Trabajo en Grupo 1

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

BIOQUÍMICA CLÍNICA
Asignatura: Química Analítica Instrumental I Nota:
TAREA N° 2
Fecha de realización: 09/1/2021 Fecha de entrega: 10/1/2021
Integrantes: • Borrero, Karen.
• Cupichamba, Kevin.
• Orozco, Richard.
• Sisalema, Erick.
• Tapia, Vanessa
1.10 Los datos de la tabla siguiente se obtuvieron durante una determinación

colorimétrica de glucosa en suero sanguíneo.
Concentración Absorbancia/A
de glucosa/ mM
0 0,002
2 0,15
4 0,294
6 0,434
8 0,57
10 0,704
a) Si se supone que hay una relación lineal, determinar la estimación de mínimos cuadrados
de la pendiente y la ordenada al origen. (Ver tabla completa en Excel)
Pendiente (m) 0.070

Ordenada al origen (a) 0.0829
b) Mediante la función ESTIMACIÓN LINEAL de Excel determinar la desviación estándar

de la pendiente y la ordenada al origen. ¿Cuál es el error estándar de la estimación?
Estimación lineal
Pendiente Ordenada
0,07014 0,0083
0,00007 0,0040
Error 12,1955% 0,964%
c) Calcule los intervalos de confianza a 95% para la pendiente y la ordenada al origen.
LC. m 0,0701±0,002
LC. b 0,0083±0,01
d) Una muestra de suero tuvo una absorbancia de 0.350. Calcule la concentración de glucosa
y su desviación estándar.
Concentración 4,871690428
Absorbancia 0,35
D.S. 0,085943481
Cglucosa 4,87±0,09mM
1.11 Se determinaron exactamente alícuotas 5.00 ml de una disolución que contiene

fenobarbital en matraces volumétricos y se hicieron básicas con KOH. Después se
vaciaron en cada matraz los siguientes volúmenes de una solución patrón que contiene
2.000𝝁g/mL de fenobarbital: 0.000, 0.500, 1.00, 1.50 y 2.00 ml y la mezcla se diluyó a
cierto volumen. La fluorescencia de cada una de estas soluciones se midió con
fluorímetro, que dio los valores de 3.26, 480, 6.41 8.02 y 9.56, respectivamente.
a) Grafique los datos.
b) con la gráfica de a) calcule la concentración de fenobarbital en la incógnita.

𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 = 0,41036625
Concentración de analito = 0,410366625 µg/mL

c) Deduzca la ecuación de mínimos cuadrados para los datos.
𝑉𝑠 = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑣𝑎𝑟𝑖𝑎𝑏𝑙𝑒 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛
𝐶𝑠 = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 (𝑐𝑡𝑒)
𝑉𝑥 = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐶𝑥 = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 (𝑑𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜)
𝑉𝑡 = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒𝑙 𝑚𝑎𝑡𝑟𝑎𝑧
𝐾𝑉𝑠 𝐶𝑠 𝐾𝑉𝑥 𝐶𝑥
𝑆= +
𝑉𝑡 𝑉𝑥
Como la función tiene una alta linealidad, se asume que es una recta.
𝑆 ∝ 𝑉𝑥
𝑆 = 𝑘 𝑉𝑥
Es así como, se plantea la pendiente (m) y la ordenada en el origen (b) a partir de las variables
que se conoce.
Como la finalidad del experimento es determinar la concentración del analito, esta se la
determina gracias al volumen, pues:
𝐶(𝑉) = 𝑉
Entonces se define como variable independiente al volumen del patrón (volumen variable),
siendo la pendiente, la concentración del patrón, multiplicado por una constante,y todo divido
para el volumen total.
Es decir, que el área bajo la curva de S(V)=V, representa la concentración final de fenobarbital
(analito)
𝑘𝐶𝑠
∴ 𝑚𝑥 = 𝑉
𝑉𝑡 𝑠
Para la ordenada al origen se considera el volumen y la concentración del fenobabital de la
muestra
Además, hay que agregar la constante, que es parte de cada experimento y se divide para el
volumen total
Es decir, que este punto representa el volumen, y por ende la concentración, de la muestra
cuando se diluye a cierto volumen (Vt)
𝑘𝑉𝑥 𝐶𝑥
𝑏=
𝑉𝑡
∴ 𝑆 = 𝑚𝑉𝑥 + 𝑏
S = 3,164𝑉 + 3,246
d) Determine la concentración de fenobarbital a partir de la ecuación c).

𝑚𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = 𝑚𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 + 𝑚𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 ∧ 𝐶 = 𝑚/𝑣
0 = 𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 × 𝑣𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 + 𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 × 𝑣𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛

∧ 𝐶𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = 0 ∴ 𝐶𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 × 𝑣𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 =0
−𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 × 𝑣𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛
𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 =
𝑣𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛
−2µg/mL × -1,02591656
𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 =
5𝑚𝐿
𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 = 𝟎, 𝟒𝟏𝟎𝟑𝟔𝟔𝟐𝟓 µ𝒈/𝒎𝑳

e) Calcule la desviación estándar de la concentración que obtuvo en d)
Sc=0,002495655
S = 0,00249565
E) Los siguientes datos de calibración se obtuvieron mediante un método instrumental

para determinar la especie X en solución acuosa.
Conc. X/ Num. Señal analítica
Desviación estándar
ppm Repeticiones medida
0 25 0,031 0,0079
2 5 0,173 0,0094
6 5 0,422 0,0084
10 5 0,702 0,0084
14 5 0,956 0,0085
18 5 1,248 0,011
a) Calcule la sensibilidad de calibración
Sensibilidad = m (pendiente) = 0.0670
b) Determine la sensibilidad analítica en cada concentración del analito.

Conc. X/ Sensibilidad analítica
ppm (γ)
0 8,49
2 7,13
6 7,98
10 7,98
14 7,89
18 6,09
c) Determine el coeficiente de variación de la media de cada uno de los conjuntos de

repetición.
Coeficiente de variación
72,01
50,86
63,69
63,69
62,20
37,14
d) ¿Cuál es el límite de detección para el método?
Cm=LOD = 0,035
3. Se obtuvo los siguientes resultados cuando se analizaron una serie de soluciones
estándar de plata por espectrometría de absorción atómica de llama
C/ ng/mL Absorbancia/A
0 0,003
5 0,127
10 0,251
15 0,39
20 0,498
25 0,625
30 0,763
a) Determine la pendiente y la ordenada en el origen de la gráfica de la calibración, junto

con sus límites de confianza.
Columna1 Columna2
Intercepción=b 0,002107143
Variable X 1=m 0,025164286
Coeficiente de determinación
R^2 0,999443489
r 0,999721706
n 7
gl 5
L 1
t 2,57
t*Sm 0,001526074
t*Sb 0,027511687
0,02516±0,0015
Límite de confianza m 2
0,002107±0,027
Límite de confianza b 5
LOD 0,034221952
Límites de
confianza
Intercepción = b 0,002107143 0,002107±0,0275
Variable X 1= m 0,025164286 0,02516±0,00152

4. Utilizando los datos del ejercicio 3), estime los límites de confianza para la
concentración de plata en:
a) Una muestra que proporciona una absorbancia de 0.308, 0.314, 0.347 y 0.312 en cuatro
análisis separados.
Absorbancia C/ ug/mL Sc t*Sc Lc

0,308 12,1558331 0,67079139 0,001023677 12,15±0,001024
0,314 12,39426625 0,67025184 0,001022854 12,39±0,001023
0,347 13,70564859 0,66812399 0,001019607 13,70±0,001020
0,312 12,31478853 0,67042649 0,00102312 12,31±0,001023
0,32025 12,64263412
5. Estime el límite de detección del análisis de plata de los datos del ejercicio 3.
LOD 0,034221952
6. Estime la concentración del oro en la muestra de agua de mar, y determine los límites
de confianza para esta concentración.
Concentración 48,03 ng/mL

Límites de confianza 48,03±2,248
ANEXOS
Enlace de documento de Excel donde se realizaron los cálculos, respectivos.
https://uceedu-
my.sharepoint.com/:x:/r/personal/kfcupichamba_uce_edu_ec/_layouts/15/Doc.aspx?sourc
edoc=%7B260014D4-3B98-4EA6-9F14-
3A16CA6D692D%7D&file=Tarea%202%2C%20instrumental.xlsx&wdOrigin=OFFICECOM-
WEB.START.REC&ct=1610330869776&action=default&mobileredirect=true
.

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1.10 Los datos de la tabla siguiente se obtuvieron durante una determinación

Pendiente (m) 0.070

b) Mediante la función ESTIMACIÓN LINEAL de Excel determinar la desviación estándar

1.11 Se determinaron exactamente alícuotas 5.00 ml de una disolución que contiene

b) con la gráfica de a) calcule la concentración de fenobarbital en la incógnita.

Concentración de analito = 0,410366625 µg/mL

d) Determine la concentración de fenobarbital a partir de la ecuación c).

0 = 𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 × 𝑣𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 + 𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 × 𝑣𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛

𝐶𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 = 𝟎, 𝟒𝟏𝟎𝟑𝟔𝟔𝟐𝟓 µ𝒈/𝒎𝑳

E) Los siguientes datos de calibración se obtuvieron mediante un método instrumental

a) Calcule la sensibilidad de calibración

Sensibilidad = m (pendiente) = 0.0670

b) Determine la sensibilidad analítica en cada concentración del analito.

c) Determine el coeficiente de variación de la media de cada uno de los conjuntos de

d) ¿Cuál es el límite de detección para el método?

a) Determine la pendiente y la ordenada en el origen de la gráfica de la calibración, junto

Variable X 1= m 0,025164286 0,02516±0,00152

Absorbancia C/ ug/mL Sc t*Sc Lc

Concentración 48,03 ng/mL

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