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Resultados Prac.n.3

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RESULTADOS

PRACTICA N. 3
DETECCIÓN DE AMINOACIDOS, PÉPTIDOS Y PROTEINAS POR MÉTODOS
COLORIMETRICOS
En la presente práctica realizada se llevaron a cabo distintos test a disoluciones de
proteínas, péptidos y aminoácidos para poder llegar al objetivo de identificar cada
una de las reacciones de las cinco pruebas realizadas, ya que están basadas en la
presencia de grupos químicos, en los enlaces o en sus propiedades fisicoquímicas
como las reacciones de Biuret, de la Ninhidrina, de la prueba de Hopkins-cole,
prueba de millón y prueba de Pauly, las cuales permiten identificar a ciertos
grupos de aminoácidos de acuerdo a los grupos funcionales que contenga, en la
práctica identificaremos aminoácidos, péptidos y proteínas de diferentes
soluciones proteicas, por medio de estas técnicas sencillas, que no implican el uso
de instrumentos sofisticados, hoy en día se disponen de técnicas de
identificación de aminoácidos y proteínas altamente especializadas ,
dependiendo de sus distintos componentes y características, a partir de cambios
de coloración en las muestras testeadas, logrando su identificación y como
resultados tenemos lo siguiente:
Para las diferentes pruebas se utilizaron las siguientes muestras biológicas: leche
de vaca (bronca) y chícharo licuado.

1.Prueba de Ninhidrina
Para la primera prueba de Ninhidrina se utilizaron 6 tubos de ensaye de 13 x 100
mm, cada uno de ellos etiquetado, a cada tubo se le agrego 1 ml de las soluciones
de proteínas al 2%, 1 ml de las muestras biológicas y 1 ml de agua como blanco.

No. DE TUBO SOLUCIONES DE PROTEINAS Y MUESTRAS BIOLOGICAS

1 Glicina al 2%
2 Caseína al 2%
3 Albumina al 2%
4 Leche de vaca
5 Chícharo licuado
6 Agua (blanco)
PROCESO OBSERVACIONES
A 6 tubos ya etiquedos agregamos 5
gotas de Ninhidrina, mezclamos bien y
colocamos a baño maría durante 5
minutos, dejamos enfriar y observamos lo
siguiente: la glicina al 2% Se formó un
sobrenadante de color morado, en la
caseína al 2% se turbió un poco y tomó
un color levemente gris, en la albumina al
2% se turbió un poco y tomó un color
levemente gris, en la leche de vaca se
formó una espuma en la parte superior y
un precipitado de color amarillo, en el
jugo de chícharo se turbió un poco y
tomó un color levemente amarillo y
finalmente el agua( blanco) se produjo
una reacción exotérmica, pero no hubo
cambio en el color del agua

2. prueba de Hopkins-cole (prueba del ácido glioxilico, Aldehído)

Etiquetamos 6 tubos de ensaye de 16 x 150mm, a cada uno agregamos 2ml de las


soluciones de proteínas al 2%, 2ml de las muestras biológicas y 2ml de agua
como blanco.

No. DE TUBO SOLUCIONES DE PROTEINAS Y MUESTRAS BIOLOGICAS


1 Triptófano al 2%
2 Caseína al 2%
3 Albumina al 2%
4 Leche de vaca
5 Chícharo licuado
6 Agua (blanco)
PROCESO OBSERVACIONES
Agregamos 2ml del reactivo de Hopkins-cole,
inclinamos el tubo y cuidadosamente
agregamos 3ml de ácido sulfúrico (H2SO4)
formándose dos capas, esperamos dos
minutos y observamos lo siguiente: en el
Triptófano al 2% se separó el sedimento
(anillo) se tornó ligeramente de color morado.
En la caseína al 2% se separó formando una
espuma blanca en la parte superior y un
(anillo) de color severamente violeta, en la
albumina al 2% se separó el sedimento
formándose al fondo un tono turbio de color
severamente amarillo y se formó un (anillo)
color violeta, se observó una coagulación de
color naranja y finalmente una coloración
ligeramente gris, en la leche de vaca se formó
al fondo un tono ligeramente amarillo, en la
segunda capa se formó un (anillo) tono
violeta, en la tercer capa un tono ligeramente
gris y en la parte superior se formó una
espuma blanca, en el jugo de chícharo se
separó, el sedimento se tornó de color turbio
severamente verde-amarillo y un (anillo) de
tono violeta intenso y por último el agua
(blanco) no se produjo ninguna reacción.

3. prueba de millon
Etiquetamos 6 tubos de ensaye de 16 x 150 ml, a cada uno agregamos2ml de las
soluciones de proteínas al 2%, 2lm de las muestras bilógicas y 2ml de agua como
blanco.
No. DE TUBO SOLUCIONES DE PROTEINAS Y MUESTRAS BIOLOGICAS

1 Tirosina al 2%
2 Caseína al 2%
3 Albumina al 2%
4 Leche de vaca
5 Chícharo licuado
6 Agua (blanco)
PROCESO OBSERVACIONES

Agregamos 5 gotas del reactivo de millón,


mezclamos bien y calentamos por 30 segundos
sobre la flama del mechero (flama baja) y
observamos lo siguiente: en la tirosina al 2% se
produjo una coagulación y una coloración color
rojo ladrillo, en la caseína al 2% se produjo una
coagulación y una coloración color rosado, en la
albumina al 2% se produjo una separación
dejando al fondo una coagulación y una
coloración color rojo ladrillo, en la leche de vaca
se produjo una separación dejando en la parte
superior una coagulación y una coloración color
rojo ladrillo, en el jugo de chícharo se produjo
una coagulación y una coloración severamente
color verde- rosado y por último el agua
(blanco) no se produjo ninguna reacción

4. prueba de Biuret
Etiquetamos 6 tubos de ensaye de 13 x 100mm y agregamos a cada tubo 2ml de
las soluciones de proteínas al 2%, 2ml de las muestras biológicas y 2ml de agua
como blanco.

No. DE TUBO SOLUCIONES DE PROTEINAS Y MUESTRAS BIOLOGICAS


1 Fenilalanina u otro aminoácido al 2%
2 Caseína al 2%
3 Albumina al 2%
4 Leche de vaca
5 Chícharo licuado
6 Agua (blanco)

PROCESO OBSERVACIONES
A cada tubo agregamos 2ml de reactivo de
Biuret, mezclamos y observamos lo siguiente
en la fenilalanina al 2% se observa una
coloración severamente de tono azul, lo cual
indica una prueba negativa reconociendo la
ausencia de proteínas, en la caseína al 2%
observamos una coloración ligeramente
color violeta dando una prueba positiva
reconociendo la presencia de proteínas, en
la albumina al 2% observamos una
coloración violeta intenso reconociendo la
presencia de proteínas, en la leche de vaca
observamos un tono severamente purpura
reconociendo la presencia de proteínas, en
el jugo de chícharo observamos una
coloración turbia en la cual no produjo
alguna reacción, por último el agua (blanco)
observamos una coloración severamente de
tono azul, lo cual indica una prueba negativa
reconociendo la ausencia de proteínas.

Para la identificación de proteínas y aminoácidos que permiten establecer un


resultado positivo o negativo de acuerdo a las características y composición de
cada una de ellas, evidenciado en coloraciones, la presencia de anillos, se
establecieron las características de estas pruebas para la identificación de dichas
biomoléculas y se logró la identificación cualitativa de sustancias que
pueden contener aminoácidos, proteínas o péptidos.
REFERENCIAS

BERG, J. M., STRYER, L., & TYMOCZKO, J. L. (2007). Bioquímica. [En línea]
Available at: https://www.studocu.com/es-mx/document/instituto-politecnico-nacional/
bioquimica/practica-no1-reacciones-de-aminoacidos-y-proteinas.
[Último acceso: 19 03 2023].

GUEL OSORIO, M. M. , 2020. . [En línea]


Available at:https ://www.studocu.com/es-mx/document/instituto-tecnologico-de-sonora/
bioquimica/practica/practica-2-pruebas-cualitativas-de-identificacion-de-aminoacidos-y-
proteinas.
[Último acceso: 19 03 2023].

CHEMISTRY LEARNER, 2021. STUDOCU. [En línea]


Available at: https://www.studocu.com/es-mx/document/instituto-politecnico-nacional/
bioquimica/practica-no1-reacciones-de-aminoacidos-y-proteinas-pdf.
[Último acceso: 19 03 2023].

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