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    Sakaguchi

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    Enmanuel Alcoser
    Este documento describe la prueba de Sakaguchi, la cual es específica para la detección de arginina. La prueba involucra la reacción del grupo guanidina de la arginina con α-naftol e hipobromito alcalino para producir un complejo de color rojo. La prueba se realizó con diferentes muestras incluyendo albúmina, glicina, arginina y urea, observándose un resultado positivo solo para la arginina a través de la formación de un color rojo intenso.

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    Sakaguchi

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    Este documento describe la prueba de Sakaguchi, la cual es específica para la detección de arginina. La prueba involucra la reacción del grupo guanidina de la arginina con α-naftol e hipobromito alcalino para producir un complejo de color rojo. La prueba se realizó con diferentes muestras incluyendo albúmina, glicina, arginina y urea, observándose un resultado positivo solo para la arginina a través de la formación de un color rojo intenso.

    Descripción original:

    reactivo de sakaguchi

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    INTRODUCCIÓN

    Los aminoácidos que constituyen a las proteínas, son substancias que tienen como
    característica general el hecho de poseer un carboxilo libre y un grupo amino, situado en el
    carbono alfa con respecto al carboxilo.

    En todos los aminoácidos alfa que forman a las proteínas, el grupo amino alfa es un grupo
    primario, es decir que no tiene sustituyentes. La única excepción ocurre con la prolina, que
    es un aminoácido, ya que su grupo es secundario. Los aminoácidos difieren entre sí
    únicamente por las características del resto de su molécula o cadena lateral (R), de manera
    que su fórmula general es

    Las propiedades de cada aminoácido dependen tanto de su grupo carboxílico como de su


    grupo amino alfa, y de su cadena lateral (R). En un polímero lineal de aminoácidos o
    polipéptido, de todos los grupos carboxilo alfa y amino de los aminoácidos que intervienen,
    solo quedan libres un grupo amino alfa, el grupo terminal y un grupo carboxilo alfa, el grupo
    carboxilo terminal.

    Así pues, en una proteína las cadenas laterales de los aminoácidos que la constituyen, son
    las que influyen de manera directa en las propiedades de cada zona a lo largo de la cadena
    poli peptídica y, en consecuencia, determinan también en gran medida su comportamiento.
    Una de las propiedades más importantes de las cadenas laterales de los aminoácidos, es su
    capacidad de interacción con los solventes acuosos o con los reactivos que permiten su
    identificación, es decir su grado de polaridad o no polaridad.
    PRUEBA DE SAKAGUCHI

    Esta prueba es específica para Arginina o proteínas que la contienen. Es positiva para el
    aminoácido que contiene el grupo guanidina en la Arginina. El grupo guanidina presente en
    el aminoácido reacciona con α-naftol e hipobromito alcalino para dar un complejo de color
    rojo (7,8).

    Reacción Química

    PROCEDIMIENTO

    Materiales Reactivos

     Pipetas 1 – 5 mL  Solución de albumina 5%


     Tubos de ensayo  Aminoácidos (glicina y arginina)
     Soporte de tubos de ensayo  NAOH 10M
     Urea
     Alfa-naftol 1% en alcohol
     Bromo

    DESARROLLO

    Se tomó 5 ml de la solución de albumina y se trasfirió a un tubo de ensayo, de igual manera


    se agregó una pequeña porción de glicina, arginina y urea en diferentes tubos de ensayo
    rotulados.
    Después se procedió agregar 10 ml de NAOH 10M y 5 gotas de alfa-naftol a cada uno de los
    tubos de ensayo, se mezcló por unos minutos.

    Por último, se procedió agregar 5 gotas agua de bromo a cada tubo de ensayo, se agito por
    unos minutos.

    Los tubos presentaron diferentes coloraciones.

    RESULTADOS

    Solución de albumina negativo coloración poco rojo

    Glicina negativo coloración poco rojo

    Arginina positiva coloración roja intenso

    Urea negativo coloración no muy clara

    ANÁLISIS DE RESULTADOS

    Puesto que la reacción positiva de esta prueba se generó debido a la presencia de un grupo
    guanidinio (como se aprecia en la reacción) el cual reaccionó con la solución de α – naftol
    en la presencia de bromo (componente del reactivo de sakaguchi) en medio alcalino, la
    muestra de arginina obviamente arrojo un resultado positivo por hacer parte de ella dicho
    grupo, sin embargo, para el resto de muestras los resultados en cuanto al cambio de la
    coloración no fueron muy claros.
    CONCLUSIONES GENERALES

    Indicamos la presencia de proteínas en diferentes muestras mediante pruebas cualitativas, del


    mismo modo identificamos algunos de los aminoácidos presentes en ellas por medio de las
    reacciones que ocurrieron en cada caso de acuerdo al radical o al grupo que caracteriza al
    aminoácido. Identificamos estructuralmente diferentes aminoácidos presentes en
    determinadas proteínas o en su defecto como aminoácidos libres.

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