UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE

SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

Escuela profesional de Farmacia y Bioquímica

Informe N° 2- Técnicas para el estudio de las células

Asignatura:

Biología celular

Docenter:

RUIZ QUIROZ, Julio Reynaldo

Integrantes:

COTRINA CARMENES, Katiuska Elaine

TADEO PORTERO, Roberto Carlos

PAJUELO CERVANTES, Sheyla Sofía

CHAPOÑAN RIOJAS, Dania

TRUJILLO CAQUI, Renzo Giusepe

Lima, Perú

2020

TÉCNICAS PARA EL ESTUDIO DE LAS CÉLULAS

OBJETIVOS
 ● Conocer y aplicar las principales técnicas de estudio de células.
● Observar e identificar las características de células presentes en diferentes muestras biológicas (agua
estancada, hojas de plantas, sangre humana y placa dental).

DIAGRAMA DE FLUJO

Diagrama experimento 1:

Diagrama experimento 2:
Diagrama experimento 3:
Diagrama experimento 4:
 RESULTADOS Y DISCUSIONES

RESULTADOS

Se observó el video “MICROORGANISMOS EN UN CHARCO”, en este se recolectó en un frasco agua estancada,

una parte gelatinosa con platina color verde, así como el agua y tierra del charco. En el laboratorio, se coloca
una cantidad minúscula de masa verdosa con agua y tierra en portaobjetos y se llevan bajo el microscopio
pudiendo observar en el primero cianobacterias y en el segundo protozoos, amebas y algas diatomeas.
El experimento 2 se divide en 3 partes, en la primera se pone bajo la mira del microscopio a el catáfilo de la
cebolla, este se da de 2 maneras. En la primera se utiliza una sustancia salina para montar el catafilo y en el
portaobjetos. Ya en el microscopio se se observa a 3 aumentos (4X, 10X, y 40X) en los cuales va cambiando
básicamente la proximidad y nitidez con la cual se ven las estructuras del catafilo. En la segunda se realiza el
procedimiento de manera similar pero a esta muestra se le aplica tinción con lugol que ayudará más que todo
a obtener una mejor visualizar del núcleo de esta misma.

La segunda parte consistía en visualizar las células de corcho obtenidas de la parte interna de este mismo,
colocar 1 gota de agua, montar en el portaobjetos y posteriormente colocarlo bajo el microscopio. En este
caso solo se observaron en 2 aumentos que son 4X y 10X dando como resultado las imágenes en las que se
observan las células en forma de una malla, en la segunda se distinguen con mayor claridad estas células de
forma hexagonal y/o pentagonales.

Esta es la última parte del experimento 2. Aquí se aprecia el sencillo montaje de una capa muy delgada de
tomate, se coloca en el portaobjetos junto al cubreobjetos y se lleva al microscopio donde se podrán observar
las células del tomate así como los cromoplastos que contienen licopeno y le dan esa coloración roja al
tomate.
En este tercer experimento se utiliza un “nuevo” método de tinción para nosotros que la tinción de Giemsa
(Azul de metileno y Eosina) que permite distinguir diversas estructuras (se basa en teñir dependiendo de su
afinidad por componentes básicos (Azul o violeta), ácidos (Rosa) o mezcla de ambos). Primero se realiza la
extensión sanguínea, luego se fijará con metanol y el colorante de giemsa lo que permitirá observar la tinción
en un

En este último experimento, se buscó visualizar a bacterias del sarro dentario con la ayuda del microscopio.
Para esto se recolectó sarro de los dientes realizando un raspado con mondadientes, que posteriormente se
colocarían en un portaobjetos con una gota de solución salina, se realizaría el frotis, se dejaría secar, se
enjuaga y luego se realizaría tinción con colorante (Azul de metileno, safranina o cristal violeta). Finalmente se
coloca bajo el microscopio con un objetivo de 100X y una gota de aceite de inmersión y se visualiza el
movimiento browniano de bacilos inmóviles así como bacterias móviles.

DISCUSIÓN

1. Según el estudio realizado por Marchand, para una correcta recolección, transporte, almacenamiento
y un posterior análisis de la muestra a estudiar es recomendable seguir los lineamientos del Standard
Methods For The Examination Of Water And Wastewater de la APHA para los primeros puntos con el
objetivo de obtener una muestra en correctas condiciones en el estudio. Durante la recolección se
utiliza frascos con rosca y estériles, y con precinto para evitar la más mínima adulteración de la
muestra, y el llenado y la contención de la muestra en el frasco debe de darse con todas las medidas
de bioseguridad. Durante el traslado es necesario colocar el frasco, con la muestra contenida, en una
caja térmica a una baja temperatura con él con fin de conservarla. Por el contrario, durante la práctica
realizada no se efectuó una correcta extracción y almacenamiento de la muestra ,para un posterior
estudio.(1)
 2. Según estudios realizados por Scott, Hammer, Baker y Bowler en el estudio microscópico electrónico
de la epidermis de la Allium Cepa. El empleo del microtomo ayuda mucho en la observación
microscópica ya nos puede permitir observar, de una mejor manera, el tamaño, la forma y las
estructuras celulares al brindar distintos tipos de cortes extremadamente finos de secciones
transversales y longitudinales. Además, una tinción de azul de metileno servirá para definir las
paredes, membranas y ciertas estructuras como el núcleo, con un objeto de 40x se puede llegar
apreciar estructuras nucleares, el nucleolo. La aplicación de tionina, azul de anilina y el verde de Janus
ayuda a definir el protoplasto celular. Durante la experiencia en el laboratorio se logró apreciar las
estructuras de una forma correcta al emplear los métodos necesarios. (2)

3. Según el estudio realizado por Vásconez y Lozada confirman que el método de coloración más eficaz
sería el método de coloración Warthin Starry, obtenido de los resultados de las pruebas que
realizaron para identificar Helicobacter Pylori en biopsias gástricas, estos resultados muestran que,
mientras el método de coloración Giemsa identifica un 60% el método de coloración Warthin Starry
identificó un 100% debido a que en este tipo de tinción la plata, componente principal de este tipo de
tinción, se precipita en la membrana de la bacteria dándole una apariencia más gruesa y más fácil de
identificar. (3)

4. Según el estudio realizado por Ledezma, la presencia de sarro no sólo es un problema de estética
dental, sino también un problema para el tejido bucal ya que no solo genera inflamación y sangrado,
si no puede conllevar a la caída de los dientes y el mal aliento, la observación de este sarro es
fundamental ya que con esto se pueden distinguir diferentes bacterias, que pueden desencadenar
diferentes tipos de enfermedades bucales debido a que la persona tuvo hábitos de higiene
deficientes, lo que eleva los riesgos de presentar lesiones en la mucosa, caries dentales,
enfermedades periodontales, afecciones cancerosas, xerostomía, entre otros. alterando la calidad de
vida de la persona. (4)

CONCLUSIONES

● Se logró conocer y aplicar las principales técnicas de estudio de células.

 ● Se observó e identificó las características de células presentes en diferentes muestras biológicas (agua
estancada, hojas de plantas, sangre humana y placa dental) con ayuda de videos modelo.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué organismos observó en el agua estancada?

Respuesta: En la primera muestra donde se toma la sustancia verdosa, se puede identificar, mediante el
microscopio, células en forma de moneda que forman filamentos. Estas características son muy típicas de las
algas cianobacterias. Las cianobacterias tienen a la clorofila como principal pigmento fotosintético aeróbicos
Además, al tomar una muestra del barro, en el microscopio se pueden apreciar un protozoario ciliado, ameba
y algas diatomeas. La ausencia de luz no es un factor que inhiba la capacidad de sobrevivir de los protozoarios,
cianobacterias, amebas, entre otros. Estos microorganismos tienden a desplazarse por los fondos lodosos
cubiertos de vegetación muerta o materia orgánica descompuesta. (5)

2. ¿Qué tipo de microorganismos se observó a partir de la muestra de placa dental?

Respuesta: En la muestra de placa dental que se llevó al microscopio se pudo apreciar bacterias móviles y
bacilos. La placa dental inicia su formación a los 20 minutos luego de comer, es en este momento cuando
empieza la fijación de las bacterias a los dientes. Estas primeras bacterias que se fijan, cambian las condiciones
de la boca para que facilite la proliferación de más bacterias. La placa dental es importante para la aparición de
enfermedades bacterianas. (6)

3. Proporciona ejemplos de otras observaciones vitales

Respuesta: En el caso de la observación de los protozoarios se utilizan colorantes vitales que tiñen ciertas
estructuras como el rojo de Congo que tiñe a todo el protozoario, el rojo neutro tiñe las vacuolas, el verde
Janus tiñe las mitocondrias y en el caso del azul de metileno tiñe los gránulos citoplasmáticos y el núcleo (7).

Otro ejemplo es en el estudio de lo parásitos mediante el método frotis en fresco que permite observar
parásitos en estadio adulto o larvario para determinar ciertas características , que una vez fijados no es
posible observar. En el caso de la amibiasis intestinal se utiliza el método de “la amiba en fresco “, útil para
detectar trofozoitos en movimiento y posteriormente para cultivo y tinción (8).

4. ¿Qué tipo de colorante es el azul de metileno?

Respuesta: El azul de metileno es un colorante muy empleado en los laboratorios, industria textil, cosmética,
farmacológica, entre otras, debido a que colorea fácilmente las superficies y su costo es relativamente
económico. Este colorante fue empleado en la práctica realizada para poder teñir las muestras y de este modo
facilitar su visualización en el microscopio. (9)

5. ¿Qué función cumple el metanol en la extensión de sangre humana?

Respuesta: El metanol cumple la función de ser un fijador y deshidratador de la muestra. Además en la tinción
de Giemsa los colorantes de May y Grunwald actúan como fijador ya que están disueltos en metanol(10).

6. En todas las observaciones realizadas en la práctica ¿Cuál es la estructura celular más fácilmente observable
(sin tinción). ¿Cuál es la importancia de esta estructura para la célula?

Respuesta: Se observa que las células de zanahoria son fácilmente detectables de ver a través del microscopio
sin tinción alguna como en este caso los cromoplastos de la zanahoria. La importancia de estas estructuras es
que se encargan de acumular pigmentos carotenoides a través de los cuales se dará color rojo, naranja y
amarillo a algunas frutas, plantas, raíces y hojas antiguas(11).

7. ¿Qué diferencias morfológicas pueden notarse entre las células estudiadas?

Respuesta: Se pudieron observar diferencias morfológicas como en el caso de bacterias que se encontraron en
el agua estancada y en el sarro dental presentan cloroplastos que les permite realizar fotosíntesis oxigénica y
bacterias gram positivas y gram negativas en forma de bacilos(12)(13).

En el caso de las células sanguíneas y las células de la cebolla y zanahoria es que una pertenece a las célula
animal y vegetal respectivamente, las células de cebolla y zanahoria presentan pared celular y clorofila y en la
células sanguíneas encontramos plasma, elementos formes como eritrocitos, leucocitos y trombocitos(14)(15).

8. ¿Qué ventajas y desventajas existen entre los estudios in vivo y estudios in vitro?

Respuesta: Las principales ventajas de los estudios in vitro son: la posibilidades de controlar los parámetros
(como la concentración espacial y temporal de sustancias) y la posibilidad de estudiar cada etapa del proceso
individualmente. Por el contrario, la principal desventajas de este proceso es que los efectos de un compuesto
por el estudio in vitro pueden ser diferentes a los del estudio in vivo, esto a causa de los procesos metabólicos
del organismo. (16)

Los estudios in vivo tiene como principales ventajas la aproximación a la realidad que ocurre en el organismo y
la mayor facilidad para extrapolar los resultados. Por el contrario, sus principales desventajas son el mayor
costo que involucra dicho estudio y la necesidad de un mayor esfuerzo que los in vitro. (16)

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
(1) Marchand E. Microorganismos indicadores de la calidad del agua de consumo humano en
lima metropolitana [Internet]. [citado 27 de junio de 2020]. Disponible en:
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BibVirtualData/Tesis/Basic/Marchand_P_E/tesis_completo.pdf

(2) Estudios con microscopio electrónico de la epidermis de Allium Cepa. American Journal of
Botany, 45 (6), 449 | 10.2307 / 2439180 [Internet]. [citado 27 de junio de 2020]. Disponible
en: https://sci-hub.tw/https://www.jstor.org/stable/2439180?seq=1

(3) Vásconez, Diana - Lozada J. Vista de MÉTODO DE COLORACIÓN GIEMSA Y WARTHIN

STARRY PARA IDENTIFICAR HELICOBACTER PYLORI EN BIOPSIAS GÁSTRICAS
[Internet]. 2017 [citado 27 de junio de 2020]. Disponible en:
https://revistas.uta.edu.ec/erevista/index.php/ccli/article/view/113/110

(4) Ledesma Pacheco ME. Presencia de lesiones en la mucosa bucal generado por la
acumulación de sarro, en los pacientes con prótesis dental atendidos en la Clínica Integral
del Adulto Mayor de la Facultad de Odontología de la Universidad de Guayaquil, en el
periodo 2016-2017 [Internet]. [Guayaquil]: Universidad de Guayaquil; 2017 [citado 28 de junio
de 2020]. Disponible en:
http://repositorio.ug.edu.ec/bitstream/redug/21658/1/LEDESMAmilka.pdf

(5) Barreto E, Ayala N. Protistas-hongos [Manual de prácticas]. Ensenada, México; Universidad

Autónoma de Baja California; 2012. [citado 27 junio 2020]. Disponible en:
https://ciencias.ens.uabc.mx/documentos/manuales/manual%20hongos-protistas.pdf

(6) Muras A. Mis bacterias, mis caries y yo. [Internet]. 2018. [Recuperado 27 junio 2020].
Disponible en: https://www.masscience.com/2018/05/04/mis-bacterias-mis-caries-y-yo/

(7) Práctica Preparaciones Microbiológicas 18855.pdf [Internet]. [citado 28 de junio de 2020].

Disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Practica_preparaciones_microbiologicas_18855.p
df

(8) Cruz Reyes A., Camargo Camargo B.Glosario de términos en Parasitología y Ciencias
Afines [Internet]. [citado el 28 de junio de 2020]. Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?
id=Hgj4bbEdyUgC&pg=PA207&lpg=PA207&dq=observación+in+vivo+parasitos&source=bl&
ots=58NhzTS5Qi&sig=ACfU3U2f8x2wyLkGk7v2nTxHPJ7zp0xYVw&hl=es&sa=X&ved=2ahU
KEwjHs47SvqXqAhUCFbkGHWBGAT8Q6AEwBXoECAwQAQ#v=onepage&q=observación
in vivo parasitos&f=false

(9) Albis A, López A, Romero M. Remoción de azul de metileno de soluciones acuosas utilizando
cáscara de yuca (Manihot esculenta) modificada con ácido fosfórico. Prospect. [Internet]. Dic
2017 [citado 27 junio 2020]; 15(2): 60-73. Disponible en:
http://ojs.uac.edu.co/index.php/prospectiva/article/view/777

(10) Delia MC.PRÁCTICA No11. TINCIÓN DE GIEMSA | Prácticas de Hematología y Citología

[Internet]. [citado 28 junio de 2020]. Disponible en:
https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/13/practica-no11-tincion-de-
giemsa/
(11)Daniela Rodriguez. ¿Qué son los Cromoplastos? [Internet]. [citado 28 junio de 2020].
Disponible en: https://www.lifeder.com/cromoplastos/

(12)Violeta Gomez. Cianobacterias: características, morfología, toxicidad [Internet]. [citado 28 de

junio de 2020]. Disponible en: https://www.lifeder.com/cianobacterias/

(13) Estudi Dental Barcelona. ¿Qué bacterias tenemos en la boca y qué problemas crean?
[Internet]. [citado 28 de junio de 2020]. Disponible en:
https://estudidentalbarcelona.com/bacterias-tenemos-la-boca-problemas-crean/ Esta bien:)
SISI, GRACIAS:

(14)Javier Sanchez.Semejanza y diferencia entre celula animal y vegetal [Internet]. [citado 28 de

junio de 2020]. Disponible en: https://www.ecologiaverde.com/semejanza-y-diferencia-entre-
celula-animal-y-vegetal-1533.html

(15)Lopez JGDJ. CÉLULAS SANGUINEAS PROYECTO "Tecnologías de la Información y

Comunicación en la formación de los profesionales de la Salud; [citado 28 de junio de 2020];
Disponible en: https://www.academia.edu/41696643/C
%C3%89LULAS_SANGUINEAS_PROYECTO_Tecnolog%C3%ADas_de_la_Informaci
%C3%B3n_y_Comunicaci%C3%B3n_en_la_formaci
%C3%B3n_de_los_profesionales_de_la_Salud_

(16)Marañón M, Pérez L, Font O, Moya A. Modelos y ensayos para el estudio de la angiogénesis.

MEDISAN. [Internet]. 2016 [citado 27 junio 2020]; 20(1): 102. Disponible en:
http://www.medisan.sld.cu/index.php/san/article/download/164/pdf_213