Dr Gene Mayer

Professor Emeritus
University of South Carolina School of Medicine

Traducido por :
Dr. en C. Paula Figueroa-Arredondo

INTRODUCTION

Definición

Los bacteriófagos (fagos) son parásitos intracelulares obligados que se multiplican al

interior de las bacterias, haciendo uso de algunas o todas sus maquinarias biosintéticas
(p. ej., los virus que infectan bacterias).

Existen muchas similaridades entre los bacteriófagos y los virus de células animales. Así,
los bacteriófagos pueden ser visualizados como sistemas modelo de los virus de células
animales. Además es necesario el conocimiento previo del ciclo de vida del bacteriófago
para entender uno de los mecanismos por los cuales los genes bacterianos pueden
transferirse de una bacteria a otra.

Alguna vez se pensó que el uso de los bacteriófagos podría ser una vía efectiva para tratar las
infecciones bacterianas, pero pronto se hizo aparente que los fagos son removidos rápidamente del
cuerpo así que resultaron de poco valor clínico. Sin embargo, los bacteriófagos son útiles en el
diagnóstico de laboratorio para la identificación de bacterias patógenas (fago-tipificación). Aunque la
fago-tipificación no se usa en el laboratorio clínico de rutina, sí se usa a en los laboratorios de
referencia con propósitos epidemiológicos. Recientemente, se ha desarrollado un nuevo interés en el
posible uso de los bacteriófagos para el tratamiento de infecciones bacterianas y en la profilaxis. De
manera que la decisión de si los bacteriófagos serán usados en la medicina clínica o no, aún está
por ser determinada.

COMPOSICIÓN Y ESTRUCTURA DEL BACTERIÓFAGO

Composición
Aunque diferentes bacteriófagos pueden contener diferentes materiales todos ellos
contienen ácido nucleico y proteína.

Dependiendo del fago, el ácido nucléico puede ser ya DNA o ya RNA pero no ambos y
puede existir en varias formas. Los ácidos nucléicos de los fagos a menudo contienen
bases raras o modificadas. Estas bases modificadas protegen a los ácidos nucleicos del
fago de las endonucleasas que cortan los ácidos nucléicos del huésped durante la
infección. El tamaño de los ácidos nucleicos varía dependiendo del fago. Los fagos más
simples solo tienen suficiente ácido nucleico para codificar un promedio de 3-5 productos
génicos, mientras que los fagos mas complejos, pueden codificar para mas de 100
productos génicos.
El número de proteínas de diferentes clases y la cantidad de cada una de ellas en la
partícula del fago variará dependiendo de la clase de fago que se trate. El fago mas
simple posee varias copias de solo una o dos diferentes proteínas, mientras que los mas
complejos podrían poseer muchos tipos de proteínas diferentes. La función de las
proteínas durante la infección es proteger al ácido nucleico de las nucleasas de su medio
ambiente.

Estructura
Los bacteriófagos vienen en muchas diferentes formas y tamaños. Las características
básicas estructurales de los bacteriófagos se ilustran en la Figura 1, la cual muestra al
fago denominado T4.

1. Tamaño - T4 está entre los fagos mas grandes, tiene aproximadamente 200 nm de
largo y 80-100 nm de ancho. Otros fagos son mas pequeños. La mayoría de los fagos
están entre un rango de 24-200 nm de longitud.

2. Cabeza o Cápside – Los fagos clásicos poseen una estructura a manera de cabeza y
pueden variar de tamaño y forma. Algunos son icosaédricos (20 caras) otros son
filamentosos. La cabeza o cápside está compuesta de muchas copias de una o más
proteínas diferentes. Al interior de la cabeza se encuentra el ácido nucleico. La cabeza
actúa como una cubierta protectora para el ácido nucleico.

3. Cola – Muchos, aunque no todos los fagos muestran una cola unida a la cabeza del
fago. La cola es un tubo hueco a través del cual el ácido nucleico pasa durante la
infección. El tamaño de la cola puede variar y algunos fagos ni siquiera la tienen. En los
fagos más complejos como T4, la cola se rodea de una cortina contráctil durante la
infección de la bacteria. Al extremo de la cola los fagos más complejos como T4
presentan una placa en la base y una o mas fibras unidas a ella. Esta placa de base y las
fibras de la cola están involucradas en la unión de los fagos a la célula bacteriana. No
todos los fagos tienen placas de base ni fibras de la cola, En tales casos existen otras
estructuras que se ven asociadas en la unión de partícula del fago a la bacteria.

INFECCIÓN DE LAS CÉLULAS HUÉSPED

Adsorción
El primer paso en el proceso de infección es la adsorción del fago a la célula bacteriana-
Este paso es reversible está mediado por las fibras de la cola o por alguna estructura
análoga en aquellos fagos que carecen de las mismas. Las fibras de la cola se unen a
receptores específicos en la célula bacteriana y la especificiad del huésped del fago (p.
ej., la bacteria que es capaz de infectar) se determina usualmente por el tipo de fibras de
la cola que un fago posee. La naturaleza del receptor bacteriano varía en las diferentes
bacterias. Los ejemplos incluyen proteínas sobre la superficie externa de la bacteria, LPS,
pili y lipoproteínas. Estos receptores están en la bacteria para otros propósitos y los fagos
han evolucionado de manera que son capaces de usar estos receptores para llevar a
cabo la infección.

Unión irreversible
La unión del fago con la bacteria vía las fibras de la cola es de naturaleza débil y es reversible. La
unión irreversible del fago con la bacteria está mediada por uno o mas componentes de la placa de
la base. Los fagos que carecen placas de la base tienen otras formas de unirse estrechamente a la
célula bacteriana.

Contracción de la cortina
La unión irreversible del fago a la bacteria da como resultado la contracción de la cortina
(para aquellos fagos que la presentan) y la fibra hueca que es la cola se ve empujada a
través de la envoltura bacteriana (Figure 2). Los fagos que no tienen cortinas contráctiles
usan otros mecanismos para introducir la partícula del fago al interior de la envoltura de
bacteriana. Algunos fagos tienen enzimas digetivas que degradan varios componentes de
la envoltura bacteriana.

Inyección del Ácido Nucleico

Cuando el fago ha logrado atravesar la envoltura bacteriana el ácido nucleico que se
encuentra en la cabeza pasa a través de la cola hueca y penetra la célula bacteriana.
Usualmente el único componente del fago que realmente penetra la célula es el ácido
nucleico. Los remanentes del fado permanecen en el exterior de la bacteria. Hay algunas
excepciones para esta regla. Esto es diferente de los virus animales, en los cuales la
mayoría de las partículas virales normalmente se introducen en la célula. Esta diferencia
se debe probablemente a la incapacidad de la bacteria para envolver a la bacteria a fin
de endocitar materiales

CICLO DE MULTIPLICACIÓN DEL FAGO

Fagos Líticos o Virulentos

Definición
Los fagos líticos o virulentos son fagos que solo pueden multiplicarse en bacterias y
matan a la célula debiso a la lisis al término del ciclo de vida.

Cíclo de replicación viral

El ciclo de vida de un fago lítico se ilustra en la Figura 3.

a. Periodo de eclipse – Durante la fase de eclipse las partículas de fago no infeccioso se

pueden encontrar ya sea en el interior o en el exterior de la célula bacteriana.
El ácido nucleico del fago se apodera de la maquinaria biosintéticas del huésped y se
elaboran los mRNAs y las proteínas fago específicas. Existe una expresión ordenada de
la síntesis macromolecular dirigida por el fago, tal como se observa en las infecciones por
virus animales. Los mRNAs tempranos codifican para las proteínas tempranas, las cuales
se necesitan para la síntesis del DNA de fagos y para apagar la biosíntesis del DNA, RNA
y proteínas del huésped. En algunos casos las proteínas tempranas literalmente
degradan el cromosoma del huésped. Luego de que el DNA del fago se sintetiza,
entonces los mRNAs y las proteínas tardías se fabrican. Las proteínas tardías son las
proteínas estructurales que conforman al fago, también son las proteínas necesarias para
causar la lisis de la célula bacteriana.

b. Fase de acumulación intracelular – En esta fase el ácido nucléico y las proteínas

estructurales de que están hechos, se ensamblan y las partículas infecciosas se
acumulan dentro de la célula.

c. Lisis y Fase de liberación – Después de un tiempo la bacteria empieza a sufrir lisis y

los fagos intracelulares se liberan al medio. El número de partículas liberadas por bacteria
infectada puede ser tan alto como 1000.

Ensayos para determiner fagos líticos.

Ensayo en placa
Los fagos líticos se cuentan mediante ensayos de formación de placas. Una placa se define como el
área clara que resulta de la lisis de bacterias (Figure 4). (Cada placa se origina de un solo fago
infeccioso). A la partícula infecciosa que da origen a la placa se le llama una unidad formadora de
placa (ufp o en inglés pfu).

Fago lisogénico o Temperado

Definición
Los fagos lisogénicos o temperados son aquellos que bien pueden multiplicarse via el
ciclo lítico o entran en un estado quiescente en la célula. En este estado quiescente la
mayoría de los genes del fago no se transcriben; el genoma del fago existe en un estado
reprimido. Al DNA del fago en este estado reprimido se le conoce como profago porque
no es un fago pero posee el potencial para producir fagos. En la mayoría de los casos el
DNA de fago realmente se integra en el cromosoma del huésped y se replica junto con el
cromosoma del huésped y se transmite a las células hijas. La célula que alberga un
profago no se ve negativamente afectada por la presencia del profago y el estado
lisogénico puede persistir indefinidamente. A la célula que alberga un profago se le
conoce como lisógena.

Eventos que conducen a la lisogenia

El fago prototipo: Lambda
a. Circularización del cromosoma del fago- El DNA de Lambda una molécula lineal de
doble cadena con pequeñas regiones de cadena sencilla en los extremos 5’. Estas
cadenas sencillas de los extremos son complementarias (extemos cohesivos) de
manera que pueden aparearse y producir una molécula circular. En la célula, los
extremos libres del círculo se pueden ligar para formar un círculo covalentemente cerrado
como se ilustra en la Figura 5.

b. Recombinación Sitio-específico – Un evento de recombinación catalizado por una

enzima codificada por el fago, ocurre entre un sitio particular en el DNA del fago
circularizado y un sitio particular en el cromosoma del huésped. El resultado es la
integración del DNA del fago en el cromosoma del huésped como se ilustra en la Figura
6.

c. Represion del genoma del fago – Una proteína codificada por el fago, la llamaremos
el represor es una proteína que presenta afinidad y se une con un sitio particular en el
DNA del fago que llamaremos el operador y apaga la transcripción de la mayoría de los
genes del fago, EXCEPTO la del gene que dá lugar al represor.

El resultado es un genoma del fago pero reprimido estable el cual está integrado dentro
del cromosoma de la célula huésped. Cada fago temperado solamente reprimirá la
expresión de su propio DNA y no la de otro fago, así que la represión es muy específica
(inmunidad a la superinfección con el mismo fago).

Eventos que conducen a la terminación de la Lisogenia

En cualquier momento en que la bacteria lisogénica quede expuesta a condiciones

adversas, el estado lisogénico puede ser terminado. Este proceso se le
llama inducción. Las condiciones que favorecen la terminación del estado lisogénico
incluyen: desecación, exposición al la luz UV o radiación ionizante, exposición a químicos
mutagénicos, etc. Las condiciones adversas que conducen a la producción de proteasas
(proteína recA) la cual destruye a la proteína llamada represor. Esto a su vez conduce a
la expresión de los genes del fago, al proceso inverso al proceso de integración, llamado
escisión y al proceso de multiplicación lítica.

Ciclo Lítico vs Ciclo Lisogénico

La decisión de lambda de entrar en el ciclo lítico o en el ciclo lisogénico cuando este

penetra en la célula inicialmente está determinada por la concentración dentro de la
célula, tanto del represor, como de otra proteína del fago llamada cro. La proteína cro del
fago, apaga la síntesis del represor y por lo tanto previene el establecimiento de la
lisogenia. Las condiciones ambientales que favorecen la producción de cro conducirán al
ciclo lítico mientras que aquellas que favorecen la producción del represor favorecerán la
lisogenia.

Importancia de la Lisogenia

a. Modelo de la transformación por virus animales – La lisogenia es un sistema

modelo para la transformación que llevan a cabo los virus de células animales.

b. Conversión Lisogénica – Cuando la célula está lisogenizada ocasionalmente hay

genes extra que el fago lleva y que se empiezan a expresar en la célula. Estos genes
pueden cambiar las propiedades en la célula. Estos genes pueden cambiar las
propiedades de la célula bacteriana. Este proceso se le llama conversión lisogénica o
conversión por fago. Esto puede tener importancia clínica, por ej. Se ha demostrado que
los fagos lisogénicos llevan genes que pueden modificar al antígeno O de Salmonella, el
cual es uno de los antígenos principales ante los cuales está dirigida la respuesta
inmune. La producción de toxina por Corynebacterium diphtheriae está mediada por un
gen que es acarreado por un fago. Solo aquellas cepas que se han convertido por
lisogenia son patógenos.

https://www.microbiologybook.org/Spanish/chapter7.htm