ELECTROFORESIS CAPILAR

FUNDAMENTO

El desplazamiento de sustancias bajo la acción de un campo electrónico fue citado

por Reus en 1809 en las memorias de la sociedad imperial Natural (Moscow) (1809.
Allí se describe lo que vemos en la imagen, donde se observa el comportamiento
migratorio de pequeñas partículas de arena en un ámbito de agua transparente
contenido en un recipiente de vidrio con un lecho de arena fina en su fondo y dos
tubos conteniendo electrodos de una batería. El pasaje de la corriente produce un
entubamiento en las proximidades del polo positivo producido por la migración de
partículas de arena muy pequeñas que se movilizan por su carga eléctrica negativa.
Este experimento puede ser considerado como el primer aporte bibliográfico que
revela la polarización de la sílice, pues la arena es dióxido de silicio y fundida
permite obtener las capilares que se emplean en la electrofosis capilar. Varios años
más tarde, en 1816, fue observado el transporte del agua por acción de la corriente
galvánica generada por la polarización negativa del capilar que une los dos
recipientes electrónicos. La pared del capilar, sabemos hoy, adquiere carga
negativa (al pasaje de la corriente eléctrica) produciéndose la polarización del agua,
la que por consiguiente tiende a desplazarse hacia el polo negativo. Esta corriente
liquida que se desplaza en sentido opuesto a la dirección de la corriente eléctrica,
se designa con el hombre de fuerza electrostático(FEO): el flujo electro osmótico
permite la migración de anualitos neutros, migración de aniones hacia el catado,
separación de aniones y cationes en una misma corrida, mejora y controla la
resolución, el flujo electro osmótico puede ser controlado modificando el pH de la
solución amortiguadora de separación con el fin de obtener una mejora resolución,
la intensidad del flujo electro osmótico puede disminuirse al trabajo a una ph4, al
agregar al buffer de separación un solvente orgánico, al adicionar un surfactante
catiónico al electrolito soporte, este puede ser eliminado permanentemente si se
modificado la pared del capilar o temporalmente recubrimiento la pared del capilar
con algún polímero adicionado al electrolito de soporte.

Definición de electroforesis: Ha sido definida como el moviente o desplazamiento

diferencial de especies cargadas (iones), sustancias neutras o migración pasiva, por
atracción o repulsión en un campo eléctrico (voltaje aplicado por unidad de longitud
del medio de separación. La electroforesis en solución en medios libressin
elementos soportes (agar, almidón, geles de polo acrilamida), fue desarrollada por
tiselus, el que resolvió mezclas de proteínas de proteínas en un tubo aplicando un
campo eléctrico de corriente continua, pulsante, estudios que lo hicieron acreedor
al primero novel en química. Los problemas experimentales que se presentaron,
estuvieron vinculados a la difusión térmica y a la convención, lo que determino el
empleo de medios anticonvectantes como agar, agarosa y poliacrilamidas en forma
de geles. Las técnicas que más se han desarrollado están en la actualidad aplicadas
al campo de las proteínas y productos de la biología molecular, como son los geles
de agarosa y poliacrilamida en placas o films de distintos espesor verticales u
horizontales.

 Velocidad de migración: la velocidad de migración (v) de la partícula es

directamente proporcional al efecto de su carga efectiva (q) y el gradiente del
potencial eléctrico (e) e inversamente proporcional al coeficiente de fricción
(f=relativo) según la forma y el tamaño de la partícula. V=qE/f.

 Movilidad electroforética: es el caso particular de la migración de un ion

cuando se aplica un campo de 1 v/cm. Su signo es igual al de la carga de la
partícula. U=v/E=Q/f (U) depende del coeficiente de fricción, que responde a
parámetros físicos de la molécula que pueden dar información del tamaño y
forma de las moléculas.

La velocidad de migración depende de la: densidad de carga, del voltaje aplicando,

de la polaridad del gel, pH, punto isoeléctrico.

PRINCIPIOS BÁSICOS

Flujo electroosmótico.

En EC, además de las moléculas de soluto cargadas, la disolución tampón también

se desplaza por el capilar bajo la influencia de un campo eléctrico. Este fenómeno
se denomina flujo electroosmótico

Al trabajar con polaridad positiva, de forma que el polo positivo o ánodo se

encuentra en el extremo del capilar donde se realiza la inyección de la muestra, el
flujo electroosmótico va del polo positivo al negativo, es decir, que el tampón se
mueve del vial de entrada a través del capilar hacia el detector y el vial de salida.

La pared del capilar está constituida por un entramado de grupos silanol Si-OH con
un pKa que se encuentra alrededor de 5.

Esto hace que al trabajar con soluciones amortiguadoras básicas se encuentre

cargada negativamente con grupos silanoato Si-O - , y que los H + u otras cargas
positivas libres de la disolución se sitúen cerca de las cargas negativas de la pared
formando una doble capa. Al aplicar una diferencia de potencial, las cargas libres
(positivas y negativas) se moverán hacia los polos contrarios. Como las cargas
negativas de la pared del capilar no pueden moverse, existe un flujo resultante de
cargas positivas hacia al polo negativo. Los cationes como el H+ se encuentran
solvatados con moléculas de agua. Esto hace que con su desplazamiento se
desplace también todo el seno de la disolución tampón, creando el flujo
electroosmótico.

Una característica única del flujo electroosmótico es que presenta un perfil de

distribución plano, el cual solamente se desvía pocos nm de la pared, de forma que
proporciona la misma velocidad a todos los solutos, sea cual sea su posición a la
columna. Debido a este hecho, el flujo electroosmótico no contribuye de manera
significativa al ensanchamiento de banda por difusión longitudinal, como sí que lo
hace el perfil parabólico que se obtiene en HPLC cuando el líquido se impulsa por
presión hidrostática. La velocidad electroosmótica viene dada por la expresión:

veo = (VV / 4V V) E = Veo (V/L)

donde V es la constante dieléctrica del medio, V es la potencial zeta (que se crea

entre la pared interna y la disolución), V es la viscosidad del líquido, E es el campo
eléctrico, Veo es la movilidad electroosmótica, V es el voltaje aplicado y L es la
longitud de la columna.

Flujo electroforético.

Bajo la acción de un campo eléctrico, los solutos iónicos se desplazan a través de

la columna debido a dos razones: por un lado, ya se ha comentado que el flujo
electroosmótico arrastra todo el seno de la disolución y, por tanto, también los
solutos iónicos. Por otro lado, la propia carga de un soluto hace que éste muestre
una movilidad por sí mismo, llamada flujo electroforético. La movilidad
electroforética de un soluto (V ef) es función de su carga (q), del radio (r, asumiendo
una geometría esférica) y de la viscosidad del medio (V), según la ecuación:
𝑄
Vef = 6 𝑉𝑉𝑅

La movilidad electroforética es análoga a la movilidad electroosmótica y tiene las

mismas unidades (𝐶𝑀2 𝑉 −1 𝑆 −1 ). La velocidad electroforética viene dada por la
expresión:

vef = Vef.E = Vef(V/L)

Cuando se introduce una muestra en la columna y se aplica una diferencia de

potencial, cada uno de sus componentes tendrá una movilidad total que dependerá
de las velocidades electroosmóticas y electroforéticas:

vT=veo x Vvef

Si definimos el tiempo de migración como:

 tm = Ld /vT = L.Ld / V T.V

Donde Ld es la longitud de la columna hasta el detector, vemos que podemos

calcular los valores de los flujos a partir de valores experimentales

Separación de analitos.

La separación se basa en las diferencias de las movilidades electroforéticas de los

solutos iónicos, que harán que los analitos migren a través del capilar y lleguen al
detector a tiempos diferentes

La movilidad electroosmótica es normalmente superior a la movilidad electroforética

de los solutos iónicos inyectados, haciendo que sea posible separar cationes y
aniones en una sola inyección de la muestra.

En polaridad positiva, los cationes son atraídos hacia al cátodo y sus velocidades
aumentan por el flujo electroosmótico.

Los compuestos neutros no pueden ser separados mediante CZE debido a que no
muestran movilidad electroforética. El procedimiento más utilizado es crear un
sistema micelar en el tampón que transporte a los analitos, de forma que los
compuestos neutros son separados según su interacción con las micelas.

Este procedimiento analítico es un híbrido entre la electroforesis y la cromatografía

y fue introducido para Terabe et al. en 1984

Recibe los nombres de electroforesis capilar en fase micelar abreviado como MECC
(Micella r Electrokinetic Capillary Chromatography) o MEKC (Micellar Electrokinetic
Chromatography).

ELECTROOSMOSIS

Este es el proceso de mover un líquido a través de un material utilizando un campo

eléctrico aplicado. El movimiento puede ser a través de un material poroso, a lo
largo de un capilar, membrana, etc.
Esto se puede utilizar como una
técnica de separación (especialmente
electroósmosis capilar). La velocidad
del líquido es linealmente proporcional
al campo eléctrico aplicado. También
depende del material utilizado para
construir el canal y la solución utilizada. En la interfaz, la solución y el material han
obtenido cargas opuestas y esto se conoce como una doble capa eléctrica. Cuando
se aplica un campo eléctrico a la solución, la doble capa eléctrica se mueve por la
fuerza de Coulomb resultante. Esto se conoce como el flujo electroosmótico.

ELECTROMIGRACION:

La electromigracion es el transporte del

material, causado por el movimiento gradual
de los iones

En un conductor gracias a la transferencia

de cantidad de movimientos entre los
electrones de conducción y los átomos del
metal .El efectos la electromigración es
importante en la aplicaciones donde se
utiliza densidades de corrientes altas, como
en la microelectrónica y en estructuras
relacionada, como el tamaño e la estructura
en las diapositivas electrónicas y los circuitos integrados es muy pequeño, la pérdida
del material debido a la electromigracion es de importancia.

Mucha gente cree que la electromigracion es la “migración de electrones “ pero en

realidad es el material que" migra" por causa de un flujo de electrones, por eso se
llama electromigracion.

La electromigracion es un fenómeno que depende de la temperatura de seracion de

la densidad de corriente que circula por el semi conductor. La electromigracion solo
ocurre solo en Zonas donde el semiconductor está disparado cuando está dopado.

INSTRUMENTACIÓN

La instrumentación general de un aparato de electroforesis capilar se detalla

en la figura 1. Básicamente, costa de un tubo capilar, dos viales, un detector y una
fuente de alto voltaje. Los viales de entrada y salida contienen el tampón de
separación. En dichos viales se introducen los extremos del capilar, que
mediante una diferencia de presión se rellena con el tampón. Una vez rellenado
con el tampón de separación, se introduce el extremo del capilar de entrada
en el vial de muestra para realizar la introducción de ésta. La inyección de
la muestra en el capilar se puede realizar hidrodinámicamente estableciendo
una diferencia de presión, o bien por inyección electrocinética mediante la
aplicación de voltaje.
 Dentro de cada vial también se
encuentran los electrodos, el positivo
(ánodo) en el de entrada y el
negativo (cátodo) en el de salida,
siempre que trabajemos a polaridad
normal. Estos electrodos están
conectados a la fuente de alto
voltaje, que genera potenciales de
hasta 30 kV. El capilar tiene una
ventana de detección, una zona sin
recubrimiento que permite la
transmisión de la señal que llegará
al detector. El detector se encuentra acoplado a esta ventana, de manera que
detecta los diferentes compuestos separados por electroforesis a medida que van
pasando por la ventana. La sensibilidad de un procedimiento de CE vendrá
determinada por el tipo de detector utilizado. El sistema de detección más
ampliamente utilizado en electroforesis capilar es el de absorbancia en el rango UV-
Vis, debido a que es posible detectar una gran número de compuestos y a su
bajo coste. Su principal inconveniente es su menor sensibilidad respecto a
otros sistemas de detección. Un sistema de detección con el que se consigue
aumentar sustancialmente la sensibilidad es la detección de fluorescencia inducida
por láser (LIF). En este sistema el haz de luz procedente de un láser incide
sobre la ventana del capilar y un detector recoge la fluorescencia inducida
sobre los compuestos a analizar. Este tipo de detector es altamente sensible.
Tiene como inconveniente que su uso queda restringido a moléculas que
posean fluorescencia nativa, o que sean susceptibles a ser derivatizadas mediante
reacción con fluorógenos, de manera que puedan ser detectadas mediante
este sistema.

TIPOS DE ELECTROFORESIS CAPILAR

ELECTROFORESIS CONVECCIONAL

 Es muy utilizada para la detención y control de pureza, caracterización y

cuantificación (por comparacioncon controles) así como para la purificación
de fragmentos de ADN y ARN.

 Se lleva acabo sobre una capa delgada y sálica de gel, semisólido y poroso
que contiene un tampón en el interior de sus poros que ofrece resistencia al
movimiento.

 Se pueden separar varias muestras simultáneamente.

  Se aplica un potencial de corriente continua por un tiempo fijo, transcurrido
este se corta la corriente.

 Una vez que se produjo la separación de las especies, se realiza la coloración

para visualizarlas, se utilizan geles tridimensionales de polímeros
ramificados que contienen entre sus ramificaciones espacios llenos de
líquido.

 Esto permite la electroforesis: separación por relación carga/tamaño y es

tamizado: separación por tamaño.

 Los geles más comunes son agarosa y poliacrilamida, la contención del gel
define el poder de rituculacion.

ELECTROFORESIS CAPILLAR

 Surge a que debido la velocidad de separación y resolución de los

compuestos mejora a medida que aumentan la intensidad del campo
eléctrico aplicado.

 Se realiza electroforesis en un tubo capilar de menos de 0.1 mm de diámetro

de 50 a 100 cm de longitud, reduce el efecto joule aumentando la disipación
del calor generado, el mecanismo de separación está basado en la relación
carga/masa.

 Se utilizan volúmenes pequeños de 0,1 a 10 nL con elevada resolución y

rapidez.

La electroforesis capilar se divide en:

 Electroforesis capilar en gel: combina la técnica de electroforesis con la

cromatografía de reparto, se realiza una separación en función de la
migración electroforetica del peso molecular, se lleva a cabo en la matriz
polimérica de un gel poroso contenido en un tubo capilar.

 Electroforesis capilar de zona: Basada en la separación de anualitos según

la relación carga/tamaño, la composición del tampón es constante en toda la
zona de separación, los componentes de la zona migran cada uno según su
propia movilidad y se separan en zonas que pueden estar completamente
resueltas o parcialmente solapadas, no permite separar compuesto neutros.

 Enfoque isolectrico: Se basa en establecer un gradiente de pH estable en

una disolución o gel, este gradiente se logra por un conjunto de anfolitos que
migran hasta alcanzar sus puntos isoeléctricos, cuando en el gradiente de
 pH se introduce una proteína, cada zona intercambia protones con la muestra
proteica generando una separación isoeléctrica.

 Isotacoforesis: Electroforesis a velocidad uniforme, tiempo transcurrido en

el capilar bajo condiciones isotacoforesis; es independiente de la velocidad.
Se basa de la separación por desplazamiento, el capilar se debe llenar de un
electrolito líder. Este debe tener una gran movilidad mayor al de los
componentes a separar, luego se introduce un electrolito terminal, de
movilidad menor a la muestra.

CARACTERISTICAS RELEBANTES

La electroforesis capilar (EC)

es una técnica de separación
utilizada en distintas áreas
(química, bioquímica, etc.) para
separar las diferentes moléculas
presentes en una disolución de
acuerdo con la relación
masa/carga de las mismas. La
separación se lleva a cabo en un
tubo hueco de diámetro muy
pequeño (menos de 50 µm de
diámetro), de ahí que reciba el
nombre de capilar.

En síntesis la electroforesis capilar es una técnica de separación basada en la

migración diferencial de moléculas (ADN, proteínas, lones inorgánicos, esteriodes,
fármacos), sujetas a un campo eléctrico (de 100 a 500 V/cm) a través de un capilar
de menos de 50 um de diámetro en el interior. Como en toda electroforesis los
cationes fluyen hacia la terminal negativa, mientras que los aniones fluyen hacia la
positiva pero la inducción del alto potencialelectrico permite que:

 La separación sea más sensible entre las diferentes moléculas (resolución)

 El tiempo de análisis sea más corto. Para el caso del ADN, los fragmentos
de análisis se encuentran unidos a marcas flourecentes que son destacados
por un láser de argón (ar) que las excita a diferentes longitudes de ondas,
permitiendo el análisis de múltiples fragmentos al mismo tiempo, que se
mueven por la aplicación del campo eléctrico hacia el polo hacia positivo y
se separan de acuerdo con la longitud del mismo, de tal forma que los de
menor peso molecular viajan más rápido atreves del capilar, mientras que el
de mayor peso lo hacen más lentamente. Estas características hacen que la
 electroforesis capilar sea un método eficiente y económico con la capacidad
de separar cientos de componentes de forma simultánea, empleando
mínimas cantidades de muestras y reactivos, razones suficiente para ser la
herramienta de elección en el análisis bioquímico.

Características:

 Elevada ubicación de separación: técnica capaz de separar cientos de

componentes de forma simultánea.

 El consumo de muestra y reactivos mucho menor por lo que se considera

elevada una técnica limpia.

 Es muy versátil: ya que se puede emplear para separar cierto tipo de

compuestos eligiendo bien el detector. Ej. Se puede adaptar a un detector
uv, flurescencia, un espectrómetro de masas.

 La total automatización del análisis: Los instrumentos de la electroforesis

capilar permite llevar acabo el análisis sin la constante atención del operador.

 Elevada rapidez de análisis: Los tiempos de separación son generalmente

de varias decenas de minutos.

 Elevada eficacia de separación: En los análisis de proteínas suelen

obtenerse eficacias en torno a los 10.000-100.000 platos teóricos por metro
de columna, dependiendo de la proteína a analizar y de las condiciones de
separación.

 Pequeños volúmenes de muestra: En cada separación de utilizan unos pocos

(10 – 50) nanolitros de muestra.

 La total automatización del análisis: Los instrumentos de electroforesis

capilar permiten llevar a cabo los análisis sin la constante atención del
operador.

APLICACIONES
La electroforesis capilar es una herramienta de separación de biomoleculas, que en
los últimos años ha tenido una gran importancia en medicina, presenta la
versatilidad de poder separar aminoácidos, ácidos orgánicos, iones inorgánicos,
carbohidratos, esteroides, tioles,
contaminantes alimenticios,
material genético y algunos
fármacos importantes en el estudio
de diferentes ramas en el área de la
salud.

El explosivo avance de la
electroforesis capilar se ha
extendido al área de bioquímica,
en el campo de las proteínas,
péptidos, ADN, análisis de líquidos
de perfusión, monitoreo de drogas,
marcadores genéticos tumorales y
neurobioquimicos, drogas
xenobioticas, de abuso, y pericias
forenses. En el área
biofarmacéutica, para el control de calidad de productos farmacéuticos y
biotecnológicos, quimioterapias y de estructura quiral. En el área de alimentos, se
le aplica al fraccionamiento y cuantificación de aminoácidos, hidratos de carbono,
ácidos orgánicos, aditivos y contaminantes. En el área de control ambiental,
permite la identificación de contaminantes y sus metabolitos, pesticidas, metales
pesados e hidrocarburos. Como todo desarrollo de un área analítica nueva, la
incorporación de técnicas acopladas como espectroscopia de masa, fluorescencia
inducida por láser y otras variantes permiten augurar un promisorio futuro.

Las separaciones por electroforesis capilar se llevan de distintas maneras. Es

interesante destacar que estas modalidades se emplearon en primer lugar en la
electroforesis convencional y se adaptaron posteriormente en la electroforesis
capilar. Estas modalidades son la electroforesis capilar en zona (CZE),
electroforesis capilar en gel (CGE), isoelectroenfoque capilar (CIEF) e isotacoforesis
(CITP).

Para esto es importante recalcar las características de la disolución tampón como

ser:

 Solubilidad y estabilidad de los analitos en el sistema.

 Grado de ionización de los analitos.

  Efectos del pH.

 Efecto de los modificadores orgánicos y aditivos añadidos.

La condición esencial en la elección de la disolución tampón es que el analito de

interés sea soluble en el mismo, ya que si no se producirá una presipitacion dentro
del capilar que da lugar a que no aparezcan picos en electroferograma.

Para esto existe una serie de características de las disoluciones tampón que van a
afectar considerablemente la selectividad de la separación por electroforesis capilar
y que son:

 Tipo

 Composición

 pH

 Fuerza iónica

ELECTROFORESIS CAPILAR DE ZONA

En la electroforesis capilar de zona

utiliza una solución buffer (electrolito
base) el cual conduce la corriente
eléctrica y provee la capacidad
tamponante. La muestra (mezcla de
aniones, cationes y especies neutras) es
introducida en uno de los extremos del
tubo capilar, formando en un principio
una zona aguda, bajo la aplicación de un
campo eléctrico las especies iónicas del electrolito y de la muestra migran en forma
independiente con una velocidad específica, se separaran en zonas que pueden
estar completamente resueltas y parcialmente solapadas. Entre las zonas
completamente resueltas hay huecos ocupados por el tampón.

Aplicaciones:

Ha sido empleada en Química Clínica para la separación de las proteínas del suero
humano normal y patológico, péptidos como insulina, hemoglobinas normales y
patologías en un lapso de 3 a 5 minutos.

Separa pequeñas moléculas ionizadas, como nucleótidos, aminoácidos, vitaminas

y drogas iónicas. Puede proveer la CZE la separación de esteroisómeros y puede
esta técnica permitir la caracterización de drogas quirales y de sus metabolitos; se
emplean ciclodextrinas en lo buffer como aditivos. Los oligosacáridos cíclicos
poseen cavidades hidrofobicas en las cuales el anfolito puede estar en forma de
complejo huésped. La cavidad y la dimensión del grupo funcional, es la que permite
la enantioselectividad a la separación.

Con esta técnica se pueden separar iones inorgánicos, incorporando un ion que
absorbe un UV y los iones se detectan por la producción de una absorbancia
negativa, y producir picos negativos, se separan asi iones como S2O3=, Br, Cl, SO4,
NO2, N3, SCN, ClO3, BrO3, PO4-3.

ISOELECTROENFOQUE CAPILAR

En esta técnica los recipientes electrodicos se llenan uno con una solución básica y
otro con una solución acida. El capilar se llena con un anfolito que está constituido
por una mezcla de agregados moleculares obtenidos por la reacción de ácido
acrílico polietilen tetra o penta aminas que al paso de la corriente se ordena de
acuerdo a la atmosfera protónica que se obtiene.

Esta atmosfera iónicas de protones, reacciona con los grupos amino y carboxilos
generando zwitteriones, que delimitan un gradiente de pH estable y continuo. Los
péptidos y proteínas se desplazan y separan acorde al ámbito químico que permite
su desplazamiento hasta el valor del pH al igual a su pI. Los ambos los extremos
del pH del sistema anfolito pueden ser 3 9, subordinados a las características del
anfolito empleado. Al aplicar el campo en el capilar que contiene los solutos y el
anfolito, las proteínas cargadas migran hasta enfocarse, por lo que se encuentran
el ámbito de pH al igual a su punto isoeléctrico; estas bandas proteicas son muy
angostas porque la difusión a una zona de pH diferente resulta la generación de
cargas, y la subsecuente migración de vuelta a la zona apropiada. La corriente es
la que produce la migración de los iones, y cuando el sistema alcanza el estado
estacionario, no influye más corriente, una vez enfocadas las proteínas en el área
de los anfolitos, las soluciones son movilizadas y pasan a través del detector. La
FEO necesita ser reducida o eliminada, en las electroforesis capilares por
isoelectroenfoque, porque el flujo podría barrer los anfolitos del capilar, antes que
se complete el enfoque. La reducción de FEO puede ser obtenida usando un
cubrimiento dinámico o covalente; el primero es simple, pero es difícil obtener
reproductibilidad, pero son útiles para limitar la adsorción de las proteínas a la pared
capilar.

Aplicaciones de la electroforesis capilar por isoelectroenfoque:

Se ha empleado exitosamente para la medición del pI (punto isoeléctrico) de

proteínas y para lograr la separación de isomorfos. Es muy útil para la sepracion de
hemoglobinas e inmunoglobulinas.
ELECTROFORESIS CAPILAR EN GEL (CGE O ECG)

La separación de moléculas de gran tamaño y peso molecular ha requerido el

desarrollo de la electroforesis en gel. Esta separación tiende en especial a emplear
procedimientos y principios basados en el tamaño y empleando un primero que
actúa como tamiz molecular.

Aplicaciones:

Ha sido muy aplicada esta técnica a la resolución de proteínas y productos de

biología molecular (análisis de pureza de oligonucleótidos, terapia genética,
secuenciado de DNA y análisis de productos de PCR y de química forense).

ISOTACOFORESIS

En los compartimentos electrodicos se une una combinación de dos sistemas buffer,

para generar un estado en el cual todas las zonas separadas se muevan a igual
velocidad, por eso se llama iso (igual) y tachos (velocidad).

Aplicaciones de la isotacoforesis:

Los primeros trabajos fueron

realizados para separar aniones como
oxalato unitario; también se ha
aplicado a separación de purinas y
pririmidinas en suero. Se ha extendido
a la identificación y separación de
pequeñas moléculas de péptidos en fluido de pacientes urémicos o pueden ser
aplicados en electroforesis de zona, pero con una etapa de isotacoforesis, los ácidos
orgánicos como aniones de piruvato, citrato, malato, acetoacetato, en electroforesis
con capilares cubiertos con poliacrilamina lineal. También se ha aplicado
isotacoforesis para separar aminoácidos urinarios, previamente derivatizados con
opthaldialdiodo (OPA) y naftalina 2, 3-dicarboxaldehido. Los productos
derivatizados por CZE son detectados empleando por fluorescencia estimulada con
láser.

BIBLIOGRAFIA

1. Kostal V, Katzenmeyer J, Arriaga E. Capillary electro-phoresis in bioanalysis. Anal Chem 2008; 80:
4533-4550.

2. Franco T, Federica B, Jennifer P. Current role of capi-ary electrophoretic/electrokinetic

techniques in forensic toxicology. Anal Bioanal Chem 2007; 388: 1359-1364.

3. Yan X. Tutorial: Capillary electrophoresis. The chemical educator. 1996; 1 (2): 1-14.

4. Wätzig H, Günter S. Capillary electrophoresis. A high performance analytical separation

technique. Clin Chem Lab Med 2003; 41 (6): 724-738.

5. Suntornsuk L. Capillary electrophoresis in pharmaceuti-cal analysis a survey on recent

application. J Chromatogr Sci 2007; 45: 559-577.

6. Singh B. An overview of capillary electrophoresis: Pharmaceutical, biopharmaceutical and

biotechnology applications. J Pharm Educ Res 2011; 2 (2): 2-36.

7. electroforesis capilar citado 01 de octubre disponible en:

https://www.tesisenred.net/bitstream/handle/10803/284348