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iNFORME BIOQUÍMICA

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TITULACIÓN DE AMINOACIDOS

1. INTRODUCCION

Las proteínas son macromoléculas compuestas por unidades más pequeñas,


conocidas como aminoácidos.
En las proteínas se encuentran básicamente veinte aminoácidos diferentes, los cuales
contienen un grupo carboxilo (-COOH, acido débil) y un grupo amino (-+NH3, base
débil) unidos al mismo átomo de carbono (carbono α,carbono quiral).
Estos aminoácidos difieren unos de otros únicamente por la naturaleza de sus cadenas
laterales, o grupos R, que varían en estructura, tamaño, carga eléctrica y reactividad
química Todos los aminoácidos presentan al menos un grupo ácido (donador de
protones) y un grupo básico (aceptor de protones) que se ionizan cuando están en
solución, por lo que los aminoácidos pueden tener propiedades de acido y de base, es
decir son anfotéricos. Cada grupo tiene un pK, el cual corresponde al pH en el que se
encuentra la misma cantidad de la forma no ionizada que de la ionizada Los
aminoácidos tienen al menos dos pK, por lo que tienen mayor capacidad
amortiguadora, ya que presentan de tres a cuatro formas iónicas diferentes.
Cuando la forma iónica tiene una carga neta de cero (zwitterion), se dice que se
encuentra en su punto isoeléctrico o pi. Al variar el pH, cambia la proporción de las
formas iónicas y es posible ver la capacidad amortiguadora de los aminoácidos.
Cada aminoácido tiene sus propios pK, puesto que presenta diferentes sustituyentes
en sus cadenas laterales Determinar los puntos isoeléctricos de cada aminoácido
Reconocer cuando un aminoácido es diprotico y triprotico

2. OBJETIVOS

 Describir la estructura de un aminoácido


 Explicar las propiedades acido básicas de los aminoácidos
 Explicar la importancia de determinar el pK de un aminoácido
 Determinar en forma práctica los pK de un aminoácido, mediante el método titulación
por neutralización.
 Determinar los pK de un aminoácido mediante una titulación.
 Comparar los valores de los pK del aminoácido problema, obtenidos
experimentalmente, con los valores teóricos para su identificación.

3. MATERIALES Y REACTIVOS

 HCI (100mmol/L)
 OHNa (100mmol / L)
 Glicerina
 PHmetro
 Buretas
4. PROCEDIMIENTO

1. Tomar 10 ml de la solución del aminoácido que en este caso sería la


GLICINA.
2. Determinar el pH de la glicina
3. Agregar 2.20 ml de HCl 0.01 M a la solución de glicina y medir su pH, a
medida que se le vaya agregando el ácido, ya que este debe llegar a un
pH aproximado de 1.3.

4. Una vez lista la solución se debe comenzar con la titulación, para ello se
debe colocar en la bureta el Hidróxido de Sodio 0,01M que llegara a ser
el titulante.

5. Para titular la solución se debe ir dejando caer el hidróxido de sodio de


0,5 en 0,5 ml, hasta que la solución llegue a un pH aproximado de 12.5;
no se debe olvidar que se debe ir lavando los electrodos a medida que
se vaya realizando la titulación, es decir que para cada contacto con la
muestra estos deben estar lavados y secos ya que pueden causar algún
error en los datos.

6.

7. Una vez que se tengan todos los datos de la titulación se debe proceder
a realizar la gráfica para construir la curva de valoración y así conocer el
punto isoeléctrico del aminoácido que se tituló.l

6. CONCLUCIONES

Se realizó una curva de titulación por neutralización de un aminoácido problema, utilizando


para ello sus propiedades acido-base frente al NaOH y las lecturas de pH con el potenciómetro,
en la cual se establecieron los rangos posibles donde pudieran encontrarse los pK de éste
aminoácido, el cual, comparado con la literatura, fue identificado como glicina.

Los aminoácidos son compuestos orgánicos que contienen grupos amino y carboxilo y por
tanto poseen propiedades acidas y básicas

Son solido cristalinos, que son solubles en agua

7. OBSERVACIONES

Al aminoácido se le añade ácido clorhídrico hasta llegar a un ph de 1.5 para formar un


aminoácido protonado para poder calcular los valores de pka (valor de ph)

El pH metro con el que se realizó la titulación de aminoácidos no era muy sensible, esto
dificulto un poco el procedimiento de la práctica.
En la gráfica, a medida que aumenta el volumen de hidróxido de sodio aumenta el ph, pero no
es directamente proporcional, ya que, se va manteniendo constante luego aumenta y se
mantiene constante.

Las mesetas en la gráfica donde se mantienen constante, significan que la concentración del
ácido y la base conjugada son iguales.

8. CUESTIONARIO

1.- Explique en sus palabras cual es la importancia de determinar una


curva de

titulación de un aminoácido

La curva de titulación son las representaciones graficas de la variación del pH


durante la valoración, nos permiten estudiar los diferentes casos de valoración
como de ácidos y base débiles, nos ayuda a seleccionar el indicador adecuado,
determinar el intervalo de viraje y el punto de equivalencia

2.- Explique que es una inflexión en una curva de titulación

Una inflexión es una desviación de dirección, es un punto donde la meseta


constante, son puntos donde llegan a una solución amortiguadora. Gracias a
estos puntos se calcula el punto isoeléctrico el cual es un valor de pH, es un
punto de referencia para poder cargar el aminoácido Positiva-Negativa o Cero.

3.- Explique por qué los aminoácidos no son solubles en solventes

Orgánicos

Los aminoácidos son sólidos cristalinos solubles en H2O debido a que en


solución acuosa forman la estructura tipo zwiterión o ión bipolar o sal interna

4.- ¿En un pH acido, que grupo de aminoácido se encuentra no ionizado y


cual a un pH alcalino?

En un pH acido, el grupo carboxilo ocupa el exceso de iones de hidrogeno,


para volver de nuevo a la forma de ácido carboxílico.

Si el pH es alcalino se produce la liberación de un protón desde el ion NH3 +,


que toma la forma de NH2.

5.- ¿Qué es un sistema amortiguador?

Los amortiguadores son sistemas acuosos que tienden a resistir los cambios
de pH cuando se les agregan pequeñas cantidades de ácido, o base, consiste
de un ácido débil (dador de protones) y su base conjugada (aceptor de
protones.
Las soluciones amortiguadoras son aquellas soluciones cuya concentración de
hidrogeniones varía muy poco al añadirles ácidos o bases fuertes. Y tienen la
propiedad de mantener estable el pH de una disolución frente a la adición de
cantidades relativamente pequeñas de ácidos o bases fuertes

6.- ¿Cuáles son los principales sistemas amortiguadores en los seres


vivos?

Amortiguador bicarbonato (Tampón bicarbonato-Inorgánico):


mantenimiento del pH de la sangre.

Amortiguador fosfato (Tampón fosfato-Tampón fosfático): presenta una


acción mucho más fuerte que el bicarbonato en el medio interno de la celula

Amortiguador de proteínas

Amortiguador de hemoglobina

9. BIBLIOGRAFÍA

Wikipedia (internet) California. San Francisco 2001 (actualizado enero 2019)


citado 25 de julio 2019) disponible en:
https://es.m.wikipedia.org/wiki/Amino_ácidos

Alexander Gálvez, 2012: Los principales amortiguadores en el organismo


humano y su importancia en su función reguladora. Disponible en:
http://www.academia.edu/34932417/LOS_PRINCIPALES_AMORTIGUADORE
S_EN_EL_ORGANISMO_HUMANO_Y_SU_IMPORTANCIA_EN_SU_FUNCIO
N_REGULADORA

Wikipedia (internet) California. San Francisco 2001 (actualizado enero 2019)


citado 25 de julio 2019) disponible en:
https://es.m.wikipedia.org/wiki/Valoración_àcido-base

Wikipedia (internet) California. San Francisco 2001 (actualizado enero 2019)


citado 25 de julio 2019) disponible en: :
https://es.m.wikipedia.org/wiki/Zwitterión

Wikipedia (internet) California. San Francisco 2001 (actualizado enero 2019)


citado 25 de julio 2019) disponible en: :
https://es.m.wikipedia.org/wiki/Punto_isoeléctrico

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