MÉDULA ÓSEA Y

HEMATOPOYESIS
Dr. César Chian García
Sección de Patología
Departamento de Ciencias Preclínicas y de Apoyo
Facultad de Medicina “Alberto Hurtado”
COMPETENCIAS
1. Reconocer la localización anatómica de los tejidos hematopoyéticos en
diferentes etapas de la vida
2. Nombrar las principales moléculas que regulan la hematopoyesis
3. Identificar las características de las células madre pluripotenciales de la médula
ósea
4. Describir la organización de la médula ósea en el adulto y las etapas de la
eritropoyesis, mielopoyesis y megacariopoyesis
5. Identificar los normoblastos, reticulocitos y formas juveniles (bastones) y la
importancia de su identificación en condiciones fisiológicas y patológicas
6. Nombrar las pruebas utilizadas para evaluación de la médula ósea y sus
principales indicaciones
 Línea de tiempo histórica
Lista cronológica de inventos y descubrimientos de
importancia o significancia particular en la microscopía
que permitieron observaciones cruciales para el avance
en el campo del desarrollo de la hematopoiesis.

Developmental Biology
Volume 428, Issue 2, 15 August 2017, Pages 318-327
 Yema endodermal
predecesor primitivo y extra embrionario de la célula madre de la medula ósea

hígado

Paraortiva esplanopleura
aorta agonada mesonefros

médula ósea

Stem Cell Research & Therapy (2015) 6:52

Hematopoyesis en la vida fetal

Se inicia en la tercera semana de gestación

El tiempo de vida de las células sanguíneas es breve, por lo que se requiere renovación celular

Se divide en:
• Mielopoyesis
• Eritropoyesis
• Granulopoyesis
• Trombopoyesis
• Monopoyesis
• Linfopoyesis
 Células Tronco Hematopoyéticas en el Embrión
Unión de placenta y embrión:
arteria umbical o vitelia/saco
vitelino
- órganos principales relacionados
con la hematopoyesis: aorta e
hígado
FASES HEMATOPOYESIS FETAL

Fase megaloblástica, a partir de la 3ra. Semana de gestación.

En el mesénquima del saco vitelino y del pedículo de fijación
aparecen eritrocitos nucleados llamados megaloblásticos

Fase hepatoesplénica. A partir de la sexta semana, se forman

eritrocitos sin núcleo y escasos granulocitos y megacariocitos

Fase medular. A partir del quinto mes de gestación hasta la

vida adulta

Dan la hematopoyesis extracelular en el adulto

El hígado y el bazo preservan su capacidad hematopoyética
durante toda la vida
solo la dan en condiciones extremas, como FALLA MEDULAR

SISTEMA RETÍCULO ENDOTELIA: médula ósea, ganglios linfaticos, hígado y bazo.

- órganos por lo qeu circulan las celulas del sistema hematopoyético.
 diapo no muy
importante, solo
habla del nicho
hematopoyético

Stem Cell Research & Therapy (2015) 6:52

hematopoyesis inicia en saco vitelino,
hígado, baso, huesos largos y esqueleto
axial.
Citoquinas que
estimulan la
Hematopoyesis
factor estimulante de granulocitos macrófagos: Existe un análogo sintético
- Una tirosina quinasa con capacidad de inducir todos los linajes granulocitos y
macrófagos en médula ósea y se utiliza para inducir reactivar médulas en
anemia aplásica
STEM CELLS TRANSLATIONAL MEDICINE 2017;6:2106–2114
Regulación de la
Hematopoyesis
citoquinas para desarrollo en médula ósea
Mecanismo de Acción de los Estimuladores de la Hematopoyesis

A. Limitada a un linaje diferenciación eritroide con uso de eritropoyetina, es especifica de linaje

B. Acción en varios linajes uso de GM-CSF que estimula varios linajes

C. En diferentes etapas o acción conjunta SCF: factor de crecimiento relacionado con células madre
Funciones Múltiples de las Citoquinas Hematopoyéticas
permite en célula de la medula osea en cualquier etapa de su maduración puede
hacer todo esto.
 A. Esquema de la jerarquía de la hematopoyesis. Las lineas punteadas indican vías de
diferenciacion. Mono=Monocitos; Gran=Granulocitos; Ery=Eritrocitos; Mega=Megacariocitos;
NK=Natural killer; ; mDC=células dendríticas mieloides; pDC= Células dendríticas
plasmocitoides; MPP=Progenitor multipotencia; LMPP=Precursos linfoide multipotencia;
CMP=Precursor Mieloide común; CLP: Precursor linfoide común; CMP: Progenitor de
granulocitos macrófagos; MEP=Precursor megacariocítico Eritroide.
B. Descripción cuantitativa de la jerarquía hematopoyética en la que la diferenciación eritroide
es la vía predominante por defecto.
C. Visualización de la jerarquía hematopoyética en la que el direccionamiento de linaje ocurre
en un continuo más que en estadios puntuales. Una perspectiva motivada por recientes
estudios de transcriptómica.

EMBO Mol Med (2019) 11: e10316

Factores que inhiben la hematopoyesis
• InterferónActúa en procesos inflamatorios agudos

• Factor de necrosis tumoral Factor de caquexia: fuertemente activado en cáncer y enfermedades crónicas, responsable que bajen de peso
cuando tienen enfermedades debilitantes.
 Células Madre Pluripotenciales
importantes para desarrollo

0.1% en sangre, parecen linfocitos pero están en fase G0.

Son escasas y suelen estar en reposo (Fase G0)

Activada por
Tienen capacidad de autorenovación y diferenciación
fase de reposos, activada cuando teiene presión madurativa en ciertas condiciones
Pueden aparecer en la sangre periférica luego de una estimulación adecuada

Morfológicamente similares a un linfocito

Dan origen a las células progenitoras

CD34+, CD38-, c-kit+

CD117

Alta capacidad regenerativa

Criopreservables uso de medicina regenerativa

 Característica Autorenueva, produce replicas de sí mismas

Fundamental de
la Célula Madre
Hematopoyética
dar células iguales o similares

igual una para proliferar

Blood. 2015 Apr 23; 125(17): 2605–2613
solo info: leer dsp
• Representación esquemática de la terapia génica con células
madre pluripotenciales (HSPC) que muestra los pasos cruciales
del proceso y sus posibles aplicaciones clínicas:
• Las HSPC se obtienen de la sangre periférica o de la médula ósea de
un paciente y son cultivadas ex vivo en condiciones adecuadas que
permitan el mantenimiento o la expansión de las células con potencial
de repoblación a largo plazo, mientras se someten a transferencia de
genes o edición de genes.
• A continuación, se administra al paciente un régimen de
acondicionamiento que agota las HSPC endógenas de la médula ósea
y deja espacio para sus células modificadas ex vivo, que luego se
infunden de nuevo (terapia de células autólogas).
• Las células modificadas genéticamente se injertan en la médula ósea,
donde se auto-renuevan potencialmente durante la vida del individuo
mientras dan lugar a una progenie diferenciada a lo largo de todos los
linajes hematopoyéticos.
• Las células maduras corregidas con genes repoblan los
compartimentos vasculares y extravasculares con células funcionales
que pueden revertir patologías preexistentes que afectan el sistema
linfoide, como inmunodeficiencias primarias, linajes eritroides, como
talasemia y anemia de células falciformes, células depuradoras de
linaje mieloide que se encuentran en todo el linaje periférico. órganos y,
en parte, el sistema nervioso central y padecen una enfermedad de
almacenamiento debido a una deficiencia de enzima lisosomal.
• A medida que confiamos en la seguridad y eficacia de la ingeniería
genética de la hematopoyesis, también se exploran nuevas
aplicaciones que, en lugar de reemplazar genes defectuosos
heredados, están instruyendo nuevas funciones a linajes seleccionados
para combatir mejor el cáncer o las infecciones crónicas.

EMBO Molecular Medicine 11: e9958 | 2019

Identificación de Células Madre
Pluripotenciales
• CD34 (permite la adhesión de esta célula a otras y a la matriz extracelular) CD117
• CD59 (inhibe la formación del componente de la cascada del complemento
conocido como complejo de ataque a membrana)
• CD133 (cuya función aún se desconoce)
• Thy1 (antígeno timocítico 1, también llamado CD90; se piensa que interviene en
la interacción de la célula con otras células y con la matriz extracelular)
• Receptor de C-kit (también conocido como CD117), que actúa como molécula
receptora para factor de células madre (que también recibe el nombre de ligando
C-kit y factor de Steel)
Microambiente Inductivo Hematopoyético

• Matriz celular • Matriz extracelular

• Adipocitos • Adiponectina
• Células endoteliales • Fibras colágenas
• Células reticulares adventicias • Fibronectina
• Fibroblastos • Hemonectina
• Linfocitos • Laminina
• Monocitos/macrófagos • Proteoglucanos
• Osteoblastos • Tenascina
• Osteoclastos • Trombospondina
• Vitronectina
Actúan por estimuladores para
inducir maduración o reposo de
las células
Interacción entre las células madre y las células estromales
Actúan por señalización para inducir reposo o no de la ´celula

Int. Jnl. Lab. Hem. 2010, 32, 551–558

Células Estromales de la Médula Ósea
Fibroblastos (células reticulares fibroblásticas), productoras de colágeno tipo III y de factores de
crecimiento para la hematopoyesis, localizados cerca de las paredes de los sinusoides

Células endoteliales, tapizan los sinusoides, controlan el ingreso de sustancias químicas y

partículas, expresan receptores de factor de von Willebrand, colágeno tipo IV y laminina,

Macrófagos, distribuidos homogéneamente en el estroma medular, algunos en el centro de

agregados eritroides (eritronas), tienen capacidad fagocítica y sintetizan factores de crecimiento
no son inertes, endocrina: hormonas producidas por lectina y adipolectina, regular masa tisular y alamacenamiento de lipidos que intervienen en hambre y saciedad
Adipocitos, sintetizan adiponectina (que inhibe la apoptosis de las células endoteliales), asi como
leptina y osteocalcina, que promueven la granulopoyesis y osteogénesis e inhiben la linfopoyesis

Osteoblastos, producen factores estimulantes de colonias, IL-1 e IL-6 e inhibidores de la

hematopoyesis
 proporcionan soporte vascular.
Para migrar usan integrinas y selectinas.
celulas de la médula ósea se forman Explica por ejmeplo la pancitopenia
ahí pero para trabajar migra, por
endotelio con sus mole´culas de
adhesión como integrinas y selectinas

Pancitopenia: los tres linajes están

en el suelo, médula que falla -->
diagnostico.
- Puede la médula ósea estar llena
de células neoplásicas sin capacidad
de poder unirse a las selectinas.

Sinusoides: tipo especial de circulación con balance para interacción de estroma de medioambiente celular y aparato circulatorio.
Organización
de la médula
ósea
Organos del sistema reticulo endotelial:
tienen sinusoides, los 4
Cambios Celulares en la grande con

Hematopoyesis cromatina
oscura

• Los cambios morfológicos generales que

ocurren durante la maduración de las
células sanguíneas son:
• Citoplasma basófilo a menos basófilo
• Reducción de tamaño celular
• Condensación de la cromatina nuclear

Maduración de elemento eritroide

- Cromatina de gran tamaño y color,
va disminuyendo con la maduración
Médula Ósea del Adulto
organo en esqueleto axial y pelvis (hueso sacro y hueso pélvico)

• Representa el 5% del peso

corporal
elementos hematopoyesis
• Se divide en médula ósea roja y
blanca amarilla: tejido adiposos, todo el estroma

• Componentes:
• Células hematopoyéticas
• Vasos sanguíneos (sinusoides)
• Tejido adiposo
Médula Ósea Roja: Localización
• Pelvis (34%)
• Vértebras (28%)
• Cráneo y mandíbula (13%)
• Costillas y esternón (10%)
• Húmero, escápula y clavícula (8%)
• Fémur (4%)

• Argüelles, Fundamentos de Hematología, 2009

 Estructura Histológica de la Médula Ósea
soporte de tejidos:
fibras elásticas
fibras reticulares
fibras colagena

Pulmón: fibras elasticas para su función

Medula ósea: buen soporte: tiene fibras reticulares

La función hace al órgano

 zeta adiposa
lípidos

tejido mieloide y eritroide

megacariositos

megacariocitos

puntos de pimienta
isla eritroide
CONCEPTO FUNDAMENTAL

Medula ósea roja: en niños 90%

Médula roja amarilla: en niños 10%

Medula ósea roja: en ancianos 10%

Médula roja amarilla: en ancianos 90%

Medula ósea roja: en 50ton 50%

Médula roja amarilla: en 50ton 50%

Inversamente proporcional con

médula roja
Hematopoyesis en el Adulto
Inmunofenotipo
 Eritropoyesis
• Proceso de formación de los eritrocitos
que, en el adulto normal, se realiza
íntegramente en la médula ósea
conceptos importantes:
- anemia es común: relacionado a malnutrición

Elemento clase en sintesis de

hemoglobina:
B12: acido fólico, función de cofactor
en desarrollo nuclear del elemento
eritroide.
- Relacionada con anemia
megaloblastica

Eritropoyetina: producida por el riñon

- actúan por JAK 2, JAK/STAT, por
fosforilación

Nido de eritroblastos en la médula ósea

Eritropoyesis
eritropoyetina: producida

• Empieza con la formación de dos tipos de células progenitoras:

• La unidad formadora de brotes de eritrocitos (BFU-E), que deriva de la CFU-GEMM bajo la influencia de
la eritropoyetina
• La unidad formadora de colonias de eritrocitos (CFU-E), que se origina a partir de la BFU-E.
• La eritropoyesis produce alrededor de un billón (1 012) de eritrocitos al día en un adulto normal.
• Los receptores de eritropoyetina en la superficie de las células destinadas al linaje eritrocítico se
unen a eritropoyetina activando una cinasa, conocida como cinasa Jano (o Janus) 2 (JAK2), que se
une al componente intracelular del receptor.
• Una proteína intracelular llamada transductor de señales y activador de la transcripción 5 (STAT 5)
se une a JAK2 y se fosforila.
• El proceso de fosforilación activa la proteína, y ésta se une a otro STAT 5, formando un dímero
activado. El dímero activado se libera de JAK2, entra en el núcleo y activa los genes que inducen la
eritropoyesis.
eritropoyetina inyectable para tratar la anemia: en falla renal
- Insuficiencia renal crónica.

reticulocitos
Normal de normoblastos en sangre periférica: los recién nacidos, hemorragia
Eritropoyesis

rezago de cromatina que se tiñe,

colorea y contabiliza. Conocer
respuestas fisiológicas como altura.
Enfermedad del monje.
precursores importantes porque señal

normal en personas con

hemorragia, es la respuesta
de la médula ósea:
es normal encontrarlo en SP en respuestas fisiologicas en
recién nacidos estrés eritropoyetico
Adaptación a la altura
1. Proeritroblasto Pronormoblasto Normoblasto basófilo
2. Eritroblasto basófilo

Normoblasto policromatófilo

Normoblasto ortocromático
 Eritropoyetina

Esquema de la eritropoyesis. Los riñones son la principal fuente de eritropoyetina

La producción de EPO es activada por el complejo HIF-2/HIF-1β. Con la participación Regulacion de la producción de glóbulos rojos por EPO. (A) La disminución
del cofactor p300 el complejo HIF se une a los elementos de respuesta hipóxica (HRE) del aporte de oxígeno a los riñones resulta en una expresión y secreción
activando la expresión de EPO. En la médula ósea la EPO promueve la sobrevivencia, incrementada De EPO que circula en el plasma y estimula a los progeni-
proliferación y diferenciación de los progenitores eritroides, particularmente la UFC-E tores de la médula ósea, aumentando la producción de eritrocitos. Si el
incremento en la masa de eritrocitos supera la señal hipóxica la expresión
de EPO es regulada hacia abajo. (B) Niveles de EPO en pacientes con
Front Horm Res. Basel, Karger, 2016, vol 47, pp 115–127 diferentes tipos y niveles de anemia y en personas con eritrocitosis primaria y
secundaria. HIF. Factor inducible por hipoxia. PCV. Policitema vera
Diagrama de la regulación de la eritropoyesis. La falta de oxígeno (hipoxia) es un estímulo para la síntesis de eritropoyetina (EPO), primariamente por los riñones. La
EPO es un factor de sobrevivencia, proliferación y diferenciación para los progenitores eritroides, particularmente las unidades formadoras de colonias eritroides. La
capacidad de transporte de oxígeno se incrementa con la liberación incrementada de reticulocitos. El rol de sitios extrarrenales (cerebro, piel) en el control de la síntesis
de EPO no es del todo comprendido. BFU-E Unidad formadora de colonias eritroides.
Front Horm Res. Basel, Karger, 2016, vol 47, pp 115–127
 mecanismo de producción de hierro, la hepcidina

Hepcidina: producida por el hígado, síntesis en condiciones de estrés hipóxico.

Restricción de hierro en plasma por aumento de eritropoyetina,

Una ruta por la que la actividad eritropoyética regula la homeostasis del hierro. Durante la eritropoyesis por
estress (por ejemplo después de pérdidas sanguíneas) los niveles incrementados de eritropoyetina causan una
producción incrementada de la hormona eritroferrona (ERFE) por progenitores eritorides en la médula ósea. La
Inducción de ERFE por EPO es dependiente de la vía de señalización JAK2/STAT5. ERFE luego establece
comunicación con los hepatocitos a través de una vía no conocida, logrando la supresión de hepcidina. Como
resultado, la disponibilidad de hierro para la síntesis de hemoglobina en los precursores eritroides está
incrementada.

Curr Opin Hematol. 2015 May ; 22(3): 199–205.

 Novel pathways by which iron restriction regulates
erythropoietic activity.
(a) In ironrestricted conditions, a decrease in
intracellular iron in renal interstitial fibroblasts results in
iron regulatory protein 1 (IRP1) binding to the 5′ iron-
responsive element in hypoxiainducible factor 2α
(HIF2α) mRNA and suppression of HIF2α translation.
Lower HIF2α levels lead to decreased production of
erythropoietin (EPO) and eventually lesser utilization
of iron by developing RBC. This is thought to be a
‘safeguard’ mechanism to balance the usage of iron by
erythron vs. other tissues during the times of iron
deficiency.
(b) Iron restriction directly affects the maturation of
erythroblasts by causing inactivation of aconitase,
hyperactivation of protein kinase C (PKC) and
induction of the erythroidinhibitory transcription factor
PU.1. These effects of iron restriction can be reversed
by the treatment with isocitrate, mimicking the
enzymatic activity of aconitase.

Curr Opin Hematol. 2015 May ; 22(3): 199–205.

 Granulopoyesis
importante: denominaciones de elementos celulares de granulopoyesisi.
Mieloblasto, promielocito, mielomonocito, metamielocito: predecesores ... predeseroes del grupo de los segmentados.

La granulopoyesis es el proceso que permite la generación de los granulocitos

polimorfonucleares de la sangre

Se genera a partir de la línea mieloide

drivers o mecanismos
de maduración: MAS
IMPORTANTE PU.1,
El primer estadio en su diferenciación es el mieloblasto, que se diferencia a promielocito involucrado en
diferenciación de célula
que genera las granulaciones azurófilas primarias de los polimorfonucleares madre a granulocito
para continuar
maduraión hacia
cualqueira de los tres
El promielocito se diferencia a mielocito que genera granulaciones secundarias específicas linajes en la médula
ósea.

Dependiendo de los gránulos secundarios generados se formará un metamielocito

basófilo, acidófilo o neutrófilo

En el desarrollo del neutrófilo el núcleo adopta una conformación en banda para luego
convertirse en neutrófilo maduro segmentado.
Granulopoyesis
• La formación de granulocitos empieza con la producción de tres células unipotenciales o bipotenciales, todas
las cuales descienden de la CFU-GEMM (GMP).
• El proceso dedifereniacion
formación de CFU-GEMM a partir de CMHP requiere altas concentraciones del factor de
de grnulocito en condicion de maduración de grnuocotio, continua maduración cualquiera de linaje
transcripción PU.1, una proteína con afinidad por segmentos de DNA ricos en purina presente en la vecindad
de genes promotores.
• Al unirse al segmento rico en purina, el gen promotor se activa y las CMHP se diferencian en células GEMM.
• Otras citocinas, como factor estimulante de colonias de granulocitos y monocitos (GM-CSF, por sus siglas en
inglés), factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF, por sus siglas en inglés), e interleucina 3 (IL-3),
son responsables de la formación de granulocitos.
• La presencia adicional de interleucina 5 (IL-5) dirige la diferenciación hacia la línea de los eosinófilos,
mientras que si no hay IL-5 presente, la diferenciación procede hacia la formación de basófilos.
• Se producen alrededor de un millón de granulocitos diarios en un adulto normal.
GRANULOPOYESIS
 Trombopoyesis
eritrocito no es una célula

• Proceso de formación de las

plaquetas que, en el adulto normal,
se realiza íntegramente en la médula
ósea.
CÉLULAS DE LA SANGRE PERIFÉRICA: SOLO MIEOLIDES Y LINFOIDES, excluimos megacariocitos y
eritrocitos.

sí es una célula el megariocito

Fragmentos rodeados de membrana citoplasmática llegan a la función periferica para función de plaqueta y en
procesos de inflamación.
100 a 150 mil: bajo de plaqueta
formación de grumos en plaquetas
Regulación de la
trombopoyesis
regulado por trombopoyetina

Regulation of platelet production by thrombopoietin (Tpo). Tpo is produced constitutively and binds to
receptors on megakaryocytic progenitors, megakaryocytes, and platelets. When the megakaryocyte and platelet
mass falls, the amount of free Tpo available to bind to Tpo receptors on marrow megakaryocyte progenitors
rises; when the megakaryocyte and platelet mass rises, the converse is true.
Estudio de la Médula Ósea
médula ósea, estudiado en procesos patológicos
anemia

1. PUNCIÓN ASPIRACIÓN
• May Grunwald- Giemsa
• Pearls (depósitos de hierro)
• Inmunocitoquímica
2. BIOPSIA
• Morfología
• Inmunohistoquímica
3. CITOGENÉTICA
4. CITOMETRIA DE FLUJO