UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL I
CICLO II
I N F O R M E #3 2021 - 2022

Estudiantes: Semestre: Quinto Grupo: G1 Subgrupo: 5

► Freire Zöller Nicolás
► Garcia Cevallos Garly
► Llerena Lozano Briggitte
► Pérez De la Paz Paula

Fecha de Entrega: 05/01/2022 Docente: Dra. Zoraida del Carmen Burbano Gómez

Tema: “LA RADIACIÓN ELECTROMAGNÉTICA EN EL ANÁLISIS INSTRUMENTAL

COMPONENTES DE UN INSTRUMENTO DE MEDICIÓN”
Objetivos
1. Aprender y dominar el manejo de instrumentación analítica (espectrofotómetro) para la medición de la
absorción de radiación
2. Conocer la anatomía y fundamento de un espectrofotómetro
3. Desarrolla la destreza para la selección adecuada de los instrumentos de acuerdo con los casos de
estudios analíticos

Reactivos de laboratorio Materiales de laboratorio Equipos de laboratorio

• n/a • Fotocolorímetro LUMETRON • n/a
• Espectrofotómetros de diferentes
modelos

Fundamento de la práctica (Marco teórico)

Espectrofotómetro
Un espectrofotómetro es un instrumento utilizado para medir la transmitancia/absorbancia
de una muestra, en función de la longitud de onda de una radiación electromagnética. En general,
un espectrofotómetro está compuesto de 4 partes principales: una fuente, un monocromador, un
divisor del haz, un área de muestra y un detector. También cuenta con elementos ópticos como
lentes o espejos, que transmiten la luz a lo largo de todo el equipo. Es utilizado en los laboratorios
de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos. Hay varios tipos de
espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de masa (ONAC, 2021).

Ilustración 1. Espectrofotómetro Digital

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 Ilustración 2. Esquema Funcionamiento de un Espectrofotómetro

Fuente
Es la encargada de generar radiación electromagnética. La fuente ideal es aquella que
proporcione una intensidad constante para todas las longitudes de onda, con bajo ruido y muy
estable. Esta fuente ideal no existe, sin embargo, existen lámparas que cumplen en gran medida
con estas condiciones, estas son: (ONAC, 2021).
► La lámpara de deuterio: Produce una intensidad adecuada en la región ultravioleta (3). El
funcionamiento de esta lámpara se basa en la aplicación de una corriente eléctrica a un gas,
de tal manera que origina que las moléculas del gas colisionan con los electrones
provocando excitaciones electrónicas, vibracionales y rotacionales, las cuales a su vez
generan la iluminación. La vida útil de esta lámpara es de aproximadamente 1000 horas.
► La lámpara de tungsteno: Proporciona una intensidad adecuada en toda la región visible
e infrarrojo, este tipo de lámpara tiene muy bajo ruido y poca deriva. Su funcionamiento se
basa en hacer pasar una corriente eléctrica a lo largo de un filamento de tungsteno, lo cual
incrementa su temperatura y produce la emisión de energía. La lámpara de tungsteno tiene
una vida útil de aproximadamente 10 000 horas.
► La lámpara de Arco de xenón: Proporciona una intensidad continua a lo largo de todo el
espectro ultravioleta-visible. Su funcionamiento se basa en la ionización del xenón, debido
a una descarga eléctrica entre dos electrodos de tungsteno. Una desventaja de esta fuente es
que posee un mayor ruido comparada con las lámparas de deuterio y tungsteno (ONAC,
2021).
► La lámpara de mercurio: Tiene el mismo principio de funcionamiento de la lámpara de
deuterio, se utiliza para la calibración de la escala de longitud de onda de algunos
espectrofotómetros UV-Vis.

Monocromador
El monocromador está compuesto de 3 partes principales:
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 ► Una rendija de entrada, que delimita la cantidad de luz proveniente la fuente.
► Un dispositivo de dispersión como su nombre lo indica realiza la dispersión de la luz para
obtener la longitud de onda deseada.
► Una rendija de salida, por la cual la radiación monocromática es dirigida a la muestra. Esta
rendija es la encargada de definir la región de longitud de onda que será detectada y por
consiguiente está directamente relacionada con el ancho de banda espectral (ONAC, 2021).
Compartimento de muestras
Las muestras que van a ser analizadas se ubican en esta parte del espectrofotómetro. En
general, el porta muestras debe ser oscuro y estar completamente aislado, con el fin de evitar
errores en la medición debido a luz extraviada o cualquier otra interferencia. Así mismo, este
debe estar alineado con el haz de luz y por consiguiente no debe bloquearlo. Dependiendo del
tipo de espectrofotómetro y de la aplicación que se requiera existen diferentes tipos de porta
muestras. Por ejemplo, para los espectrofotómetros de doble haz para muestras sólidas (A) y
celdas estándar (B), para espectrofotómetros de haz simple para celdas estándar (C), portaceldas
para celdas con diferentes pasos ópticos (D) portaceldas para múltiples muestras (E) (ONAC,
2021).

Ilustración 3. Compartimento de muestras

Detector
El principio de un detector consiste en convertir una señal de luz en una señal eléctrica.
Idealmente, debe suministrar una señal lineal, con bajo ruido, alta sensibilidad y a su vez,
amplificarla en varias etapas a lo largo de todo el dispositivo. Existen varias clases de detectores,
a continuación, se describen algunos de ellos: (ONAC, 2021).
► Fototubo: Este detector cuenta con una superficie fotoemisora en el cátodo, la cual al
absorber los fotones que previamente han pasado por la muestra, libera electrones que a
su vez son recolectados por el ánodo, generando así un flujo de corriente proporcional a

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 la radiación incidente, la cual finalmente se amplifica.
► Tubo fotomultiplicador: al igual que en el detector de fototubo, la superficie
fotoemisora del cátodo libera electrones al entrar en contacto con la radiación que sale
después de atravesar la muestra. Gracias a un campo eléctrico, estos electrones son
atraídos hacia un conjunto de dinodos, los cuales poseen una superficie fotoemisora, con
el propósito de multiplicar la cantidad de electrones (ONAC, 2021).
► Arreglo de diodos: Este detector está compuesto por un conjunto de fotodiodos, con
superficie semiconductora, conectados a unos condensadores. Cuando la radiación
proveniente de la muestra entra en contacto con esta superficie, se genera un flujo de
electrones que descarga los condensadores. La corriente necesaria para cargarlos
nuevamente es proporcional al número de fotones detectados por cada fotodiodo (ONAC,
2021).
Radiación Electromagnética
La radiación electromagnética se puede definir como una forma de energía que se produce
por el movimiento de partículas cargadas eléctricamente que viajan a través de una materia o vacío o por
perturbaciones magnéticas y eléctricas oscilantes. Los campos magnético y eléctrico forman un ángulo
de 90° entre sí, y las ondas combinadas se mueven perpendicularmente a los campos oscilantes eléctricos
y magnéticos que producen la perturbación. (Bijus, 2018)

Ilustración 4 Radiación electromagnética.

Puntos Clave
► Los polos magnéticos vienen en pares que se repelen y se atraen, al igual que las cargas eléctricas.
► La fuerza de repulsión o atracción entre dos cargas eléctricas es inversamente proporcional al
cuadrado de la distancia entre las partículas.
► Un campo eléctrico en movimiento produce un campo magnético.
► Un alambre con una corriente eléctrica produce un campo magnético cuya dirección depende de la
dirección de la corriente eléctrica .

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 Propiedades de la Radiación Electromagnética
Cuando se produce la radiación electromagnética, las radiaciones de electrones se liberan
como fotones. Estos son haces de energía luminosa u ondas armónicas cuantificadas que viajan a la
velocidad de la luz. Luego, según la longitud de onda del espectro electromagnético, la energía se agrupa
en diferentes categorías. Estas ondas magnéticas y eléctricas viajan perpendiculares entre sí y tienen
algunas características como longitud de onda, amplitud y frecuencia. Algunas propiedades básicas de
la radiación electromagnética se dan en los puntos mencionados a continuación. (Bijus, 2018)

Ilustración 5. Ondas electromagnéticas

► Pueden viajar a través del espacio vacío. Las ondas distintas de las ondas electromagnéticas
tienen que viajar a través de alguna sustancia. Por ejemplo, las ondas de sonido necesitarán un
sólido, un líquido o un gas para pasar.
► La velocidad de la luz que es 2.99792458 x 10 8 m/s es siempre constante.
► La longitud de onda se caracteriza comúnmente por el símbolo 'λ'. Es la medida entre la distancia
de los valles o las crestas. (Bijus, 2018)

Radiación Ionizante
La radiación ionizante es la energía típica que liberan los átomos que viajarían en forma de
ondas electromagnéticas como rayos X y gamma o partículas alfa, neutrones o beta. Como la
radiactividad no es otra cosa que el desdoblamiento espontáneo de los átomos, la radiación ionizante
sería el exceso de energía emitido en su debido momento. A partir de esta actividad se forman los
radionucleidos que son los elementos inestables que dividirían y dispersarían la radiación ionizante. La
mayoría de los radionúclidos se identifican fácilmente por el tipo de radiación que emiten, la energía de
la radiación y también la vida media de la misma. (Byjus, s.f)
Tipos de exposición a la radiación ionizante
La exposición a la radiación podría ser externa o interna y podría tener un impacto solo a
través de vías de exposición de diferentes tipos.
► Exposición interna:
La exposición interna a la radiación ionizante ocurre cuando inhala un radionúclido o se
ingiere en su sistema o ingresa directamente al torrente sanguíneo. Podría erradicarse del organismo

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mediante tratamiento o mucho más rápido (a través de los conductos excretores) eliminando el
radionúclido del organismo. (Byjus, s.f)
► Exposición externa
La exposición externa ocurre cuando el material radiactivo comprado a través del aire se
deposita en la ropa o en la piel. Eliminar este mero lavado sería más que suficiente para deshacerse de
la radiación depositada en su cuerpo. (Byjus, s.f)

Tipos de radiación ionizante

Partículas alfa
Las partículas alfa (α) tienen carga positiva y están compuestas por dos protones y dos neutrones
del núcleo del átomo. Las partículas alfa provienen de la desintegración de los elementos radiactivos
más pesados, como el uranio, radio y polonio. Si bien las partículas alfa
tienen mucha energía, son tan pesadas que agotan su energía en distancias
cortas y no se pueden alejar demasiado del átomo.
El efecto sobre la salud de la exposición a las partículas alfa depende
en gran medida de la forma de exposición de la persona. Las partículas alfa
carecen de la energía para penetrar incluso la capa externa de la piel, de manera que la exposición en el
exterior del cuerpo no es motivo de gran preocupación. Sin embargo, en el interior del cuerpo pueden
ser muy dañinas. Si los emisores de rayos alfa se inhalan, ingieren o ingresan al cuerpo por medio de un
corte, las partículas alfa pueden dañar tejido vivo sensible. La forma en que estas partículas grandes y
pesadas causan daños las hace más peligrosas que las de otros tipos de radiación. Las ionizaciones que
producen están muy próximas: pueden liberar toda la energía en unas cuantas células. Esto se traduce en
daño más grave para las células y el ADN. (EPA, 2019)

Partículas beta
Las partículas beta (β) son partículas pequeñas y rápidas con una carga eléctrica negativa que
son emitidas desde el núcleo de un átomo durante la desintegración radiactiva. Estas partículas son
emitidas por ciertos átomos inestables como el hidrógeno 3 (tritio), el carbono 14 y el estroncio 90.
Las partículas beta son más penetrantes que las alfa, pero menos dañinas para el tejido vivo y el
ADN porque las ionizaciones que producen son más espaciadas. Se desplazan a distancias mayores en
el aire que las partículas alfa pero pueden ser detenidas por una capa de ropa o una capa delgada de una
sustancia como el aluminio. Algunas partículas beta son capaces de penetrar
la piel y causar daños como quemaduras de la piel, por ejemplo. Sin
embargo, al igual que con los emisores de alfa, los emisores de beta son más
peligrosos cuando se inhalan o ingieren. (EPA, 2019)

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 Rayos gamma
Los rayos gamma (γ) son paquetes de energía sin peso llamados fotones. A
diferencia de las partículas alfa y beta, que tienen energía y masa, los rayos
gamma son energía pura. Los rayos gamma son similares a la luz visible, pero
tienen mucha más energía. Los rayos gamma a menudo se emiten junto con
partículas alfa o beta durante la desintegración radiactiva.
Los rayos gamma son un peligro de radiación para todo el cuerpo. Pueden penetrar fácilmente
las barreras que pueden detener las partículas alfa y beta, como la piel y la ropa. Los rayos gamma tienen
tanto poder de penetración que se pueden necesitar varias pulgadas de un material denso como el plomo,
o incluso unos pocos pies de concreto para detenerlos. Los rayos gamma pueden atravesar
completamente el cuerpo humano; a medida que pasan, pueden causar ionizaciones que dañan el tejido
y el ADN. (EPA, 2019)

Rayos X
Debido a su uso en medicina, casi todo el mundo ha oído hablar de los
rayos X. Los rayos X son similares a los rayos gamma en que son fotones de
energía pura. Los rayos X y los rayos gamma tienen las mismas propiedades
básicas pero provienen de diferentes partes del átomo. Los rayos X son emitidos
por procesos fuera del núcleo, pero los rayos gamma se originan dentro del
núcleo. También son generalmente de menor energía y, por lo tanto, menos penetrantes que los rayos
gamma. Los rayos X se pueden producir de forma natural o mediante máquinas que utilizan electricidad.
Literalmente, miles de máquinas de rayos X se utilizan diariamente en medicina. La
tomografía computarizada, comúnmente conocida como tomografía computarizada o tomografía
computarizada, utiliza un equipo especial de rayos X para generar imágenes detalladas de los huesos y
los tejidos blandos del cuerpo. Los rayos X médicos son la fuente más grande de exposición a la
radiación artificial. (EPA, 2019)

Actividades por desarrollar/ técnica operatoria o procedimiento

1) Espectrofotometría de absorción molecular ir (esquema de un espectrofotómetro de doble haz. las líneas
gruesas y obscuras indican una conexión mecánica).

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2) Espectrofotometría con atomizadores electrotérmicos

3) Espectrofotometría de emisión con plasma

4) Espectrofotometría de absorción y emisión atómica

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5) Diagrama esquemático de un colorímetro de plantillas

6) Diagrama esquemático de un colorímetro de filtros

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Conclusiones de la práctica

Las investigaciones desarrolladas a lo largo de la practica han disipado todas las inquietudes y
proporcionado nueva información del tema de radiación magnética, concluyendo que se trata de una onda
partícula que al interactuar con un medio magnético o eléctrico cambia de dirección distando en puntos
altos o máximos, así como puntos mínimos en unidades nanométricas.
También se logró comprender el manejo y funcionamiento del espectrofotómetro el cual
manifestando información mediante un gráfico que independiente de la concentración con el que se
trabaje, el analito va a tener la misma longitud de onda y su punto más alto de absorción de radiación,
será la parte más alta del gráfico.
Si incrementa la concentración incrementará la interacción.
Esta interacción de la radiación con la materia a pesar de que se sabe que está allí, no se puede
identificar correctamente por eso es indispensable un traductor de la señal, para aquello hay que escoger
correctamente el material dependiendo del analito es decir de la muestra problema, evitando en la medida
de lo posible los errores que se pueden generar por desviación parasita o una incorrecta lectura del gráfico.

Recomendaciones

1. Preparar apuntes previos de la practica con respecto al instrumento de espectrofotómetro, con el fin de
agilizar la familiarización de este.
2. Tomar las medidas de precaución de bioseguridad correspondiente, evitar espacios reducidos, y trabajar
junto a otros equipos considerados sensibles antes la radioactividad.
3. Limpiar la zona dónde se realizará la práctica antes y después.

Captura de Zoom (grupo)

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Bibliografía
Bijus. (2018). Obtenido de Electromagnetic Radiation: https://byjus.com/physics/electromagnetic-
radiation/#what-is-electromagnetic-radiation
Byjus. (s.f). Obtenido de ionizing radiation: https://byjus.com/physics/ionizing-radiation/
EPA. (2019). United States Environmental Protection Agency. Obtenido de Radiation Basics:
https://www.epa.gov/radiation/radiation-basics
ONAC. (30 de Abril de 2021). Recuperado el 06 de Enero de 2022, de https://inm.gov.co/web/wp-
content/uploads/2021/11/M-06-F-01-Guia-de-calibracion-espectrofotometros-ISBN.pdf
Skoog, D., J.J, L., & James, H. F. (1998). Recuperado el 06 de Enero de 2022, de
https://utanuror7.files.wordpress.com/2012/07/infrarrojo.pdf

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