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Informe Bioquimica Laboratorio

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INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA

CUANTIFICACIN DE UREA Y CREATININA SRICA


1. INTRODUCCIN.
HEMOGLOBINA.
La hemoglobina es una protena tetramrica: consta de dos subunidades y dos , con
notable homologa entre ellas. Cada subunidad contiene un grupo hemo (Fe
Protoporfina IX).
En cada subunidad proteica del tetrmero, el grupo hemo (grupo prosttico) se halla
encajado en la oquedad superior de la protena globular, mantenindose unido a la
protena por el enlace tipo van der Waals entre el tomo de hierro (Fe) y los nitrgenos
imidazlicos (ver frmula bidimensional).
El grupo hemo tiene un comportamiento similar al de un hidrocarburo aromtico,
mantenindose en su posicin por interacciones van der Waals que ejercen los
aminocidos hidrofbicos que lo rodean, a una distancia estimada (estudios
cristalogrficos) de 0,4nm.
El anlisis de hemoglobina puede realizarse como parte de un examen de rutina o
durante una enfermedad, pero suele formar parte del recuento hemtico completo. El
anlisis de hemoglobina se utiliza principalmente para detectar varios tipos de anemia,
una enfermedad comn que aparece cuando la cantidad de glbulos rojos de una
persona es demasiado baja.
BILIRRUBINA.
La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina en el
Sistema Retculo Endotelial. Los hemates al degradarse liberan la hemoglobina que es
metabolizada a dos molculas el grupo hemo y el grupo globina, el grupo hemo se
transforma en biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o
indirecta. Al pasar por el hgado esta bilirrubina se conjuga con cido glucurnido
transformndose en bilirrubina conjugada o directa.

El hgado segrega esta bilirrubina directa a travs de las vas biliares hacia el intestino,
al metabolizarse por la flora intestinal se convierte en urobilinas que dan el color marrn
a las heces. Parte de estas urobilinas se reabsorben y pueden aparecer en la orina en
forma de urobilingeno.

Cuando se eleva la bilirrubina, la piel y los tejidos toman un color amarillo que se llama
ictericia. Segn cual sea el origen de la bilirrubina elevada podemos saber si es un
problema de hgado (elevacin de la bilirrubina no conjugada) o de las vas biliares
(elevacin de la bilirrubina conjugada).

Cuando se realiza un anlisis de rutina se mide la bilirrubina total (directa ms


indirecta), el 70 al 85 % corresponde a la bilirrubina no conjugada o indirecta.

El Sistema Retculo Endotelial esta formado por la unin de macrfagos


(este termino lo asigno Aschoff en el ao 1924 a un conjunto de clulas
formado por monocitos , histocitos, fibroblastos, clulas endoteliales y
reticulares) , mviles y tisulares fijos.

Sntesis de Bilirrubina Directa: en el hgado

Sntesis de Bilirrubina Indirecta: en la sangre

2. MATERIALES.

Hemoglobinometro
Tubo de ensayo
Micro pipeta
Gradilla espectrofotmetro
Reactivos
Agua destilada

3. OBJETIVOS.

Determinar la concentracin de hemoglobina en sangre total.

Explicar la importancia de hemoglobina para el organismo.

Determinar los valores de bilirrubina directa, total e indirecta en suero


sanguneo.

Diferenciar los tipos de bilirrubina segn su solubilidad

4. PROCEDIMIENTO.
DETERMINACION DE BILIRRUBINA
El analizador de la hemoglobina del control de EKF Hemo necesita apenas una pequea
muestra proporcionar exacto, resultados de la laboratorio-calidad en el plazo de 25
segundos. Encajado con la tecnologa innovadora del microcuvette de NXT, esta unidad
avanzada produce resultados rpidos con la basura mnima. Los microcuvettes de NXT

tienen aberturas ms grandes cuando estn comparados a las versiones previas as que el
tcnico puede colocarse a cualquier ngulo para recoger muestras de sangre de
pacientes. Cuando la muestra se inserta en el analizador, el sostenedor incorporado del
microcuvette asegura que la sangre no est salpicada hacia fuera, por lo tanto poca
contaminacin. El analizador tambin tiene un software que deje la demostracin de los
resultados en una PC y de all a un sistema de la gestin de la informacin.
DETERMINACION DE BILIRRUBINA DIRECTA Y TOTAL
En tres tubos blancos marcados B (blanco), D (directa) y T (Total) colocar:

B
D
T
Muestra (suero)
200 ul
200 ul
200 ul
Agua destilada
2,5 ul
2,5 ul
Reactivo A
2,5
Reactivo B
200 ul
Diazorreactivo
200 ul
200 ul
Mezclar de inmediato cada tubo por inversin. Luego de 5 minutos, leer en
espectofotometro a 530 nm, llevando el aparato a cero con agua destilada. Las lecturas
pueden efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto para la bilirrubina directa que debe
leerse a los 5 minutos exactos. Si se lee antes, habr subvaloracin de los resultados por
reaccin incompleta. Si se lee despus, habr sobrevaloracin porque comienza a
reaccionar la bilirrubina libre.

5. CALCULO DE RESULTADOS.
Bilirrubina total (mg/l) = (T- ) x f
l) =(D B) x f
6. VALORES DE REFERENCIA.
Bilirrubina en suero o plasma
Adultos:

Total: hasta 10 mg/l


Directa: hasta 2 mg/l

Bilirrubina directa (mg/

Indirecta: hasta 8 mg/l

7. RESULTADOS.

HEMOGLOBINA:

11,5 mg/dl

BILIRRUBINA TOTAL E INDIRECTA:


Lecturas:

B = 0,021

D = 0.049

T = 0.050
Bilirrubina total = 0.63
Bilirrubina directa = 0.6104
Bilirrubina indirecta = 0.02

8. DISCUSION DE RESULTADOS.
HEMOGLOBINA.
La hemoglobina (Hb), el principal componente de los glbulos rojos. Es una protena
que transporta oxgeno. Este examen se hace para diagnosticar o vigilar la gravedad de
la anemia hemoltica, un trastorno en el cual un bajo conteo de glbulos rojos es
causado por la descomposicin anormal de stos.

Los niveles de hemoglobina por debajo de lo normal pueden deberse a:

Anemia (diversos tipos)


Sangrado
Destruccin de glbulos rojos

Leucemia
Desnutricin
Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitamina B12 y vitamina B6
Sobrehidratacin
Los niveles de hemoglobina por encima de lo normal pueden deberse a:

Cardiopata congnita
Cor pulmonale
Deshidratacin
Eritrocitosis
Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia)
Fibrosis pulmonar
Policitemia vera

BILIRRUBINA.
La bilirrubina directa en la muestra reacciona con el cido sulfanlico diazoado,
originando un complejo coloreado que puede determinarse espectrofotomtricamente.
La cetrimida solubiliza la bilirrubina indirecta permitiendo su reaccin junto con la
fraccin directa. Los trminos directa y total se refieren a las caractersticas de
reaccin en presencia o ausencia de solubilizantes (aceleradores). La bilirrubina
directa e indirecta equivale slo de forma aproximada a las fracciones conjugada y
no conjugada

9. RESUMEN Y CONCLUSIONES.
El metabolismo de la bilirrubina comienza con la descomposicin de los hemates
en el sistema reticuloendotelial. La hemoglobina es liberada desde los hemates y

descompuesta en las molculas heme y globina. El heme es catabolizado despus


para formar biliverdina, que se transforma en bilirrubina. Esta forma de bilirrubina
se denomina no conjugada (indirecta). En el hgado, la bilirrubina indirecta es
conjugada con glucurnido para producir bilirrubina conjugada o directa. La
bilirrubina conjugada se excreta despus por las clulas hepticas hacia los
canalculos intrahepticos, que acaban conducindola a los conductos hepticos, el
conducto biliar comn y el intestino. La mayor parte de la bilirrubina de la bilis
que alcanza el intestino est conjugada. La bilirrubina conjugada no es
apreciablemente absorbida por el intestino. La accin de las bacterias intestinales
sobre la bilirrubina da por resultado la desconjugacin y la oxidacin o reduccin,
con formacin de compuestos que colectivamente se denominan urobilingeno.
Estos compuestos estn no conjugados, lo que permite su absorcin. La mayor
parte del urobilingeno absorbido es excretado por el hgado, aunque pueden
aparecer pequeas cantidades normalmente en la orina. Cantidades mayores se
encuentran en la orina cuando la excrecin de bilirrubina por la bilis est
aumentada, como en la hemlisis. O cuando el hgado enfermo no puede segregar
fcilmente urobilingeno absorbido por el intestino.
La ictericia es una coloracin amarillenta de piel y mucosas causada por niveles
sanguneos de bilirrubina anormalmente altos. El color amarillo se aprecia cuando
la bilirrubina srica total es superior a 1,6 mg por 100 ml en los casos de origen
heptico o biliar, requirindose cifras mayores para que se manifieste en
ictericia una hiperbilirrubinemia de origen hemoltico.
10. Referencias Bibliogrficas
MURRAY R,K. GRANNER D.K. MAYES, P.A. y RODWELL V,W. 2001.
Bioqumica de Harper. 16a Ed. Edit El Manual Moderno. Mxico.
PLUMMER P,T 1981. Bioqumica Prctica. 13a Ed. Edit. El Manual Moderno
S.A. De C.V. Mxico D.F.
RONDONI, P. Compendio de Bioqumica con Aplicacin a la Patologa y al
Diagnstico. 4ta Edicin. Editorial LABOR S.A. Madrid Espaa.

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