UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

SEDE PALMIRA
Laboratorio # 1 EL MICROSCOPIO
Jos Luis Bejarano Rodrguez cdigo: 410507
Claudio Alejandro Gutirrez Castaeda cdigo: 410531
Grupo 1
Introduccin
Desde la antigedad el hombre, ser racional ha sido el motor para el desarrollo de
la humanidad, el inters por descubrir el por qu de las cosas lo ha llevado a ir
ms all de lo que puede ver.las galaxias, las clulas, los planetas y los
microorganismos son algunos ejemplos en los que el hombre ha utilizado su
inteligencia para poder ver la naturaleza universal.
La implementacin del microscopio contribuyo al descubrimiento de la clula cuyo
nombre fue designado por Robert Hooke en 1665, gracias a la observacin del
corcho en un microscopio ptico. Las primeras observaciones reales de clulas
fueron vistas por Antonio Van Leeuwenhoek con un microscopio con una
capacidad de aumento de 300 veces su tamao real, algunas de estas clulas
fueron glbulos rojos, esperma entre otras.
Desde la biologa celular el microscopio es el instrumento base para el estudio de
objetos que pueden ser visualizados con un aumento hasta de mil veces su
tamao normal, cosa que el ojo humano no puede lograr en cuerpos tan pequeos
como la clula que mide entre 0 y 100 m de dimetro, como tambin algunos de
los orgnulos subcelulares como el ncleo, los cloroplastos y las mitocondrias.
Gracias a esta herramienta la clula consigui el reconocimiento como la unidad
fundamental de los organismos vivos.
El poder de resolucin es una medida que nos determina que tanto podemos
distinguir una imagen de otra, es la claridad con la que podemos observar un
objeto. Esta capacidad de resolucin es limitada ya que cuando un aumento es
exagerado la calidad de la imagen puede ser baja y generar distorsin.
Para Estudiar la estructura celular suelen usarse diferentes tipos de microscopia
ptica. El ms comn es el microscopio de campo luminoso, donde la clula es
atravesada por una luz invisible y la distincin de sus partes depende de contraste
dado por esta luz. En otros casos para diferenciar las partes de la clula suelen
usarse tintes relacionados con protenas y con cidos nucleicos, as se genera
contraste.

Hoy en da las cmaras de video y los computadores han extendi el poder del
microscopio ptico mediante el anlisis y procesamiento de imgenes.
El poder de resolucin del microscopio ptico tiene un lmite de 0.2 m lo que
implica que un objeto puede distinguirse de otro y no convertirse en una sola
imagen a esta distancia.

Objetivos de la prctica
Conocer el microscopio compuesto e identificar sus partes y las funciones de las
mismas.
Conocer el concepto de dimetro de campo DC y las propiedades del microscopio.
Dar a conocer las unidades de mayor uso en micrometra y como se aplican en
observacin de clulas y organismos vivos.
Comparar las caractersticas bsicas del microscopio fotonico o de luz y
compararlo con el microscopio electrnico.

Partes del microscopio y sus funciones:

Subsistemas del microscopio.
El microscopio ptico comn est conformado por tres sistemas:
El sistema mecnico: Est conformado por un armazn metlico que sostiene al
sistema ptico y a veces el de iluminacin, est compuesto por pie, platina,
controles de enfoque, porta objetos, tubo, portacondensador y portafiltros.
El sistema ptico Esta compuesto por dos juegos de lentes que se encargan de
producir la visibilidad y el aumento de las imgenes que se observan a travs de
ellos.
El sistema de iluminacin Es aquel que nos brinda la cantidad de luz necesaria
para efectuar la observacin de las imgenes en el microscopio.

2. Sistema ptico:
Oculares: Son los encargados de examinar y amplificar las imgenes producidas
por el objetivo, situadas en la parte superior del tubo y nos suministra un aumento
de 10X.
Objetivos: Los objetivos son un juego de lentes que se encuentran ubicadas en la
parte inferior del revlver, estas lentes convergentes amplan la imagen de un
objeto en observacin. Los tipos de objetivos ms usados son de 4X, 10X, 40X y
100X, este ultimo conocido como objetivo de inmersin.
3. Subsistema lumnico:
Condensador: Este tiene como fin dirigir los rayos procedentes de la fuente
lumnica en el centro del orificio de la platina, en otras palabras enfoca la luz hacia
el objeto de observacin proporcionando un campo visual optimo que genera al
objetivo un cono de luz adecuado para obtener resultados ptimos.
Diafragma: Es una abertura graduarle que sirve para regular la entrada de luz al
condensador y que se controla por medio de una palanca que se encuentra en la
parte lateral del condensador.
Lmpara: Hoy en da el microscopio utiliza luz artificial procedente de lmparas
como las de incandescencia con filamento, las de placa de tugsteno-halogeno de
bajo voltaje, para la iluminacin de la imagen. Dejando atrs el uso de el espejo
que aprovechaba la luz natural para tal fin.
Espejo: Posee dos caras: una cncava y otra plana. Puede moverse en todas las
direcciones. La cara cncava se utiliza particularmente con iluminacin artificial, y
la plana, se usa con iluminacin natural (luz solar).Como lo dijimos en la definicin
anterior el espejo se ha visto extinto debido a la incorporacin de la lmpara al
microscopio.
4. Subsistema mecnico:
Base o pie: Es la parte inferior y punto de apoyo del microscopio que est en
contacto con la mesa.
Soporte o brazo: Es una pieza colocada en la parte posterior del microscopio,
sobre el tubo binocular y la platina. Su funcin es transportar el aparato.
Tubo soporte de lentes: Pieza vertical cilndrica que sostiene el revlver y el
lente ocular y evita las molestias que generan los reflejos de la luz.

La platina: Es una pieza metlica plana con un orificio central que permite el paso
de los rayos luminosos, en donde se ubica la muestra a observar, puede ser fija o
giratoria.
El revlver: Es un aparato giratorio con orificios en los que se ubican los
objetivos. Al cambiar de un objetivo a otro el revlver presenta un peculiar sonido
generado por un pin que lo fija.
Palanca del diafragma: Esta sirve abrir y cerrar el diafragma y se encuentra
ubicada al lado del condensador.
El tornillo macromtrico: Se encuentra en la parte inferior del aparato la funcin
que cumple es mover el tubo verticalmente por medio de una cremallera
propiciando as un enfoque rpido de la muestra.
El tornillo micromtrico: se encuentra incorporado al tubo macrometico, es de
menor tamao y su funcin es dar un enfoque exacto y ntido de la muestra,
tambin puede medir el espesor del objeto en observacin.
Carro: Es un conjunto de pinzas que se coloca encima de la platina, su funcin es
la de desplazar la muestra de derecha a izquierda y de adelante hacia atrs.

Propiedades del microscopio:

-En 1590 La construccin del primer microscopio compuesto sea aquel que
construye la imagen en dos o ms pasos fue atribuido al holands Zacarias
Jansen.
-En 1611 Kepler sugiere la forma de elaborar un microscopio compuesto
-En 1665 Robert Hooke utilizando un microscopio que tena una bola de vidrio
como condensador de la luz que provena de una lmpara de aceite observa a
travs de un corcho unos pequeos poros o celdas a los que llamo clulas.
-En 1674 Leeuwenhoek da a conocer un descubrimiento de suma importancia
para la Biologa. el de los protozoarios. Casi una dcada despus logra por
primera vez la observacin de bacterias
-En 1681 Christian Huygens invento un ocular para el telescopio, poco tiempo
despus tambin lo adapto al microscopio compuesto. Tambin postulo la teora
ondulatoria de la luz.
-En1687 Griendl Von Asch innovo con un microscopio que descansaba sobre un
trpode.

-En 1691 Bonnani innovo con el microscopio de columna.

-En 1716 Joblot cre el microscopio con diafragma de campo.
-En 1744 Cuff-Baker crea un microscopio de columna perfeccionado que permita
movimientos micromtricos e inclua un espejo para centrar la luz.
-En 1800 Thomas Young corrigi las lentes para el astigmatismo y descubri la
interferencia de dos rayos de luz.
-En 1827 Amici diseo un objetivo con un foco muy pequeo que a su vez posea
un gran poder de resolucin.
-En 1828 W. Nicol utiliza la luz polarizada para la microscopia.
-En 1829 Joseph Jackson Lister corrigi la aberracin cromtica.
-En 1837 David Brewster utiliz la fluorita para el mejoramiento de la correccin
cromtica.
-En 1840 Amici construyo el primer objetivo de inmersin en agua.
-En 1849 J. Quekett escribi un tratado sobre buenas prcticas de uso del
microscopio.
-En 1851 Charles A. Spencer construyo el primer objetivo de fluorita.
-En 1872 Powell y Lealand perfeccionaron el microscopio el cual estaba
adelantado para su poca debido a sus ajustes mecnicos. Ernst Abbe invento un
mtodo para la construccin de lentes que eliminaban muchas aberraciones.
-En 1873 Ernst Abbe cre un condensador de muy buena calidad que inclusive se
sigue usando hoy en da por muchas fbricas de construccin de microscopios.
-En 1877 Ernst Abbe dio a conocer su teora de la formacin de la imagen en el
microscopio mediante el anlisis de los efectos de la difraccin.
-En 1878 Ernst Abbe Fabrica el objetivo de inmersin en aceite.
-En 1886 Abbe,Schott y Zeiss fabricaron y perfeccionaron una serie de lentes
logrando imgenes con excelentes correcciones cromticas.
-En 1901 Siedentopf y Zsigmondy crean el microscopio fotonico
-1908 Khler y Siedentopf desarrollan en conjunto el microscopio de
fluorescencia.
-En 1930 Lebedeff realiza el diseo y la construccin del primer microscopio de
interferencia.

-En 1932 Zernike construye el microscopio de contraste de fases.

-En 1932 Ernst Ruska y Max Knoll ambos fsicos de nacionalidad Alemana
construyen el primer microscopio electrnico.
-De 1942 a 1948 Brumberg,Burch y Grey disearon objetivos esfricos
reflejantes para aplicaciones en la microscopia de ultravioleta.
- En 1952 Nomarski inventa el sistema de contraste de interferencia diferencial
para el microscopio de luz.
-En 1981 Heinrich Rohrer y Gerd Binnig crean el microscopio de efecto tnel.

Tamao de las clulas eucariotas

El tamao de esta clula es mayor al de la procariota, miden entre 10 a 100
micrmetros.
Campo de observacin: Corresponde al rea de observacin visualizada donde
se puede ver la luminosidad, la nitidez y las dimensiones de la imagen a travs de
los oculares.Si el aumento es mayor, el campo disminuye .El valor del ndice de
campo es un numero se encuentra impreso en los oculares y sirve para el clculo
del dimetro del campo visual.
Calculo del dimetro de campo de observacin: El dimetro de campo de
observacin es el resultado de un cociente determinado de la siguiente forma: el
numerador es el valor del ndice del campo visual de los oculares del microscopio
y el denominador corresponde al valor del aumento del objetivo en uso. Por
ejemplo si el valor del ndice es de 20 y el objetivo que uso es 10x quiere decir que
el dimetro del campo visualizado es de 20/10 sea 2.00 mm.
Poder de resolucin microscopio ptico: El microscopio ptico tiene un lmite
resolucin de cerca de 200 nm (0.2 m).Donde se usan objetivos de 100x.
Tamao de aproximado de las siguientes estructuras (Pg. 127 del libro de
Curtis).
tomo 0,1nm Bacteria 1m Ovulo humano 100m
Clula Eucarioticas (animal) entre 10m y 100m Espermatozoide 55m
Cabeza de un alfiler 1 mm.
La mayora de organismos y estructuras que se estudia un microscopio que se
estudian con el microscopio son muy pequeas. Las medidas ms comnmente
usada en microscopia son el angstrom (), la milimicra (m), el micrmetro micra
() y el milmetro (mm).

Teniendo en cuenta la siguiente relaciones:

1 mm = 1000
1 = 1000m
1m = 10
Determine:
A cuantos m equivalen 1 mm = 1000000 m
A cuantos mm equivale 1 = 0.001 mm
A cuantos equivale 1 mm= 1x107
A cuantas m equivale 1 cm = 1x107

Realice las siguientes conversiones:

0.025mm en y en = 25 = 25x104
1300 en m y en mm = 130m =0.0013mm
1x10-4 mm en =0.1

Propiedades y usos del aceite de inmersin en la microscopia:

Cuando entre la lente frontal y el cubreobjetos no existe aire es necesario el uso
de aceite de inmersin, as se consigue una mayor apertura numrica. Los
objetivos de inmersin son superiores a los objetivos secos en cuanto a correccin
de imagen. Los objetivos de 100 son siempre objetivos con uso de aceite de
inmersin. El aceite de inmersin se usa para dar la mayor resolucin posible al
enfocar objetos muy pequeos labor que no sera posible con el uso de objetivos
secos, este tiene un ndice de refraccin similar al del vidrio del cubreobjetos y
debe ser utilizado para lentes que requieren su uso osea objetivos de inmersin,
cabe anotar que al terminar de usar objetivos de este tipo se debe limpiar el
aceite. Se usa para la observacin de bacterias individuales, aplicaciones de alta
resolucin como el TIRF y aplicaciones de fluorescencia confocal entre otros.

Propiedades del microscopio:

-Ampliacin: La ampliacin es la capacidad que tiene en conjunto el subsistema
ptico del microscopio para aumentar el tamao de la muestra y generar un

optimo plano ampliado de observacin. La potencia del ocular multiplicada por la

potencia objetiva es igual a la ampliacin total (es decir si el ocular es de 10X y el
objetivo 10X se multiplica y quiere decir que el espcimen se ha agrandado 100
veces).
-Resolucin: La definicin de un microscopio consiste el poder de distincin de
dos puntos separados por una determinada distancia osea que tanto puede
diferenciar el observador una imagen de otra sin que estas se unan o se vean
borrosas. La cantidad de aumento y la capacidad de resolucin son inversamente
proporcionales ya que si el aumento es mayor la definicin tiende a disminuir.
-Penetracin: El poder de penetracin consiste en la capacidad que posee el
microscopio de permitir la observacin de varios planos del objeto estudiado de
manera simultnea.
-Definicin: toda imagen definida es aquella que tiene una resolucin de mayor
rango, normalmente se utiliza para microscopios con excelente calidad de
imagen, la definicin nos proporciona una superior nitidez.
-Cul es el poder de resolucin aproximado para:
1. El ojo humano: el poder de resolucin del ojo humano es de 0.2 mm, quiere
decir, que para distinguir un objeto de otro esta es la distancia mnima que deben
tener.
2. El microscopio compuesto: El microscopio compuesto tiene un lmite
resolucin de cerca de 200 nm (0.2 m).Donde se usan objetivos de 100x.
3. El microscopio electrnico: Tiene un lmite de resolucin de cerca de 2 nm.
Esto es debido a limitaciones del lente usado para enfocar electrones hacia la
muestra.
-El dimetro promedio de una bacteria es de 0.5 a 1.0 m, un glbulo rojo humano
es de 7.5 m, un micoplasma (Bacteria pequea sin pared celular) 0.2 m, un
virus relativamente grande como el virus del mosaico del tabaco (TMV) es de 10300 nm y el ovulo humano es de 150 m.
-Con base en la pregunta anterior con que tipo de microscopio u aparato
lograra usted observar los organismos o estructuras anteriores? (Pg. 127
Curtis)
Bacteria: Se pueden observar en un microscopio ptico y en un microscopio
electrnico.
Glbulo rojo: Se puede observar en un microscopio electrnico
Micoplasma: Se puede observar en un microscopio electrnico

Virus telmosaico del tabaco: Se puede observar en un microscopio electrnico

Ovulo Humano: Se puede observar con un microscopio ptico y con un
microscopio electrnico.

BIBLIOGRAFIA
Curtis H, Barnes S, Biologia 2000. Editorial Panamericana, Pag 118-122
Guerrero, M.
lvarez,
M, Parra,
Y,
Barboza,
http://www.monografias.com/trabajos12/micros/micros.shtml

E.

2004.

Gonzales, Genoveva, Tcnicas en biologa celular, Teora y prctica, 1996, Mxico

DF, AGT Editor SA. 208 p.
Mollring, Friedrich Karl, La microscopia desde el principio, 1968, Alemania,
Editorial Carl Zeiss. 64 p.
Gage Simon Henry, The Microscope, 1947, Ithaca, New York, Comstock Publishing
Company, INC. 617 p.
http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_compuesto