UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE COAHUILA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL

Bioquímica general

Reporte de practica #1

Propiedades iónicas de los aminoácidos

(Determinación del valor de pK)

Equipo no.2

Integrantes
1. Jessica Mariana Fraire Tépox
2. Ana Gabriela Hernández Castañeda
3. Valeria Alejandra Dueñez Moreno
4. Michele Isabel Aguilera Onofre
5. Ana Lidia Arroyo Ruiz
6. Emanuel Delgado

Catedrático: Dra. Norma M De la Fuente Salcido

Torreón, Coah. 12/Febrero/2020

 Propiedades iónicas de los aminoácidos

I. Introducción

Se sabe que toda sustancia química puede ser sometida a un análisis para determinar las
concentraciones de iones hidrógeno presentes, se llamará ácido a la sustancia que en
soluciones acuosas libere iones hidrógeno y base aquella libere iones hidróxido. Los ácidos y
bases están presentes en todo momento, desde nuestros productos de limpieza y alimentos
e incluso en nuestro produciéndose en nuestro propio cuerpo por lo es muy importante
mantener un equilibrio entre estos para no ocasionar un deterioro celular, ahí es donde
radica su importancia para retomar este tema e incorporar el conocimiento experimental,
pero utilizando en esta ocasión compuestos orgánicos elementales para el cuerpo humano
como lo son los aminoácidos, específicamente la Lisina, siendo esta la sustancia con la que
se trabajó en esta ocasión.

Sabemos que los aminoácidos son compuestos que tienen un grupo carboxilo y uno amino
unido al carbono alfa, unido por otros enlaces con átomos de hidrogeno y cadenas
R, que le confieren características especiales a cada aminoácido. Las propiedades
iónicas de los aminoácidos también les confieren características acido-base a los mismos.
Poseen grupos ionizables (carboxilo y amino alfa) que, dependiendo del pH del medio que
los rodea y de su constante de disociación (pKa) (Nelson, D. & Cox, M., 2009, p. 59) pueden
comportarse como ácidos o como bases, entrando en un estado dipolar denominado
zwitterión cuando su carga neta es cero, dando como resultado un valor de pka igual al del
pH. Con el objetivo de determinar el punto isoeléctrico de un aminoácido, ubicar en curvas
de titulación las regiones que manifiestan presencia de formas iónicas y
determinar gráficamente valores de pk1 y pk2.

La titulación es el método que se usó para comprobar los valores que se analizaron y se
expondrán a continuación, la titulación determina la concentración de una solución especifica
de ácido o base. También utilizamos el potenciómetro, instrumento que nos permite realizar
mediciones más exactas del PH por métodos eléctricos. (Burns R. 2011), por lo general su
precisión es de 0.01 unidades de PH.
II. Objetivo general:

Determinar la constante de disociación de un aminoácido mediante el método de titulación

acido-base.

Objetivos específicos:

 Comprobar el pK del aminoácido (LYS) mediante la valoración acido-base.

 Conferir los productos de pK de del aminoácido determinado con los resultados
obtenidos.
 Instruirse en el método para uso del potenciómetro.

III. Generalidades:

Propiedades ácido-base de los aminoácidos

Los aminoácidos son compuestos nitrogenados que se

caracterizan por presentar un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-
COOH) unidos al mismo carbono. Estos dos grupos se pueden ionizar en
medio acuoso, siendo los responsables del anfoterismo de los
aminoácidos, es decir, pueden actuar como ácidos o como bases, en
función del pH del medio (los compuestos que son capaces de aceptar o ceder protones se
denominan anfóteros o anfolitos): el grupo α-carboxilo se comporta como un ácido débil y el
grupo amino, como una base débil. Por ello, la carga de los aminoácidos varía en función del
pH. Además, cinco de los aminoácidos proteinógenos presentan otro grupo ionizable en su
cadena lateral: Lys, Arg, His (aminoácidos con carga positiva o básicos), Asp y Glu
(Aminoácidos con carga negativa o ácidos).

La relación cuantitativa entre la concentración de un ácido débil (HA) y su base conjugada

(A-) viene definida por la ecuación de Henderson-Hasselbalch.
En el caso de los aminoácidos neutros, se establecen dos equilibrios en solución acuosa
entre tres formas iónicas distintas. Dichos equilibrios vienen determinados por las
constantes de equilibrio del grupo carboxilo (KC) y del grupo amino (KN):

Formas iónicas y equilibrios de los aminoácidos en función de pH del medio.

Al existir dos equilibrios, aparecen dos constantes de equilibrio distintas y tres especies
iónicas en solución.

Constante de equilibrio del grupo carboxilo (KC): relaciona las formas iónicas I & II y viene
definida por la siguiente ecuación.

Si se utiliza la fórmula de la ecuación de Henderson-Hasselbalch, entonces

Constante de equilibrio del grupo amino (KN): relaciona las formas iónicas II & III y viene
definida por la siguiente ecuación.

Si se utiliza la fórmula de la ecuación de Henderson-Hasselbalch, entonces:

Zwitterion o ion dipolar: se corresponde con la forma II, en la que el grupo -carboxilo y el
grupo amino están disociados, por lo que la carga neta del aminoácido es nula. A este pH, el
aminoácido no presentaría movilidad electroforética.

Punto isoeléctrico (pI): pH en que la carga neta del aminoácido es nula; en este punto el
aminoácido se encuentra en forma de ion dipolar, así como en pequeñas cantidades
equimolares de aniones y cationes y una pequeña fracción de aminoácido no ionizado.

El pH de los aminoácidos neutros se localiza a pH ≈ 6-8

 III. Metodología: Propiedades iónicas de los aminoácidos

Colocar 30 ml. De
aminoácido (lisina) en
un vaso de pp.

Preparar una Bureta con

solución de NaOH 3N.

Calibrar el potenciómetro Cuidar que el

con las sol. electrodo no tope en
Amortiguadores pH 4 y pH la agitación
7

Introducir el electrodo
en la solución de Agitar ligeramente.
aminoácido.

INICIAR TITULACION

SI
Repetir NO Resultados Anotar en la
proceso bitácora
 IV. Resultados:

Utilizando la Lisina (Lys, K) como aminoácido en la prueba, se obtuvo por medio del
potenciómetro, un pH de 9.28 que es ligeramente exacto a la información proporcionada
(9.2). Al iniciar con la titulación usando NaOH al .3 N y añadiendo .25 ml, se observó un
incremento en el valor del pH. Se prosiguió a seguir añadiendo mínimas cantidades de
NaOH. Al añadir 2 ml de sosa, se notó una aproximación al valor requerido (10.53) de 10.49.
Se determinó un rango de 2 - 2.2 ml para tener una lectura de pH exacta, ya que al añadir
más obteníamos valores de 10.58. A continuación se muestra una tabla representada por
una gráfica mostrando los datos mencionados.

Equivalencia del NaOH

Vol. de NaOH (ml) pH obtenido
0 9.28
0.25 10.07
2 10.49
2.1-2.2 10.53
2.3 10.58

DISCUSIÓN
 En la realización de la practica:

1. Para la realización de la practica utilizamos la lisina como aminoácido para encontrar

en su pka a partir del método de titulación.
2. Al realizar la titulación teníamos dudas al principio puesto que no teníamos muy en
claro hasta qué punto de pH de este aminoácido era el indicado para saber si el
aminoácido que analizábamos corresponde si era correcto o no a la lisina.
3. La muestra del pH inicial del aminoácido era de 9.2, fue lo que nos indicó el
potenciómetro.
4. Al comenzar a titular con NaOH, le agregamos 2ml de sosa a la muestra y obtuvimos
un pH muy elevado del que era indicado de este aminoácido, pero no había mucha
diferencia así que decidimos realizar un segundo análisis.
5. En el segundo análisis fuimos agregando de 0.5ml a la muestra para así obtener de
manera exacta el pH que correspondía
6. Obtuvimos un gasto de 2.2ml de NaOH para obtener el pka del aminoácido
correspondiente que es la lisina obteniendo un margen de error de .02 para que el
pka fuera más exacto.
7. Llegamos a pensar que para ser mas exactos debimos de haber agregado 2.18ml
para obtener el pka correspondiente
8. La práctica se realizó con mucho cuidado siguiendo las buenas prácticas de
laboratorio.
9. No tuvimos ningún percance y seguimos los pasos tal como se nos había indicado

Después de la práctica.

10. El aminoácido que se analizó debido a las características que posee, comentamos
que era un aminoácido que es fundamental para el organismo, pero no es producido
por nosotros, sino que tenemos que consumirlo y podemos encontrarlo en alimentos
tales como la carne y el pescado.
11. Además, debido a los resultados que obtuvimos observamos que este aminoácido
entra en la categoría como básicos ya que son hidrofílicos y tienen una carga neta
positiva a pH 7 ya que tiene un grupo amino primario adicional en la posición de su
cadena alifática.

CUESTIONARIO

1. ¿cuáles son los grupos funcionales del aminoácido que se neutralizan en la titulación
de un aminoácido?

El grupo amino, el grupo carboxilo y grupo r

2. ¿qué representa el PK de un grupo carboxilo o de un grupo amino?

El grupo a-carboxilo tiene un pka entre 1,8 y 2.5, mucho más bajo que el pka del ácido acético (pka
= 4.8). Esto se debe al efecto inductivo que ejerce el grupo amino que al estar protonado atrae
hacia si los electrones del grupo carboxilo favoreciendo la desprotonación del mismo. Para un
grupo carboxilo que tenga un pka de 2.0 la proporción de forma desprototonada a forma protonada
a pH 7 será de 100.000 a 1, es decir, a pH fisiológico la forma predominante es la de anión
carboxilato.

Para el grupo amino el valor de pka varía entre 8,7 y 10,7. Así para un grupo amino cuyo pka sea
de 10,0 la razón base/ácido será de 1/1000 a pH 7. Esto datos confirman el hecho de que la forma
predominante a pH neutro para los aminoácidos es la forma de zwitterion neutro.

3. Partiendo de la especie totalmente protonada, escriba las reacciones de disociación

que se presentan durante la titulación con una base fuerte, de los aminoácidos tirosina y
ácido glutámico.

Acido glutámico

4. Indique si los aminoácidos pueden usarse como amortiguadores y explique en qué

casos.

Si son buenos amortiguadores, ya que se puede definir el pk como el valor de pH de una solución
amortiguadora en el que el ácido y la base se encuentran a concentraciones equimoleculares o al
50% cada una. Son los sistemas encargados de mantener el pH de los medios biológicos dentro
de los valores compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realización de funciones
 bioquímicas y fisiológicas de las células, tejidos, órganos, aparatos y sistemas. Según su
naturaleza química, los amortiguadores se clasifican en orgánicos e inorgánicos y, así mismo,
atendiendo a su ubicación, se distribuyen en plasmáticos y tisulares.

5. ¿cuál es el fundamento del potenciómetro?

Un potenciómetro se basa en el mecanismo de una celda electroquímica, donde se involucran

iones h+ en la reacción química de la celda para determinar la concentración de estos iones en la
solución y, de esta manera, obtener el pH de la misma.

Cuando se desea medir el pH de una solución mediante la potenciometría se emplea un

potenciómetro y un electrodo; el primero es el dispositivo que determina el pH, mientras que el
segundo se basa en la combinación de un electrodo de referencia y otro de medición que es
sensible a los analitos. En este sentido, se forma un circuito por donde fluye la corriente eléctrica
entre los electrodos y la solución, donde estos ejercen la función de una batería cuando se
sumergen en la mencionada solución

De esta manera, el potenciómetro está diseñado con el fin de generar un voltaje igual a cero (en
unidades de mili voltios) cuando se tiene un pH igual a siete; es decir, neutro.

Asimismo, cuando se registra un incremento en los valores de potencial (con números positivos)
significa que se tienen valores menores de pH, y cuando se observa una disminución de estos —
es decir, un crecimiento hacia los números negativos— se habla de valores mayores de pH

VIII.- CONCLUSIONES.

Después de haber realizado esta práctica, y de haber analizado y realizado correctamente

cada uno de los procedimientos, podemos concluir:

1. Los aminoácidos pueden funcionar como ácidos y bases dependiendo del pH de su

medio, ya que sus grupos funcionales amino y carboxilo le permiten donar y recibir
protones.
2. La lisina es un aminoácido dicarboxílico o con carga negativa. Presenta carga
negativa a pH fisiológico, por lo que es muy polar.
3. El equilibrio entre las concentraciones de los dadores y aceptores de protones da un
resultado Pk igual al valor del pH de la solución.
 4. La lisina es un aminoácido esencial para los seres humanos, es necesaria para el
crecimiento. Es precursora de la carnitina. Presenta capacidad antioxidante y es
componente de las proteínas.

La cantidad correcta para haber obtenido un pH exacto de 10.53 debimos de haber

adicionado 2.18 ml de NaOH

Referencias bibliográficas

1. Stewart PA. Modern quantitative acid-base chemistry: applications in biology. Can J

Physiol Pharmacol 1983;61:1444-61.
2. Figge J, Mydosh T, Fencl V. Serum proteins and acid-base equilibria: a follow-up. J Lab
Clin Med 1992;120:713-9.
3. Calzavacca P, Licari E, Bellomo R. Renal Failure. En: Kellum JA, Elbers PWG (eds.).
Stewart's Textbook of Acid-Base (2.a ed.), 2009. Disponible en http://www.acidbase.org/

Discusión:

https://aminoacidos.top/lisina/
http://diarium.usal.es/vgnunez/files/2012/11/4.-Curvas-de-titulaci%C3%B3n-de-
aminoacidos.pdf
https://es.slideshare.net/DiegoGuzmanSilva/20161107-disociacin-de-aminocidos-pti-i

Cuestionario:
DAVID L. NELSON 2013 PRINCIPIOS DE BIOQUIMICA (P.P 60-90) EDITORA OMEGA
http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer3.htm
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/06%20pH%20AMORTIGUADORES.pdf