Curva Espectral

CURVA ESPECTRAL DE LA AZOSULFAMIDA
MARCO TEORICO
La luz se puede explicar como un conjunto de radiaciones que se mueven por todo el espacio.
Aquellas detectables por nuestro ojo corresponden a la luz visible, pero la mayora son invisibles
para nosotros. Estas radiaciones se pueden describir como partculas y como ondas. La
descripcin como onda se basa en que la luz consta de campos elctricos y magnticos que
oscilan sinusoidalmente y en forma perpendicular a la direccin de traslacin por el espacio.
En cada una de estas ondas, la distancia entre dos crestas (o valles) consecutivas es la longitud
de onda, _. El producto de la longitud de onda por frecuencia (el nmero de ciclos por segundo
en unidades Hertz, Hz), es la velocidad de la luz, c (esencialmente la velocidad de la luz en el
vaco):
c v
En cualquier medio material, la velocidad de propagacin es inferior a sta y queda dada por
nc = 2.9979X1010 (cm/s), donde n es el ndice de refraccin del medio.
La radiacin slo se absorbe o emite en unidades definidas llamadas fotones. La energa de los
fotones es proporcional a la frecuencia de radiacin:
E = hv
donde h es la constante de Planck.
El conjunto de radiaciones electromagnticas se llama espectro electromagntico y es

conveniente agruparlas en regiones para poder conocer sus propiedades. En la figura se
muestran las zonas del espectro segn la clasificacin ms aceptada. Como se puede observar
la zona del visible (radiaciones percibidas por nuestro ojo) es muy pequea en comparacin con
la gran amplitud del espectro.
Aunque hablamos de una radiacin determinada (), fsicamente es imposible aislar dicha
radiacin. Siempre podremos obtener un rango de radiaciones pequeo segn la exactitud del
dispositivo de seleccin (difractares de radiacin y filtros), pero nunca una sola. De la misma
manera que no podemos obtener o aislar un punto de una recta, sino un trozo pequeo (un
conjunto de puntos).

La espectrofotometra es una tcnica que mide la interaccin de molculas con la radiacin
electromagntica. La luz que se encuentra en la luz visible y la luz ultravioleta de los espectros
electromagnticos presenta una energa de 150- 400 kJmol-1. La energa de la luz es usada para
promover electrones de un estado de excitacin a otro. Un espectro es obtenido cuando la
absorcin de luz es medida en funcin de una frecuencia o longitud. Molculas con electrones
deslocalizados en sistemas aromticos a menudo absorben la luz a 150-400 nm (ultravioleta) o
en la regin visible de 400-800 nm.
La espectrofotometra de absorcin es usualmente usada con molculas disueltas en un

solvente transparente. La absorbancia de un soluto depende linealmente de la concentracin y
por consiguiente la espectrofotometra de absorcin es ideal para hacer mediciones
cuantitativas. La longitud de absorcin y la fuerza de absorbancia de una molcula no slo
depende de la naturaleza qumica, si no del ambiente molecular en donde se encuentre el
cromforo. La espectrofotometra de absorcin es por lo tanto una excelente tcnica para seguir
reacciones de unin a ligando, catlisis enzimticas y transiciones conformacionales en
protenas y cidos nucleicos. Las mediciones espectroscpicas son muy sensibles y se requieren
pequeas muestras de material para el anlisis.
Ley de Lambert-Beer.
La cantidad de radiacin electromagntica absorbida por un analito se puede relacionar
cuantitativamente con la concentracin de dichas sustancias en solucin. La transmitancia (T) se
define como la fraccin de radiacin incidente trasmitida por la disolucin. Si la potencia
radiante que incide sobre la disolucin es Po y P la potencia radiante que sale, entonces:
Adems, se observa que la potencia de la energa trasmitida disminuye geomtricamente

(exponencialmente) con la concentracin C y con la distancia b recorrida a travs de la
disolucin.
donde k y k son constantes de proporcionalidad y combinando ambas y aplicando
logaritmos
T=10-a*b*c
-log T = a*b*c=A
que es la expresin matemtica de la Ley de Beer y que indica la relacin directa entre la
absorbancia de un analito y su concentracin en disolucin.
MATERIALES
- Espectrofotmetro UV/VIS
- Fiola 100ml
- Pipetas volumtricas
- Azosulfamida 1000 ug/ml
- Hojas milimetradas
PROCEDIMIENTO
a) Se prepararon disoluciones de 2 ug/ml y 10 ug/ml a partir de una muestra estndar de

1000 ug/ml.
1) Se realizo la preparacin de la disolucin de 2 ug/ml:
Tomando 4 ml de la solucin patrn y luego llevado a una fiola de 100 ml se obtuvo

una concentracin de 4000 ug/ml.
4000 ug ------ 100 ml

200 ug ------ X ml
X = 5 ml
Donde X se denota como el volumen necesario que al llevarlo a una fiola de 100 ml
se obtiene la concentracin de 2 ug/ml.
2) Se realizo la preparacin de la disolucin de 10 ug/ml:
Tomando 10 ml de la solucin patrn y luego llevado a una fiola de 100 ml se

obtuvo una concentracin de 10000 ug/ml.
10000 ug ------ 100 ml

1000 ug ------ X ml
X = 10 ml
Donde X se denota como el volumen necesario que al llevarlo a una fiola de

100 ml se obtiene la concentracin de 10 ug/ml.
b) Se realizo la medicin del espectro de la azosulfamida para ello se utiliz el

Espectrofotometro UV/VIS a una longitud de onda de 460 600 nm, respectivamente
en 15 mediciones.
RESULTADOS
1) Resultados obtenidos por el espectrofotmetro UV/VIS para la dilucin de 2

ug/ml en la escala de 460-600 nm
Longitud de onda Absorbancia Trazabilidad

460 0.060 87.096
470 0.066 85.090
480 0.074 84.918
490 0.082 82.794
500 0.089 81.470
510 0.094 80.537
520 0.097 79.983
530 0.098 79.799
540 0.092 80.909
550 0.084 82.413
560 0.073 84.527
570 0.061 86.896
580 0.050 89.125
590 0.042 90.782
600 0.036 92.044
1) Resultados obtenidos por el espectrofotmetro UV/VIS para la dilucin de

10 ug/ml en la escala de 460-600 nm
Longitud de onda Absorbancia Trazabilidad

460 0.161 69.023
470 0.170 67.608
480 0.224 59.703
490 0.259 55.080
500 0.291 51.168
510 0.317 48.194
520 0.331 46.665
530 0.332 46.558
540 0.314 48.528
550 0.280 52.480
560 0.233 58.479
570 0.184 65.463
580 0.139 72.610
590 0.105 78.523
600 0.082 82.794
DISCUSIONES
Durante el preparado a la solucin estndar de 1000 ug/ml no se realiz ningn proceso

adicional durante la disolucin a 2 ug/ml y 10 ug/ml, A menudo son necesarios pasos de
separacin (filtracin, extraccin con solventes, etc.) porque es posible la presencia de
interferencias espectrales, difciles de eliminar instrumentalmente, siendo necesario un pre
tratamiento de la muestra.2
Trabajamos con una longitud de onda de 460-600 nm porque nuestra muestra presenta una
coloracin inicial azul oscuro por ello, Las mediciones de absorbancia se hacen en la zona de
longitudes de onda donde se espera que absorba la sustancia problema. Si se trata de
sustancias coloreadas, las mediciones se realizan en la zona visible del espectro
electromagntico (380 a 800 nm). En el caso de sustancias no coloreadas, las mediciones se
realizan en la regin ultravioleta del espectro electromagntico (200 a 380 nm)3
CONCLUSIONES
Durante el manejo de la prctica se obtuvieron los valores de absorbancia y trazabilidad del
espectro de la azosulfamida.
Se desarrollo la curva espectral de la azosulfamida para un rango de 460-600 nm debido a que

es una sustancia coloreada cuyo rango de medida ronda los 380-800 nm.
BIBLIOGRAFIA
1.- Arenas I. Espectrofotometra de absorcin. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.
Mxico. 2004.
2.- Alberto de J. Estudio por espectrofotometra uv-vis de la reaccin entre los iones cianuro y
picrato. un ejemplo prctico de aplicaciones analticas y estudios cintico. Universidad de Los
Andes. Venezuela. 2009.
3.- Martnez H. Tcnica de Anlisis Espectrofotomtrica de Antocianinas en Materias Primas de

la Regin de Ayacucho. Ayacucho. Per. 2015.
UNIVERSIDAD NACIONAL
MAYOR DE SAN MARCOS
FACULTAD DE FARMACIA Y
BIOQUMICA
EAP CIENCIA DE LOS

ALIMENTOS
TEMA:
Curva Espectral de la Azosulfamida (informe de practica)
CURSO:
Catedra De Qumica Analtica Instrumental
Lima Per
2017

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CURVA ESPECTRAL DE LA AZOSULFAMIDA

El conjunto de radiaciones electromagnticas se llama espectro electromagntico y es

La espectrofotometra de absorcin es usualmente usada con molculas disueltas en un

Adems, se observa que la potencia de la energa trasmitida disminuye geomtricamente

- Azosulfamida 1000 ug/ml

a) Se prepararon disoluciones de 2 ug/ml y 10 ug/ml a partir de una muestra estndar de

1) Se realizo la preparacin de la disolucin de 2 ug/ml:

Tomando 4 ml de la solucin patrn y luego llevado a una fiola de 100 ml se obtuvo

4000 ug ------ 100 ml

2) Se realizo la preparacin de la disolucin de 10 ug/ml:

Tomando 10 ml de la solucin patrn y luego llevado a una fiola de 100 ml se

10000 ug ------ 100 ml

Donde X se denota como el volumen necesario que al llevarlo a una fiola de

b) Se realizo la medicin del espectro de la azosulfamida para ello se utiliz el

1) Resultados obtenidos por el espectrofotmetro UV/VIS para la dilucin de 2

Longitud de onda Absorbancia Trazabilidad

1) Resultados obtenidos por el espectrofotmetro UV/VIS para la dilucin de

Longitud de onda Absorbancia Trazabilidad

Durante el preparado a la solucin estndar de 1000 ug/ml no se realiz ningn proceso

Se desarrollo la curva espectral de la azosulfamida para un rango de 460-600 nm debido a que

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