Métodos de estandarización

Reactivos patrón
En química analítica un estándar es una preparación que contiene una concentración conocida de un
elemento o sustancia específica.
Patrón primario
Un patrón primario también llamado estándar primario es una sustancia utilizada en química como
referencia al momento de hacer una valoración o estandarización. Usualmente son sólidos que
cumplen con las siguientes características:
 Tienen composición conocida. Es decir, se ha de conocer la estructura y elementos que lo
componen, lo cual servirá para hacer los cálculos estequiométricos respectivos.
 Deben tener elevada pureza. Para una correcta estandarización se debe utilizar un patrón
que tenga la mínima cantidad de impurezas que puedan interferir con la titulación.
 Debe ser estable a temperatura ambiente. No se pueden utilizar sustancias que cambien su
composición o estructura por efectos de temperaturas que difieran ligeramente con la
temperatura ambiente ya que ese hecho aumentaría el error en las mediciones.
 Debe ser posible su secado en estufa. Además de los cambios a temperatura ambiente,
también debe soportar temperaturas mayores para que sea posible su secado. Normalmente
debe ser estable a temperaturas mayores que la del punto de ebullición del agua.
 No debe absorber gases. Ya que este hecho generaría posibles errores por interferentes así
como también degeneración del patrón.
 Debe reaccionar rápida y estequiométricamente con el titulante. De esta manera se puede
visualizar con mayor exactitud el punto final de las titulaciones por volumetría y entonces
se puede realizar los cálculos respectivos también de manera más exacta y con menor
incertidumbre.
 Debe tener un peso equivalente grande. Ya que este hecho reduce considerablemente el
error de la pesada del patrón.
Patrón secundario
El patrón secundario también es llamado estándar secundario y en el caso de una titilación suele ser
titulante o valorante. Su nombre se debe a que en la mayoría de los casos se necesita del patrón
primario para conocer su concentración exacta.
El patrón secundario debe poseer las siguientes características:
 Debe ser estable mientras se efectúa el análisis
 Debe reaccionar rápidamente con el analito
 La reacción entre el valorante y el patrón primario debe ser completa o cuantitativa, y así
también debe ser la reacción entre el valorante y el analito.
 La reacción con el analito debe ser selectiva o debe existir un método para eliminar otras
sustancias de la muestra que también pudieran reaccionar con el valorante.
 Debe existir una ecuación balanceada que describa la reacción
Adición de patrón
La preparación de estándares que reproduzcan la composición de la muestra es muy complicada
cuando se trata del análisis de muestras complejas (suelos, minerales, sangre completa, orina, etc.)
ya que en este tipo de muestras, usualmente, los componentes de la matriz afectan las medidas de la
señal analítica ya sea por exceso o por defecto. Por ello, es imposible compensar un blanco distinto
de cero.
Con el objetivo de minimizar los efectos de la matriz, se utiliza el método de adición de estándar el
cual consiste en la adición de un volumen fijo de la muestra, a las soluciones estándares diluyendo a
un volumen final constante. Posteriormente, se procede a determinar la señal de los estándares así
como de una muestra preparada de la misma forma, en ausencia de estándar añadido. En cada
solución, las señales son afectadas de manera similar por los interferentes de la matriz.
En general, con este método se obtienen intervalos lineales de concentración de trabajo muy
estrechos (menos de un orden de magnitud) originados por los complicados efectos químicos de los
componentes de la matriz. Este método no elimina las interferencias, solo las compensa ya que se
obtienen todas las señales analíticas bajo las mismas condiciones.
El procedimiento que se lleva a cabo para la aplicación de este método, consiste en la selección de
alícuotas de un volumen fijo de muestra (V M) a las cuales se les añaden volúmenes variables de un
estándar (VS) de concentración conocida (CS) diluyendo a un volumen final fijo (VT).
Existen varios procedimientos matemáticos, que pueden aplicarse para el tratamiento de los
resultados obtenidos cuando se aplica el método de adición de estándar y que se describirán a
continuación.
Método 1
Si se cumple una relación lineal entre la señal analítica y el volumen del estándar añadido (V S),
se tiene para la muestra (SM) sin adición de estándar que:
k∗C Mi∗V M
Señal M =
VT
Dónde: k corresponde a una constante de la curva de calibrado y C M a la concentración del analito
en la muestra.
Por otra parte, para una alícuota de muestra con adición de estándar la señal total (S M+S) viene dada
por la siguiente expresión:
k∗C Mi∗V M k∗C S i∗V S
Señal M + S= +
VT VT
Apartir de la ecuación anterior una gráfica de la SM+S en función de Vs es una línea recta con
pendiente e intercepto igual a :
C Si k∗C Mi∗V M
pendiente ( m )=k ,intercepto ( b )=
VT VT
Al dividir la expresión del intercepto entre la expresión de la pendiente, se obtiene la siguiente
ecuación. A partir de la cual se determina la concentración del analito en la muestra. Para la
deducción de esta expresión ya se consideró el factor de dilución. Así que CM corresponde en este
caso a la concentración de la muestra directamente.
b∗C S i
C Mi=
m∗V M
Método 2
Se puede graficar la señal analítica en función de la concentración del estándar añadido para
el cual la relación matemática, para una alícuota de la muestra sin adición de estándar es:
Señal M =k∗C M

Mientras que para una alícuota de la muestra con estándar añadido la relación matemática que se
cumple es:
Señal M =k∗C S + k∗C M

Par este caso se tiene que:

pendiente=k , intercepto=k∗C M
A partir del cociente del intercepto entre la pendiente se obtiene la siguiente ecuación y donde se
puede determinar la concentración de la muestra
b
C M=
m
En este caso el CM que se obtiene en la ecuación anterior corresponde a la muestra diluida, ya que
todos los estándares con lo que se realiza la curva de calibrado fueron medidos en el volumen final
de dilución. Siendo necesario considerar el factor de dilución para obtene el valor real de C M
b
∗V M
m
C M i=
VT
Método 3
Cuando se tiene un gran número de muestras para analizar, es posible realizar la
determinación usando solo dos soluciones, una que corresponde a la muestra sin adición de
estándar y otra con adición de estándar. Es necesario indicar que previo a la aplicación de
este tipo de calibrado, se debe investigar el intervalo de linealidad del método de análisis de tal
manera, que los resultados estén dentro del rango de linealidad.

En este caso se pueden seguir dos procedimientos experimentales, en el primero la muestra

problema a la cual se le mide la respuesta instrumental en ausencia de estándar está en un volumen
total que solo corresponde al volumen de muestra (VM). Luego se le agrega a la solución de la
muestra un volumen de solución estándar (VS) de concentración conocida (Cs) de tal forma que el
volumen final (Vf) en la muestra con adición de estándar corresponde a la suma de V s+ VM. Las
expresiones matemáticas en este caso vienen dadas por las ecuaciones siguientes:
S Mi=k∗C Mi , Para muestra

ST =k C MF + K C Sf , Para muestra en presencia del estándar añadido

Donde:
C Mi∗V M C S∗V S
C Mf = y C Sf =
Vf Vf
Dividiendo la ecuación para muestra y muestra en presencia del estándar añadido nos dará como
resultado la siguiente ecuación
S Mi∗C Sf
C Mi=
ST −
( )VM
Vf
∗S Mi

Dividiendo
k∗C Mi∗V M k∗C Si∗V S
Señal M + S= +
VT VT
k∗C Mi∗V M
Señal M =
VT
Nos queda
 C Si∗V S∗S M
C M=
( ST −S M )∗V M

Patrón interno
La calibración con estándar ó patrón interno se utiliza para compensar errores aleatorios y
sistemáticos como interferencias no espectrales de componentes de la matriz, fluctuaciones debidas
del método y errores instrumentales .Entre estas se tiene; variación de la velocidad de nebulización,
del tamaño de gota, fluctuaciones de las presiones gaseosas, de la viscosidad y tensión superficial.
Se aplica este método en técnicas instrumentales que permitan la determinación multielemental.
Se selecciona como estándar interno, una sustancia diferente del analito que presente propiedades
similares a las del analito, tal que ambos sean afectados similarmente durante el análisis. También
puede seleccionarse un componente mayoritario que esté presente en la muestra, y el cual se
adiciona a los patrones a elevada concentración para considerarse constante. La matriz debe estar
libre de estándar interno. El paso más importante en este método, es la selección adecuada del
estándar interno.
Considerando que se determina la intensidad de emisión de una analito (I A) y un patrón interno (IP)
a concentraciones determinadas (C A y CP) y conocidos los valores de energía necesaria para que
transcurra la transición electrónica respectiva (E A y EP) al medir la relación de intensidades I A/IP; sí
se cumple que ΔEP≈ΔEA el segundo término de la Ec.# tiende a uno y la relación de intensidades es
independiente de la temperatura.

I A α A CA { Δ E A− Δ E P }
= (exp− )
I P αP CP RT

α= constante de proporcionalidad
La aplicación de este método consiste en realizar medidas simultáneas de la respuesta del
instrumento al analito y al estándar interno. El estándar interno, se añade en una cantidad conocida
y constante a la muestra, y a los estándares del analito. En la gráfica de calibrado se representa la
relación Señal analito/Señal de estándar interno en función de la concentración del analito en los
estándares. De esta manera la respuesta del instrumento o la señal analítica es independiente, de la
fluctuación debida al método de análisis. Para la muestra la relación entre la señal (Señal M) y la
concentración (CM) viene dada por:
SEÑALM =k M∗C M
Similarmente para estándar interno se tiene:
SEÑALEI =k EI∗C EI

Dividiendo las ecuaciones anteriores obtenemos:

SEÑALM f∗C M
=
SEÑAL EI C EI
Donde, f corresponde al factor de respuesta f = k M/kEI este debe ser constante en un determinado
intervalo de concentración. Además, f también viene dado por el producto de la pendiente de la
curva de calibrado por la concentración del patrón interno, cuando se gráfica la relación de las
señales versus la concentración del estándar. Mientras que si se gráfica la relación de las señales
versus la relación de las concentraciones, la pendiente es directamente el factor de respuesta. Re-
escribiendo la Ec. # en términos de los estándares del analito (C S, SeñalS), se tiene la expresión que
describe la curva de calibrado, dada por:
SEÑALS C S∗f
=
SEÑAL EI C EI

Ejemplo:
En la determinación de benceno (C6H6) por cromatografía usando como detector la espectroscopia
de masa, se utilizo el benceno deuterado (C 6D6) como patrón interno, ambos salen casi al mismo
tiempo y se obtuvieron los resultados siguientes:

Solución:
Utilizando esta ecuación:
SEÑALM f∗C M
=
SEÑAL EI C EI