Manual de Procedimientos Técnicos - en Act

HOSPITAL
EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO
MANUAL
PROCEDIMIENTOS
Código: M–LC-MA-05
LABORATORIO CLÍNICO Versión: 02
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

HOSPITAL 05/12/2018
EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO Página 1 de 249
TABLA DE CONTENIDO
1. OBJETIVO.................................................................................................................................................4
2. ALCANCE..................................................................................................................................................4
3. RESPONSABLES....................................................................................................................................4
4. DEFINICIONES........................................................................................................................................4
5. HEMATOLOGÍA........................................................................................................................................8
5.1 CUADRO HEMÁTICO MANUAL..............................................................................................................8
5.2 CUADRO HEMÁTICO AUTOMATIZADO.............................................................................................16
5.3 EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA.............................................................................................17
5.4 RECUENTO DE RETICULOCITOS.......................................................................................................29
5.5 RECUENTO DE EOSINÓFILOS EN MOCO NASAL..........................................................................31
5.6 VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR...............................................................................32
5.7 GOTA GRUESA........................................................................................................................................35
5.8 PRUEBA DE CICLAJE - DREPANOCITOS........................................................................................43
5.9 CÉLULAS L.E............................................................................................................................................45
5.10 RETRACCIÓN DEL COAGULO...........................................................................................................47
6. MICROSCOPIA Y LIQUIDOS CORPORALES.......................................................................................50
6.1 PARCIAL DE ORINA...............................................................................................................................50
6.2 RECUENTO DE ADDIS Y HAMBURGUER..........................................................................................74
6.2.1 RECUENTO DE ADDIS........................................................................................................................74
6.2.2 RECUENTO DE HAMBURGUER.......................................................................................................77
6.3 FROTIS DE FLUJO VAGINAL Y URETRAL ........................................................................................78
6.4 KOH – HIDRÓXIDO DE POTASIO........................................................................................................80
6.5 EXAMEN DIRECTO FRESCO DE CUALQUIER MUESTRA............................................................81
6.6 BACILOSCOPIA........................................................................................................................................81
6.7 GRAM DE CUALQUIER MUESTRA......................................................................................................83
6.8 LEISHMANIASIS.......................................................................................................................................84
6.9 LÍQUIDOS ESTÉRILES............................................................................................................................85
6.10 ESPERMOGRAMA.................................................................................................................................96
7. COPROANÁLISIS.....................................................................................................................................105
7.1 COPROLÓGICO......................................................................................................................................105
7.2 COPROSCÓPICO...................................................................................................................................106
7.3 PRUEBA RÁPIDA PARA DETECCIÓN DE ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS EN MATERIA FECAL 110
ESTE DOCUMENTO ES PROPIEDAD DE LA E.S.E. HOSPITAL SAN JOSÉ DEL GUAVIARE PROHIBIDA SU
REPRODUCCION POR CUALQUIER MEDIO, SIN AUTORIZACION ESCRITA DEL GERENTE
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7.4 TEST DE GRAHAM................................................................................................................................111

7.5 SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL - MÉTODO GUAYACO MODIFICADO.....................112
7.6 COPROLÓGICO POR CONCENTRACIÓN – MÉTODO DE RITCHIE..........................................113
8. QUÍMICA CLÍNICA E INMUNOLOGÍA...................................................................................................117
8.1 PRUEBAS DE QUÍMICA SANGUÍNEA..............................................................................................117
8.2 PRUEBAS DE AGLUTINACIÓN...........................................................................................................122
8.3 PRUEBA NO TREPONÉMICA - VDRL................................................................................................124
8.4 PRUEBAS RÁPIDAS DE INMUNOLOGÍA..........................................................................................125
8.4.1 TROPONINA I CUALITATIVA:..........................................................................................................125
8.4.2 HEPATITIS B (ANTÍGENO):..............................................................................................................126
8.4.3 HEPATITIS C........................................................................................................................................127
8.4.4 HEPATITIS A........................................................................................................................................127
8.4.5 DENGUE IGG E IGM..........................................................................................................................127
8.4.6 TOXOPLASMA IGG E IGM................................................................................................................128
8.4.7 PRUEBA DE EMBARAZO..................................................................................................................129
8.4.8 PRUEBA RÁPIDA PARA SÍFILIS......................................................................................................130
8.4.9 VIH..........................................................................................................................................................131
8.5 GASES ARTERIALES............................................................................................................................136
8.6 ELECTROLITOS NA, K, CLORO........................................................................................................137
8.7 COAGULACIÓN PT Y PTT..................................................................................................................139
8.8 PRUEBA RÁPIDA PARA DETECCIÓN DEL ANTÍGENO DEL VIRUS SINCITIAL RESPIRATORIO E
INFLUENZA A Y B.........................................................................................................................................144
8.9 PRUEBA RÁPIDA PARA DETECCIÓN DEL ANTÍGENO DE ADENOVIRUS..............................144
9. PRUEBAS ESPECIALES.........................................................................................................................147
9.1 TSH NEONATAL.....................................................................................................................................149
9.2 HIV ELISA.................................................................................................................................................151
9.3 HEMOGLOBINA GLICOSILADA HBA1C...........................................................................................155
9.4 MICROALBUMINURIA U-ALB..............................................................................................................157
9.5 MICROALBUMINURIA 24 HORAS:.....................................................................................................159
10. MICROBIOLOGÍA...................................................................................................................................161
10.1 UROCULTIVO.......................................................................................................................................161
10.2 CULTIVO Y ANTIBIOGRAMA PARA GÉRMENES COMUNES...................................................164
10.3 IDENTIFICACIÓN BACTERIANA.......................................................................................................165
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10.3.1 IDENTIFICACIÓN BACTERIANA SEMI AUTOMATIZADA: PANELES DE IDENTIFICACIÓN DL-96

..........................................................................................................................................................................169
10.4 PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS (ANTIBIOGRAMA)................179
10.5 HEMOCULTIVO-HEMOCULTIVO CON RESINAS.........................................................................182
10.6 COPROCULTIVO PARA AISLAMIENTO DE SALMONELLA Y SHIGELLA...............................185
10.7 CULTIVO MICOBACTERIAS..............................................................................................................186
10.8 ESTÁNDAR MCFARLAND.................................................................................................................190
10.9 CULTIVO DE SUPERFICIES EN EL AMBIENTE HOSPITALARIO............................................190
10.10 ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DE RESIDUOS HOSPITALARIOS Y SIMILARES................193
10.11 PREPARACIÓN MEDIOS DE CULTIVO........................................................................................195
10.11.1 ALMACENAMIENTO Y VIDA ÚTIL..............................................................................................200
10.11. 2 CONTROLES CALIDAD DE MEDIOS PREPARADOS...........................................................200
11. COLORACIONES....................................................................................................................................202
11.1 COLORACIÓN WRIGHT: EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA Y FROTIS PARA DIAGNÓSTICO
DE LEISHMANIASIS....................................................................................................................................202
11.2 COLORACIÓN DE ROMANOWSKY MODIFICADA PARA GOTA GRUESA............................202
11.3 COLORACIÓN DE ZIEHL NEELSEN................................................................................................204
11.4 COLORACIÓN DE GRAM...................................................................................................................205
11.5 ESTANDARIZACIÓN DE LA COLORACIÓN...................................................................................206
12. REPORTE DE RESULTADOS..............................................................................................................209
12.1 DESCRIPCIÓN REPORTE DE RESULTADOS..............................................................................210
13. DOCUMENTOS DE REFERENCIA.....................................................................................................216
14. LISTA DE DISTRIBUCIÓN....................................................................................................................216
15. ANEXOS...................................................................................................................................................218
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1. OBJETIVO
Proporcionar un instrumento que facilite el desarrollo adecuado, sistematizado y
estandarizado de los procedimientos técnicos que se realizan en el laboratorio clínico.
2. ALCANCE
Este protocolo es aplicable a todos los funcionarios que cumplen labores o trabajos en las
distintas secciones y áreas del Laboratorio Clínico del hospital San José del Guaviare. Va
desde el inicio de los procesos hasta la emisión del resultado.
3. RESPONSABLES
Son responsables de la aplicación de las actividades descritas en este protocolo todo el

personal profesional y auxiliar del Laboratorio Clínico.
4. DEFINICIONES
 Plasma: es la fracción líquida y celular de la sangre. Las proteínas del plasma

sanguíneo están constituidas por tres clases principales de compuestos: albúminas
(54 %), globulinas (38 %) y fibrinógenos (7 %). Estas proteínas plasmáticas son
fundamentales para la vida. Por ejemplo el fibrinógeno, albúmina llamada protrombina
son básicos en el mecanismo de coagulación de la sangre. Las globulinas funcionan
como componentes esenciales del mecanismo de inmunidad: son anticuerpos
circulantes. Todas las proteínas plasmáticas contribuyen a la conservación de la
viscosidad normal de la sangre, de su presión osmótica y del volumen sanguíneo.
 INR: Ratio normalizada internacional, representa el cociente que se hubiera obtenido

si se hubiera realizado la prueba con la primera tromboplastina de referencia humana
de la OMS.
 Hematocrito: Relación entre el volumen ocupado por los hematíes dentro de un

volumen de sangre total, relación expresada en porcentaje, su cifra depende del
tamaño del glóbulo rojo.
 Hemoglobina: Compuesto complejo de hierro y proteína que forma parte del hematíe
y sirve para transportar oxígeno a las células de los tejidos. Constituye el 95% de
peso seco eritrocitario, por esto mismo es el componente más importante del eritrocito.
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 Leucocitos: Glóbulo blanco, uno de los elementos formes de la sangre. Hay cinco
tipos de leucocitos que se clasifican según la presencia o ausencia de gránulos en el
citoplasma celular. Los agranulocitos (sin gránulos) se dividen en linfocitos y
monocitos; los granulocitos (con gránulos) comprenden los neutrófilos, eosinofilos y
basófilos.
 Plaquetas: El menor de los elementos de la sangre; fragmentos celulares que sirven

que sirven para la coagulación, hemostasia y preservar la integridad del tejido
lesionado.
 Cuadro hemático automatizado: Los cuadros hemáticos automatizados aportan más

parámetros que los manuales entre ellos los llamados índices secundarios:
- Volumen Corpuscular Medio (VCM): Es el valor medio del volumen de cada

hematíe. Se calcula a partir del hematocrito (HCT) y del recuento del número de
hematíes (RBC)
- Hemoglobina Corpuscular Media (HCM): Expresa el valor medio contenido de

hemoglobina que existe en cada hematíe. Se calcula a partir de la concentración
de hemoglobina (Hb) y del número de hematíes.
- Volumen Globular Medio (VGM): Mide la proporción de sangre ocupada por los
eritrocitos expresada por el volumen y es una medida indirecta del promedio en
tamaño del eritrocito : vgm=hematocrito(%)x10/eritrocitos/mm3
- Promedio de Concentración de Hemoglobina (CMHG): Es la cantidad de

hemoglobina en términos porcentuales, del volumen corpuscular
- Diferencial leucocitario: Distingue tres poblaciones, linfocitos, neutrófilos y

células mixtas (sumatoria de eosinofilos, basófilos y monocitos).
 Reticulocitos: Hematíes que han perdido su núcleo pero que no están

completamente maduros y contienen restos de RNA.
 Velocidad de Sedimentación Globular: Proceso por el cual se mide el tiempo en el
que los eritrocitos se sedimentan en un área determinada.
 Extendido de sangre periférica: Distribución uniforme de células para estudiar

morfología. La sangre bajo impulsos mecánicos se expande por capilaridad sobre una
placa de vidrio dejando todos los elementos distribuidos uniformemente.
- Anisocitosis: Nombre utilizado para valorar el tamaño del hematíe se toma

referencia el linfocito, si el hematíe es igual o mayor al linfocito se dice que es
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macrocito, si es menor una vez es normocitico y si es menor dos veces en

microcito.
- Poiquilocitosis: Termino utilizado cuando se producen variaciones muy marcadas

en la forma de los eritrocitos (eliptocitos, ovalocitos, esferocitos, dianocitos,
esquistocitos, acantocitos, drepanocitos, estomatocitos).
- Hipocromia: Denominación dada a los glóbulos rojos cuando éstos presentan una
coloración pálida al examinarlos bajo el microscopio, debido a la disminución de la
concentración de hemoglobina en éstos.
 Gota gruesa: La gota gruesa es el método de rutina para el diagnóstico de malaria o

paludismo ya que concentra entre 20 a 30 veces, por lo tanto la probabilidad de
encontrar los parásitos sanguíneos es mayor en un lapso de tiempo de 3 a 5 minutos.
 Coprológico: estudio de la materia fecal que se basa en la demostración de

parásitos intestinales en ésta.
 Coproscópico: El coproscópico incluye además del examen coprológico, un análisis

químico de la muestra.
 Sangre oculta: Se denomina sangre oculta puesto que la sangre si proviene del
sistema digestivo alto (Boca, esófago, estómago e intestino delgado) pasa por una
serie de cambios químicos y de pH inducidos por las diferentes sustancias que
fisiológicamente actúan a esos niveles, cambiando su coloración a negro, si esta no es
muy abundante el color negro se diluye en la materia fecal marrón y no se verifica
macroscópicamente.
 Azucares reductores: Esta prueba revela la presencia de azúcares del tipo glucosa
que son capaces de reducirse en presenciad de óxido cúprico. Normalmente las heces
son azúcares reductoras negativas. Esta prueba es especialmente útil en infantes
menores de 2 años con cuadros diarreicos, permitiendo establecer el diagnóstico
de síndrome de intolerancia a la lactosa con la positividad de la prueba. Presenta poca
o nula utilidad en la mayoría de los casos de adultos. Sin embargo, se han estudiado
casos de intolerancia a la lactosa en pacientes ancianos, lo que ameritaría la
aplicación de esta prueba.
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HEMATOLOGÍA
5. HEMATOLOGÍA
5.1 Cuadro Hemático Manual
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 Hematocrito Manual
El hematocrito es el examen que mide el volumen de eritrocitos, se expresa como un

porcentaje del volumen de sangre total existente en una muestra y depende de la
concentración de la hemoglobina. La relación del hematocrito y la concentración de la
hemoglobina lo hace un método práctico para el diagnóstico de anemia. Así el hematocrito
disminuye siempre que lo hace la concentración de la hemoglobina, aumenta cuando la
concentración de la masa eritrocitaria es superior al valor normal; también depende del
tamaño globular. El hematocrito en ciertas condiciones patológicas debe tenerse siempre en
cuenta, no obstante que independiente de la concentración de la hemoglobina, su valor
puede variar también y a veces de manera importante con el valor del volumen plasmático.
Un descenso del volumen plasmático dará lugar a un falso aumento del hematocrito debido a
la hemoconcentración y un aumento del volumen plasmático dará lugar a una falsa anemia
por hemodilución. El hematocrito de sangre venosa es menor que el de sangre capilar debido
a la concentración plasmática.
Reactivos y Materiales
 Capilares con Heparina

 Capilares sin Heparina
 Plastilina
 Escala de medición.
 Microcentrifuga
Procedimiento:
 Tomar un capilar de vidrio con EDTA o HEPARINA.

 Llénelo con sangre venosa por capilaridad.
 Sellar con plastilina una vez se llena las ¾ partes.
 Ubicar el microhematocrito en la microcentrifuga con la plastilina hacia la parte
proximal, tape, encienda y centrifugue a 100.000 rpm, por 5 minutos.
 Leer el microhematocrito en la tabla que va de 0 a 10, donde comienza la sangre.
 En el capilar se coloca en 0 y donde termina el plasma en 100 y se lee la columna de
eritrocitos. No incluir en la lectura la capa de glóbulos blancos.
 Al resultado restarle 3 unidades para mayor exactitud*.
*Nota: El hematocrito manual tiene plasma atrapado entre las células después de ser
centrifugadas, y es así como su valor es de 2% a 3% más bajo que el hematocrito del equipo
automatizado, por ello en el laboratorio clínico HSJG se le resta 3 unidades al valor del
hematocrito manual.
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Responsable: Bacteriólogo (a)

Registro: Libro de Registro Hematología
Reporte Resultado: Ver anexos
Valores de referencia:
 Recuento de Leucocitos
La sangre anti coagulada se deposita en el reactivo de Turk, permitiendo así evidenciar los
leucocitos, manteniéndolos visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados. El recuento
del número de leucocitos o glóbulos blancos se expresa por mm3 (milímetro cúbico) de
sangre.
Reactivos y Materiales
 Pipeta automática de 100 a 1000 y de 5 a 50 lambdas.

 Tubos de ensayo de vidrio.
 Reactivo de Turk.
 Puntas amarillas y azules.
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 Microscopio
 Cámara de Neubauer
 Sangre anti coagulada o sangre capilar.
Procedimiento
 Mezclar la sangre anti coagulada por un minuto aproximadamente.

 Medir 380 ul de reactivo de Turk y pasarlos a un tubo de vidrio.
 Medir 20 ul de sangre homogenizadas y agregarlas al tubo donde está el reactivo de
Turk enjuagando varias veces hasta que la punta quede limpia.
 Limpiar bien la cámara de Neubauer verificando que no queden pelusas
 Colocar la lámina de cuarzo o laminilla en el rayado de la cámara.
 Con la pipeta de 5 a 50 lambdas, tomar 10 ul muestra y llena la cámara, teniendo la
precaución que no queden burbujas y no se exceda el límite de llenado.
 Dejar en reposo por un minuto y leer en el microscopio con el objetivo de 10x y el
diafragma a medio cerrar.
 Además de los leucocitos contados dentro de cada uno de los cuadrantes, se deben
contar todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la línea horizontal superior
y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos, adheridos a la línea horizontal
inferior y vertical interior.
 Realizar el cálculo correspondiente.
Cálculo
Nº de leucocitos x mm3 = Num.de cel. contadas*1*dilución

Volumen del área contada
Leucocitos/mm³=Num. De cel. Contadas*1*20

0,4
Leucocitos/mm³=resultado * 50
Valores de referencia
5000 - 10 000 leucocitos / mm3
Nota: Otra forma de realizarlo es a través del extendido de sangre periférica, coloreado con
Wright, enfocando en objetivo de 10x y contar 3 campos, sacar promedio y multiplicar por
200.
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 Corrección de Recuento de Leucocitos
La corrección de los Glóbulos blancos generalmente se realiza en pacientes con anemias

hemolíticas intensas y en eritroblastosis fetal en el que la muestra presenta gran cantidad de
normoblastos y el equipo automatizado los cuenta como leucocitos.
Por tal razón se debe realizar

la siguiente fórmula:
Ejemplo: recuento de 30.000/mm3 con presencia en lámina de 90 normoblastos

 Recuento de Plaquetas Manual
Las plaquetas o trombocitos son células de tamaño pequeño que cumplen un papel
primordial en los procesos de coagulación. Es de vital importancia para el diagnóstico de
trastornos hemorrágicos. El aumento de las cifras de plaquetas se denomina trombocitosis y
puede hallarse en la trombocitemia idiopática, leucemia granulocitica crónica y después de
esplenectomías. La disminución de las plaquetas se denomina trombocitopenia y se da en la
condiciones como la purpura trombocitopénica, anemias aplásicas, leucemia aguda, anemia
perniciosa, virosis (dengue) y en algunas ocasiones después de quimioterapia.
Materiales y Reactivos
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 Tubo con sangre venosa anticoagulada con EDTA.

 Gradilla para tubos
 Microscopio
 Piano cuenta células
 Laminas portaobjetos
 Aceite de Inmersión
 Colorante de Wright
Procedimiento
 Mezclar bien la muestra de sangre obtenida con EDTA.

 Colocar una gota de sangre sobre la lámina portaobjetos.
 Dejar que la gota se extienda por capilaridad a lo largo del extremo del portaobjeto
extensor.
 Realizar el extendido formando un ángulo de 45 °C con ayuda de otro portaobjetos
 Secar la lámina a temperatura ambiente
 Colorear con Wright (ver anexo de coloraciones)
 En el extendido de sangre periférica, coloreado con Wright, en objetivo de 100x,
visualizar el campo óptimo, el cual es aquel donde se observan 100 glóbulos rojos
bien diferenciados que apenas se toquen, leer 10 campos, el resultado se promedia
por los campos leídos y se multiplica por 21000.
 El bacteriólogo (a) transcribe los resultados al libro de registro de hematología y al
software.
Valor de referencia: 150 000 - 450 000 plaquetas/mm3

Reporte Resultado: Ver punto 12
 Recuento Diferencial de Leucocitos en lámina
La cuenta leucocitaria diferencial es el conteo del número de los distintos tipos de leucocitos.
La cuenta leucocitaria total se divide en 5 tipos de leucocitos:

 Neutrófilos (en banda y segmentados). Su citoplasma es incoloro y tiene múltiples
granos color gris; o puede ser multilobulado, que posee cuatro lóbulos nucleares.
 Eosinófilos: es redondo u ovalado, el núcleo posee no más de tres lóbulos y en el

citoplasma se observa no más de 20 granos color naranja.
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 Basófilos: se caracterizan por sus grandes granulaciones azul oscuro. Estos gránulos
son hidrosolubles.
 Linfocitos: Su citoplasma es azul pálido y la cromatina nuclear color púrpura azulado

oscuro; casi no posee citoplasma.
 Monocitos: su núcleo suele ser arriñonado. Contiene una red de cromatina. El

citoplasma se tiñe de un color azul grisáceo y contiene finas granulaciones color rosa.
El recuento leucocitario puede ser útil en la valoración de una infección o inflamación, en la
determinación de los efectos de intoxicación posible por sustancias químicas o drogas, en el
monitoreo de trastornos sanguíneos como la leucemia y en los efectos secundarios de
tratamientos como la
quimioterapia.
El frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente una porta objeto con una gota de
sangre, de tal manera que las células de ésta se dispongan formando una sola capa de
ellas.
Características de un buen extendido: debe tener

cabeza, cuerpo y cola.

 Impresora
 Microscopio
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Procedimiento
 Mezclar bien la muestra de sangre obtenida con EDTA.

 Colocar una gota de sangre sobre la lámina portaobjetos
 Dejar que la gota se extienda por capilaridad a lo largo del extremo del portaobjeto
extensor
 Realizar el extendido formando un ángulo de 45 °C con ayuda de otro portaobjetos
 Secar la lámina a temperatura ambiente
 Colorear con Wright (ver anexo de coloraciones)
Lectura
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 Con el objetivo de 40X, se busca un área del frotis en la cual los eritrocitos se
encuentren uniformemente distribuidos y en donde apenas se toquen unos con otros.
 Leer la lámina en objetivo de 100 x adicionando aceite de inmersión
 Realizar la lectura hasta llegar a 100 leucocitos, con ayuda del piano contador de
células seleccionar la célula observada
 Al llegar a 100 células el piano contador de células emitirá un sonido
 La bacterióloga registra los resultados al libro de registro de Hematología y al
software.
Célula Adultos
Linfocitos 20 -40 %
Monocitos 3 - 11 %
Eosinófilos 0–5%
Basófilos 0-1%
Neutrófilos 50 – 70 %
Bandas 0–2%

Reporte Resultado: Ver punto 5.8
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5.2 Cuadro Hemático Automatizado
Basado en la impedancia electrónica, consiste en la detección y medición de los cambios en

la resistencia eléctrica producida por una partícula, en este caso células, en un líquido
conductivo al atravesar una pequeña apertura. A medida que la suspensión de las células
diluidas pasa a través de la apertura, el paso de cada célula aumenta momentáneamente la
resistencia de la trayectoria eléctrica entre dos electrodos sumergidos a cada lado de la
apertura.
Se utiliza el método de cianometahemoglobina, donde los glóbulos rojos son lisados,
liberando la hemoglobina. El hierro de la hemoglobina se convierte del estado ferroso al
estado férrico para formar el metamioglobina, que se combina con el cianuro del potasio
para producir el cianometamioglobina estable. Posteriormente, la concentración de HCB se
mide fotométricamente.

 Equipo Automatizado de hematología
 Reactivos: diluyente, lisante, limpiador
 Panel de Células Control
 Impresora
 Microscopio
Realizar mantenimiento diario al equipo, ver protocolo Manual manejo y limpieza de equipo.
 El bacteriólogo (a) debe descartar desechos y verificar el nivel de llenado de reactivos

 Verificar el encendido de la impresora y el papel
 Procesar y analizar el control de calidad ver Manual control de calidad
 Mezclar la muestra en el mezclador de tubos, mínimo 11 vueltas
 El equipo se debe mantener en reposo todo el día en la pantalla de ID
 Ingresar los datos del paciente.
 Destapar el tubo y pasar la muestra por la aguja y presione el botón STARTUP.
 Al finalizar el ciclo de análisis la pantalla muestra los resultados
 Los resultados de los cuadros hemáticos que salgan alterados como: plaquetas
disminuidas (<150.000 mm3) o aumentadas, leucocitos disminuidos o
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aumentados, hematocritos bajos y mixtas mayor a 10 se deberán confirmar

manualmente
 Al terminar de procesar las muestras pulse el botón ID para colocar de nuevo el
equipo en reposo.
 El bacteriólogo (a) del turno de la noche deberá apagar el equipo de hematología
principal a media noche y encender el equipo de apoyo. ver protocolo Manual manejo
y limpieza de equipo.
Para Recordar: Rechazar muestras con Hemólisis, coágulos de fibrina, no marcadas.

5.3 Extendido de Sangre Periférica
El extendido periférico estudia la morfología de las células sanguíneas y el porcentaje de

distribución de los distintos tipos de leucocitos, morfología y cantidad de plaquetas.
 Láminas limpias y desengrasadas.

 Wright
 Lápiz marcador
 Cronómetro
Procedimiento
 Marcar la lámina
 Colocar 1 gota de sangre anticoagulada, extender la gota utilizando una lámina de
borde liso, se coloca este borde sobre la gota de sangre y con una inclinación de 30 a
40° se deja extender la gota por capilaridad y se desliza suave y uniformemente. No
debe demorarse más de 2 a 3 segundos para realizar el extendido
 Limpiar la lámina extensora entre un frotis a otro.
Un buen frotis debe ocupar las ¾ partes de la lámina debe tener cabeza, cuerpo y
cola lo cual es muy importante para el estudio que se va a realizar.
 Dejar secar al aire. El tiempo de secado varia con la humedad y temperatura del
laboratorio, un secado lento produce retracción en los glóbulos, debe tener cuidado de
no poner los extendidos sobre superficies muy calientes que pueden producir
hemolisis o deshidratación de las células.
 Colorear la lámina con Wright. ( ver anexo coloraciones).
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Lectura
 Realizar la lectura del extendido si
cumple con los criterios de calidad del extendido. Enfocar primero en 40x para buscar
el campo ideal en los que los glóbulos rojos, están ligeramente unidos y no se
encuentran unos sobre otros. Ubicar el cuerpo del extendido adicionar 1 gota de aceite
de inmersión, enfocar en 100 x y realizar la lectura de blancos hasta 100 células.
 Los hematíes se deben de ver color rosa, los núcleos de los leucocitos son de color
azul o purpura, la cromatina debe estar claramente diferenciadas y los gránulos de
los neutrófilos son de color rosado, los gránulos de los eosinófilos son de color naranja
y gruesos, los basófilos tienen gránulos de color purpura o azul oscuro, las plaquetas
son de color lila oscuro, el citoplasma de los linfocitos es azul y el de los monocitos es
gris-azulado.
 Examen Microscópico:
Anomalías morfológicas eritrocitarias:
Alteraciones del tamaño:
 Anisocitosis: Desigualdad en el tamaño de los hematíes.

 Microcitosis: Predominio de hematíes de diámetro < de 6 um y volumen < 80 fl.
 Macrocitosis: Predominio de hematíes de diámetro entro 8 - 11 um y volumen > 100 fl.
 Megalocitosis: Predominio de hematíes de diámetro > 12 um y volumen > 100 fl.
 Anisocitosis
Marcad
Normal Ligera Moderada
a
0–5 6 – 15 16 – 30 Mayor
de 30
ADE Hasta 15.5 16.1 – 18 18.1 – 20 Mayor
de 20.1
Relación Micro y Macrocitosis con el VCM
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Índice Normal Ligera (+) Moderada (++) Marcada (+++)

0-5 6 – 15 16 – 30 Mayor de 30
Micro: 81 – 99 80 – 70 69 – 60 Menor de 60
VCM (fl)
Macro: 80 – 99 100 – 108 109 – 120 Mayor de 120
VCM (fl.)
Valoración Fenómeno de Rouleaux
Normal Ligera (+) Moderada (++) Marcada (+++)

0 1-5 6 – 15 > 15
Alteraciones de la forma (poiquilocitosis)

Esquistocitos: Hematíes fragmentados.

Dacriocito: Hematíes con una proyección elongada en un polo (forma de pera,
lágrima).
 Esferocitos: Hematíes de forma esférica sin aclaramiento central.
 Ovalocitos: Hematíes con forma de óvalo.
 Eliptocitos: Hematíes en forma elíptica.
 Drepanocitos: Hematíes falciformes, con forma de S.
 Codocitos o hematíes en forma de diana: Hematíes con un área con mayor contenido
de Hb que se sitúa en la zona central clara.
 Estomatocitos: Hematíes que en su región central clara poseen una hendidura en
forma de boca.
 Dianocito: Forma concentración central de hemoglobina rodeada de un área incolora
con un anillo periférico de hamoglobina que se asemeja a una diana; puede
presentarse con forma de campana (a) o taza (b).
 Estomatocito: Eritrocito con un área central pálida similar a una hendidura.
 Knizocito: Hematíes maduros que muestran tres concavidades con dos áreas más
claras, tomando forma de canasta.
 Excentricitos: Hematíes con distribución anormal de la Hb. Se dispone como
despegada de la parte interna de la membrana y concentrada en uno de sus extremos.
Hematíes espiculados
 Equinocitos o hematíes crenados: Hematíes con espículas cortas distribuidas

regularmente por toda la superficie.
 Keratocitos o hematíes en casco: Presentan dos proyecciones en forma de espículas.
 Acantocitos o spur cells: Hematíes con perfil dentellado y espinoso con espículas.
Poiquilocitosis
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Normal Ligera (+) Moderada (++) Marcada (+++)

0–5 6 – 15 16 – 30 Mayor de 30
Poiquilocitosis y Relación con el VCM
Forma Normal Ligera (+) Moderada(++) Marcada(+++) Relación con

VCM
Esferocito 0 1-5 6 – 15 > 15 No Afecta
Acantocito 0 1–5 6 - 15 > 15 No Afecta
Drepanocito 0 1–5 6 – 15 > 15 Disminuye
Codocito 1 2- 5 6 – 15 > 15 Disminuye
Leptocito 1 2–5 6 – 15 > 15 Disminuye
Eliptocito 1 2–5 6 – 15 > 15 Aumenta
Equinocito 1 2–5 6 – 15 > 15 No Afecta
Esquistocito 1 2–5 6 – 15 > 15 Disminuye
Ovalocito 1 2–5 6 – 15 > 15 Aumenta
Anulocito 1 2–5 6 – 15 > 15 Disminuye
Estomatocito 1 2–5 6 – 15 > 15 Disminuye
Dacriocito 1 2-5 6 - 15 > 15 Disminuye
Alteraciones de la coloración de la hemoglobina
 Hipocromía: Hematíes que se tiñen débilmente debido a la baja concentración de

hemoglobina en éste,
 Policromasia: Hematíes jóvenes que conservan parte del material basófilo del
eritroblasto y se tiñen de color gris.
Hipocromía

0–5 6 – 15 16 – 30 Mayor de 30
HCM % 29 – 39 28 – 30 25 – 27 Menor de 24
Policromatofilia

0 – 1.5 1.6 – 2.5 2.6 – 3.5 Mayor de 3.6
Reticulocitos (%) 0.5 – 1.5 1.6 – 4 4.1 – 6 Mayor de 6
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Policromatofilia y
Reticulocitos
Inclusiones eritrocitarias
 Corpúsculos de Howell-Jolly: Corpúsculos redondos únicos u múltiples compuestos

de DNA de 1 µm de diámetro de color rojo violáceo.
 Anillos de Cabot: Restos del uso mitótico que forman una línea muy fina en forma de
anillo o de 8 de color rosado o gris.
 Punteado basófilo: Restos de RNA agrupados de color azul grisáceo en la célula
roja.
 Cuerpos de Pappenheimer: Gránulos de hierro color azul negruzco.
 *Reticulocitos
 *Cuerpos de Heinz: hemoglobina inestable que forma esférulas azules
 Siderocitos: Gránulos verdes (tinción Perls).
 Parásitos: Plasmodium, Filarias, Babesia, Bartonella bacilliformis Trypanosoma cruzi.
 Hongos: Histoplasma capsulatum, Cryptococcus neoformans.
 Bacterias: Cocobacilos, bacilos, cocos
*Solo se visualizan con tinciones vitales.
Evaluación Inclusiones
Normal (+) (++) (+++)

C. Howell-Jolly 0 1–2 3–5>6
C. Pappenheimer 0 1–2 3–5>6
Punteado Basófilo 0 1–2 3–5>6
Anillos de Cabot 0 1–2 3–5>6
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Alteraciones en la forma de los Hematíes
Poiquilocitos Descripción Estados Patológicos relacionados

Equinocito Enfermedad hepática, uremia,
terapia con heparina, insuficiencia
Hematíes con renal, ulcera péptica, Cáncer de
espículas cortas estómago, presencia de
con distribución determinados derivados metabólicos
simétrica en plasma. (artefacto, sangre
conservada)
Acantocito Administración de heparina, post-

Hematíes con esplenectomía, Síndrome de Bassen
espículas largas Kornzweig (a-beta-lipoproteinemia
con distribución congénita) Síndrome de McLeod
asimétrica (neuroacantocitosis), retinitis
pigmentosa.
Eliptocito u Ovalocito
Anemias megaloblásticas, anemia
Hematíes
por déficit de hierro, eliptocitosis
alargados,
congénita, Talasemias.
extremos
simétricos
Drepanocito
Hematíes en
forma semilunar
Anemia Falciforme
(alargados y
estrechos)
Codocito/Dianocito Hematíes en
Talasemia, Anemia Ferropénica,
forma de
Hepatopatías crónicas,
campana con
esplenectomía, enfermedades
aumento en la
renales, enfermedad obstructiva del
relación de
hígado.
superficie a
volumen
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Hematíes Anemias hemolíticas

fragmentados en microangiopáticas, CID, Quemaduras
triangulo o coma.
Esquistocito
Célula en casco, Anemias hemolíticas

hematíes con (microangiopática, por válvula
proyecciones en cardiaca) glomerulonefritis,
los extremos hemangiomas cavernosos.
Keratocito
Hematíes de Esferocitosis hereditaria,

forma esférica quemaduras, incompatibilidad ABO,
anemias hemolíticas autoinmunes.
Esferocito
Estomatocitosis hereditaria,
Estomatocito Célula en forma
neoplasias, quemaduras, cirrosis
de boca
alcohólica, intoxicación con Pb.
Célula cuya Hb se
distribuye en los
Estomatocitos congénita , xerocitosis
extremos del
congénita, déficit de Glucosa-6-
Excentrocito hematíe.
fosfato-deshidrogenasa.
Knizocito Anemia hemolítica, algunas

Hematíes hemoglobinopatías, pancreatitis
maduros que
muestran tres
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concavidades con
dos áreas más
claras (forma de
canasta) Se
consideran
formas inestables
de los eritrocitos.
 Evaluación Morfológica de los Leucocitos
Determinar la celularidad
Observar alteraciones morfológicas
Proceder a hacer corrección de conteos celulares
Anomalías morfológicas de los leucocitos polimorfonucleares neutrófilos
Alteraciones nucleares
 Anomalía constitucional de Pelger Hüet: Leucocito con relativa ausencia de

segmentación. Queda configurado en forma de banda o en 2 segmentos.
 Núcleos en anillo: Hiposegmentación nuclear con un gran agujero central.
 Hipersegmentación nuclear: Polimorfonucleares con 4 o más segmentos.
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 Pleocariocito: Hipersegmentación nuclear más gigantismo celular.
Alteraciones del citoplasma
 Granulación tóxica: Granulación que se tiñe de forma pronunciada.
 Desgranulación: Neutrófilo sin granulación, aparece

azulado y agranular.
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 Anomalía de Alder-Reilly: Granulaciones color

violeta.*
 Anomalía de Steinbrinck Chediak-Higashi: Gránulos en forma de inclusiones

azules oscuras de 3 a 9 um.
 Cuerpos de Döhle: Inclusiones basófilas, ovaladas o

rectangulares.
 Bastones de Auer: Estructuras azurófilas en forma de bastoncillo, de puntas afiladas

(puede encontrarse desde blastos hasta neutrófilo).
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Alteraciones Morfológicas en Linfocitos y Plasmocitos
 Linfocitos Reactivos
 Linfocitos Atípicos
 Cristales de Ig en los linfocitos
 Estructuras tubulares paralelas
 Cuerpos de Russell
 Cuerpos de Dutcher
 Células de Mott
Linfocitos reactivos Linfocitos atípicos Cuerpos de Russell
Cuerpos de Dutcher Inclusiones azurófilas Células de Mott
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Alteraciones Morfológicas en Monocitos

 Eritofagocitosis
 Pigmento férrico
 Vacuolización
 Pigmento malárico
Eritofagocitosis Vacuolización Pigmento malárico
Observaciones de la línea Plaquetaria
 Nº de plaquetas.
 Distribución Plaquetaria.
 Cúmulos plaquetarios.
 Satelitísmo plaquetario.
 Anisocitosis Plaquetaria.
 Granularidad Plaquetaria.
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Pseudotrombocitopenia: es el parámetro más afectado en la biometría automatizada.
Causas
 La observación de agregación in vitro
 Venas de difícil acceso (neonatos, obesos, pacientes en quimioterapia)
 Uso de torniquete por tiempo prolongado
 Extracción de sangre con jeringa: se trasvasa con lentitud y se mezcla
inadecuadamente
 Extracción inadecuada de la muestra
 Inducida por EDTA
 Macroplaquetas no identificables por el analizador
 Relación sangre-anticoagulante
 Activación plaquetaria
Satelitísmo Plaquetario: Pseudotrombocitopenia por EDTA
El EDTA es un quelante del Ca ocasiona la disolución del complejo IIb-IIa (factor de

agregación). Favorece la exposición de Ag de la membrana plaquetaria. Cuando el individuo
presenta Ac EDTA dependientes, estos se adhieren al Ag expuestos y se produce el
fenómeno de la adhesión a PMN.
Es un fenómeno físico-químico mediado por Ac. Las plaquetas se adhieren o agregan en
torno a PMN.
El recuento es infravalorado por los analizadores. La anomalía no patológica se resuelve con
revisión microscópica o muestra citratada.
Volumen Plaquetario Medio (VPM): es una medida del volumen promedio de las plaquetas.
Varía inversamente con el conteo de plaquetas: pacientes con un recuento de plaquetas bajo
presentan un VPM alto.
El Dr. Bessman sugiere que VPM es un valor para identificar una variedad de estados
clínicos.
Situaciones clínicas con VPM alterado
 SMC
 PTI
 Anemia de Dresbach
 Post -quimioterapia
 Síndrome de Wiskott-Aldrich
 Anemia aplásica
 Anemia Megaloblastica
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 Esplenectomía / Híper-
esplenismo
Descripción Morfológica de los Blastos: cuando

haya presencia de Blastos se debe informar al médico el porcentaje y realizar descripción de
la célula como se describe a continuación:
 Tamaño, relación núcleo- citoplasma

 Inclusiones
 Contorno nuclear
 Cromatina
 Citoplasma

5.4 Recuento de Reticulocitos
El recuento de reticulocitos es un instrumento diagnóstico de gran importante, ya que su

número refleja la cantidad de eritrocitos producidos por la medula ósea.
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Los reticulocitos son hematíes que contienen restos de ARN (ribosomas), el cual es un
compuesto que se precipita en presencia de ciertos colorantes llamados vitales como el azul
de cresil brillante y da imágenes a formas filamentosas visibles mediante el microscopio
óptico.
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teñir con el
azul de cresil brillante. Este colorante en combinación con una misma cantidad de sangre
anti coagulada se mezcla y con la ayuda de la temperatura (baño maría) se produce la
coloración de éstos eritrocitos jóvenes visualizándose en el frotis sanguíneo.
 Sangre anticoagulada con EDTA.

 Colorante azul de cresil brillante.
 Pipeta Pasteur o goteros.
 Laminas porta objetos
 Tubos de ensayo.
 Microscopio
 Baño de María
 Cronometro
 Aceite de inmersión.
Procedimiento
 En el tubo de ensayo colocar dos gotas de sangre total con anticoagulante

 Inmediatamente adicionar con la ayuda de una pipeta Pasteur la misma cantidad de
colorante azul de cresil de brillante. Mezclar la solución.
 Colocar en baño maría por espacio de 15 minutos. Realizar extendido en lámina.
 Leer con objetivo de 100x.
 Contar número total de reticulocitos observados en 10 campos
 Sacar promedio
 El
resultado se da en porcentaje sobre cada 100 hematíes.
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Hematocrito Ideal:
Recién Nacido: 55 %
Niños Menores de 1 año: 35 %
Niño 1 -10 años: 38 %
Mujeres: 39 %
Hombres: 45 %
Adultos 0,2 – 2.0 %
Al nacer 2 - 6 %. A las dos semanas iguala los valores del adulto.
Causas de aumento: El número de reticulocitos aumenta en todas las circunstancias en las

que existe un incremento de la eritropoyesis, tales como en la hemólisis, como respuesta a
sangrados o tras el inicio de un tratamiento anti anémico que ha resultado eficaz.
Causas de disminución: Como la producción de reticulocitos es necesaria para compensar

las pérdidas fisiológicas de glóbulos rojos maduros, una disminución de su número es la
expresión de un estado arregenerativo o hipo regenerativo de la serie roja. Esta circunstancia
es típica de anemias aplásicas, anemias carenciales y enfermedades inflamatorias y
neoplásicas.

5.5 Recuento de Eosinófilos en Moco Nasal
Procedimiento diagnóstico que ayuda a identificar la presencia de problemas inflamatorios

que afectan a la mucosa nasal, incluyendo procesos infecciosos (bacterianos y virales),
alérgicos y de otra índole. Es útil no solo para establecer el diagnóstico, sino también para
evaluar la respuesta al tratamiento en los pacientes con rinitis.
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Este examen se realiza para ver que tipo de celularidad está presente en el moco nasal.
Orientará si el problema es de tipo infeccioso o alérgico o su combinación. Se realiza
mediante un frotis de la mucosa del cornete inferior, empleando un hisopo.
La mucosa o membrana mucosa es un tipo de tejido que reviste la cavidad nasal. Las
membranas mucosas son generalmente tejidos húmedos, bañados por secreciones, tal como
ocurre en la nariz. La composición del moco es el 95% es agua, 3% elementos orgánicos y
2% minerales. La cantidad secreta es de 0´1 a 0´3 ml/kg/.
 Colorante Wright
 Laminas porta objeto
 Microscopio
Procedimiento:
 Frotis de secreción nasal, dejar secar a temperatura ambiente y colorear con Wright
por 10 minutos.
 Realizar lectura con objetivo de inmersión
 Realizar recuento diferencial de polimorfonucleares, mono nucleares y eosinófilos en
100 células
Valor de Referencia Eosinófilos: 0 – 2 %
Los resultados serán:
Eosinófilos en el moco nasal por encima de 20 por campo corroboran la alergia en la

etiología.
Neutrófilos elevados: relacionado con la presencia de infecciones bacterianas agudas.
Linfocitos: sugiere procesos infecciosos de tipo crónico.
Células caliciformes: cuando predominan sugieren la presencia de alergia

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5.6 Velocidad de Sedimentación Globular
La eritrosedimentación o VSG constituye una medida de agregabilidad de los hematíes y

depende fundamentalmente de los siguientes factores:
 Tamaño de los hematíes

 Diferencia de los hematíes y el plasma.
 Viscosidad plasmática (concentración de fibrinógeno y/o globulinas).
 Temperatura ambiental.
La sedimentación se realiza en tres etapas:
 Hemaglutinación o tendencia de los hematíes a formar agregados en pilas de

monedas.
 Sedimentación o desplazamiento de los hematíes hacia el fondo del recipiente a
velocidad constante.
 Acumulo de hematíes en el fondo del recipiente.
De estas etapas la más importante es la primera, ya que de ella depende la velocidad de
todo el proceso. Así cuando más pequeños sean los agregados, más lentamente se
producirá la sedimentación y viceversa.
Aunque se trate de una prueba inespecífica, la determinación de la VSG es de gran utilidad
en clínica ya que fuera de las posibles variaciones fisiológicas (embarazo, deshidratación,
ejercicio, sobre hidratación, fiebre, etc.), constituye un signo de enfermedad.
Así mismo y debido a la frecuente correlación que suele observarse entre el valor de la VSG
y el grado de actividad de la enfermedad, su determinación resulta útil para seguir el curso
evolutivo de ciertas afecciones, entre las que se destacan los procesos inflamatorios.
Los eritrocitos poseen una carga electrostática negativa en su membrana, lo cual genera
fenómenos de repulsión que llevan a mantener los glóbulos rojos suspendidos conservando
su individualidad. Esta fuerza de repulsión se denomina potencial Z. En condiciones
normales, si se coloca la sangre en tubo vertical, las células por fuerza de gravedad caen por
que son más densas que el plasma.
 Tubos de Wintrobe.
 Soporte para tubos de Wintrobe.
 Jeringa con cánula.
 Reloj
 Método de Wintrobe
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Este método mide la tendencia de los eritrocitos a la sedimentación al colocar sangre

anticoagulada en un tubo pequeño. Se lee la columna de plasma al cabo de una hora de
reposo.
Procedimiento
 Mezclar suavemente la sangre por inversión para homogenizar la muestra.
 Con la ayuda de la aguja introducir la sangre dentro del tubo de Wintrobe hasta la
marca cero, evitar la formación de burbujas, colocar la pipeta en la gradilla y
contabilizar una hora.
 Al término de 60 min determinar la distancia recorrida por los eritrocitos en su caída y
reportarla en mm.
 Medir los milímetros descendidos de glóbulos rojos mediante la columna de plasma
por encima del paquete globular.
 Hombres: 0 - 15 mm/hora
 Mujeres: 0 - 20 mm/hora
 Niños: hasta 10 mm/h.
 Recién nacidos: 0-2 mm/h.
 Embarazadas: 40 mm/h a 45 mm/h.

 Método de Hematocrito
Este método mide la tendencia de los eritrocitos a la sedimentación al colocar sangre

anticoagulada en un tubo de microhematocrito. Se lee la columna de plasma al cabo de una
hora de reposo en la tabla de lectura para hematocrito.
Procedimiento
 Mezclar suavemente la sangre por inversión para homogenizar la muestra.

 Por capilaridad introducir la muestra en el microhematocrito
 Colocar el microhematocrito en la gradilla y contabilizar una hora.
 Al término de 60 min determinar la distancia recorrida por los eritrocitos en su caída y
reportarla en mm.
 Medir los milímetros descendidos de glóbulos rojos mediante la columna de plasma
por encima del paquete globular en la tabla de lectura para hematocrito.
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 Hombres: 0 - 15 mm/hora
 Mujeres: 0 - 20 mm/hora
 Niños: hasta 10 mm/h.
 Recién nacidos: 0-2 mm/h.
 Embarazadas: 40 mm/h a 45 mm/h.

5.7 Gota gruesa
La gota gruesa también denominada prueba para hemopárasitos, consiste en una muestra
de sangre total tomada en pico febril y extendido en placa, de forma que concentra de 6-20
veces más sangre que un frotis. Mayor cantidad de muestra en un espacio reducido facilita la
búsqueda del parásito al microscopio, presenta la ventaja de diagnóstico rápido en
parasitemias escasas. La prueba es de utilidad en el diagnóstico de paludismo.
Definición y Características Clínicas de la Malaria

Malaria es una enfermedad causada por protozoarios del género Plasmodium:
 P. falciparum
 P. vivax
 P. malariae
 P. ovale
 P. Knowlesi (en los últimos años en países del Asia)
Los parásitos del genero Plasmodium son transmitidos al hombre por mosquitos hembras del
genero Anopheles.
La transmisión puede ser:
 Vectorial: el Anopheles infectado, al picar, inocula los esporozoitos, forma infectante
del parasito.
 Inoculación directa de glóbulos rojos infectados por vía transfusional o casual por
pinchazos con jeringas contaminadas.
 Transmisión vertical: de una madre infectada al feto.
Tres de los parásitos causantes de malaria son encontrados exclusivamente en humanos: P.

falciparum, P. vivax y P. ovale. El P. malariae es encontrado también en simios africanos.
Períodos de Incubación
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El periodo de incubación abarca en promedio 10 a 14 días, tiempo durante el cual ocurre el

ciclo pre-eritrocítico en el hígado y pueden presentarse síntomas generales como cefalea,
mialgias, anorexia y vomito.
El periodo de incubación de la malaria adquirida a través de transfusión es de 48 a 72 horas.
Después del periodo de incubación comienza el ataque agudo.
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Las características clínicas de la malaria dependen de la especie de Plasmodium que afecta

al ser humano: Plasmodium vivax es el agente infeccioso que origina la malaria conocida
como fiebre terciaria; Plasmodium malariae produce la forma de paludismo más letal y
peligrosa conocida como fiebre terciana maligna; mientras que Plasmodium falciparum es el
causante de la mayoría de las muertes por malaria.
Una característica importante de la patogénesis de P. falciparum es su habilidad para
secuestrarse en la microsvasculatura venosa profunda y producir manifestaciones severas
que incluyen malaria cerebral, anemia profunda, insuficiencia respiratoria, insuficiencia renal
y malaria severa del embarazo.
Las características clínicas de la malaria dependen de:

 La especie de Plasmodium
 Número de parásitos
 Estado inmunitario del hospedero humano
Diagnóstico
El diagnóstico y tratamiento son los elementos fundamentales de la Estrategia Global de
Control de la Malaria. La detección precoz de los casos y la administración de tratamiento,
además de ser una medida altamente efectiva en términos de atención individual, con rápida
reducción de la incapacidad y cura en 100% de los casos oportunamente detectados, es en
términos colectivos, la acción más importante de prevención primaria e interrupción de
transmisión en el control de la malaria.
El diagnóstico de malaria se basa en:
Criterios Clínicos
 Historia de episodio malarico en el último mes.

 Fiebre actual o reciente (menos de una semana).
 Paroxismos de escalofríos intensos, fiebre y sudoración profusa.
 Cefalea, síntomas gastrointestinales, mialgias, artralgias,
 nausea, vomito.
 Anemia
 Esplenomegalia
 Evidencia de manifestaciones severas y complicaciones de malaria por P.
falciparum.
Criterios epidemiológicos
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 Antecedente de exposición, en los últimos 15 días, en áreas con transmisión activa de

la enfermedad (ocupación, turismo, desplazamientos, etc.).
 Nexo epidemiológico (tiempo y lugar) con personas que hayan sufrido malaria.
 Antecedentes de hospitalización y transfusión sanguinea.
 Antecedentes de medicación antimalárica en las últimas cuatro semanas.
Criterios de laboratorio
Diagnóstico por microscopía: con examen de gota gruesa o de extendido de sangre

periférica.
El examen de gota gruesa es el método diagnóstico más ampliamente difundido para el
diagnóstico de la malaria y el recomendado como primera opción en el proceso diagnóstico.
La gota gruesa consiste en el examen al microscopio de una gota de sangre obtenida
mediante punción digital de un dedo de la mano o del pie sobre una lámina portaobjetos.
 Lanceta
 Colorante Azul de metileno fosfatado
 Solución A
 Solución B
 Pipeta Pasteur o goteros.
 Laminas porta objetos
 Microscopio
 Aceite de inmersión
Procedimiento
 Tomar dos gotas gruesas por paciente.

 Láminas realizadas por punción capilar, rotuladas con el número consecutivo
 Diligenciar formato talonario gota gruesa sivigila ETV
 Se dejan secar a temperatura ambiente por 20 minutos, en un mesón horizontal y
ordenado. Se debe proteger de los insectos cuando sea necesario.
 Realizar la coloración. Ver anexo coloraciones
 Dejar secar a temperatura ambiente
Lectura de la gota gruesa

La lectura de la muestra se empieza a realizar en donde se observe un número adecuado de
células sanguíneas, teóricamente se deben observar entre 10 a 20 leucocitos, sin embargo
algunos pacientes con bajo recuento de leucocitos pudiendo tener menos glóbulos blanco
por campo.
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Para iniciar la búsqueda de formas parasitarias, se mueve el carro del microscopio buscando
los campos adyacentes hasta llegar al extremo de la muestra, en donde se mueve el carro de
manera lateral para devolverse por
una línea paralela a la ya
observada. Es semejante a un
movimiento de zigzag.
El Bacteriólogo (a) debe leer las dos gotas de las dos láminas para aumentar la posibilidad
de encontrar parásitos en los casos de bajas parasitemias. Sin embargo, si al observar un
mínimo de 300 campos microscópicos en objetivo de 100 x y no encontrar formas
parasitarias se considera que la muestra es negativa.
Para realizar una adecuada identificación parasitaria, se deben conocer las células
sanguíneas, como también reconocer
las estructuras del parásito. El parásito
que ocasiona la malaria tiene: núcleo,
citoplasma y según sea el estadio
puede o no tener pigmento malárico
y vacuola.
En cuanto a la morfología parasitaria es posible establecer generalidades así:

 El parásito más pequeño y de aspecto regular es el P. falciparum
 El multiparasitismo (la presencia de más de un parásito en un glóbulo rojo) es más
frecuente en P. falciparum
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 El doble punto de cromatina es más frecuente en P. falciparum.

 En todas las especies es posible ver concomitantemente tanto formas asexuadas
como sexuadas, sin embargo en P. falciparum existe un tiempo de 1 a 3 semanas en
el que se puede evidenciar solo formas asexuadas (trofozoitos) en circulación sin
presencia de gametocitos y posteriormente se genera la formación de gametocitos.
 La única especie con gametocitos crecientes o a manera de luna, banana o salchicha
es el P. falciparum.
 La única especie que tiene el pigmento malárico de los gametocitos a manera de
barras es P. falciparum, de tal manera que cuando se redondean por algún factor es
posible tener un criterio de diferenciación frente a los gametocitos de las otras
especies.
 Las parasitemias más altas son alcanzadas por P. falciparum debido a que parasita
todo tipo de glóbulos rojos, mientras que P. malariae y P. ovale usualmente presentan
las parasitemias más bajas de las cuatro especies parasitarias.
 De las tres especies circulantes en Colombia, es a P. vivax al que se le evidencia con
mayor facilidad las granulaciones o puntos de contacto del parásito con el glóbulo rojo.
En P. vivax se denominan granulaciones de Shüffner, en P. falciparum granulaciones
de Maurer y en P. malariae granulaciones de Ziemann.
 Las dos especies que agrandan y distorsionan el glóbulo rojo son P. vivax y P. ovale.
Sin embargo, P. ovale tiende a ovalarlo. Estas dos especies parasitan los glóbulos
rojos jóvenes.
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En Colombia la infección mixta más frecuente está dada por P. falciparum y P. vivax. En este
contexto, la infección mixta se puede establecer cuando se evidencian formas parasitarias de
P. vivax y concomitantemente gametocitos de P. falciparum.
Adicionalmente, se establece infección mixta cuando ante la ausencia de gametocitos de P.
falciparum, se evidencia circulación de P. vivax y se observan formas asexuadas regulares
compatibles con P. falciparum en una proporción ≥40% en 100 formas parasitarias
observadas.
Recuento parasitario
Un diagnóstico adecuado para malaria incluye reportar tanto la(s) especie(s) parasitaria(s)
como el recuento. El recuento tiene importancia porque ayuda a definir la conducta y el
tratamiento que se le debe suministrar al paciente, de igual forma tiene gran utilidad para
hacer el seguimiento a la respuesta terapéutica.
Observación del campo microscópico

El recuento en la gota gruesa se debe realizar frente a los leucocitos (glóbulos blancos). Se
realiza de manera ordenada para lograr contar todos los leucocitos y todos los parásitos
presentes en el campo. Por lo tanto, se recomienda seguir el sentido de las manecillas del
reloj como indica la figura
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Fórmula del recuento parasitario en gota gruesa

Si se diagnostica una muestra positiva se debe confirmar
especie o especies parasitarias (infección mixta). Luego
se realiza el recuento parasitario teniendo en cuenta la siguiente fórmula:
Número de parásitos X 8000

_______________________
Número de Leucocitos (200)
 Si al contar 200 leucocitos se observan 10 o más parásitos, aplicar la fórmula en base

a 200 leucocitos. Si al contar 200 leucocitos se observan 9 o menos parásitos,
continuar el recuento hasta llegar a los 500 leucocitos y aplicar la fórmula en base a
los 500 leucocitos.
 Si se cuentan más de 500 parásitos sin llegar a contar los 200 leucocitos, el recuento
se dará por terminado cuando se finalice la lectura del último campo y la parasitemia
debe calcularse según la fórmula anterior.
 El bacterióloga (o) debe realizar la lectura de la gota gruesa mínimo en 20 minutos,

teniendo en cuenta que debe contar mínimo 300 campos microscópicos.
 Para el informe de resultados del diagnóstico Plasmodium spp. es necesario informar

método de diagnóstico (Gota gruesa), positividad/negatividad de la muestra, especie
parasitaria infectante y recuento parasitario en unidades parásitos/μL.
Positivo: se interpreta como positiva una lámina de gota gruesa en la que se observen
formas parasitarias compatibles con especies de Plasmodium spp.
Negativo: se interpreta como negativa una lámina de gota gruesa en la que no se observen
formas parasitarias compatibles con Plasmodium spp.
El uso de la prueba rápida para el diagnóstico de malaria puede fortalecer la atención del
paciente con malaria y será empleada en el siguiente caso: como complementariedad del
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diagnóstico microscópico y ante la duda de una de las especies de Plasmodium spp.

observadas al microscopio.
Para el informe de resultados del diagnóstico de parásitos del género Plasmodium spp es
necesario informar método de diagnóstico (Gota gruesa, extendido o prueba rápida),
positividad/negatividad de la muestra, especie parasitaria infectante y recuento parasitario en
unidades parásitos/μL.
Positivo: se interpreta como positiva una lámina de gota gruesa en la que se observen
formas parasitarias compatibles con especies de Plasmodium spp o una prueba rápida válida
que cumpla con los criterios de lectura como positiva según el fabricante.
Negativo: se interpreta como negativa una lámina de gota gruesa en la que no se observen
formas parasitarias compatibles con Plasmodium spp después de observar por lo menos 300
campos microscópicos con objetivo 100x., o una prueba rápida válida que cumpla con los
criterios de lectura como negativa según el fabricante.
Si se diagnostica una muestra positiva se debe confirmar especie; descartar una posible
Infección mixta bajo los siguientes criterios:
 Observación de formas sexuadas y asexuadas de P. vivax, junto con gametocitos de
P. falciparum
 Observación de formas sexuadas y asexuadas de P. vivax, junto con formas
asexuadas de P. falciparum, en cantidades similares de las dos especies. En este
caso, se realiza un recuento a 100 parásitos y se determina el porcentaje de cada
especie. Para definir infección mixta debe observarse >40% de formas asexuadas de
P. falciparum.
Si persisten dudas en la especie se debe usar el extendido de sangre para observar los
cambios que ocasiona el parásito al glóbulo rojo o la morfología más definida y clara de las
estructuras parasitarias.
Consideraciones especiales
 Si luego de realizar la gota gruesa el resultado es negativo pero se tiene una alta
evidencia epidemiológica de padecer malaria, se sugiere tomar muestras seriadas
cada 12 horas hasta por 48 horas.
 En el caso de examinar una muestra de un paciente que presente sólo gametocitos de
P. falciparum se debe indagar si fue previamente diagnosticado con malaria por esta
especie y sobre el esquema de tratamiento recibido: si recibió el tratamiento adecuado
y completo, se informa la muestra como positiva, pero lo anterior no indica
enfermedad malárica y no es necesario suministrarle tratamiento nuevamente ya que
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la primaquina es un gametocida que garantiza la supresión total de la inefectividad de

los gametocitos para los vectores. Si por el contrario, el paciente no recibió tratamiento
o este fue incompleto, se debe suministrar el esquema completo de acuerdo a los
lineamientos nacionales vigentes.
 En el reporte al paciente con tratamiento completo es necesario realizar las siguientes
especificaciones: Cuando se observen solamente gametocitos de P. falciparum
especificar que esta forma no ocasiona sintomatología ni malaria en el paciente.
 Durante la lectura de la gota gruesa el personal de bacteriología debe utilizar el tiempo
mínimo establecido (20 minutos), donde no se permite modificar tiempo por presión
del personal médico o paciente.
 Si durante turno nocturno (madrugada) se presenta aumento en la recepción de
láminas de gota gruesa para lectura, revisar las que considere pertinente sin alterar
tiempos de lectura e informar al personal médico que el próximo compañero que
reciba turno continuará con la lectura con el fin de evitar error en el diagnóstico. Si se
tiene duda en la lectura de la especie se recomienda solicitar apoyo a otro compañero
o en su defecto al personal del laboratorio de salud pública.
Registro: Registro diario de diagnóstico y tratamiento de malaria

Responsable: Bacteriólogo (a) realiza la lectura, el personal auxiliar puede colaborar en el
montaje.
Reporte de Resultados: Ver punto 12
5.8 Prueba de Ciclaje - Drepanocitos

La anemia drepanocitica o anemia falciforme es una enfermedad homocigota de la
hemoglobina “S”, en el cual el Ácido Glutámico del aminoácido en la sexta posición sobre la
cadena beta es sustituido por la Valina. La sustitución se realiza en la superficie de la
molécula que conlleva al cambio de la carga y por lo tanto de movimiento electroforético. La
HbS es libremente soluble, cuando se encuentra completamente oxigenada, al eliminarla
ocurre la polimerización de la Hb anormal formando tactoides rígidos que deforman la
célula dándole la forma de hoz o media luna. Existen varios métodos para su determinación:
 Método de metabisulfito de sodio al 2%

 Método de solubilidad en tubo
 Test cualitativo de siclindex
En el laboratorio clínico HSJG se realiza en sangre venosa recogida en EDTA y por el

método de metabisulfito de sodio.
La sangre se mezcla con metabisulfito de sodio al 2%, un agente reductor fuerte que
desoxigena la hemoglobina formando células falciformes en presencia de hemoglobina “S”.
Materiales y reactivos

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 Laminas portaobjeto y laminillas cubre objeto

 Metabisulfito de sodio al 2%
 Tubo de ensayo
 Vaselina o parafina
Procedimiento
 Colocar 4 gotas de metabisulfito de sodio al 2% en un tubo pequeño.

 Añadir 2 gotas de sangre a la solución de metabisulfito de sodio al 2% y mezclar
muy bien.
 Colocar una gota de la mezcla en un portaobjeto
 Cubrir la mezcla con un cubre objeto.
 Extraer el remanente con una gasa o con un papel de filtro ejerciendo una suave
presión sobre el cubre objeto.
 Sellar alrededor de la lámina con parafina o vaselina.
 Examinar la preparación para buscar células falciformes inmediatamente, a los 30
minutos, a la hora y a las dos horas.
 El resultado positivo se determina por la presencia de células falciformes
dentro de este tiempo, como resultado presuntivo.
 La lectura definitiva se realiza a las 24 horas.
Causas de error

Falsos negativos:
 Cantidad de HbS pequeña menor de 7%
 Deterioro del agente reductor
 Exceso de muestra
 Burbujas debajo del cubreobjetos
Falsos positivos
 Desecamiento de la lámina
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Registro: Libro de Hematología

5.9 Células L.E.
Fundamento
El lupus eritematoso diseminado es una enfermedad inflamatoria crónica del tejido conectivo
que ocasiona cambios bioquímicos y estructurales en la piel, articulaciones y músculo, por lo
general con ataque de múltiples órganos. A la postre puede causar la muerte por
insuficiencia de órganos vitales especialmente los riñones.
En el lupus eritematoso se produce un anticuerpo de carácter antinuclear. Este anticuerpo
puede atacar a los neutrófilos. La célula se rompe y queda en libertad el núcleo, convertido
en una masa eosinofílica amorfa y de gran tamaño. Esta masa es fagocitada por otro
neutrófilo el cual ocupa casi todo el espacio celular. La imagen que se presenta una vez
hecha la tinción, es inconfundible y recibe el nombre de células LE.
La técnica que se presenta a continuación intenta provocar el fenómeno celular LE in vitro, lo
que favorece su producción machacando el coágulo a través de una fina malla. Sin embargo,
ocasionalmente pueden presentarse las células LE en otra enfermedad en la que también se
producen anticuerpos antinucleares, particularmente en las llamadas colagenopatías.
Material y Reactivos
 Sangre venosa tomada sin anticoagulante 10 ml

 Incubadora
 Colador de malla fina.
 Vaso de precipitado de 250 ml
 Mortero con mazo
 Pipeta Pasteur.
 2 Tubos de Wintrobe
 Aguja de Wintrobe
 Centrífuga.
 Coloración de Wright
 Portaobjetos.
Procedimiento
Una vez coagulada la sangre incúbela a 37°C por 2 horas o el tiempo necesario para que el
coágulo se retraiga
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Colocar la malla fina sobre el mortero, verter el contenido del tubo previamente incubado
sobre la malla y con el mazo machacar el coágulo, recogiendo el colado en el mortero.
Con la pipeta Pasteur recoger el colado y llenar los tubos de Wintrobe tratando que ambos
queden bien calibrados. Centrifugar por 5 ó 15 minutos.
Tomar del tubo de Wintrobe la capa de leucocitos y hacer una extensión sobre un
portaobjetos, ayudándose con otro.
Teñir con la coloración de Wright
Revisar la preparación con el objetivo de inmersión.
Nota: Esta prueba se confirma con otros estudios como la presencia de anticuerpos
antinucleares o anticuerpos contra ADN.
Factores que interfieren en los resultados
Hemólisis, fármacos como la Isoniacida pueden dar falsos positivos.

Algunos pacientes con artritis reumatoide, con esclerodermia y con sensibilidad a los
medicamentos también muestran un examen de
células de lupus eritematoso positivo.

5.10 Retracción del Coagulo
Al coagularse en forma espontánea la sangre, se forma una masa sólida con todos los
componentes sanguíneos. Con el tiempo, la acción de las plaquetas sobre la red de fibrina
retrae el coagulo reduciendo su masa
El proceso de retracción del coágulo conduce a la consolidación de un coágulo hemostático o
trombo.
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La retracción ocurre por la interacción entre los pseudópos de las plaquetas y las hebras de
fibrina. Esto ocurre dentro de los 60 minutos y el coágulo ocupa el 50% del volumen total de
sangre
La retracción del coágulo resulta en una masa estabilizada de plaquetas y de fibrina que
cierra firmemente el vaso injuriado para prevenir futuras pérdidas de sangre.
La retracción comienza a la hora con un máximo a las 24 horas.
La retracción del coágulo depende de la función plaquetaria, de una proteína contráctil
proveniente de la membrana plaquetaria (trombostenina), del magnesio, ATP y piruvato
quinasa.
La concentración y la habilidad funcional del fibrinógeno y el nivel del hematocrito deben
estar dentro de los límites normales para arribar a una conclusión válida acerca de la función
plaquetaria.
 Tubos de ensayo
 Baño de María
 Alambre de 1 mm
 Equipo de Venopunción
Procedimiento
En el tubo de ensayo colocar 5 ml de sangre venosa recientemente extraída.

Introducir el alambre hasta el fondo del tubo.
Incubar en baño maría a 37°C, durante una hora.
Transcurriendo ese tiempo, sacar cuidadosamente el alambre con el coagulo adherido,
permitiendo que el plasma escurra dentro del tubo durante unos 2 minutos.
Leer el volumen que queda en el tubo y anotarlo como porcentaje con relación del volumen
total de sangre inicial. Utilizando una regla de tres, de la siguiente manera:
Volumen inicial
5 ml ___________ 100%
Volumen liquido
Exudado _________X
Con este método la retracción del coagulo tiene como valores de referencia de 40 a 65%
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.
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MICROSCOPIA Y
LÍQUIDOS
CORPORALES
6. MICROSCOPIA Y LIQUIDOS CORPORALES
6.1 Parcial de Orina
El examen de la orina constituye un indicador importante del estado de salud del paciente. Es
una ayuda valiosa en el diagnóstico y tratamiento de las enfermedades renales, del aparato
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urinario y en la detección de enfermedades metabólicas o sistémicas que no están

directamente relacionadas con el riñón.
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables para
evitar errores de interpretación. La identificación correcta del paciente es esencial. Ver
Manual toma, Manipulación y Conservación de muestra
 Tubos de ensayo
 Tiras Reactivas
 Láminas
 Laminillas
 Microscopio
 Centrifuga
 Cronómetro o Timer
 Marcador
Procedimiento
 Verificar los datos registrados en el frasco recolector

 Registrar al paciente en el libro de registro de Uroanálisis
 Mezclar bien la orina.
 Extraer solamente la tira reactiva que va a ser usada inmediatamente y tape de nuevo
el frasco.
 Observar que los colores de las áreas reactivas de la tira correspondan a los de las
cartas de colores. En caso de observarse un cambio de color se deben descartar.
 Tener cuidado de no tocar las áreas reactivas.
 No sacar el desecador que posee el frasco, sin que se hayan usado todas las tiras.
 Conservar a una temperatura inferior a 30 grados centígrados, en un lugar seco y
fresco pero no refrigerado.
 Envasar la orina en un tubo de ensayo debidamente marcado con los nombres del
paciente, sumergir la tira reactiva en la orina de acuerdo al tiempo establecido en el
frasco de tiras de orina.
 Secar en papel absorbente el resto de orina
 La auxiliar del laboratorio debe realizar la lectura visual y registrarla en el libro de
Uroanálisis.
 Centrifugar 10 – 15 ml de orina durante 5 minutos a una velocidad de 2500 r.p.m.
(si el volumen de la muestra es demasiado pequeña señalar en el informe que los
resultados se obtuvieron de una muestra escasa).
 El sobrenadante se descarta y se agita el sedimento aplicando una gota de este sobre
un portaobjetos, extendiéndolo homogéneamente con un cubreobjetos.
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 El personal de bacteriología debe examinar la muestra inicialmente con escaso

aumento (10x) para obtener una visión general, luego se intensificará el aumento
(40x), lo cual permitirá identificar y contar el número de distintos elementos formes.
La luz del microscopio debe estar amortiguada para dar un contraste adecuado (se
cierra parcialmente el iris del diafragma y se ajusta el condensador hacia abajo hasta
lograr el contraste optimo).
 Examen físico
 Volumen: El volumen de orina requerido depende del número de análisis solicitados,

sin embargo debe procesarse un volumen constante de 12 – 15 ml para el análisis de
rutina.
 Aspecto: Puede ser transparente, ligeramente turbio o turbio.
 Color: Puede presentar una amplia gama de colores, blanca, amarilla, anaranjada,
rosada, roja, castaña, púrpura, negro, azul e inclusive verde, dependiendo de sus
constituyentes y su concentración.
En condiciones normales el color de la orina va de amarillo hasta ámbar. Se pueden

encontrar colores anormales debido a la presencia de elementos anormales en la orina como
por ejemplo sangre, medicamentos, alimentos y otros pigmentos.
 Examen Químico
Se pueden observar por medio de la tira reactiva, esta es una banda angosta de plástico con
pequeños tacos adheridos, que contienen un reactivo diferente para cada determinación, lo
que permite la evaluación simultánea de varias pruebas.
Se lleva a cabo una reacción química productora de color cuando el papel absorbente entra
en contacto con la orina. Las reacciones de color se interpretan comparando el color
producido en el papel con la gráfica proporcionada por el fabricante.
La utilización de tiras reactivas permite la detección de diversos elementos que pueden

ocasionalmente estar presentes en la orina, siendo su uso de fácil realización, bajo costo y
resultados inmediatos. Se trata de la determinación semicuantitativa de proteínas, glucosa,
hemoglobina, mioglobina, leucocitos nitritos, cuerpos cetónicos, bilirrubina, urobilinogeno así
como la verificación de pH y densidad.
 pH: Dentro de las funciones del riñón está el mantener el equilibrio ácido – base en el
organismo. Para mantener un pH constante en la sangre debe modificar el pH de la
orina para compensar la dieta y los productos del metabolismo.
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Esto se produce en la región distal de la nefrona con la secreción de iones hidrogeno,

amoniaco, fosfatos y ácidos orgánicos débiles en el filtrado y con la reabsorción de
bicarbonatos en los túbulos contorneados.
Es el reflejo de la acidez de la orina. El pH normal va de 5.5 - 6.5. Influyendo el régimen

dietético de cada paciente. Este se determina utilizando una Tira Reactiva lectora de pH la
que se sumerge en una muestra de orina por dos o tres segundos y luego se compara el
color obtenido con una carta patrón de colores.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en el principio del doble indicador que da
un espectro amplio de colores que cubre el rango completo de pH urinario.
El color del área de reacción de la tira va desde el anaranjado, pasa por el amarillo y verde
hasta el azul.
De no seguir el procedimiento correcto para eliminar exceso de orina en la tira, se puede

producir un fenómeno conocido como “corrimiento” en el cual el amortiguador ácido del área
reactiva para proteínas contamina el área de pH dando un resultado falsamente disminuido.
Tiempo de lectura: 60 segundos.
 Densidad
Esta varía en razón directa a la cantidad de sólidos, principalmente cloruros, urea, sulfatos, la
densidad normal va de 1.015 - 1.025.
 Proteínas
En el riñón normal solo una pequeña cantidad de proteínas de bajo peso molecular se filtra
en el glomérulo. La estructura de la membrana glomerular impide el pasaje de proteínas de
alto peso molecular. Debido a su bajo peso molecular, la albúmina es la proteína sérica que
existe en la orina normal, la mayor parte de proteínas filtrada se reabsorbe en los túbulos.
La proteína de TAMM-HORSFALL es una mucoproteina excretada normalmente por los

túbulos renales, esta proteína forma la matriz de la mayoría de los cilindros urinarios.
Otras proteínas incluyen, fracciones microglobulinicas séricas y tubulares y proteínas de las

secreciones prostáticas, seminales y vaginales.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en el error proteico de los indicadores,

fenómeno que se caracteriza porque el punto de cambio de color de algunos indicadores de
pH es diferente en presencia de proteínas. Por lo general el indicador cambia del amarillo al
azul o verde entre pH 3 y pH 4, pero en presencia de proteínas se produce un error en el
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comportamiento del indicador. La intensidad de color es proporcional a la cantidad de

proteínas presentes.
Para orinas con alta gravedad específica, la tira podrá indicar trazas aún cuando sea normal
la concentración de proteínas presentes. Se necesita del juicio clínico para evaluar el
significado de los resultados de trazas.
Cualquier color por encima de trazas es significativo de proteinuria.
Falsos positivos: Orinas muy alcalinas (pH 9) como consecuencia de medicación alcalina,
orinas añejas pueden superar el buffer ácido del reactivo, con cambio de color del área en
ausencia de proteínas, contaminación de la orina con secreciones vaginales, semen, moco
espeso, pus o sangre.
Falsos negativos: En orinas muy diluidas; el área reactiva es más sensible a la albúmina
que a las globulinas, hemoglobina, proteína de Bencen-Jones y mucoproteina, por lo tanto un
resultado negativo no descarta la presencia de estas otras proteínas.

 Glucosa
La cantidad de glucosa que aparece en la orina depende de nivel de glucemia, de la
velocidad de filtración glomerular y del grado de reabsorción tubular. Por lo general no existe
glucosa en la orina hasta que el nivel de glucosa en sangre no supere los 160 – 180 mg/dl,
cifra que es el umbral renal normal para la glucosa.
Además de la glucosa, también pueden aparecer galactosa, lactosa, fructosa, manosa y

pentosa. De estos azucares el más significativo es la galactosa, que aparece en lactantes
con un defecto congénito del metabolismo, en el que la ausencia de la enzima galactosa-1-
fosfato-uridil transferasa evita el desdoblamiento de la galactosa ingerida y da por resultado
falta de crecimiento y otras complicaciones incluyendo la muerte.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en una reacción enzimática de doble

secuencia; una enzima de glucosa oxidasa, cataliza la formación del ácido glucónico y
peroxido de hidrógeno al oxidar la glucosa.
Una segunda enzima, la peroxidasa, cataliza la reacción de peróxido de hidrógeno con
yoduro de potasio (cromógeno); al oxidarse el cromógeno da diferentes colores que van
desde el verde hasta el café, dependiendo de la cantidad de glucosa.
La reacción es específica para la glucosa; ningún otro azúcar excretado en la orina da

resultado positivo. La sensibilidad del área de glucosa está entre 75 – 125 mg/dl.
La reactividad puede estar influida por la gravedad específica de la orina y la temperatura.
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Falsos Positivos: Contaminación de los recipientes con peróxido o detergentes oxidantes

fuertes.
Ácido Nalidíxico, Cefalosporinas, Probenecid, conservadores urinarios (formalina y
formaldehido), concentraciones altas de ácido ascórbico
Falsos Negativos: Orinas con densidad superior a 1020, en particular con pH elevados, en
cifras que tienen escasa glucosuria debido a concentraciones de ácido ascórbico mayores a
50mg/dl y a niveles moderadamente altos de cuerpos cetónicos (<40 mg/dl).

.
 Cetonas
Los cuerpos cetónicos se forman durante el catabolismo de los ácidos graso. Cuando la
acetil-CoA no puede entrar en el ciclo de Krebs es desviada hacia la formación de cuerpos
cetónicos.
Dentro de los cuerpos cetónicos tenemos: ácido acetoácido (ác. Diabético), ác. B-
hidroxibutirico, acetona. El ácido acetoacético es la primera cetona que se forma a partir de
la aceti-CoA y las demás se forman a partir del ácido acetoacético, este y el ác. B-
hidroxibutirico constituyen combustibles normales de la respiración y son fuentes importantes
de energía, de hecho, el músculo cardiaco y la corteza renal prefieren usar acetoacetato en
lugar de glucosa.
La mayor parte de acetona producida en el organismo se elimina a través de los pulmones.

El olor a acetona puede detectarse en el aliento del individuo con altos niveles de cetonas en
la sangre. Las proporciones que se pueden encontrar en la sangre son: 78% ác. B-
hidroxibutirico, 20% ác. Acetoacético, 2% acetona.
Normalmente, no aparecen en la orina cantidades cuantificables de cetonas, porque toda la

grasa metabolizada es desdoblada por completo hasta bióxido de carbono y agua.
Sin embargo, cuando se altera el uso de carbohidratos como fuente principal de energía, se
detectan cetonas en la orina.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en la reacción de nitroprusiato de sodio con

el ácido acetoacético desarrollando un color rosado cuya intensidad depende de la
concentración de las cetonas en la orina, la prueba es específica para ácido acético y no hay
reacción de color con la acetona o ácido B-hidroxibutírico.
Falsos positivos: Orinas con densidad alta y pH bajos, orinas muy pigmentadas, grandes
cantidades de metabolitos de levadota, compuestos como el ácido sulfúrico – 2
mercaptoetano.

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 Sangre
Puede detectarse: hematíes (hematuria), hemoglobina (hemoglobinuria) y mioglobina

(mioglobinuria).
Hematuria: Presencia de sangre o de hematíes en la orina. Orinas muy alcalina o de muy

baja densidad provocan lisis de los hematíes observándose eritrocitos acrómicos o
corpúsculos fantasmas.
Los hematíes pueden venir desde el glomérulo hasta la uretra
Hemoglobinuria: Presencia de hemoglobina libre en la orina como consecuencia de la

hemólisis intravascular.
La hemoglobinuria sin hematuria se debe a la presencia de Hb libre en la sangre y puede
llegar a producir daño renal.
La hemoglobina liberada se une rápidamente a la haptoglobina y es eliminado de la
circulación por el sistema RE. (Vida media es de 2 a 3 horas).
La Hb plasmática libre, no unida a la haptoglobina se filtra a través de los glomérulos, es
reabsorbida en parte por el epitelio tubular, donde el Fe es extraído y depositado en el
interior de las células en forma de ferritina y hemosiderina.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en la actividad tipo peroxidasa de la Hb

(hidroperoxidasa de cumene) y de la mioglobina, que catalizan la oxidación de un indicador
(tetrametilbenzidina) por acción de un peróxido orgánico.
Los hematíes intactos de la orina se hemolizan al hacer contacto con el taco reactivo.
Puntos verdes: hemoglobina liberada que reacciona con el reactivo. Verde o verde uniforme,
a azul oscuro: Hb libre y la mioglobina.
Si la correlación del examen microscópico con los resultados químicos no implica hematuria,
deben realizarse evaluaciones y estudios adicionales para determinar si el resultado positivo
se debe a la presencia de hemoglobina o de mioglobina.
Falsos positivos: Concentraciones altas de contaminantes oxidantes como hipoclorito,

cuando hay infección urinaria con producción de peroxidasa bacteriana, en el periodo
menstrual.
Falsos Negativos: Orinas con alta densidad, presencia de ácido ascórbico en cantidades
mayores a 5 mg/dl, cantidades excesivas de nitritos, proteínas elevadas, pH urinario menor
de 5, que la orina no se mezcle bien.
Tiempo de lectura: 60 segundos
 Bilirrubina
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Pigmento biliar de color amarillo rojizo que resulta de la degradación de la hemoglobina.

En condiciones normales, la vida media de los eritrocitos es alrededor de 120 días y luego se
destruyen en el vaso e hígado por las células fagocíticas del sistema reticuloendotelial.
La hemoglobina liberada se desdobla en sus componentes: hierro, proteínas y protoporfirina.
El hierro y las proteínas son usadas de nuevo en el cuerpo y la protoporfirina restante es
convertida a bilirrubina por las células del sistema reticuloendotelial.
Luego, se libera la bilirrubina en la circulación donde se fija a la albúmina y es transportada al

hígado. En este punto, la bilirrubina circulante no puede ser excretada por los riñones, ya que
no solo está unida a la albúmina, sino que también es insoluble en agua.
En el hígado la bilirrubina se conjuga con el ácido glucorónico mediante la acción de la
glucoroniltransferasa para formar diglucorónido de bilirrubina, hidrosoluble.
Esta bilirrubina conjugada no aparece en orina, ya que pasa en forma directa del hígado al
conducto biliar y luego al intestino, en donde las bacterias la reducen a urobilinógeno y
finalmente se excreta en las heces en forma de urobilina
La aparición de bilirrubina en la orina es la primera indicación de enfermedad hepática y con

frecuencia se detecta mucho antes del desarrollo de la ictericia.
La bilirrubina proporciona una detección temprana de hepatitis, cirrosis, enfermedad de
vesícula biliar y cáncer.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en la unión de la bilirrubina en medio fuerte

ácido, con dicloroanilina diazotizada; el color del área de reacción cambia a diferentes tonos
de color café. El nivel mínimo de detención está entre 0.4 y 0.8 mg/dl
Cualquier cantidad de bilirrubina se considera anormal y se requiere de una evaluación más

a fondo. Los colores atípicos (diferentes a los cuadros de color negativo y positivo de la
carta de colores) pueden indicar que hay pigmentos biliares anormales derivados de la
bilirrubina que pueden enmascarar la reacción, por lo que es conveniente realizar pruebas
adicionales. Debido a que se trata de un método semicuantitativo, los bloques de color
especificados en la etiqueta corresponden aproximadamente a las siguientes
concentraciones más o menos:
Negativo: 0 mg/dl, Bajo: 0.8 mg/dl, Moderado: 1.6 mg/dl, Alto: 3.2 mg/dl
La bilirrubina se excreta en la orina, conjugada con el ácido glucorónico y este compuesto es
muy inestable, desapareciendo de la orina en reposo especialmente si se expone a la luz por
tanto es importante analizar la orina lo más pronto posible.
Falsos positivos: Dosis altas de Sulfato de indócil y clorpromacina.
Falsos negativos: Altas concentraciones de ácido ascórbico, altas concentraciones de

nitritos, bilirrubina se oxidó a biliverdina.
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 Urobilinógeno
Al igual que la bilirrubina el urobilinógeno es un pigmento biliar que resulta de la degradación
de la hemoglobina. Se produce en el intestino por la degradación de la bilirrubina por las
bacterias.
Casi la mitad del urobilinógeno se reabsorbe del intestino hacia la sangre, circula de nuevo al
hígado y se excreta otra vez hacia el intestino a través del conducto biliar.
El urobilinógeno que queda en el intestino es excretado en las heces, donde es oxidado a

urobilina, pigmento que causa el color pardo característico de las heces.
El urobilinógeno aparece en orina porque al circular por la sangre en camino hacia el hígado,
pasa a través de los riñones y se filtra en el glomérulo por lo tanto una pequeña cantidad de
urobilinógeno, menos de 1 mg/dl se encuentra normalmente en la orina.
Parece ser que el pico de excreción de urobilinógeno se produce entre las 14 y 16 horas, de
forma que cuando se investiga el daño hepático es aconsejable recolectar la orina en ese
momento.
Reacción en tiras reactivas: La prueba se basa en la reacción de Ehrlich modificada, en la

cual el P-dietilamino-benzaldehido reacciona en un medio fuertemente ácido, con el
urobilinógeno produciendo colores que varían desde rosado hasta rojo.
Las pruebas en tiras reactivas no pueden detectar la ausencia de urobilinógeno, que es

significativo en la obstrucción biliar.
Falsos positivos: ácido para-amino benzoico, sulfonamidas.

Falsos negativos: Contaminación con formol, orinas con grandes cantidades de nitritos, las
orinas muy pigmentadas puede dificultar las reacciones de color.
 Nitritos
Se piensa que la mayor parte de la infección de vías urinarias empiezan en la vejiga como
resultado de contaminación externa y si no se trata, evolucionan hacia arriba a través de los
uréteres a los túbulos, pelvis renal y riñón.
La prueba de nitritos es valiosa para la detección de infección vesical inicial (cistitis), ya que
con frecuencia los pacientes están asintomáticos o presentan síntomas vagos que no hacen
que el médico solicite un urocultivo.
También es importante para la valoración de tratamientos con antibióticos.
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Las bacterias comunes que causan infección del tracto urinario son: E. coli, Enterobacter
spp, Citrobacter spp, Klebsiella spp y Proteus spp, estas bacterias reducen el nitrato de la
orina a nitritos.
Reacción en tiras reactivas: En el medio ácido del área reactiva el nitrito producido
reacciona con el ácido P-arsanílico formando un compuesto diazónico el cual se une con
tetrahidro benzoquinolina produciendo un color rosado.
Aunque se pueden producir diferentes tonos de rosa, la prueba no mide el grado de

bacteriuria y cualquier grado de rosa se considera significativo de infección urinaria.
La prueba es específica para nitritos y cuando es positiva sugiere la presencia de 100.000 o
más colonias de bacterias.
Puede haber una prueba negativa cuando la infección urinaria es debida a microorganismos
que no contienen reductosa para convertir nitratos a nitritos en la dieta, como lo son los Gram
positivos y levaduras, Cuando la orina no ha sido retenida suficiente tiempo en la vejiga como
para que el nitrato sea reducido a nitritos (cuatro horas o más), o cuando no hay presencia
de nitratos en la dieta, aún si se encuentran microorganismos que contengan reductasa y se
cumple el tiempo de incubación.
Falsos positivos: Si la prueba no se realiza en orinas frescas, ya que la multiplicación de

bacterias contaminantes pronto producen cantidades medibles de nitritos.
Falsos negativos: Concentraciones de ácido ascórbico de 25 mg/dl o mayores, inhibición

del metabolismo bacteriano por los antibióticos. La reducción de nitritos a nitrógeno no
detectable que se puede presentar cuando existe gran número de bacterias.
Tiempo de lectura: 60 segundos

Valor de Referencia: positivo o negativo
 Leucocitos:
Tiene significado clínico en infección de vías urinarias, en la valoración de tratamiento con

antibióticos.
El recuento de leucocitos puede hacerse al observar el sedimento urinario con el microscopio
o por las tiras reactivas donde la prueba se basa en el contenido de la estearasa de los
polimorfos nucleares.
Reacción en tiras reactivas: La estearasa cataliza la hidrólisis de esteres de aminoácidos

pirrólicos liberándose 3 hidroxi-5 fenol pirrol que a su vez, reacciona con una sal de diazonio
y se produce un color púrpura. La sensibilidad del área de reacción está entre 5 y 15
leucocitos por campo de mayor aumento.
Falsos negativos: Glucosuria de más de 3 g/dl, cefalexina, tetraciclina y ácido oxálico.
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Tiempo de lectura: 2 minutos.
Manejo Tiras Reactivas

Dispensar en tubo de ensayo, la orina fresca, bien mezclada, y sin centrifugar, 10-12 ml.
Sumergir completamente las áreas de pruebas de la tira y retirarla en forma inmediata, debe
tenerse cuidado de no tocar las áreas reactivas.
Eliminar el exceso de orina de la tira tocando el borde de ésta en el frasco que contiene la
muestra.
En el momento apropiado comparar las áreas reactivas con la correspondiente carta de
colores proporcionadas por el fabricante.
Control De Calidad De Las Tiras Reactivas:
Deben protegerse del deterioro por la humedad, por sustancias químicas, volátiles, calor y
luz.
Su presentación general es en envases opacos y con un desecante, los cuales cuando no
están en uso se deben almacenar con la tapa bien cerrada en un área fresca.
Deben respetarse la fecha de caducidad, así aparentemente no haya deterioro de las partes
reactivas.
La bacterióloga debe verificar funcionamiento con Orinas Control el primer día hábil de la
semana. Ver Manual de Control de Calidad.
 Examen Microscópico
Examen sencillo del sedimento urinario en el que mediante la observación cuidadosa de

estructuras de diferente forma y origen: Como cilindros, células, cristales, leucocitos,
bacterias, hematíes, moco y otros y teniendo en cuenta la correlación entre tales estructuras
y el análisis fisicoquímico se puede realizar el diagnóstico y seguimiento tanto de
enfermedades renales y del tracto urinario como de enfermedades metabólicas y sistémicas
no relacionadas directamente con el riñón.
Para que esta identificación visual sea rigurosa y para que el examen sea de excelente
calidad se requiere, sin embargo, adoptar un sistema uniforme en la toma de muestras, el
análisis físico-químico, la estandarización en la obtención del sedimento, la lectura
microscópica y el logro del resultado.
En una persona sana, la orina contiene menos de 3 hematíes por campo, menos de 5
leucocitos por campo y algunos cilindros hialinos, células epiteliales y cristales.
La aparición, en el estudio del sedimento urinario, de elementos anormales como cilindros
hemáticos, cilindros leucocitarios, cilindros granulosos, etc., hace pensar en diversas
nefropatías o enfermedades parenquimatosas renales
 Eritrocitos:
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Los hematíes se eliminan en forma muy reducida en la orina, debido a que los eritrocitos no
pueden entrar al filtrado en una neurona intacta. Éstos se identifican al examen microscópico
como discos redondos de color débilmente amarillo rojizo, con doble contorno.
En las orinas hipotónicas se hinchan y pueden lisarse liberando Hb y en las hipertónicas se
arrugan.
Cuando la orina no se examina rápidamente o cuando la densidad urinaria esta por debajo
de 1% se puede producir una destrucción in Vitro de eritrocitos, produciéndose una liberación
de Hb.
La morfología de los hematíes puede revelar el origen glomerular o postglomerular de la
hematuria. Los eritrocitos que atraviesan el canal glomerular aparecen "di mórficos", es decir,
se deforman, fragmentan y tienen muescas.
Estas células se diferencian de los hematíes uniformes de origen postglomerular. La
hematuria glomerular se sospecha cuando más del 80% de los hematíes tienen aspecto di
mórfico. Elementos que apoyan la sospecha de una hematuria de origen glomerular son la
presencia simultánea de cilindros eritrocitarios, granulosos, hialinos.
 Leucocitos:
Son células de tamaño mayor a los hematíes y menor a las células epiteliales, con presencia
de núcleo segmentado y granulaciones.
Contaminación con flujo vaginal: En la mujer debe tenerse en cuenta que los leucocitos
hallados pueden ser de origen vaginal, sobre todo si se acompañan de una gran cantidad de
células de epitelio plano, por lo que el estudio de la orina de chorro medio puede ser de gran
valor para aclarar esta cuestión..
 Células Epiteliales:
No es poco común encontrar células epiteliales en la orina ya que se derivan del
revestimiento del aparato genitourinario a menos que estén presentes en cantidades grandes
o en formas anormales, representan descamación normal de células viejas. Su valor
diagnóstico es muy reducido. Existen diversos tipos:
 Células Escamosas:
Procede de los genitales externos o de la porción inferior de la uretra. Se trata de grandes
células de aspecto irregular con un núcleo pequeño y redondo, pudiendo observarse en
forma frecuente un repliegue parcial en el borde celular.
 Células De Transición
Tiene su origen desde la pelvis renal, uréter y vejiga, hasta la uretra. Su presencia
acompañada de leucocituria puede indicar una inflamación de la vía urinaria descendente. En
caso de apreciar anomalías nucleares deberá descartarse un proceso maligno. Estas células
son más pequeñas que las del epitelio plano, son redondeadas con "cola" y su núcleo es
más grande y redondo.
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 Células Tubulares Renales:

Son células algo mayores que los leucocitos y presentan granulaciones. Su núcleo, de difícil
visualización es grande y redondo. Son las más significativas pues números elevados
indica: daño tubular que se produce en; pielonefritis, necrosis tubular aguda, intoxicación por
salicilatos y en rechazo de riñón transplantado.
 Células Granulosas O Cuerpos Ovales Grasos:

Son células de epitelio tubular que contienen gotas de grasa muy refringentes en el
protoplasma. Pueden ser también macrófagos o leucocitos polimorfonucleares que han
incorporado lípidos o células degeneradas en su interior que han sufrido degeneración grasa.
Su presencia sugiere la existencia de un Síndrome Nefrótico, además de glomerulonefritis
crónica, degeneración del túbulo renal, diabetes mellitus, lipúria, eclampsia, intoxicación,
nefrosis lipoidea, embolia grasa y después de lesiones superficiales extensas con
aplastamiento de grasa subcutánea, después de fracturas de huesos largos o pelvis donde
se libere grasa de médula ósea en la circulación con filtración posterior a través de los
glomérulos.
 Cilindros:
Elementos exclusivos del riñón. Se forman en la luz del túbulo contorneado distal y
conductos colectores, proporcionan una visión microscópica de las condiciones dentro de la
neurona. Sus formas son representativas de la luz tubular y generalmente consisten en
dos lados paralelos y extremos redondeados, pero pueden estar arrugados o contorneados.
El ancho del cilindro está determinado por su área de formación. En el aspecto de un cilindro
también influyen los materiales presentes en el filtrado en el momento de su formación y
pueden contener diferentes elementos.
Existen diversos tipos de cilindros:
Cilindros Hialinos:
Estos cilindros son homogéneos, incoloros, transparentes y poco refringentes, por lo que son
fáciles de omitir. Pueden aparecer en forma aislada en personas sanas o tras la
administración de diuréticos potentes como la furosemida, sin embargo su número aumenta
drásticamente durante el curso de un Síndrome Nefrótico. No es raro detectar cilindros
hialinos con inclusiones celulares (eritrocitos, leucocitos, epitelio tubular), lo que determina la
presencia de enfermedad del parénquima renal. Se presentan en: ejercicio energético,
tensión emocional, deshidratación, estados febriles, glomerulonefritis, enfermedad renal
crónica, insuficiencia cardiaca congestiva.
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Cilindros Granulosos:
Suelen ser más grandes que los hialinos y presentar inclusiones granulares que consisten
en: desintegración de C. leucocitarios, bacterias, uratos, lisosomas de células tubulares,
agregados de proteínas. No es raro observar una mezcla de cilindros hialinos y granulosos
Ocasionalmente pueden aparecer en personas sanas, aunque su presencia se relaciona con
enfermedades agudas y crónicas del riñón.
También se pueden presentar en tensión y ejercicio, estasis de flujo de orina, infección de
vías urinarias.
Cilindros Céreos:
Suelen ser más anchos que los hialinos, muestra una refringencia mucho mayor y no son
fáciles de omitir. Presenta muescas o hendiduras finas en sus bordes, que se dirigen
perpendicularmente al eje longitudinal del cilindro. Se presentan a partir de la degeneración
de cilindros hialinos.
Su presencia indica siempre una enfermedad renal crónica grave en un paciente con
insuficiencia renal crónica avanzada, pero en ocasiones puede observarse en la fase de
recuperación de la diuresis luego de un período de anuria.
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También se presentan en; estasis prolongados de flujo urinario, síndrome nefrótico,

hipertensión maligna, amiloidosis renal, neuropatía diabética, inflamación y degeneración
tubular aguda, rechazo de aloinjerto renal.
Cilindros Epiteliales:
Están compuestos de epitelio tubular descamado que permanecen adheridas a fibrillas de
proteínas de T-H. Su presencia se aprecia especialmente en la fase de recuperación de la
diéresis luego de una falla renal aguda por necrosis tubular isquémica o tóxica (virus
nefrotóxicos; citomegalovirus, hepatitis). También se presentan en el rechazo a transplante.
Son poco frecuentes.
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Cilindros Eritrocitarios:
Se componen de eritrocitos hinchados que se adhieren a una sustancia fundamental hialina.
Pueden ser de color castaño a ser casi incoloros o pueden estar formados por pocos
eritrocitos en una matriz visible. Indican siempre el origen renal de la hematuria y por
consiguiente se trata de un hallazgo muy valioso.
Aparecen fundamentalmente en la Glomerulonefritis aguda y crónica y también en la
Nefropatía lúpica, panarteritis nodosa, endocarditis bacteriana asociada a Glomerulonefritis,
traumatismo renal, síndrome de Good Pasture, infarto renal, pielonefritis grave, insuficiencia
del ventrículo derecho, trombosis de la vena renal.
Cilindro Leucocitario:
Se producen cuando ocurre una exudación intensa de leucocitos y al mismo tiempo se

eliminan proteínas por el túbulo.
Su presencia tiene fundamental importancia ya que demuestra que la inflamación es de

origen renal, casi siempre, a causa de una pielonefritis.
También se encuentra en nefritis lúpica e intersticial, enfermedad glomerular, pielitis,

infección renal, procesos inflamatorios de causa no infecciosa.
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Cilindros Grasos:
Se diferencian de los epiteliales por la inclusión de gotas de grasa, o cuerpos ovales grasos
en las células tubulares.
Se observan en el curso de un Síndrome nefrótico, enfermedad tubular degenerativa,
glomeruloesclerosis diabética, lupus, intoxicación renal daños hepáticos, síndrome de
Kinosmels-wilson.
 Cristales:
Se forman por la precipitación de sales urinarias al cambio de pH, temperatura o
concentración que afectan su solubilidad. Los cristales pueden adoptar múltiples formas
que dependen del compuesto químico y del pH del medio.
En comparación con otros elementos de la orina, los cristales sólo poseen significación
diagnóstica en muy pocos casos.
Uratos Amorfos:
Son sales de urato sodio, potasio, magnesio y calcio en una forma no cristalina, amorfa o
granular en orinas ácidas o conformando un cilindro, lo que puede llevar a confusión.
Cuando se eliminan en grandes cantidades, se reconocen microscópicamente como un

precipitado rojo-pardo (polvo de ladrillo).
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Ácido Úrico:
En la orina ácida pueden adoptar múltiples formas (cuadros romboidales, rosetas, pesas,
barriles, bastones). Pueden con frecuencia estar teñidos por los pigmentos urinarios y en
consecuencia tener un color amarillo o rojo castaño.
Su presencia es anormal, pero no siempre indica un estado patológico. Son frecuentes en
orinas concentradas, como ocurre en la fiebre, en la gota y en la lisis tumoral.
También se presentan en cálculos renales, metabolismo de purinas aumentado, nefritis
crónica, litiasis renal.
Oxalato De Calcio:
Se presenta en orinas ácidas y neutras, es incoloro y muy birrefringente. Es característica su
forma en sobre de carta.
Raras veces se presentan como esferas ovales o discos bicóncavos, que tienen forma de
pesas de gimnasia. Se producen con gran frecuencia luego de la ingesta de alimento ricos en
oxalato como: tomate, ajo, naranjas, espárragos, leche, ruibarbo.
Se presentan en intoxicación con etilenglicol, diabetes mellitus, enfermedad hepática,
enfermedad renal crónica.
Acido Hipúrico:
Son prismas o placas alongadas amarillo castaño o incoloras, pueden ser tan delgadas que
parecen agujas y con frecuencia están agrupados.
Carecen de significación clínica.
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Uratos De Sodio:
Agujas o prismas delgados, incoloros o amarillentos que se presentan en grupos o racimos.
Sulfato De Calcio:
Se observan como agujas largas y finas. Son raros y sólo se detectan en orinas muy ácidas.
Cistina:
Se detectan en orinas ácidas como cuadros hexagonales incoloros. Se observan en la
cistinuria, trastorno congénito de la reabsorción tubular de cistina, cálculos renales. Siempre
son de importancia clínica.
Leucina:
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Aparecen en orinas ácidas, son esferoides oleosos, altamente refractarios, de color amarillo
o castaño con estriaciones radiales y concéntricas.
Tienen gran importancia clínica pues aparecen en pacientes con enfermedad de la orina con
jarabe de arce, con síndrome de Smith y Strang, con enfermedades hepáticas graves como
cirrosis Terminal, hepatitis viral grave, atrofia
amarilla del hígado, leucinosis.
Tirosina:
Son agujas finas, altamente refringentes, que aparecen en grupos o acúmulos, por lo general
los acúmulos son necesarios sobre todo en el centro, pero pueden tomar coloración amarilla
en presencia de bilirrubina. Presentes en orinas ácidas.
Aparecen en enfermedades hepáticas graves, tirosinosis, síndrome de Smith y Strang,

cálculos renales.
Colesterol:
Son placas de gran tamaño, planas y transparentes, con ángulos mellados. Presentes en
orinas ácidas.
La presencia de placas de colesterol en la orina es índice de una excesiva destrucción
tisular, estos cristales se observan en cuadros nefríticos y nefróticos y en quiluria. La quiluria
se produce como consecuencia de la obstrucción a nivel torácico o abdominal del drenaje
linfático en el interior de la pelvis renal o en el tracto urinario.
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La obstrucción del flujo linfático puede deberse a tumores, agrandamiento grosero de

ganglios linfáticos abdominales y a filariosis; también se observa en destrucción celular,
quemaduras de cuatro y cinco grados.
Sulfamidas Y Otros Fármacos:

Se encuentran en orinas ácidas, son un grupo de agujas, por lo general con unión excéntrica,
su color puede ser claro a castaño.
En la terapéutica con sulfamidas y ampicilina aparecen muchos problemas como son daño
renal por precipitación del fármaco.
Para confirmar su presencia, se realiza la prueba de lignina: consiste en colocar 1 o 2 gotas
de orina en una tira papel, agregar una gota de ác. Clorhídrico al 25% en el centro del área
humedecida. La aparición de un color amarillo a anaranjado al cabo de 15 minutos indica un
resultado positivo.
Fosfato Triple:
Se aprecian como formas incoloras en "tapa de ataúd" en la orina alcalina. Aparecen como
consecuencia de la fermentación amoniacal en casos de bacteriuria marcada.
A menudo se pueden encontrar en orinas normales, pero también puede formar cálculos
urinarios, se presentan en retención vesical de la orina, hipertrofia de la próstata, cistitis,
pielonefritis crónica.
Fosfato Amorfo:
Son partículas granulares, carecen de una forma definida y por lo general son indistinguibles
de los uratos amorfos. El pH de la orina y la solubilidad los diferencian, pues estos cristales
se presentan en orinas alcalinas. Carecen de
significación clínica.
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Fosfatos De Calcio:
Son prismas largos, delgados e incoloros con un extremo puntiagudo y ordenado formando
estrellas o en forma de agujas. Pueden estar flotando en la orina. Se presentan en orinas
alcalinas.
Pueden estar presentes en orinas normales y también pueden formar cálculos. Carecen de
significado clínico.
Carbonato De Calcio:
Son pequeños en forma esférica o de pesas de gimnasia o en masas granulares de gran

tamaño. Existe conexión de los cristales a nivel de los bordes. Aparecen en orinas alcalinas.
Carecen de significado clínico.
Biurato De Amonio:
Son cuerpos esféricos de color amarillo castaño, con espículas largas e irregulares.
También pueden ser esferoides de color amarillo castaño sin espículas. Se encuentran en
orinas alcalinas, neutras y también en ácidas.
Se constituyen en una anormalidad pero en orina recién emitidas.
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 Otras Estructuras:
Bacterias.
Normalmente en la orina a nivel renal y vesicular no existen bacterias pero se pueden

contaminar con bacterias presentes en la uretra, en la vagina o procedentes de fuentes
externas.
Cuando una muestra de orina está bien recolectada y contiene gran número de bacterias y
está acompañada de leucocitos, es índice de infección del tracto urinario.
Se informa por cruces.
Moco:
Es un producto proteico de las glándulas y células epiteliales del aparato genitourinario.

En pequeñas cantidades es normal, de lo contrario se observa en inflamación o irritación del
tracto urinario, además se le incorporan leucocitos.
Levaduras:
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Son uniformes, incoloras, por lo general de forma ovoide con pared doble, con frecuencia
muestran gemación por lo general son Cándida albicans y se pueden presentar en pacientes
con diabetes mellutis y mujeres con moniliasis vaginal, además en contaminación cutánea o
vaginal con orina.
Se confunden con eritrocitos frescos, por lo tanto hay que buscar formas gemantes.
Se informan por cruces.
Cuerpos Cilindroides Y Pseudocilindros:
Es importante conocer estas estructuras para no confundirlas con los verdaderos cilindros.
Tienen forma de banda longitudinal, acaban en punta por los extremos o se disponen en
filamentos. Su origen no está bien determinado.
Trichomonas:
Se destacan en el sedimento urinario por su movilidad, por lo que no basta con observar una
imagen inmóvil con un aspecto sugerente. Se trata de estructuras redondas u ovaladas que
disponen de cuatro flagelos en uno de los polos, generalmente móviles.
Su tamaño es aproximadamente 2 a 3 veces mayor que el de los leucocitos. Suelen
encontrarse en la orina de mujeres con infección vaginal y en ocasiones indican infección
vesical.
Otros Parásitos:
Pueden encontrarse huevos y en ocasiones también el adulto hembra del Enterobius

vermicularis (oxiuro). Los huevos tienen forma muy característica; una de sus caras es plana
y otra redondeada, a través de su cáscara transparente se puede observar, por lo general, la
larva en desarrollo. El Schistosoma haematobium es un gusano trematodo que habita en
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las venas de la pared de la vejiga. El adulto deposita sus huevos en los capilares de la
mucosa. Alrededor de los huevos se forman abscesos. En la orina pueden encontrarse
huevos acompañados de hematíes y leucocitos.
Espermatozoides:
Pueden observarse en la orina de ambos sexos después del coito.

Pueden aparecer en la orina masculina después de: convulsiones epilépticas, poluciones
nocturnas, enfermedades de órganos genitales, espermatorrea. Se reportan en cruces solo
en muestras de hombres.
Artefactos:
Se pueden observar artefactos en la orina como:

Gotas de aceite, cristales de almidón, fibras, cabello, fragmentos de vidrio, partículas de
talco, detritos de pañal. Los cuales refieren contaminación de la muestra.

Registro: Libro de Registro Uroanálisis
Gram de orina
Es un método rápido y económico que orienta la selección del tratamiento antibiótico

empírico. La muestra se mezcla muy bien por inmersión y una gota de orina se extiende
sobre una lámina portaobjetos y se realiza coloración de Gram; al observar una bacteria por
campo con objetivo de inmersión se presume un recuento de colonias aproximado de 10 5
UFC/mL.
Reporte: se reporta la reacción leucocitaria observada (Escasa, Moderada, Abundante), y si

se observan bacterias, la morfología de éstas.
Cuando el Gram proviene de una muestra de orina sin centrifugar, se reporta > 1 bacteria por
campo de inmersión, especificando su morfología y apetencia tintorial, también con la
reacción leucocitaria observada.
Ejemplo: Al Gram de orina se observa >1 bacilo Gram Negativo por campo de inmersión,
con moderada reacción leucocitaria.

Registro: Libro de Registro GRAM.
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6.2 Recuento de Addis y Hamburguer
6.2.1 Recuento de Addis
Definición
En esta prueba se realiza una cuantificación minutada del número de células y de proteínas
que pueda contener la orina recolectada. Es de gran interés para el diagnóstico de las
enfermedades renales ya que nos permite una valoración completa del funcionamiento renal.
Se hace imprescindible hacer una indicación correcta de la recolección de la muestra para
que la prueba tenga validez diagnóstica.
Fundamento
Esta prueba se basa en la cuantificación minutada, tanto de los elementos que componen el
sedimento urinario (eritrocitos, leucocitos y cilindros) mediante un análisis microscópico,
como de las proteínas excretadas por métodos turbidimétricos y se valora en orinas
recogidas en 8 horas o en 12 horas; el incremento de estos valores varía de acuerdo al tipo
y la extensión de la lesión renal correspondiente.
Reactivos
 Tubos plásticos de 10 mL graduados de centrífuga.

 Tubos para ensayo de 13 x 100 ó 15 x 125 mm.
 Gradilla para los tubos de ensayos.
 Pipetas graduadas de 5 ml, 10 ml, 25ml.
 Probeta graduada de 1000 ml, 2000, ml.
 Pipeta automática de 50 y 500µL.
 Cámara de Newbauer.
 Cubre objeto.
 Papel indicador de pH
 Microscopio con lente de objetivo 40 X y poca luz.
Técnica orina de 12 horas
El día anterior a la prueba el paciente debe restringir la ingesta de líquidos para obtener una
orina concentrada.
 Homogenizar bien la orina antes de analizar.
 Medir volumen total de la orina recolectada
 Con tira reactiva medir los valores de pH y cetonuria
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 Colocar 10 ml de la orina en tubo de centrífuga graduado y centrifugar a 1500 rpm

durante 10 min. Separar un sobrenadante de 9 ml sobrenadante con una pipeta de 10
ml, o decantar y dejar para el análisis del sedimento 1 ml.
 Del sobrenadante de la orina medir proteínas en el equipo automatizado
 Para la observación microscópica del sedimento urinario se debe homogenizar el ml
de sedimento agitando suavemente para evitar la ruptura de los elementos formes,
con un gotero montar en la cámara de Newbauer para proceder al conteo de los
mismos.
 Los leucocitos y hematíes se cuentan en 16 pequeños cuadrados o en un área de 1
mm2 y los cilindros en los 4 grandes cuadrados de las esquinas o en un área total de
4 mm2.
Cálculos:
Para los leucocitos y hematíes:
N = Elementos contados x volumen /minuto x 1000.
Para los cilindros:
N = Elementos contados x volumen /minuto x 250.
El volumen /minuto o la diuresis minuto: Se calcula dividiendo la cantidad total de orina

recolectada expresada en ml entre los minutos existentes en el tiempo en que fue tomada la
orina (8h, 12h). 8h: 480 min, 12h: 720 min.
Ejemplo:
Se contaron 3 hematíes y 1cilindrio.
0.0001ml ---------------- 3 hematíes.
1 ml ---------------- x hematíes.
X = 1 x 3 / 0.0001 = 3 / 0.0001 = 30 000 hematíes.
Pero en realidad estos son los hematíes de 10 ml de orina centrifugada, es decir que en 10
ml de orina centrifugada hay 30 000 hematíes.
Ahora debemos hallar la cantidad de elementos eliminados en 1 ml.
10 ml ---------------- 30 000 hematíes.

1 ml ---------------- x hematíes.
X = 1 x 30000 / 10 = 3000 hematíes/ml.
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Si la diuresis minuto es de 1 ml/min tendremos: (Si el conteo de Addis es de 8h y el paciente

orinó 480 ml tendremos que la diuresis/minuto correspondiente = 480ml/ 480 min que es
igual a 1ml/min.
Entonces multiplicamos los elementos eliminados en 1ml por la diuresis.

X = 3000 hematíes/ml x 1ml/min.
X= 3000 hematíes x min.
Simplificando
n es igual a hematíes o leucocitos contados en 1 mm2 tendremos:
N = n x 1000 x Dmin (diuresis minuto)
Calculo por regla de tres para los cilindros.
0.0004ml ----------------- 1 cilindros.

1 ml ----------------- X cilindros.
X = 1 x 1 / 0.0004 = 1 / 0.0004 = 2500 cilindros.
Pero en realidad estos son los cilindros de 10 ml de orina centrifugada, es decir que en 10 ml
de orina centrifugada hay 2500 cilindros.
Ahora debemos hallar la cantidad de elementos eliminados en 1 ml
10 ml------------------ 25 00 cilindros.
1 ml ---------------- X cilindros
X = 1 x 25 00 / 10 = 250 cilindros/ml.
Posteriormente se multiplica la cantidad de cilindros en 1 ml por la diuresis minuto y si la

diuresis es de 1ml/min, tendremos:
X= 250 cilindros/ml x 1 ml/min.

X= 250 cilindros/min.
Simplificando. 18
n es igual a cilindros contados en 4 mm2, tendremos: N = n x 250 x Dmin.
Calculo para la determinación de proteínas: En caso de que la prueba cualitativa arroje

resultados dosificables (trazas o contiene) para proteínas se procederá a realizar la
determinación de proteínas según el método seleccionado y el resultado obtenido en g/l de
proteínas en la orina se debe multiplicar por la diuresis minuto y luego se informa en mg/min.
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Simplificando:
Si en la muestra hay 0,5 g/l.
Sería: 0,5 g/l x Dmin.
Si la muestra contiene proteínas se deberá realizar una dilución de la misma y después
multiplicar por factor de la dilución.
Valores de Referencia
Para proteínas: Nunca superior a: 0,15 mg / min.

LEUCOCITOS: > 0 - 1000/ min.
HEMATÍES: > 0 - 1000/min.
CILINDROS: > 0 - 250/min.
Factores que interfieren en los resultados
 Mal montaje de la cámara.

 No mezclar la orina antes de montar la cámara.
 Desecación de la cámara.
 Inadecuada recolección y conservación de la muestra.
 No medir correctamente el volumen de la muestra.
 Error en los cálculos.
 Mal manejo de equipos.
 Orinas turbias por la presencia de abundantes sales.
6.2.2 Recuento de Hamburguer
Definición
Útil en el diagnóstico de síndrome nefrótico. Consiste en hacer un recuento minutado de
eritrocitos, leucocitos y cilindros en una orina recolectada durante 3 a 12 horas según
indicación médica.
Muestra
Consta de la recolección de orina de 3 – 12 horas según indicación médica.
Procedimiento
 Medir el volumen
 Sacar 10 c.c. en un tubo de centrífuga graduado, se centrifuga por 10 minutos entre
1.500 – 2.500 r.p.m.
 Separar el sobrenadante de 9 ml con una pipeta de 10 ml o decantar y dejar para el
análisis del sedimento 1 ml.
 Para la observación microscópica del sedimento urinario se debe homogenizar el ml
de sedimento agitando suavemente para evitar la ruptura de los elementos formes,
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con un gotero montar en la cámara de Newbauer para proceder al conteo de los

mismos.
 Los leucocitos y hematíes se cuentan en 16 pequeños cuadrados o en un área de 1

mm2 y los cilindros en los 4 grandes cuadrados de las esquinas o en un área total de
4 mm2.
Cálculos:
Número de elementos x Volumen x 100 = Número de elementos x minuto

180 minutos (3 horas)
Se mide además:
 Volumen
 pH
 Densidad
 Glucosa
 Albúmina

Registro: Libro de Registro Uroanálisis
6.3 Frotis de Flujo Vaginal y Uretral
El epitelio de la vagina produce secreciones que contienen lisoenzimas, ácidos, lípidos e IgA,
que defienden el entorno vaginal. Este sufre descamaciones y regeneraciones, que permiten
eliminar gran número de bacterias patógenas. Bajo la influencia de los estrógenos, el epitelio
produce glucógeno que se degrada por la acción de Lactobacillus spp (microbiota normal
Gram positivo) a glucosa y finalmente a ácido láctico, este último mantiene un pH vaginal
menor de 4,5, que previene un crecimiento excesivo de bacterias patógenas.
 Tubos de ensayo
 Espéculo
 Láminas
 Laminillas
 Hisopos
 Microscopio
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 Marcador
Procedimiento
 Toma de muestras Ver Manual toma de muestras.

 Registrar las muestras en el libro de Frotis de Flujo Vaginal.
 La auxiliar de laboratorio realiza la coloración de Gram para el extendido. Ver anexo
coloraciones
 La bacterióloga (o) realizar examen en fresco, colocar sobre un porta objetos una gota
de la solución salina donde se depositaron los hisopos. Cubrir con una laminilla cubre
objetos
 Leer en el microscopio en objetivo de 40X.
 Buscar especialmente Trichomonas vaginalis, levaduras, pseudomicelios y células
guía.
 Si el examen al fresco no se puede realizar de inmediato, se debe incubar a 37°C
máximo por 2 horas.
Responsable: Bacterióloga/o
Registro: Libro de Frotis de Flujo Vaginal
Frotis fondo del

saco
Mx COLORACION
DE GRAM
.
Frotis pared del

TOMA
TOMA DE
DE cuello
MUESTRA
MUESTRA
Registro libro EXAMEN

FFV FRESCO
Observación entre lámina y

laminilla
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Hacer lectura del Gram determinando:
 Frotis del fondo del saco. PMN xcm, Morfología bacteriana (especialmente diplococos
Gram negativo intracelulares y extracelulares).
 Frotis pared del cuello. PMN xcm, Morfología bacteriana (especialmente Bacilos Gram
positivo, bacilos y cocobacilos Gram negativo y Gram variables, cocos Gram positivo),
Presencia ausencia de levaduras, pseudomicelios y células guía
 Realizar registro de hallazgos en el libro de Frotis de flujo vaginal.
 Hacer
reporte en
físico o en
el sistema
según
servicio de
ingreso
(ver
anexo).
Frotis uretral
Puede ser fisiológica - no relacionada con la uretritis -, o puede ser patológica debido a la
presencia de uretritis - inflamación de la uretra-, la secreción uretral está presente en el 95%
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de los casos, es el síntoma sobresaliente de la uretritis. La secreción puede ser escasa,

profusa, purulenta o clara, el 75% de los pacientes con uretritis gonocócica describe la
secreción como purulenta y de eliminación espontánea por uretra. Las secreciones tienden a
aparecer menos purulentas poco después de la micción cuando la infección comienza a
resolverse las secreciones se tornan mucoides. Los pacientes con uretritis no gonocócica
suelen tener una secreción más escasa y menos purulenta y es menos probable que tengan
disuria y secreción simultánea, puede presentarse solo por la mañana o a lo largo de todo el
día, en algunos casos, se puede presentarse sangre en la orina o el semen. La uretritis no
gonocócica suele aparecer de 7 a 14 días después de la exposición, pero puede retardarse
hasta 5 semanas, los síntomas suelen ser menos intensos que la uretritis gonocócica.
Los hombres sintomáticos van a presentar la clásica secreción a través de la uretra anterior,
acompañada por disuria, polaquiuria y edema de meato. Las complicaciones más frecuentes
son, infección persistente crónica, epididimitis, estrechez uretral e infertilidad.
 Tubos de ensayo
 Láminas
 Laminillas
 Hisopos
 Microscopio
 Marcador
Procedimiento
 Toma de muestras Ver Manual toma de muestras.

 Si el paciente no tiene secreción se pide que se retraiga el prepucio y la muestra debe
ser tomada introduciendo escobillón muy fino humedecido con solución salina
fisiológica estéril 1-2 cms en el canal uretral, imprimiendo un movimiento suave de
rotación.
 Si el paciente presenta abundante secreción se pide que se retraiga el prepucio se
oprima el glande y se toma con escobillón del orificio uretral la secreción obtenida.
 Realizar 2 láminas con el extendido de la muestra y tomar el fresco de la secreción
uretral.
coloraciones
 La bacterióloga (o) realizar examen en fresco, colocar sobre un porta objetos una gota
de la solución salina donde se depositaron los hisopos. Cubrir con una laminilla cubre
objetos
 Leer en el microscopio en objetivo de 40X.
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 Buscar especialmente Trichomonas vaginalis, levaduras, pseudomicelios y reacción

leucocitaria
 Extendido en objetivo 100x observar diplococos Gram negativos en forma de riñón o
grano de café intra y extracelulares en los linfocitos polimorfonucleares es bastante
característico de la gonorrea.
 Puede hacerse un diagnóstico de uretritis no gonocóccica cuando se observan grupos
de leucocitos por lo menos en algunos campos microscópicos sin diplococos
intracelulares.
Diagnóstico definitivo:
El diagnóstico se hace a través de la clínica y pruebas de laboratorio para la identificación de

N. gonorrhoeae.
 En hombres observación de diplococos Gram negativos intra y extracelulares en la

secreción uretral. Y en las mujeres aislamiento por cultivo selectivo para N.
gonorrhoeae, demostración de colonia morfológicamente típica, reacción positiva a la
oxidasa y Gram con la típica morfología de la bacteria.
 Confirmación de la N. gonorrhoeae a través de métodos bioquímicos, enzimáticos o

por ácidos nucleicos (pruebas de carbohidratos, enzimáticas, métodos serológicos
como la conglutinación o anticuerpos fluorescentes o pruebas de ADN).
Responsable: Bacterióloga/o
Registro: Libro de Frotis de Flujo Vaginal y Uretral
6.4 KOH – Hidróxido de Potasio
El examen Directo con KOH consiste en la toma de muestras: escamas, pelos o fragmentos
de uñas, su incubación con hidróxido potásico al 10-30% y su posterior visualización en el
microscopio, lo que permite observar la existencia de hifas septadas (dermatofitosis), hifa
aseptadas, formas levaduriformes o pseudohifas (candidiasis) que son suficientes para
confirmar el diagnóstico. El KOH destruye todas las células excepto las micóticas.
Procedimiento:
 Colocar muestra sobre una lámina portaobjetos

 Adicionar una gota de KOH
 Colocar laminilla
 Dejar en reposo por 10 minutos
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 Observar al microscopio en objetivo de 40x

 Reportar lo observado.

Registro: Libro de Registro KOH, Gram, Espermograma, Líquidos Corporales
6.5 Examen Directo Fresco de Cualquier Muestra
Consiste en colocar una gota entre lámina y laminilla de secreciones de heridas, heridas
quirúrgicas, uretrales, líquidos estériles y demás que el médico considere pertinente realizar
análisis para búsqueda de bacterias de importancia clínica y respuesta inflamatoria.
Procedimiento:
 Colocar una gota de la muestra sobre una lámina portaobjetos.

 Colocar laminilla
 Observar al microscopio en objetivo de 40x
 Reportar lo observado.

6.6 Baciloscopia
Micobacterias
La tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa crónica causada por el complejo
Mycobacterium tuberculosis, el cual puede afectar cualquier órgano o tejido, sin embargo, la
forma más común de la enfermedad es la pulmonar, cuyo principal síntoma es la presencia
de tos con expectoración mucoide o mucopurulenta por más de 15 días, denominándose a la
persona que presente esta condición como sintomático respiratorio; esta tos puede estar
acompañada por otros signos y síntomas como hemoptisis, fiebre, sudoración nocturna,
malestar general, dolor torácico, astenia, anorexia y pérdida de peso.
Cuando la infección afecta órganos diferentes al pulmón se denomina tuberculosis
extrapulmonar, la localización más frecuente de esta forma de la enfermedad es la pleural,
seguida por la ganglionar.
La TB extrapulmonar incluye diversas manifestaciones, pronóstico y tiempo de enfermedad;
se puede encontrar desde una infección de latencia o evolución lenta hasta una reactivación
focal o diseminación y compromiso de múltiples órganos, lo cual hace difícil su diagnóstico
por parte del clínico, quien podría no identificar el caso oportunamente.
Una de las formas más graves de TB extrapulmonar es la meningitis tuberculosa, que se
produce como consecuencia de la diseminación hematógena del bacilo en el espacio
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subaracnoideo; se conoce como una complicación de la TB primaria y puede ocurrir años

después como una reactivación endógena de una tuberculosis latente o como consecuencia
de una reinfección exógena.
El diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis se basa en confirmar la presencia del agente

causal en la muestra a procesar, mediante baciloscopia y/o cultivo. La demostración
bacteriológica del bacilo tuberculoso es criterio suficiente para hacer diagnóstico.
Todo caso sospechoso de tuberculosis pulmonar se le debe realizar una baciloscopia seriada
de esputo. La baciloscopia es la técnica de elección para el diagnóstico rápido y el control del
tratamiento antituberculoso.
La lepra es una enfermedad crónica causada por el Mycobacterium leprae, el periodo

promedio de incubación es de hasta 5 años; se transmite a través de gotas que salen de la
nariz o boca. Provoca lesiones en piel, tejidos blandos y sistema nervioso. El diagnóstico es
clínico, sin embrago se deben tomar muestras de las lesiones, idealmente deben ser 6 en
total, para hacer la clasificación de la enfermedad de acuerdo al índice bacilar.
Procedimiento
Recepción de muestras por consulta externa:
 El auxiliar de laboratorio del área de toma de muestras recepciona la muestra,
verificando orden médica, factura y registra los datos del paciente en el libro de
ingreso de consulta externa.
 Rotular el frasco con el consecutivo correspondiente
 Luego la muestra es recogida y transportada en cava por la auxiliar de laboratorio
encargada del área de separación de muestras la cual debe dar ingreso al paciente en
el registro de baciloscopia (formato Excel) y libro de baciloscopias, llenar todos los
datos, colocar el número consecutivo correspondiente al paciente en el frasco
(sintomático respiratorio) y llevar al área de coloración y microbiología para ser
procesada la muestra.
 En caso tal que la muestra no sea procesada inmediatamente (baciloscopia y/o
cultivo) ésta puede ser conservada a 4°C hasta por 24 horas.
Baciloscopia:
Realización del Extendido: el auxiliar de laboratorio es quien realiza el extendido y coloración
de baciloscopia.
 Lavar las manos
 Colocar implementos de bioseguridad (bata, gafas, mascarilla N95, gorro).
 Ubicar en la mesa o bandeja papel humedecido con hipoclorito de sodio al 1%.
 Dejar solo lo necesario para realizar el extendido
 Seleccionar la partícula más purulenta
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 Extender homogéneamente suficiente cantidad de la partícula útil, sin exceso, en un

pequeño óvalo centrado en el portaobjetos (2cmx2cm o 2cmx1cm).
 Colorear la lámina. Ver anexo coloraciones
Lectura de la Baciloscopia:
El objetivo es determinar si en el extendido hay BAAR y si los hay, cuantificar

aproximadamente el contenido de bacilos.
El número total de campos a examinar depende de si se encuentra bacilos y en que
concentración:
Promedio de BAAR encontrados Número mínimo de campos útiles a

examinar
Ningún BAAR 100
Menos de 1 BAAR por campo 100
1 a 10 BAAR por campo 50
Más de 10 BAAR por campo 20
De 1 a 9 BAAR en todo el extendido 100
Informe de Resultados – Escala Semicuantitativa
Resultados del Examen Microscópico Informe

No se encuentran BAAR en los 100 No se observan bacilos ácido alcohol
campos observados resistente.
Se observan de 1 a 9 BAAR en 100 N° exacto de bacilos en 100 campos
campos observados
Se observan entre 10 y 99 BAAR en 100 Positivo +
campos observados
Se observa de 1 a 10 BAAR por campo en Positivo ++
50 campos observados.
Se observan más de 10 BAAR por campo Positivo +++
en 20 campos observados.
Nuevos lineamientos TBC
*Nota: trimestralmente se entrega informe de actividades de tuberculosis al laboratorio de

salud pública.
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Registro: Registro diario de baciloscopias (excel) y libro de registro de baciloscopias.
6.7 Gram de Cualquier Muestra

Consiste en realizar extendido en lámina de secreciones de heridas, heridas quirúrgicas,
uretrales líquidos estériles y demás que el médico considere pertinente realizar análisis para
búsqueda de bacterias de importancia clínica y respuesta inflamatoria.
 Tubos de ensayo
 Espéculo
 Láminas
 Laminillas
 Hisopos
 Microscopio
 Marcador
Procedimiento
 Realizar toma de muestras o recepción de la muestra (servicios intrahospitalarios)

 Registrar en los libros de ingreso a pacientes según corresponda
coloraciones
 La bacterióloga (o) debe leer el extendido en el microscopio en objetivo de 100x.
 Reportar morfología bacteriana y reacción polimorfonuclear
Responsable: Bacterióloga
Reporte Resultado: Ver punto 12.
6.8 Leishmaniasis
La leishmaniasis es causada por un protozoo parásito del género Leishmania, que cuenta
con más de 20 especies diferentes. Se conocen más de 90 especies de flebotominos
transmisores de Leishmania. La enfermedad se presenta en tres formas principales: visceral,
cutánea y mucocutanea.
En el laboratorio clínico del hospital San José del Guaviare, se realiza diagnóstico para
Leishmaniasis cutánea, para ello, se debe realizar frotis directo a partir de la lesión en el cual
se observen amastigotes de Leishmania spp. Se deben obtener 3 muestras de diferentes
lesiones o en diferentes sitios de la misma lesión.
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Las láminas se deben colorear y el bacteriólogo realiza la lectura, reportando como positivo o
negativo, según la visualización o no del amastigote.
Ver anexo coloraciones.

Registro: Libro de Registro de Leishmaniasis
6.9 Líquidos Estériles
El estudio de los líquidos estériles, es ciertamente una prueba que en primera instancia
requiere un procesamiento inmediato, debido entre otras razones a la urgencia por la cual fue
enviada al laboratorio y al deterioro de las células presentes las cuales deben ser contadas.
La evaluación de todos los líquidos corporales, tienen PRIORIDAD sobre cualquier otro
examen en microbiología.
Estas muestras son obtenidas en condiciones quirúrgicas estériles, por lo tanto, todo
microorganismo que se aísle es patógeno.
Los líquidos estériles son tomados por el personal médico en tubos estériles y llevados al
laboratorio por el personal auxiliar de enfermería.
Registro de muestras
Todas las muestras de líquidos estériles deben ser registradas en el libro de Registro KOH,
Gram, Espermograma, Líquidos Corporales con sus respectivos hallazgos, según
procedencia de muestra.
 Láminas
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 Laminillas
 Aplicadores o palillos de madera
 Cámara de Neubawer
 Microscopio
 Mechero
 Lápiz Marcador
 Medios de cultivo
 Wright
 Reactivo de KOH
 Asas bacteriológicas
 Colorantes para coloración de baciloscopia
 Tinta china
 Colorantes para coloración de Gram
Procedimiento: en el laboratorio clínico se procesan los siguientes líquidos: LCR, L. Pleural,

L. Ascítico, L. Sinovial, L. Pericadardico, L. Peritoneal.
 Líquido Cefalorraquídeo:
Examen físico: describir las características físicas como color, aspecto, y presencia o
ausencia de coagulo.
Color: Incoloro
Xantocrómico
Aspecto: Agua de Roca

Ligeramente Turbio
Turbio
Sanguinolento
pH: medir mediante papel tornasol, valor de referencia 7.31 -7.34.

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Coagulo: Presente
Ausente
Examen en fresco:
Realizar mediante lámina y laminilla
Colocar una gota del LCR sin centrifugar y observar al microscopio en objetivo de 40x
Revisar si hay presencia de leucocitos.
Ante presencia de leucocitos realizar recuento en cámara de New-Bawer - leucocitos xmm 3.
Contar los 9 cuadros de la cámara, si la leucocitosis es muy marcada hacer dilución
utilizando líquido de Turk.
Si se observa hematíes contar los 9 cuadros de la cámara, si los hematíes están muy
aumentados hacer dilución utilizando solución salina. Diferenciar entre frescos% y crenados
%.
Cálculos:
# de células contadas x 10 9 = células xmm3.
Recuento diferencial:
Hacer extendido y colorear con Wright. Hacer diferencial a 100 células e informar en %.
Examen Bioquímico:
Centrifugar y procesar con el sobrenadante. Para la separación del sobrenadante es

necesario hacerlo frente al mechero y en condiciones asépticas para evitar que el sedimento
se contamine.
Realizar análisis de Glucosa, Proteínas Totales y LDH.
Procesar simultáneamente si es posible los mismos analitos en sangre.
Gram:
Hacer frotis y realizar coloración de Gram según protocolo de coloraciones. Leer e informar
incluyendo descripción de los gérmenes y reacción leucocitaria. Reportar inmediatamente
aun si es negativo.
Tinta china:
Poner una gota del sedimento en un porta objetos y agregar una gota de tinta china, tapar
con una laminilla. Observar la presencia de levaduras encapsuladas.
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KOH:
Poner una gota del sedimento en una porta objetos y agregar 1 gota reactivo de KOH, tapar
con una laminilla. Observar la presencia de estructuras micóticas.
Baciloscopia y cultivo para Mycobacterium tuberculosis
Realizar extendido para baciloscopia y colorear con Zielhl-Neelsen según protocolo de

coloraciones. Leer e informar BAAR. Sembrar en medio Ogawa Kudoh.
VDRL:
Realizar dilución 1:2 con solución salina (esta preparación debe ser empleada dentro de las
dos primeras horas y centrifugar por 8 minutos a 180 RPM. Leer e informar igual que una
muestra de suero.
Estudio microbiológico:
Se emplea el sedimento obtenido después de la centrifugación.
Cultivo
Se debe sembrar la muestra en los medios para aislamiento de microorganismos comunes.
Este cultivo debe realizarse primero para evitar contaminación.
Se utilizan los siguientes medios: agar Sangre, agar MakConkey, Chocolate y BHI.
NOTA: Teniendo en cuenta la relevancia diagnostica que tiene este análisis, se deben
procesar todos parámetros anteriormente mencionados sin falta alguna, aun cuando en la
orden médica no se especifique con detalle.
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 Liquido Pleural
Examen físico: describir las características físicas como color, aspecto, y presencia o
ausencia de coagulo
Color: Claro
Amarillo pálido
Aspecto: Purulento
Hemorrágico
Lipémico
Coagulado: Presente
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Ausente
Examen en Fresco:

Colocar una gota del Líquido pleural sin centrifugar y observar al microscopio en objetivo de
40x
%.
Cálculos:
Contar los 9 cuadros de la cámara, si los hematíes están muy aumentados hacer dilución
utilizando solución salina. Diferenciar entre frescos% y crenados%. Menos de 500 normal.
Más de 5000 Hemotorax o derrame hemorrágico.
Cálculos:
# de células contadas x 10 / 9 = células xmm3.
Hemotorax: Si el líquido es hemorrágico se debe realizar un hematocrito para descartar la

existencia de un hemotorax.La concentración de la Hb del liquido pleural puede ser superior
al 25% de la concentración en sangre.
Recuento Diferencial:
Examen bioquímico:
Centrifugar y procesar el sobrenadante. Para la separación del sobrenadante es necesario

hacerlo frente al mechero y en condiciones asépticas para evitar que el sedimento se
contamine. Se debe procesar:
 Glucosa
 Proteínas Totales
 LDH
Procesar simultáneamente los mismos analitos en sangre.
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KOH:
Poner una gota del sedimento en el porta objetos y agregar 1 gota reactivo de KOH, tapar
con una laminilla. Observar la presencia de estructuras micoticas.
Se emplea el sedimento obtenido después de la centrifugación.
Cultivo
Gram
Hacer frotis y realizar coloración de Gram según protocolo de coloraciones. Leer e informar
incluyendo descripción de los gérmenes y reacción leucocitaria.

NOTA: revisar orden médica con el fin de realizar otros análisis solicitados por el médico.
 Liquido Pericardico
Examen físico: describir las características físicas como color, aspecto y presencia o
Color: Claro
Amarillo pálido
Aspecto: Turbio
Hemorrágico
Lipemico
Coagulado
Presente
Ausente
Examen en Fresco:

COPIA CONTROLADA

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Colocar una gota del Líquido Pericardico sin centrifugar y observar al microscopio en objetivo
de 40x

%.
Cálculos:
Cálculos:
# De células contadas x 10 / 9 = células xmm3.
Examen bioquímico:

se contamine.
 Glucosa
 LDH
Procesar simultáneamente los mismos análisis en sangre.
Estudio Microbiológico:
Centrifugar tubo estéril y emplear el sedimento obtenido.
Cultivo
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Gram
Hacer frotis y realizar coloración de Gram. Leer e informar incluyendo descripción de los
gérmenes y reacción leucocitaria.

 Líquido Peritoneal y Líquido Ascítico
Examen físico: describir las características físicas como color, aspecto y presencia o
Color: Amarillo claro

Amarillo Pajizo
Aspecto: Transparente
Turbio
Sanguinolento
Lechoso
Coagulo: Presente
Ausente
Examen en Fresco:

Colocar una gota del Líquido Peritoneal o Ascítico sin centrifugar y observar al microscopio
en objetivo de 40x
%.
Cálculos:
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Cálculos:
# De células contadas x 10 / 9 = células xmm3.
Examen bioquímico:
se contamine. Se debe procesar:
 Glucosa
Procesar simultáneamente los mismos analistas en sangre.
Cultivo
Gram
Hacer frotis y realizar coloración de Gram. Leer e informar incluyendo descripción de la
morfología bacteriana y reacción leucocitaria.

NOTA: Si se solicita, según orden médica, realice Baciloscopia y KOH como se menciona en
el estudio microbiológico de LCR.
 Liquido Sinovial
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Examen Físico: describir las características físicas como color, aspecto y presencia o
Color: Incoloro
Rojo brillante
Rojo parduzco
Xantocromico
Aspecto: Transparente
Turbio
Sanguinolento con coagulo
Sanguinolento sin coagulo
Lechoso
Examen en Fresco:
Colocar una gota del Líquido Peritoneal o Ascítico sin centrifugar y observar al microscopio
en objetivo de 40x
%.
Cálculos:
Cálculos:
# de células contadas x 10 / 9 = células xmm3.
Test mucina:
Refleja la naturaleza de la proteína hialuronica en el líquido sinovial.
Agregar 1 parte de líquido sinovial y 4 partes de ácido acético 2-5%.
Interpretación del coagulo

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Bueno: El líquido es claro y el coagulo es firme. Enf. No inflamatoria.

Regular: El líquido es turbio y el coagulo es blando. Enfermedad inflamatoria aguda.
Mala: El líquido es turbio y el coagulo es friable. Proceso séptico.
Examen bioquímico:

se contamine. Se debe procesar:
 Glucosa
Procesar simultáneamente los mismos analistas en sangre.
Estudio Microbiológico:
Cultivo

Gram
Hacer frotis y realizar coloración de Gram. Leer e informar incluyendo descripción de los
gérmenes y reacción leucocitaria. Reportar inmediatamente aun si es negativo.

NOTA: Si se solicita, según orden médica, realice Baciloscopia y KOH como se menciona en
el estudio microbiológico de LCR.

Registro: Libro de Registro
importante y sencillo para iniciar el estudio de la fertilidad masculina. En KOH, Gram,
Espermograma, Líquidos Corporales
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 Coloración de Gram
Se debe realizar cuando se observa leucocitos en el fresco, se debe reportar al médico las
células sanguíneas presentas y morfología bacteriana observada. Ver 11 coloraciones.
6.10 Espermograma
También conocido como espermatobioscopía, espermatograma o seminograma; es el

examen de diagnóstico más él, se evalúan los aspectos físicos del semen, como el volumen,
pH, mucólisis, viscosidad, color y olor y los aspectos celulares que estudia el espermatozoide
en relación con el número, movilidad, morfología y vitalidad.
También ofrece información valiosa sobre la presencia de otras células como macrófagos,
linfocitos, leucocitos, bacterias y hongos.
 Procedimiento
La muestra debe ser incubada a 37º C si no es procesada inmediatamente y debe ser

examinada dentro de la primera hora después de emitida.
Examen Físico:
 Volumen: Medido en un tubo graduado o con una pipeta Pasteur. El volumen

normal para un mínimo de dos días de abstinencia es de 2 mL. Se relaciona con
la cantidad de secreción producida por las glándulas anexas. El 60% del volumen
corresponde a la secreción de las vesículas seminales, el 30% de próstata y el
10% del epidídimo y glándulas bulbouretrales.
 Hipospermia: niveles inferiores a 2 mL (relacionada con niveles de testosterona

bajos). Sin embargo, debe evaluarse una nueva muestra para descartar
problemas en la recolección.
 Aspermia: Cuando habiendo orgasmo no hay líquido seminal externo, esto ocurre
generalmente en pacientes diabéticos o en aquellos que tienen alguna lesión
medular.
 Hiperespermia: Por encima de 6 mL. Es negativo para la fertilidad por su efecto

de dilución sobre la población espermática, sobre todo si el número de
espermatozoides por ml es bajo
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 Viscosidad: Es un valor físico- químico. Se establece en el momento de

medir el volumen; 30 minutos a 60 minutos después de recogida la muestra.
Se recomienda homogenizar debidamente la muestra. Se determina con la
caída libre de gotas de la muestra.
El semen, eyaculado como un líquido, casi inmediatamente toma una consistencia

gelatinosa y luego se torna líquido nuevamente dentro de un lapso de 30 a 40
minutos. Si el eyaculado no se vuelve a tornar líquido, los espermatozoides podrían
tener problemas al entrar en el cérvix. Por lo tanto, en un análisis de semen el grosor
(viscosidad) del semen se estudia en un intervalo posterior a la eyaculación, cuando
ya la licuefacción total debiera haber ocurrido.
 Disminuida: Como el agua.
 Normal: Caída de gotas pequeñas bien definidas.
 Aumentada: Con filancia mayor a 2 cm.
La alteración de la mucólisis y el aumento de la viscosidad del líquido seminal se
relacionan con procesos inflamatorios de las glándulas y su presencia impide el libre
desplazamiento del espermatozoide
 Licuefacción: Fenómeno bioquímico que depende de la actividad hormonal y

particular de la testosterona. In vitro se debe producir entre los 15 a 30
minutos después de la recolección de la muestra. La presencia de material no
licuado (coágulos) 60 minutos después de la eyaculación indica disfunción
prostática enzimática.
Al momento de la eyaculación, el plasma seminal proveniente de la próstata es líquido,

pero una vez entra en contacto con las secreciones de las vesículas seminales se
coagula. Por lo tanto, la coagulación del plasma seminal es una de las características de
la función de las vesículas seminales. Después de la coagulación ocurre un fenómeno
de licuefacción, el cual es dependiente de la actividad de la próstata. Por ello, ambos
procesos, la coagulación y la mucólisis (licuefacción), reflejan la función de las glándulas
sexuales accesorias (vesículas seminales y próstata). La alteración de la mucólisis y el
aumento de la viscosidad del líquido seminal se relacionan con procesos inflamatorios
de las glándulas y su presencia impide el libre desplazamiento del espermatozoide, lo
cual produce astenozoospermia
Aspecto: inicialmente es GELATINOSO, ESPESO Y DENSO. Dentro de los 30

minutos sufre un proceso de licuefacción. Después de la licuefacción espontánea
toma un aspecto OPALESCENTE que depende del contenido de espermatozoides y
otros elementos.
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 Color: blanco grisáceo, lechoso o débilmente amarillento. Sus alteraciones

dependen de la presencia de sangre, leucocitos, bacterias, y medicamentos
 Blanco opalescente o grisáceo (Normal)
 Amarillento (prostatitis o vesiculitis crónica)
 Blanco purulento (Infección aguda)
 Marrón (presencia de sangre Hemospermia)
 pH: Debe determinarse durante la primera hora de obtenida la muestra. Cuando se

demora su determinación hay tendencia a la alcalinidad. Se utiliza papel indicador.
El valor de referencia en el adulto ha sido modificado por la OMS durante la última
década, siendo en la actualidad de 7.2 a 7.8.
El pH seminal depende de las secreciones de las glándulas sexuales accesorias,
siendo la próstata acidificante y alcalinizante las vesículas seminales. A pH ácido se
produce mortalidad de los espermatozoides (el pH ácido de la vagina actuá como
espermaticida biológico). El espermatozoide tolera más fácilmente la alcalinización
del semen
Cuando existe un pH ácido y un volumen menor de 2 cc se debe sospechar de una
agenesia de vesículas seminales. Esta se puede confirmar con una titulación de
fructuosa en el semen, la cual debe de reportar valores bajos o con una ecografía de
órganos genitales internos.
Examen Microscópico
 Movilidad: Con el semen ya licuado y homogenizado, se monta una gota

entre lámina y laminilla y se leen con el de objetivo de 40X.
a. Móviles rápidos progresivos: se mueven en dirección lineal.

b. Móviles lentos progresivos: se mueven en dirección lineal o no.
c. In situ: no avanzan
d. Inmóviles.
Motilidad normal corresponden a 50% de espermatozoides clasificados como a y b,

y más del 25% grado a. Si no se cumplen estos criterios, la muestra seminal se
califica con diagnóstico de astenozoospermia (MOTILIDAD ANORMAL).
 Viabilidad: Se establece el porcentaje de vivos y muertos contando

como mínimo 200 a 300 espermatozoides en diferentes campos. Se coloca
una gota de semen sobre el portaobjetos más una gota de eosina al 0.5%
entre lamina y laminilla.
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Cuando las células mueren pierden su capacidad de permeabilidad de membrana y

permiten el paso libre de los fluidos, por lo cual los espermatozoides muertos se
observarán al microscopio como teñidos de rosado y los vivos estarán sin teñir. Lo
normal son ≥ 50% de espermatozoides vivos.
La fracción de espermatozoides muertos se encuentra aumentada en procesos
infecciosos, falla hormonal, presencia de anticuerpos anti espermatozoides, etc.
 Morfología: Se debe hacer un extendido como preparación de sangre con

semen licuado y mezclado se colorea con coloración de Wright.
Características morfológicas normales del espermatozoide.

Forma Ovalada
Acrosoma Bien definido ocupa 40-70% de la
Cabeza cabeza
Longitud 4-5 micras
Ancho 2.5-3.5 micras
Forma Delgada, unida axialmente a la
Pieza cabeza
intermedia Longitud 1.5 long cabeza
(cuello)
Ancho < 1 micra
Flagelo Recto, uniforme, más delgado que el cuello,
(cola) desenrollado, 45 micras de long
Espermatozoide normal, sin alteraciones morfológicas y normoconfiguración de la cabeza.
Normal hasta el 30% de anormalidades. Cuando no se cumple con el porcentaje de

formas normales se denomina teratozoospermia. Las infecciones de transmisión
sexual, el estrés, las altas temperaturas, el varicocele, los tóxicos ambientales, las
drogas de adicción (marihuana, ácidos, cocaína etc.), el alcohol, el cigarrillo, antibióticos,
agropesticidas, radiaciones han sido asociadas con la teratozoospermia
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También existen factores genéticos, como son los casos de la agenesia del acrosoma y
la ausencia de brazos de dineina en el flagelo (Síndrome del Cilio Inmóvil), donde hay
inmovilidad de los espermatozoides
 Cabeza: Oval, piriforme, macrocéfalo, microcéfalo, bicéfalo, acéfalo, amorfo.
 Cuello: Puede estar ausente o restos
 Flagelo: Aflagelado, Biflagelado, Enrollado, Corto.
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 Recuento: El recuento de espermatozoides se realiza mediante cámaras de

recuento específicas como la cámara de Neubauer. Se debe realizar una
dilución 1:20 con solución salina 0,85% (380ul diluyente + con 20ul de muestra).
El semen debe estar totalmente licuado y muy bien mezclado. Se deposita una
gota de la dilución en la cámara y se lee con el objetivo de 40X en el cuadrante
de los glóbulos rojos.
 Para el recuento se debe tener en cuenta lo siguiente:

FACTOR DE
SI OBSERVAMOS CONTAR MULTIPLICACIÓN
Menos de 10 espermatozoides por contar 25 200.000

cuadrado cuadros
De 10 a 40 espermatozoides por contar 10 500.000
cuadrado cuadros
Más de 40 espermatozoides por contar 5 1´000.000
cuadrado cuadros
Explicación del Factor de multiplicación de 1´000.000

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400: número de cuadros pequeños de 1 mm 2 de la cámara.

10: la cámara es de 1/10
20: la dilución empleada es de 1:20
1000: factor de transformación de mm 3 a cm3
80: número de cuadrados pequeños contados
Nº de espermatozoides / mL = 400 x 10 x 20 x1000 = 1´000.000

80
Valor de referencia: >20.000.000 de espermatozoides/ mL y >40.000.000
Espermatozoides eyaculados están en el rango fértil.
Ejemplo: si se utiliza una dilución de 1:20, se cuenta en promedio 60 espermatozoides
en los cinco cuadrados de eritrocitos en ambos lados del cámara de Neubauer. Calcular
la concentración de concentración de espermatozoides por milímetro y el recuento total
de espermatozoides en una muestra con un volumen de 4 ml:
60 espermatozoides contados x 1.000.000= 60.000.000 de espermatozoide/ml
60.000.000 de espermatozoides/ml x 4 ml= 240.000.000 esperm. Eyaculados.
 Oligozoospermia: La cantidad de espermatozoides es inferior a 20 millones cc 3

o menor a 40 millones en recuento total.
 Azoospermia: No se observan espermatozoide. En estos casos, el problema

puede ser secretor, es decir, no hay o hay pocos espermatozoides por daño
en el testículo causado por inflamaciones, infecciones, varicocele y otras
causas, o excretor, es decir, se producen espermatozoides pero existe una
obstrucción de la vía de transporte de espermatozoides desde los testículos a
la uretra prostática.
En los casos post vasectomía, se requiere un examen exhaustivo de todo el

sedimento obtenido por centrifugación durante 15 min a 800rpm, para clasificar a un
paciente de azoospérmico. Debido a que la imprecisión de la cámara es alta, no
debe indicarse “0 espermatozoides”, debe informarse “no se observan
espermatozoides en la muestra examinada”.
La movilidad está disminuida generalmente por infecciones de transmisión sexual,
por el varicocele testicular, el frío, muchos días de abstinencia, afectaciones
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mitocondriales de origen congénito o adquirido, sustancias adictivas como el

cigarrillo y el alcohol. Es una alteración frecuente en varones con infertilidad. El
tratamiento depende de su causa.
Celularidad
El Líquido seminal contiene frecuentemente otros elementos diferentes a los

espermatozoides:
Hematíes: su presencia es patológica, nos orienta hacia la presencia de algún
proceso maligno o congestivo de uretra o bien próstato-vesicular.
Leucocitos y piocitos: su presencia en forma aumentada nos indica un proceso

infeccioso y/o inflamatorio de las glándulas anexas. Los leucocitos también pueden
estar aumentados en pacientes con espermatogénesis muy alterada, con exposición
a altas temperaturas, tóxicos etc.
Células epiteliales: normalmente escasas, se encuentran aumentadas en procesos

congestivos.
Conglomerados: los espermatozoides muertos tienden por propiedades físico-

químicas de sus membranas a conglomerarse entre sí, con filamentos de mucus,
células y/o detritus. Debe diferenciarse de “aglutinación”, donde espermatozoides
móviles se unen entre sí, indicando la presencia de anticuerpos. Su presencia no
confirma la autoinmunidad y su ausencia no la descarta.
 Bacterias
 Hongos
 Trichomonas

Registro: Libro de Registro espermograma
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COPROANÁLISIS
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7. COPROANÁLISIS
7.1 Coprológico
Es un método sencillo y rápido que permite confirmar el diagnóstico de parasitosis intestinal.
 Láminas
 Laminillas
 Lugol
 Solución Salina 0.85 %
 Lápiz Marcador
Procedimiento
La auxiliar del laboratorio debe realizar el montaje y análisis macroscópico que consiste en:
Color: café, amarillo, verde, negra, rojas, etc. El color depende del estado normal o
patológico del paciente o de su régimen alimenticio.
Consistencia: en la materia fecal la consistencia varía así: duras, blandas, diarreicas,

liquidas.
Aspecto: se observa si presenta moco muy visible y se informa mucoide o con sangre que
sería sanguinolento
Moco: se observa si la muestra presenta o no moco y se informa por cruces. Se encuentra

generalmente en pequeñas cantidades, su significación clínica es variada.
Normalmente la materia fecal presenta una consistencia firme y formada o blanda y formada,
y un color café carmelito; pero factores fisiológicos, patológicos y alimenticios modifican estas
características.
Observar e informar si existen parásitos adultos.
Iniciar la preparación de las muestras por las heces líquidas y las que contienen moco y
sangre, que deben ser las primeras en examinarse.
Proceda a la preparación de las muestras de la siguiente manera:
 Marcar las láminas con el número de la muestra correspondiente.

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 Colocar sobre la lámina una gota de solución salina y aproximadamente a dos

centímetros una gota de Lugol.
 Tomar con el aplicador de madera una pequeña porción de la parte profunda y de la
superficie de la muestra, si las heces están formadas.
 Si son líquidas o semilíquidas tómela del moco sanguinolento y del líquido que las
rodea.
 Homogenizar la muestra primero en la gota de solución salina y con el mismo
aplicador tome otra porción y homogenícela en la gota de Lugol.
 Colocar una laminilla sobre cada gota, evitando se formen burbujas.
 Llevar las láminas al sitio indicado para que la bacterióloga realice el examen
microscópico conservando el orden de numeración.
 Registrar en el libro de registro de Coproanálisis,
 Una vez examinadas las muestras descarte las muestras en la bolsa roja.
Análisis microscópico:
El bacteriólogo (a) debe observar en objetivo 10X con baja intensidad de luz en una sola
dirección de forma horizontal o vertical todo el montaje. Con este objetivo además de
realizar una visualización general de todo lo que pueda contener la muestra examinada se
consigue aquí el diagnostico de helmintiasis realizando un recuento de huevos y larvas
multiplicando su número por 500 para dar un resultado en h.p.g (huevos por gramo).
Posteriormente observar con el objetivo 40X formas protozoarias de parásitos intestinales
entre otros.

Registro: Libro de Registro Coproanálisis
7.2 Coproscópico
Es el análisis químico, microscópico y macroscópico de una muestra de materia fecal.
 Láminas
 Laminillas
 Lugol Parasitológico
 Test Sangre Oculta
 Test o Reactivo de Benedict
 Papel Indicador de pH
 Solución Salina 0.85 %
 Lápiz Marcador
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 Microscopio
 Colorante Wright
Procedimiento
La auxiliar del laboratorio debe realizar el montaje y análisis macroscópico que consiste en:
 Marcar las láminas con el número de la muestra correspondiente.

 Colocar sobre la lámina una gota de solución salina y aproximadamente a dos
centímetros una gota de Lugol.
 Tomar con el aplicador de madera una pequeña porción de la parte profunda y de la
superficie de la muestra, si las heces están formadas.
 Si son líquidas o semilíquidas tómela del moco sanguinolento y del líquido que las
rodea.
 Homogenizar la muestra primero en la gota de solución salina y con el mismo
aplicador tome otra porción y homogenícela en la gota de Lugol.
 Colocar una laminilla sobre cada gota, evitando se formen burbujas.
 Llevar las láminas al sitio indicado para que la bacterióloga realice el examen
microscópico conservando el orden de numeración.
 Registrar en el libro de registro de Coproanálisis,
 Una vez examinadas las muestras descarte las muestras en la bolsa roja.
 Medición de pH: con un palillo se toma una pequeña porción de materia fecal, se pasa
por una tirilla de papel tornasol o papel indicador para la medición de pH.
Normalmente es neutra, o ligeramente alcalina (pH 6.9 – 7.2) pero la reacción
depende de múltiples factores, dietéticas y endógenos.
Medición de azucares reductores:
Método Benedict
 Colocar en un tubo 5 gotas de deposición líquida, si es sólida untar la paleta

 Agregar 2.5 mL del reactivo Benedict
 Al tiempo montar un tubo Blanco, utilizando como muestra agua destilada
 Mezclar y colocar en el baño serológico durante 3 a 5 minutos
 Dejar enfriar y leer
 El tubo blanco no debe tener cambio de color
Resultados
% DE AZUCAR
COLOR INFORME
REDUCTOR
AZUL Negativo 0%
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AZUL VERDOSO Trazas <1%

VERDE + 0.25%
VERDE MARRÒN ++ 0.5%
PARDO VERDUSCO +++ 1%
NARANJA O ROJO
++++ 2%
LADRILLO
 Medición de sangre oculta:
Método Guayaco Modificado
 Sobre un test escribir el nombre, apellido del paciente y fecha en la parte posterior
del sobre. Abrir el test por el lado de adelante y sacar el folio de protección del lado
interior.
 Tomar con una SPAT una suficiente cantidad de heces y llenar la ventana A
completamente hasta el borde. Descartar la espátula.
 Con una segunda SPAT tomar una muestra más de otra parte de las heces y llenar
completamente la ventana B. Descartar la espátula.
 Cerrar el test presionando fuerte la tapa autoadhesiva
 Separar totalmente del lado posterior del sobre la cubrejunta con la impresión A.
 Aplicar una gota del frasco gotero ACT sobre la mancha marrón y dejar que penetre.
 Aplicar una gota del frasco gotero con DEV sobre la mancha marrón y dejar que
penetre.
 Después de 30 segundos aparece en una reacción positiva una coloración azul. No
interpretar el resultado después de 10 minutos.
Prueba Rápida
Cada paquete contiene 25 dispositivos de prueba, cada uno sellado en una bolsa de aluminio
junto con los siguientes productos:
 Un dispositivo casete de prueba

 Un desecante
Procedimiento
 Recolectar una muestra aleatoria de las heces en un recipiente limpio y seco

 Desenroscar el tapón del tubo de muestras y retire el aplicador
 Aleatoriamente perfore el espécimen fecal en por lo menos 5 puntos diferentes
 Eliminar el exceso de muestra del eje y ranuras exteriores. Asegúrese de que la
muestra permanezca en el interior de las ranuras. Esta cantidad es suficiente para
realizar la prueba. El exceso de cantidad de materia fecal puede dar lugar a resultados
de la prueba no válidos.
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 Colocar el tubo dentro del contenedor de prueba y apriete bien

 Agitar el tubo de extracción enérgicamente
 Abrir la bolsa retirar el dispositivo. Colocar el dispositivo de prueba en una superficie
limpia y plana.
 Agitar el tubo de recolección de muestras vigorosamente con el fin de asegurar una
completa suspensión líquida.
 Mantener el tubo boca arriba, girar la tapa.
 Verter 2 gotas de la solución en la almohadilla de muestras en el dispositivo. No
sobrecargue el
dispositivo con
muestra.
Programe el cronómetro. Los

resultados pueden leerse 10
minutos después de haber
adicionado la muestra. Los resultados positivos son visibles en un tiempo de 1 minuto.
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No realizar la lectura del resultado después de 10 minutos.
Nota: la muestra recolectada puede mantenerse almacenadas durante 3 días a una

temperatura de 2 a 8 °C o durante un año a una temperatura menor a <-20°C.
Interpretación de Resultados
Resultado Negativo: si solo aparece la banda C, la prueba indica que el hHB en la muestra
se encuentra por debajo de 25 ng/ml del tampón FOB. En este caso el resultado es negativo,
Resultado Positivo: si aparecen las bandas C y T, la prueba indica que la concentración de

hHb en la muestra es igual o superior a 25 ng/ml del tampón FOB o 25 ug hHB/g en heces.
En este caso el resultado es positivo.
Resultado Inválido: si no se genera una banda C, el ensayo no es válido sin importar que se
haya generado una línea en la banda T. El análisis se debe repetir con un nuevo dispositivo.
Si se obtiene este resultado a causa de la sobrecarga en la cantidad de muestra fecal
recolectada, tomar nueva muestra y repetir la prueba.
La causa de sangrados elevados en heces debe ser aclarada por ulteriores exámenes
diagnósticos.
7.3 Prueba rápida para detección de Rotavirus y Adenovirus en materia fecal
Para estudios epidemiológicos que buscan determinar la prevalencia de Enterovirus en

niños, se realiza prueba rápida RIDA QUICK ROTAVIRUS/ ADENOVIRUS COMBI a todos
los menores de 5 años que presenten consistencia liquida en muestra de materia fecal
Procedimiento:
 Ajustar reactivos a temperatura ambiente.

 Pipetear 1 ml de buffer de extracción Diluent a un tubo de ensayo.
 Adicionar 100 ul o 50 mg de muestra de heces.
 Homogenizar la muestra en un vibrador vórtex o como alternativa mediante la
aspiración y expulsión de la suspensión de heces con una de las pipetas desechables
suministradas Pipet.
 Dejar que sedimente la suspensión de heces durante 3 minutos.
 Sacar el casete de la bolsa plástica y pipetear 4 gotas 0 200 ul de sobrenadante claro
en el orificio circular de entrada del casete.
 Lectura del resultado después de 5 minutos.
Interpretación:
 Adenovirus positivo: banda azul y banda verde son visibles.
 Rotavirus positivo: banda roja y banda verde son visibles.
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 Adenovirus y Rotavirus positivos: banda azul, banda roja y banda verde son visibles.
 Negativo: Sólo la banda verde es visible.
 Inválido: no hay bandas visibles, o existe otra situación diferente a la descrita más
arriba, así como otras coloraciones de las bandas. Igualmente si hay coloraciones de
bandas que aparecen a los 10 minutos o más tarde, éstas se deben evaluar como
carentes de valor diagnóstico.
7.4 Test de Graham
El nemátodo Enterobius Vermiculares, comúnmente denominado oxiuro, es el agente causal

de una enfermedad parasitaria llamada Oxiuriasis. Su ciclo de vida tiene características
diferentes. La hembra grávida migra al ano y en los pliegues perianales deposita sus huevos,
ocasionando prurito. Es por esto que la técnica para su diagnóstico es diferente a la de otras
parasitosis intestinales.
Este el método es el más utilizado para el diagnóstico de oxiuros, ya que es una técnica
sencilla que permite observar los huevos adheridos a una cinta engomada transparente.
 Cinta engomada transparente.

 Bajalenguas.
 Láminas.
 Gasa.
Procedimiento
 Cortar aproximadamente 12 cm. de cinta engomada transparente de 1 cm. de ancho y

péguela sobre una lámina, dejando que sobresalga la cinta por los extremos de ésta.
 Doblar uno de los extremos de la cinta sobre sí mismo para usarlo de “cogedera “y el
otro extremo péguelo a la lámina.
 En el momento de tomar la muestra, colocar un bajalenguas debajo de la lámina
haciendo que sobresalga del extremo contrario a la “cogedera “, aproximadamente 2.5
cm.
 Separar la cinta de la lámina tomándola por la “cogedera “y dóblela por detrás del
bajalenguas, dejando expuesta la superficie gomosa.
 Sujetar firmemente la cinta y la lámina contra el bajalenguas.
 Solicitar al usuario se despoje de su ropa interior y se coloque sobre la camilla en
posición de gateo.
 Separar los glúteos y presione el extremo del bajalenguas, sin insertarlo, en varios
sitios de la piel que rodea el ano.
 Adherir de nuevo la cinta a la lámina y alísela suavemente con una gasa
 Desechar el bajalenguas y lleve la lámina para su observación microscópica por parte
del bacteriólogo (a) responsable.
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 Descartar la lámina una vez examinada la muestra.
Responsable: Bacterióloga - auxiliar del laboratorio

Registro: Libro de Coproanálisis
7.5 Sangre Oculta en Materia Fecal - Método Guayaco Modificado
La hemorragia en el aparato gastrointestinal puede ser aguda o crónica, oculta o evidente, y

puede originarse en cualquier punto del aparato digestivo desde la boca hasta el recto.
Aunque con frecuencia es el resultado de una patología menor, como en el caso de las
hemorroides y las fisuras anales, nunca debe ignorarse la presencia de sangre en las heces.

 Test Sangre Oculta
 Lápiz Marcador
 Microscopio
Procedimiento
 Sobre un test escribir el nombre, apellido del paciente y fecha en la parte posterior
del sobre. Abrir el test por el lado de adelante y sacar el folio de protección del lado
interior.
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 Tomar con una SPAT una suficiente cantidad de heces y llenar la ventana A
completamente hasta el borde. Descartar la espátula.
 Con una segunda SPAT tomar una muestra más de otra parte de las heces y llenar
completamente la ventana B. Descartar la espátula.
 Cerrar el test presionando fuerte la tapa autoadhesiva
 Separar totalmente del lado posterior del sobre la cubrejunta con la impresión A.
 Aplicar una gota del frasco gotero ACT sobre la mancha marrón y dejar que penetre.
 Aplicar una gota del frasco gotero con DEV sobre la mancha marrón y dejar que
penetre.
 Después de 30 segundos aparece en una reacción positiva una coloración azul. No
interpretar el resultado después de 10 minutos.
La causa de sangrados elevados en heces debe ser aclarado por ulteriores exámenes
diagnósticos.
Responsable: Bacterióloga realiza la lectura, el personal auxiliar puede colaborar en el

montaje.
Registro: Libro de Coproanálisis
7.6 Coprológico por Concentración – Método de Ritchie
Método de Concentración por Sedimentación
Fundamento
Es un método que consiste en la sedimentación de parásitos intestinales en heces se logra

por centrifugación ligera o por gravedad del material fecal, conduciendo a la recuperación de
todos los protozoarios, huevos y larvas, especialmente huevos de tremátodos. Concentra
bien estas formas y elimina bastantes detritus orgánicos. Aunque se inactivan las formas
móviles de los protozoarios, se mantiene la integridad de los organismos. Es efectivo aún en
heces con cantidades excesivas de grasas. Sin embrago, durante la sedimentación, aparte
de concentrarse los parásitos, se quedan reunidos también algunos otros materiales,
abundando los artefactos durante la observación.
Es un método de concentración fecal muy parecido al de Faust, la única diferencia es que en
esta técnica se sedimentará en el fondo la materia fecal a examinar, y es útil para encontrar
huevecillos, quistes y trofozoitos muy pesados.
Es empleada cuando no se observan parásitos en el método directo y para aumentar la
probabilidad de observar parásitos en las muestras estudiadas.
Volumen y elección: En heces sólidas o pastosas se utiliza el equivalente al tamaño de una

aceituna. En heces líquidas se utiliza todo el volumen. Se debe preferir tomar la muestra
donde tenga presencia de mucus, pus o sangre.
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 Tubos de ensayo cónicos

 Gasa
 Embudo
 Vaso de Precipitado
 Pipeta Pasteur
 Aplicador de Madera
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Centrifuga
 Microscopio
 Solución Salina
 Formaldehido al 10 %
 Éter Comercial
 Lugol
Procedimiento
 Agregar con el aplicador de madera 1gr de materia fecal en un vaso de precipitado

 Añadir 10 ml de solución salina al vaso de precipitado para diluir las heces, mezclar
 Colocar la gasa en el embudo doblada en 4 partes
 Filtrar las heces ya diluidas en el tubo cónico
 Se tapa el tubo y se pone en la centrifuga a 2000 rpm a 2 minutos
 Decantar el líquido
 Al sedimento agregar solución salina y suspender
 Centrifugar, decantar y suspender 2 veces más
 Agregar 5 ml de formaldehido al 10 % y mezclar
 Dejar reposar el tubo por 10 minutos
 Agregar 0.5 ml de éter, tapar
 Agitar el tubo durante 30 segundos vigorosamente
 Centrifugar el tubo durante 2 minutos a 2000 rpm
 Decantar
 Con la pipeta Pasteur extraer 1 gota del sedimento y colocar en la lámina portaobjetos
 Agregar 1 gota de Lugol parasitológico
 Colocar cubreobjetos
 Observar al microscopio con los objetivos 10x y 40x
 Registrar lo observado en el libro de Coproanálisis
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Registro: Libro de Registro Coproanálisis
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QUÍMICA CLÍNICA E
INMUNOLOGÍA
8. QUÍMICA CLÍNICA E INMUNOLOGÍA
8.1 Pruebas de Química Sanguínea
El área de Química Sanguinea e Inmunología comprende el análisis de los siguientes

exámenes por método automatizado, semi automatizado o manual.
Colorimétricas Indicaciones Cinéticas Indicaciones

Muestra Muestra
Glucosa - Curvas de Suero sin Bun Suero sin hemólisis
Glucosa hemólisis, ayuno.
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Colesterol Suero sin Creatinina- Suero sin hemólisis

hemólisis, ayuno. Depuración de
Creatinina
Colesterol HDL Suero sin GOT Suero sin hemólisis
hemólisis, ayuno.
Triglicéridos Suero sin GPT Suero sin hemólisis
hemólisis, ayuno.
PCR Suero sin Lactato Suero sin hemólisis
hemólisis Deshidrogenasa LDH
Proteinuria Orina 24 hrs o al Amilasa Suero sin hemólisis
Azar
Ácido Úrico Suero sin Fosfatasa Alcalina Suero sin hemólisis
hemólisis, ayuno.
Proteínas Totales Suero sin CK Total Suero sin hemólisis
hemólisis
Bilirrubinas Total, Suero sin CK MB Suero sin hemólisis
Directa e Indirecta hemólisis,
protegido de la
luz.
Albumina Suero sin PT - PTT Plasma sin
hemolisis. hemólisis
Suero sin ASTOS Suero sin
Serología VDRL hemólisis, hemólisis,
Factor Reumatoide RA Suero sin
Test hemólisis,
Pruebas Rápidas
HIV Troponina
Dengue HBsAg
Hepatitis C Toxoplasma
Hepatitis A
Procedimiento General
El personal de bacteriología antes de realizar el procesamiento de muestras y uso del equipo

al inicio de jornada debe verificar:
 Limpieza y Mantenimiento de equipos y su debido registro en el formato

correspondiente del área
 Revisión de reactivos
 Revisión y Análisis de Control de calidad
Limpieza y Mantenimiento de Equipos
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De acuerdo a lo establecido en el manual de Manejo y Limpieza de Equipos el bacteriólogo

(a) debe realizar o verificar que se haya realizado.
Limpieza semanal: el personal de bacteriología del turno de la noche debe realizar el

mantenimiento al equipo durante el turno del fin de semana siguiente al día hábil.
Limpieza diaria: el personal de bacteriología de turno en la mañana debe verificar que el

equipo cuente con suficiente agua y detergente y demás condiciones necesarias para el
buen funcionamiento.
Informe SAT (Equipo A-15): semanalmente debe realizarse un informe SAT, el cual permite
almacenar la información de resultados de pacientes y estado de controles durante la
semana transcurrida, evitando así perdida de datos almacenados en el equipo analizador de
química sanguínea.
Revisión de Reactivos
El personal de bacteriología debe realizar la revisión de la cantidad de reactivo disponible en

cada frasco del carrusel de reactivos del equipo.
Los reactivos vienen listos para su uso y se encuentran refrigerados de 2 a 8 °C en la nevera

de la sección. Excepto la creatinina y proteínas totales se almacenan a temperatura ambiente
en el área.
El personal de bacteriología debe preparar reactivo de trabajo en la proporción 4:1 de los
reactivos que vienen en presentación de Reactivo 1 y Reactivo 2, con el fin de evitar
deterioro del reactivo. Ver inserto de cada técnica
Preparación del Reactivo de Trabajo: 4:1
 Rotular el frasco del reactivo de trabajo con el nombre de la técnica y fecha de

preparación
 Mezclar en la proporción: 4 ml de reactivo A + 1 ml del reactivo B. Es estable por 28
días a 2-8 °C cuando no ocurra contaminación química o microbiana.
 Para preservar el desempeño del reactivo debe permanecer por fuera de la nevera
solamente el tiempo necesario.
Nota: el envase donde se prepara el reactivo de trabajo debe estar limpio, purgarse con
reactivo antes de su uso. Cuando se sirve nuevo reactivo se debe cambiar de frasco.
Revisión y Análisis del Control de Calidad
La bacterióloga (o) de turno de la mañana debe realizar el análisis de acuerdo a las

indicaciones dadas en el manual de Control de Calidad interno y Externo del Laboratorio
clínico y debe registrar los resultados del control de calidad en el formato en Excel disponible
en el computador del área.
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Procesamiento de muestras
Las siguientes pruebas son procesadas en el área de química clínica: Glucosa, Test de O”
Sullivan, Curvas de Glucosa, Colesterol Total, Colesterol HDL, Triglicéridos, Albúmina, BUN,
Creatinina, Ácido Úrico, Bilirrubinas Total y Directa, GOT, GPT, Fosfatasa Alcalina, Proteínas
Totales, Proteinuria, LDH, Amilasa, CK, CK-MB, PCR Turbidimetría.
El personal auxiliar del laboratorio lleva al área de química sanguinea las muestras a
procesar junto con la orden médica.
El personal de bacteriología verifica nuevamente que la muestra corresponda con la orden

médica y cumpla con las condiciones para su análisis.
Equipo Automatizado y Software
 Colocar el tubo primario que contiene el código de barras para ser leído por el lector.
 Oprimir la opción Escanear en el equipo y este inicia el reconocimiento de reactivos y
muestras.
 Si no aparece alarma en el equipo ordenar el inicio del proceso al equipo
 Si aparece alarma verificar que el lector del código de barras esté limpio, sino limpiar
con paño suave, revisar que el sticker esté en la posición correcta en el tubo.
 El equipo empieza a emitir resultados directamente al software y la bacterióloga (o)
valida el resultado mediante la interfase.
Nota: para manejo del equipo ver Manual de Manejo y Limpieza de Equipos.
Verificación de Resultados: ante un resultado por fuera del intervalo de referencia se debe
reprocesar en el equipo y el nuevo resultado es enviado al software directamente e invalida
el resultado anterior. Pero si al contrario se desea enviar el resultado antes reportado por el
equipo, se debe buscar ese resultado en el equipo y oprimir la opción enviar y el software lo
envía directamente a la interfase para poder ser validado y reportado.
NOTA: Con el uso del código de barras no se digitan datos del paciente, ni se solicitan
pruebas, el código de barras carga toda la información del paciente ya ordenada por la
auxiliar del área de recepción de muestras.
Equipo Automatizado e ingreso de pacientes de forma manual
 Ingresar el nombre y apellidos del paciente al equipo automatizado

 Seleccionar los exámenes a procesar por el equipo
 Colocar el tubo secundario que contiene los datos del paciente. Si la cantidad de la
muestra es escasa se debe utilizar la copilla del equipo.
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 Oprimir la opción iniciar al equipo
 El equipo realiza reconocimiento de muestras y reactivos, si saca alarma se debe

revisar y corregir.
 Si no aparece alarma en el equipo, ordenar el inicio del proceso al equipo
 El equipo emite resultados en la pantalla o en la opción de resultados
Insertos Inmunoquímica
En el área de química se encuentran los insertos de las técnicas utilizadas.

Registro: Libro de Registro Química
 Fórmulas para determinación de Proteinuria, Depuración de Creatinina,

Creatinina en Orina, Globulinas y LDL.
Depuración de Creatinina:
Realizar dilución de la orina 1:40 (3900 ul de solución salina – 100 ul de sobrenadante orina).
Medir la creatinina en orina (dilución)
Medir la concentración de creatinina en suero del paciente.
Realizar la fórmula:
Valor de referencia
Depuración de Creatinina: 75 -115 ml/min (mujeres) – 85 – 125 ml/min (hombres).
Creatinina en Orina 24 horas: 0.8 – 1.9 gr/24 horas
Creatinina
en Orina de
24 Horas:
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mg/kg peso: mg/24 horas dividido por el peso corporal
Valor de referencia
Creatinina en Orina:
2-3 años: 6-22 mg/24 horas
>3 años: 12-30 mg/24 horas
Mujeres adultas: 16-22 mg/24 horas
Hombres adultos: 21-26 mg/24 horas
Proteinuria:
No se diluye la muestra, se
procesa el sobrenadante.
Proteinuria:
Valor de Referencia: 0 – 150 mg/24 horas
Globulinas: se obtienen de restar el valor de las proteínas totales a la albúmina.
HDL: realizar la precipitación. Ver inserto

Luego se centrifuga 15 minutos a 3500 ppm, se procesa el sobrenadante. El equipo da el
resultado en mg/dl.
HDL LE: determinación directa del colesterol HDL en suero y plasma. Se coloca la muestra a
analizar en el equipo. El equipo da el resultado en mg/dl.
LDL: se obtiene de la fórmula:
LDL: Colesterol Total – Triglicéridos/5 - HDL
Equipo de Apoyo
Equipo automatizado o semi automatizado el cual se utiliza para la verificación de resultados

o cuando el equipo principal presente falla o falte algún insumo para su funcionamiento.
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8.2 Pruebas de Aglutinación
Las reacciones de aglutinación son unas pruebas de amplio uso en los laboratorios clínicos;
es un método cualitativo y/o semi-cuantitativo que permite identificar antígenos o anticuerpos;
el reciproco de la dilución se multiplica por un factor que lo indica la casa fabricante.
La aglutinación se basa en la reacción que se lleva a cabo entre un anticuerpo y un antígeno
particulado tipo células, bacterias o partículas inertes como látex o bentonita a las cuales se
les ha adosado ya sea el antígeno o el anticuerpo soluble.

Pruebas de Aglutinación PCR, ASTOS, RA TEST
Estas 3 pruebas llevan el mismo procedimiento y se utiliza la misma cantidad de muestra y

reactivo:
PCR
Prueba rápida de aglutinación en látex para la determinación cualitativa y semi cuantitativa
de la proteína c reactiva en suero no diluido.
ASTOS
Prueba en lámina de aglutinación en látex para la determinación
cualitativa y semicuantitativa de antiestreptolisinas O en suero no diluido.
Factor Reumatoide
Prueba rápida en lámina de aglutinación en látex para la determinación cualitativa y semi

cuantitativa del factor reumatoide, en suero no diluido.
Procedimiento PCR, ASTOS, RA TEST:
 Atemperar el reactivo y mezclar suavemente
Pipetear en el círculo de la placa:

Suero muestra 50ul
Control positivo 50ul
Control negativo 50ul
Reactivo de látex 50ul
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Mezclar con diferentes palillos y extender el fluido sobre toda la superficie de cada una de las
áreas, poner en un rotador automático a 100 r.p.m. por 2 minutos.
Al finalizar los dos minutos observar el resultado bajo luz artificial.
La aglutinación indica un contenido de PCR de más de 6 mg/L en la muestra sin diluir. Los
sueros con resultados positivos en la prueba de tamizaje, deben analizarse de nuevo con la
prueba de titulación.
Cualquier aglutinación visible indica un contenido de ASTOS de más de 200 UI/ml en
muestras sin diluir. El suero con resultados positivos en la prueba de tamizaje debe ser
analizado con la prueba de titulación.
La aglutinación clara indica un contenido de factor reumatoide RA de más de 8 IU/ml en la
muestra sin diluir. Los sueros con resultados positivos en las pruebas cualitativas deberían
analizarse con la prueba de titulación.
Prueba semi cuantitativa
Realiza dilución 1:2 seriada de la muestra, adicionar reactivo y agitar 100 r.p.m. durante 2
minutos.
Interpretación de resultados
Leer el título en la última dilución que presente una aglutinación visible. Multiplicar el titulo por
el factor de conversión:
Prueba Factor de Conversión

PCR 6
ASTOS 200
RA 8
Reportar el resultado en mg/L.

Ejemplo: Titulo 1: 16 concentración de PCR. 16 X 6 mg/L = 96mg/L.
Control de calidad
Ver Manual Control Calidad

Registro: Libro de Registro de Astos – RA test, PCR
8.3 Prueba No Treponémica - VDRL
Fundamentos del método:
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Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pallidum se detectan en suero por
la reacción con un antígeno cardiolipínico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene
reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una floculación visible en microscopio. Las
reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de antígeno altamente purificado y el
agregado de cloruro de colina característica de la técnica USR (Unheated Serum Reagin) en
la que no es necesario inactivar la muestra.
Es necesario tener en cuenta que que esta reacción tiene una sensibilidad del 91%, pero
solo una especificidad del 40% por lo cual no toda reacción positiva indica sífilis, ni toda
reacción negativa la descarta.

Muestra: Suero o LCR
Procedimiento:
Tanto los reactivos como la muestra deben estar a temperatura ambiente antes de realizar la
prueba.
Prueba cualitativa en suero o plasma
 En cada uno de los pozos de la placa colocar:

 50 ul de muestra y con gotero provisto colocar: Reactivo A 1 gota
 Agitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4 minutos.
 Observar inmediatamente en microscopio con poco aumento (10 X).
Prueba semicuantitativa en suero o plasma
Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32 con solución fisiológica. Reportar
hasta la última dilución donde observe floculación.
Prueba cualitativa para LCR
Diluir el Reactivo A 1:2 con solución de cloruro de sodio 10 g/dl. Emplear dentro de las 2
horas de preparación. En cada sector delimitado de la placa colocar: Muestra 50 ul Con
aguja calibre 6 agregar: Reactivo A diluido 1 gota (10 ul) Mezclar bien y agitar
horizontalmente la placa durante 8 minutos a 180 rpm.
Leer los resultados en microscopio con poco aumento (10X).
Interpretación de los Resultados
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 Reactivo: presencia de floculación.

 No reactivo: ausencia completa de floculación.
 Prueba semicuantitativa: el título estará dado por la inversa de la última dilución que
se observe reactiva. Leer atentamente las LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.
Control de calidad
Para controlar la calidad del sistema procesar un Control Positivo y un Control Negativo
utilizándolos de la misma forma que las muestras. Ver Manual Control de Calidad

Registro: Libro de Registro de Serología
8.4 Pruebas rápidas de Inmunología
Las pruebas Rápidas utilizadas en el laboratorio clínico son: Troponina, Hepatitis B AgHBs,
Hepatitis C, Hepatitis A, Malaria, Toxoplasma IgG e IgM, Prueba de Embarazo, Sífilis, HIV,
Rotavirus, Enterovirus, Virus sincitial respiratorio e Influenza A y B.
Fundamento: las pruebas rápidas son un inmunoensayo de cromatografía lateral para la

detección cualitativa de antígeno o anticuerpo en suero, plasma o sangre total humana. Son
usadas como tamizaje y ayuda diagnóstica de infecciones. Cualquier muestra que de un
resultado reactivo debe confirmarse con pruebas alternativas y sintomatología clínica.
Procedimiento:
8.4.1 Troponina I Cualitativa:

 Con la pipeta provista en el kit, aspirar muestra de suero hasta la marca indicada.
 Adicionar la muestra al casete.
 Esperar entre 15-20 minutos para realizar la lectura.
 La línea del Control siempre debe dar positiva para validar la prueba.
Interpretación:
 Una línea: negativo
 Dos líneas: positivo.
8.4.2 Hepatitis B (Antígeno):
 Esperar hasta que se atemperen todos los componentes de la prueba.

 Añadir 100 ㎕ de plasma o suero en el pozo de muestra del casete.
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 Tan pronto comienza la prueba, se verá un color purpura moviéndose a lo largo de

la ventana de resultados en el centro del dispositivo de prueba.
 Interpretar los resultados en 20 minutos.
Interpretación:
 Una banda de color aparecerá en la sección izquierda de la ventana de resultados

para mostrar que la prueba está funcionando apropiadamente. Esta banda es la
banda control “C”. Esta banda siempre debe aparecer para que la prueba sea
válida.
 La sección de la derecha de la ventana indica los resultados de la prueba. Si
aparece otra banda de color en la sección derecha de la ventana de resultados,
esta es la banda de prueba “T”.
8.4.3 Hepatitis C

 Usando una micropipeta, añada 10 ㎕ de muestra de suero, plasma o sangre
completa en el pocillo de muestras (S).
 Dispensar 4 gotas del diluyente del ensayo en el pocillo para muestras (S).
 Tan pronto comience la prueba, usted verá un color purpura moviéndose a lo largo de
la ventana de resultados en el centro del dispositivo de prueba.
 Interpretar los resultados de 5 a 20 minutos.
 Precaución: no lea los resultados después de 20 minutos; las lecturas retrasadas
pueden dar lugar a resultados falsos.
Interpretación:
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Resultado positivo; la presencia de la banda T y C.

Resultado negativo: la presencia solamente de la banda C banda indica un resultado
negativo.
8.4.4 Hepatitis A

 Con una pipeta capilar de 5 ㎕ añada 5 ㎕ de suero o plasma hasta la línea negra de
la ventana del depósito marcada con S, o usando una micropipeta añada 5 ㎕ de la
muestra.
 Añadir 4 gotas del diluyente de ensayo en la ventana redonda del dispositivo para
diluyente.
 Interpretar los resultados de la prueba a los 20 minutos.
Interpretación de la prueba:
 Resultado negativo: la línea control (C) solo es visible en el dispositivo de prueba. No

se detectaron anticuerpos IgG ni IgM,
 Resultado positivo para IgM: la línea control C y la línea IgM (M) son visibles en el
dispositivo de la prueba.
 Resultado positivo para IgG: la línea control C y la línea IgG (G) son visibles en el
dispositivo de la prueba.
 No valido: La línea control (C) no aparece.
8.4.5 Malaria
 Con una pipeta capilar de 5 ㎕ extraer sangre hasta la línea negra. Si es por punción
capilar la muestra.
 Tomar una pipeta invertida desechable (5ul) suministrada y sumergir el extremo
circular de la pipeta invertida en la muestra de sangre.
 Dispensar 5 ul de la sangre extraída en el pocillo para muestras redondo tocando la
almohadilla.
 Añadir 4 gotas del diluyente verticalmente para prueba en el pocillo para diluyente de
prueba cuadrado.
 Interpretar los resultados de la prueba a los 15- 20 minutos.
 Resultado negativo: la línea control (C) solo es visible en el dispositivo de prueba.

Ningún antígeno de malaria.
 Resultado positivo para p.f: la presencia de dos bandas de color indica resultado
positivo para P. falciparum. (línea de prueba P.f y línea de control C o tres bandas P.f,
Pan y C)
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 Resultado positivo para otra especie de falciparum: la presencia de dos bandas de

color indica resultado positivo para otra especie de Plasmodium. (línea de prueba Pan
y línea de control C).
 Resultado positivo para infección combinada o mixta: la aparición de tres líneas en la
ventada de resultados, independiente de cual aparezca en primer lugar, indica que la
muestra es positiva para infección mixta de P.f y P.v (o P.m, P.o).
 Ninguna línea C: Se recomienda analizar nuevamente la muestra usando un nuevo kit.
8.4.6 Toxoplasma IgG e IgM
 Llevar las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es

refrigerada o congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez
descongelado.
 Cuando esté preparado para realizar la prueba, abrir el empaque y sacar el
dispositivo.
 Colocar sobre una superficie limpia y plana.
 Marcar el dispositivo con la identificación del paciente.
 Llene el gotero de plástico con la muestra. Con el gotero en posición vertical, agregue
1 gota (30-45 ㎕) de muestra en el pozo de muestra asegurándose de que no haya
burbujas de aire. Inmediatamente adicione 1 gota (aprox 30-45 ㎕) de diluyente de la
muestra en el pozo de muestra con la botella en posición vertical.
 Contabilice el tiempo.
 Los resultados pueden ser leídos en 15 minutos. Resultados positivos pueden ser
visibles en un minuto.
 No lea los resultados después de 15 minutos. Para evitar confusión descarte el casete
después de leer el resultado.
Control de calidad:
Se valida con el control interno de cada casset.
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8.4.7 Prueba de embarazo
Procedimiento de la prueba:
 Dejar estabilizar la bolsa sellada a temperatura ambiente antes de abrirla. Extraer la

placa de la bolsa sellada y utilícela en cuanto sea posible.
 Colocar la placa en una superficie limpia y nivelada. Mantenga el cuentagotas en
posición vertical y depositar 3 gotas de orina o suero (aproximadamente 100 ㎕) en el
pocillo de la placa (S) y ponga en marcha el cronómetro. Evite que queden retenidas
burbujas de aire en el pocillo de la placa (S). Véase la siguiente ilustración. 3. Espere
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hasta que aparezcan una o dos líneas coloreadas. Los resultados deberán leerse a los
3 minutos cuando se analice orina o a los 5 minutos cuando se analice una muestra de
suero.
 NOTA: Una concentración baja de hCG podría dar lugar, después de un periodo de
tiempo prolongado, a la aparición de una débil línea en la región de la prueba (T); por
tanto, no interprete el resultado después de 10 minutos.
Interpretación de resultados:
 POSITIVO: Aparecen dos líneas coloreadas distintas. Una línea quedará en la región de
control (C) y otra línea quedará en la región de la prueba (T). *NOTA: La intensidad del
color de la línea de la región de la prueba (T) puede variar dependiendo de la
concentración de hCG presente en la muestra. Por lo tanto, cualquier coloración, por
muy débil que sea ésta, en la línea de la región de la prueba (T) deberá considerarse
positiva.
 NEGATIVO: Una línea coloreada aparece en la región de control (C). No aparece
ninguna línea coloreada en la región de la prueba (T).
 NO VÁLIDO: No aparece la línea de Control. Un volumen de la muestra insuficiente o
una técnica incorrecta son las razones más frecuentes del fallo de la línea de control.
Revise el procedimiento y repita la prueba con una nueva placa. Si el problema persiste,
deje de utilizar ese kit inmediatamente y contacte con el distribuidor
Control de calidad:
8.4.8 Prueba rápida para sífilis
 Retirar el dispositivo de prueba de la bolsa que contiene el papel de aluminio y colocarla
sobre una superficie plana y seca [Usando una pipeta capilar].Adicionar 20 ㎕ de la
muestra de sangre extraída con una pipeta capilar de 20㎕ dentro del pozo de muestra
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(S), O [Usando una micropipeta] Agregar 10 ㎕ de muestra de plasma o suero (20㎕ de

muestra de sangre) dentro del pozo de muestra (S).
 Agregar 4 gotas (aproximadamente 120 ㎕) de diluyente de ensayo dentro del pozo de
muestra(S) En la medida en que empieza la prueba a funcionar, se observará que el
color púrpura se desplaza a través de la ventana de resultados en el centro del
dispositivo de prueba. Interpretar los resultados de prueba al cabo de 5 ~ 20 minutos.
 Advertencia: El tiempo de interpretación antes mencionado se basa en la lectura de los
resultados de la prueba a temperatura ambiente. Si la temperatura ambiente es
significativamente inferior a los 10 grados C, entonces el tiempo de interpretación se
debe extender a otros 10 minutos. Interpretación de la prueba.
 Una banda de color aparecerá en la parte izquierda de la ventana de resultados para
mostrar que la prueba está funcionando adecuadamente. Esta banda es la Banda de
control. La parte derecha de la ventana de resultados indica los resultados de la prueba.
Si aparece otra banda de color en la parte derecha de la ventana de resultados, esta
banda es la Banda de prueba.
 Resultado negativo: La presencia de una única banda de color púrpura en la ventana de

resultados indica un resultado negativo.
 Resultado positivo : La presencia de dos bandas de color (banda "T" y banda "C") en la
ventana de resultados, independientemente de qué banda aparezca primero, indica un
resultado positivo para los anticuerpos TP.
 Resultado no válido: Si la banda de control púrpura no se visualiza en la ventana de
resultados después de realizar la prueba, el resultado se considera no válido. Es posible
que no se hayan seguido correctamente las indicaciones o que la prueba se haya
deteriorado. Se recomienda volver a analizar la muestra.
Control de calidad:
8.4.9 VIH
PROCEDIMIENTO VIH BIOLINE
 Retirar el dispositivo de prueba de la bolsa que contiene el papel de aluminio y colocarla

sobre una superficie plana y seca.
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 Adicionar 20 Ul de la muestra de sangre extraída con una pipeta capilar de 20 ul dentro

del pozo de muestra (S).
 Agregar 4 gotas de diluyente (aproximadamente 120 ul) de ensayo verticalmente dentro
del pozo de muestra (S).
 En la medida en que empieza la prueba a funcionar, se observará que el color púrpura
se desplaza a través de la ventana de resultados en el centro del dispositivo de prueba.
 El tiempo de obtención de los resultados oscila entre 10 y 20 minutos. Tras añadir el
diluyente del ensayo, lea el resultado después de 10 minutos (pero no espere mas de
20 minutos).
INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA
 Resultado negativo: la presencia de una banda de control (C) dentro de la ventana de

resultados es indicativo de un resultado negativo.
 Resultado positivo: La presencia de dos líneas tanto línea de control (C) y la línea de
prueba 1 (1) dentro de la ventana de resultados indica un resultado positivo para HIV-
1.
La presencia de dos líneas tanto línea de control (C) y la línea de prueba 2 (2) dentro
de la ventana de resultados indica un resultado positivo para HIV-2.
La presencia de tres líneas tanto línea de control (C), la línea de prueba 1 (1) y la línea
de prueba 2 (2) dentro de la ventana de resultados indica un resultado positivo para
HIV-1 y HIV-2.
Si la intensidad del color de la línea de prueba 1 es más oscura que la línea de prueba 2,
este resultado se puede interpretar como positivo para HIV-1.
Si la intensidad del color de la línea de prueba 2 es más oscura que la línea de prueba 1,
este resultado se puede interpretar como positivo para HIV-2.
PRECAUCIÓN: La infección dual de VIH-1 y VI2 de un individuo es bastante raro. La

reactividad dual observada en SD Bioline HIV1/2 3.0, por ejemplo, si la línea de VIH-1 y la
línea de VIH-2 son ambas positivos, es probables que sea causada por la reactividad
cruzada dado la cierta homología en las secuencias de aminoácidos de VIH-1 y VIH-2. Para
determinar el tipo de virus o diagnosticar una co-infección, la prueba de confirmación debe
ser realizada.
Resultados no validos: Si no hay presencia de la línea de control (C) y/o el color

rosa/púrpura en la ventana de resultados indica un resultado no válido. Es posible que no se
hay puesto en práctica las instrucciones correctamente, o que la prueba se hubiese
deteriorado. Se recomienda analizar nuevamente la muestra.
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El personal auxiliar del laboratorio lleva al área de química sanguínea las muestras a
procesar junto con el consentimiento informado.
El personal de bacteriología verifica nuevamente que la muestra corresponda con la solicitud

en el sistema y cumpla con las condiciones para su análisis.
PROCEDIMIENTO ALERE
 Retire el plástico de protección de los ensayos.

 Para muestras de suero o plasma:
 Añada 50 ul de muestra (con una pipeta de precisión) en la superficie adsorbente
(señalada con una flecha).
 Espere entre un mínimo de 15 minutos y un máximo de 60 minutos para leer el
resultado.
 Para muestras de sangre (venopunción):
 Añada 50 ul de muestra (con una pipeta de precisión) en la superficie adsorbente
 Espere un minuto y añada una gota de tampón de arrastre en la superficie absorbente.
resultado.
 Para muestras de sangre (punción digital):
 Añada 50 ul de muestra (con un tubo capilar con EDTA) en la superficie adsorbente
 Espere hasta que la sangre impregne totalmente la superficie y, a continuación, añada
una gota de tampón de arrastre en la superficie absorbente.
resultado.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
 Positivo: tanto en la ventana de control (Control) como en la ventana de resultados del

paciente (Patient) aparecen barras rojas. Cualquier barra roja que pueda aparecer en
la ventana de resultados del paciente implica que el resultado es positivo.
 Negativo: en la ventana de control (Control) aparece 1 barra roja y en la ventana de

resultados del paciente (Pacient) no aparece una barra roja.
 No válido: si no aparece una barra roja en la ventana de control del ensayo, el

resultado no es válido y se debe repetir el ensayo (aunque haya aparecido una barra
roja en la ventana de resultados del paciente).
Control de calidad:
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Registro: Libro de Registro de VIH
8.4.10 Rotavirus/Adenovirus
Test inmunocromático rápido para la identificación cualitativa de Rotavirus y/o adenovirus en

muestras de heces.
 Ajustar reactivos a temperatura ambiente (20-25°C)

 Pipetear 1 ml de buffer de extracción (Diluente) a un tubo de ensayo
 Adicionar 100 ul o 50 mg de muestras de heces
 Homogenizar la muestra en un vibrador Vortex o como alternativa mediante la
aspiración y expulsión de la suspensión de heces con una de las pipetas desechables
suministradas.
 Dejar que sedimente la suspensión de heces durante 3 minutos
 Sacar el cassette de la bolsa plástica y pipetear 4 gotas o 200 ul de sobrenadante claro
en el orificio circular de entrada del cassette.
 Lectura del resultado después de 5 minutos.
 POSITIVO:
A) Adenovirus positivo: junto a la banda verde de control (C) se ve además una banda
azul (T1)
B) Rotavirus positivo: Junto a la banda verde de control (C) se ve además una banda
roja (T2)
C) Rotavirus y Adenovirus positivos: Junto a la banda verde de control se ve además
una banda roja y una azul.
 NEGATIVO: Solo se ve la banda verde de control.
 INVALIDO: No existe banda verde de control. En este caso se debe repetir el test con
un nuevo casete.
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Nota: Otras coloraciones de las bandas, así como colores que aparezcan sólo después de 10
minutos, no tienen valor diagnóstico. Cantidades demasiado grandes de muestra de heces
pueden conducir a tales manifestaciones.
Control de calidad:
8.4.11 Adenovirus
Los adenovirus causan infecciones respiratorias y oftalmológicas y representan

aproximadamente del 5 a 10% de las infecciones virales. Se trata de un virus ADN
bicatenario, sin envoltura, icosaédrico de 80 nm de diámetro. Estos virus causan un amplio
espectro de infecciones en el humano, como faringitis, neumonía, conjuntivitis, cistitis
hemorrágica y diarrea. La mayoría de los adenovirus afectan a los niños en edades
tempranas, provocando congestión nasal y tos, mientras que la faringitis es más habitual en
niños de más edad.
 Preparativos para la prueba:

 Deje que los componentes del kit, dentro del envase sin abrir, y las muestras alcancen
la temperatura ambiente (15 a 30°C) antes de realizar una prueba.
Una vez abierta, realice la prueba inmediatamente.
Procedimiento de preparación de la muestra:
 Preparar un tubo para recogida de muestras

 La muestra de aspirado o lavado nasofaríngeo es tomada en los servicios
intrahospitalarios por los jefes de enfermería.
 Transferir 200 ul de la muestra al tubo
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 Añadir 6 gotas del tampón de dilución HC hasta alcanzar una relación ½.

 Agitar bien para homogenizar la solución
 Sumergir la tira en el tubo de ensayo siguiendo el sentido indicado por la flecha
 Dejar la tira por 15 minutos antes de leer el resultado
Los resultados se deben leer en tiras todavía húmedas.
 POSITIVO: además de una banda verde en la línea de control (C), aparece una banda
rojiza purpura visible en la posición de la línea de prueba (T). La intensidad de la línea
de prueba puede variar en función de la cantidad de antígenos encontrados en la
muestra. Cualquier línea T rojiza púrpura, incluso débil, debe considerarse como
positivo.
 NEGATIVO: aparece una línea verde en la posición de la línea de control (C). No
aparece ninguna otra banda.
 INVALIDO: Falla en la presencia de la línea control. Revisar el procedimiento y repetir la
prueba con una nueva tira de prueba. Si el problema persiste, descontinuar el uso del kit
inmediatamente y contactar a su distribuidor local.

Control de calidad

Registro: Libros de Registro de pruebas especiales.
8.4.12 Virus Sincitial
El virus respiratorio sincitial (VRS) es el mayor causante de enfermedades respiratorias en

todas las edades. Representa la causa más frecuente de importantes infecciones del tracto
respiratorio en recién nacidos y niños menores de cuatro años. También es responsable
importantes problemas en personas de avanzada edad e inmunodeprimidos, produciendo un
aumento en el índice de mortalidad.
La prueba es un test listo para su uso basado en un sistema de membrana homogéneo en
partículas de oro coloidal, la muestra nasofaríngea debe diluirse en el tampón de extracción
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previsto. Una membrana de nitroceluosa se sensibiliza con anticuerpos dirigidos frente a

antígenos del virus.


 Añadir 7 gotas del tampón de dilución HC hasta alcanzar una relación ½.
 Sumergir la tira en el tubo de ensayo siguiendo el sentido indicado por la flecha
 Dejar la tira por 15 minutos antes de leer el resultado
rojiza purpura visible en la posición de la línea de prueba (T). La intensidad de la línea
de prueba puede variar en función de la cantidad de antígenos encontrados en la
muestra. Cualquier línea T rojiza púrpura, incluso débil, debe considerarse como
positivo.
 NEGATIVO: aparece una línea verde en la posición de la línea de control (C). No
aparece ninguna otra banda.
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Control de calidad

8.4.12 Virus Influenza A y B
La gripe es una infección viral altamente contagiosa de las vías respiratorias altas que es
caracterizada por la variabilidad del antígeno, la estacionalidad y el impacto sobre la
población en general.
De los dos principales subtipos de la gripe (A y B), el subtipo de la gripe A son especialmente
diferenciados por la alta variabilidad de los antígenos de la glicoproteínas superficiales
(Hemaglutininas y neuraminidasas). El virus de la gripe A es el más frecuente y se asocia a
las epidemias más severas. La gripe puede causar complicaciones severas tales como
bronquitis o pulmonía, particularmente en niños, la gente mayor o adulto con enfermedades
respiratorias crónicas.
Este producto se ha diseñado para detectar los antígenos nucleoprotéinicos del virus de la
gripe A y B, en muestras del frotis nasofaríngeo, frotis faríngeos o aspirado nasal.
Cuando la solución de extracción de las secreciones nasofaríngeas entra en contacto con la
tira, los conjugados solubilizados migran con la muestra mediante difusión pasiva y los
conjugados y el material de la muestra entran en contacto con el anticuerpo monoclonal
frente al influenza A. Si la muestra contiene Influenza A el complejo de conjugado e Influenza
A permanecerá unido al anticuerpo monoclonal adsorbido en la nitrocelulosa y parecerá una
línea roja. La solución sigue migrando hasta alcanzar el anticuerpo monoclonal frent4e al
influenza B que se absorbe en la nitrocelulosa. Si la muestra contiene Influenza B el complejo
del conjugado e influenza b permanecerá unido al anticuerpo monoclonal y aparecerá una
línea roja.
La solución continúa migrando hasta que se encuentra un tercer reactivo, que une el
conjugado del control de migración, produciendo una línea de control rojo que confirma que
la prueba funciona correctamente.
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Precauciones: utilizar elementos de protección personal, no tocar la nitrocelulosa con los

dedos, no utilizar los elementos de otro kit.


 Añadir 7 gotas del tampón RE-A hasta alcanzar una relación ½.
 En caso de escasa muestra transferir 100 ul y añadir 3 gotas de tampón
 Adicionar 100 ul de la muestra diluida en el pocillo del casset
 Dejar reaccionar por 15 minutos antes de leer el resultado
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rojiza purpura visible en la posición de la línea de prueba de Influenza (A) o en la línea
de Influenza (B). Aparecerá 3 líneas (A-B-C) en caso de infección por Influenza A y B.
La intensidad de la línea de prueba puede variar en función de la cantidad de antígenos
encontrados en la muestra. Cualquier línea A o B rojiza púrpura, incluso débil, debe
considerarse como positivo.
 NEGATIVO: aparece una línea rojiza púrpura en la posición de la línea de control (C).
No aparece ninguna otra banda.

procesar junto con el formato de orden médica.

8.4.13 Antígeno Covid-19
La COVID-19 es la enfermedad infecciosa causada por el coronavirus que se ha descubierto

más recientemente. Tanto este nuevo virus como la enfermedad que provoca eran
desconocidos antes de que estallara el brote en Wuhan (China) en diciembre de 2019.
Actualmente la COVID-19 es una pandemia que afecta a muchos países de todo el mundo.
Los síntomas más habituales de la COVID-19 son la fiebre, la tos seca y el cansancio. Otros
síntomas menos frecuentes que afectan a algunos pacientes son los dolores y molestias, la
congestión nasal, el dolor de cabeza, la conjuntivitis, el dolor de garganta, la diarrea, la
pérdida del gusto o el olfato y las erupciones cutáneas o cambios de color en los dedos de
las manos o los pies. Estos síntomas suelen ser leves y comienzan gradualmente. Algunas
de las personas infectadas solo presentan síntomas levísimos.
Una persona puede contraer la COVID-19 por contacto con otra que esté infectada por el
virus. La enfermedad se propaga principalmente de persona a persona a través de las gotas
que salen de la nariz o la boca de una persona infectada al toser, estornudar o hablar. Estas
gotas son relativamente pesadas, no llegan muy lejos y caen rápidamente al suelo. Una
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persona puede contraer la COVID-19 si inhala las gotas procedentes de una persona
infectada por el virus. Por eso es importante mantenerse al menos a un metro de distancia de
los demás. Estas gotas pueden caer sobre los objetos y superficies que rodean a la persona,
como mesas, pomos y barandillas, de modo que otras personas pueden infectarse si tocan
esos objetos o superficies y luego se tocan los ojos, la nariz o la boca. Por ello es importante
lavarse las manos frecuentemente con agua y jabón o con un desinfectante a base de
alcohol.
El tiempo que transcurre entre la exposición a la COVID-19 y el momento en que comienzan
los síntomas suele ser de alrededor de cinco o seis días, pero puede variar entre 1 y 14 días.
La prueba rápida para determinar cualitativamente el antígeno Covid-19, es un ensayo
inmunocromatográfico, y requiere de una muestra de hisopado nasofaríngeo para su estudio.
La prueba es un test listo para su uso basado en un sistema de membrana homogéneo que
contiene anticuerpos anti-covid, la muestra nasofaríngea debe diluirse en el tampón de
extracción previsto. Durante la prueba, el antígeno COVID-19 en la muestra interactúa con el
anticuerpo anti-COVID-49 monoclonal conjugado con partículas de color para generar el
complejo de partícula de color antígeno-anticuerpo. Este complejo migra a través de la
membrana por acción capilar hasta la línea de prueba, donde es capturado por el anticuerpo
anti-COViD-19 monoclonal de ratón. Si en la muestra se detecta la presencia de antígenos
COVID-19, una línea de prueba de color será visible en la ventana de resultado.
PREPARACION DE LA PRUEBA
 Verifique la fecha de caducidad de la prueba en el reverso de la bolsa de aluminio.
 Abra la bolsa de aluminio y verifique el estado del dispositivo de la prueba.
PREPARACION DE LA MUESTRA
 Insertar el hisopo estéril en la fosa nasal del paciente hasta alcanzar la superficie
posterior de la nasofaringe.
 Recolectar una muestra desde la superficie posterior de la nasofaringe.
 Retirar el hisopo estéril de la cavidad nasal.
 Insertar el hisopo estéril en el tubo buffer de extracción. Mezclar utilizando el hisopo al
menos cinco veces.
 Retirar el hisopo presionando simultáneamente los costados del tubo buffer para
extraer el líquido impregnado en el hisopo.
 Asegurar la tapa de la boquilla en el tubo.
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 Depositar 3 gotas de la muestra extraída en el pocillo de muestra del dispositivo de

muestra.
 Leer el resultado de la prueba en 30 minutos.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
RESULTADO POSITIVO: la presencia de la banda T y la banda C indican la

presencia del antígeno COVID-19, en la muestra.
RESULTADO NEGATIVO: presencia de la banda C, indica que hay ausencia del

antígeno COVID-19, en la muestra.
RESULTADO INVALIDO: ausencia de la banda C.
El personal auxiliar del laboratorio lleva al área de procesamiento Covid-19, las muestras a
procesar junto con el formato de orden médica, y ficha epidemiológica.

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8.5 Gases Arteriales
Epoc
El sistema de análisis de sangre epoc es un analizador de sangre portátil que consta de tres
componentes:
Epoc Reader
Epoc Host
Tarjeta de análisis Epoc

Procedimiento:
 Encienda el epoc Reader y el epoc Host.

 Inicie sesión en la aplicación del software del epoc Reader.
 Detecte el epoc Reader conectando de forma inalámbrica desde el epoc Host.
 Comience la secuencia de análisis.
 Inserte una tarjeta de análisis nueva en el epoc Reader. Espere el equipo calibre.
 Introduzca la información del paciente, selecciones los análisis y el tipo de muestra (si
procede).
 Introduzca la muestra de sangre en la tarjeta de análisis. ( El equipo indicará en que
momento ingresar la tarjeta)
 Observe los resultados del análisis e imprímalos si es posible.
 Retire la tarjeta y deséchela.
 Una vez iniciada la sesión y conectado a un epoc Reader, para realizar otro análisis
son necesarios.
 Manejo de equipo: Ver Manual Manejo y Limpieza de Equipos
Realización de otro análisis
Después de retirar la tarjeta de análisis usada, el indicador de estado del análisis del Reader
aparece verde fijo indicando que el Reader está listo para realizar otro análisis.
Repetir el mismo procedimiento para completar otro análisis.
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El inicio de un nuevo análisis guardará de forma permanente el registro del análisis previo.
Ya no es posible realizar cambios en ese análisis.

Registro: Libro de Registro de Gases Arteriales
8.6 Electrolitos Na, K, Cloro
La medición de sodio, potasio y cloro se basa en el principio de electrodo selectivo (ISE). En

un electrodo selectivo, un potencial eléctrico se establece a través de una membrana que es
selectivo a un ion. Ese potencial eléctrico del ion selectivo se mide contra un electrodo de
referencia y se utiliza para determinar el nivel de Actividad (a) o concentración efectiva (c) de
los iones de interés en una muestra.
Procedimiento:
Procesamiento de muestras:
El análisis de muestras solo está disponible cuando el analizador se encuentra en estado

preparado. Cuando el analizador no está en estado preparado, el muestreador no puede
levantarse debido a que está bloqueado.
 Verificar que el analizador se encuentra en estado “Preparado”.

 Levante la cubierta del muestreador. Aparecerá el siguiente mensaje: Introduzca la
muestra ahora.
 El analizador aspirará la muestra y dará aviso en el momento de retirarla, y cerrar la
tapa de éste.
 El analizador procederá a realizar el análisis y una vez éste esté hecho, aparecerán
Los resultados en la pantalla del equipo.
Para Muestras en jeringa, sumerja el extremo de la sonda en el contenedor del muestreador.

Se debe tener cuidado de no introducir burbujas de aire, coágulos o sustancias extrañas
junto con una muestra para el analizador.
Para obtener una muestra capilar, levante la cubierta del muestreador hacia arriba. Inserte
con cuidado el capilar en el tabique.
No permitir espacios entre el capilar y el tabique para evitar que corrientes de aire alteren la
muestra.
Si la sonda del muestreador esta adecuadamente inmersa en la muestra, pulse aspiración
para comenzar.
El mensaje “Aspirando muestra. Por favor espere" aparecerá.
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Si la aspiración es completada, el mensaje "Retirar la muestra ahora" aparecerá. Retire la

muestra de la sonda del muestreador.
Espere un segundo, hasta que el mensaje "cierre la cubierta del muestreador" aparezca.
Bajar la tapa para cerrar del muestreador.
Ingreso de información de muestra
Una vez que la cubierta está cerrada, la pantalla siguiente aparece.

Para introducir número de la muestra, pulse número de casilla para Muestra y escriba el
número de la muestra mediante el teclado.
Si el número de la muestra está disponible en código de barras, escanee el código de barras
con el lector de códigos de barras.
Del mismo modo, introduzca ID de paciente, ID de usuario y/ o el nombre de paciente.
Cuando el análisis de la muestra se ha completado, los resultados de la muestra aparecen
en pantalla.
El resultado aparecerá en color negro si los intervalos de referencia no se han configurado en
el analizador.
Si los intervalos de referencia se han configurado en el analizador y el resultado se encuentra
dentro del rango de referencia, el valor aparecerá en color azul.
Nota:
Si un resultado es superior rango de referencia, el valor aparecerá en color rojo junto con una
flecha hacia arriba
Si un resultado es inferior a rango de referencia, el valor aparecerá en color rojo junto con
una flecha hacia abajo.
Si algún resultado cae fuera del rango de medición, " fuera de rango" aparecerá en lugar del
valor. La frase va acompañada de una doble flecha, para indicar por encima del limite
superior o por debajo del límite inferior.
Si el sensor ha fallado en el anterior Cal 2, el resultado correspondiente no sera comunicado.
En cambio, "Pendiente Error" aparecerá.
Pulse Imprimir para imprimir los resultados.
Análisis de orina
Un conjunto diferente de factores correlación debe establecerse para correlacionar los

resultados de las muestras de orina.
Establezca los factores de correlación de las muestras de orina antes y aplique los factores
de correlación de los resultados de las muestras de orina al analizador.
 Las muestras de orina no requieren dilución para su análisis.

 Introducir las muestras de orina para el analizador de la misma manera que las
muestras de sangre.
 Una vez que el analizador informa de los resultados de la muestra de orina, se aplican
los factores de correlación con los resultados observados en la pantalla.
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Registro: Libro de Registro Electrolitos
8.7 Coagulación PT y PTT
Tiempo de Protrombina - PT
El PT de un paso mide el tiempo de coagulación del plasma después de adicionar una fuente
de factor tisular (tromboplastina) y calcio. La recalcificación del plasma en la presencia del
factor tisular genera activación del factor Xa con la consecuente formación de trombina y por
último un coágulo de fibrina.
Tiempo de Tromboplastina Parcial - PTT
El tiempo parcial de tromboplastina activada se realiza por la adición a la muestra del

reactivo PTT; es una prueba simple y versátil, sensible a las diferencias de todos los factores
de coagulación en el plasma excepto para el factor VII. Sin embargo, es principalmente
usado para detectar las deficiencias en los factores VIII, IX, XI, XII y Precalicreína (Factor de
Fletcher).
El tiempo parcial de tromboplastina activada se realiza por la adición a la muestra del
reactivo PTT que contiene un activador de plasma y fosfolípidos. Los fosfolípidos sirven
como un substituto de las plaquetas. Esta mezcla se incuba por una activación, después se
recalcifica con cloruro de calcio y se contabiliza el tiempo de formación del coágulo.
El personal de bacteriología debe verificar que el equipo semi automatizado esté encendido y
apto para funcionar. Ver Manual de Manejo Y Limpieza de Equipos Laboratorio Clínico.
Procedimiento para PT Equipo Semi automatizado:
 Verificación funcionamiento del equipo

 Pre incubar reactivos y muestras en las copillas por 180 segundos
 En una copilla colocar 25 ul de muestra y en otra el 50 ul de reactivo para PT
 Incubar 180 segundos que se programan en el reloj del equipo para ver el transcurso
del tiempo.
 Una vez se incube antes de cumplir los 180 seg se pone en el pozo de lectura se le
oprime el botón para la lectura y se espera al aviso de ACTIVE
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 Poner los 50 ul de reactivo.

 El realiza la lectura y arroja el resultado junto al INR
Procedimiento para PTT Equipo Semi automatizado:
 Verificación funcionamiento del equipo

 Pre incubar reactivos y muestras en las copillas por 180 segundos
 En una copilla colocar 25 ul de muestra y en otra el 25 ul de reactivo para PTT
 Incubar 180 segundos que se programan en el reloj del equipo para ver el transcurso
del tiempo.
 Cumplidos los 180 segundos mezclar 25 ul de muestra con 25 ul de reactivo de PTT,
incubar por 180 segundos
 Una vez se incube antes de cumplir los 180 seg se pone en el pozo de lectura se le
oprime el botón para la lectura y se espera al aviso de ACTIVE
 Adicionar 25 ul de cloruro de calcio previamente incubado a 37 °C.
 El realiza la lectura y arroja el resultado junto al INR
 La bacterióloga (o) transcribe los resultados al libro de registro de química y al
software Dinámica.
Procedimiento para PT Técnica Manual:
 Verificación funcionamiento baño serológico

 Pre incubar reactivos y muestra
 Pipetear en los tubos de ensayo precalentados
Plasma/control 100 ul
Incubar por 3-5 minutos de
37º
Añadir RGT precalentado 200 ul
 Activar el cronómetro con la adición del reactivo PT.

 Registrar el tiempo necesario para la formación del coagulo.
software Dinámica.
Procedimiento para PTT Técnica Manual:
 Verificación funcionamiento baño serológico

 Pre incubar reactivos y muestra
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 Pipetear en tubos de ensayo precalentados

software Dinámica.
Plasma/ Control 100 ul

Incubar 1-2 minutos a 37ºC
Agregar reactivo PTT 100 ul
Incubar 3-5 minutos a 37ºC
Agregar 100 ul Cloruro de calcio precalentado
Activar el cronómetro con la adición del reactivo. Anotar el tiempo
necesario para la formación del coágulo.
INR: son las siglas en inglés de "International Normalized Ratio", que expresa la relación
entre el tiempo de protrombina de una persona y el tiempo de protrombina en el individuo
normal.
La medición del INR se prescribe a pacientes que siguen un tratamiento anticoagulante por
AVK (anti vitamina K). En efecto, la coagulación de la sangre es, generalmente, muy
fluctuante en este tipo de pacientes, por eso conviene controlar el nivel regularmente. Si el
INR es anormal, el tratamiento deberá reajustarse.
Los resultados deben situarse entre 2 y 3 en aquellas personas a quienes se ha prescrito un

tratamiento anticoagulante por anti vitamina K en los casos siguientes:

Para prevenir de forma primaria y secundaria una trombosis venosa, cuando el paciente va a
someterse a una cirugía que conlleva un alto riesgo trombótico o si está siguiendo un
tratamiento secundario de la trombosis venosa y de la embolia pulmonar.

En caso de trastorno del ritmo cardíaco o prótesis cardíaca de los tejidos, valvulopatía, infarto
del miocardio, fibrilación auricular y válvula aórtica. En cambio, los resultados deben
situarse entre 3 y 4.5 en aquellas personas que han sufrido una intervención para colocar
una prótesis valvular mecánica (alto riesgo) o debido a embolias sistémicas reincidentes.
Si el valor es superior a 5, el riesgo hemorrágico es grande.
El índice de sensibilidad internacional (ISI) es el valor representativo de la capacidad de

respuesta de una tromboplastina específica ante la reducción de los factores de coagulación
que dependen de la vitamina K; así una tromboplastina más sensible, produce una activación
de los factores de coagulación más lenta y da como resultado una mayor prolongación del
TP; por el contrario, una tromboplastina menos sensible, activa más rápidamente los factores
de coagulación residuales y da como resultado un TP menos prolongado. Las variaciones en
el ISI de las diferentes tromboplastinas se deben a las diferencias en la manufactura, fuente y
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método de preparación, por ello, no se puedan comparar los cocientes que se determinan a
partir de las diversas preparaciones de tromboplastina, y los valores del INR más exactos se
logran cuando se utilizan tromboplastinas altamente sensitivas con valores de ISI cercanos a
1,0.
La fórmula para calcular el INR es:
Se aplica como factor de corrección el ISI al cociente dependiente de la sensibilidad de los

diferentes reactivos comerciales.
La utilización del INR tiene varias ventajas:
 Coherente regulación del tratamiento anticoagulante.

 Beneficios para los pacientes que viajan, puesto que se hace posible una mayor
coherencia entre laboratorios que utilizan diferentes tipos de tromboplastina
 Normalización del tratamiento anticoagulante en pruebas clínicas y publicaciones
científicas
 Disminución del riesgo potencial de hemorragia o complicaciones trombóticas
asociadas con el tratamiento anticoagulante oral
Valor de Referencia
PT: 10-15 segundos

PTT: 25-40 segundos.
Los niños prematuros sanos tienen resultados de coagulación prolongados y regresan al

valor normal de adultos alrededor de los 6 meses de edad, sin embargo no desarrollan
hemorragias espontáneas o complicaciones trombóticas porque hay un balance entre los pro
coagulantes y los inhibidores.
El rango en pacientes anti coagulados: 3 veces mayor que el control.

Registro: Libro de Registro Química
 Registro Pool Plasma Normal: El bacteriólogo (a) registra en el formato de Registro

de Pool de Plasma Normal los resultados de pacientes normales, cada 20 datos se saca
el promedio con el fin de sacar el valor testigo normal.
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PRUEBAS
ESPECIALES
9. PRUEBAS ESPECIALES
El área de Pruebas Especiales comprende el análisis de los siguientes exámenes por

método automatizado:
Prueba Indicaciones Prueba Indicaciones

Muestra Muestra
Troponina Suero sin Toxoplasma IgG Suero sin hemólisis
hemólisis, ayuno.
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TSH Suero sin Toxoplasma IgM Suero sin hemólisis

hemólisis, ayuno.
TSH Neonatal Sangre sin PSA Total Suero sin hemólisis
hemólisis.
Hepatitis B HBsAg Suero sin
hemólisis, ayuno.
Beta Cuantitativa Suero sin

BHCG hemólisis, ayuno.
Suero sin
HIV hemólisis, ayuno. Metodología: Elisa
Procedimiento General
El personal de bacteriología antes de realizar el procesamiento de muestras y uso del equipo

al inicio de jornada debe verificar:
 Limpieza y Mantenimiento de equipo y su debido registro en el formato

correspondiente del área
 Revisión de reactivos
 Revisión y Análisis de Control de calidad
Limpieza y Mantenimiento de Equipos
De acuerdo a lo establecido en el manual de Manejo y Limpieza de Equipos la bacterióloga

debe realizar el mantenimiento diario o mensual.
Limpieza diaria: el personal de bacteriología debe realizar el mantenimiento al equipo los

días martes y jueves.
Limpieza mensual: el personal de bacteriología de turno en la mañana debe realizar el

mantenimiento mensual el primer martes de cada mes, según lo establecido en el manual de
Manejo y Limpieza de Equipos.
Antes de iniciar el procesamiento de muestras la bacterióloga debe verificar que el equipo

cuente con suficiente agua y detergente y demás condiciones necesarias para el buen
funcionamiento.
Revisión de Reactivos
El personal de bacteriología debe realizar la revisión de la cantidad de reactivo disponible en

cada frasco del carrusel de reactivos del equipo.
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Los reactivos vienen listos para su uso y se encuentran refrigerados de 2 a 8 °C en la nevera

de la sección de servicio transfusional.
Revisión y Análisis de Control de Calidad
El control de calidad se debe procesar los 3 niveles y la bacterióloga (o) debe realizar el
análisis de acuerdo a las indicaciones dadas en el manual de Control de Calidad interno y
Externo del Laboratorio clínico y debe registrar los resultados del control de calidad en el
formato en Excel disponible en el computador del área de química.
Procesamiento de muestras
 El personal auxiliar del laboratorio lleva al área de pruebas especiales las muestras a
 El personal de bacteriología verifica nuevamente que la muestra corresponda con la

orden médica y cumpla con las condiciones para su análisis.
 Volumen de muestra: 250 ul de suero libre de hemólisis.
Equipo Automatizado
El bacteriólogo (a) ingresa los datos del paciente como nombre, documento de identidad y
número de copilla al equipo. Debe colocar la muestra en el carrusel de muestras junto con la
perla de la técnica a procesar. Oprimir aceptar y luego la tecla GO para iniciar el
procesamiento de la muestra. Ver Manual Manejo y Limpieza de Equipos.
 Transferir la muestra del paciente a una cubeta para muestras de plástico limpio y
colóquelo en un soporte de cubeta para muestras.
 Colocar el soporte de la cubeta para muestras en la cadena de carga seguido por un
máximo de cinco unidades de Ensayo (con sus respectivas perlas y de diferentes
ensayos).
 Seleccionar de la pantalla de Inicio, el icono de LISTA DE TRABAJO, PACIENTES.
Asegúrese que no existan burbujas en la superficie de la muestra o de los reactivos.
 Ingresar la información necesaria por paciente y presione ACEPTAR.
 Seleccionar Lista de Trabajo, para ver resumen de las pruebas programadas en el
equipo
 Para retirar los soportes de las cubetas para muestras, retire primero la bandeja de
recolección de muestras con el IMMULITE 1000 en modo PAUSA, espere hasta que en
el panel de visualización se lea: IMMULITE está ahora en modo PAUSA Pulse PAUSA
para parar o IR para leer los reactivos.
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 Retirar los soportes de cubetas para muestras

 Sustituir la bandeja de recolección de muestras
 Pulse GO (IR) en el panel de visualización para reemprender el funcionamiento

Registro: Libro de Registro Pruebas Especiales
9.1 TSH Neonatal
Tamizaje Hipotiroidismo Congénito
Es la identificación entre individuos aparentemente sanos de aquellos que están en riesgo de

sufrir una enfermedad o desorden metabólico que justifica la aplicación de una prueba
diagnóstica para tomar medidas de acción preventiva.
La toma de muestra en el servicio intrahospitalario es realizada por el personal de enfermería

de las área de UMI y Cirugía y las del área de Consulta Externa por el personal auxiliar de
laboratorio. Ver Manual Toma, Manipulación y Conservación de Muestras en el Laboratorio
Clínico y Servicio Transfusional.
Almacenamiento: las tarjetas con las muestras ya tomadas son llevadas diariamente por el
personal auxiliar de enfermería de la UMI al laboratorio clínico para ser almacenadas y
refrigeradas en la nevera de almacenamiento de muestras biológicas.
Control de Calidad Interno de las muestras
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Se procesan 3 niveles de control de calidad y se corre cada vez que se procesen muestras.
Ver Manual control de Calidad Interno y Externo del Laboratorio Clínico.
Montaje:
 Sacar los reactivos de la nevera y dejarlos atemperar

 Cortar dos círculos de 3 mm o uno de 5 mm con la ponchadora, de calibradores,
controles.
 Marcar los tubos como Calibradores, Controles y Muestras
 Agregar los círculos de Calibradores, Controles y Muestras a los tubos de
polipropileno
 Dispensar 250 ul de diluyente de TSH Rapid en cada tubo.
 Tapar los tubos y colocarlos en el agitador de Manzzini a 200 r.p.m. durante 2 horas a
temperatura ambiente.
 Bajar los tubos de agitador Manzzini y servir al menos 200 ul del eluído en copillas de
Immulite.
 Ingresar el estuche al Immulite por Kit-Entry.
 Leer con el scanner el código de barras del estuche de TSH Rapid.
 Cargar el reactivo de TSH Rapid en el Immulite
 Correr calibradores, controles y muestras en el Immulite
 No se necesita procesar ajustadores
 Sacar una export y con estas CPS obtenidas hacer la reducción de datos en el
formato de Excel (computador del área de química).
Análisis y Validación de Resultados
Cuando el equipo emita los resultados la bacterióloga debe realizar el análisis y validación de
los resultados.
Ante un resultado por fuera del intervalo de referencia se debe reprocesar en el equipo la
muestra y notificar según lo establecido en el protocolo de Atención al Usuario.

9.2 HIV Elisa AUTOMATIZADO
Enzimoinmunoanálisis para la detección de anticuerpos frente al virus de la

inmunodeficiencia humana de tipos (VIH-1, grupo O del VIH-1) y 2 (VIH-2) en suero o plasma
humanos.
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Principio Biológico
El ensayo Murex se desarrolla en micropocillos recubiertos de un péptido sintético que

representa una región inmunodominante del VIH-1 (O), una proteína recombinante derivada
de las proteínas de la envoltura del VIH-1 y VIH-2 y una proteína del core del VIH. El
conjugado es una mezcla de los mismos epítopos marcados con peroxidasa de rábano.
Las muestras y el suero control se incuban en los pocillos y los anticuerpos frente al VIH
presentes en la muestra o en el suero de control se unen a los antígenos de los
micropocillos. Después del lavado para eliminar la muestra y el exceso de anticuerpos, se
añade el conjugado, que se une a los anticuerpos específicos ya unidos a los antígenos de
los pocillos. En las muestras que no contienen anticuerpos específicos, el conjugado no se
une a los pocillos. Después del lavado para eliminar el conjugado no unido, se añade a los
pocillos una solución con 3, 3,5,5-tetrametilbenzidina (TMB) y peróxido de hidrógeno. En los
pocillos con conjugado unido se desarrolla un color violáceo que se convierte en naranja
cuando la reacción se para con la adición de ácido sulfúrico. Después de la incubación, las
reacciones enzimáticas se paran añadiendo ácido sulfúrico y el color producido se mide
espectrofotométricamente a 450 nm. La cantidad de conjugado y por lo tanto, el color en los
pocillos, es directamente proporcional a la concentración de anticuerpos frente al VIH
presente en la muestra.
Reactivos:
 Pocillos recubiertos
 Diluyente de muestra
 Conjugado
 Diluyente de conjugado
 Suero control positivo anti VIH-1
 Suero control positivo anti VIH-2
 Control negativo
 Diluyente de sustrato
 Concentrado de sustrato
 Líquido de lavado
Reconstitución del Conjugado
Golpee suavemente el frasco de conjugado sobre la superficie de trabajo para eliminar los
materiales que se hayan podido quedar pegados al tapón de goma.
Verter por completo el contenido del frasco de diluyente de conjugado en el frasco de
conjugado.
Taparlo y mezclar invirtiendo suavemente y dejar que se rehidrate durante 30 minutos
agitándolo ocasionalmente
El conjugado reconstituido es de color rojo.
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Tras la reconstitución, el conjugado se puede almacenar hasta 8 semanas a una temperatura

entre 2°C y 8°C o hasta 4 semanas a una temperatura igual o inferior a -15 °C sometiéndolo
a un máximo de 4 ciclos de congelación y descongelación.
Reconstitución del Sustrato
Para preparar la solución de sustrato, añadir una parte de diluyente de sustrato incoloro a la
misma cantidad de concentrado de sustrato rosa en un recipiente limpio de vidrio o de
plástico.
Es importante se siga este orden para realizar la mezcla y que las pipetas y los materiales de
vidrio que utilice para preparar la solución de sustrato estén limpios,
La solución de sustrato también se puede preparar vertiendo completamente el contenido del
frasco del diluyente de sustrato en el frasco del concentrado de sustrato.
La solución del sustrato debe ser rosa en el caso de que sea de color violáceo antes del uso,
se debe desechar y preparar solución nueva de sustrato.
La solución se mantiene estable si se almacena refrigerada a una temperatura entre 2 y 8°C
o entre 15 y 25 °C hasta un máximo de 2 días. Si aparecen cristales en la solución desechar.
Preparación Líquido de Lavado
Añadir un volumen de concentrado de líquido de lavado a 19 volúmenes de agua

desionizada o destilada para obtener el volumen necesario o diluya el contenido de un frasco
de líquido de lavado hasta obtener un volumen total de 2500 ml.
Pueden observarse cristales en el líquido de lavado concentrado, pero estos cristales se

disuelven al diluir el líquido de lavado a la concentración de trabajo.
Almacenar a 18-30 °C en una cubeta cerrada y permanece activo durante 1 mes.
El líquido se puede tornar de color amarillo durante el almacenamiento, lo cual no influye en

el funcionamiento del ensayo, siempre que se aspire totalmente el líquido de lado de los
pocillos.
Precauciones en el análisis
 No utilizar los reactivos transcurrida la fecha de caducidad. Evitar la contaminación

microbiológica de los reactivos, ya que puede afectar su rendimiento y producir
resultados erróneos.
 No modificar el procedimiento del ensayo, ni utilizar reactivos de otros fabricantes ni
de otros lotes. No reducir el tiempo de incubación recomendado.
 Atemperar los reactivos y las muestras.
 Lavar con ácido clorhídrico (2mol/L) todos los materiales de vidrio que vaya a utilizar
con los reactivos y después enjuagarlos con agua destilada o desionizada de primera
calidad.
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 No exponer los reactivos a luz intensa ni a vapores de hipoclorito durante el

almacenamiento o incubación.
 Evitar que se sequen los pocillos durante la incubación.
 No causar contaminación cruzada en los reactivos. Utilizar siempre la misma pipeta
para la solución de sustrato de los ensayos Murex. Asi mismo se deberá usar siempre
la misma pipeta (distinta a la del sustrato) para el conjugado.
 No tocar ni salpicar el borde de los pocillos con el conjugado. No pipetear expulsando
aire hacia afuera. Se recomienda pipetear con la técnica inversa cuando sea posible.
 Asegurarse que el fondo de la placa esté limpio y seco y que no haya burbujas en la
superficie del líquido antes de la lectura de la placa.
 Evitar contaminar los micropocillos con el talco de los guantes desechables.
 Después del uso no almacene la solución para suspender la reacción en un recipiente
poco profundo ni la devuelva a un frasco de almacenamiento.
Muestra: suero o plasma con EDTA o Citrato.
Procesamiento:
 Reconstituir y mezclar el conjugado. Preparar la solución de sustrato y el líquido de

lavado.
 Utilizar sólo el número de pocillos que necesite para el ensayo. Evite tocar el borde o
el fondo de los pocillos.
 Seleccionar en el equipo editar nuevo ensayo, e ingrese los datos del montaje y
prueba a realizar, tales como nombre y fecha.
 Disponer y/o ubicar los reactivos, controles y muestras según el equipo los vaya
solicitando. Asegurar de que cada recipiente quede en el lugar correcto de la gradilla
de muestras ó reactivos.
 Dar click en ACEPTAR, posterior a esto, dar click en SALTAR, para avanzar en la
línea de tiempo.
 El equipo añade 25 ul de diluyente de muestra en cada pocillo.
 Posteriormente, el equipo añade 100 ul de muestra o control a los pocillos. Utiliza la
primera columna de pocillos de cada placa para los controles del ensayo. Añade los
controles en los pocillos designados, después dispensa las muestras. Pipetea 100 ul
de control negativo en cada uno de los 3 pocillos de A1 a C1 y 100 ul de los controles
positivos anti-VIH-1 y anti-VIH-2 en los pocillos D1 y E1, respectivamente.
 El equipo tapa los pocillos y los incuba durante 60 minutos a 37°C +/- 1°C.
 Transcurrido el periodo de incubación, lava la placa, de acuerdo a las instrucciones del
protocolo. 5 ciclos de lavado, con un volumen de 500 ul de solución de lavado por
pocillo, durante 30 segundos por ciclo, el cual comprende aspirado/lavado/remojo.
 Posterior a los ciclos de lavado, adiciona 100 ul de conjugado en cada pocillo.
 Tapa los pocillos y los incuba durante 30 minutos a 37 °C +/- 1°C.
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 Una vez terminado el ciclo de incubación, lavar la placa nuevamente.

 Seguidamente, añade 100 ul de solución de sustrato en cada pocillo.
 Tapa los pocillos y los incuba durante 30 minutos a una temperatura de 37 °C +/- 1°C.
 Añade 50 ul de solución de parada (ácido sulfúrico entre 0.5 mol/L) a cada pocillo.
 El analizador DS 2 lee la absorbancia a 450 nm con una longitud de onda de
referencia entre 620 nm y 690 nm (si es posible)
 Ajustar el blanco del instrumento con aire (no debe haber ninguna placa en el carril).
 Verificar que los controles y cutt off, cumplan con las formulas establecidas para poder
validar el ensayo.
 Guardar el ensayo en archivo pdf en la carpeta de Resultados VIH, con la fecha del
montaje.
 Imprimir el reporte generado por el analizador.
 Retirar la placa, los reactivos y los controles del equipo, para posteriormente, realizar
el mantenimiento diario antes de apagar el analizador.
 Realizar dispensado y aspirado Murex.
 Descartar los desechos líquidos generados en el montaje.
 Apagar el equipo y cúbralo totalmente.
Cálculo de los Resultados: el equipo realiza el cálculo y emite el resultado.
Control de Calidad
Los resultados de un ensayo son válidos si los controles cumplen los siguientes criterios:
Control Negativo: la absorbancia media debe ser inferior a 0.3

Control Positivo: la absorbancia de cada uno de los controles positivos debe ser superior a
0.8 por encima de la absorbancia media del control negativo.
Los ensayos que no cumplan estos criterios se deben repetir
Interpretación de los Resultados
Resultados no Reactivos:
Las muestras cuyos valores de absorbancia sean inferiores al valor del punto de corte se
consideran negativas.
Resultados Reactivos:
Las muestras cuyos valores de absorbancia sean iguales o superiores al valor del punto de
corte se consideran inicialmente reactivas. Estas muestras se deben volver analizar por
duplicado utilizando más muestra de la extracción original. Las muestras reactivas en
cualquiera de la reanálisis se consideran repetidamente reactivas según los criterios del
ensayo Miurex HIV-1.2 O y pueden contener anticuerpos frente al VIH-1 o al VIH-2. Dichas
muestras se deben analizar con otros ensayos adicionales para confirmar la presencia de los
anticuerpos frente al VIH.
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No se ha añadido muestra
En el caso de los pocillos en los que no se haya añadido muestra, pero si reactivos, se
pueden obtener valores de absorbancia significativamente superiores al control negativo.

9.3 Hemoglobina Glicosilada HbA1c
La hemoglobina glicosilada (o glicosilada) es una heteroproteína de la sangre que resulta de la

unión de la hemoglobina (Hb) con glúcidos unidos a cadenas carbonadas con funciones ácidas
en el carbono 3 y el 4.
La prueba de hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un examen para la diabetes tipo
2 y prediabetes que mide el nivel promedio de glucosa en la sangre durante los últimos tres
meses.
La realización de este examen en el laboratorio clínico del hospital San José de Guaviare se
lleva a cabo mediante el Kit de Prueba SD MultiCare HbA1c, el cual es un reactivo de
diagnóstico en vitro utilizado para medir la hemoglobina glicosilada en una muestra de sangre
entera, capilar o venosa.
Procedimiento:
 Colocar el analizador sobre una superficie nivelada. Prenda el analizador oprimiendo el botón
ENTER o insertando un panel de prueba.
 Cuando el chip con el código para el kit de prueba especifico ya está insertado en el
analizador antes de prenderlo, el analizador entrará en modo de prueba automáticamente.
 Preparar el Kit de Prueba SD MultiCare HbA1c y un tubo con buffer. Verifique la fecha de
vencimiento y el número del código en la caja del kit de prueba. Siempre debe usar los kits de
prueba antes de su fecha de vencimiento.
 Insertar el chip con el código dentro del analizador y luego inserte también el panel de prueba
con la inscripción “HbA1c” mirando hacia arriba. Cuando el panel de prueba alcance la
posición correcta, el panel de prueba se inserta a mayor profundidad dentro del analizador
automáticamente. Si el panel de prueba no tiene problema alguno -que esté dañado o
defectuoso- se mostrarán los iconos de los botones Sangre e Inicio (START). Este es el
estado “en espera de sangre” del modo sangre entera.
 Tomar la muestra de sangre que usted necesite, como por ejemplo sangre capilar entera o
sangre venosa entera.
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 Colocar el extremo de la boquilla en la sangre. Así, la sangre será recopilada

automáticamente por la acción capilar. Recolecte la sangre hasta llenar la boquilla tal como
se muestra en la imagen abajo (esta es una muestra de sangre de unos 5μl).
 Colocar el extremo de la boquilla dentro del tubo con buffer.
 Oprimir y soltar el caucho de la boquilla para mezclar la sangre y la tableta de látex en el tubo
con buffer. Recolectar la mezcla de sangre entera en la boquilla soltando el caucho. Poner
toda la muestra en el panel de prueba oprimiendo el caucho de la boquilla. Luego, oprimir el
botón START (Inicio).
 El resultado aparecerá en la pantalla después de tres minutos.
 Cuando termine la prueba saque el panel de prueba usado. El analizador se apagará
automáticamente después que usted retire el panel de prueba.
INTERPRETACION DEL RESULTADO DE LA PRUEBA
El analizador lee la concentración de HbA1c entre 4.0-15%

En caso que el resultado de la prueba esté por fuera del rango de mediciones, el analizador
mostrará un mensaje de “Lo” o de “Hi”.
La recomendación (4) Asociación de Diabetes Americana (ADA) (6) se resumen en la siguiente
tabla:

9.4 Microalbuminuria U-ALB
La U-ALB (microalbumina) evalúa en la orina la presencia de una proteína llamada albumina. La

albumina es normalmente encontrada en la sangre y es filtrada por los riñones. Cuando los
riñones están trabajando correctamente, la albumina no está presente en la orina, sin embargo,
pequeñas cantidades de albumina se fugan en la orina cuando los riñones están dañados. Esta
condición se llama microalbuminuria . La Micro albuminuria es la causa más frecuente del daño
renal de la diabetes. Sin embargo, muchas otras condiciones pueden conducir al daño renal,
tales como la hipertensión, falla cardiaca, cirrosis, o lupus eritematoso sistémico. Si el daño renal
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no es tratado en forma temprana, mayor cantidad de albumina y proteína puede fugarse en la

orina. Esta condición se llama macro albuminuria o proteinuria.
El Kit de Prueba SD Multicare U-Albumina es un reactivo de diagnóstico in vitro utilizado para
medir micro albuminuria en la orina humana. La cantidad medida de micro-albumina proporciona
información de predicción de la nefropatía diabética y enfermedades cardiovasculares.
Tipo de muestra: La muestra de orina humana se puede usar con el Kit de Prueba SD Multicare
U-Albumina. Orina 24 horas y orina parcial.
Procedimiento:
 Colocar el analizador sobre una superficie nivelada. Prenda el analizador oprimiendo el botón
ENTER o insertando un panel de prueba.
 En caso que se haya insertado el chip con el código en el analizador para el kit de prueba
especifico antes de prender el analizador, éste entrará en modo de prueba automáticamente.
 Preparar el Kit de Prueba SD Multicare U-Albumina y el tubo con el buffer. Verifique la fecha
de vencimiento y el número del código en la caja del kit de prueba. Siempre debe usar los kits
de prueba antes de su fecha de vencimiento.
 Insertar el chip con el código dentro del analizador y luego inserte también el panel de prueba
con la inscripción “U-ALB” mirando hacia arriba. Cuando el panel de prueba alcance la
posición correcta, el panel de prueba se inserta automáticamente a mayor profundidad dentro
del analizador. Si el panel de prueba no tiene problema alguno, por ejemplo, que esté dañado
o defectuoso, se mostrarán los iconos de los botones de la muestra y de Inicio (START). Este
es el estado “en espera de la muestra”
 Recoger la Orina
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 Colocar el extremo de la boquilla sobre la orina. Luego, la orina se recogerá automáticamente

por la acción capilar. Recoja la orina hasta llenar la boquilla como se muestra en la imagen
abajo (esto debe ser una muestra de orina de alrededor de 3µl).
 Poner el extremo final de la boquilla dentro del tubo con el buffer.
 Oprimir y suelte el caucho de la boquilla para mezclar la muestra con la tableta de látex
dentro del tubo con el buffer.
 Recoja toda la muestra dentro de la punta soltando el caucho de la boquilla.
 Poner toda la muestra en el panel de prueba oprimiendo el caucho de la boquilla. Luego,
oprimir el botón START (Inicio). 9. El resultado aparecerá en la pantalla después de tres
minutos.
 Cuando termine la prueba, sacar el panel de prueba usado. El analizador se apagará
automáticamente después que usted retire el panel de prueba.
INTERPRETACION DEL RESULTADO DE LA PRUEBA
El analizador lee la concentración de U-Albumina entre 5.0-300 mg/L.

En caso que el resultado de la prueba esté por fuera del rango de mediciones, el analizador
mostrará un mensaje de “Lo” o de “Hi”.
9.5 Microalbuminuria 24 horas:
Se realiza el mismo procedimiento anteriormente descrito, pero utilizando una muestra de orina
recolectada durante las 24 horas previas bajo las recomendaciones dadas por el personal del
laboratorio y aplicando la siguiente fórmula para obtener la concentración de Microalbuminuria
excretada en 24 horas.
Formula: Valor arrojado por el equipo x volumen de la muestra (En litros)
Valores de referencia: 30-300 mg/24 horas

Reporte Resultado: Ver punto 12 .8
9.6 Microalbuminuria Látex -Turbidimetría:
Las partículas de látex sensibilizadas con anti-albúmina humana, son aglutinadas cuando
reaccionan con la albúmina presente en la muestra. La aglutinación de las partículas de látex es
proporcional a la concentración de albúmina en la muestra y puede ser medida por turbidimetría.
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Tipo de muestra: Orina 24 horas y orina parcial.
Procedimiento:
 Centrifugar la muestra
 Realizar lo establecido en el punto 8.1 pruebas de química sanguínea.
 El equipo emite los resultados en mg/L
Orina parcial valor de referencia: hasta 15 mg/L
Para orina de 24 horas aplicar la siguiente fórmula:
Valor arrojado por el equipo x volumen de la muestra (En litros)
Valor de referencia: 30-300 mg/24 horas
MICROBIOLOGÍA
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10. MICROBIOLOGÍA
10.1 Urocultivo
El urocultivo es el cultivo de orina para diagnosticar infección sintomática del tracto urinario o
infección asintomática (bacteriuria asintomática) en pacientes con riesgo de infección.
Se utiliza para cuantificar el número de bacterias por mililitros y se expresa como unidades
formadoras de colonias/ml (UFC/ml). La técnica utilizada es con asa calibrada, que permite
depositar sobre la superficie del medio de cultivo un volumen determinado de orina.
La piuria, junto con la bacteriuria, es un dato muy importante para el diagnóstico de infección del
tracto urinario, ya que prácticamente está presente en todas las infecciones urinarias. Una
excepción es la bacteriuria asintomática en la que la piuria puede estar ausente.
Las principales bacterias que afectan el sistema urinario son las Enterobacterias (bacilos Gram
negativos).
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Enterobacter spp.
Proteus spp.
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Pseudomonas aeruginosa (no es Enterobacteria).

De menor frecuencia tenemos los cocos Gram positivos:
Enterococcus spp.
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes y Streptococcus spp. (raros).
Staphylococcus saprophyticos
Reactivos y/o elementos:
 Mechero
 Asa calibrada estéril o tira de bacteruritest.
 Medio de Cultivo
 Papel absorbente
Procedimiento:
 La muestra es recepcionada por la auxiliar de laboratorio previa verificación de datos con

la orden médica y registro en el libro de ingreso según servicio.
 La auxiliar de laboratorio lleva la muestra en la cava de transporte al área de microbiología
y la guarda en la incubadora dentro de la cava destinada para tal fin.
 La muestra se guarda en cava dentro de la incubadora mientras es procesada.
 La bacterióloga (o) registra los datos del paciente como nombres y apellidos, historia
clínica, edad, servicio, tratamiento (antibiótico), hora de siembra y resultado del sedimento
urinario en el libro de microbiología.
 Verificar que la muestra corresponda con la orden médica, mezclar
 Si no es estéril flamear el asa en el mechero
 Agitar el frasco de orina, abrir delante del mechero y flamear la boca del mismo. Introducir
verticalmente el asa flameada y fría en la orina, justamente por debajo de la superficie.
 Inocular los medios de cultivo (Agar EMB y agar cromogénico) deslizando el asa una sola
vez a lo largo de la caja de petri pasando por el centro luego haciendo un sigsa. (método
de Kass).
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 Siembra con tirilla bacteruritest: sumergir la tirilla hasta el borde indicado en la orina,
poner en el agar haciendo presión. Vuelva a sumergir, y con el lado contrario sembrar en
el otro medio de cultivo.
 Interpretación tirillas bacteruritest: cada colonia que crezca en el área de siembra del
bacteruritest, representará una población de 5.000 UFC/ml.
Nota: según recomendaciones dadas por las guías prácticas para los laboratorios de
bacteriología y análisis realizado en el laboratorio clínico Hospital San José del Guaviare con una
orina la cual se sembró antes de ser refrigerada (durante 2 horas), se observó que el recuento de
colonias en los medios de cultivo con la orina a 37 °C fue más alto que con la muestra
refrigerada. Por tal motivo se implementó que las muestras de orinas se guardan en la
incubadora a 37°C mientras son procesadas, debido a que la temperatura de la nevera
disminuye el crecimiento bacteriano.
Interpretación:
 Después de incubar ambas cajas durante 18-24 horas el bacteriólogo (a) debe interpretar
resultados de ambas cajas simultáneamente.
 Realizar recuento según criterios de lectura (método de Kass).
 El bacteriólogo (a) responsable del procedimiento debe realizar las pruebas de identificación
bacteriana y antibiograma.
Parámetros para el Recuento de Kass
Método de Kass
Si crece solo en la mitad de la línea central

de siembra, se considera un recuento de
25.000 UFC/ml.
Si crece solo en la línea central es

compatible con un recuento de 50.000
UFC/ml
Si crece en la línea central y hasta la mitad

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de las líneas que intercepten a ésta, el

recuento es de 75.000 UFC/ml.
Si existe crecimiento en todas las líneas de

siembra, se considera un recuento
> 100.000 UFC/ml.
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Recuentos de colonias de 75.000 a 100.000 UFC/ml cultivo puro o con dos colonias
predominando en igual proporción, se debe realizar identificación bacteriana y antibiograma.

Registro: Libro de Registro Microbiología
10.2 Cultivo y Antibiograma para Gérmenes Comunes
Se siembran muestras de secreciones provenientes de exudados faríngeos, óticos,

conjuntivales, endocervicales, uretrales, material purulento procedente de los tejidos blandos,
líquidos estériles.
El objetivo del cultivo es facilitar el crecimiento y aislamiento de las bacterias presentes en una
muestra clínica, determinar qué bacteria entre las que se desarrollan tienen más probabilidades
de ser las causantes de la infección y cuáles son las posibles contaminantes o colonizadores.
Obtener un desarrollo suficiente de las bacterias de importancia clínica para permitir su
identificación, caracterización y realización de pruebas de sensibilidad antibiótica.
 Mechero
 Asa calibrada estéril
 Medios de Cultivo
Procedimiento
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 La muestra es recepcionada por la auxiliar de laboratorio previa verificación de datos con

la orden médica y registro en el libro de ingreso según servicio.
 La auxiliar de laboratorio lleva la muestra en la cava de transporte al área de microbiología
y la guarda en la incubadora dentro de la cava destinada para tal fin.
 La muestra se guarda en cava dentro de la incubadora mientras es procesada.
 La bacterióloga (o) registra los datos del paciente como nombres y apellidos, historia
clínica, edad, servicio, tratamiento (antibiótico), hora de siembra y tipo de muestra.
 Verificar que la muestra corresponda con la orden médica, mezclar
 Previamente se deben atemperar el medio de cultivo: Agar sangre, Mac Conkey, BHI y
Agar Chocolate.
 Frente al mechero se siembra la muestra en los medios de cultivo descritos anteriormente
 Incubar a 37 °C
 El agar chocolate debe someterse a un ambiente de anaerobiosis, por ende, debe ser
puesto en el recipiente que contiene una vela, ésta es encendida una vez introducido el
medio y sellada, para así, se consuma el oxígeno y crear este ambiente.
Interpretación:
 Después de incubar ambas cajas durante 18-24 horas la bacteriólogo (a) debe interpretar
resultados de ambas cajas simultáneamente.
 El bacteriólogo (a) responsable del procedimiento debe realizar las pruebas de identificación
bacteriana y antibiograma.

10.3 Identificación Bacteriana
Realizar Gram de las diferentes muestras sembradas que presentan crecimiento bacteriano para
saber morfología, orientar la identificación y antibióticos a utilizar.
Procedimiento para Bacilos Gram Negativos
 Si es necesario realizar repique en EMB o Cromoagar para identificación, ya que para la

técnica semi automatizada se requiere cultivo puro y cepas de Agar Mac Conkey o
Cromoagar. Para identificar E.coli realizar repique en EMB para observar el brillo metálico.
 En caso de urocultivo orientar identificación de acuerdo al viraje del medio Cromoagar
 Realizar montaje de técnica semiautomatizada para la identificación de género y especie
de la bacteria en estudio.
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Crecimiento de colonia compatible con género diferenciado por Cromo-Agar
E. coli: colonia rosada

Proteus, Morganella, Providencia: colonia amarilla a café
Enterococcus: colonia azul claro
Klebsiella, Enterobacter, Serratia: colonia azul oscuro
Procedimiento para Cocos Gram Positivos
 Realizar catalasa, coagulasa y test de Novobiocina
Realizar Catalasa
Determina la presencia de la enzima catalasa, esta enzima descompone el peróxido de

hidrógeno en agua y oxígeno gaseoso.
Reactivo: Peróxido de hidrógeno al 3%

Procedimiento
 Con el asa de siembra, recoger el centro de una colonia pura de 18 a 24 horas y colocarla
sobre un portaobjetos limpio.
 Agregar una gota H2O2 al 3%.
 Observar la efervescencia
Control positivo: S. aureus.

Control negativo: Streptococcus spp.
 Prueba de Coagulasa
Se realiza para comprobar la facultad de la bacteria de coagular el plasma por acción de la
enzima coagulasa, la cual aumenta la velocidad de coagulación del plasma. El resultado final
es la formación de un coágulo de fibrina.
Prueba en lámina (detecta factor de aglutinación).
Prueba en tubo (detecta coagulasa libre y ligada).
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Reactivo: Plasma liofilizado de conejo. (Reconstituir de acuerdo con las instrucciones del
fabricante.)
En el laboratorio clínico HSJG se utiliza plasma humano. El personal de bacteriología debe
realizar la calidad del plasma verificando los resultados de tiempos de coagulación y cultivo
en agar sangre para descartar agentes infecciosos.
Los resultados de PT y PTT del plasma a usar deben estar dentro de los rangos normales y
cultivo negativo.
Procedimiento
Prueba en tubo:
Transferir una colonia aislada del agar sangre a 500 ul de plasma
Girar el tubo suavemente para lograr la suspensión del organismo. No agitar.
Incubar la mezcla a 37 °C (en baño maría de preferencia) por 4 horas; observar si
hay formación de coágulo inclinando lentamente el tubo.
Prueba en lámina:
Colocar una gota de agua destilada sobre un portaobjetos emulsionar suavemente el

organismo en estudio en la gota de agua de manera de obtener una suspensión cargada
homogénea. Agregar una gota de plasma junto a la gota de la suspensión del
microorganismo. Mezclar bien con el asa. Inclinar el portaobjetos hacia uno y otro lado,
observando la formación inmediata de un precipitado granular o de grumos blancos
Interpretación:
 Prueba en portaobjetos: una reacción positiva se detecta usualmente en 15 a 20

segundos por la aparición de un precipitado granular.
La prueba se considera negativa si no se observa aglutinación en 2 a 3 minutos.
Esta prueba es solo presuntiva y todos los cultivos que den resultados negativos o
positivos tardíos deben verificarse mediante la prueba en tubos ya que algunas cepas
de Staphylococcus aureus no producen coagulasa fija.
 Prueba en tubo:
1+: pequeños coágulos no organizados.

2+: pequeños coágulos organizados.
3+: gran coágulo organizado.
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4+: todo el contenido aparece coagulado y se mantiene cuando se invierte

el tubo.
Se consideran positivos los grados 3+ y 4
 Resistencia a la Novobiocina
Esta prueba se realiza principalmente para distinguir S.saprophyticus de otras especies

de importancia clínica.
A partir de colonias aisladas y cultivadas por 24 horas, hacer una suspensión equivalente a
la escala 500 ul.
Sumergir un hisopo estéril dentro de la suspensión ajustada y rotarlo varias veces
Inocular sobre la superficie de una placa con agar sangre de carnero estriando
homogéneamente con el hisopo sobre la superficie del agar.
Colocar el disco de Novobiocina y presionar suavemente con una pinza estéril.
Incubar a 37 °C toda la noche o 24 horas.
Lectura: Medir el halo de inhibición. Un halo 16 mm es resistente a la Novobiocina, si es
mayor entonces es sensible. La resistencia a Novobiocina es intrínseca en S.
saprophyticus.
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10.3.1 Identificación bacteriana Semi Automatizada: Paneles de identificación DL-96
Los paneles DL-96 son una herramienta que permite la identificación de bacterias presentes
en los medios de cultivo inoculados con muestras de diferente procedencia y permite conocer
el perfil de susceptibilidad de éstas.
Pasos a seguir:
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 DL 96 E (Enterobacterias):
Bacilos Gram negativos cuyo test de oxidasa sea negativo y se obtengan colonias
puras, aisladas en el medio de cultivo después de 18 a 24 horas de incubación,
deberán ser analizadas bajo este tipo de panel:
Procedimiento:
 Preparar una suspensión bacteriana al 0.5 del Estándar McFarland: Tomar con el asa
las colonias aisladas de la caja de Petri (6-8 colonias) y transferirlas al frasco con
diluyente para preparar la suspensión bacteriana al 0.5 del Estándar de McFarland
(MCF), determine el valor en el equipo DL Turbidimieter.
 Inocular la suspensión en la tarjeta:
 Dispensar 100μl de la suspensión bacteriana en cada pozo del área de
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Identificación (pozo A1 al A12, B1 al B12, C1 al C4),
 Dispensar 50μl de suspensión bacteriana en el caldo y mezcle bien. Luego dispense

100μl de la suspensión en cada pozo del área AST (Pozo C5 al C12, D1 al D12, E1 al
E12, F1 al F12, G1 al G12, H1 al H12).
 Agregar parafina estéril:
 Cubrir y ajustar firmemente la placa o tarjeta con la tapa plástica e incúbela por 18-
24horas de 35~37℃.
 Adicionar de los reactivos auxiliares.
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 Leer los resultados en el programa instalado en el computador de microbiología.

 El bacteriólogo responsable debe registrar y reportar los resultados al sistema
Dinámica o los imprimirá si se trata de resultados de pacientes de consulta externa.

 DL 96 NE (No Enterobacterias):
La realización de este panel está indicado para aquellas bacterias Gram negativas
cuyo resultado de la Oxidasa sea positivo, y su conteo sea significativo en el medio
de cultivo.
Procedimiento:
 Preparar una suspensión bacteriana al 0.5 del Estándar McFarland: Tome con el asa
las colonias aisladas de la caja de Petri (6-8 colonias) y transfiéralas al frasco con
(MCF).
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 Dispensar 100μl de la suspensión bacteriana en cada pozo del área de identificación

(pozo A1 al A12, B1 al B12,).
 Dispensar 50μl de suspensión bacteriana en el caldo y mezcle bien. Luego dispense

100μl de la suspensión en cada pozo del área AST ( pozo C1 al C12, D1 al D12, E1 al
E12, F1 al F12, G1 a l G12, H1 al H12)
 C u b r i r y a j u s t a
24horas
de
35~37
℃.
 Adicionar los reactivos auxiliares:
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 El bacteriólogo responsable registra y reporta los resultados al sistema Dinámica o los
imprimirá si se trata de resultados de pacientes de consulta externa.

 DL 96 STREP (para bacterias del genero Streptococcus y Enterococcus):
Las bacterias a las cuales se les debe realizar montaje de este panel de identificación
son aquellos cocos Gram positivos, que presenten prueba de catalasa negativa y
hayan crecido como colonias aisladas después de 18 a 24 horas de incubación.
Procedimiento:
 Preparar una suspensión bacteriana al 2 del Estándar McFarland: Tome con el asa las
colonias aisladas de la caja de Petri (6-8 colonias) y transfiéralas al frasco con
diluyente para preparar la suspensión bacteriana al 2 del Estándar de McFarland
(MCF).
 Dispensar 100μl en cada pozo del A5 al A12.
 Dispensar 500 μl de la suspensión bacteriana en el caldo A y mezcle (suspensión A).

Luego dispensar 100μl de la Suspensión A en los pozos del A1 alA4, B1 al B7
-
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 Dispensar 50 μl de la suspensión A en el caldo B (suspensión B) y mezcle. Luego

adicione en 100 μl de la nueva
suspensión en los pozos B8 al B12, C1,
C2 al C12, D1 al D12, E1 al E12, F1 al
F12, G1 al G12, H1 al H 12
 Cubrir
y ajustar
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firmemente la placa o tarjeta con la tapa plástica e incúbela por 18-24horas de

35~37℃.
 Adición de los reactivos Auxiliares.

 E l b a c t e r i ó l o
Dinámica o los imprimirá si se trata de resultados de pacientes de consulta externa.
Nota: Antes de leer, espere a que finalicen las 3 reacciones anteriores (30 minutos)

DL 96 STAPH (para bacterias del genero Sthaphylococcus ):
Las bacterias a las cuales se les debe realizar montaje de este panel de
identificación son aquellos cocos Gram positivos, que presenten prueba de catalasa
positiva y hayan crecido como colonias aisladas después de 18 a 24 horas de
incubación.
Procedimiento:
 Preparar una suspensión bacteriana al 0.5 del Estándar McFarland: Tome con el asa
las colonias aisladas de la caja de Petri (6-8 colonias) y transfiéralas al frasco con
(MCF).
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 Dispensar 100μl en cada pozo del A1 al A12, B1 al B10.
 Dispensar 50 μl de la suspensión bacteriana en el caldo y mezcle. Luego dispense

100μl de la suspensión en cada pozo del área AST (pozo B11, B12, C1 al C12, D1 al
D12, E1 al E12, F1 al F12, G1 al G12, H1 al H12).
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 Cubrir y ajustar firmemente la placa o tarjeta con la tapa plástica e incúbela por 18-
24horas de 35~37℃.
 Adicionar los reactivos auxiliares

 El bacteriólogo responsable anotará y reportara los resultados al sistema Dinámica o
los imprimirá si se trata de resultados de pacientes de consulta externa.

10.4 Prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos (antibiograma)
La prueba de susceptibilidad sirve para determinar IN VITRO a que antibióticos es

susceptible o resistente una determinada cepa bacteriana aislada del paciente. Este método
permite al médico escoger el antibiótico más adecuado con base científica proporcionada por
el laboratorio y así poder dar un buen tratamiento.
Susceptible: Cuando los microorganismos responsables de una infección son inhibidos por
concentraciones de antibióticos obtenidos con un régimen usual de dosificación.
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Resistente: Si los microorganismos que causan la infección, toleran concentraciones de

antibióticos superiores a las que pueden obtenerse en la sangre por medio de un régimen
usual de dosificación.
Intermedio: Hoy en día se considera como prueba errática, que por lo tanto debe repetirse,
ya que realmente se trata de una población bacteriana resistente.
Procedimiento Técnica Manual:
 Con el asa flameada y fría tomar 4 a 5 colonias bien aisladas y de igual morfología del
cultivo.
 Inocular un tubo con 2 mL solución salina estéril. Mezclar.
 Luego inocular la caja presecada de agar Mueller-Hinton así: introducir un hisopo
estéril en la solución salina, exprimir bien el hisopo presionándolo ligeramente contra
las paredes del tubo, arriba del nivel la solución salina.
 Con el hisopo exprimido hacer una siembra masiva cerca al mechero.
 Dejar secar la caja de 3 a 5 minutos; pero no más de 15 minutos, con la tapa cerrada.
 Con pinzas estériles, colocar los discos impregnados de antibióticos a manera que
queden lo más separado entre sí. Escoger los antibióticos a colocar dependiendo de la
bacteria aislada, edad del paciente, servicio y embarazo.
 Invertir las cajas e incubarlas por 16 a 18 horas.
 Se debe realizar el antibiograma de acuerdo a lo descrito en la siguiente tabla.
UROCULTIVO CULTIVOS HEMOCULTIVOS

Amikacina Amikacina Amikacina
PEDIATRIA
Ampicilina Oxacilina Vancomicina

Cefalotina Ampicilina - Sulbactam Ceftriaxona
Ceftriaxona Cefalotina Ampicilina
Trimetropin – Sulfa Vancomicina
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Cefalotina Amoxacilina
LIZADOSHOSPITA SALA DE
PARTOS
Nitrofurantoina Cefalotina
Amoxacilina Ceftriaxona
Ampicilina Sulbactam Ampicilina Sulbactam
Ceftriaxona Gentamicina
Nitrofurantoina Oxacilina Oxacilina
Cefalotina Vancomicina Vancomicina
Ciprofloxacino Cefalotina Clindamicina
Trimetropin – Sulfa Ciprofloxacino Ciprofloxacino
Ampicilina Sulbactam Trimetropin – Sulfa Trimetropin – Sulfa
Nota: Se utiliza Ciprofloxacina (intrahospitalario) o Norfloxacino (consulta externa), pero

nunca las dos en el mismo antibiograma.
La Gentamicina se utiliza en las embarazadas como última instancia cuando el
microorganismo es multirresistente y en el último trimestre del embarazo.
Antibiograma Urocultivos Consulta Externa
Niños Maternas Adultos

Cefalexina
Cefalexina Cefalexina Norfloxacino
Nitrofurantoina Nitrofurantoina Nitrofurantoina
Ácido Nalidíxico Amoxacilina Ampicilina
Trimetropin - Sulfa Trimetropin - Sulfa Ampicilina – Sulbactam
Ampicilina - Sulbactam Trimetropin - Sulfa
Gentamicina

Almacenamiento de los discos con antibióticos:
 Almacenar los discos de acuerdo con las siguientes instrucciones para que no pierdan
su potencial:
 Congelar (idealmente a –20°C) los discos de Penicilina, Ampicilina, Carbenicilina y
Cefalosporinas. Atemperar por lo menos 2 horas antes de usar los sensidiscos.
 Los discos del resto de antibióticos pueden almacenarse refrigerados sin congelación.
De preferencia con un desecante.
Interpretación de resultados.
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 Después de 16 a 18 horas de incubación, examinar con buena luz las cajas ya con
crecimiento.
 Medir en milímetros el diámetro de los halos de inhibición completa con una regla por
detrás de la caja petri.
 En caso de sulfonamidas, puede ocurrir crecimiento dentro del halo, el cual no debe
tomarse en cuenta.
 Transformar las medidas de los diámetros de los halos de inhibición en milímetros,
hacer lecturas de acuerdo a tablas actualizadas.
10.5 Hemocultivo-hemocultivo con resinas

El hemocultivo o cultivo de sangre, sirve para detectar las bacterias que se están
reproduciendo en sangre, lo que provoca septicemia. Cuando las bacterias se multiplican a
una velocidad que excede la capacidad del sistema retículo-endotelial para removerlos de la
sangre, ocurre la septicemia. Se diferencia de la bacteremia, que es la presencia transitoria
de bacterias en el torrente circulatorio.
Las resinas presentes en algunos hemocultivos, tienen la capacidad de neutralizar agentes
antimicrobianos que pueden estar siendo suministrados al paciente en el momento de la
toma de la muestra para este tipo de cultivo.
Instrucciones para la toma de un hemocultivo:

 El personal auxiliar de laboratorio con apoyo de bacteriología son los responsables de
la toma de muestra
 Selección de la vena adecuada
 Usando guantes estériles desinfectar con solución alcohólica de iodo toda la zona
seleccionada.
 Limpiar del centro a la periferia con una gasa estéril humedecida en solución de
alcohol etílico 70 %.
 Colocar la banda del torniquete
 Usando siempre guantes estériles tomar con jeringa desechable de 10 ml: 5-10 ml de
sangre.
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 No se debe tocar la piel con la mano una vez desinfectada, salvo si se usan guantes
estériles.
 Limpiar con una gasa impregnada en solución de alcohol iodado el tapón de Hemo-
bacter donde colocarse la muestra.
 Con la jeringa en posición vertical penetrar el tapón e inocular rápidamente la muestra
en proporción 1:10 para un volumen de 35 ml de medio Hemo-Bacter inocular 3.5 ml
de sangre, para un volumen de 20 ml inocular 2 ml. Esta relación entre la muestra y el
medio debe mantenerse siempre lo cual garantiza una mejor posibilidad de
crecimiento.
 Una vez concluida la inoculación del medio, retire la aguja del tapón del frasco y
mezcle suavemente la muestra dándole al frasco suaves movimientos de vaivén.
 La auxiliar de laboratorio realiza el transporte de la muestra al área de microbiología y
registra los datos del paciente, edad, servicio, tratamiento y hora de toma de muestra
en el libro de registro de microbiología.
 Rotula el frasco del hemocultivo con el consecutivo interno de ingreso
 Incuba los hemocultivos a 37 °C en la incubadora
Procedimiento:
 Incubar los Hemocultivos por cinco días a 37 °C
 Diariamente revisar los hemocultivos aparentemente negativos hasta completar los
cinco días de incubación.
 Con mucho cuidado para que el caldo no se agite, examinar diariamente los frascos
contra la luz, para buscar algunos de los siguientes signos visibles que indican
crecimiento bacteriano, los cuales orientan hacia el tipo de bacteria que está
creciendo:
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En caso de observar cualquiera de estas características:
 Agitar suavemente, limpiar el tapón perforable con algodón y alcohol, puncionar con
jeringa y aguja estéril, y aspirar una pequeña cantidad de caldo.
 Inocular una gota y luego estriar con asa sobre una caja de agar sangre, agar Mc
conkey, caldo BHI y lámina para Gram.
 Mechero
 Asa calibrada estéril
 Medios de Cultivo
Procedimiento
 Previamente se deben atemperar el medio de cultivo: Agar sangre, Mac Conkey, BHI y
Agar Chocolate.
 Frente al mechero se siembra la muestra en los medios de cultivo descritos anteriormente
 Incubar a 37 °C
Interpretación:
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 Después de incubar ambas cajas durante 18-24 horas el bacteriólogo (a) debe
interpretar resultados de ambas cajas simultáneamente.
 El bacteriólogo (a) responsable del procedimiento debe realizar las pruebas de
identificación bacteriana y antibiograma.
Informe:
 Los hemocultivos se reportan como negativo a las 48 horas de incubación si no se observan

bacterias, pero se guarda por cinco días más para realizar lectura en estos días, aún después de
haber sido ya reportados.
 Si el hemocultivo presenta crecimiento a cualquier tiempo de incubación, realizar Gram y
reportar al médico.
 Si es positivo reportar identificación bacteriana y antibiograma.

10.6 Coprocultivo para aislamiento de Salmonella y Shigella
El coprocultivo consiste en cultivar materia fecal con el objetivo de identificar diferentes

organismos causantes de enfermedades gastrointestinales. Se utiliza para estudiar casos de
diarrea severa, persistente o recurrente sin causas conocidas, y en caso de diarreas asociadas
al consumo de antibióticos.
Las infecciones entéricas pueden ser causadas por varios microorganismos, siendo de mayor
importancia las bacterias del género Shigella y Salmonella.
Recomendaciones
Debe conocerse la edad del paciente, registrar si es niño menor de 6 meses. Para efectuar el
coprocultivo se utilizan medios selectivos (contienen inhibidores, por lo que sólo permiten el
crecimiento de bacilos Gram-negativos) y diferenciales (contienen lactosa e indicadores de
pH que viran cuando se produce ácido, lo que hace cambiar el color de las colonias y así las
diferencia). Algunos de estos medios contienen sales de hierro que precipitan en forma de
sulfuro ferroso de color negro intenso si las bacterias producen ácido sulfídrico.
Procedimiento:
 Inocular una porción de heces (con moco, sangre o pus) o de muestra similar,
directamente en media caja de Mac Conkey, XLD, agar Hektoen incubar a 37 °C
durante 18 hrs.
 Sembrar en caldo selenito, incubar a 37 °C durante 6 – 18 hrs
 Pasadas 8 horas, se mezcla bien el caldo selenito, tomar muestra y sembrar por
agotamiento en la otra mitad de la caja del medio Mac Conkey, XLD, agar Hecktoen.
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 El inóculo se coloca con asa en anillo o con hisopo.

 Incubar a 37°C por 18 horas.
 Después de incubadas, observar cuidadosamente las placas.
 Seleccionar 3 colonias lactosa negativas o productoras de H2S.
 Realizar la identificación con la técnica disponible ya sea automatizada o semi
automatizada.
 Realizar antibiograma
10.7 Cultivo Micobacterias
El cultivo es el método de diagnóstico bacteriológico de tuberculosis de mayor sensibilidad;

en el caso de sospecha de tuberculosis extrapulmonar es el mejor método de diagnóstico.
Se debe realizar el cultivo en:
 Sintomático respiratorio, cuando la segunda muestra de baciloscopia del seriado del
esputo es negativa.
 Muestra de esputo inducido, lavado gástrico, lavado bronco alveolar, de casos con
síntomas o signos respiratorios.
 En menores de 15 años con sospechas de TB
 Caso sospechoso de TB extrapulmonar
 En pacientes con VIH o inmunocomprometidos
 Población de alto riesgo (personal de salud, población indígena, personas privadas de la
libertad, personas en situación habitante de calle, pacientes inmunosuprimidos, entre
otros).
El bacteriólogo (a) debe rotular el medio Ogawa Kudoh con el número consecutivo colocado
en el frasco, nombre, apellidos, documento, fecha de siembre y tipo de muestra.
Nunca marcar sobre la tapa del frasco.
El medio de cultivo debe estar atemperado previamente para la siembra.
Para el cultivo, también se puede conservar adicionando igual cantidad de FTS al 10% hasta
por 24 horas a temperatura ambiente. Durante su conservación, las muestras deben estar
protegidas de la luz directa y evitar que se derramen. Los medios de cultivo después de
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inoculados, se deben incubar inmediatamente, de lo contrario se deben conservar a

temperatura ambiente, protegidos de la luz insectos y polvo.
Procedimiento:
Esputo
 Para muestras de esputo se deben sembrar dos medios de Ogawa Kudoh
 Para muestras de jugo gástrico un medio de Ogawa Kudoh
 Mojar la totalidad del algodón de un escobillón estéril con la partícula útil de la muestra.
 Introduzca el escobillón, en un tubo que contenga 3 ml de NaOH al 4%, dejar en reposo
durante 2 minutos.
 Introduzca en el tubo de medio Ogawa Kudoh el escobillón que ha sacado del hidróxido
de sodio, siembre con movimientos de rotación y presión sobre todo el medio.
 Usar un escobillón para cada tubo del medio de Ogawa Kudoh y el mismo hidróxido de
sodio por muestra.
Jugo gástrico
La muestra de jugo gástrico debe llegar al laboratorio en tubo estéril, el cual debe contener 2 ml
de fosfato trisódico FTS al 10% y 10 ml del aspirado gástrico, esto con el fin de neutralizar el pH
ácido que afecte las micobacterias.
 Medir el pH de la muestra y neutralizarla (pH 7) con agua destilada si se requiere.

 La muestra debe tener 2 horas de reposo a partir de la toma.
 Centrifugar a 4500 r.p.m. por 30 minutos en centrifuga refrigerada. En caso de contar con
centrifuga refrigerada, centrifugar a 4500 r.p.m. por 15 minutos, dejar 15 minutos en nevera y
repetir centrifugación a 4500 r.p.m. por 15 minutos.
 Descartar sobrenadante en un recipiente con hipoclorito y dejar sedimento para realizar
baciloscopia y cultivo.
 Realizar el mismo procedimiento mencionado anteriormente para muestra de esputo.
Orina
La muestra ideal es la primera orina de la mañana debido a que es más concentrada
.
 Mezclar la orina y tomar 30 mL de esta y adicionar 10ml de fosfato trisódico al 10%.
 La muestra debe ser procesada inmediatamente.
 Centrifugar a 4500 r.p.m. por 30 minutos en centrifuga refrigerada. En caso de no contar con
centrifuga refrigerada, centrifugar a 4500 r.p.m. por 15 minutos, dejar 15 minutos en nevera y
repetir centrifugación a 4500 r.p.m. por 15 minutos.
 Descartar sobrenadante en un recipiente con hipoclorito y dejar sedimento para realizar
baciloscopia y cultivo.
 Realizar el mismo procedimiento mencionado anteriormente para muestra de esputo
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Cabe aclarar que la baciloscopia positiva del sedimento de orina no necesariamente es

diagnóstico concluyente de tuberculosis, por cuanto existen micobacterias saprófitas en el tracto
urinario que pueden producir resultados falsos positivos. El diagnóstico debe ser completado con
cultivo e identificación del bacilo observado.
Líquido Cefalorraquídeo
La obtención de este material está reservada al personal médico.

Cantidad de muestras: todas las que el médico crea conveniente; cuanto mayor es la cantidad de
muestras procesadas, mayor es la posibilidad de hallazgo de BAAR.
El LCR debe llegar en envase estéril de 10-15 ml de capacidad y con tapa a rosca de cierre
hermético.
Es conveniente procesar el material inmediatamente o conservarlo a 4º C por no más de 12
horas.
El bacteriólogo (a) debe rotular el medio Ogawa Kudoh con el número consecutivo colocado en
el frasco, nombre, apellidos, documento, fecha de siembre y tipo de muestra.
 Mojar la totalidad del algodón de un escobillón estéril con la muestra.

 Introduzca en el tubo de medio Ogawa Kudoh el escobillón y sembrar con movimientos de
rotación y presión sobre todo el medio.
 Incubar el medio a 37 °C
Líquidos Pleural, Ascítico, Pericárdico, Articular y otros
La obtención de estos materiales está reservada al personal médico. Número de muestras: todas
las que el médico considere conveniente
Envase: estéril, de capacidad adecuada para la cantidad de la muestra
horas.

Sangre
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Cantidad y momento de recolección: dos muestras de 10 ml de sangre venosa en días

consecutivos.
Esterilidad y bioseguridad: utilizar guantes, desinfectar previamente la piel del área donde se
efectuará la extracción con alcohol iodado. Utilizar jeringas con heparina.
Envase: transferir la sangre a un tubo plástico seco estéril con tapa a rosca de cierre hermético.

Pus
Envase: estéril Es preferible no usar hisopos para evitar la desecación. En caso de utilizarlos,
antes de la toma de muestra deben ser humedecidos con solución fisiológica o agua destilada
estéril.
Conservación: La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio
horas.

 Incubar el medio a 37 °C.
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Cultivo positivo para Mycobacterium.

Registro: Libro de Registro Baciloscopia
10.8 Estándar Mcfarland

La densidad de la turbidez del Estándar McFarland deberá ser verificada utilizando un
espectrofotómetro con dirección de luz de 1 cm y cubetas adecuadas para determinar
absorbancia. Para realizar el control de un estándar McFarland de 0.5, la absorbancia deberá
leer entre 0.08 a 0.10 a una longitud de onda de 625 nm.
 La suspensión de Sulfato de Bario deberá transferirse en alícuotas de 4 a 6 ml dentro de
tubos con rosca. Estos tubos deberán guardarse a temperatura ambiente en un lugar
fresco y oscuro.
 Antes de ser usados, los patrones deberán agitarse para una adecuada
homogenización.
 Mensualmente los patrones son descartados y vueltos a preparar, o en su defecto se
debe comprobar su densidad
Nota: para el montaje de paneles de identificación, se cuenta con el equipo DL Turbidimeter,
que determina la escala en este patrón.
10.9 Cultivo de superficies en el ambiente hospitalario .
Los pacientes hospitalizados que presentan afecciones por microorganismos patógenos son
focos potenciales de infección para los demás pacientes y para el personal de salud. La
microbiota bacteriana puede contaminar objetos, dispositivos médicos, superficies y
materiales que ulteriormente entran en contacto con pacientes que presentan algún tipo de
inmunocompromiso y que puedan ser blanco de estos microorganismos oportunistas.
Aunque las superficies no están directamente asociadas con la infección nosocomial, si se

consideran fuente potencial de microorganismos patógenos oportunistas para las manos del
personal que brinda atención a los pacientes .
Según la guía práctica Prevención de las infecciones nosocomiales de la OMS, no se
recomienda pruebas bacteriológicas del medio ambiente, excepto en determinadas
circunstancias, como las siguientes:
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 Investigación de una epidemia, en que hay un presunto foco de infección ambiental

 Actividades de control de calidad al cambiar de prácticas de limpieza
Es importante aclarar que los estudios microbiológicos de superficies ambientales

representan un problema importante de interpretación, especialmente porque no existe
evidencia de que el nivel en particular de contaminación correlacione con el desarrollo de
transmisión o la aparición de infecciones y en la actualidad no existen niveles de
contaminación máxima normalizados para los ambientes hospitalarios
Con el fin de evaluar y verificar la eficacia del proceso de limpieza y desinfección de las
áreas asistencias del Hospital San José del Guaviare y tomar las medidas necesarias para
impedir la formación de reservorios, se implementa el procedimiento para la realización de
cultivos de superficies, donde un resultado óptimo del proceso de limpieza y desinfección
debe ser el no aislamiento de microorganismos, lo que se evidencia en el resultado negativo
de los medios de cultivo a las 48 horas de incubación.
Cuidados y recomendaciones
 Utilizar escobillones estériles, verificar la vigencia y esterilidad del caldo y medios de
cultivo.
 Las muestras deben ser recolectadas con elementos de protección como guantes,
tapabocas, gorro y bata.
 Realizar la toma de muestras después del proceso de limpieza y desinfección.
 En caso de ser recolectadas por evento de brote por infecciones intrahospitalarias, se
recomienda recolectarlas antes de la limpieza y desinfección.
Técnica de Recolección: Cualitativa

Fundamento: Consiste en frotar sobre un área conocida de las superficies a muestrear,
hisopos estériles humedecidos con caldo de cultivo BHI estéril y rotar luego los mismos sobre
placas de Agar Sangre, Agar EMB y Mac Conkey.
Materiales:
 Mechero
 Tubos con caldo de cultivo(BHI)
 Escobillones estériles
 Medios de cultivo (Agar sangre, Agar Mac Conkey, Agar EMB)
Superficies a muestrear:
Superficies Inertes: mesas, manijas, contactos eléctricos, camas, superficies húmedas (Lava
manos), pisos.
Superficies vivas: manos del personal (palma, dorso y uñas)
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Toma de muestra a Superficies Inertes – Técnica cualitativa: Hisopado y siembra directa.

Con un escobillón estéril humedecido en caldo de cultivo BHI estéril, tomar la muestra
rotándolo sobre sí mismo, recorriendo la superficie a analizar. Luego pasar al medio de
cultivo directamente y realizar siembra masiva, después introducir el escobillón al caldo de
cultivo BHI para incubarlo y luego repicar en medios de cultivo
Toma de muestra a Superficies Vivas – Técnica cualitativa: Hisopado y siembra directa.
rotándolo sobre sí mismo, frotar la palma de la mano, teniendo especial cuidado entre los
dedos y las uñas. Luego pasar al medio de cultivo directamente y realizar siembra masiva,
después introducir el escobillón al caldo de cultivo BHI para incubarlo y luego repicar en
medios de cultivo.
Realizar muestreos a aquellos objetos señalados presuntamente como reservorios; definida
como “toda superficie, instalación, equipo, objeto que alberga una concentración de
bacterias.
Tener en cuenta según el área los equipos y objetos a tomar muestra:
AREA EQUIPO Y OBJETOS (Puntos

críticos)
Cirugía Pared, pisos, camilla,
Unidad Materno Infantil Pared, pisos, camilla,
Hospitalización Barandas camilla, mesa,

colchoneta.
Pediatría Pared, pisos, camilla,
Urgencias Pared, pisos, camilla,
Transporte: llevar en cava al laboratorio clínico los primeros 30 minutos de la recolección.
Cronograma:
Con el propósito de dar inicio al proceso de evaluación de la efectividad del proceso de
Limpieza y desinfección en las área asistenciales de la E.S.E Hospital San José del
Guaviare, se implementa comenzar con Periodicidad mensual y de acuerdo a los resultados
obtenidos se establece la Periodicidad en comité de Infecciones.
Periodicidad Resultado
Mensual Resultados positivos para cualquier

microorganismo
Semestral Resultado Negativo de 3 tomas consecutivas.
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Análisis:
El bacteriólogo encargado realizará los ensayos concernientes analizando los medios de

cultivos inoculados, y teniendo en cuenta el tipo de crecimiento presentes en éstos,
procederá a realizar los diferentes estudios necesarios para llegar a la identificación final del
o los microorganismos presentes en el área analizada. (Ver punto 5.6.3: identificación
bacteriana).
Resultados:
El área de coordinación del Laboratorio Clínico realiza entrega de la información obtenida de
las muestras tomadas y analizadas.
10.10 Estudio microbiológico de residuos hospitalarios y similares

Los residuos sólidos hospitalarios y similares incluyen un componente importante de
residuos comunes y una pequeña proporción de residuos peligrosos (biocontaminados y
especiales), que pueden representar fuentes importantes de infección tanto para los
pacientes como para el personal que labora dentro de un entorno hospitalario, por lo tanto,
es de suma importancia realizar un análisis de los microorganismos que pueden estar
presentes en este tipo de residuos y elementos para tomar medidas correctivas que
disminuyan el impacto que pueden generar en todos los integrantes de la institución.
En el laboratorio clínico del hospital San José del Guaviare se realiza un estudio anual de los
microorganismos presentes en los carros recolectores de residuos (verde y rojo), las caretas
y guantes del personal encargado de la recolección de los residuos y las manos de éstos,
con el fin de evaluar y determinar las condiciones de esterilidad en estos elementos.
Técnica de Recolección: Cualitativa

Fundamento: Consiste en frotar sobre un área conocida de las superficies a muestrear,
hisopos estériles humedecidos con caldo de cultivo BHI estéril y rotar luego los mismos sobre
placas de Agar Sangre, Agar EMB y Mac Conkey.
Materiales:
 Mechero
 Tubos con caldo de cultivo(BHI)
 Escobillones estériles
 Medios de cultivo (Agar sangre, Agar Mac Conkey, Agar EMB
Superficies a muestrear:
Superficies Inertes: carros recolectores de residuos, careta y guantes del personal encargado
de la recolección de los residuos.
Superficies vivas: manos del personal (palma, dorso y uñas)
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Toma de muestra a Superficies Inertes – Técnica cualitativa: Hisopado y siembra directa.

rotándolo sobre sí mismo, recorriendo la superficie a analizar. Luego pasar al medio de
cultivo directamente y realizar siembra masiva, después introducir el escobillón al caldo de
cultivo BHI para incubarlo y luego repicar en medios de cultivo.
Toma de muestra a Superficies Vivas – Técnica cualitativa: Hisopado y siembra directa.

rotándolo sobre sí mismo, frotar la palma de la mano, teniendo especial cuidado entre los
dedos y las uñas. Luego pasar al medio de cultivo directamente y realizar siembra masiva,
después introducir el escobillón al caldo de cultivo BHI para incubarlo y luego repicar en
medios de cultivo.
Realizar muestreos a aquellos objetos señalados presuntamente como reservorios; definida
como “toda superficie, instalación, equipo, objeto que alberga una concentración de
bacterias.
Transporte: llevar en cava al laboratorio clínico los primeros 30 minutos de la recolección.
Cronograma:
Dando cumplimiento con la normatividad vigente en gestión ambiental, este estudio se
realizará de manera anual.
Análisis:
El bacteriólogo encargado realizará las pruebas concernientes analizando los medios de
cultivos inoculados, y teniendo en cuenta el tipo de crecimiento presentes en éstos,
procederá a realizar los diferentes estudios necesarios para llegar a la identificación final del
o los microorganismos presentes en el área analizada. (Ver punto 5.6.3: identificación
bacteriana).
Resultados:
El área de coordinación del Laboratorio Clínico realiza entrega de la información obtenida de

las muestras tomadas y analizadas al área de Copass mediante oficio.
10.11 Preparación medios de cultivo
En el laboratorio clínico del Hospital San José del Guaviare, la realización de medios de
cultivo será llevada a cabo por el personal auxiliar. A continuación, se presentan los medios
de cultivo y el procedimiento general para la realización de estos:
Medio de cultivo Procedimiento de preparación
Agar sangre Suspender 19.75 gramos en 500 ml de

El agar sangre es un medio enriquecido y agua destilada.
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diferencial utilizado para el aislamiento y Calentar a ebullición para disolver el medio

cultivo de una amplia variedad de por completo.
microorganismos, principalmente de Esterilizar en autoclave 15 libras de presión
bacterias exigentes (121 ° C) por 25 minutos.
Enfriar a 45-50 ° C y agregar
asépticamente un 7% v / v de sangre
desfibrinada estéril. Mezclar bien y verter en
placas de Petri estériles.
Nota: por cada 200 ml del agar preparado,

se sirve aproximadamente el medio en 25
cajas de Petri estéril.
Para preparar volúmenes inferiores a 500

ml, se aplica una regla de 3 para determinar
el gramaje correcto.
Ejemplo, si se desean hacer 400 ml,
multiplicar 400 x 19.75 y este resultado se
divide entre 500, así:
Obteniendo que, para preparar 400 ml del

agar, se deben pesar y servir 16 gramos del
medio de cultivo.
Esta forma aplica para la preparación de
todos los medios realizados en el
laboratorio.
Agar chocolate Suspender 19.75 gramos en 500 ml de

El agar chocolate es un medio enriquecido, agua destilada. Calentar a ebullición para
particularmente recomendado para el disolver el medio por completo.
crecimiento de cepas exigentes de Esterilizar en autoclave 15 libras de presión
Haemophilus spp., Neisseria spp., y (121 ° C) por 25 minutos.
Streptococcus pneumoniae. Agregar complemento Vitox y agregar
asépticamente un 7% v / v de sangre
desfibrinada estéril.
Mezclar bien y verter en placas de Petri
estériles.
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Agar MacConkey
Suspender 50.03 gramos de medio
El agar MacConkey se recomienda para el deshidratado en 1000 ml de agua purificada
aislamiento selectivo de Escherichia coli y / destilada.
también se recomienda para el aislamiento Calentar a ebullición para disolver el medio
selectivo y la diferenciación de bacterias completamente.
entéricas fermentadoras de lactosa y de Esterilizar en autoclave a una presión de 15
libras (121 ° C) durante 25 minutos. Evitar el
exceso de calor. Enfriar a 45-50 ° C.
Mezclar bien antes de verter en placas de
Petri estériles. La superficie del medio debe
estar seca cuando se inocula.

aquellas que no fermentan este azúcar.
Agar EMB Suspender 37.46 gramos en 1000 ml de

El agar EMB (Eosin Methylene Blue Agar) agua destilada.
se recomienda para el aislamiento y la Mezclar hasta que la suspensión sea
diferenciación de las bacterias Gram uniforme. Calentar a ebullición para disolver
negativos en diferentes muestras clínicas. el medio completamente.
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Esterilizar en autoclave a 15 Libras de

presión (121 ° C) durante 25 minutos. Evitar
el exceso de calor.
Enfriar a 45-50 ° C y Agite el medio para
oxidar el azul de metileno (es decir, para
restaurar su color azul) y suspender el
precipitado floculante.

Agar XLD Suspender 56.68 gramos en 1000 ml de

agua destilada. Calentar con agitación
El Agar deoxicolato de xilosa-lisina (Agar frecuente hasta que hierva el medio.
XLD) es un medio selectivo recomendado NO HAGA AUTOCLAVE O SOBRETENSO.
para el aislamiento y la enumeración de Transferir inmediatamente a un baño de
Salmonella typhi y otras especies de agua a 45 - 50 ° C.
Salmonella de muestras clínicas y no Después de enfriar, verter en placas de
clínicas. Petri estériles.
Es aconsejable no preparar grandes
volúmenes que requieran un calentamiento
prolongado, produciendo así un precipitado.

Suspender 76.67 gramos en 1000 ml de

agua destilada.
Agar Hektoen Calentar a ebullición para disolver el medio
por completo.
Hektoen Enteric Agar es un medio selectivo NO AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50 ° C.
diferencial utilizado para el aislamiento de Mezclar bien y verter en placas de Petri
especies de Shigella y Salmonella de estériles.
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especímenes patológicos entéricos.

Medio BHI Suspender 37.0 gramos en 1000 ml de

Este medio es de enriquecimiento y se agua destilada.
utiliza para el cultivo de bacterias Dispensar en botellas o tubos y esterilizar
nutricionalmente exigentes. en autoclave a 15ºC Libras de presión (121
° C) durante 25 minutos.
Para obtener los mejores resultados, el
medio debe utilizarse el día en que se
prepara, de lo contrario,
Debe hervirse o cocerse al vapor durante
unos minutos y luego enfriarse antes de
usar.
Servir 3 ml en tubos tapa rosca estériles.
Medio Selenito Suspender 19.01 gramos en 1000 ml de

Se recomienda como medio de agua destilada.
enriquecimiento selectivo para Salmonella y Añadir 4 gramos de hidrógeno de sodio
posiblemente Shigella sonnei a partir de selenito (M1079B).
heces, orina, agua y Calentar para disolver el medio
productos alimenticios. completamente Distribuir en probetas
estériles.
Esterilizar en un baño de agua hirviendo o
con vapor que fluye libremente durante 10
minutos.
NO AUTOCLAVE. El calentamiento
excesivo es perjudicial. Desechar el medio
preparado si se reduce la cantidad de
selenita. (Indicado por un precipitado rojo en
el fondo del tubo / botella).
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Servir 3 ml del medio en tubos tapa rosca

estéril.
Agar Mueller Hinton

Suspender 38 gramos del polvo en 1 litro de
Medio utilizado en el procedimiento de agua purificada.
difusión en disco estandarizado para la Mezclar bien, calentar agitando
determinación de la sensibilidad de cepas frecuentemente y hervir durante 1 minuto
aisladas a partir de muestras clínicas de para disolver completamente el polvo.
organismos aerobios de rápido crecimiento Autoclavar a 121° C durante 25 minutos, no
ante agentes antimicrobianos. caliente en forma excesiva.
Agregar en cajas de Petri estériles.

Agar Sabouraud
Suspender 65.05 gramos en 1000 ml de
agua destilada.
Recomendado para el cultivo selectivo de Calentar a ebullición para disolver el medio
levaduras y mohos. por completo.
Esterilizar por Autoclavado a 15 libras de
presión (121 ° C) durante 25 minutos.
Enfriar a 45-50 ° C. Mezclar bien y verter en
placas de Petri estériles.
Precaución: algunos hongos patógenos

pueden producir esporas infecciosas que se
dispersan fácilmente en el aire, por lo que el
examen debe ser realizado en gabinete de
seguridad.

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10.11.1 Almacenamiento y vida útil
Almacenar las cajas de Petri en un lugar oscuro, a una temperatura de 2 a 4 °C evitando la

congelación y el sobrecalentamiento. Los medios deben utilizarse antes de la fecha de
caducidad descrita en la etiqueta del envase.
10.11. 2 Controles calidad de medios preparados
Cada vez que se preparan los medios de cultivo se debe dejar una caja para realizar el
control de calidad de esterilidad (crecimiento), a este control se le debe realizar lectura a las
24 y 48 horas. Se debe dejar otra caja del medio preparado para realizar el control de
selectividad, para este control, el bacteriólogo/a encargado debe realizar la siembra en el
medio con el respectivo microorganismo. A continuación se describe el medio de cultivo y la
cepa del microorganismo que se debe sembrar:
Agar sangre: Staphylococcus aureus.
Agar MacConkey: Pseudomonas aeruginosa.
Agar EMB: Escherichia coli.
A las 24 horas debe realizarse de igual forma un Gram. Ver manual control de calidad
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COLORACIONES
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11. COLORACIONES
11.1 Coloración Wright: Extendidos de Sangre Periférica (incluye para lectura

hemoparásitos) y Frotis para diagnóstico de Leishmaniasis
 Colocar el frotis sobre la gradilla de coloración, aplicar aproximadamente 2.5 ml de

colorante de Wright sobre el extendido. Cantidad insuficiente de colorante produce
coloraciones acidas y el exceso coloraciones básicas.
 Adicionar ágilmente gota a gota y con movimiento de zig-zag, el líquido de contraste
(agua destilada) obteniendo una mezcla homogénea
 Soplar hasta la aparición de escarcha o película delgada de apariencia metálica
verdosa.
 Cronometrar el tiempo de acuerdo a lo estandarizado (10 minutos). Tiempos mayores
o menores afectan la coloración, por eso se recomienda no hacer tandas de mas de10
laminas.
 Lavar con agua de chorro. Un lavado insuficiente genera coloraciones básicas y
precipitadas de colorante.
 Limpie por debajo el exceso de colorante, poner a escurrir inmediatamente en posición
vertical y deje secar rápido. Un secado lento trae como consecuencia coloraciones
acidas.
11.2 Coloración de Romanowsky modificada para Gota Gruesa
Esta coloración se aplica a la gota gruesa. La coloración de Romanowsky modificada está

compuesta por cuatro soluciones:
 Azul de metileno fosfatado: utilizado para la pre coloración

 Solución A de Romanowsky modificado: tiñe el citoplasma de azul.
 Solución B de Romanowsky modificado: tiñe el núcleo de rojo.
 Solución fosfatada o buffer: es el diluyente de la solución de coloración y consiste en
una solución fosfatada de pH: 7,2 la cual permite observar las estructuras celulares y
los tonos de la coloración apropiadamente.
Procedimiento de la coloración Romanowsky modificada
Precoloración:
 Sumergir en azul de metileno de 2 segundos
 Retirar el exceso de azul de metileno escurriendo en un papel absorbente.
Enjuague:
 Realizar enjuague por inmersión en agua destilada o desionizada (un segundo).

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 Escurrir en un papel absorbente

 Colocar la lámina en la lámina cóncava nuevamente con la muestra hacía la
concavidad mientras prepara la solución de coloración.
Coloración:
 Medir 3 mL de solución fosfatada a la cual se adiciona una gota de solución A y una

de solución B.
 Servir en un tubo con tapa rosca y mezclar por inversión suavemente.
 El tiempo de coloración es de 10 minutos
Enjuague:
Este enjugue es opcional, si nota que la lámina está libre de excesos de coloración omita
este paso y deje escurrir directamente en el soporte o en posición inclinada. Si es necesario
realizar enjuague por inmersión en buffer fosfato o agua desionizada (un segundo) y deje
escurrir en el soporte.
Otra opción de Coloración:
Cuando existe la necesidad de colorear una gota gruesa y no se dispone de la coloración de

Romanowsky modificada, se procede a utilizar el método de Walker que consiste en el uso
del Giemsa como colorante o en su defecto la gota gruesa también puede ser coloreada con
colorante de Wright en la misma proporción que se indica con el Giemsa.
Método de Walker
 Se debe dejar secar completamente la gota gruesa y/o el extendido. Posteriormente,

se fija con alcohol metílico. Se deja secar nuevamente.
 Precoloración: se realiza igual como se indicó para Romanowsky modificado, es decir
por inmersión en azul de metileno fosfatado por tres segundos.
 Enjuague: realice un enjuague por inmersión en buffer fosfato (un segundo).
 Coloración con Giemsa al 10%: se hace una dilución así:
 A partir del colorante de Giemsa filtrado, se mide 1mL de colorante y se diluye en 9 mL
de solución buffer fosfatado pH: 7,2, para obtener la solución de trabajo. Se mezcla
por inversión suavemente. No se debe olvidar estandarizar el tiempo de coloración.
 La proporción también se logra midiendo 3 mL de buffer y adicionando 3 gotas de
colorante de Giemsa previamente filtrado. Por cada lámina a colorear se preparan 3
mL de solución.
 Siempre use la lámina cóncava para que el precipitado quede en la concavidad de la
misma y no sobre la muestra
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 Colocar la lámina sobre la lámina cóncava con la muestra hacia la concavidad,

adicione la solución de solución colorante diluida o solución de trabajo y deje actuar
por el tiempo estandarizado que generalmente es de 10 minutos.
 Enjuague: es opcional. realice un enjuague por inmersión en buffer fosfato (un
segundo). Deje secar en un soporte para este fin.
Nota: el colorante de Giemsa por ser una solución alcohólica, se debe proteger de
elementos acuosos que haga que se precipite. La solución madre de Giemsa debe
preservarse en un frasco que impida el paso de la luz y de tenga tapa de cierre hermético
para impedir que la humedad ambiental lo afecte. Adicionalmente, la dilución de Giemsa
en buffer que es utilizada como solución de trabajo se debe preparar inmediatamente
antes de su uso.
 La gota gruesa también puede ser coloreada con colorante de Wright en la misma
proporción que se indica con el Giemsa.
Principales errores en la coloración de la Gota Gruesa

11.3 Coloración de Ziehl Neelsen
 Coloración principal: fucsina 5 minutos.

**Para baciloscopias de lepra, la fuscina debe dejarse por 10 minutos.
 Decoloración: alcohol ácido 3 min
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 Coloración de contraste: azul de metileno 1 min

 D
ej
ar
secar a temperatura ambiente
11.4 Coloración de GRAM
 Cristal Violeta: 1 Minuto

 Lugol de Gram: 1 Minuto
 Alcohol Cetona: 30 segundos
 Fuschina: 45 segundos
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11.5 Estandarización de la Coloración
La estandarización de la coloración es parte del control de calidad interno que se realiza para
garantizar coloraciones óptimas y se realiza cuando se cambia de lote en uno de los
componentes de la coloración.
Coloración de Gram
Se realiza frotis de las 3 cepas de control de calidad: Staphylococus aureus, Escherichia coli
y Pseudomonas aeruginosa, las cuales son sometidas a diferentes tiempos de tinción de
cada uno de los cuatro colorantes que componen el Gram. Una vez coloreadas y secas, el
bacteriólogo (a) realiza lectura en el microscopio objetivo 100x para verificar las
características morfológicas y tintoriales de cada una de las cepas.
Las cepas de Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa deben observarse color rosado
(Gram negativos), mientras que la cepa de Staphlylococcus aureus debe observarse color
morado (Gram positivo). La coloración óptima fue obtenida con los siguientes tiempos para
cada colorante: Cristal Violeta 1 Minuto, Lugol de Gram 1 Minuto, Alcohol Cetona 30
segundos y Fuschina. 45 segundos
Coloración de Gota Gruesa
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En el laboratorio clínico se realiza el proceso con sangre negativa debido a que el tiempo
indicado lo dan las plaquetas. Por lo tanto, la auxiliar de laboratorio procede a realizar 3
láminas de gotas gruesas negativas, las cuales se secan y se colorean a los 8 y 10 minutos.
La bacterióloga (o) observa y analiza la coloración de las láminas realizadas. La coloración

óptima será aquella en la cual las plaquetas se observen bien teñidas, pero que se observen
“coposas o esponjosas”, es decir, con un fino punteado y en ocasiones se pueden observar
sus prolongaciones. La coloración que aún no tiene el tiempo indicado se evidencia con la
presencia de plaquetas teñidas, pero con aspecto liso. Se ha de tener precaución con la
presencia de precipitado el cual es un factor indeseable.
La coloración óptima fue obtenida a los 10 minutos, por ello se establece este tiempo de
coloración.
Coloración de Wright
En el laboratorio clínico se realiza el proceso con sangre anticoagulada. Por lo tanto, la

auxiliar de laboratorio procede a realizar 3 láminas, las cuales se secan y se colorean a los
5,8 y 10 minutos.
La bacterióloga (o) observa y analiza la coloración de las láminas realizadas. La coloración
óptima será aquella en la cual:
 Los eritrocitos se observarán de color rosado

 Los citoplasmas de los monocitos presentarán una tonalidad azul grisácea con gránulo
rojizos bastante finos y sus vacuolas características.
 El citoplasma de los linfocitos presentará varias tonalidades azules.
 Los núcleos de los linfocitos y neutrófilos aparecerán de color púrpura oscuro. Los
núcleos de los monocitos de color púrpura algo más claros (lila).
 Los gránulos de los eosinófilos son de color rojo-anaranjado intenso.
 Los gránulos de los basófilos púrpura azulado muy oscuro.
 Los gránulos de los neutrófilos se aprecian de color lila, bastante finos.
 Las plaquetas toman coloración violeta o púrpura.
Responsable: Bacteriólogo (a) del área de Microbiología

Reporte Resultado: Ver Anexo 4.0
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REPORTE DE RESULTADOS
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12. REPORTE DE RESULTADOS

Reporte de Resultados Intrahospitalario:
Lo realiza la bacterióloga (o) mediante el software Dinámica, utilizando las plantillas
establecidas para cada examen. (VER ANEXO 6)
Consulta Externa:
Lo realiza la bacterióloga (o) y existen tres formas:
Software institucional Dinámica gerencial: la bacterióloga valida los resultados mediante

el software dinámica a cada paciente. La auxiliar de laboratorio imprime los resultados del
paciente cuando se reclamen en el área de recepción de muestras de consulta externa.
Software Lysis: la bacterióloga (o) valida los resultados mediante la interfase del software a
cada paciente. La auxiliar de laboratorio imprime los resultados del paciente cuando se
reclamen en el área de recepción de muestras de consulta externa.
Formato Reporte de Resultados Consulta Externa (Excel): La bacterióloga (o) valida e
imprime los resultados mediante el formato correspondiente en Excel y los entrega firmados
a la auxiliar del área de recepción de muestras para ser archivados.
Los formatos se encuentran en los computadores del área de química y recepción de
muestras intrahospitalaria.
Corrección de Errores de Transcripción:
Cuando se presente error al transcribir un resultado en el software Dinámica, la bacterióloga
(o) debe realizar la corrección del resultado en medio físico e imprimir copia para el recibido
por parte del médico o jefe a cargo del paciente. Debe reposar en la historia clínica la
corrección del resultado.
Validación y verificación de Resultados:
Todos los resultados inesperados requieren confirmación independientemente de si caen
dentro o fuera del intervalo de referencia. Un resultado inesperado puede sospecharse a
partir de la información clínica que tiene el laboratorio acerca de un paciente o de los
resultados de otras cantidades medidas en el mismo paciente en la misma fecha o el
resultado de la misma cantidad medida en fechas anteriores.
La confirmación de un resultado puede llevarse a cabo por repetición de la medición
realizada en la muestra. Si todavía existe duda se procesa una nueva muestra.
En el laboratorio clínico HSJG se realiza revisión de resultados de la historia clínica en el

sistema dinámica, revisión del diagnóstico clínico en la orden médica con el fin de
correlacionar los resultados antes de generar el reporte.
Si se observan valores fuera del valor de referencia o dato crítico en los resultados de las
pruebas realizadas a los pacientes, se realiza verificación por duplicado del análisis,
verificación nuevamente del control de calidad interno, se habla con el médico a cargo del
paciente, si el caso lo amerita se solicita nueva muestra.
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Después de realizar este proceso se reporta el resultado y se escribe nota al final del reporte.
Notas establecidas:
 Se observa variación en el recuento de ___________ respecto al cuadro hemático
anterior. Se sugiere verificar en nueva muestra.
 Dato verificado en nueva muestra y validación con control de calidad interno.
12.1 Descripción reporte de resultados
 Cuadro Hemático Manual
Reportar:
Hematocrito en %
Recuento de Leucocitos: leucocitos /mm³
Recuento manual de plaquetas: plaquetas/mm³
Recuento Diferencial de Leucocitos en lámina: Reportar en porcentaje el recuento de cada
célula.
 El Extendido de Sangre Periférica debe incluir:
Estimado cuantitativo de leucocitos
Diferencial leucocitario
Estimado de Plaquetas
Rasgos morfológicos de las líneas celulares
Distribución de hematíes y plaquetas
Línea Roja reportar:
Anisocitosis: Normal, ligera, modedarada, marcada
Poiquilocitosis: Normal, ligera, modedarada, marcada
Policromatofilia: Normal, ligera, modedarada, marcada
Hipocromia: Normal, ligera, modedarada, marcada
Inclusiones: Normal, ligera, moderada, marcada
Rouleaux: +, ++, +++.
Serie Blanca reportar:
Glóbulos blancos normales, aumentados o disminuidos en número
Inclusiones o si se observan Blastos.
Serie Plaquetaria reportar:
Número: normal, disminuidas o aumentadas
Morfología: Normales, Macroplaquetas.
Agregados plaquetarios: escasos, moderados, abundantes.
 Reticulocitos
Se reporta en porcentaje
 Recuento de Eosinófilos en Moco Nasal
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Informar % de células encontrados en cada fosa nasal.

 Velocidad de Sedimentación Globular
Informar el valor obtenido en mm/hora
 Gota Gruesa
Informar: Género, especie y recuento
Positivo para Plasmodium falciparum:
# de formas asexuadas /μL de sangre o # de trofozoitos/μL de sangre y reportar la presencia
de gametocitos.
Positivo para Plasmodium vivax: # de parásitos /ul de sangre

 Reporte de Resultados de Parcial de Orina
La bacterióloga realiza el reporte de resultados intrahospitalarios por medio del software
Dinámica, los resultados de Consulta Externa en el formato Reporte de Resultados, los
cuales son recibidos y archivados por la auxiliar encargada del área de Recepción de
muestras.
Análisis Físico:
Aspecto: En la orina el aspecto varía así: Claro, Ligeramente turbio, Turbio.
Color: Se informa según el color de la orina: Incoloro, Amarillo claro, Amarillo oscuro,
Ámbar, Verdoso, Anaranjado, Marrón, Rojo.
Análisis Químico:
 pH: El valor promedio se encuentra alrededor de 5 y 6.
 Proteínas: Pequeñas cantidades pueden detectarse en individuos sanos;
normalmente es negativa.
 Proteínas de 24 horas: En adultos es menor de 150 mg/24 horas, en niños es menor
de 100 mg/24 horas.
 Glucosa: Por lo general no existe glucosa en la orina hasta que el nivel en sangre no
supera los 180 mg/dl (umbral renal normal para la glucosa). A veces pequeñas
cantidades no significativas pueden detectarse en orinas normales.
 Cetonas: Normalmente no debe existir en orinas.
 Sangre: Normalmente no existe sangre ni hemoglobina en orina.
 Bilirrubinas: No debe existir en orinas normales.
 Urobilinógeno: los límites normales varían de 0.2 a 1.0 mg/dl.
 Nitritos: Normalmente son negativos, más sin embargo un resultado negativo nunca
debe interpretarse como indicador de ausencia de infección bacteriana.
 Esterasa Leucocitaria: Se considera normal entre 1 a 3 leucocitos/ul.
Análisis Microscópico:
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 Eritrocitos – Leucocitos – Células: Se informan número por campo. (se hace un

promedio de las estructuras observadas en 10 campos microscópicos, con objetivo de
40X).
 Cilindros: se informan número por campo de bajo poder (10x) si son muchos y
número por preparación si son pocos.
 Cristales - Bacterias – Moco – Levaduras: Se informan por cruces.
 Espermatozoides: En orinas masculinas se informan número por campo, en orinas
femeninas se informa como contaminación de flujo vaginal.
 Parásitos: Se reportan como presencia.
Valores de Referencia
Análisis físico:
Aspecto: La orina normal habitualmente es clara.
Color: Puede variar de un amarillo pálido a un ámbar oscuro.
Densidad:
Recién nacidos (primeros días): 1.012
Lactantes: 1.002-1.006
Adultos: 1.001-1.035
Adultos con ingestión normal de líquidos: 1.016 -1.022
Orina de 24 horas: 1,015 -1,025.
 Eritrocitos: Se pueden observar aprox. 0 – 2 hematíes por campo.
 Leucocitos: Pueden detectarse hasta 5 leucocitos por campo.
 Células Epiteliales: Las células tubulares renales y las células de transición pueden
existir normalmente en número reducido; las células escamosas poseen escaso
significado diagnóstico; los cuerpos ovales grasos no deben encontrarse en orina, su
presencia sugiere la existencia de algún trastorno.
 Cilindros: En orinas normales pueden encontrarse cilindros hialinos en pequeñas
cantidades, la presencia de otros tipos de cilindros es considerada patológico.
 Cristales: Por lo general no se encuentran cristales en la orina recién emitida sin
embargo la presencia en pequeñas cantidades de algunos cristales no es considerada
patológico.
 Bacterias – moco: Normales en pequeñas cantidades.
 Reporte de Coprológico
El examen coprológico se informa:
Análisis Físico: Color, Consistencia
No se observan parásitos intestinales o Informando las formas y los nombres de los parásitos
observados.
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Otras estructuras:
Leucocitos - eritrocitos: se informan número por campo
Almidones (amilorrea) – grasas neutras (esteatorrea) – fibras musculares (creatorrea): se
informa por cruces.
Levaduras: se deben informar además los pseudomicelios e hifas si se encuentran
presentes; se informan por cruces.
Densidad bacteriana: se informa normal, disminuida o aumentada.
 Reporte de Coproscópico
El examen coproscópico se informa:
Análisis Físico: Color, Consistencia

Análisis Químico: pH, Azúcares Reductores, Sangre Oculta
No se observan parásitos intestinales o informando el nombre del parásito observado,
reportándolo en cruces.
Para el caso del protozoo Blastocystis spp (Antes Blastocystis hominis) no es necesario
reportar en cruces, pues su cantidad no se relaciona directamente con la sintomatología
presentada por las personas.
Otras estructuras:
Leucocitos - eritrocitos: se informan número por campo
Almidones (amilorrea) – grasas neutras (esteatorrea) – fibras musculares (creatorrea): se
informa por cruces.
Levaduras: se deben informar además los pseudomicelios e hifas si se encuentran
presentes; se informan por cruces.
Flora bacteriana: se informa normal, disminuida o aumentada.
 Reporte de Resultados de KOH
Informar
KOH: Negativo, no se observan estructuras micóticas
KOH: Positivo, se observan Hifas septadas, levaduras o micelios según corresponda.
 Reporte de Resultados de Examen Directo Fresco de Cualquier Muestra

Informar:
Morfología bacteriana
Reacción Leucocitaria
 Reporte de Resultados de Examen Frotis Flujo vaginal y Uretral
Informar:
Morfología bacteriana y micótica
Reacción Leucocitaria
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 Reporte de Resultados de Líquidos Estériles
Examen Físico
Liquido
Color
Aspecto
pH
Coagulo
Viscosidad
Examen Químico
Glucosa
Proteínas Totales
Examen Fresco
Leucocitos
Hematíes
Bacterias
Cel Epiteliales
Examen Microbiología
Bacterias
Recuento Leucocitario
Test- Mucina
 Informe de los resultados Recuento de Addis
Parámetros Resultados
Volumen: mL.
pH:
Densidad:
DM: ml/min.
Elementos por minutos.
Leucocitos: / min.
Hematíes: e / min.
Cilindros: e / min.
Proteínas: mg
 Recuento de Hamburguer
Número de elementos x minuto
Cuando no hay elementos se informa:
No se observan elementos.
 Reporte de resultados Células LE
Reporta como positivo si se observan dos o más células LE.

Reporta como negativo si no se observan dichas células.
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 Prueba de Ciclaje – Drepanocitos

Reporta como positivo si se observan drepanocitos
Reporta como negativo si no se observan drepanocitos
 Reporte Prueba Cruzada de Cirugía Programada
Rastreo De Anticuerpos Irregulares:

Prueba De Compatibilidad - Cruzada Mayor:
Numero Sello De Calidad:
 Reporte Espermograma:
VOLUMEN: VR: 2-6 ml

ASPECTO:
COLOR:
PH: VR: 7,2-7,8
VISCOSIDAD:
LICUEFACCIÓN: MINUTOS VR: 15-30 MINUTOS
RECUENTO: Espermatozoides /ml VR: > 20.000.000/ml
Espermatozoides Eyaculados VR: > 40.000.000
VITALIDAD:
VIVOS: %
MUERTOS: %
MOVILIDAD:
INMOVIL: %
INSITU: %
LENTO: %
RAPIDO: %
MORFOLOGÍA:
NORMAL: %
MACROCEFALO: %
MICROCEFALO: %
PIRIFORME: %
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BICEFALO: %
AFLAGELADOS %
PUNTIFORME: %
OTROS:
13. DOCUMENTOS DE REFERENCIA
 Tamizaje de TSH Neonatal “Hipotiroidismo Congénito” Instituto Nacional de Salud.

http://www.ins.gov.co/tramites-y-servicios/programas-de-calidad/TSH
%20Neonatal/Tamizaje%20Neonatal%20de%20Hipotiroidismo%20Cong%C3%A9nito.pdf
 http://www.ins.gov.co/tramites-y-servicios/programas-de-
calidad/SiteAssets/Paginas/prueba-de-idoneidad-en-serologia-de-sifilis-piss/PROTOCOLO
%20EED-SS%202016.pdf
 Insertos técnicas
 Manual de instrucciones Murex HIV-1-2. Diasorin.
 Manual para el diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis. Organización Panamericana
de la Salud.2008
 Ordoñez Smith de Danies Margaret. Guías prácticas para los laboratorios de
bacteriología clínica. Editorial Panamericana. 2014. Bogotá D.C
 METROSALUD. Manual de procedimientos uroanálisis. Laboratorio de referencia. 2001.
 UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA. Guía de bioquímica. UCMC.
Facultad de ciencias de la salud.1999.
 BALCELLS ALFONSO. La clínica y el laboratorio, 17 edición. Masson S.A. 1997.
Barcelona España.
 LYNCH MJ, RAPHAEL SS, MELLOR LD. Métodos de laboratorio. 2ª edición. Editorial
Interamericana, 1996: vol. 1: 104-116. México
 STRASINGER SK. Líquidos corporales y análisis de orina. Editorial El Manual Moderno,
1991: 1-195. México.
 GÓMEZ, CASAS. Interpretación clínica del laboratorio. 8va. Edición. Editorial
panamericana 2012. Colombia.
 CARR, RODAK. Atlas de Hematología clínica. 3ra. Edición. Editorial panamericana 2012.
Colombia.
 STRASINGER. DI LORENZO. Análisis de orina y líquidos corporales. 5ta. Edición.
Editorial panamericana 2010. Colombia.
14. LISTA DE DISTRIBUCIÓN
 Gerencia
COPIA CONTROLADA

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 Subgerencia Científica-Técnica
 Laboratorio Clínico – Socialización
CONTROL DE REVISIONES Y CAMBIOS DEL DOCUMENTO
ELABORÓ REVISO APROBO
Alexandra Bonilla Pérez Jorge Enrique Duarte

Coordinadora Laboratorio Subgerente de Servicio de Cesar Jaramillo Martínez.
Clínico Salud Representante de la
Alta Dirección
Tannia L. Montañez
Profesional de Calidad
FECHA DE REVISIONDESCRIPCION GENERAL DEL

VERSION
O ACTUALIZACION CAMBIO REALIZADO
01 24/05/2016 Creación del documento
05/12/2018 Se modifica la definición de hipocromía. Se agrega
microcentrifuga en materiales para realización de
hematocrito.
02 Cambia valor de multiplicación para determinar número de
plaquetas/ mm3 (DE 15,000 A 21,000), Se agrega
búsqueda con objetivo de 40 x en extendidos de sangre
periférica. Se define valor de 150,000 para confirmación
de plaquetas, se adiciona en poiquilocitosis: estomatocito,
dianocito, estomatocito, knizocito. Se define la
composición de cada tipo de inclusión eritrocitaria. Se
adiciona el parásito T. Cruzi, hongos y bacterias. Se
agrega definición de knizocito. Se agrega definición de
GOTA GRUESA. Reporte de espermatozoides solo en
hombres. Se cambia la palabra flora por microbiota. Se
incluye registro de Baciloscopias en libro de bk.
Elementos de bioseguridad para montaje de bk. Se
incluye Ldh en LCR. Se incluye Prueba rápida de rota y
adenovirus, hepatitis a en pruebas rápidas, Formula
depuración de creatinina, medir creatinina en suero para
depuración. Se define: pruebas de aglutinación. Se
cambia valor de concentración de RA test, cambia de 12
ui/ml a 8 UI/ ml. Sensibilidad y especificidad del método
VDRL. Descripción de cada una de las pruebas rápidas.
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HOSPITAL 05/12/2018
Se anexan las siguientes técnicas: Hemoglobina

Glicosilada. Microalbuminuria. Medios para Urocultivo. Dl
96 e, ne, strep y staphy. Patrón mcfarland. Cilindros en
orinas se realizan en 10 x (campo de bajo poder). Del
selenito hacer repique a las 8 horas, tiempos de la
coloración del Gram y el examen de Espermograma. Se
anexa plantillas de reporte resultados intrahospitalarios.
03 15/07/2020 Se modifica procedimiento toma de gota gruesa y lectura
según la Guía de vigilancia por laboratorio de Plasmodium
spp.
Se actualiza el reporte de resultados, se incluye el reporte
en el software dinámica.
Se adiciona técnica HDL LE directo, microalbuminuria
técnica en látex, prueba rápida para Malaria, Virus
Sincitial, Adenovirus y Rotavirus. Se elimina la prueba
rápida para Dengue y registro entrega interna de
resultados de microbiología.
Durante la lectura de la gota gruesa el personal de
bacteriología debe utilizar el tiempo mínimo establecido
(20 minutos), donde no se permite modificar tiempo por
presión del personal médico o paciente.
Si durante turno nocturno (madrugada) se presenta
aumento en la recepción de láminas de gota gruesa para
lectura, revisar las que considere pertinente sin alterar
tiempos de lectura e informar al personal médico que el
próximo compañero que reciba turno continuará con la
lectura con el fin de evitar error en el diagnóstico. Si se
tiene duda en la lectura de la especie se recomienda
solicitar apoyo a otro compañero o en su defecto al
personal del laboratorio de salud pública.
Frotis uretral
Puede ser fisiológica - no relacionada con la uretritis -, o

puede ser patológica debido a la presencia de uretritis -
inflamación de la uretra-, la secreción uretral está
presente en el 95% de los casos, es el síntoma
sobresaliente de la uretritis. La secreción puede ser
escasa, profusa, purulenta o clara, el 75% de los
pacientes con uretritis gonocócica describe la secreción
como purulenta y de eliminación espontánea por uretra.
Las secreciones tienden a aparecer menos purulentas
poco después de la micción cuando la infección comienza
a resolverse las secreciones se tornan mucoides. Los
pacientes con uretritis no gonocócica suelen tener una
secreción más escasa y menos purulenta y es menos
probable que tengan disuria y secreción simultánea,
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HOSPITAL 05/12/2018
puede presentarse solo por la mañana o a lo largo de todo

el día, en algunos casos, se puede presentarse sangre en
la orina o el semen. La uretritis no gonocócica suele
aparecer de 7 a 14 días después de la exposición, pero
puede retardarse hasta 5 semanas, los síntomas suelen
ser menos intensos que la uretritis gonocócica.
Los hombres sintomáticos van a presentar la clásica

secreción a través de la uretra anterior, acompañada por
disuria, polaquiuria y edema de meato. Las
complicaciones más frecuentes son, infección persistente
crónica, epididimitis, estrechez uretral e infertilidad.
Materiales y Reactivos:Tubos de ensayo, Láminas,
Laminillas, Hisopos, Microscopio, Cronómetro o Timer,
Marcador.
Procedimiento
Toma de muestras Ver Manual toma de muestras.
Si el paciente no tiene secreción se pide que se retraiga el
prepucio y la muestra debe ser tomada introduciendo
escobillón muy fino humedecido con solución salina
fisiológica estéril 1-2 cms en el canal uretral, imprimiendo
un movimiento suave de rotación.
Si el paciente presenta abundante secreción se pide que
se retraiga el prepucio se oprima el glande y se toma con
escobillón del orificio uretral la secreción obtenida.
Realizar 2 láminas con el extendido de la muestra y tomar
el fresco de la secreción uretral.
La auxiliar de laboratorio realiza la coloración de Gram
para el extendido. Ver anexo coloraciones
La bacterióloga (o) realizar examen en fresco, colocar
sobre un porta objetos una gota de la solución salina
donde se depositaron los hisopos. Cubrir con una laminilla
cubre objetos
Leer en el microscopio en objetivo de 40X.
Buscar especialmente Trichomonas vaginalis, levaduras,
pseudomicelios y reacción leucocitaria
Extendido en objetivo 100x observar diplococos Gram
negativos en forma de riñón o grano de café intra y
extracelulares en los linfocitos polimorfonucleares es
bastante característico de la gonorrea.
Puede hacerse un diagnóstico de uretritis no gonocóccica
cuando se observan grupos de leucocitos por lo menos en
algunos campos microscópicos sin diplococos
intracelulares.
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HOSPITAL 05/12/2018
Si el examen al fresco no se puede realizar de inmediato,

se debe refrigerar máximo por 2 horas.
Diagnóstico definitivo:
El diagnóstico se hace a través de la clínica y pruebas de
laboratorio para la identificación de N. gonorrhoeae.
En hombres observación de diplococos Gram negativos
intra y extracelulares en la secreción uretral. Y en las
mujeres aislamiento por cultivo selectivo para N.
gonorrhoeae, demostración de colonia morfológicamente
típica, reacción positiva a la oxidasa y Gram con la típica
morfología de la bacteria.
Confirmación de la N. gonorrhoeae a través de métodos
bioquímicos, enzimáticos o por ácidos nucleicos (pruebas
de carbohidratos, enzimáticas, métodos serológicos como
la conglutinación o anticuerpos fluorescentes o pruebas
de ADN).
*Se ingresa prueba rápida para antígeno COVID-19.
15. ANEXOS
 ANEXO 1. Flujograma Manual de Procedimientos técnicos
 ANEXO 2. Registro Pool Plasma Normal
 ANEXO 3. Estandarización Coloración
 ANEXO 4. Formatos Reporte de Resultados Consulta Externa
 ANEXO 5. Formatos Reporte de Resultados Intrahospitalarios
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ANEXO 1. Flujograma Manual de Procedimientos Técnicos
INICIO
ATEMPERAR MUESTRAS Y
REACTIVOS
REALIZAR PROCEDIMIENTO DE CADA PRUEBA
REALIZAR ANÁLISIS Y VALIDACIÓN DE

RESULTADOS
REALIZAR REGISTRO Y REPORTE DE

LOS RESULTADOS
FIN
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HOSPITAL 05/12/2018
ANEXO 2. Registro Pool Plasma Normal
GESTIÓN Y ATENCIÓN EN APOYO Código: M-LC-FO-33

DIAGNÓSTICO Y TERAPÉUTICO Versión: 01
Fecha de Aprobación:
Registro Pool Plasma Normal 24/05/2016
Laboratorio Clínico Página: 1 de 1
ITEM FECHA SEXO PT PTT ITEM FECHA SEXO PT PTT

1 1
2 2
3 3
4 4
5 5
6 6
7 7
8 8
9 9
10 10
11 11
12 12
13 13
14 14
15 15
16 16
17 17
18 18
19 19
20 20
Fecha Promedio: FechaPromedio:
LECTURA POOL: LECTURA POOL:
ITEM FECHA SEXO PT PTT ITEM FECHA SEXO PT PTT

1 1
2 2
3 3
4 4
5 5
6 6
7 7
8 8
9 9
10 10
11 11
12 12
13 13
14 14
15 15
16 16
17 17
18 18
19 19
20 20
Fecha Promedio: FechaPromedio:
LECTURA POOL: LECTURA POOL:
FIRMA RESPONSABLE:
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ANEXO 4. Estandarización Coloración

Código: M-LC-FO-29
LABORATORIO CLÍNICO
Versión: 2.0
HOSPITAL FORMATO DE ESTANDARIZACIÓN Fecha de Aprobación:
DE COLORACIÓN 28/09/2018
DIA:_______ MES: _______ AÑO: _________

Reactivos: _________________________________________________________________________
COLORACIÓN: _____________________ N° Lotes: __________________________________________________________________
_____
SE VALIDA
LECTURA
SI NO
LAMINA N° 1
5 Minutos
LAMINA N° 2
8 Minutos
LAMINA N° 3
10 Minutos
COLORACION OPTIMA WRIGHT :

• Los eritrocitos se observarán de color rosado
• El citoplasma de los monocitos presentarán una tonalidad azul grisácea con gránulo rojizos bastante finos y sus
vacuolas características.
• El citoplasma de los linfocitos presentará varias tonalidades azules.
• Los núcleos de los linfocitos y neutrófilos aparecerán de color púrpura oscuro. Los núcleos de los monocitos de
color púrpura algo más claros (lila).
• Los gránulos de los eosinófilos son de color rojo-anaranjado intenso.
• Los gránulos de los basófilos púrpura azulado muy oscuro.
• Los gránulos de los neutrófilos se aprecian de color lila, bastante finos.
• Las plaquetas toman coloración violeta o púrpura.
COLORACION OPTIMA GOTA GRUESA:
Las plaquetas se observan bien teñidas (color violeta), “coposas o esponjosas”, es decir, con un fino punteado y en
ocasiones se pueden observar sus prolongaciones. El nucleo de parásito se observa de color rojo intenso, citoplasma
azul.
COLORACION OPTIMA GRAM:

Se valida con control de calidad Cepas ATCC:
Staphylococcus aureus (Cocos gram positivos)
Escherichia coli: (Bacilos gram negativos)
Pseudomona aeruginosa (Bacilos gram negativos)
OBSERVACIONES: ________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
BACTERIOLOGA RESPONSABLE: ____________________
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HOSPITAL 05/12/2018
ANEXO 5. Formatos Reporte de Resultados Consulta Externa
ESE HOSPITAL SAN JOSE DEL GUAVIARE

HOSPITAL
LABORATORIO CLINICO
EMPRESA SOCIAL DEL E STADO
Calle 12 Carrera 20 - B. La Esperanza Tel: 5840045 - 5840168
PACIENTE: IDENTIFICACION:
EDAD: SEXO: ID MUESTRA:
SERVICIO: FECHA INGRESO:
FROTIS DE FLUJO VAGINAL
EXÁMEN FISICO
COLOR:
OLOR:
EXÁMEN FRESCO
CELULAS GUIA:
TRICHOMONA VAGINALIS:
GRAM VAGINAL
PMN:
CELULAS GUIA:
LEVADURAS:
PSEUDOMICELIOS:
MORFOLOGIA:
FLORA NORMAL:
ANALISTA: FECHA SALIDA:

HORA:
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018

HOSPITAL
LABORATORIO CLINICO
UROANALISIS
EXÁMEN FISICO-QUIMICO EXÁMEN MICROSCOPICO

COLOR:
ASPECTO: LEUCOCITOS:
DENSIDAD: BACTERIAS:
P.H.: CEL. EPITELIALES:
PROTEINAS: HEMATIES:
GLUCOSA:
CETONAS:
HEMOGLOBINA:
NITRITOS:
BILIRRUBINAS:
UROBILINOGENO:
ÁCIDO ASCORBICO:

HORA:
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018

LABORATORIO CLINICO
HOSPITAL

COPROSCOPICO
EXÁMEN FÍSICO
COLOR:
CONSISTENCIA:
EXÁMEN QUÍMICO
p.H:
SANGRE OCULTA:
AZUCARES REDUCTORES :
EXÁMEN MICROSCOPICO
DENSIDAD BACTERIANA:
Negativo para parasitos intestinales en la preparación observada
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018

LABORATORIO CLINICO
HOSPITAL
EMPRESA SOCIAL DEL ESTAD O

HEMOGRAMA
VR: VR:
LEU: (3,5-10,0) VCM: (80-97)
ERI: (3,80-5,80) HCM: (26,5-33,5)
HB: (11,0-16,5) CCMH: (31,5-35,0)
HTO: (35,0-50,0) IDE: (10,0-15,0)
PLQ: (150000-450000) VPM (6,5-11,0)
RECUENTO DIFERENCIAL
VR:
% LIN: (17,0-48,0)
%MON: (4,0-10,0)
%GRA: (43,0-76,0)

HORA:
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018

LABORATORIO CLINICO
HOSPITAL

NOMBRE IDENTIFICACION:
VALOR
EXAMEN RESULTADO UNIDAD OBSERVACIONES
REFERENCIA

HORA:
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
ANEXO 6. PLANTILLAS REPORTE DE RESULTADOS INTRAHOSPITALARIOS
 Química
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
Uroanálisis
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
 Hematología
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
 Serologías
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
 Coproscopico
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
  Electrolitos
 Gases
COPIA CONTROLADA

HOSPITAL 05/12/2018
 Pruebas de compatibilidad
 Rastreo de anticuerpos
COPIA CONTROLADA

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HOSPITAL

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

7.4 TEST DE GRAHAM................................................................................................................................111

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

10.3.1 IDENTIFICACIÓN BACTERIANA SEMI AUTOMATIZADA: PANELES DE IDENTIFICACIÓN DL-96

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

Son responsables de la aplicación de las actividades descritas en este protocolo todo el

 Plasma: es la fracción líquida y celular de la sangre. Las proteínas del plasma

 INR: Ratio normalizada internacional, representa el cociente que se hubiera obtenido

 Hematocrito: Relación entre el volumen ocupado por los hematíes dentro de un

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

 Plaquetas: El menor de los elementos de la sangre; fragmentos celulares que sirven

 Cuadro hemático automatizado: Los cuadros hemáticos automatizados aportan más

- Volumen Corpuscular Medio (VCM): Es el valor medio del volumen de cada

- Hemoglobina Corpuscular Media (HCM): Expresa el valor medio contenido de

- Promedio de Concentración de Hemoglobina (CMHG): Es la cantidad de

- Diferencial leucocitario: Distingue tres poblaciones, linfocitos, neutrófilos y

 Reticulocitos: Hematíes que han perdido su núcleo pero que no están

 Extendido de sangre periférica: Distribución uniforme de células para estudiar

- Anisocitosis: Nombre utilizado para valorar el tamaño del hematíe se toma

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

macrocito, si es menor una vez es normocitico y si es menor dos veces en

- Poiquilocitosis: Termino utilizado cuando se producen variaciones muy marcadas

 Gota gruesa: La gota gruesa es el método de rutina para el diagnóstico de malaria o

 Coprológico: estudio de la materia fecal que se basa en la demostración de

 Coproscópico: El coproscópico incluye además del examen coprológico, un análisis

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

5.1 Cuadro Hemático Manual

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

El hematocrito es el examen que mide el volumen de eritrocitos, se expresa como un

 Capilares con Heparina

 Tomar un capilar de vidrio con EDTA o HEPARINA.

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

Responsable: Bacteriólogo (a)

 Pipeta automática de 100 a 1000 y de 5 a 50 lambdas.

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

 Mezclar la sangre anti coagulada por un minuto aproximadamente.

Nº de leucocitos x mm3 = Num.de cel. contadas*1*dilución

Leucocitos/mm³=Num. De cel. Contadas*1*20

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

 Corrección de Recuento de Leucocitos

La corrección de los Glóbulos blancos generalmente se realiza en pacientes con anemias

Por tal razón se debe realizar

Ejemplo: recuento de 30.000/mm3 con presencia en lámina de 90 normoblastos

Responsable: Bacteriólogo (a)

 Recuento de Plaquetas Manual

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

 Tubo con sangre venosa anticoagulada con EDTA.

 Mezclar bien la muestra de sangre obtenida con EDTA.

Valor de referencia: 150 000 - 450 000 plaquetas/mm3

Responsable: Bacteriólogo (a)

 Recuento Diferencial de Leucocitos en lámina

 Eosinófilos: es redondo u ovalado, el núcleo posee no más de tres lóbulos y en el

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Fecha Aprobación:

 Linfocitos: Su citoplasma es azul pálido y la cromatina nuclear color púrpura azulado

 Monocitos: su núcleo suele ser arriñonado. Contiene una red de cromatina. El

Características de un buen extendido: debe tener

Nº de leucocitos x mm3 = Num.de cel. contadas1dilución

Leucocitos/mm³=Num. De cel. Contadas120