MUESTRAS DE SALIVA

REALIZADO POR: LIDIA GUERRERO BEJARANO

INDICE

1. La saliva: definición, formación y características-----------------------------------------Pag. 2

A) Definición----------------------------------------------------------------------- Pag. 3

B) Formación----------------------------------------------------------------------- Pag. 4

B.1) Tipos de glándulas ---------------------------------------------------------- Pag.

2. Análisis de la saliva.---------------------------------------------------------------------- Pag.

3. Muestras de saliva.----------------------------------------------------------------------- Pag.

4. El futuro --------------------------------------------------------------------------------- Pag.

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 LA SALIVA: definición, formación y características.

A) DEFINICIÓN

La saliva según el Diccionario de Términos Médicos de la Real Academia Nacional de

Medicina (2011) se define como: “El líquido segregado por las glándulas salivales, de
viscosidad variable, según el estado de hidratación y la fase digestiva; de composición
parecida a la del plasma, contiene agua, iones, mucina, proteínas plasmáticas, leucocitos y
detritos celulares. Sirve para lubricar los alimentos, facilitando su masticación y la formación
del bolo alimenticio e inicia la digestión del almidón gracias a su contenido en α-amilasa.
Ejerce además un efecto de arrastre y limpieza de los dientes y la mucosa bucal”.

A nivel odontológico se define como un líquido biológico de composición compleja que

facilita las interacciones entre las células del huésped, los microorganismos bucales y los
moduladores inmunológicos con el principal propósito de mantener el estado de salud bucal.
Dentro de los componentes salivales, las proteínas son fundamentales por ser responsables de
las principales funciones de la saliva. Se identifican entre 2.000 a 2.600 proteínas y péptidos
diferentes en su composición. Entre ellas, una alta proporción son glucoproteínas, como las
mucinas, proteínas ricas en prolina e inmunoglobulinas, aglutininas, lactoferrina, cistatinas y
lisozima. Además la saliva posee péptidos de potente actividad antimicrobiana y de
protección a los tejidos minerales, como la catelicidina LL-37, α y β defensinas, histatinas y
estaterinas.

Desde hace dos mil años la medicina tradicional china se refiere a la sangre y la saliva como
“hermanos” en el cuerpo y que tienen el mismo origen, destacando que los cambios en la
saliva eran indicativos del bienestar del paciente.
Desde finales del siglo XIX, se conoce la influencia de la saliva sobre la digestión, y a lo
largo del siglo XX, se investigó sobre las propiedades y composición de la saliva pero no es
hasta los últimos 40 años, cuando se comienza a indagar sobre el valor de la saliva como
material de muestra en las determinaciones de laboratorio, y es principalmente a partir de
1999, cuando se desarrollan grandes iniciativas para la investigación de biomarcadores en

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saliva. El National Institute of Dental & Craniofacial Research (NIDCR) de USA, establece y
financia diversos premios, con objeto de fomentar el desarrollo de sistemas de microfluidos y
micro/nanoelectromecánica (MEMS/NEMS) para el diagnóstico de biomarcadores en saliva.
Varios de estos proyectos se han focalizado en el desarrollo de tecnologías para medida de
DNA, transcripción de genes (RNAm), proteínas, electrolitos y pequeñas moléculas presentes
en saliva que puedan correlacionarse con el estado de salud y/o bienestar, con alta
sensibilidad y especificidad.
La capacidad para monitorizar, ver cómo y cuándo una enfermedad comienza, cómo progresa
y observar el resultado del tratamiento a través de técnicas no invasivas es el fin más deseable
en la promoción del estado de salud y bienestar. Para ello se precisa:

1. Que existan biomarcadores específicos asociados al estado de salud o enfermedad.

2. Que estos biomarcadores se puedan detectar y monitorizar de forma no invasiva.
3. Que existan tecnologías que discriminen estos biomarcadores.

El segundo requisito lo cumple a la perfección la saliva, y en el primer y tercer prerrequisito

se focalizan los trabajos de investigación en saliva.

Por ejemplo, en odontología en los últimos años se ha profundizado en la selección de

biomarcadores de las enfermedades bucales como la caries dental, enfermedades
periodontales y cáncer bucal, considerando la sencilla, económica y poco invasiva obtención
de este fluido, por lo que se ha impulsado el desarrollo de tecnologías para la detección de
biomarcadores con alta sensibilidad y especificidad para una gran variedad de enfermedades
bucales. El estudio de los componentes de la saliva y sus potenciales biomarcadores convierte
a este fluido en una potente herramienta de diagnóstico y detección de enfermedades, como
así también para evaluar la evolución de tratamientos terapéuticos, debido a que refleja el
estado fisiológico y patológico del cuerpo.

B) FORMACIÓN DE LA SALIVA.

La saliva es una secreción compleja que proviene de las glándulas salivales mayores,
(parótida, sublinguales y submaxilares) en un 93% de su volumen y el 7% restante de las
glándulas menores o secundarias (glándulas labiales, palatinas, genianas y linguales), que
están distribuidas por toda la cavidad bucal. El flujo salival diario varía entre 500 y 700 ml,
sin estímulo o en reposo se producen alrededor de 0.25 y 0.35 ml/min (saliva basal), en
condiciones de estímulos externos como son la masticación, la fase previa de digestión y el
olor, la producción puede llegar a 1.5 ml/min (saliva estimulada) y estos dos tipos de
secreciones salivales, en condiciones normales, pueden llegar a sumar de 0.8 a 1.5 litros al
día.
El pH salival basal se puede encontrar entre 5.7 y 6.2 (pudiendo llegar hasta 7,4) , mientras
la saliva estimulada puede llegar hasta un pH de 8 ( pudiendo llegar hasta el 8,4). Esto se
debe a que los diferentes estímulos, provocan que la saliva se prepare para proteger los

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tejidos orales de los cambios ácidos y así poder mantener condiciones normales, esto indica
que al aumentar el flujo salival varía el pH pasando a ser menos ácido.

Fig 1. Imagen de saliva.

B.1.Tipos de glándulas salivares:

Son glándulas exocrinas en el sistema digestivo superior que producen la saliva que vierten
en la cavidad bucal. Las glándulas exocrinas son un conjunto de glándulas que se distribuyen
por todo el organismo, formando parte de distintos órganos y aparatos que producen
diferentes sustancias no hormonales que realizan una función específica, como las enzimas.
Las glándulas exocrinas también se llaman glándulas de secreción externa.

Las glándulas salivales están formadas por un sector secretor o acino glandular y un conducto
excretor.Las células del acino son epiteliales secretoras cúbicas y se disponen en contacto
estrecho alrededor de la luz central.Las células mioepiteliales se encuentran en todas las
glándulas salivales y se localizan por fuera de las células secretoras, entre estas y la lámina
basal. Son células aplanadas con capacidad contráctil.De acuerdo al tipo de células secretoras
se pueden clasificar como:

-Glándulas serosas contienen solo células glandulares serosas y secretan saliva fluida que
contiene ptialina.

-Glándulas mucosas solo tienen células glandulares mucosas.

-Glándulas mixtas contienen células mucosas y serosas, la secreción es viscosa e incluye

mucina y ptialina.

-Sistema de conductos excretores. Las primeras porciones se denominan conductos

intercalares, luego son intralobulares y se continúan en los conductos salivales o estriados.

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Las glándulas salivales menores, secundarias o accesorias se encuentran distribuidas en la
mucosa y submucosa de los órganos de la boca y son las glándulas labiales, genianas, palatinas y
linguales.

A) Glándulas salivares mayores:

Las glándulas salivales mayores representadas por 3 glándulas pares: las glándulas sublinguales:
ubicadas en el tejido conectivo de la cavidad oral, glándulas parótidas y glándula submaxilar:
ubicadas por fuera de la cavidad oral.

-Glándula parótida:

Es una glándula tubuloacinosa que es sólo serosa, que comunica la boca a través del conducto de
Stenon. Produce alrededor de 1-1,5 L de saliva por día. La parótida es una glándula salival muy
voluminosa, bilateral, situada a ambos lados de la cara, en una celda osteofibrosa dependiente de
la aponeurosis cervical superficial por debajo del conducto auditivo externo (CAE), por detrás de
la rama ascendente del maxilar inferior y por delante de las apófisis mastoides y estiloides; pesa
alrededor de 25 gramos. La atraviesan 3 estructuras importantes: el nervio facial, la vena
retromandibular y la arteria carótida externa y el inicio de sus ramas terminales. La parótida
produce la mayor cantidad de saliva de predominio seroso.

La glándula está atravesada por la arteria carótida externa y por los nervios facial y
auriculotemporal y en ella tiene nacimiento la vena yugular externa. En el interior de la glándula
se encuentran ganglios linfáticos parotídeos. Asimismo el nervio facial (VII par craneano) la
divide en dos porciones, una superficial y otra profunda.

-Glándula submaxilar:

La glándula submaxilar es una glándula salival que tiene una forma irregular y un tamaño
parecido a una nuez con un peso de 8 a 15 gramos. Se localiza en la parte posterior del piso de la
boca. Esta glándula produce una secreción musinosa acuosa, llamada mucoserosa, a través del
conducto de Wharton. Tiene una forma irregular y un tamaño parecido a una nuez. Se localiza en
la parte posterior del piso de la boca. Esta glándula produce una secreción con predominio
seroso, pero también con acinos mucosos, llamada seromucosa, a través del conducto de
Wharton.

Es una glándula mixta, constituida por acinos serosos como la glándula parótida y acinos
mucosos separados por tejido conjuntivo. Su secreción se vierte por conductos excretores.Está
irrigada por las arterias procedentes del facial y de la submentoniana, donde desembocan también
las venas.Está inervada por el nervio lingual, en conjunto con ramas del nervio facial.Está
formada por una gran porción superficial y por una porción profunda más pequeña. Está
protegida o recubierta por el compartimento submaxilar.El conducto submaxilar (de Wharton)
tiene una longitud aproximada de 5 cm, y su pared es mucho más delgada que la del conducto
parotídeo. Se forma en la zona media de la porción profunda de la glándula, se introduce entre la
glándula sublingual y el geniogloso, y desemboca en el suelo de la boca a través de un orificio
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estrecho situado en el vértice de la papila sublingual que está localizada lateralmente al frenillo
de la lengua.

-Glándula sublingual:

Glándulas secretora de saliva mucosa. Vierten su secreción por el conducto de Rivinus o

Bertollin.La glándula sublingual está situada en el suelo de la boca. Es la más pequeña de las
glándulas salivales mayores. Se halla envuelta por tejido conjuntivo. La glándula sublingual es
una glándula mixta, compuesta de acinos serosos y acinos mucinosos, secretando más mucina,
cuyos productos de secreción son eliminados por conductos intraglandulares y
extraglandulares.El conducto de Bartholin nace de la parte posterior de la glándula al lado del
conducto de Wharton abriéndose por fuera de él. Es el conducto excretor más voluminoso de la
glándula sublingual.Los linfáticos de la sublingual terminan en los ganglios submaxilares y su
inervación parasimpática procede del lingual y de la cuerda del tímpano.La glándula sublingual
pertenece al grupo de glándulas salivales, que se encuentra en la cavidad oral. Pesa 3 g, posee 2
caras, 2 bordes y 2 extremidades.

B) Glándulas salivares menores:

Son pequeñas, numerosas y superficiales, situadas en los diferentes órganos de la cavidad bucal
con excepción de las encías y parte anterior del paladar duro. Son labiales, genianas o
vestibulares, palatinas y linguales. A excepción de las linguales de Von Ebner que son de
secreción serosa, la mayoría son mixtas, con predominio mucoso.

Aunque son responsables de la menor cantidad de saliva producida (5-10 % del total) son las que,
por su producción continua, mantienen la lubricación o humedad de la boca y contribuyen a
mantenerla libre de infecciones y caries por producir una película protectora y, con su alto
contenido de mucinas inmunoglobulinas, fosfatasas ácidas y lisozimas, impedir la colonización
de los gérmenes y su ataque al esmalte dental.

C) Glándulas tubariales:

Son un conjunto de glándulas que secretan saliva ubicadas en la parte posterior de la nasofaringe.
Fueron descubiertas en septiembre de 2020 por un grupo de investigadores holandeses (Wouter
Vogel y Matthijs Valstar) del Instituto del Cáncer de los Países Bajos Netherlands Cancer
Institute. Forman parte de las glándulas productoras de saliva junto a las consideradas glándulas
mayores (sublinguales, parótidas y submaxilares) y las menores.

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 Fig 2. Anatomía de las glándulas salivares.

Fig 3. Anatomía de las glándulas salivares.

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Fig 3. Glándulas tubariales.

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  ANÁLISIS DE LA SALIVA

-Caracteristicas preanaliticas de la saliva.

La saliva como muestra posee una serie de ventajas y limitaciones con respecto a cualquier otro
fluido biológico.

VENTAJAS:
• Facilidad de obtención, almacenamiento y transporte de la muestra, bajo coste. En relación
al paciente, es una muestra que se obtiene de forma no invasiva, por lo que se encuentra
libre de estrés, no existen problemas para poder obtener muestras repetidas y poder
monitorizar un analito seriado.

• La mayoría de los analitos son excepcionalmente estables en este tipo de muestra. Para los
profesionales posee la ventaja de ser menos infecto-contagiosa que la sangre, cuando
exponemos a un individuo sano a muestras de infectividad desconocida la mayoria de las
veces.

• La saliva es más fácil de manejar para los procedimientos diagnósticos, no coagula y re-
quiere menor manipulación.

LIMITACIONES:
• La principal ha sido la tecnológica, debido a la falta de sensibilidad y especificidad de las
técnicas, en relación a las concentraciones de los analitos en saliva.

Tabla 1. Principales proteínas de la saliva humana

Proteina: Porcentaje Origen Función
Péptidos ricos en Parótida y Submandibular Homeostasis mineral, neutralización de
Pro- lina PRP (37 substancias tóxicas, protección de
%) tejidos frente a ataques proteolíticos de
microorganismos
α-Amilasa (20 %) Parótida (60-120 mg/dL) Iniciar digestión, función antibacteriana en
Submandibular (25 la boca, involucrada en lubricación de
mg/dL) tejidos
Mucinas (20 %) Submandibular Sublingual Protección de tejidos frente a ataques
y glándulas menores proteo- líticos de microorganismos;
citoprotección; lubricación; protección
frente a deshidratación; mantenimiento de
viscoelasticidad de la saliva
Cistatinas (8 %) Parótida, Submandibular y Función antibacteriana y antivírica; regula
Sublingual me- tabolismo proteico; ayuda en la
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 protección de tejidos frente a ataques
proteolíticos de microor- ganismos; ayuda
en la mineralización
Albúmina (6 %) Parótida, Submandibular y Transporte de proteínas, buffer de pH
Sublingual
IgA secretora (3 Parótida y Submandibular Primera línea de respuesta Inmunitaria
%) innata
IgG (2 %) Parótida y Respuesta inmune secundaria;
Submandibular. asociada a múl- tiples patógenos,
Penetra en saliva vía previene al organismo contra ellos
fluido gingival
crevicular
Staterinas (7 %) Presente en la saliva Inhibe el crecimiento de cristales de
Parótida hidroxiaI- patita; ayuda en la protección
de tejidos frente a ataques proteolíticos
de microorganismos;
citoprotección; lubricación, mantenimiento
de la viscoelasticidad de la saliva
Histatinas Presente en todos los Función antimicrobiana y anticandida,
tipos de glándulas Forma- ción de la película de
protección, participación en la
mineralización dinámica de los fluidos
orales, inhibición de la liberación de
histamina desde los mastocitos,
sugiriendo un papel de regulador de la
inflamación oral
Catelicidinas Expresada por neutrófilos Función antimicrobiana, modula la
(hCAP18) y células epiteliales de la respuesta inmune por sus propiedades
cavidad oral quimiotácticas para monocitos, células T,
neutrófilos, estimula libera- ción de
histamina desde los mastocitos.

-Factores que afectan el flujo salival.

La hipersalivación se puede deber a alteraciones neurológicas, incluida la enfermedad de Parkinson,

patología con reflujo gastro-esofágico, efecto secundario de diversos fárma- cos, sobre todo los que
activan el sistema nervioso parasimpático (pilocarpina), miorela- jantes, antiepiléticos, antipsicóticos
(litio), hiperhidratación, envenenamiento con meta- les pesados

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La hiposalivación se puede deber a patologías como el síndrome de Sjögren´s, fármacos que
interfieren con la acción de Acetilcolina como anticolinérgicos, antihistamínicos, quimioterápicos,
terapia de irradiación de cabeza y cuello, etc.

Las variaciones en el flujo salival, son importantes cuando la muestra de saliva se obtiene me- diante
estímulo. El estímulo más utilizado es la acción masticatoria con parafilm o aplicando

0.1 - 0.2 mol/L (aproximadamente una gota) de ácido cítrico en la lengua.

La muestra de saliva puede recogerse de una glándula específica, mediante succión o canula- ción
(estos procedimientos son complejos, lentos, invasivos, requieren personal especializado), o ser una
muestra de saliva completa (con o sin estímulo). La saliva completa sin estímulo es la muestra de
preferencia. Se puede obtener dejando gotear o escupiendo la saliva en un tubo de muestra, pero este
método tiene la desventaja de las barreras sociales, sobre todo en muestras de geriatría, y agravado si
el paciente padece xerostomía. Existen comercializados una serie de dispositivos para la recogida de
muestra, donde lo esencial es que no se vea afectada la con- centración salival del analito a estudiar.
El cristal (material de referencia), está completamente libre de absorción, pero no es un material útil
para la toma de muestra, por su fragilidad. El material menos absorbente es el polipropileno ultra-
puro, ya que en el propileno reciclado se produce absorción variable. El algodón y el polietileno
absorben diferentes analitos. Se reco- mienda que el dispositivo utilizado para la toma de muestra de
saliva esté validado respecto a la adsorción del analito en estudio.

La toma de muestra de saliva, ha de estar perfectamente protocolizada y estandarizada, para asegurar

que las condiciones de recogida de la muestra, son óptimas para el analito en estudio.

-Métodos analíticos

 Métodos inmunológicos:

Los primeros inmunoensayos que se utilizaron fueron en su mayor parte adaptaciones para la
matriz saliva de RIAs comerciales, pero han sido completamente reemplazados por técnicas
ELISA ultrasensible, y técnicas de electroquimioluminiscencia. Son las más utilizadas en la de-
terminación de esteroides, también se utilizan para determinaciones de péptidos y factores de
crecimiento, aunque se está trabajando con plataformas bio-micro-electromecánicas para la
determinación de múltiples analitos.

 Métodos cromatográficos:

En un principio se utilizó electroforesis bidimensional en gel combinado con espectrometría de

masas para el estudio de péptidos. Se ha reemplazado por una técnica más sensible, mejo- rando
la especificidad y la sensibilidad, la cromatografía líquida en dos dimensiones acoplada con
espectrometría de masas (MS). Estos métodos cromatográficos se han aplicado para la detección
de nuevos péptidos y proteínas. Con la cromatografía líquida-tandem MS se cuanti- fican
hormonas esteroideas, péptidos y aminas con peso molecular inferior a 5 kD, como es la Ghrelina
y la Melatonina.

 Tecnicas de PCR:
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Gracias a técnicas de amplificación y con la colaboración potenciada por la Universidad de
California Los Angeles (UCLA) entre Collaborative Oral Fluid Diagnostic Research Center y la
School of Engineering de UCLA se han desarrollado plataformas capaces de detectar múltiples
proteínas, RNA y biomarcadores en saliva a tiempo real de forma específica y sensible.

Detección covid a partir del 2020….

-Aplicaciones de biomarcadores en saliva

Actualmente la determinación de cortisol en saliva, es la determinación más validada. Son múl-

tiples las aplicaciones de la determinación de hormonas en saliva.

 Estudio del síndrome de Cushing:

Desde el año 2008, se recomienda por parte de la Sociedad Europea de Endocrinología y por la
Asociación Americana de Química Clínica, la determinación de cortisol en saliva a las 23 h,
como técnica de cribado en el estudio del síndrome de Cushing. En el Síndrome de Cushing de
cualquier origen se produce una pérdida del ritmo circadiano en la secreción adrenal. En los
individuos sanos con ciclos convencionales vigilia- sueño, los niveles de cortisol comienzan a
aumentar sobre las 3 – 4 h llegando al máximo entre las 7 – 9 h para ir disminuyendo a lo largo
del día. La medida del cortisol a las 23 h es un método muy simple como cribado porque el
paciente toma la muestra antes de acostarse, sin estrés, sin necesidad de hospitalización, y
únicamente hay que seguir las indicaciones apropiadas de recogida de muestra.

Para una adecuada interpretación en los resultados de cortisol en saliva, es crucial conocer las
fuentes de variabilidad que ejercen influencias sistemáticas sobre la muestra.

Podemos dividirlas en:

– Variabilidad biológica por factores no modificables del sujeto en estudio (perfil diurno de
cortisol salival, variación inter e intra individuo, variación estacional, efectos de la edad y sexo).

– Variabilidad biológica por factores modificables del sujeto en estudio (estilo de vida, die- ta,
medicación, fumador, toma de alcohol, actividad física).

– Variabilidad metodológica relacionada con la muestra y su proceso de almacenaje (algo- dón

frente a poliéster, congelación y/o mantenimiento a diferentes temperaturas).

– Variabilidad metodológica relacionada con las técnicas empleadas en el laboratorio para su

determinación (método de medida, precisión del método).

Es imprescindible considerar los posibles sesgos que puedan afectar la evaluación del test
(tabaco, regaliz, trabajadores nocturnos, enfermos depresivos, ausencia de ritmo diurno).

• Seguimiento de la hiperplasia adrenal congénita por déficit de 21 hidroxilasa. La forma más

común de hiperplasia adrenal congénita es por déficit de 21 hidroxilasa y como conse- cuencia el
precursor del cortisol 17-hidroxiprogesterona va a estar presente en concentracio- nes muy
elevadas en sangre y en saliva. Los niños en general tienen miedo de la venopunción y la saliva
13
es una alternativa en el seguimiento de esta patología. En este caso se recomienda la recogida de
3 muestras de saliva durante un día (por la mañana, al mediodía y por la noche), para la
determinación de 17-hidroxiprogesterona, con lo que vamos a obtener información de la eficacia
del régimen de supresión obtenido con los glucocorticoides utilizados en el tra- tamiento. Debido
a la secreción adrenal aumentada de andrógenos, también se investiga en la saliva la
androstenodiona como marcador directo, aunque la monitorización con este pará- metro está
menos extendida. Además de las 3 muestras se pueden recoger muestras con más frecuencia para
evaluar la cinética de los glucocorticoides orales administrados permitiendo el ajuste de forma
individualizada para optimizar la supresión de 17-hidroxiprogesterona. El mayor problema es el
cumplimiento adecuado de las tomas de muestras, es indispensable que se recojan siempre poco
antes de tomar la píldora de substitución, así como un adecuado mar- cado de las distintas
muestras, ya que en caso contrario la estimación de la calidad terapéutica será mala

• Investigación de la fertilidad. Debido a la pulsatilidad en la secreción tanto de estradiol como

de progesterona o testosterona, se recomienda trabajar con una alícuota de 3 - 5 mues- tras
recogidas en intervalos de 30 minutos a primera hora de la mañana, con objeto de mini- mizar las
fluctuaciones de su secreción.

El estradiol es secretado por ovario, testículos, placenta, glándula adrenal o producido por con-
versión extraglandular de los precursores androgénicos secretados; hay que tener en cuenta que
tanto en niñas prepúberes como en hombres o mujeres postmenopaúsicas las concentra- ciones de
estradiol no son cíclicas. La determinación de estradiol está especialmente indicada en estudios
de pubertad precoz en niñas, ginecomastia en varones en los que los valores de estradiol en
sangre no están muy elevados y en la fecundación in vitro, donde nos va a dar información sobre
el crecimiento folicular, pudiendo monitorizar la ovulación de forma similar a las muestras de
sangre. En estos programas se recomienda la muestra de saliva por la posibi- lidad de recogida en
casa el día adecuado y seguimiento del ciclo ovulatorio.

Progesterona: producida principalmente como precursor de otros esteroides en la corteza de las

glándulas suprarrenales en ambos sexos, siendo en la mujer la mayoría de la progesterona

producida por el cuerpo lúteo en los ovarios o por la placenta durante el embarazo. La muestra en
saliva puede al igual que en suero ser medida para la determinación de la suficiencia del cuerpo
lúteo, el estudio de trastornos del ciclo menstrual en mujeres en edad fértil y en la mo-
nitorización de tratamientos de reproducción asistida. La progesterona es una de las moléculas
que más se absorben al material plástico de los dispositivos de toma de muestra.

Testosterona: La forma libre de la testosterona es la biológicamente activa. En saliva medimos la

hormona libre. La globulina fijadora de hormonas sexuales (SHBG) va a ligar el 60 % de la
testosterona, la albúmina el 38 % y sólo el 1 – 2 % circula en forma libre, además la afinidad de
la SHBG por la testosterona es 5 veces mayor que por el estradiol. Cualquier cambio de aumento
o disminución de la SHBG va a repercutir en cambios en las concentraciones de hormonas libres
testosterona y estradiol. Cuando su concentración aumenta va a aumentar el cociente estradiol
14
libre/testosterona libre lo que favorece que aparezca en el hombre el síndro- me de
estrogenización. Múltiples condiciones actúan modificando la concentración de SHBG, aumenta
en el hipertiroidismo, terapias estrogénicas, edad, cirrosis hepática y disminuye en el
hipotiroidismo, aplicaciones de glucocorticoides, obesidad, síndrome nefrótico, etc.

Para la determinación de testosterona las condiciones de conservación de la muestra, tienen que

ser más estrictas (a 4 ºC aumenta si se mantiene más de una semana, sugiriendo creci- miento
bacteriano, a -20 ºC disminuye si se mantiene más de 6 meses, a -80 ºC no se altera). Se deben
analizar en 48 h las muestras guardadas a 4 ºC tras la toma de muestra. El crecimiento bacteriano
puede interferir en los resultados de testosterona pero no en cortisol, 17-hidroxi- progesterona o
progesterona en 5 días a 4 ºC.

• Andrógenos adrenales. La dehidroepiandrosterona (DHEA) y su sulfato son los andrógenos

adrenales más importantes. DHEA al ser la hormona libre y biológicamente activa puede ser
medida en saliva. Debido a la alta concentración que existe en sangre del sulfato de DHEA, su
medida puede ser útil y es investigada para comprobar si existe contaminación en la muestra de
saliva por sangre. DHEA se determina en patologías de insuficiencia adrenal, tumores de
glándula adrenal, síndrome adrenogenital, diagnóstico diferencial del hirsutismo.

• Medicina deportiva. Debido a la posibilidad de toma de muestras durante la realización del

deporte. Se ha usado el balance catabolismo/anabolismo con la determinación de cortisol/
testosterona en hombres y determinando el cociente cortisol/DHEA en mujeres, en la investi-
gación de sobre entrenamiento. También en los programas antidoping (la saliva es más fácil de
recoger en presencia de testigos que las muestras de orina). Los andrógenos sintéticos o naturales
están prohibidos como sustancias estimulantes. Los atletas lo toman para mejorar la masa
muscular y reducir el dolor durante el ejercicio físico extremo. Se sospecha de dopaje por el
aumento del cociente testosterona/epitestosterona, en general es 1. También si aparecen
andrógenos sintéticos como tetrahidrogestrinona.

Péptidos exógenos que se utilizan en el dopaje incluyen la hormona del crecimiento y la eritro-
poyetina, aunque estos 2 péptidos no son secretados por la glándula salival. Mediante técnicas

recombinantes o de biología molecular se han producido estos péptidos etiquetados y se ha visto

que en muy pequeña cantidad pueden aparecer en la saliva, por eso valores muy superio- res a los
de referencia o presencia de péptidos marcados son indicativos de dopaje.

• Investigación del estrés y del comportamiento. En el campo de la psicología (depresión), se

investiga el cortisol con resultados contradictorios. En el estudio de estrés agudo, al ser las ca-
tecolaminas difíciles de investigar por su rápida degradación, se determina la cromogranina A.

• Investigación de cronobiología. Con la determinación de melatonina que es una amina

producida por la glándula pineal durante la oscuridad, forma parte del regulador del ciclo
circadiano, en el ritmo biológico normal los valores mayores se producen durante la oscuridad
cayendo durante el día, aparece en saliva de forma similar a esteroides. El tiempo de adapta- ción
de los ritmos circadianos en un vuelo desde Europa a Nueva York es de 6 días.
15
Otros compuestos identificados en saliva:

– Investigación para detección de drogas y tóxicos. En controles de tráfico, utilizan estos pro-
cedimientos, porque se pueden realizar in situ. El principal problema es que disponemos de
escasa información en relación a la vida media, en saliva, en que son detectables estas drogas.
Los tóxicos se pueden excretar como compuestos liposolubles no disociados, con lo que se
vuelven a deglutir comenzando de nuevo su absorción, distribución, metabolismo y excreción.

– Indicador de exposición a metales pesados como el cadmio, plomo, cromo, mediante téc-
nicas de absorción atómica en horno de grafito. Los contaminantes ambientales se investigan por
la relación entre plasma y saliva.

Las proteínas y péptidos en saliva:

Pueden ser útiles en la investigación de enfermedades sistémicas, algunas con manifestaciones en

la cavidad oral.

• Síndrome de Sjogren (SS), en saliva los tres biomarcadores (2,microglobulina, Catepsina D

y -enolasa) y RNAm (antígeno de diferenciación nuclear de células mieloide, receptor IIIb de
baja afinidad para el fragmento fijador de complemento de IgG y la proteína 2 de unión de
guanilato) son los que mejor discriminan pacientes con SS, de individuos sanos o con lupus
eritematoso sistémico.

• Carcinoma oral de células escamosas, el factor de necrosis tumoral-, Interleuquina 1, antí-

geno polipéptidico tisular, antígeno de cáncer 125, están más elevados en saliva que en suero de
los pacientes con cáncer oral.

• Cáncer de mama, el receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico humano en saliva se

correlaciona con mal pronóstico.

• Cáncer de boca, lengua, labios y glándulas salivares, investigadores de la Universidad

Complutense de Madrid diseñaron en 2016 un biosensor que puede identificarlos analizando
la presencia simultánea de dos biomarcadores, aumentando la precisión del diagnóstico. Una
pequeña muestras de saliva es suficiente. El biosensor se basa en la captura selectiva de dos
biomarcadores como hemos dicho anteriormente, en concreto la proteína IL-8 y su mRNA
asociado realizándose directamente en la muestra de saliva ( sin procesar ni diluir) para ello
se emplean dos tipos de partículas magnéticas previamente modificadas con bioreceptores
adecuados.

La concentración elevada de esta proteína se asocia con una forma especialmente agresiva de la
enfermedad y con una mala o pobre respuesta a la quimioterapia tradicional. Por ello, este tipo de
cáncer requiere de un tratamiento específico y diferente al resto.

• Enfermedades cardiovasculares. Se ha documentado la presencia de Troponina I cardiaca en

saliva. La PCR está elevada en saliva en enfermedad cardiovascular, aunque también se encuen-
tra elevada en caso de existir enfermedad periodontal, como reactante de fase aguda.

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• Infecciones sistémicas. En saliva podemos identificar patógenos, ácidos nucléicos o anticuer-
pos frente a ellos. La determinación de anticuerpos frente a VIH en saliva posee una sensibili-
dad y especificidad similar al test en sangre. También pueden determinarse anticuerpos frente a
virus de hepatitis con una sensibilidad aceptable.

Como curiosidad decir que también existen aplicaciones en veterinaria para

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