El documento describe procedimientos para determinar triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo. Se detalla la obtención de muestras, materiales, reactivos y pasos del procedimiento para ambos análisis bioquímicos. Los resultados se expresan en términos de gramos de triglicéridos o colesterol por litro de sangre.
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El documento describe procedimientos para determinar triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo. Se detalla la obtención de muestras, materiales, reactivos y pasos del procedimiento para ambos análisis bioquímicos. Los resultados se expresan en términos de gramos de triglicéridos o colesterol por litro de sangre.
El documento describe procedimientos para determinar triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo. Se detalla la obtención de muestras, materiales, reactivos y pasos del procedimiento para ambos análisis bioquímicos. Los resultados se expresan en términos de gramos de triglicéridos o colesterol por litro de sangre.
El documento describe procedimientos para determinar triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo. Se detalla la obtención de muestras, materiales, reactivos y pasos del procedimiento para ambos análisis bioquímicos. Los resultados se expresan en términos de gramos de triglicéridos o colesterol por litro de sangre.
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“Año de la unidad, la paz y el desarrollo”
Facultad de ciencias de la Salud
Escuela Profesional de Estomatología
TITULO: Determinación de triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo.
CURSO: Bioquímica Estomatológica.
DOCENTE: Mgtr. Geyby Tatiana Ca
INTEGRANTES Nima Silva, María Daniela. Pulache Coveñas, Ronal Jesús. Severino Aguilera, Milagritos Antuane
PIURA – PERÚ
2023 I. INTRODUCCIÓN II. MATERIALES.
Se realizó un estudio de tipo observacional. Con respecto a la población de
participantes tenemos a estudiantes de la escuela de Estomatología, cursando el II ciclo de la carrera: Severino Aguilera Milagritos Antuane, Nima Silva María Daniela y Pulache Coveñas Ronald Jesús. Todos pertenecientes a la ciudad de Piura. Los integrantes colaboraron en la realización de la determinación de triglicéridos y colesterol en suero sanguíneo. 3.1. Material biológico: - Suero o plasma sanguíneo humano.
3.2. Materiales y reactivos de laboratorio:
- Mandil, guantes descartables, mascarilla y toca o gorro.
- Ligadura y marcador indeleble. - Torundas de algodón hidrófilo estéril. - Tubo Vacutainer tapa amarilla, jeringa de 5ml y aguja hipodérmica N°21G x 1 ½ (1). - Pipeta serológica de plástico descartable. - Gradilla para tubos. - Tubos de ensayo de 13 x 100 mm. - Pipetas automáticas de goma. - Micropipeta de 20 µL (1) y tips de micropipetas de 2-50 µL. - Centrífuga de mesa. - Baño María a 37ºC. - Espectrofotómetro de luz visible.
3.3. Reactivos y kits:
- Kit para determinación de triglicéridos: Buffer Good (pH 6.8),
Clorofenol, lipoprotein lipasa (LPL), Glicerol kinasa (GK), Glicerol fosfato oxidasa (GPO), Peroxidasa (POD), Adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4- AF). Standard: Glicerol 2.26 mmol/L (equivale a 2 g/L de trioleína). - Kit para determinación de colesterol: Buffer Good pH 6.8 (conteniendo fenol y colato de sodio), Colesterol esterasa (CHE), Colesterol oxidasa (CHOD), Peroxidasa (POD) y 4aminofenazona (4-AF). Standard: Colesterol 2 g/L. III. PROCEDIMIENTO
A. DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS:
Obtención de la muestra (suero o plasma sanguíneo):
Previo ayuno de 12 a 14 horas, se extrae de 3 a 5 mL de sangre de la vena de la
flexura del codo utilizando el sistema Vacutainer con tubo tapa roja, o una jeringa de 5ml y aguja hipodérmica N°21G x 1 ½ y se recibe en un tubo de 13 x 100 mm. Se deja en reposo por 10 minutos para la coagulación de la sangre. Luego, dentro de las 2 horas de extracción se centrifuga a 2,500-3,000 rpm durante 10 minutos y se separa el suero con una pipeta serológica de plástico descartable. Si la muestra a utilizar fuese plasma, la sangre se extrae utilizando un anticoagulante (se recomienda el uso de heparina), se mezcla suavemente, se deja en reposo durante 5 minutos y luego se centrifuga y se separa el plasma.
Sistema de incubación:
Valoración de triglicéridos en sangre:
Luego del tiempo de incubación leer la absorbancia en espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco de reactivo (B), en el lapso de 60 minutos (tiempo en que el color de la reacción es estable). Con estos datos se procede a realizar los cálculos respectivos y a expresar los resultados en términos de triglicéridos por volumen de sangre: mg/dL (o también en g/L).
B. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL:
Obtención de la muestra: Se extrae la muestra de manera usual, previo ayuno. Para plasma, se recomienda utilizar únicamente heparina como anticoagulante. Sistema de incubación: Valoración del colesterol en sangre: Luego del tiempo de incubación leer la absorbancia en espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco de reactivo (B), en el lapso de 30 minutos (tiempo en que el color de la reacción es estable). Con estos datos se procede a realizar los cálculos respectivos y a expresar los resultados en términos de colesterol por volumen de sangre: mg/dL (o también en g/L).
Figura: Extracción de sangre.
IV. RESULTADOS
A. DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
Expresión de resultados: los resultados se expresan términos de gramos de
triglicéridos por litro de sangre (g/L) o en miligramos de triglicéridos por decilitro de sangre (mg/dL), lo cual se determina mediante la siguiente fórmula: V. DISCUSIÓN VI. CONCLUSIONES VII. PREGUNTAS VIII. REFERENCIAS
