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Enfermedades de Aves - Sem-02 - Sesión-04 - TOMA DE MUESTRAS Y CASOS DE MALA PRAXIS

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ENFERMEDADES

DE LAS AVES
Semana 2
SECCIÓN DE REFERENCIA

RESULTADO DE APRENDIZAJE DE LA SESIÓN

• Al finalizar la sesión, el estudiante juzga la forma correcta de colectar sangre,


plasma, hisopados cloacales, órganos, heces, raspados de piel y secreciones y cómo
estas muestras deben conservarse para realizar los análisis laboratoriales que
corroboren el diagnóstico presuntivo de una enfermedad, mediante el análisis de videos
e imágenes como casos de mala praxis.
TOMA DE MUESTRAS
EN AVES
SECCIÓN DE REFERENCIA

REFLEXIÓN DESDE LA EXPERIENCIA

• ¿Has observado alguna vez el envío de


muestras?
• ¿Qué consideraciones se deben tener para el
envío de muestras?
• Para el análisis de títulos de anticuerpos ¿qué
se debe enviar al laboratorio suero o plasma?
MANERA APROPIADA PARA RECOLECTAR Y
MANEJAR LAS MUESTRAS PARA
DIAGNÓSTICOS
SEROLOGÍA Y TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE

• Las muestras para diagnósticos se utilizan


para determinar el estado de salud o para
identificar patógenos específicos en lotes
de pollonas, ponedoras y reproductoras.
• Las pruebas de rutina incluyen muestras
de sangre, suero, tejidos y muestras de
gasas o hisopos en formalina: traqueal,
orofaríngeal, cloacal, de órganos y
articulaciones.
ENTREGA DE MUESTRAS
Cuando se envían muestras a un laboratorio de diagnóstico, es importante
proporcionar la información completa y relevante del lote en el formulario de
presentación al laboratorio. La información crítica que debe acompañar a
todos los envíos de muestras para diagnóstico incluyen:
• Identificación y ubicación del lote
• Edad del lote
• Fecha en que se tomaron las muestras
• Programa de vacunación
• Historia del lote, incluyendo problemas de salud o de producción

Esta información es esencial para que el veterinario y la persona que hace el diagnóstico
puedan hacer una interpretación significativa de los resultados serológicos o del diagnóstico y
proporcionar recomendaciones que mejoren la salud y/o la producción del lote.
SEROLOGÍA

La serología es el estudio de los niveles de anticuerpos del suero, conocidos


también como títulos.

El sistema inmunológico desarrolla anticuerpos que circulan en la sangre después de que


el ave ha sido expuesta a un antígeno, ya sea por una vacuna o por exposición al patógeno
de una cepa de campo.
Los anticuerpos se encuentran en la porción del suero de la sangre (la parte líquida
después de que se forma el coágulo).

El suero esta libre de células de sanguíneas y de factores coagulantes.


SEROLOGÍA - IMPORTANCIA

Los títulos de anticuerpos en el suero se utilizan para monitorear


la eficacia de los programas de vacunación, evaluar los desafíos
de campo, o diagnosticar enfermedades del lote.

❑El valor de esta información depende de la


calidad de las muestras de suero que recibe
el laboratorio.
❑Las muestras de mala calidad llevan a
resultados erróneos y engañosos.
❑La selección de las aves para tomar las
muestras de sangre, las técnicas utilizadas
para extraer la sangre, y la manipulación de
las muestras de sangre y suero influyen en los
resultados del laboratorio.
Normas Apropiadas para Recolectar Suero
Seleccione aves representativas normales (10 a 20 muestras de suero), a menos que
este trabajando en un diagnóstico.
✓ Tome de 2 a 3 ml de sangre de cada ave (aguja mejor que bisturí)
✓ No dañe las muestras forzando el paso de la muestra de sangre de la aguja al tubo.
✓ Asegúrese que la sangre corra por un lado del tubo y coloque los tubos casi planos
hasta que se forme el coágulo.
✓ Deje la sangre en el tubo de 10 a 12 horas a una temperatura aproximada de 27°C.
✓ La sangre no debe manipularse o agitarse bruscamente mientras se forma el coágulo o
va a ocurrir la hemólisis.
✓ Remueva el coágulo cuidadosamente, o saque el suero.
✓ No envíe las muestras sin remover antes el coágulo.
✓ Mantenga las muestras de suero frías y envíelas inmediatamente al laboratorio
en un paquete con hielo o en un paquete frío.
Selección de Aves
✓Para pruebas SEROLÓGICAS DE RUTINA, las muestras de
suero deben recolectarse de aves normales y sanas. No
utilice las aves de descarte, enfermas o que
aparentan estar estresadas, ya que sus títulos no Cuando un lote se inscribe
representan típicamente el estado general de la salud en un programa de
del lote. pruebas de rutina, se
recomienda tomar las
muestras de sangre de las
✓ Durante la investigación de una ENFERMEDAD mismas aves (o de las
POTENCIAL, las muestras de sangre deben tomarse de mismas jaulas)
las aves que están exhibiendo los signos clínicos o
lesiones del patógeno o síndrome sospechado.

✓ Seleccionar aves de diferente lugares del galpón.


Número de Muestras

Deben tomarse veinte muestras de suero de buena calidad para el


perfil de rutina del lote y para la investigación de enfermedades; sin
embargo, un mínimo de 10 muestras puede ser suficiente para
estimar los títulos de anticuerpos.
Edades para tomar las muestras

• Micoplasma gallisepticum (MG)


• Micoplasma sinoviae (MS)
• Enfermedad de Newcastle (NDV)
• Bronquitis infecciosa (IB),
• Encefalomielitis aviar (AE)
• Influenza aviar (AI).
Edades para tomar las muestras
• Durante la investigación de un brote de enfermedad, se
deben tomar muestras de sangre cuando se observan por
primera vez los signos clínicos de la enfermedad, seguido de
una muestra de sangre adicional de las mismas aves de 3 a 5
semanas después.

• La comparación de los títulos de estas muestras de suero


puede demostrar cambios significativos en los títulos para
un patógeno sospechoso.
Volumen de la Muestra de Sangre
•Utilizando una técnica apropiada para la recolección y manipulación,
2 a 3 mililitros (ml o cc) de sangre producirán 1 a 1.5 ml de suero. Este
volumen de suero es suficiente para hacer las pruebas de rutina de
ELISA para la enfermedad de Newcastle, bronquitis infecciosa,
enfermedad infecciosa de la Bursa (IBD Gumboro)
Equipo utilizado para extraer sangre

• Se utilizan jeringas desechables estériles de 3 o 5 cc dependiendo del


tamaño de la muestra que se va obtener.
• El tamaño de la aguja depende del sitio anatómico utilizado para
extraer la sangre.
SECCIÓN DE REFERENCIA

Equipo utilizado para extraer


sangre
• Utilice siempre agujas desechables y
reemplácelas cada 5 a 10 aves. Las agujas desechables deben
cambiarse cada 5 a 10 aves para
• Las agujas sin filo causan trauma en el tejido y es más prevenir trauma en el tejido y la
difícil entrar en la vena. contaminación cruzada.

• Enjuague la jeringa con agua destilada después de


usarla entre ave y ave para prevenir que la aguja se
tape con sangre.
• Los tubos estériles de plástico o vidrio de 3 ml con
tapas herméticas son ideales para la recolección y Las jeringas desechables de 5 ml y
las agujas calibre 22 son ideales para
almacenamiento de sangre, ya que permiten la
extraer sangre de la vena del ala de
coagulación adecuada de las muestras. las aves adultas.
Tubo de plástico con tapa,
ideal para separar el suero
y transportar la muestra.
Volumen apropiado (1.0 ml),
el suero es de color ambar
transparente.
MÉTODOS UTILIZADOS PARA EXTRAER SANGRE

1. Método utilizando una aguja en la vena (braquial) del ala

▪ La vena braquial del ala es un sito aceptable para extraer


sangre en aves de 4 semanas de edad o más.
▪ En las aves más jóvenes, la vena es demasiado pequeña para
poder extraer sangre eficientemente.
2. Punción de la vena utilizando un bisturí

Aunque este método es más rápido para recolectar sangre, tiene el potencial de causar mayor
trauma que si se utiliza una aguja y una jeringa.

1. Se utiliza una navaja #11 insertada en el mango de un bisturí #3 o #4 para realizar la punción
de la vena braquial justo arriba de la articulación del codo.

2. Se utiliza un tubo para recolectar la sangre cuando la hemorragia sale de la cortada. Con este
método es más probable que la muestra se contamine con bacteria, moho, etc. Si se limpia la
piel con alcohol antes de cortar se puede limitar la contaminación.

3. Dependiendo del tamaño del corte, este método puede causar un trauma significante (perdida
de sangre, estrés, etc.) al ave, además implica el riesgo de una ruptura de la arteria braquial y
del nervio.
3. Métodos de punción cardiaca
1. Sacar sangre directamente del corazón puede ser una forma rápida de obtener
sangre y permite recolectar grandes volúmenes de sangre (4 a 10 ml).

2. Además, se pueden obtener muestras de sangre más limpias comparadas con el método de la
vena del ala.

3. El método de punción cardiaca solo debe llevarse a cabo por personal bien entrenado.

4. Una mala técnica en la colocación de la aguja y los repetidos intentos para localizar el corazón
pueden resultar en una hemorragia fatal; sin embargo, este riesgo se minimiza con la práctica.

5. Si existe la sospecha de una hemorragia fatal, el ave debe ser humanamente sacrificada sin
demora.
MANEJO APROPIADO DE LAS
MUESTRAS DE SANGRE
1. Una vez obtenida la sangre en la jeringa, la muestra debe tranferirse cuidadosamente a un tubo para que
se forme el coágulo. La coagulación se produce cuando las células en la sangre se unen por medio del
proceso de coagulación y se separa de la porción líquida de la sangre (suero).
2. Debe remover la aguja de la jeringa antes de ponerla en el tubo de coagulación. El forzar la sangre de
nuevo a través de la aguja puede romper los glóbulos rojos (hemólisis), lo que resulta en una muestra de
mala calidad.
3. Inyecte lentamente la sangre en el tubo de coagulación, permitiendo que corra sobre uno de los lados
del tubo, lo cual ayuda a la formación del coágulo. La sangre debe colocarse dentro del tubo antes de que
inicie el proceso de coagulación.
4. No mueva los tubos mientras ocurre el proceso de coagulación. Los tubos deben colocarse en forma casi
plana (horizontalmente) para tener una mayor superficie mientras se forma el coágulo.
RECOLECCIÓN Y MANEJO DEL SUERO

• Después de que el suero se haya


separado del coágulo de sangre, saque el
suero del tubo de coagulación y
colóquelo en otro tubo, o saque el
coágulo del tubo con un palito de
madera, (como un palillo de dientes),
dejando únicamente el suero en el tubo.
• El coágulo debe manejarse
cuidadosamente durante el proceso de la
separación del suero. Las muestras
turbias, viscosas o con hemólisis no
deben enviarse al laboratorio.
Recolección en hisopos
• El uso de hisopos de algodón o de gasas son métodos efectivos, no invasivos para
tomar muestras de Micoplasmas, bacterias, y muchos otros virus. (por ejemplo,
bronquitis infecciosa, influenza aviar, laringotraquetis infecciosa, Newcastle).
• Hisopos orales/anales, traqueales, cloacales y de órganos y articulaciones
afectados.
HISOPADOS
Se recomienda confirmar el hisopo del tipo
apropiado y la necesidad del medio de
enriquecimiento para la recolección de la
muestra y el transporte. La comunicación
previa con el laboratorio es importante para
asegurar la manipulación correcta y acelerar
el proceso.
Cuando envíe muestras de hisopos en un
medio líquido, tales como infusión de
cerebro-corazón (BHI), muchos
laboratorios requieren que el hisopo actual
no este incluido en el tubo.

El procedimiento apropiado en este caso es mover


cuidadosamente el hisopo en el medio para que se
desprenda el material y después presione el hisopo
contra el vidrio del tubo antes de sacarlo para exprimir el
exceso de líquido del hisopo que puede contener material
patógeno.

Dependiendo de la prueba, se pueden poner juntos de 5 a


11 hisopos con muestras individuales
MUESTRA DE ÓRGANOS
RASPADO DE PIEL

❑ En dirección contraria
❑ Muestras con heridas,
raspar bordeando la
herida
MUESTRA DE ALIMENTO
MUESTRA DE CAMA
MUESTRA DE AGUA
SECCIÓN DE REFERENCIA

INTEGREMOS LO APRENDIDO

• ¿Para qué evaluamos el plasma sanguíneo?

• ¿Qué podemos evaluar a nivel intestinal?

• ¿Para qué se toma muestra de secreciones?

• ¿Cómo se deben conservar las muestras de suero

sanguíneo?
CASOS PRÁCTICOS
SECCIÓN DE REFERENCIA

APLIQUEMOS LO APRENDIDO
• Leer y resolver los siguientes casos prácticos sobre toma de muestras y las consideraciones que
se deben considerar para el envío de muestras.
SECCIÓN DE REFERENCIA

CASO 1:
Llegan al laboratorio 50 pollitos Cobb de 1 día de edad para realizar pruebas de serológicas de:
enfermedad infecciosa de la Bursa (IBD Gumboro), y el método de obtención de sangre elegido
por la persona a cargo en el laboratorio es:

Punción venosa en vena del ala


Para lo cual planea usar
• 50 Jeringas desechables de 5 mL
• 50 tubos sin anticoagulante
Ave de 1 día de
edad
SECCIÓN DE REFERENCIA

CASO 2:
Llegan al laboratorio 50 muestras de sangre de gallinas de la raza Dekalb Brown de 24 semanas,
para realizar pruebas de serológicas para Enfermedad de Newcastle (NDV), Bronquitis infecciosa
(IB) e influenza aviar (AI). Indican que el método de obtención de sangre fue punción alar.

Punción venosa en Entrega de


Aves adultas
vena cubital muestra
SECCIÓN DE REFERENCIA

CASO 3:
El día de hoy, Granja A enviado al laboratorio 50 muestras de sangre de gallinas de la raza
Dekalb Brown de 24 semanas, para medir títulos de anticuerpos contra Enfermedad de
Newcastle (NDV), Bronquitis infecciosa (IB) e influenza aviar (AI). Indican que el método de
obtención de sangre fue punción en vena del ala.

Punción venosa en
Aves adultas Entrega de muestra
vena cubital
SECCIÓN DE REFERENCIA

CASO 4:
El día de hoy, Granja B enviado al laboratorio 20 muestras de sangre de gallinas de la raza
Dekalb Brown de 24 semanas, para realizar pruebas de serológicas Enfermedad de Newcastle
(NDV), Bronquitis infecciosa (IB) e influenza aviar (AI). Indican que el método de obtención de
sangre fue punción en vena del ala.

Punción venosa en
Aves adultas Entrega de muestra
vena cubital
SECCIÓN DE REFERENCIA

CASO 5:
El día de hoy, Granja C enviado al laboratorio 20 muestras de sangre de gallinas de la raza
Dekalb Brown de 24 semanas, para realizar pruebas de serológicas de: Enfermedad de
Newcastle (NDV), Bronquitis infecciosa (IB) e influenza aviar (AI).

Punción venosa en
Aves adultas Entrega de muestra
vena cubital
SECCIÓN DE REFERENCIA

CASO 6:
Hoy llegaron al laboratorio muestras de distintos órganos para evaluación histopatológica

Recepción del
laboratorio
SECCIÓN DE REFERENCIA

INTEGREMOS LO APRENDIDO 2

• ¿Según la edad de ave que método obtención


de sangre se puede utilizar?
• ¿Qué colores de suero deben ser aceptados?
• ¿Qué se debe cumplir para que se de un
correcto envío de muestras de órganos?
SECCIÓN DE REFERENCIA

ACTIVIDAD ASINCRÓNICA

Manera apropiada para recolectar y manejar las


muestras para diagnósticos: Parte 4 Recolección y
CONTROL DE LECTURA envío de tejidos para histopatología.

Hy-Line International. (2017).


SECCIÓN DE REFERENCIA

REFERENCIAS
• Hy-Line International. (2017). Manera apropiada para recolectar y manejar las muestras para diagnósticos. Disponible
en: https://www.hyline.com/Upload/Resources/TU%20SER%20SPN.pdf
• Machado, A., Luciano, R., Iba, A., Cardoso, A. & Castiglioni , E. (2017). Aves. En PANAFTOSA, Manual veterinario de
toma y envío de muestras: manual técnico. (p.p.144-173), Brasil.
MUCHAS GRACIAS

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