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Practica de Laboratorio 2

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Facultad de Ciencias Naturales

Laboratorio de Biología Celular

Alumno: Andrea Angulo. Código: A00294596

Laboratorio 3: Transporte a través de Membranas

OBJETIVOS:

1. Entender las propiedades osmóticas de la membrana plasmática en células


animales y vegetales
2. Identificar los diferentes tipos de transporte a través de la membrana
plasmática.
3. Observar y explicar los efectos que tiene la concentración de solutos del
medio extracelular en la célula animal.
4. Hacer extendidos de sangre con muestras que han sido expuestas a un medio
hipertónico, hipotónico o isotónico.
5. Observar y entender el proceso de plasmólisis en la planta acuática Elodea

INTRODUCCIÓN

La membrana plasmática es una de las estructuras de la célula que no es visible con el


microscopio óptico. Es tan delgada que solo se pudo obtener imágenes de ella hasta finales
de los años 50, con el uso combinado del microscopio electrónico y técnicas de tinción.

La membrana plasmática encierra el contenido de toda la célula, no obstante no es la única


membrana existente en la célula, al interior de esta, los organelos se encuentran delimitados
por membranas. Todas estas membranas tienen funciones en común, entre ellas, proveer
una barrera con permeabilidad selectiva y con capacidad de transportar determinados
solutos de un lado a otro de la membrana, a veces en contra del gradiente de concentración.

El movimiento de sustancias a través de las membranas se puede clasificar en dos tipos


básicos: mecanismos de Transporte Pasivo, que ocurren por difusión (a favor de un
gradiente de concentración) y mecanismos de Transporte Activo, que ocurren gracias a un
gasto energético.

Los tres tipos básicos de transporte pasivo son:


Difusión simple a través de la membrana lipídica
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Difusión simple por un canal proteico acuoso
Difusión facilitada por un transportador proteico.

Tres ejemplos de transporte a través de la membrana plasmática que incurren en un gasto


energético son:

Endocitosis
Exocitosis
Transporte Activo

La endocitosis y la exocitosis son procesos que involucran un gran número de proteínas


encargadas de armar el mecanismo por el cual se genera una vesícula a partir de la
membrana plasmática (endocitosis) o se funciona una vesícula interna con la membrana
plasmática (exocitosis). El transporte activo por el contrario requiere solo una proteína,
llamada una “bomba”, la cual transporta sustancias en contra del gradiente de
concentración. La energía requerida para este tipo de transporte se obtiene gracias a
procesos exergónicos como la hidrólisis de ATP.

Osmosis

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La Osmosis (un tipo de transporte pasivo), es el proceso mediante el cual el agua se mueve
a través de las membranas celulares de una región de menor concentración de solutos, a
una de mayor concentración de los mismos.

Tomando como referencia la concentración del citoplasma, la concentración de un medio


extracelular puede ser:

Isotónico: cuando la concentración de los fluidos extracelulares e intracelulares son


iguales.
Hipertónico: cuando la concentración del fluido extracelular es mayor a la
concentración del fluido intracelular.
Hipotónico: cuando la concentración del fluido extracelular es menor a la
concentración del fluido intracelular.

Las células vegetales casi siempre están expuestas a medios acuosos y por lo tanto
hipotónicos. Es así como se genera una presión interna llamada “turgencia” generada por
la tendencia del agua a entrar a la célula y la resistencia de la pared celular en contra de la
expansión de la membrana plasmática. La presión de turgencia provee el soporte a las
estructuras vegetales no leñosas como las hojas.

Las células animales, por el contrario, casi siempre se encuentran expuestas a medios
isotónicos. Una importante excepción son las células que recubren la pared del intestino y
las que conforman los túbulos colectores del riñón. Estas células están encargadas de
reabsorber agua desde el lumen de los conductos (intestinal o renal) hacia el cuerpo.
Muchas de estas células que quedan expuestas a medios hipotónicos son más permeables al
agua de lo que podría explicarse por difusión simple a través de la bicapa lipídica. Esto se
debe a la presencia de canales de agua, llamados “acuaporinas”, cuya existencia fue
comprobada por el investigador Peter Agre quien ganó el premio Nobel de Química en el
2003 por elucidar la estructura de estos canales.

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ACTIVIDAD 1. SIMULACIÓN DE LOS CANALES DE MEMBRANA

Ingrese en el siguiente link

https://phet.colorado.edu/sims/cheerpj/membrane-channels/latest/membrane-
channels.html?simulation=membrane-channels&locale=es

Van a encontrar un simulador de canales de membrana, por favor considere la parte de


arriba como el espacio extracelular y la parte de abajo como el espacio intracelular

PREGUNTA 1: ¿Qué otro nombre se le puede dar a los “canales de pérdida” y “canales
controlados” que están disponibles en la simulación?
 Canales de pérdida: Estos canales son proteínas que permiten el paso libre de
iones o de agua (poros).
 Canales controlados: Hace referencia a los canales proteicos activados por ligando
(se abren y se cierran por compuertas). 

PREGUNTA 2: A nivel celular ¿De qué depende que un “canal controlado” se abra o se
cierre?
 De su activación química a través del ligando al cual sea afín.

Simulación # 1

1. Introduzca 30 círculos verdes en el espacio extracelular que en este caso


simbolizarán moléculas de glucosa
2. Active la opción “Mostrar concentraciones”
3. Coloque 2 “canales de pérdida” en la membrana

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4. Acelere la velocidad de la simulación al máximo y espere un tiempo de 2 minutos

PREGUNTA 3: ¿Qué pasa con las concentraciones de la molécula, tanto en el espacio


extracelular como en el espacio intracelular después de transcurrido el tiempo?
 Las concentraciones se igualan.

PREGUNTA 4: ¿Qué fenómeno celular estaría ocurriendo en este caso?


 Difusión simple, ya que el medio extracelular estaba hipertónico y luego pasó a ser
isotónico.

PREGUNTA 5: ¿Estos canales podrían transportar otro tipo de molécula?


 No, ya que al intentar poner un canal de perdida color azul, no genera la opcion del
transporte a través de la membrana, ya que este canal solo permite el paso de un tipo
de molécula específica (color verde).

Simulación #2

1. Introduzca 20 rombos azules en el espacio intracelular los cuales en este caso


simbolizarán iones de calcio Ca+ provenientes de una cascada de señalización
celular
2. Active la opción “Mostrar concentraciones”
3. Coloque 2 “canales controlados” azules y 2 verdes en la membrana
4. Acelere la velocidad de la simulación al máximo
5. Abra los canales verdes
6. Ahora abra los canales azules

PREGUNTA 6: ¿Qué sucede y por qué se puede explicar?


 Al abrir los canales verdes no sucede nada ya que estos no son afines a las
moléculas que se encuentran al interior de la células, por lo tanto no permitirán ni la
salida ni la entrada de esto, en cambio los canales azules si se da el transporte intra y
extracelular de las moléculas de Ca en la célula.

PREGUNTA 7: ¿Qué sucede con los iones de calcio? ¿A nivel celular cuál es el estímulo
que hace que se abran este tipo de canales específicos?
 Los iones de calcio activan los canales proteicos activados por el voltaje ya que 
funcionan como medio de señalización intracelular que provoca una cascada de
señalización que busca igualar las concentraciones eléctricas tanto dentro como
fuera de la célula.

PREGUNTA 8: ¿Por qué se usan “canales controlados” y no “canales de pérdida”?


 Para controlar la salida de los iones Ca y se de la salida y entrada de iones de la
manera en que la célula logre regular las concentraciones electroquímica del ion y
mantenerse en condiciones ideales.

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Simulación #3

1. Para esta simulación los círculos verdes serán un soluto como por ejemplo sal
(NaCl) y los rombos azules representarán moléculas de agua (H2O)
2. En el espacio extracelular introduzca 20 círculos verdes y 20 rombos azules
3. En el espacio intracelular introduzca 40 rombos azules
4. Agregue 2 “canales controlados” verdes y 2 “canales controlados” azules
Nota: Para efectos de esta simulación los “canales controlados” azules van a representar
poros por donde pasa el agua
5. Abra ambos canales al mismo tiempo
6. Acelere la velocidad de la simulación al máximo y deje pasar 2 minutos

PREGUNTA 9: ¿Hacia dónde se mueven las moléculas de soluto y hacia dónde se mueve
el agua? ¿Por qué?
 Las moléculas de agua se desplazan hacia medio extracelular y las moléculas de
soluto se desplazan hacia el interior de la célula. Esto se explica porque los
gradientes de concentración del agua y del soluto son distintos en ambos medios así
que ellos se van a mover a favor de su gradiente de concentración. 

PREGUNTA 10: ¿En qué tipo de medio se encuentra la célula de la simulación?


 Al inicio se encontraba en un medio hipertónico ya que había menor cantidad de
soluto en el fluido intracelular, sin embargo al final, es isotónico ya que la
concentración tanto del soluto como del agua se balancean.

ACTIVIDAD 2. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

PREGUNTA 11: ¿Las siguientes son células vegetales, indique en qué tipo de medio se
encuentra cada una?

Hipertónico Isotónico Hipotonico

PREGUNTA 12: ¿Qué estructura evita que la célula se explote? 


 La membrana celular.

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PREGUNTA 13: ¿Cómo se llama la presión que la pared celular ejerce en contra de la 
presión del agua moviéndose por ósmosis?
 La presión osmótica.

PREGUNTA 14: Cuando una célula se encuentra en un medio isotónico ¿Significa que
todos los canales están cerrados? Explique
 No. No se cierran sino que están en equilibrio. Es decir, mientras el agua entra, otro
poco de agua sale, lo que hace que las concentraciones permanezcan constantes y
parezca que nada se mueve, pero en realidad es un equilibrio de entrada y salida de
agua, en la que los canales siguen funcionando para seguir manteniendo este
equilibrio.

ACTIVIDAD 3. EXPERIMENTOS EN CASA

Para dar un entendimiento mayor a los fenómenos relacionados con el transporte a través de
membrana y la osmosis se proponen los siguientes experimentos de realización casera. Por
pareja deben escoger uno de los experimentos y seguir las indicaciones tal cual se
proponen. Una vez realizado el experimento deben presentar los resultados obtenidos
incluyendo registro fotográfico y una pequeña discusión. EN ESTO ÚLTIMO DEBEN
REALIZAR UNA COMPOSICIÓN DE MÁXIMO 300 PALABRAS.

EXPERIMENTO 1

Materiales necesarios: Un vaso de vidrio, vinagre blanco, un huevo crudo, azúcar, un


pedazo pequeño de plástico, un resorte de plástico y agua

Procedimiento:
1. Coloque el huevo en el vaso de vidrio
2. Añada el vinagre en el vaso hasta cubrir por completo el huevo. Tape el vaso con el
plástico, el cual debe hacerle dos pequeños agujeros con una aguja
3. Deje el vaso sin moverlo por dos días. Observe que sucede. Anote claramente sus
observaciones pues son parte de los resultados
4. Vacié cuidadosamente el vaso y examiné el huevo. Anote de nuevo sus
observaciones
5. Ahora bien, añada de nuevo el huevo al vaso y agregue una solución de azúcar
sobresaturada, cubriendo completamente el huevo
6. Deje el frasco sin moverlo por dos días, y anote de nuevo sus observaciones.

 ¿Cómo cambió el tamaño del huevo cuando se puso en vinagre? ¿Qué explicación
puede dar?
 ¿Cómo cambió el tamaño del huevo cuando se puso en la solución con azúcar?
¿Qué explicación puede dar?
 ¿Qué pasó con la cáscara del huevo al agregarle el vinagre? ¿Qué explicación puede
dar?

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EXPERIMENTO 2

Materiales necesarios: Tres vasos plásticos, Bisturí o cuchillo de cocina, cinta de papel,
marcador, papas medianas, sal, clips, agua y colorante vegetal azul

Procedimiento:
1. Marcar uno de los recipientes como solución insaturada, el segundo como solución
saturada y el tercero como solución sobresaturada
2. En cada vaso añadir agua del grifo hasta la mitad y en añadir las siguientes
cantidades de sal:
 Insaturada: No añadir sal
 Saturada: Añadir paulatinamente sal y revolver constantemente hasta que
se disuelva por completo
 Sobresaturada: Añadir paulatinamente sal y revolver constantemente hasta
que ya no se pueda disolver más. Dejar que se acumule sal en el fondo del
vaso
 Nota: A cada vaso añadir una gota de colorante vegetal azul

3. Con el cuchillo de cocina obtener tres cilindros de papa, procurando que tengan el
mismo tamaño
4. Extiende un clip e introdúcelo por uno de los extremos del cilindro de papa,
cuidando que atraviese la papa en línea recta hasta llegar al otro extremo. Hacer esto
con cada uno de los cilindros de papa
5. Introduce un cilindro de papa en cada vaso marcado
6. Sumergir cada un cilindro de papa en cada vaso marcado y dejar transcurrir 10
minutos
7. A los 10 minutos tomar anotaciones sobre el aspecto del cilindro y pesarlo. Anote
sus observaciones y los pesos en una tabla diseñada por usted
8. Repita el procedimiento anterior cada 10 minutos durante una hora y anote los
cambios en forma, coloración y pesado de cada cilindro de papa en cada solución

Preguntas para orientar la discusión:

 ¿A qué se deben las variaciones de la masa de la papa en las diferentes


concentraciones?

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 ¿Qué diferencias notaste en la coloración de los tres cilindros de papa en
cada concentración?
 Explica cómo se realizó el proceso de osmosis en la papa
 Qué conclusiones puede obtener de los datos obtenidos en la tabla

Información complementaria

https://es.khanacademy.org/science/biology/membranes-and-transport

Lecturas previas

Capítulo 1 y 4, “Biología Celular y Molecular” de G. Karp. 5 edición.

Elaborada por: Juliana Chaura y Sebastián Escobar

Fecha: Agosto de 2020

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