TEMA 3: CITOGENETICA

La citogenética es la ciencia dentro de la genética médica que estudia la estructura, la función y la

herencia de los cromosomas. En 1959, Lejeune en parís descubrió la primera enfermedad cuya causa
es una alteración en los cromosomas, que es el conocido síndrome de Down o trisomía 21, y se debe
a que el niño presenta 3 cromosomas 21, es decir presenta un cromosoma exceso del par número 21,
a ese exceso de material genético se deben las características físicas, fenotípicas y cognitivas que
presentan los pacientes.

El ADN dentro de la célula se organiza en forma de cuerpos, estos se denominan cromosomas, estos
no son iguales en todos los organizamos, particularmente en el ser humano son 23 pares de
cromosomas, es decir, 46 cromosomas de los cuales dos de ellos definen el sexo (cromosomas
sexuales). El ADN es una doble molécula, un polímero dinucleotido de forma paralela unidos con
enlaces covalentes fuertes y débiles.

Existe una unidad de compactación denominado histonas, este es un polímero de proteínas

(octamero) acentrales, es decir, no ha tenido modificaciones estructurales, de las cuales la histona
numero 1 no participa en la conformación del octamero pero poseen un papel importante en el eje de
gio estabiliza la asociación) que hace el nucleosoma, esta queda en el exterior. El nucleosoma es la
unidad básica de compactación del ADN (unidad estructural de la cromatina) formada por 4 histonas.
El ADN cuando la célula está en reposo está inmerso en el núcleo pero cuando la célula se activa
pasa por procesos de mitosis y meiosis generando células idénticas a la que la origino o cambiando su
conformación genética.

El nucleosoma está conformado por el octamero de histona (250 pares de bases) e histona 1. Estos se
enrrollan entre si dando un cuerpo más compacto llamado celenoide; los selenoides se van
comprimiendo a su vez formando la cromatida y la cromatida es lo que va a dar origen al
cromosoma. De un espesor de 2 nanomicras termina un cuerpo de 1400 nanomicras. El ADN está
formado por nucleótidos, que tienen un fosfato, una azúcar ribosa y una base nitrogenada. El ADN no
tiene proteínas.

Simón Flores
Es importante saber todo esto ya que las enfermedades genéticas ya que estas se clasificación en
enfermedades cromosómicas, enfermedades monogenicas y enfermedades de origen factorial.
Cuando la célula recibe la señal que indica estado de división celular el material genético se duplica
por lo que de forma equitativa se distribuye. El cromosoma esta conformado por ADN, fragmentos
de ARN y proteínas que ayudan a compactar o formar el octamero de histona que a su vez establece
el ee de gio.

Células somáticas: abarcan el 90% de las células de nuestro cuerpo.

CROMOSOMA: estructura que lleva los genes. Son filamentos o bastones de cromatinas que
aparecen contraídos durante la mitosis y la meiosis. Están formados por 15% ADN, 10% ARN y 75%
proteínas que le van a permitir enrroscarse

TIPOS DE CROMOSOMA

Cuando se estudiaron los cromosomas humanos se visualizó que los mismos entre ellos no eran
iguales y se organizaron de acuerdo a la posición de la conformación primaria llamada centrómero,
de acuerdo a la posición del centrómero, los cromosomas humanos se clasifican en tres tipos:
- Metacéntrico: dos brazos de tamaño similar
- Submetacentrico: implica la existencia de un brazo más largo que otro.
- Acrocentrico: presencia de un solo brazo.

Nota: las células epiteliales de la cara se renuevan 126 veces. El proceso de recambio celular con el
pasar del tiempo se hace más lento por ende aparece el envejecimiento.
Nota: los tumores poseen células capaces de replicarse indefinidamente. Las células tumorales
poseen una proteína llamada telomerasa.

CICLO CELULAR

El ciclo celular tiene diferentes fases, las células entran en división de acuerdo a la necesidad que
posee cada órgano. El ciclo celular se divide en: interfase o ase de reposo y división celular

Simón Flores
 INTERFASE: los filamentos de cromatina que se encuentran desenrollados en el núcleo se
duplican. Tiene 3 periodos:
- G1: se produce la acumulación de ATP necesario y el incremento de tamaño celular. Periodo
que más variación de tiempo presenta pudiendo durar días meses o años (células nerviosas o del
musculo esquelético no se dividen nuevamente permanecen en una fase G0, pasan toda su vida
en esa fase).

- Fase S: Fase de síntesis o replicación del ADN comienza cuando la célula adquiere el tamaño
suficiente y el ATP necesario. Existen ahora dos copias de la información genética de la célula.

- G2: Tiempo que transcurre entre la duplicación del ADN y el inicio de la mitosis. Se adquiere
energía. Los cromosomas comienzan a condensarse.

 DIVISION CELULAR – MITOSIS O MEIOSIS

- MITOSIS
 Metafase: es donde el material genético esta
duplicado, se forman los cromosomas y se
ubican en el polo ecuatorial (en el centro de la
célula). Los cromosomas bien definidos con
una doble cromatida en metafase se ubican en
el ecuador. El proceso de metafase es
ampliamente utilizado en el estudio de los
cromosomas.
 Anafase: en los cromosomas aparece el
centriolo, estos se dividen longitudinalmente
dispersándose hacia los polos.
 Telofase: la célula hace la cariocinesis, que es
la ruptura del citoplasma con la producción de
dos células germinales. Los cromosomas hijos se rodean de una nueva membrana nuclear y se
completa la división del núcleo.

- MEIOSIS: se da en dos pasos:

La primera división es prácticamente una mitosis, se duplican las cromatides, hay un fenómeno que
se llama crossing over o entrecruzamiento.

Primera división:
 Profase I: se emparejan los cromosomas homólogos, este apareamiento es un rasgo exclusivo
de la meiosis. Las cromatides no hermanas (paterno y materno) pueden entrecruzarse dando
lugar a un intercambio y recombinación del segmento y por lo tanto de los genes en ellos
localizados.
 Metafase I: los cromosomas homólogos emparejados se disponen en el plano central de la
célula.
 Anafase I: los filamentos del huso cromático se acortan pero no se separan las cromatides,
sino los cromosomas homólogos, emigran a polos opuestos.
 Telofase I: se producen dos células cada una con la mitad de los cromosomas homólogos
presentes en la célula original.

Simón Flores
La mitosis da clones, es decir, origina células hijas idénticas a la célula madre, mientras que la
meiosis origina células diferentes a la célula que la origino.

Crossing over: proceso de entrecruzamiento, es el intercambio de material genético durante la

meiosis, entre los parentales masculinos y femeninos, se rompen los quiasmas y vuelven a unirse para
permitir la recombinación de los genes. Este se realiza entre los cromosomas homólogos y
autosómicos no sexuales. Los seres humanos son híbridos, dado que tanto el hombre como la mujer
aportan la mitad de la carga genética de un nuevo individuo. En el crossing over cada cromosoma
homólogo de ambos padres intercambia información generando un cromosoma nuevo como
consecuencia de la combinación de segmentos denominado cromosoma recombinante. Se produce en
la primera división celular de la meiosis, en la segunda división celular hay una reducción de carga
genética, las cromatides se separan y la célula que antes tenía 23 pares de cromosomas ahora posee
23 cromosomas dado que la otra célula germinal proporcionada por el padre complementa el proceso
recombinante generando nuevamente los 23 pares de cromosomas (uno sexual) que a su vez activa el
proceso de mitosis generando el embrión.

Segunda división:

Tiene lugar como una mitosis normal pero sin duplicación del ADN. Ocurre la separación de las
cromatides que formaban los cromosomas, el resultado son 4 células que tienen la mitad de los
cromosomas de la célula original (cetaploide y reducción de la carga cromosómica. Un individuo
debe tener 46 cromosomas, pero si existe una alteración en la meiosis que produzca una ruptura
desigual, las células germinales no tendrán la misma carga cromosómica.

Existen diferentes puntos de entrecruzamiento en cada evento es por ello que cada individuo es
diferente entre ellos pertenecientes a una misma familia.

Quiasmas: puntos de intercambio de información.

REQUERIMIENTOS BASICOS EN LA OBTENCION DE CELULAS GERMINALES SALUDABLES:

- Buena Alimentación
- No ingerir alcohol
- No estresarse.
- No fumar.
- Realizar ejercicio.

INDICACIONES CLINICAS PARA ANALISIS CROMOSOMICO

- Problemas en el crecimiento y desarrollo temprano.
- Nacidos muertos y muerte neonatal.
- Problemas de fertilidad.
- Antecedentes familiares.
- Tumores.
- Embarazo en una mujer de edad avanzada.

Simón Flores
SEXO CROMOSOMICO: XX o XY, dependiendo de esto va a desarrollar las gónadas.
SEXO GONADAL: si está presente el gen SRY que esta situado en el cromosoma Y la gónada se
diferencia hacia testículo, si no está el gen SRY la gónada se diferencia hacia ovario, por tanto el gen
que está situado en el cromosoma Y identifica a que sexo se va a desarrollar un cigoto. Puede haber
un intercambio entre una región que hay ahí que se aparean el X y el Y y que una mujer tenga el gen
SRY por un intercambio, y al haber un intercambio esa mujer va a ser genotípicamente hembra pero
va a tener testículos.
TIPOS DE SEXO:
1. Cromosómico
2. Cromatinico
3. Gonadal
4. Genital
5. Social.
Las alteraciones cromosómicas se dan en la mayoría de las veces la mayoría de las veces por una
mala distribución de la carga cromsomica que puede ocurrir en meiosis 1 o meiosis 2.

NO DISYUNCION: es cuando las cromatides en metafase no se separan, las dos cromatides se van
hacia uno de los polos, el cual la célula tendrá duplicidad de la información genética o ausencia de
esa información ocasionando una enfermedad cromosómica. Puede ocurrir tanto en mitosis como en
meiosis. Esta célula defectuosa va a permanecer en el individuo normal, el problema va a ocurrir
cuando esta célula es fecundada o cuando fecunda un ovulo.
Si ocurre no disyunción en la primera división de meiosis hay dos posibilidades:
 Trisomía: 3 cromosomas 1, 2 de la célula afectada de uno de los padres y 1 cromosoma de la
célula normal del otro padre. Teniendo el nuevo ser formado 4 cromosomas.
 Nulosomia: teniendo el nuevo ser 45 cromosomas la mayoría de estos productos son
abortados en el primer trimestre del embarazo.
Si ocurre no disyunción en la segunda división de meiosis hay 3 posibilidades:
 Trisomía
 Nulisomia
 Una carga cromosómica normal.

Si ocurre en el segunda división de meiosis se obtendrán 3 posibilidades, una célula disomica que es
una célula alterada, una célula unisomica que le falta un cromosoma y 2 opciones normales.
Obteniéndose un 50% de probabilidad de tener un niño afectado y 50% de tener un niño sano. Estas
anomalías se relacionan a la edad de la madre aumentando la probabilidad de ocurrencia a partir de
los 35 años.

CARIOTIPO: es la organización de los cromosomas humanos desde el 1 hasta el 22 (Grupo A 1 - 3

Grupo B 4 y 5 Grupo C 6 – 12 Grupo D 13 – 15 Grupo E 16 – 18 Grupo F 19 y 20 Grupo G 21 – 22)
más los cromosomas sexuales y por grupos de acuerdo a la posición del centromero de acuerdo a las
técnicas de clasificación. Este permite:
1. Identificar si hay alteraciones en el número (hay 46 en total)

Simón Flores
 2. Ordenamiento sistemático de los cromosomas en orden decreciente de tamaño desde el par nº
1 que es el más grande hasta el par nº 22 que es el más pequeño incluyendo los cromosomas
sexuales que se ponen al final separados, y agrupados en 7 grupos denominados por letra de la
A a la G, en dependencia de la posición del centromero y de la longitud de los brazos

TECNICAS DE BANDEO:
 BANDAS Q: este método utiliza la tinción con mostaza de quinacrina o compuestos similares, y las
preparaciones se visualizan con microscopia de fluorescencia. Los cromosomas se tiñen con un
patrón específico de bandas brillantes y oscuras (bandas Q). Las bandas Q, así como las bandas C,
son particularmente útiles para detectar variantes ocasionales de la morfología o la tinción de los
cromosomas denominadas heteromorfismos. Estas variantes son generalmente benignas y reflejan
diferencias en la cantidad o el tipo de secuencias de DNA satélite en una determinada localización
del cromosoma.
 BANDAS C: tinción de giemsa en las zonas ricas en ADN repetitivo. Se utilizaba ampliamente
como prueba de paternidad. Esta técnica tiñe específicamente la región centromérica de cada
cromosoma y otras regiones que contienen heterocromatina constitutiva, es decir, las secciones de
los cromosomas 1q, 9q y 16q adyacentes al centrómero y la parte distal de Yq. La heterocromatina
es el tipo de cromatina que permanece en estado condensado y que se tiñe de oscuro en las células
en interfase.
 BANDAS R: se utiliza en el estudio de los telomeros, estas son las porciones distales de los
cromosomas, se tiñe de un color claro. Si los cromosomas reciben un tratamiento especial antes de
la tinción, las bandas oscuras y claras resultantes son las inversas de las obtenidas mediante los
métodos de bandas G o Q. Cuando se examinan regiones que se tiñen mal con las bandas G o Q, las
bandas R ofrecen un patrón más fácil de analizar. Éste es el método estándar en algunos
laboratorios, sobre todo de Europa.
 BANDAS G: se detiene el proceso en premetafase se obtiene la visualización de 1300 partes. Los
cromosomas se tratan con tripsina para desnaturalizar las proteínas cromosómicas y después con
tinción giemsa. Cada cromosoma se tiñe con patrones característicos de bandas oscuras y claras. Es
considerado un procedimiento especial al igual que bandeo C y R.

El centomero divide al cromosoma en dos partes:

 Brazos cortos o Petit (p)
 Brazos largos con la letra(q)
El centromero se simboliza por la letra (c) y el telomero es el extremo de los cromosomas este tienen
dos telomeros uno superior en el brazo p y uno inferior en el brazo q.

MUESTRAS QUE PERMITEN OBSERVAR LOS CROMOSOMAS

 Células epiteliales de la piel
 Hematíes por aspirado de medula osea.
 Espermatozoides.

Simón Flores
PREPARACION CITOGENETICA: se toma una muestra de sangre venosa en una zona
previamente esterilizada, esta se coloca dentro de un tubo con heparina para evitar la coagulación y
por ende lisis celular. Se agrega colchisina y se revisa a los tres días esto con la finalidad de detener
la división celular en metafase. En un medio de cultivo a 37°C. Este estudio se realiza a los linfocitos
T. Luego el contenido se transfiere a una centrifuga agregando una solución hipotónica para que el
resto de las células se edematicen y se rompan. Se agrega una sustancia de ácido acético con alcohol
cuya finalidad es congelar el citosol celular, se realiza lavados posteriores con la misma solución para
eliminar los elementos formes hasta que queda el objeto bajo estudio, luego se agregan 5 cc de ácido
acético con alcohol mezclándolo y de ahí se colocan unas gotas en una lámina portaobjeto a
diferentes alturas para obtener una dispersión de la célula sin sobreponerse una sobre otra. Se observa
a temperatura ambiente. Antes de visualizarlo en el microscopio se agrega una sustancia llamada
antitripsina que rompe los enlaces de las proteínas y luego tinción de gimsa, esta entrara entre las
proteínas de las histonas.

ENFERMEDADES DE CAUSA GENETICA

 ENFERMEDADES MONOGENICAS O GENOPATIAS: quiere decir que la alteración está en
un gen y se transmiten siguiendo las leyes de Mendel (enfermedades mendelianas); el ADN es una
moléculasusceptible de mutaciones
 MUTACION: cambiar constante y abrupto del ADN por factores propios de la replicación de la
replicación o por factores externos.
 ENFERMEDADES MULTIFACTORIALES: son las enfermedades comunes del adulto,
diabetes, obesidad, dislipidemia, esquizofrenia, trastornos bipolares el asma todas esas
enfermedades comunes del adulto que son de causa genética. Se deben a la expresión genética
interactuando con el ambiente.
 ENFERMEDADES MITOCONDRIALES: se debe a alteraciones del ADN que se encuentra en
las mitocontrias ya que no solamente hay ADN en el núcleo.

TÉCNICA DE FISH: es una mezcla de una técnica citogenética con una técnica de Biología
Molecular (hibridación fluorescente in situ). Se realiza una lámina de cromosomas. El FISH se utiliza
para identificar microdelecciones que no se pueden observar por las técnicas comunes, incluyendo la
de alta resolución. Una vez que se tenga identificado el pedazo que falta de cromosoma, se le
adiciona un Fluorocromo (rojo, verde, azul), luego se somete al calor para desnaturalizarlo, se separa
el ADN y ese segmento de ADN marcado con un Fluorocromo que se quiere estudiar va a
Hibridizarse, es decir, va a unirse de manera complementaria si encuentra la secuencia
complementaria en el ADN del caso que se está estudiando.

Por lo tanto el ADN tiene que estar en estadio simple y se hibridizan. Cuando se baja la temperatura
y la doble S esté hibridizada, se va a observar el segmento del ADN del individuo marcado con el
fluorocromo en el microscopio de fluorescencia. Se está aquí uniendo la técnica simple de
citogenética con una técnica de biología molecular.

Nota: Si en un cromosoma se ve el fluorocromo y en el otro no se ve, esto quiere decir que no

hibridizó y por lo tanto en dicho cromosoma falta una región.

Simón Flores