Informe Biok 6 PDF

UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR
CARRERA: MEDICINA HUMANA Y OBSTETRICIA
PRÁCTICA DE LABORATORIO
CURSO: BIOQUÍMICA
PROFESORA: MUÑOZ CABANA, MILAGROS YOVANA
INFORME DE PRÁCTICA
PRÁCTICA N°: 6
INTEGRANTES:
- Pierre Alfaro Peña
- Michelle Romero Ichpas
- Andrade Tuanama Karen
- Lozano Hilario Aylen
- Quispe Lopez Jhoselin
HORARIO DE PRÁCTICA: 5:10 p.m A 7:00 p.m
FECHA DE REALIZACIÓN: 27/04/2023
FECHA DE ENTREGA: 04/05/2023
LIMA, PERÚ
2023
DETERMINACIÓN
DE UREA
1. OBJETIVOS:
1.1. Determinar la concentración de urea en el suero sanguíneo.
1.2. Interpretar los resultados obtenidos de urea de acuerdo con valores de
referencia.
1.3. Relacionar el significado clínico de los resultados de la prueba.
INTRODUCCIÓN:
El catabolismo de los aminoácidos libera moléculas de nitrógeno en forma de

amonio, este exceso de nitrógeno es transportado al hígado y riñones, para
posteriormente ser eliminado por el organismo mediante la orina. El ciclo de la urea
consiste en la eliminación de este exceso de nitrógeno mediante la síntesis de la
urea en el hígado.
El ciclo de la urea o de la ornitina ocurre en el hígado, más específicamente en los

hepatocitos tanto en la mitocondria (fase 1) y citoplasma (fase 2) de la célula y
comprende la síntesis de urea mediante el requerimiento de amonio, dióxido de
carbono, aspartato y bicarbonato. La enzima que va a catalizar la primera reacción
es la carbamoil fosfato sintetasa que requiere de N – acetil glutamato como
activador, donde se va a requerir dos moléculas de ATP, esto va a dar como
producto al carbamoil fosfato que se va a continuar con el proceso en forma de
citrulina en el citoplasma. (Ver imagen 1)
IMAGEN 1: CICLO DE LA ÚREA
La ecuación de la formación de urea se resume en:

NH3 + CO2 + Aspartato + 3 ATP + 2 H2O ----> Urea + fumarato + 2 ADP + AMP + otros subproductos.
Es importante la regulación de los niveles de nitrógeno en el organismo, ya que un
exceso puede crear toxicidad del amoniaco, resultando en una hiperamonemia, y el
déficit el desequilibrio del organismo e indicador de alguna enfermedad hepática.
La excreción de urea por la orina depende fundamentalmente de la ingesta proteica.

Un incremento de urea en sangre puede ocurrir a causa de una probable disfunción
renal, es decir, de azoemia pre renal, renal, post renal y de uremia.
Para determinar el nivel de urea en suero se utiliza la proposición de Faucet y Scott

y de la enzima ureasa, resultando en la degradación de urea en amonio, dióxido de
carbono y una molécula de agua. La segunda reacción se va a utilizar el amonio
obtenido de la degradación de urea y reaccionara con salicilato e hipoclorito,
resultando en indofenol que ayudara en la determinación de urea en el suero
mediante la absorbancia de su tinción de color verde, que luego va a ser comparado
según los rangos referenciales de urea, que son de 10 a 50 mg/dL,
Otro indicador en sangre es el de nitrógeno ureico en sangre(BUN), una

herramienta útil para evaluar la función renal. Los riñones son los encargados de
eliminar la urea y otros productos de desecho del cuerpo a través de la orina. Si los
niveles de nitrógeno ureico en la sangre son altos, puede indicar que los riñones no
están funcionando adecuadamente y no están eliminando los productos de desecho
del cuerpo de manera eficiente.
La prueba de nitrógeno ureico en sangre también se utiliza para evaluar la

hidratación del cuerpo. Cuando una persona está deshidratada, los niveles de
nitrógeno ureico pueden aumentar debido a que el cuerpo retiene más líquido.
También se utiliza para evaluar la función hepática, ya que el hígado es el
responsable de producir urea, los valores normales de nitrógeno ureico son de 4,5 a
22,7 mg/dl.
En la uremia, los niveles de BUN suelen estar muy elevados, junto con otros
productos de desecho en la sangre. Los síntomas de la uremia pueden incluir fatiga,
debilidad, pérdida de apetito, náuseas, vómitos, cambios en el estado mental,
convulsiones y coma.
Es importante realizar un diagnóstico temprano de la uremia, ya que puede ser una
afección potencialmente mortal. El tratamiento puede incluir diálisis, que es un
proceso para eliminar los productos de desecho de la sangre de manera artificial, o
un trasplante de riñón. Además, se pueden utilizar medicamentos para tratar las
complicaciones de la uremia y mantener la función renal restante.
En resumen, el BUN es una prueba sanguínea que se utiliza para evaluar la función
renal y se puede utilizar para diagnosticar la uremia. Los niveles de BUN suelen
estar muy elevados en la uremia, junto con otros productos de desecho en la sangre,
lo que puede causar una variedad de síntomas graves. La detección temprana y el
tratamiento adecuado son fundamentales para prevenir complicaciones graves y
potencialmente mortales.
2. MATERIALES:
2.1. Para estudiantes:
■ 01 gradilla
■ 05 tubos de ensayo 13x100mm
■ 01 piseta con agua destilada
■ 02 pipeta volumétrica o graduada 5 mL
■ 02 pipeta volumétrica o graduada 10 mL
■ 02 propipetas
2.2. Para profesor:
■ 01 suero tubo de tapa rosca 2 mL
■ Estuche comercial para determinar urea (01 estándar de urea
(0.60g/L) frasco 1 mL; 01 ureasa frasco 1 mL; 01 reactivo de trabajo 1
frasco 12 mL; 01 reactivo de trabajo 2 frasco 12 mL)
■ Espectrofotómetro
IMAGEN N°2: ESPECTROFOTÓMETRO
■ 04 micropipetas 10 – 100 µL y/o de 5 – 50 µL

IMAGEN N°3: ELABORACIÓN DEL SISTEMA
■ 06 puntas descartables de micropipetas

■ 06 cubetas para espectrofotometría
IMAGEN N°4: TRASVASE DE TUBO A CUBETA
■ Baño maría 37°C
■ Vórtex
3. MÉTODOS:
○ TABLA N°1: Se elaboró el siguiente sistema (IMAGEN N°3)
Blanco (B) Muestra Estándar (St)
desconocida
(x)
Estándar de - - 20
úrea(µL)
Suero(µL) - 20 -
Ureasa(gota) 1 1 1
Se mezcló agitando e incubó a 37°C por 5 minutos.
IMAGEN N°5: TUBO 1 Y 2 EN CUBETAS
IMAGEN N°6: INCUBACIÓN A 37°
TABLA N°2: TABLA DE SISTEMA

B X St
Reactivo 1 (mL) 1 1 1
Reactivo 2 (mL) 1 1 1
Se mezcló e incubó a 37°C por 5 minutos, para posteriormente leer en el
espectrofotómetro a 540 nm.
IMAGEN N°7: LECTURA DEL ESPECTROFOTÓMETRO
IMAGEN N°8: COLORACIÓN VERDOSA DEL TUBO 1 Y 2 RESPECTIVAMENTE
4. RESULTADOS:
4.1. Después de realizar el experimento se obtuvo como absorbancia de la
muestra estándar a 1.744 y la de la muestra problema a 0.556. Para lo cual
se utiliza la siguiente fórmula:
IMAGEN N°9: FÓRMULA PARA HALLAR FACTOR DE CALIBRACIÓN
Hacemos los cálculos para la concentración de la muestra problema es
igual al producto del factor de calibración, que es igual a la división
entre concentración del estándar y la absorbancia del estándar, con la
absorbancia de la muestra problema para determinar urea y nitrógeno
ureico:
IMAGEN N°10: CÁLCULO CONCENTRACIÓN DE UREA
IMAGEN N°11: CÁLCULO CONCENTRACIÓN DE NITRÓGENO UREICO
4.2. En el caso de la úrea obtuvimos como resultado 21.04 mg/dl, el cual

se encuentra en el rango de valores normales
4.3. En el caso del nitrógeno ureico obtuvimos 9.56 mg/dl, el cual se
encuentra en el rango de valores normales.
5. DISCUSIONES:
5.1. Después utilizar el espectrómetro (IMAGEN N°2), que funciona bajo el
principio de Faucet y Scott, se determinan los valores de la concentración de
la urea y el nitrógeno ureico, el cual tienen un rango de 10-50 mg/dL y
4,5-22,7 mg/dL respectivamente.
5.2. Al colocar los reactivos dependiendo a cada tubo (1 o 2), podremos visualizar
el complejo verde y a partir de ello podemos sacar la conclusión que en el
tubo 2 se observa mayor concentración de urea (IMAGEN N°8).
5.3. Al momento de colocar los reactivos respectivos a los tubos 1 y 2, se debe
incubar 2 veces en un tiempo de 5-10 minutos (hecho en clase) a una
temperatura de 37° (IMAGEN N°6).
5.4. Posteriormente al colocar el contenido del tubo 1 y 2 a las cubetas (IMAGEN
N°5), se debe llevar al espectrofotómetro para indicar la absorbancia
estándar y de la muestra problema para poder hallar mediante cálculos
matemáticos la concentración puntual de la urea y del nitrógeno ureico
(IMAGEN N°7). Dando como resultado niveles normales de urea serica y
nitrógeno ureico en sangre.
6. CONCLUSIONES
6.1. Se determinó que la concentración de urea en el suero sanguíneo es de
21.04 mg/dl y de nitrógeno ureico es de 9.56 mg/dl.
6.2. Se concluyó que los resultados obtenidos de urea sérica y nitrógeno ureico
de acuerdo con valores de referencia se encuentran normales.
6.3. Se relacionaron los niveles normales de ureico y nitrógeno ureico con una
función renal normal y se concluye que el cuerpo está eliminando
adecuadamente los productos de desecho de la urea.
7. RECOMENDACIONES:
7.1. Tener en cuenta que 1 mL o 1000 μL equivale a 20 gotas, acabada la
mención al preparar el reactivo de trabajo, se utilizó para mezclar 1mL de
Reactivo Salicilato con 50 uL de Suspensión de Ureasa, el cual se colocó 10
gotas (Lo mencionado, los profesores del laboratorio se adelantaron para
poder hacer el experimento mucho más rápido y solo explicaron cómo es que
lo hicieron).
7.2. Se puede reemplazar el baño María a 36°C por sujetarlo con las manos, ya
que la temperatura corporal tiene similar alcance.
7.3. Otra recomendación que se debe tomar en cuenta es que a mayor intensidad
del color determina la cantidad que hay a simple vista sobre la urea.
7.4. Al hallar la concentración de urea y del nitrógeno ureico, se logra observar
que lo único que se diferencia entre los 2 tubos de ensayo es el estándar,
esto es debido a que los demás (absorbancia) se encuentran en la misma
cubeta.
8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA
Institutos Nacionales de Salud. (2021). Uremia. MedlinePlus.
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/000458.html
Asociación Nacional del Riñón. (2021). Pruebas de función renal.
https://www.kidney.org/atoz/content/blood-urea-nitrogen-bun
Biblioteca Nacional de Medicina. (2021). Blood Urea Nitrogen (BUN). MedlinePlus.
https://medlineplus.gov/lab-tests/blood-urea-nitrogen-bun-test/

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FECHA DE ENTREGA: 04/05/2023

El catabolismo de los aminoácidos libera moléculas de nitrógeno en forma de

El ciclo de la urea o de la ornitina ocurre en el hígado, más específicamente en los

IMAGEN 1: CICLO DE LA ÚREA

La ecuación de la formación de urea se resume en:

La excreción de urea por la orina depende fundamentalmente de la ingesta proteica.

Para determinar el nivel de urea en suero se utiliza la proposición de Faucet y Scott

Otro indicador en sangre es el de nitrógeno ureico en sangre(BUN), una

La prueba de nitrógeno ureico en sangre también se utiliza para evaluar la

■ 04 micropipetas 10 – 100 µL y/o de 5 – 50 µL

■ 06 puntas descartables de micropipetas

IMAGEN N°6: INCUBACIÓN A 37°

TABLA N°2: TABLA DE SISTEMA

IMAGEN N°8: COLORACIÓN VERDOSA DEL TUBO 1 Y 2 RESPECTIVAMENTE

IMAGEN N°11: CÁLCULO CONCENTRACIÓN DE NITRÓGENO UREICO

4.2. En el caso de la úrea obtuvimos como resultado 21.04 mg/dl, el cual

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