INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

PRACTICA 10: REACCIÓN DE TRANSAMINACIÓN Y SU
RECONOCIMIENTO POR MEDIO DE CROMATOGRAFÍA EN PAPEL
Mendez Monroy Jonathan Vega Montes Ayrton Sección:1 Grupo: 3IV1

INTRODUCCIÓN  Elaborar la curva tipo del glutamato para

poder realizar las interpolaciones del tubo
En las reacciones de transaminación, que están
testigo y problema
ampliamente extendidas en la naturaleza, el grupo
a-amino de un aminoácido se transfiere RESULTADOS
reversiblemente a uno de tres a-cetoácidos
Obtención de la Concentración para la curva tipo
diferentes (piruvato, oxalacetato, oxaglutarato). Los 20mmoles-------- 1000microL x=0.1mmoles
productos son la a-cetoácido correspondiente del x--------- 5microL
aminoácido y uno de los tres aminoácidos alanina, 20mmoles-------- 1000microL x= 0.2mmoles
x--------- 10microL
aspártico y glutámico respectivamente.
20mmoles-------- 1000microL x=0.3mmoles
Todas las transaminasas tienen como coenzima al x--------- 15microL
20mmoles-------- 1000microL x=0.4mmoles
piridoxalfosfato y comparten un mecanismo de
x--------- 20microL
reacción común. La clave de acción es el grupo 20mmoles-------- 1000microL x=0.5mmoles
aldehído del piridoxal que puede formar x---------- 25microL
reversiblemente una base de Schiff con amoniaco
o con diversas aminas. Durante el ciclo catalítico de Tabla 1 Datos espectrofotométricos para construir nuestra curva tipo

las transaminasas, un mecanismo ping-pong Muestra Concentración Absorbancia

característico, la coenzima experimenta (microL) (mmoles)
Glu 5 0.1 0.025
transformaciones reversibles entre su forma
Glu 10 0.2 0.115
aldehído libre (piridoxal) y su forma aminada
Glu 15 0.3 0.126
(piridoxamina), actuando así como un portador de Glu 20 0.4 0.186
grupos amino, desde un aminoácido a un Glu 25 0.5 0.285
cetoácido. Testigo 0.23 0.108
Problema 0.53 0.283
OBJETIVOS

 Cuantificar la actividad de la transaminasa

ALAT/TGP presente en un extracto crudo
de hígado empleando, un método
espectrofotométrico.
 DISCUSION
Curva Tipo de la absorbancia vs la
concentración del Ac.glutámico Con los datos de absorbancia y la concentracion del
(micromoles) ac.glutamico se construyo una curva tipo, para
0.3 obtener la ecuacion de nuestro grafico y realizar las
interpolaciones con respecto a la absorbancia del
0.25
tubo problema y testigo, con el fin de conocer sus
0.2 concentraciones, y calcular la concentracion real, la
Absorbancia

0.15 cual es un valor de 0.3µmoles de Glu.

y = 0.591x - 0.0299 Esta informacion es util, ya que esperamos calcular

0.1 R² = 0.9462
las unidades arbitrarias de transaminasa, y para eso
0.05
necesitamos conocer la masa: 𝑚𝑎𝑠𝑎 = 𝑃𝑀 ×
0 𝑛(𝑚𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠) donde m=39.6µg Glu
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
Concentración (micromoles) Y tambien, considerando que el extracto de
transaminasa se obtuvo añadiendo 20mL de
regulador por cada gramo de hígado, tenemos: En
1mL de solucion----- 0.05gHigado
Obtener los micromoles reales de Glu
Realizamos la siguiente relacion: en 0.05gHigado
[mmoles]= (abs+ordenada)/(pendiente) hay 39.6µg de Glu, por lo tanto en 1gHigado son:
Testigo[mmoles]= (0.108+0.0299)/(0.591)
792µg de Glu/gHigado/1h
Testigo[mmoles]= 0.23
Problema[mmoles]= (0.283+0.0299)/(0.591)
Problema[mmoles]= 0.53
CONCLUSION
En general, la transaminación consiste en
Reales (mmoles)= 0.53mmoles-0.23mmoles
Reales (mmoles)= 0.3 mmoles trasnportar un grupo α-amino desde un α-
Con base a esta informacion, se procede a calcular aminoácido donador, al carbono ceto de un α-
la UAT
cetoácido receptor, que son catalizadas por las
20ml------ 1gHigado x= 0.05gHigado aminotransferasas especificas en cada reacción.
1ml-------- x
𝐿𝑜𝑠 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑔 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑢 𝑠𝑒 𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑎𝑛 𝑐𝑜𝑛 𝑙𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑢𝑙𝑎: A partir de una preparacion cruda de transaminasa,
obtuvimos en 1gHigado una UAT de 792µg de
𝑚𝑎𝑠𝑎 = 𝑃𝑀 × 𝑛(𝑚𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠) 𝐷𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑃𝑀
= 132𝑔/𝑚𝑜𝑙 Glu/gHigado/1h

𝐿𝑜𝑠 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑢 𝑠𝑜𝑛 39.6

39.6 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑔 − − − − − −0.05𝑔𝐻𝑖𝑔𝑎𝑑𝑜
𝑋 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑔 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑢 − − − 1𝑔𝐻𝑖𝑔𝑎𝑑𝑜
𝑥 = 792𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑔 𝐺𝑙𝑢
𝑼. 𝑨. 𝑻 = 𝟕𝟗𝟐𝒎𝒊𝒄𝒓𝒐𝒈 𝑮𝒍𝒖/𝒈𝑯𝒊𝒈𝒂𝒅𝒐/𝟏𝒉
REFERENCIAS
 Aspectos generales de la degradación de
aminoácidos: Reacciones de desaminación,
transaminación y descarboxilación.
Bioquímica- 2º F (2010-11). Recuperado de:
http://www3.uah.es/bioquimica/Tejedor/bioq
uimica_quimica/R-T20-1-Rgenerales.pdf
 Alemany M, Font S (1983): “Prácticas de
Bioquímica”, 1a ed. Editorial Alhambra
(Madrid, España), pp 99-107
 Brandan, Nora C. METABOLISMO DE
COMPUESTOS NITROGENADOS. Cátedra
de Bioquímica. Facultad de Medicina.
UNNE. Recuperado de:
https://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/ima
genes/ckfinder/files/files/Carrera-
Medicina/BIOQUIMICA/nitro.pdf

Investiga otras transaminasas (diferentes a AST

y ALAT) y explique en sus propias palabras y de
manera muy breve su importancia clínica

Estas transaminasas ayudan a contribuir con los

diagnosticos clinicos, en especial en el perfil
hepatico. Una de estas enzimas son las fosfatasas
alcalinas, que estan presentes en casi todos los
tejidos del organismo, y cuando esta elevada en los
torrestes sanguineos, puede indicar daño en el
higado o alguna enfermedad en los huesos
(enfermedad osea de Paget)

Otra enzima muy importante es la gamma-glutamil

transferasa, la cual cuando esta se encuentra
elevada, es señal que se tenga un daño en las vias
biliares

Villegas Monton, S. (2019). Manual de prácticas de

Perfiles Clinicos. Cecyt6.IPN. pp 25-30