápside DNA humanos
importantes
Picornavirus No Icosaédrico 28 TS lineal Polio virus

Calicivirus No Icosaédrico 38 TS lineal Hepatitis E

Reovirus No Icosaédrico 75 TS lineal Rotavirus

Flavivirus Si Icosaédrico 45 TS no Fiebre


segmentado Amarilla y
Dengue
Togavirus Si Icosaédrico 60 TS lineal Rubeóla
Familia Envoltura Simetría de la Tamaño (nm) Estructura Virus
cápside DNA humanos
importantes
Picornavirus Si Icosaédrico 100 TS lineal VIH

Calicivirus Si Helicoidal 80 a 120 TS lineal (8 Influenza


segmentos)

Reovirus Si Helicoidal 150 TS lineal Sarampión


paperas
Flavivirus Si Helicoidal 15 x 180 TS lineal Rabia

Togavirus Si Helicoidal 80 TS lineal Ébola


Rubeola

Virus fiebre amarilla


Virus del Ebola

Influenza aviar
Influenza porcina

Hepatitis A
 Los virus exóticos, se conocen así debido a que su
morbilidad y mortalidad es difícil de estudiar.
 En general pertenecen a los siguientes géneros:

 Filovirus: Ébola, Marburg

 Poxvirus:Viruela

 Arenavirus: Fiebre Hemorrágica

 Arbovirus: Dengue, Fiebre Amarilla

 Hantavirus: FSR; SPH

 Herpesvirus: Epstein-Barr
 Los bacteriófagos son virus que
infectan bacterias.

 Su ácido nucleico puede ser ADN o


ARN

 La mayoría de los fagos están entre


un rango de 24-200 nm de longitud.

 Se agrupan en dos categorías:

 Bacteriófagos virulentos

 Bacteriófagos temperados
 Estos
bacteriófagos lisan a la bacteria
hospedera.

 Elfago T2 es un virus que infecta a la


bacteria Escherichia coli, descubierto en
1950. Se trata de un virus complejo de
DNA lineal bicatenario
Ensayos para determinar fagos líticos

 Ensayo en placa.- Los fagos líticos se cuentan


mediante ensayos de formación de placas. Una
placa se define como el área clara que resulta
de la lisis de bacterias. (Cada placa se origina
de un solo fago infeccioso). A la partícula
infecciosa que da origen a la placa se le llama
una unidad formadora de placa.
 Estos bacteriófagos tienen un ciclo de
replicación no lítico (lisogénico).

 Elgenoma del fago puede integrase en el ADN


cromosómico de la bacteria hospedadora,
replicándose a la vez que lo hace la bacteria o
bien puede mantenerse estable en forma de
plásmido, replicándose de forma
independiente a la replicación bacteriana.
La cepa bacteriana inocua Vibrio cholerae, la
cual, por acción de un fago, se transforma en una
cepa tremendamente virulenta que es la
causante del cólera
Replicación
Adhesión Penetración del Ac.
nucleico

Síntesis de
Liberación Ensamblado proteínas
estructurales
Ciclo de vida del fago y el huésped

1) Ciclo vital de la bacteria no infectada

Una bacteria no infectada puede reproducirse por


fisión binaria, no mostrando infección por el fago
2) Adsorción del fago libre

Cuando la infección tiene lugar, el fago es


adsorbido sobre la superficie celular y el ácido
nucleído del mismo penetra en la célula. En ese
estadio el ácido nucleído del fago es llamado
“fago vegetativo”
3) Infección lítica

El material del fago vegetativo inyectado puede


ser reproducido, formándose muchas replicas.
Estos elementos maduran por la adquisición de
cubiertas proteicas , después de lo cual las células
de huésped experimentan lisis y el fago libre es
expuesto en libertad
4) Reducción del fago vegetativo a profago

Muchos fagos llamados “moderados” son capaces


de reducción a profago como alternativa a la
producción de infección lítica. La bacteria es ahora
lisogénica, después de un numero indeterminado
de divisiones celulares, un elemento de la
progenie puede presentar lisis y poner en libertad
el fago infectante
5) Perdida del profago:

Ocasionalmente una bacteria lisogénica puede


perder su profago, permaneciendo viable como
una célula no infectada. Se desconoce la causa de
esta perdida espontaneas
 Importantes en el estudio de la genética
bacteriana.

 Identificación
de especies y subespecies
de bacterias, como Staphylococcus
aureus y distintas salmonellas, por su
patrón de sensibilidad.

 Se tiene interés en emplear


bacteriófagos con fines terapéuticos.
 Algunas toxinas
bacterianas son
codificadas por
profagos (fagos de
ciclo lisogénico)
 Algunos pueden
interferir en
procesos
industriales.
 Flint, S. Krug, R. et. al. Principles of Virology. Molecular
biology, pathogenesis, and control. Ed. ASM. Washington,
2000

 Duerden, B. Reid, T. et. al. Microbiología de enfermedades


infecciosas. Ed. Limusa. México, 1993

 Tay Z. Jorge. Microbiología y Parasitología Medicas.


Méndez Editores. México 1994

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