ESCUELA:

Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios No.085 “DR. JOSE MARIA

LICEAGA”

LUGAR:

Coatzacoalcos Veracruz

SUBMODULO:

Submódulo No.3: Emplea técnicas de identificación de microorganismos (ETIM)

PROFESOR:

Q. F. B. Jesus Melesio Ornelas Mijangos

ESTUDIANTE:

Cruz Izquierdo Estefania

EQUIPO:

No.6

GRADO Y GRUPO:

3M (3BLV) Tercer semestre

ESPECIALIDAD:

Técnico Laboratorista Químico

COMPETENCIA PROFECIONAL DEL 2 PARCIAL No.6:

Aplica técnicas de aislamiento de microorganismos, siguiendo instrucciones y procedimientos y

aplicando buenas prácticas de laboratorio.

TEMA:

“Técnicas de aislamiento de microorganismos en placa y en tubo”

PERIODO SEMESTRAL:

Agosto/2023 – Enero/2024

SEGUNDO PARCIAL:

03/Octubre – 30/Octubre

FECHA DE ENTREGA:

Miércoles 4 de octubre de 2023

 “TÉCNICAS DE AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS EN PLACAS”

TÉCNICA DEL EXTENDIDO EN ASA:

Consiste en tomar un asa estéril y recoger una pequeña muestra del cultivo original para
sembrarla en una placa de agar previamente esterilizada. Luego, se extiende la muestra en
forma de zigzag sobre la superficie de la placa. Este es el procedimiento de forma más
detallada que se debe seguir conforme esta técnica:

1. Se toma el tubo con el cultivo mixto y se agita para homogeneizar su contenido.

2. Se procede a flamear el asa bacteriológica y tomar una muestra del cultivo (se flamea la
boca del tubo tanto al abrirlo como antes de cerrarlo).
3. En una placa con agar nutritivo y tocando con suavidad la superficie del medio se
extiende la muestra en forma de zigzag (el recorrido del asa debe ser lo más largo
posible con el fin de conseguir al final del mismo células aisladas).
4. Al destapar la placa de Petri se debe mantener la tapa en la mano, abriéndola sólo lo
necesario para realizar la siembra.
5. Después de sembrar cerrar la placa y dejar en posición invertida para llevar a incubar a
37ºC. (aproximadamente 24 horas para poder observar una mayor densidad de
crecimiento y se apreciar las diferencias entre ellas como son el tamaño, color y forma).

TÉCNICA DE LA DILUCIÓN EN SERIE:

La técnica de la dilución en serie consiste en diluir una muestra o solución inicial en una serie
de pasos, utilizando un factor de dilución constante en cada paso. Esto se logra tomando una
muestra de la solución inicial y agregando un volumen fijo de solvente en cada dilución, por
ejemplo, si se desea diluir una solución inicial de 10 ml en una dilución de 1:10, se toma 1 ml de
la solución inicial y se agrega a 9 ml de solvente. Esto produce una dilución de 1:10. Luego,
para obtener la siguiente dilución de 1:100, se toma 1 ml de la dilución anterior y se agrega a 9
ml de solvente. Posteriormente, se toma una pequeña cantidad de cada dilución y se siembra
en placas de agar. Esto nos permite obtener colonias aisladas de bacterias.
TÉCNICA DEL VERTIDO EN PLACA:

La técnica del vertido en placa consiste en distribuir una muestra líquida en una placa de cultivo
estéril con el fin de permitir el crecimiento y la identificación de microorganismos presentes en la
muestra. Para llevar a cabo esta técnica, se agrega una pequeña cantidad de muestra líquida
en la placa de agar, que es un medio de cultivo que contiene nutrientes necesarios para el
crecimiento de los microorganismos. Para luego, se esparcir uniformemente la muestra líquida
en la superficie de la placa utilizando una varilla estéril o una pipeta. Una vez distribuida la
muestra, se deja solidificar el agar y se incuba la placa a una temperatura adecuada para que
los microorganismos puedan crecer. Después de un periodo de incubación, se observa la
aparición de colonias microbianas, que son agrupaciones visibles de microorganismos que han
crecido a partir de una célula o un grupo de ellas.

El objetivo final de la técnica del vertido en placa es obtener colonias individuales y aisladas, lo
que permitirá su posterior identificación mediante técnicas microbiológicas específicas. Esta
técnica es ampliamente utilizada en microbiología y laboratorios clínicos para el estudio de
muestras microbiológicas como alimentos, agua, muestras clínicas, entre otros.
TÉCNICA DE ESTRÍA EN PLACA:

Consiste en tomar un asa estéril y recoger una pequeña muestra del cultivo original. Luego, se
realiza una estría en forma de zigzag en la superficie del agar en placa. Este procedimiento se
repite varias veces, siempre utilizando un asa estéril, para obtener colonias aisladas. El
procedimiento es igual al del agotamiento de asa, pero la muestra de cultivo se siembra
siguiendo la figura para después de realizar la primera descarga se cerrar la placa y se flamear
el asa. Sin cargarla de nuevo, se gira la placa unos 45º y se arrastra del final de las estrías y
realizamos la segunda fase de las mismas, se repite el procedimiento dos veces más hasta la
última estría que finaliza con un pequeño agotamiento en el centro de la superficie del medio de
cultivo y ya por último la placa se cierra y se invierte para llevar a incubar a 37ºC.

TÉCNICA DEL INÓCULO POR PUNTOS:

Esta técnica consiste en transferir una pequeña cantidad de microorganismos en forma de

puntos separados en la superficie de una placa de cultivo y se utiliza comúnmente para la
siembra y separación de colonias bacterianas individuales. Aquí se detallan los pasos para
realizar esta técnica:

1. Preparación de la placa de cultivo: Primero, se prepara una placa de agar estéril, ya sea
de agar nutritivo o de un medio de cultivo específico. La placa se coloca en posición
horizontal y se deja solidificar.
2. Preparación del inóculo: Se toma una muestra que contiene los microorganismos a
transferir y se disuelve en un tubo de dilución estéril con una solución salina o medio de
transporte adecuado. Se mezcla bien para obtener una suspensión homogénea.
3. Transferencia del inóculo: Con la ayuda de un asa de siembra o una pipeta estéril, se
toman pequeñas cantidades de la suspensión del inóculo y se depositan en la superficie
de la placa de cultivo. Se utiliza un patrón de puntos separados, de manera que cada
punto represente una colonia individual
 4. Extensión de los puntos: Para que los puntos se esparzan y formen colonias
individuales, se utiliza un asa de siembra o una espátula de vidrio estéril. Se realiza una
serie de movimientos en forma de zigzag o el patrón deseado sobre la superficie de la
placa, distribuyendo los microorganismos de cada punto.
5. Incubación: Una vez que se han realizado los movimientos, la placa se cierra y se
incuba a la temperatura y condiciones adecuadas para el crecimiento de los
microorganismos.

Técnica de la filtración en placa:

La técnica de la filtración en placa consiste en utilizar una placa de filtración que contiene poros
de diferentes tamaños para separar los componentes de una mezcla mediante la filtración. Para
realizar esta técnica, se coloca la muestra líquida en la placa de filtración y se aplica una
presión o vacío para forzar el paso del líquido a través de los poros de la placa. Los poros más
pequeños retienen los componentes sólidos o grandes, mientras que los poros más grandes
permiten el paso del líquido y de los componentes más pequeños.

De esta manera, se logra separar los componentes sólidos o grandes de la muestra líquida,
obteniendo así una fracción líquida purificada. Esta técnica es ampliamente utilizada en
diferentes industrias, como la farmacéutica, alimentaria etc., para obtener muestras liquidas
purificadas y libres de contaminantes.
 “TÉCNICAS DE AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS EN TUBO”

MEDIOS DE ENREQUECIMIENTO:

Esta técnica es uno de los medios de siembra líquidos más populares Se inocula la muestra en
un medio de cultivo líquido y se incuban para permitir el crecimiento de los microorganismos en
suspensión, tras su incubación se debe resembrar por agotamiento en un medio selectivo solido
para obtener colonias aisladas de la bacteria usada. Esta técnica es útil cuando se desea
aumentar la cantidad de organismos, ya que el medio líquido proporciona un mayor espacio
para el crecimiento y reproducción. También permite un mayor intercambio de nutrientes y
gases, lo que facilita el crecimiento de los organismos. Además, la siembra en medio líquido
puede ser utilizada para realizar pruebas de sensibilidad a antibióticos o para la producción de
productos biotecnológicos.

DILUCIONES SERIADAS:

Esta técnica se basa en reducir la concentración de microorganismos y obtener cultivos más

puros en este proceso se realizan diluciones sucesivas de la muestra en tubos de ensayo con el
medio de cultivo.

SIEMBRA POR PICADURA:

la siembra por picadura es un método el cual permite estudiar la movilidad que poseen algunas
bacterias. su procedimiento se basa en introducir el ansa en punta con el inóculo en un tubo
conteniendo agar en columna, sin que este toque las paredes del tubo y en forma recta paralela
asegurándose que el inóculo quede distribuido a lo largo de toda la punción y se retira el ansa y
se quema. Esta técnica permite conocer el comportamiento de los microorganismos frente al
oxígeno y su movilidad

SIEMBRA EN ESTRÍA:

Esta técnica constituye un medio adecuado para el cultivo de microorganismos aerobios y

aerobios facultativos. De manera resumida su proceso llega a ser el siguiente: se toma el
material con ansa en anillo y se siembra en estrías en un tubo que ya con anterioridad debe
contener el agar pico de flauta o agar inclinado, siempre respetando las indicaciones señaladas.

SIEMBRA EN TUBO CON AGAR INCLINADO:

Esta técnica procede con un tubo con medio solido inclinado y deslizando el asa sobre la
superficie expuesta del agar de manera que se marque con movimiento en zigzag o surcos en
la superficie, se inicia en el fondo y se va avanzando hacia arriba por el área inclinada. Una de
las ventajas de esta técnica es que la superficie inclinada del agar les da a las bacterias una
mayor superficie donde pueden crecer dentro del tubo de ensayo.
REFERENCIAS:

Prats, Guillen (2005) MICROBIOLOGÍA CLÍNICA, Bs. As. Madrid: Ed. Médica panamericana
paginas consultadas: 24 ala 28 consultado el 3 de octubre de 2023
https://books.google.com.mx/books?id=TdsoWPEYaoUC&printsec=frontcover&dq=t
%C3%A9cnicas+de+aislamiento+de+microorganismos+libro&hl=es-
419&newbks=1&newbks_redir=0&source=gb_mobile_search&ovdme=1&sa=X&ved=2ahUKEwjf
j62awtyBAxVbH0QIHZpWBsAQ6AF6BAgGEAM#v=onepage&q=t%C3%A9cnicas%20de
%20aislamiento%20de%20microorganismos%20libro&f=false

Gaitán M.C, ETOA 5o3- Ciclo Orientado - MÉTODOS Y TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS I

consultado el 3 de octubre de 2023 Eduar.ar,
http://educacion.sanjuan.edu.ar/mesj/LinkClick.aspx?fileticket=bTRebU4qFMM
%3D&tabid=678&mid=1743

(2022) “Aislamiento de microorganismos - Aislamiento de microorganismos Técnicas de

aislamiento Entre las” consultado el 3 de octubre de 2023. Studocu,
https://www.studocu.com/es-mx/document/instituto-politecnico-nacional/microbiologia-
ambiental/aislamiento-de-microorganismos/34621891