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Práctica CORRECTA

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Citología e histología.

Práctica de microscopio y
técnicas histológicas.

9011041 María Arantxa


Colón Cano.
PRÁCTICA 1. MICROSCOPIO ÓPTICO Y
TÉCNICA HISTOLÓGICA.

INTRODUCCIÓN.
En el microscopio óptico actual se utiliza una
disposición específica de grupos de lentes que
amplifican una imagen. Como resultado del uso de más
de una lente simple, este instrumento se conoce como
microscopio compuesto. La fuente de luz es una
bombilla eléctrica con un filamento de tungsteno cuya
luz se reúne con un haz enfocado por la lente
condensadora. El haz de luz se localiza abajo y se
enfoca en el espécimen. La luz que pasa a través de
este último penetra en una de las lentes del objetivo:
estas lentes están asentadas en una torreta movible
justo arriba del espécimen. Por lo general se disponen
de cuatro lentes objetivos en una torreta, que
proporcionan amplificaciones baja, media y alta y con
aceite.
PROPÓSITO.
Identificar las partes que conforman un microscopio y su
función a través de la lectura y corroboración con un
microscopio real para la utilización de este como
instrumento de morfología microscópica.

MATERIAL.
• Un Microscopio
• Portaobjetos con preparación histológica en
hematoxilina & eosina de cualquier tejido del que
identificarán diferentes tejidos.
• Libreta y colores
MÉTODO.
Se identificarán las partes del microscopio elaborando
un dibujo donde se colocarán las partes del mismo.
Se observarán los preparados histológicos y se
describirán los hallazgos. Se realizará un resumen
explicativo de las técnicas y colorantes para los
preparados histológicos.
El estudiante realizará un resumen del procesado de
una muestra biológica para su observación al
microscopio y realizará una investigación de los
colorantes de Histoquímica más utilizados, explicando
de qué color tiñen los diferentes tejidos y sus causas.
Responde el siguiente cuestionario:
CUESTIONARIO.
¿Qué tipo de microscopio es con el que cuenta el
laboratorio de Histología?
-Óptico de campo claro.
Dibújalo y señala sus partes
¿Cuántos objetivos tiene el microscopio y que
capacidad de amplificación?
Tiene cuatro objetivos, de 4x, 10x, 40x y 100x.
¿Cuál es el mejor amplificador didáctico del
microscopio?
100x con aceite de inmersión.
¿Cuántos tipos de microscopio existen y cuál es el uso
de cada uno?
Óptico campo claro: usado para tinciones, de
investigación histológica.
Contraste de fase: examina células y tejidos vivos,
estudia cortes semifinos no teñidos.
De interferencia: cuantifica masa hística.
De interferencia diferencial: evalúa propiedades
superficiales de la célula.
Campo obscuro: examina preparados radioautográficos,
detecta cristales en la orina, y ciertas bacterias.
De fluorescencia: detecta moléculas con fluorescencia
natural como la vitamina A y neurotransmisores.
Confocal de barrido: permite visualizar una muestra en
tres dimensiones.
Luz UV: detecta ácidos nucleicos.
Polarización: fácil identificación de sustancias cristalinas
o fibrosas.
Electrónico: proporcionan datos morfológicos y
analíticos de las células.
Transmisión de barrido: microanálisis de rayos X por
sonda electrónica.
Fuerza atómica: la célula puede estar en su medio
circundante y no afectar la visibilidad.
¿Qué tinción se utiliza para poder observar al
microscopio de campo claro la membrana basal de los
epitelios y por qué?
PAS, porque tiñe el glucógeno de la membrana basal de
epitelios, resalta otras estructuras y células de la piel,
eosina y hematoxilina.
¿Para qué se prepara una muestra de tejido con la
tinción de PAS?
Para poder revelar carbohidratos como glucógeno,
mucinas, filamentos y esporas micelianos.
¿Con que tinciones podemos identificar con mayor
facilidad al músculo y por qué?
Tricromicos de Gomori, de Masson, Mallory. Porque
resalta estructuras de soporte y colágeno.
DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES.
Comenta con tus compañeros lo aprendido en esta
práctica, pregunta a tu maestro si tienes dudas y, en
equipo realiza un comentario final sobre conocimiento y
uso del microscopio óptico.

Aquí realiza tu dibujo del microscopio


En la parte baja del microscopio se encuentra el botón
de encendido y apagado, el regulador de luz, el
macrómetro,micrómetro, el condensador, la base y el
foco.
En la parte media está la platina que es un gancho que
sostiene la laminilla, el condensador con diafragma, un
anillo que aumenta o disminuye la luz y el filtro
dependiendo el microscopio que convierte la luz
amarilla a luz blanca, la palanca de desplazamiento.
En la parte alta se encuentra la torreta con lentes de 4x,
10x, 40x y 100x, el revólver, y los oculares.
Aquí realiza tu resumen del tema: técnica histológica y
tinciones utilizadas en histología.
Técnica histológica: Es el conjunto de procedimientos
aplicados a una muestra biológica, preparada en
condiciones óptimas para su observación a través de un
microscopio, se debe obtener una muestra del tejido
que se desea analizar, ya sea necropsia o biopsia. Se
usan colorantes para teñir el tejido, y debe tener
auxocromo para permitir al químico unirse al tejido.
El primer paso es la fijación para observar la estructura,
se usa para abolir el metabolismo celular, impedir la
degradación de las células, destruir patógenos y
endurecer el tejido. El más usado es la formalina.
El segundo paso es la inclusión en parafina que
permitirá su corte, se deshidrata en alcoholes, se aclara
con solventes orgánicos y queda el taco que se
colocará en el microtomo.
El corte es el tercer paso, se obtienen rebanadas finas
del tejido y se montan en el portaobjetos.
Último paso la muestra se tiñe para permitir su examen,
con hematoxilina o eosina para tener su contraste.
Tinciones usadas en histología:

Hematoxilina- eosina es la tinción más común, azul de


metileno, verde de metilo, naranja G.
Tricrómicos usados para teñir colágeno y fibras elástica.
La coloración depende del tejido, un ejemplo es que tiñe
fibras musculares de color rosa.
Gimesa: permite distinguir los gránulos de leucocitos.
También existe una tinción negativa que no tiñe la
muestra, sino todo su alrededor.

Colorantes usados en la histoquímica: PAS, se utiliza


para detectar carbohidratos. Oxida el tejido mediante el
ácido periódico de los enlaces entre los carbonos.
Provocando formación de grupos aldehídos reconocidos
por el reactivo Schiff y da un color rojizo.

Aprendí el uso correcto de un microscopio de campo


claro, sus partes y pude enfocar una muestra de
paratiroides teñida con hematoxilina y eosina.

Michael Ross. (2014). Histología. Buenos Aires: Panamericana.


Finn Geneser. (2005). Histología. Buenos Aires: Panamericana.

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