Acuaporinas:

los canales
de agua celulares
Las acuaporinas regulan el paso del agua a travs de la membrana celular.
Forman una familia de protenas muy diversa; se hallan presentes en todos los seres vivos.
Abundan sobre todo en plantas y en el sistema renal de animales
Miriam Echevarra y Rafael Zardoya

l agua, el compuesto ms abundante de nuestro

cuerpo, es esencial para la vida. Todos los
iones, lpidos, azcares, protenas y otras macromolculas que forman parte de las clulas
y su entorno se encuentran disueltos en medio
acuoso. Para realizar las funciones que hacen
posible la vida, las clulas deben incorporar nutrientes,
hormonas, iones y gases. Y deben tambin expulsar sustancias de desecho.
Ese intercambio de materia con el entorno se realiza a travs de la membrana. Opera un mecanismo de
difusin pasiva o se recurre a protenas transportadoras
especficas. La circulacin de iones y otras molculas
provoca una distribucin desigual de estas sustancias a
un lado y otro de la membrana celular.
El transporte genera un flujo de agua a travs de la
membrana. La entrada y salida de agua cambia el volumen de la clula, amn de modificar la composicin
del medio intracelular y extracelular. Entender cmo
el agua atraviesa las membranas celulares en nuestro
cuerpo ha constituido una de las cuestiones de mayor
inters en biologa.

E
60

Los primeros modelos tericos

Ya en 1895, Charles Overton public un extenso estudio
sobre las propiedades osmticas de las clulas, vegetales
y animales; analizaba all el efecto ejercido por ms de
500 compuestos qumicos en el flujo del agua a travs de la membrana celular. Desde entonces, y durante
muchos aos, se crey que el agua poda atravesar la
membrana celular por difusin pasiva entre los lpidos
que constituyen dicha estructura.
Pero la difusin pasiva no permita explicar la permeabilidad al agua que muestran los glbulos rojos y
las clulas del tbulo renal; aqu, el flujo de agua a
travs de la membrana en presencia de un gradiente de
concentracin era superior al flujo en ausencia de dicho
gradiente. Adems, la energa disipada por la interaccin
entre agua y membrana se acercaba a la del movimiento
del agua en solucin libre. Se descubri tambin que
el paso del agua a travs de estas membranas poda
bloquearse mediante frmacos derivados de compuestos
mercuriales.
Todas esas observaciones, sumadas a las realizadas
en membranas artificiales, permitieron comparar la perINVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

meabilidad al agua de membranas

lipdicas artificiales con la de membranas biolgicas. De la comparacin
en cuestin se dedujo la existencia
de protenas especializadas en la formacin de poros acuosos.

Descubrimiento
de las acuaporinas
El descubrimiento del primer canal
de agua en la membrana celular, la
acuaporina-1 (AQP1), el estudio de su
distribucin en los tejidos y la investigacin de sus propiedades estructurales y funcionales le valieron a Peter
Agre el premio Nobel de qumica de
2003. Agre y su equipo, de la Universidad Johns Hopkins, estudiaban
en 1988 las protenas de la membrana
de los eritrocitos. Durante sus trabajos de purificacin de la protena de
32 kilodalton que determina el grupo
sanguneo Rh, encontraron un polipptido de peso molecular inferior
(28 kilodalton) que copurificaba con
su protena de inters. Pensaron que
corresponda a un subproducto de la
hidrlisis de la protena Rh. Pero el
anlisis estructural de la molcula de
28 kilodalton, abundante en glbulos
rojos y en clulas del tbulo proximal del rin, revel que se trataba
de una nueva protena integral de
membrana. Sin relacin alguna con
la protena Rh.
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

Hasta 1992 no descifraron la funcin de la protena. Denominada en

un comienzo CHIP28, abreviacin
de protena integral de 28 kilodalton
formadora de canales, recibira ms
tarde el nombre de AQP1.
En sus trabajos hallaron que los
ovocitos de la rana Xenopus laevis
inyectados con cantidades exiguas de
ARN mensajero de AQP1 desarrollaban una permeabilidad al agua
superior a la de un ovocito control
sin inyectar o inyectado con agua.
Se descubri tambin que la permeabilidad al agua dependiente de
AQP1 se inhiba mediante cloruro de
mercurio y que tal efecto se reverta
con agentes reductores.

El comportamiento reseado
corresponda al esperado para un
flujo de agua mediado por canales.
Se percataron entonces de que haban
descubierto, por fin, la protena del
canal de agua. La presencia de AQP1
justificaba la elevada permeabilidad
al agua de la membrana del hemate
y del tbulo proximal renal. Pero,
cmo explicar la reabsorcin de
agua dependiente de la hormona vasopresina en el segmento ms distal
de la nefrona, el tbulo colector y
en otros tejidos que no poseen esta
protena? La identificacin molecular
de AQP1 fue el detonante de la bs61

repetido dos veces, adems de otros

aminocidos individuales a lo largo
de la secuencia, muy conservados.
AQP1 consta de dos grandes dominios, imagen especular uno de otro,
con un triplete NPA presente en cada
mitad, el primero en un lazo intracelular y el segundo en uno extracelular. Se procedi luego a la clonacin
sucesiva de otras acuaporinas que,
en conjunto, forman la familia de
protenas integrales de membrana responsables del transporte de agua. Se
nombraron desde AQP2 a AQP12; la
protena PIM se denomin AQP0.
Se sigui el mismo protocolo de
clonacin para todas ellas. De los tejidos donde se sospechaba la existencia
de un nuevo canal de agua se extrajo
ARN. A partir de ste se obtuvo, por
transcripcin inversa, el ADN comple-

CONTROL

AQP1

queda que condujo al descubrimiento

de las trece acuaporinas que hoy se
conocen en humanos.
Lo primero que llam la atencin,
al comparar la secuencia de AQP1
con las almacenadas en el banco de
genes, fue su estrecha semejanza con
miembros de una familia de protenas
integrales de membrana (PIM); entre
ellas, la protena Big Brain de Drosophila, la Nodulina26 de la semilla
del gnero Glycine, el transportador
de glicerol GLpF de Escherichia coli
y PIM, una protena de 26 kilodalton
que abunda en el cristalino bovino,
que da nombre a la familia. AQP1
comparte con ellas varios aminocidos en determinadas posiciones de
la secuencia: todos los miembros de
la familia PIM mostraban el triplete
asparragina-prolina-alanina (NPA)

HgCl2

0,5

1,5

2,5
TIEMPO (minutos)

62

3,5

mentario. El ADNc se utiliz como

molde en una reaccin en cadena de la
polimerasa, junto con cebadores que
reconoceran y se hibridaran a las
regiones NPA de cualquier miembro
de la familia PIM presente en la muestra de ARN. El grupo de Agre clon
las protenas AQP1, AQP4, AQP5 y
AQP6; el de Sei Sasaki, de la Universidad de Medicina y Odontologa
de Tokio, identific las secuencias de
AQP2, AQP7, AQP8, AQP9, AQP10,
AQP11 y AQP12. En la identificacin
de AQP3 intervino uno de los autores
(Miriam Echevarra).

Un reloj de arena
El tamao de las acuaporinas suele
oscilar entre 250 y 300 aminocidos.
Muy hidrofbicas, se organizan en
seis segmentos de estructura -hlice
que atraviesan la membrana de lado
a lado, unidos por cinco lazos conectores. Dos de los lazos (uno extracelular y otro intracelular) se pliegan
hacia la membrana y se aproximan
para formar el poro. La estructura
resultante encierra una zona central
estrecha que se ensancha abrindose
hacia ambos lados de la membrana.
Este particular plegamiento, en forma
de reloj de arena, pone en contacto
los tripletes NPA para formar el sitio
ms estrecho del poro. Aunque cada
acuaporina constituye por s sola un
canal, en la membrana celular estas
protenas se ensamblan en grupos
de cuatro.
2. OVOCITOS DE LA RANA Xenopus laevis
inyectados con cantidades reducidas de
ARN mensajero de acuaporina-1 (0,1-10 ng).
Muestran una permeabilidad al agua superior a la de un ovocito control no inyectado
o inyectado con agua.

INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

1. EL PRIMER MODELO que describa la circulacin de agua a travs de la membrana

celular data de 1895. Segn ste, el agua
se escurra por difusin pasiva entre los
lpidos (amarillo) que constituyen la membrana (a). El estudio de la inuencia del gradiente, la energa disipada por la interaccin
del agua con la membrana, el bloqueo de
compuestos mercuriales y la comparacin
de membranas puramente lipdicas con
membranas biolgicas llev a proponer la
existencia de protenas (rojo) especializadas
en la formacin de poros hdricos (b).

MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

Por fin, el grupo de Fujiyoshi Yoshinori, de la Universidad de Kyoto,

Andreas Engel, de la Universidad de
Basilea, y Agre, determinaron la estructura molecular de AQP1 con una
resolucin de 3,8 angstrom. A partir
de este anlisis tridimensional se determin una correlacin directa entre
aminocidos especficos y estructura
proteica. Los seis segmentos -hlice transmembranales conforman una
suerte de ramo en el que los segmentos se hallan levemente inclinados
y girados hacia la derecha. La estructura se mantiene estable merced
a los grandes ngulos de cruce de
los segmentos transmembrana y a la
interaccin en los sitios de cruce de
glicinas altamente conservadas. Los
lazos que conforman la zona central,
que tambin son -hlices cortas, se
proyectan hacia el centro del ramo en
ngulo de casi 90 grados para crear
la barrera de permeabilidad del canal.
Ambos lazos interaccionan a travs
del triplete NPA y se mantienen en
contacto mediante fuerzas de van der
Waals entre sus prolinas. Dos asparraginas convergen para delimitar
el sitio ms estrecho del canal, de
unos 3 angstrom de dimetro. El
dimetro de la molcula de agua es
ligeramente inferior: 2,8 angstrom.
Otros aminocidos conforman el
centro del poro acuoso: una isoleucina de la -hlice 2, una fenilalanina de la -hlice 1, una leucina
de la -hlice 4 y una valina de la
-hlice 5. Cerca de este sitio, por
el lado extracelular del poro, se encuentra la cistena responsable de la
sensibilidad de AQP1 a compuestos
mercuriales.
El resto de las paredes que forman la superficie del canal acuoso
corresponden a aminocidos de los
segmentos transmembrana 1, 2, 4 y
5. Los segmentos 3 y 6 constituyen
las hlices ms perifricas del canal;
quedan encarados hacia los lpidos
de la membrana.

Funcin y selectividad
El estudio de la funcin de un canal
de agua entraa varias dificultades.
Al tratarse de una molcula neutra,
su flujo constituye un proceso silente desde el punto de vista elctrico.
Ni puede medirse con las tcnicas
de electrofisiologa clsicas en la
investigacin de canales inicos, ni
se dispone de inhibidores especficos.
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

ACUAPORINAS

DISTRIBUCION

AQP0

Ojo (cristalino)

AQP1

Eritrocitos
Cerebro
Rin
Trquea
Corazn
Placenta
Utero

Urter y vejiga urinaria

Pulmn
Bronquios
Conductos biliares
Piel
Endotelio capilar (excepto cerebro)
Ojo

AQP2

Tbulo conector
y colector renal

Urter y vejiga urinaria

AQP3

Tbulo colector renal

Tracto gastrointestinal
Hgado
Pncreas
Bazo
Prstata
Urter y vejiga urinaria

Ojo
Glndula lacrimal y sudorpara
Pulmn
Clulas menngeas
Eritrocitos
Utero

AQP4

Cerebro
Tracto gastrointestinal
Tbulo colector renal
Mdula espinal
Odo

Pulmn
Msculo esqueltico
Ojo (retina, iris, cuerpo ciliar)
Glndula lacrimal

AQP5

Glndula salival
Glndula lacrimal
Pulmn

Tracto gastrointestinal
Crnea
Ojo

AQP6

Rin

AQP7

Espermtidas tardas
y espermas maduros
Testculo
Tejido adiposo

Tbulo proximal renal

Corazn
Msculo esqueltico

AQP8

Hgado
Pncreas
Testculo
Placenta
Utero

Glndula salival
Intestino delgado
Colon
Corazn

AQP9

Tejido adiposo
Corazn
Colon
Leucocitos
Hgado
Cerebro

Mdula sea
Rin
Intestino delgado
Pulmn
Bazo
Testculo

AQP10

Intestino delgado

3. DISTRIBUCION TISULAR de las acuaporinas de mamferos (y posiblemente vertebrados).

Para determinar la permeabilidad al

agua de clulas animales suele medirse el cambio de volumen celular
que se produce cuando las clulas
pasan de un medio isosmtico a uno
hipo o hiperosmtico. La elevada permeabilidad al agua de las membranas biolgicas explica la celeridad
extrema del flujo.
La identificacin molecular de los
canales de agua se inici mediante la

extraccin del ARN mensajero de tejidos con alta permeabilidad al agua (el
rin, por ejemplo) y la inyeccin del
mismo en ovocitos de Xenopus laevis.
Se vena recurriendo a los ovocitos
de la rana para estudiar la expresin
de numerosas protenas. En el caso de
los canales de agua, ofrecan claras
ventajas: eran clulas grandes, con un
volumen fcil de medir y una baja
permeabilidad intrnseca al agua que
63

facilitaba la determinacin de los cambios de permeabilidad inducidos por

la expresin de protenas exgenas.
Hoy la tcnica se emplea de forma
rutinaria en la caracterizacin funcional de todas las acuaporinas clonadas
para el estudio de las propiedades de
permeabilidad al agua, selectividad
a otros solutos, dependencia de la
temperatura y del pH, amn de otros
aspectos funcionales.
La AQP1 presenta una permeabilidad elevada. De las trece acuaporinas de mamfero que hoy conocemos,
cuatro de ellas (AQP3, AQP7, AQP9
y AQP10) forman el subgrupo de las
acuagliceroporinas, que son permea-

bles tambin a la urea, el glicerol y

a otros solutos de tamao reducido.
Excepto AQP6, tales acuaporinas se
muestran impermeables a solutos dotados de carga elctrica y iones.
La selectividad de las acuagliceroporinas no depende slo de la estrechez del poro. En algunas, como
AQP3, la permeabilidad al glicerol
es mucho mayor que a la urea, una
molcula de dimetro inferior. En
AQP1, los aminocidos dotados de
carga elctrica de los dos segmentos
-hlice que conforman el paso del
canal se orientan con sus polos positivos hacia el centro del poro. Esto
genera un importante campo electros-

ttico positivo que repele protones y

otros cationes, mientras que admite
el paso de solutos neutros.
La obstruccin de AQP1 al paso de
iones responde tambin al tamao de
los iones hidratados. En solucin, los
iones se encuentran rodeados de una
capa de agua que aumenta su dimetro. En la acuaporina-1 no existe
ninguna estructura que se encargue
de liberar al ion de esta capa de
solvatacin; por tanto, es imposible
que pase a travs de su dimetro. La
estrechez del poro y la notable hidrofobicidad de la superficie interna
del canal explican la permeabilidad al
agua de AQP1 y su selectividad.

ESTRUCTURA MOLECULAR DE LAS ACUAPORINAS

DOS TRIPLETES NPA

GLICOSILACION

AQP1 se compone de dos grandes

dominios, imagen especular uno del
otro. Se organiza en seis segmentos de estructura -hlice (1-6) que
atraviesan la membrana de lado a
lado; estn unidos por cinco lazos
conectores (A-E). El lazo intracelular
B y el extracelular E son portadores
de un triplete asparragina-prolina-alanina NPA. Esta duplicacin del triplete NPA es caracterstica de todas las
acuaporinas.

C189
HgCl2

NP
A

DOMINIO-2

EXTRACELULAR

NPA

H2N

MEMBRANA

INTRACELULAR
DOMINIO-1
HOOC

GLICOSILACION
H2O

EL RELOJ DE ARENA
El lazo B y E se pliegan hacia
la membrana para formar el poro
o canal acuoso de la protena.
La estructura resultante encierra
una zona central estrecha que
se ensancha abrindose hacia
ambos lados de la membrana. Se
denomin reloj de arena, por su
semejanza con ste. En el sitio ms
estrecho del poro acuoso se ponen
en contacto los tripletes NPA.

N A
APN

B
H2N

INTRACELULAR

64

MEMBRANA

D
INTRACELULAR

HOOC

H2O
3

EXTRACELULAR

DE CUATRO EN CUATRO
Aunque cada acuaporina forma por
s sola un canal, en la membrana
celular estas protenas se ensamblan en grupos de cuatro. Parece
que un arreglo tetramrico confiere
a la estructura una mayor estabilidad en el entorno lipdico de la
membrana.

INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

EXTRACELULAR

C
A

El transporte de agua
paso a paso
Dentro del canal, las molculas de
agua tienden puentes de hidrgeno
entre s y con las paredes del canal.
Sin embargo, a medida que una molcula de agua se acerca a la parte ms
estrecha del canal, proceda aqulla
del interior o del exterior celulares,
la intensa carga electrosttica positiva
de la zona, creada por los lazos que
forman el poro, provoca una reorientacin de la molcula que obliga a su
tomo de oxgeno a tender puentes
de hidrgeno con las dos asparraginas del poro. Primero la molcula de
agua se une slo a uno de esos aminocidos, permaneciendo unida por
el otro puente de hidrgeno a la molcula de agua vecina; luego se une
a las dos asparraginas, rompiendo as
por completo la molcula de agua su
conexin con las otras molculas de
agua en el canal. La imposibilidad
de tender puentes de hidrgeno con
los aminocidos hidrofbicos que
forman la pared del canal favorece
la permeabilidad. Asimismo, en el
sitio de mayor constriccin del canal
se rompe la concatenacin de puentes de hidrgeno entre las molculas
de agua que llenan el poro, lo que
impide el transporte de protones que
se establecera a travs de AQP1. La
acuaporina-1 es permeable al CO2.
De hecho, la protena forma un canal para el transporte del dixido
de carbono.

MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

Distribucin
La mayora de las clulas de nuestro
cuerpo poseen acuaporinas. Las clulas principales del tbulo colector
renal, por ejemplo, expresan AQP2,
AQP3 y AQP4; los astrocitos y clulas gliales de determinadas zonas
cerebrales, en cambio, expresan slo
AQP4; se han hallado indicios de
la presencia de acuaporinas en las
neuronas. Desconocemos la razn de
tal diversidad.
En coherencia con su funcin de
canal hdrico, el ojo, el rin, el
pulmn, el tracto gastrointestinal o
las glndulas secretoras, rganos que
se caracterizan por un alto trasiego
de agua, presentan varias de estas
protenas. En el cerebro, en cambio, donde escasea el flujo de agua a
travs de la membrana celular (para
minimizar las variaciones del medio
extracelular que pudieran afectar a la
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

TUBULO PROXIMAL
AQP1
AQP6
AQP7

RION

OJO
AQP0, 1, 3, 4, 5
CEREBRO
AQP1, 4, 9

PULMON
AQP1, 3, 4,

ASA DE HENLE
AQP1

TUBULO COLECTOR
AQP2
AQP3
AQP4

4. LAS ACUAPORINAS SE HALLAN PRESENTES en la mayora de las clulas de nuestro

cuerpo. Las clulas principales del tbulo colector renal expresan AQP2, AQP3 y AQP4.
Los astrocitos y clulas gliales de determinadas zonas cerebrales expresan slo AQP4. Los
rganos que, como el ojo, el rin, el pulmn, el tracto gastrointestinal o las glndulas secretoras, se caracterizan por su alto trasiego de agua, presentan varias de estas protenas.
En el cerebro, donde escasea el ujo de agua a travs de la membrana celular, hay una
presencia y distribucin limitadas de AQP.

funcin neuronal) hay una presencia

y distribucin limitadas de AQP.
Con excepcin de AQP2 y AQP6,
las acuaporinas intervienen en la composicin de la membrana celular. Tras
su sntesis, AQP2 permanece como
una protena de membrana en vesculas intracelulares; slo bajo la accin
de la hormona antidiurtica (argininavasopresina), las vesculas se fusionan con la cara apical de las clulas
principales del tbulo colector renal;
de ese modo las clulas exponen en
la membrana la protena responsable
del aumento de la permeabilidad al
agua en dicho tbulo.
La acuaporina-6 es tambin una
protena intracelular. Se aloja en vesculas que permanecen siempre en
el interior de la clula. En la cara
apical de otros epitelios encontramos
tambin AQP5. Las acuaporinas 3 y
4 son principalmente de membrana
basolateral. AQP1 presenta una distribucin ubicua en toda la membrana. AQP8 reside en vesculas intracelulares as como en la cara apical
de las clulas acinares del pncreas.
AQP9 parece preferir la parte basolateral de la membrana.

Regulacin
Veamos cmo opera la regulacin de
la acuaporina-2 en el tbulo renal.
La unin de la hormona vasopresina

a receptores especficos provoca un

aumento del AMP cclico intracelular. Este mensajero molecular activa
la protena quinasa A (PKA), que
se encarga de fosforilar a AQP2. La
activacin de AQP2 causa entonces
la traslocacin y fusin de vesculas
que contienen AQP2: se funden con
la cara apical de la clula renal.
Tambin AQP1, en el hgado,
AQP5, en las glndulas salivales, y
AQP8, en el pncreas, se transportan
desde vesculas intracelulares hasta
la membrana celular. En estos casos, sin embargo, no se conoce el
mecanismo de regulacin. AQP6,
presente en vesculas de las clulas
intercaladas del tbulo colector renal,
cambia su conformacin a pH < 5,5:
se hace permeable a agua y cloro. El
pH regula tambin la actividad de
AQP0 y AQP3. Algunas acuaporinas
cuentan con secuencias conservadas
para la fosforilacin por interaccin
con protenas quinasas A (AQP2,
AQP5 y AQP9) o protenas quinasas
C (AQP4, AQP5 y AQP7). En algunos casos, la regulacin se produce
por fosforilacin directa del canal. La
fosforilacin de la acuaporina-2 en la
Ser-256 resulta fundamental para el
incremento de permeabilidad al agua
dependiente de vasopresina.
En fecha reciente se ha propuesto
que la interaccin directa entre las
65

SIP
Arabidopsis (BAB09487)
Arabidopsis (AAF26B04)
Zea (AAK26766)
Zea (AAK26764)
Picea (CAA06335)
Arabidopsis (CAB72165)
Nicotiana (CAA69353)
Oryza (P50156)
AQP8
Zea (AAC09245)
Arabidopsis (AAC62397)
Raphanus (BAA12711)
Homo (BAA34223)
Brassica (AAD39372)
Mus (P56404)
Picea (CAB39758)
TIP
Caenorhabditis (CAA94903)
Zea (AAC24569)
Solanum (AAB67881)
Lycopersicon (AAB53329)
Helianthus (CAA65186)
Vernicia (AAC39480)
Arabidopsis (AAC49992)
Cicadella (CAA65799)
Brassica Arabidopsis (Q08733)
Haematobia (CAA65799)
Solanum (CAB46350)
(AAB61378)
Bos (P47865)
Nicotiana (CAA04750)
Raphanus
Homo (P29972)
Brassica (AAD39374)
(BAA32778)
Mus (Q02013)
Glycine (AAA69490)
Rana (P50501)
Oryza (AAC16545)
Homo (Q13520)
Solanum (CAB46351)
Rattus (AAD29856)
Spinacia (AAA99274)
Arabidopsis (AAB65787)
Mus (P56402)
Nicotiana (AAL33586)
Homo (P4L181)
AQP
Saccharomyces (AAD10058)
Mus (ADD32491)
Saccharomyces (P53386)
Homo (P55064)
Saccharomyces (AAC69713)
Bufo (AAC69694)
Shigella (AAC12651)
Rana (Q06019)
Escherichia (BAA35593)
Homo (P30301)
Escherichia (BAA08441)
Plesiomonas (BAA85015)
Mus (P51180)
Brucella (AAL51252)
Rattus (P09011)
AQP
Brucella (AAF73105)
Bos (P06624)
Agrobacterium (AAK86288)
Mus (AAC53155)
Agrobacterium
(AAL46049)
Homo (P55087)
Smorhizobium(NP_435575)
Methanothermobacter (AB055880)
Pseudomonas (AAG07421)
Lactococcus (P22094)
Pinus (AAL05942)
Clostridium (AAK78746)
Oryza (S52003)
Zea (AAK26750)
Thermus (BAB61772)
NIP
Medicago (AA132128)
Bacillus (AAA22490)
Glycine (P08995)
Thermotoga (AAD36499)
Pisum (CAB45652)
Staphylococcus (BAB42394)
Lotus (AAF82791)
Listeria (CAC99617)
Arabidopsis (CAA16760)
Escherichia (P11244)
Saccharomyces (BAA09187)
Homo (O14520)
Toxocara (AAC32826)
Mus (BAA24537)
Caenorhabditis (AAA83205)
Homo (O43315)
Xenopus (CAA10517)
Rattus (AAC36020)
Mus (ADD20305)
Homo (Q92482)

acuaporinas y otras protenas celulares constituira un mecanismo de sealizacin. En el extremo C-terminal

de la acuaporina-4 se han identificado
secuencias de reconocimiento para
el anclaje en protenas del citoesqueleto que podran determinar la
distribucin espacial de AQP4 en la
membrana del astrocito. La regulacin crnica se realiza por diversos
mecanismos que alteran la transcripcin de tales protenas.
El nmero de molculas de acuaporina-2 aumenta con la vasopresina.
Tal regulacin se debe a la presencia,
en el promotor del gen de AQP2,
de regiones que unen AMP cclico
y, por tanto, activan la transcripcin
del gen. La deshidratacin provoca
el aumento de AQP3 en el rin,
la vejiga urinaria y los urteres. Un
estrs hiperosmtico estimula la
expresin de AQP4 y AQP9 en la
corteza cerebral.

Patologas
Numerosos trastornos se han asociado con una distribucin aberrante de
66

Bacterianas

GLP

5. ARBOL DE LAS RELACIONES DE PARENTESCO DE LAS ACUAPORINAS: canales de agua

(verde), canales de glicerol y urea (azul) y nodulinas (rojo). Los puntos en las ramicaciones
indican la signicacin estadstica.

las acuaporinas en un rgano determinado. Tambin la alteracin en la funcin o regulacin de estas protenas
puede resultar patolgica. Determinadas mutaciones en el gen de AQP2
se han relacionado con nefropatas.
En el laboratorio de Alan Verkman se
obtuvieron ratones knockout en los
que se haba silenciado la expresin
de cada una de las acuaporinas. Los
mridos transgnicos se utilizaron
para el estudio de las alteraciones
funcionales que acarrea la ausencia
de una de estas protenas. Se observ que dos mutaciones gnicas de
AQP0 provocan en ratones cataratas
congnitas.
Debido a su ubicuidad, la acuaporina-1 se halla implicada en numerosos
trastornos. La presencia de AQP1 en
el endotelio de la crnea y de AQP5
en el cristalino sugiere una funcin
de estas protenas en el mantenimiento de la transparencia de la crnea y
el cristalino, respectivamente. AQP1

es responsable de la reabsorcin de
casi el 80 por ciento del agua en
el tbulo renal. As, los ratones en
los que se ha eliminado esta protena son incapaces de producir orina
concentrada. En el cerebro, AQP1
participa en la produccin del lquido
cefalorraqudeo. En el pulmn, la expresin de AQP1 aumenta al nacer y
en presencia de corticosteroides; ello
sugiere que la protena interviene en
el aclaramiento del agua pulmonar
que requiere el recin nacido para
iniciar la respiracin.
La disfuncin de las cuatro acuaporinas que se expresan en el tracto
respiratorio (AQP1, AQP3, AQP4 y
AQP5) podra guardar relacin con
el asma, edemas pulmonares u otras
patologas asociadas a la homeostasis
del agua pulmonar.
La disfuncin de la acuaporina-2
provoca trastornos graves. En 1994,
el equipo que dirige Peter Deen, de
la Universidad y el Hospital UniverINVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

0,05 cambios

PIP

sitario de Nimega, public el primer

caso de diabetes inspida nefrognica
(NDI) hereditaria asociada a mutaciones del gen de AQP2. Los individuos que sufren esta enfermedad
eliminan grandes cantidades de orina
diluida debido a una insuficiencia
renal que impide la reabsorcin de
agua en respuesta a la vasopresina. Un aumento en la expresin de
AQP2 se relaciona con un incremento en la retencin de lquido:
as ocurre en la cirrosis heptica,
la insuficiencia cardaca congestiva
y el embarazo.
Las alteraciones en la expresin
de las acuaporinas provocan tambin trastornos cerebrales. Las AQP4
aberrantes se asocian al desarrollo de
patologas relacionadas con desequilibrios en la homeostasis inica. Una
disfuncin de la acuaporina-4 podra
provocar cambios en la concentracin
de iones potasio (K+) que lleven a
un aumento de la excitabilidad neuronal. La relacin entre la AQP4 y
el edema cerebral se descubri mediante experimentos llevados a cabo
con ratones en los que la expresin
de AQP4 se haba silenciado. Se ha
observado tambin que el edema que
se produce tras un perodo isqumico puede reducirse de forma notable
mediante la eliminacin de la AQP4
perivascular.

MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

Evolucin por duplicacin gnica

Como hemos mencionado, las acuaporinas pertenecen a la familia de
protenas integrales de membrana
(PIM). Esta familia agrupa a ms
de 200 miembros. Su evolucin
arranca de la duplicacin de un gen
originario, que supuso la aparicin
de dos protenas con funciones diferenciadas: los canales de agua y
los canales de glicerol y urea. Esta
es la situacin que se observa hoy
en bacterias y hongos, que cuentan
slo con una copia de cada uno de
estos canales. Luego, ambos tipos
de canales se diversificaron mediante
duplicaciones gnicas en animales
y plantas. En Arabidopsis se han
identificado hasta 35 protenas; ello
resalta la importancia del control del
flujo de agua en las plantas.
Las protenas transportadoras de
glicerol han experimentado numerosas duplicaciones en el nemtodo
Caenorhabditis elegans. En mamferos, tres duplicaciones han dado
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

lugar, de forma sucesiva, a AQP3,

AQP7, AQP9 y AQP10. Curiosamente, no hay miembros de esta subfamilia en plantas.
En vertebrados encontramos seis
canales de agua resultantes de duplicaciones gnicas consecutivas:
AQP0, AQP1, AQP2, AQP4, AQP5
y AQP6. El nmero de acuaporinas
se desconoce en invertebrados; hasta la fecha, se ha descrito slo una
AQP en tres especies de insectos. La
acuaporina-8 se encuentra en todos
los animales.
El mayor nmero de acuaporinas
se encuentra en el reino vegetal.
La caracterizacin de los canales
de agua en plantas se debe sobre
todo a dos grupos de investigacin,
el de Maarten J. Chrispeels, de la
Universidad de San Diego en California, y el de Per Kjellbom, de
la Universidad de Lund. La primera
acuaporina que se aisl en plantas se
denomin ALFA-TIP.
De acuerdo con su origen evolutivo, se conocen cuatro grandes grupos de canales de agua en plantas.
Cada grupo presenta una localizacin
celular diferencial: las protenas intrnsecas de membrana plasmtica
(PIP), las protenas intrnsecas del
tonoplasto o membrana vacuolar
(TIP), las pequeas protenas bsicas intrnsecas (SIP) y las nodulinas
(NIP). Las protenas intrnsecas de
membrana plasmtica parecen derivar
de una nica duplicacin gnica que

dio lugar a dos tipos bsicos de PIP:

el tipo 1 y el tipo 2. Las protenas
intrnsecas del tonoplasto resultan de
al menos dos duplicaciones gnicas
sucesivas.
De todas las acuaporinas vegetales,
las que revisten mayor inters desde
el punto de vista evolutivo son las
nodulinas. Se describieron en los ndulos simbiticos de las races de
leguminosas, pero se encuentran tambin en plantas sin ndulos simbiticos. Segn los anlisis de parentesco,
todas las nodulinas descenderan de
un mismo tipo de canales de agua
que fue adquirido por el ancestro
comn de todas las plantas a partir
de bacterias por transferencia gnica horizontal. Luego, puesto que las
plantas carecen de transportadores de
glicerol-urea, estos canales de agua
habran cambiado su funcin: una
fuerte presin selectiva los transform en los actuales canales de
glicerol-urea.
Dado que las nodulinas adquirieron
su capacidad de transportar glicerolurea de forma distinta al resto de
acuagliceroporinas (mediante convergencia funcional), los aminocidos
implicados en la selectividad por
glicerol-urea son tambin distintos.
La secuencia de las nodulinas guarda
semejanza con la secuencia tpica de
los canales de agua, pero presenta
algunos cambios, necesarios para su
funcin, que recuerdan a las acuagliceroporinas.

Los autores
Miriam Echevarra Irusta se doctor en biologa por la Universidad Simn Bolvar
de Caracas. Es profesora de la Universidad de Sevilla. Se dedica al estudio funcional
de las acuaporinas en el departamento de siologa mdica y biofsica del Laboratorio de Investigaciones Biomdicas del Hospital Virgen del Roco. Rafael Zardoya San
Sebastin se doctor en biologa por la Universidad Complutense de Madrid. Desarrolla
su investigacin sobre logenia y evolucin molecular en el Museo Nacional de Ciencias
Naturales del CSIC.

Bibliografa complementaria
APPEARANCE OF WATER CHANNELS IN XENOPUS OOCYTES EXPRESSING RED CELL CHIP28 PROTEIN.
G. M. Preston y otros en Science, vol. 256, pgs. 385-387, 1992.
CLONING AND EXPRESSION OF AQP3, A WATER CHANNEL FROM THE MEDULLARY COLLECTING DUCT
OF RAT KIDNEY. M. Echevarra y otros en Proceeding of National Academy of Sciences
USA. vol. 91, pgs. 10997-11001, 1994.
STRUCTURAL DETERMINANTS OF WATER PERMEATION THROUGH AQUAPORIN-1. K. Murata y otros
en Nature. vol. 407, pgs. 599-605, 2000.
ORIGIN OF PLANT GLYCEROL TRANSPORTERS BY HORIZONTAL GENE TRANSFER AND FUNCTIONAL
RECRUITMENT. R. Zardoya y otros en Proceeding National Academy of Sciences USA.
vol. 99, pgs. 14893-14896, 2002.

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