Artículo de Biología Celular y Molecular N°1.

Presentado el 12 de Octubre de 2016 – Grupo 03A

ACCIÓN ENZIMÁTICA. PRÁCTICA #6

José Javier Doria, Amalfi Peralta, José Paternina

Universidad de Córdoba
Facultad de Ciencias Agrícolas
Ingeniería Agronómica
Montería
2016

Presentado a: Gabriel Montes Fuentes *

Docente Biología Celular y Molecular. Universidad de Córdoba

RESUMEN: Durante la práctica se trató de poner de manifiesto alguno de los factores que
afectan la actividad enzimática.

Palabras Clave: Proteínas, enzimas, sustratos, reactivos, temperatura, catalasa.

1. OBJETIVOS Durante la práctica se tratará de poner de

manifiesto alguno de los factores que
• Interpretar con claridad los mecanismos afectan la actividad enzimática.
subyacentes de la acción enzimática sobre
sustratos específicos. 3. MARCO TEÓRICO
• Analizar los mecanismos subyacentes de
la actividad de la catalasa en tejido animal Las enzimas son moléculas de proteínas que
y vegetal. tienen la capacidad de facilitar y acelerar las
reacciones químicas que tienen lugar en los
tejidos vivos, disminuyendo el nivel de la
2. INTRODUCCIÓN "energía de activación" propia de la reacción. A
diferencia de los catalizadores químicos, las
Las enzimas son proteínas globulares enzimas actúan en condiciones muy suaves, a
formadas por una o más cadenas temperaturas por debajo de los 70°C, a un PH
polipeptídicas. Aceleran la velocidad de alrededor de 7 y a una presión de una atmosfera.
las reacciones químicas, participando en Las enzimas son generalmente proteínas
su mecanismo pero sin sufrir un cambio globulares que pueden presentar tamaños muy
químico permanente. También influyen variables, desde 62 aminoácidos como en el caso
sobre el rendimiento, ya que aseguran que del monómero dela 4-oxalocrotonato
todo el reactivo se transforme en producto tautomerasa, hasta los 2.500 presentes en la
y que no aparezcan productos sintasa de ácidos grasos. Las actividades de las
secundarios. Las enzimas actúan sobre enzimas vienen determinadas por su estructura
sustancias llamadas sustratos, que es la tridimensional, la cual viene a su vez determinada
molécula que se va a transformar, son por la secuencia de aminoácidos
altamente específicas, variando su
actividad con la modificación del pH, la
temperatura, concentraciones de enzima y 4. MATERIALES Y METODOS
sustrato; estas pueden ser inhibidas por
sustancias llamadas venenos enzimáticos. Materiales:
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• Tubos de ensayo • Gotero

• Pinzas para tubos de ensayo • Pipetas de 5 ml
• Solución de almidón al 1% • Pera de succión
• Saliva • Guantes quirúrgicos
• Solución de lugol • Cinta de enmascarar
• Reactivo de Benedict • Papa
• Pastillas de cuajo (renina) •Agua oxigenada (peróxido de hidrogeno)
• Ácido clorhídrico al 10% y concentrado • Trozo de hígado
• 30 ml de leche • Hojas de afeitar
• Zanahoria

Métodos +
Calentar x 3 min.
Actividad de la Amilasa

a) Acción de la Renina

2 ml de saliva

5ml de leche 5ml de

leche
+ +
2 gotas 10 gotas 2 gotas de lugol 10 gotas de renina
+
10 gotas de renina

4ml de Almidón 4ml de Almidón

+ + Acción de la Catalasa
6 gotas de Benedict 2 gotas de lugol
+
Calentar x 3 minutos Papa
Zanahoria
Hígado
b)

2ml de saliva + 5 gotas de Hcl 5. DATOS OBTENIDOS

Prueba a los
5minutos
Tubo N° Enzima lugol benedict
2 gotas 10 gotas (amilasa
)
1 Activa positivo
2 negativo
4ml de Almidón 4ml de Almidón 3 Inactiva positivo
+ + 4 positivo
6 gotas de Benedict 2 gotas de lugol
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una disolución de HCl 1 M da un pH de

Descripción de 0. 
Tubo N° observaciones
1(leche + renina) La reacción fue El clorhídrico se utiliza sobre todo como
más rápida y más ácido barato fuerte y volátil. El uso más
intensa que la del conocido es el de desincrustante para
tubo 2 eliminar residuos de caliza (carbonato
2(leche + renina + La reacción fue cálcico: CaCO3). En esta aplicación se
HCL al 100%) más lenta menos transforma el carbonato cálcico en cloruro
intensa que la del cálcico más soluble y se liberan dióxido
tubo 1 de carbono (CO2) y agua

6.5. ¿Cuál es el efecto del

6. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE ácido clorhídrico sobre la catalasa?
RESULTADO.
Al aplicar el ácido clorhídrico en la
6.1. ¿En qué tubo se muestra catalasa, hubo una disminución de
la actividad de la enzima de la velocidad de las reacciones.
saliva? ¿Cómo lo has demostrado?
En el tubo 2, donde la saliva a pesar de 6.6. Al cocinar los alimentos
ser combinada con el reactivo de lugol demasiado ¿Cómo influye en la
sigue teniendo un control dominante actividad de las enzimas?
sobre esta sustancia.
La temperatura influye mucho en la
6.2. ¿en qué tubo se ha desnaturalización de proteínas (enzimas).
inactivado la enzima? ¿por qué no En las enzimas un aumento de
ha actuado? temperatura provoca un aumento en la
En el tubo N°4 donde la coloración fue velocidad de reacción hasta una cierta
más intensa dando un color positivo de temperatura óptima. Cada enzima tiene un
color más oscuro al agregarle el reactivo intervalo óptimo de temperatura en el cual
de Benedict. se logra mayor actividad enzimática, la
mayoría de las enzimas tiene su
6.3. ¿Por qué se hace temperatura óptima entre 30 y 45° y se
necesario esperar cinco minutos inactiva a mayor de los 55°C. 
para observar los resultados?
Se debe esperar 5 minutos para que el Así que cuando calientas demasiado los
reactivo surja efecto en la reacción. alimentos puede que la enzima inactive, o
puede que acelere aumente la velocidad
6.4. Cuál es la función del de reacción. 
HCL en esta reacción.
Es muy corrosivo y ácido. Se emplea Cuando mayor es la temperatura mayor es
comúnmente como reactivo químico y se la velocidad de reacción y la actividad
trata de un ácido fuerte que se disocia enzimática. La velocidad de reacción
completamente en disolución acuosa. Una aumenta debido a que hay más moléculas
disolución concentrada de ácido con la energía suficiente para entrar al
clorhídrico tiene un pH de menos de 1; estado de transición. 
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6.7. Cuando el H2O2 es

agregado a heridas produce
burbujas ¿Qué indica esto?

El peróxido de hidrogeno, H2O2, Es un

líquido oxidante, que al entrar en contacto
con materia orgánica, se reduce a agua
común liberando oxígeno, que es lo que
mata a las bacterias.

7. PREGUNTAS
COMPLEMENTARIAS.

7.1 ¿Qué cambios puede sufrir, en

relación a la estructura químicas y
el número inicial de moléculas, de
sustrato y la enzima en una
reacción química?
R: // El sustrato tiende a disminuir su
concentración ya que es modificado por la
enzima, esta suele permanecer constante
ya que solo actúa como catalizador. El
número de enzimas permanece igual, lo
que hace que la enzima es acelerar la
velocidad en la que el sustrato se vuelve
producto, así que el sustrato disminuye
hasta llegar a un equilibrio

7.2 Relacione los siguientes conceptos

en un párrafo de no más de diez
renglones: enzima alostérica,
interacción alostérica y efector
alostérico.

La interacción alostérica consiste en el

cambio estructural de una proteína, es
decir, sus receptores cambian las enzimas
alostéricas poseen dos sitios activos en el
primero se unirá un sustrato determinado,
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mientras que en el segundo también se evidencia con la producción de

conocido como sitio alostérico, se une un burbujas. Por otra parte la catalasa
factor el cual produce un cambio en la funciona correctamente, debe tener un pH
proteína, llevándolos a una regulación de neutro y a temperatura ambiente, sin
actividad de estos. Los factores pueden embargo, al disminuir la temperatura, los
ser tanto negativos como positivos. En choques entre las moléculas disminuyen
caso de los positivos, favorecen la entrada también.
de sustrato, en cambio el factor negativo
modifica la estructura de la proteína, de la
forma que el sustrato no pueda unirse al 8. BIBLIOGRAFIA
sitio activo de este.
Lehninger. Principios de bioquímica
7.3 Cite cinco ejemplos de enzimas con (2006) David L. Nelson; Michael M. Cox.
sus sustratos respectivos. 4ª Edición. Ediciones Omega. Principios
de Bioquímica (2001) Albert L.
1. Maltasa hidroliza la maltosa (sustrato)
en dos unidades de glucosa (producto)  Lehninger, David L. Nelson; Michael M.
Hidrolizar: romper enlaces con Cox. (1997) (2ª y 3ª edición). Ediciones
participación del agua  Omega.
Por lo tanto la Maltasa es una hidrolasa,
se encuentra en el intestino delgado.  Matthew C.K., Van Holde K.E. y Ahern,
2. Amilasa (hidrolasa): la alfa amilasa K.G. (2002) Bioquímica 3ª edición. Ed.
actúa sobre los enlaces de las unidades de Addison Wesley. Bioquímica (1989)
glucosa que componen el almidón.  Rawn, J.D. Interamericana McGraw-Hill
Sustrato el almidón -------> unidades (1º y 2º volúmenes)
libres de glucosa 
Stryer, L. (2002 3ª edición. Ed. Reverté.
3. Catalasa es una oxidasa  Fersht, A. (1985) Enzyme structure and
descompone el peróxido de hidrógeno en Mechanism. W. H. Freeman and
agua y oxígeno  Company, New York.
2 H2O2 ----------> 2H2O + O2 
Se encuentra en los glóbulos rojos  Jenks, W.P. (1987) Catalysis in
Chemistry and Enzymology. Dover
4. Fosforilasas enzimas que agregan Publications Inc. New York. Christensen,
grupos fosfato a una molécula  H.N. y Palmer, G.A. (1980) Cinética
ADP + Pi + energía -------> ATP  enzimática. Ed. Reverté. Barcelona.

5. Lipasas rompen enlaces ésteres 

grasas --------> ácidos grasos + glicerol

8 CONCLUSIÓN

Del análisis de los resultados de

laboratorio se pudo determinar que la
temperatura es un factor determinante en
las reacciones enzimáticas, porque acelera
o retarda la acción de las enzimas, lo que