I UNIDAD

MICROBIOLOGÍA:

Definiciones:

 Estudio de los microorganismos. Entre los aspectos que se estudian en estos,

se encuentra la forma, estructura, reproducción, tamaño, fisiología,
metabolismo, genética.
 Es la ciencia que estudia los organismos unicelulares (esta definición ya esta
desfasada, pues existen organismo que constituyen el campo de estudio de la
Microbiología, pero que no son unicelulares). Esta definición nos lleva a la
definición de la célula, la cual se concibe de la siguiente manera:

Célula: unidad básica de un ser vivo que esta compuesta por una sustancia conocida
como protoplasma y el cual a su vez esta formada por proteínas, ácidos nucleicos y
lípidos.

Características Sistema Biológico

1. Capacidad de reproducción
2. Capacidad para digerir sustancias y formar energía y de esta manera lograr el
desarrollo.
3. Capacidad para excretar sustancias de desechos (acá poner el ejemplo de los efectos negativos
y positivos de estas sustancias, tal como las toxinas y antibióticos)

4. Capacidad para reaccionar a cambios del medio lo se conoce como irritabilidad

5. Capacidad de mutación

Ventajas de la Microbiología versus Biología

1. Con respecto a los microorganismos, estos tienen comportamiento trivial por

realizar investigaciones en lo que respecta a la fisiología, genética y reacciones
bioquímicas.
2. Los microorganismo pueden cultivarse
 3. Los microorganismo pueden desarrollarse, a velocidades extraordinarias, es
decir en una proporción geométrica y mas que aritmética.
4. Los microorganismos utilizan iguales fuentes de energía que los organismos
superiores tales como: fotosíntesis, quimiotropismo, etc.

Reinos de Clasificación Microbiana

1. Reino Protista de Haeckel

Fue un zoólogo alemán que en 1886 surgió la presencia de un 3er. reino conocido
como reino protista (además del reino animal y vegetal), el cual se conforma por
organismo unicelulares que contenían características tanto del reino animal como
vegetal. En este reino se incorporaba, bacterias, protozoario, algas y hongos
2. Cinco reinos de Whittaker
Esta clasificación se basa en las 3 formas de nutrición celular, tales como
Fotosíntesis, Ingestión y Absorción. Estos reinos son los siguientes:

a. Reino animal
b. Reino vegetal
c. Reino Monera (bacterias, algas azul-verdosas)
d. Reino Protista (formado por microalgas y protozoos)
e. Reino Fungí (formado por hongos y levaduras)

Reino Protista

1. Algas: Las algas contiene clorofila y son capaces de llevar a cabo la

fotosíntesis, se pueden encontrar en ambiente húmedos y acuáticos ejemplo:
Gonyalux catenella.

2. Bacterias: organismos procariotas unicelulares que por lo común se

reproducen por FISION BINARIA. (acá poner el esquema de una fisión binaria como forma de
reproducción)
 3. Hongos: organismo desprovisto de clorofila y por lo regular son multicelulares,
no poseen ramas ni tallo, ejemplos: Penicillium.

4. Protozoos: Son organismo protista, eucariota monocelulares que se diferencia

en base a características morfológicas, nutritivas y fisiológicas.

Distribución de los microorganismos en la naturaleza

Los microorganismo se localizan ampliamente desde la corteza terrestre en la naturaleza

y depende de 3 aspectos importantes tales como: Nutrientes, Temperatura Adecuada,
Humedad (este factor es importante en la proliferación microbiana, es la humedad intracelular y no la extracelular (ej. Jugo de
Tomate versus el Tomate- el procesamiento de los productos alimenticios, llevan consigo la perdida de la humedad del alimento)

y temperatura adecuada). Ejem;

Determinante Leche Maíz

Nutrientes Rico en Prot. / m.o afín con las proteínas Rico en CHO / m.o afín con los CHO
presentes presentes

*Húmedad Humedad elevada / m.o afín con la Humedad baja / m.o afín con la humedad
humedad elevada baja.

Temperatura adecuada Termofila / Mesofila / Psicrofila. Termofila / Mesofila / Psicrofila.

Ramas de la Microbiología

1. Bacteriología: Rama de la microbiología que estudia las bacterias

2. Parasitologia: Se subdivide de la siguiente manera :
 Protozoologia: esta rama estudia los Protozoos
 Helmintología: esta rama estudia los Helmintos (gusanos)
3. Micología : Rama que estudia los hongos y levaduras
4. Virologia : Rama que estudia los virus
5. Ficología : Rama que estudia las algas
Campos de aplicación de la microbiología:

1. MICROBIOLOGÍA MEDICA: Ayuda a estudiar microorganismo causante de

enfermedades en el hombre y es de mucha importancia para determinar el control
y prevención de enfermedades.
2. MICROBIOLOGÍA DE AGUAS Y DRENAJES : Trata de estudio de microbiología
de las agua de la no domestica la cual puede ser tanto de origen superficial como
subterranea
3. MICROBIOLOGÍA DEL AIRE : Estudia la distribución de los microorganismo en el
aire el cual es influido por 2 aspectos
a) Condiciones Meteorológicas
b) Tipos de Terreno.

La supervivencia de los organismos en el aire esta determinado por la presencia

de ondas de luz u .v. y otros agentes microbicidas en la luz

4. MICROBIOLOGÍA DE LA LECHE: Es uno de los productos mas altamente

contaminable y esto es debido en parte al alto contenido de proteínas. El proceso
de pasteurización elimina las bacterias patógenas bacterias que producen
enfermedades. No todas las bacterias son nocivas para el hombre, algunas
inclusive presenta obtener derivados de la leche, eje: mantequilla, queso, etc.
Algunos m.o participan indirectamente en la formación de la leche, ya que al
descomponer la celulosa del forraje que ingieren los animales, producen minerales
y vitaminas que conformaran la leche.

5. MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS: Este campo de aplicación trata de estudiar

las enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA.), las cuales poseen 2
mecanismos de producción:
a) Infección = directo (proliferación microbiana).
b) Intoxicación = indirecto (metabolismo microbiano).

Entre las bacterias importantes en la producción de toxina se encuentra los sig

organismos: Staphylococcus aureus. (Explicar el significado de la especie aureus = oro) y
Clostridium botulinum (explicar el significado de la especie botulus = salchicha)
 Las enfermedades transmitidas por los alimentos se pueden reducir mediante
implantación de las estrategias siguientes:
a) Inspección sanitaria de los alimentos.
b) Imposición de reglamentos sanitarios.
c) Implantación de métodos conservación de los alimentos.

MICROBIOLOGÍA. DEL SUELO: Algunos microorganismos aumentan la fertilidad del

suelo la fijación de nitrógeno del cual podrá ser utilizado por la planta.

MICROBIOLOGÍA. INDUSTRIAL: Algunas atributos de los microorganismos se

utilizan para la elaboración de algunas sustancias eje: bebidas alcohólicas, enzimas,
ácidos orgánicos:

a) Bebidas alcohólicas: cerveza, levaduras llamada Saccharomyces cerevise

b) Ácidos orgánicos: acido acético, Acetobacter acetti
c) Producto farmacéutico, Penicillium crisogenum, penicilina
d) Enzimas.

MICROBIOLOGÍA INSECTOS: Se refiere a los estudios de los microorganismos que

son Vehiculados por medio de insectos.

Enfermedad Insecto vehiculador m.o causante

Chagas Tríatoma dimidiada Trypanosoma cruzi

Rhodnius prolixus

Malaria Anopheles albimanus Plasmodium vivax

Anopheles albopictus Plasmodium falciparum

Dengue Aedes aegypti Flavivirus

LA MICROBIOLOGÍA DE LAS TRANSFORMACIONES GEOQUÍMICAS

Se ha observado que algunas bacterias oxidan la materia orgánica transformando a

productos similares al petróleo.

Algunas bacterias encontradas en el sedimento marino contienen hidrocarburos cuya

composición es similar a la del metano.

Se ha estudiado que el petróleo contenido en las capas terrestres puede pasar de una
capa a otra, por medio de las siguientes acciones microbiológicas:
a) Los ácidos y gases formados por las bacterias disuelven los materiales
calcáreos de cimentación y descomponen materiales sulfatados proveyendo
porosidad a las rocas que contienen el petróleo
b) Las bacterias producen CO2, e hidrogeno molecular el cual reduce la
viscosidad y aumenta la presión de gas permitiendo su migración a través
de las capas terrestres.
c) Las bacterias producen sustancias detergentes que permiten que el
petróleo se desprenda de las capas terrestres que lo contienen.

La Microbiología y el origen de la vida:

Los factores desencadenantes del origen de la vida según la teoría de la Microbiología,

fueron: Aumento de Temperatura, Descargas eléctricas y Luz U.V. Estas incidieron
sobre las sustancias inorgánicas para convertirlas en sustancias orgánicas, estas a su
vez se sedimentaron en el mar y formaron los primeros ácidos nucleicos, estos de
unieron para formar los aminoácidos, estos a su vez los péptidos y luego los poli
péptidos para originar las proteínas.
EVOLUCION DE LA MICROBIOLOGIA

EL MICROSCOPIO.

1. La microbiología se empezó a desarrollar cuando el hombre comenzó a pulir

los lentes de vidrio para poder ver las m.o
2. En el siglo XIII Roger Bacón postula la enfermedad es causada por
organismos invisibles. Esto mismo determino Francastoro de Verona, Von
Plenciz (1762) pero ninguno dio prueba de que esto sucedió.
3. En 1458 monje Kircher hizo referencia a que gusanos invisibles a simple vista
podían descomponer los cuerpos humanos, carne, leche y exudados
diarreicos. Si bien su descripción no fue precisa fue el primero en el significado
del papel que juegan los m.o en la producción de las enfermedades.
4. En 1665 Robert Hooke vio por primera vez las células en un pedazo de
corcho concluyendo que los animales y plantas se constituyen por “Únicas
partes elementales repetidas en frecuencias” acotación que fue hecha por
Aristóteles en el siglo IV antes de cristo.
5. El termino bacterias fue acuñado por el alemán Ehremberg (1828) palabra
que significa “bastoncito” (griego)
6. El determino “microbio” fue acuñada por el francés Charles Sedillot
7. El holandés Antonio Van Leeuwenhoeck fue el primer científico en
comunicarse las observaciones y descripciones utilizando un microscopio
elaborado por el mismo que aumentaba el tamaño de los objetos en
aproximadamente 200 y 300 diámetros.

GENERACION ESPONTANEA VRS BIONESIS.

1. Se creía por parte de los griegos que la diosa GEA se encargaba de crear
animales y plantas a partir de objetos inanimados mientras que Aristóteles
teorizo que los organismos podrían crearse a partir del suelo
2. Se acepto que los gusanos invisibles podrían producirse espontáneamente
por la exposición de la carne al aire lo cual fue descartado por Francisco.
Redi al colocar carne cubierta con gasa
 3. En (1749) John Needham explico con un experimento que al colocar carne
expuestos a las cenizas no se producían microorganismos en un primer
momento poco tiempo después Spallanzani hirvió la carne y al sellarla no
observo la formación de m.o.Con ambos experimentos Needham concluyo que
el aire era un factor importante en el crecimiento de los m.o.
4. Poco tiempo después Franz Schulze y Teodor Schwann explicaron que
además de la interacción anaeróbica que determina el crecimiento microbiano
existen otros factores que determinan la aparición de los m.o, como el calor y
acido.
5. En (1850) Schröeder y Van Dusch demostraron que al colocar pequeños
tapones de algodón en las entradas de aire se eliminaba el crecimiento
microbiano en el mismo.
6. En (1864) Pasteur demostró con experimento sencillo y logro descartar la
teoría de la generación espontánea propuesta por Pouchet.

TEORIA DEL GERMEN DE LA ENFERMEDAD

1. Francastoro de Verona: Sugirió que la enfermedad podía obtenerse a través

de organismos invisibles que se transmite de persona a personas
2. (1762): Von Plenciz no solamente afirmo que las enfermedades eran
causadas por m.o. sino que cada c/u de las enfermedades eran transmitidas
por un solo tipo de m.o.
3. Un ejemplo de lo explicado por Francastoro de Verona fue lo que el cirujano
Oliver Wendell Holmes demostró que la enfermedad producida como Fiebre
Puerpebral se producía de personas enfermas o sanas por medio de la
médicos o enfermeras que atendían los partos
4. A raíz de la hipótesis de Holmes el científico húngaro Ignaz Semmelvis
descubrió y aplico los antisépticos en las practicas obstétricas, pero fue hasta
en 1890 que este descubrimiento tuvo un impacto al ser aplicado en Inglaterra
5. Pasteur inicio su carrera, la universidad de Lille en Francia iniciando sus
investigaciones en el proceso de producción de vinos cerveza. Observo que
manteniendo los jugos de fruta a 62 ºC por media hora se podría eliminar las
m.o. productores de alteraciones en los mismos se le conoció con el nombre
de pasteurización.

Es de notar este tratamiento no evitabas los olores y sabores desagradables

previamente producidos en este producto.

El segundo trabajo es de importancia fue el descubrimiento del agente

etiológico productor de la enfermedad conocida como Pebrina, la cual es una
enfermedad que ataca los gusanos de seda y que, en esa época provoco
grandes perdidas a la industria textil en Francia. El 3º trabajo de Pasteur lo
constituyo el descubrimiento del agente productor de la enfermedad conocida
como Carbunco, la cual era una enfermedad que atacaba a especies bovinas,
ovinas y caprinas, esta enfermedad era transmitida por medio de la sangre
infectada.
6. Robert Koch fue un medico alemán que tenia una gran atracción por la
Microbiología a tal punto de colaborar con posterior en el descubrimiento de
carbunco.
A partir de ese trabajo Koch formulo 4 enunciados que explicaba la
transmisión de enfermedades de un animal enfermo a un sano y que ahora se
conoce como los 4 Postulados de Koch.

 Los organismos deberían estar presentes en cada caso de

enfermedad pero ausente de organismos sanos.
 Los organismos sospechosos deben ser aislados y deben de
crecer en cultivos puros en laboratorios.
 La misma enfermedad podría resultar cuando los organismos
aislados son inoculados en organismos sanos.
 El mismo organismo debería ser aislado nuevamente del animal
enfermo experimentalmente.
 M.O.
M.O.

El Concepto de Cultivo Puro

En 1870 Joseph Lister obtuvo por primera vez lo que hoy se conoce como:
cultivo axénicos lo cual significa un crecimiento microbiano libre de otro m.o.
pero no necesariamente significa pureza genética.
Este experimento Lister lo hizo utilizando la bacteria de la leche conocida
como Bacterium lactis

Cultivo mixto Cultivo Axénico Cultivo Puro

Fenotipo distinto Fenotipo igual Fenotipo igual

Genotipo distinto Genotipo distinto Genotipo igual
MICROBIOLOGIA APLICADA

1. Edwin Klebbs y Frederick Loeffler

Descubrieron el bacilo que produce la enfermedad conocida como difteria lo
cultivaron e hicieron producir in Vitro los venenos (toxinas) de dichos m.o.
2. Von Behring y Shibasaburo Kitasato
Idearon el método para producir inmunidad para las infecciones causadas por
m.o. por medio de la síntesis de la sustancia conocida como antitoxina este
experimento se hizo utilizando la bacteria Clostridium tetani (acá colocar y explicar el
esquema de Behring y Kitasato)

Cl. tetani
Toxina Anticuerpo
Cl. tetani

3. En el año 1901 Salmm y Smith demostraron que la inmunidad a las

enfermedades también se podía adquirir por medio de la inoculación de
organismos muertos. ( acá colocar el esquema de Salmm y Smith)

Prod.
Antic
.

Muestra
Calor

1. Trabajando con Pasteur, el ruso Elie Metchnikoff descubrió que en el cuerpo

existe un tipo de célula que nos protege de organismos patógenos. Estas
 células tienen la capacidad de ingerir los agentes patógenos, a las que se les
bautizo con el nombre de fagocitos. Con esto Metchnikoff se convierte en el
padre de la inmunidad celular.
4. El alemán científico Paúl Erlich explico que en el cuerpo existen sustancias
que nos defienden de las enfermedades lo que se conoce como
ANTICUERPO. Con este descubrimiento, Erlich se convierte en el padre de la
inmunidad humoral Además se le atribuye el descubrimiento del primer
agente quimioterapeutico, utilizado con el tratamiento de la Sífilis.
5. En el periodo 1880-1900 se le considera época de oro de la microbiología ya
que en esa época se dan los mejores descubrimientos de Koch y Pasteur.
6. Un discípulo de Pasteur fue el científico Widal el cual descubre la reacción
que diagnosticaba la tifoidea, lo mismo hizo Wasserman para el diagnostico
de la sífilis.
7. El campo de la Microbiología de suelos se abre mediante las investigaciones
realizadas por el ruso Sergio Winogradsky el cual demostró la fijación de
Nitrógeno atmosférico por algunas bacterias. El irlandés Beijerinck (1901)
demostró que uno de los géneros microbiano que llevaba a cabo esta acción
pertenece al genero Azotobacter sr.
8. Otro estudio fue realizado por los científicos Hellriegel, Wilfarth que
demostraron la acción simbiótica entre algunas bacterias y plantas
leguminosas como el trébol y la alfalfa.
9. El danés Emil Christenhansen abrió el campo de la microbiología industrial al
descubrir la producción del vinagre por medio de bacterias y levaduras. Más
tarde el austriaco Adametz uso cultivos puros de bacterias para producir
queso, mientras que Conn y Weigman usaron bacterias para producir
mantequilla.

Principales Características de los M.O.

1. Características de cultivo:

Estas se refieren a los requerimientos nutricionales y condiciones del medio que

favorecen el crecimiento microbiano.

Las condiciones necesarias para el crecimiento, es la temperatura, la presencia de

gases en el medio de cultivo, según el primero, los m.o. se clasifican en Psicrofilo,
mesofilo y termofilo, mientras que el segundo aspecto, clasifica los m.o, en:
a) Anaerobios estrictos: No Requieren O2 para vivir
b) Anaerobios facultativos: Puede o no requerir O2
c) Aerobios: Requieren O2
d) Micro aerofilicos: Requieren poca concentración O2

2. Características Morfológicas:

Esta se refiere al tamaño, forma, agrupación y color de la célula. En cuanto a su forma

los organismos se clasifican: Coco, (formas esféricas), bacilos (forma alargada),
espiroquetas (espiral) y Vibriones, (espirales incompletas o comas).

3. Características Metabólicas:

Esta se refiere a la forma como los m.o, transforman los componentes químicos de un
determinado componente químico del medio de cultivo mediante una acción
metabólica.

4. Características Composición Bioquímica

Se refiere a la composición de las principales características de los Componentes

químicos de célula.

5. Características Antigénicas
Se refiere a las identificaciones de componentes celulares especiales que se dan prueba
de similitud entre las especies.

6. Características Genéticas:

Esta se refiere al análisis del ADN. Los principales estudios genéticos que se realizan
para caracterizar genéticamente los m.o, son: composición porcentual base del ADN,
mientras que el otro se relaciona e hibridación ADN.

Es el primer caso la composición porcentual base que se define como la cantidad de

moles en forma porcentual que existe de las bases pirimidinicas, citocina y guanina.

%(C+6)= moles de Citocina+moles de guanina X 100

Moles de C + moles de G + moles A + moles T

La CPB. de los m.o. varia desde un 23% hasta 75% si dos organismos tienen relación
base muy diferentes significara que no son muy afines.

El otro estudio genético se le conoce como: hibridación ADN., la cual es una

determinación del grado de precombinación entre el ADN aislados de diferente m.o. y
puestos en presencia uno del otro en condiciones experimentales. (Acá colocar el ejemplo grafico de la
hibridación de las dos cadenas sencillas de ADN al colocar una de ellas procedente de un organismo conocido, con un desconocido)

Taxonomía, Nomenclatura y Clasificación Microbiana

En el mundo biológico los nombres científicos responden a la sistemática la cual se

define como la ciencia que pretende crear un orden de la especie agrupada en otras
categorías de mayor envergadura.

Taxonomía
Se refiere al agrupamiento de los organismos en grupos conocidos como Taxa.

La taxonomía se divide en 3 partes interdependientes:

a) Clasificación: Es un agrupamiento ordenado de las unidades en grupos dentro de
unidades mayores.
b) Nomenclatura: Se refiere a la denominación de las unidades definidas.
c) Identificación: Se refiere a la diferenciación de los m.o. en base a la identificación
realizada comparando características conocidas con las desconocidas.

Nomenclatura

La denominación uniforme de los m.o. fue hecha a través de la formulación conjunta los
zoólogos y biólogos en el año de 1890 fue durante el año siguiente se publico el código
internacional de nomenclatura zoológica y en 1906 el código internacional de
nomenclatura biológica. En 1947 se publico por vez primera el código internacional de
nomenclatura bacteriana la cual sigue siendo revisada continuamente.

Principios Nomenclatura

Los códigos de clasificación internacional se rigen por enunciado tales como.

1. Cada clase distinta de un organismo se designa como una especie.
2. Las especies se nombra por 2 vocablos latinos para ajustarse a un sistema
binomial de nomenclatura.
3. La aplicación de los nombres esta reglamentada.
4. Una ley de prioridades asegura el nombre legítimo más antiguo posible.
5. Se requiere la designación de categorías para clasificación los m.o.
6. Se establecen criterios para la publicación efectiva de los nuevos nombres así
como la normativa para acuñar los nuevos.

Nombres Científicos de Bacterias

1.- Cada clase distinta de un organismo se define como una especie.

2.- Cada nombre científico esta formada por 2 vocablos latinos en donde el
primero corresponde al genero y comienza con mayúscula y el segundo la especie
y comienza con minúscula.

Bacillus subtilis
Genero especie

En donde el 1º. Nombre es latín y comienza con mayúscula. El segundo nombre es

un epíteto del género comienza con minúscula y tiene el objeto de describir al género
en la forma siguiente:

a) Un adjetivo que modifica el nombre.

Staphy lococcus aureus Aspergillus niger

Viene de aureos dorada niger = negro negro
Latín “dorada”

b) Un adjetivo en forma de participio activo de un verbo ejemplo:

Clostridium disolvens (dissolver)
Bacillus coagulans (coagular)

c) Un nombre en posesivo que modifica el nombre ejemplo:

Salmonella pullorum (pollo)

d) Un nombre explicativo eje.

Actinomyces actinomycetencomitans (hongos)
Shizosaccharomyces

3.- Se puede añadir el nombre del autor de la bacteria eje.

 Bacillus coagulans (Hammer)

4.- En ocasiones es conveniente separar o subdividir la especie en variedades eje.

Streptococcus lactis var maltigenes

Nombres de bacterias Común

Nombre Común Nombre Científico

Gonococo Neisserie gonorrhoeae
Bacilo Tífico Salmonella typhi
Bacilo Diftérico Corynebacterium diphteriae
Bacilo Tuberculoso Mycobacterium tuberculosis
Bacilo Sifilítico Treponema pallidium

Categorías Taxonómicas

Para agrupar los organismos relacionados en diferentes niveles de similitud se aplican

una serie de categorías taxonómicas o también conocidas como taxas, estas son la sig.
a) ESPECIE: Organismos de una misma clase.
b) GENERO: Grupo de especie relacionados.
c) TRIBU: Grupo de género relacionados.
d) FAMILIA: Grupo de tribus relacionados.
e) ORDEN: Grupo de familias relacionados.
f) CLASE: Grupo de órdenes relacionados.
g) PHYLUM: Grupo de clases relacionados.
h) REINO: Grupo de PHYLA relacionados.

Observación microscópica de los Organismos

Los microscopio pertenece a dos tipos Ópticos y Electrónicos, los cuales se diferencian
por su poder de amplificación. Los microscopios ópticos basa su sistema de amplificación
en la interposición de lentes y son de los siguientes tipos:
1. Campos luminoso
 2. Campos oscuro
3. Contraste de fases
4. Luz ultra violeta.
5. Fluorescencia

El microscopio electrónico basa su sistema de amplificación en el uso de un haz de

electrones en vez de ondas luminosas.

1. Microscopio de Campo Luminoso: En este tipo de microscopio el campo

luminoso se encuentra intensamente iluminado y los objetos aparecen oscuros.
Los aumentos útiles de este microscopio varían desde 1000 a 2000 diámetros
y se pueden distinguir en los 2 aspectos importantes:
a) Poder de resolución: Esta propiedad se refiere a la capacidad a distinguir
2 objetos adyacentes como diferentes y separados. El poder de resolución
esta en función de la longitud de onda de la luz y la apertura numérica de
lente que usa
b) Apertura numérica (AN): Es la medida que resulta del producto del índice
de refracción (n = 1 cuando el factor es aire y 1.58 cuando el factor es
aceite de inmersión) que llena el espacio entre el cubre objetos y el objetivo
por el seno del ángulo de los rayos mas externos que capta el objetivo.
Las ondas de la luz visible utilizada por el microscopio óptico son limitadas,
ya que esta únicamente se encuentra en el rango de 400 a 700
manómetros (1 manómetro = 1*10 -9 m)

El poder de resolución del microscopio se ve limitado por 2 elementos:

a) Valores limitados por la apertura numérica
b) Longitud de onda de la luz visible

El tamaño más pequeño que un microscopio puede observarse esta determinado por la
fórmula siguiente:

Máximo Poder Resolución = (nm)

(M. P. R.) Apertura Numérica Condensador + Apertura Numérica Objetivo

= nanómetro (1*10 -9m) M.P.R. =M (1*10 -6m)

2. Microscopio de Campo Oscuro

Consiste en observar los objetos más intensamente iluminado en fondo
oscuro, esto es debido a que la luz utilizada por este microscopio no entra por
el objeto y todo el campo se ve oscuro.
El microscopio de campo Oscuro es de gran valor en la observación de m.o.
sin colorear o suspendidos en líquidos.

3. Microscopio de Luz Ultra Violeta

Este microcopio presenta un mayor poder de resolución ya que utiliza luz U.V.
cuya longitud de onda se encuentra en el rango de 180 – 400 nm.
La principal ventaja del microscopio de luz U.V. es la devolución de la
absorvancia específica de este tipo de luz por algunos organelos celulares

4. Microscopio por Contraste de Fases

Es la técnica de incalculable valor para el estudio de las células vivas y de
amplio uso en los estudios biológicos especulativos y aplicables.
El sistema óptico de este microscopio esta dotado de un sistema que permite
distinguir estructuras que defieren ligeramente en su índice de refracción.
En este microscopio la luz atraviesa un material y pasa a otra de una densidad
diferente, la luz sufre una ligera desviación, produciendo irregularidades
mínimas que determina la morfología celular del espécimen.

5. Microscopio de Transmisión Electrónica

Con este tipo de microscopio podemos observar hasta 100 veces más con
relación al microscopio óptico.
Su uso data desde 1960, y su mecanismo se basa en la utilización de ondas
de electrones y campos magnéticos. En el microscopio eléctrico el espécimen
se prepara como una pequeña película la cual es colocada entre el objetivo y
condensador magnético
TECNICAS MICROSCOPICAS.

a) Técnica del Sombreado

Consiste en colocar una capa de metal sumamente delgada en un Angulo

oblicuo sobre microorganismo con esto se logra una representación
topográfica de la superficie del m.o.

b) Cortes Ultra Finos.

Esta técnica se realiza mediante el uso del aparato conocido como

micrótomo, el cual corta el m.o. en rebanadas.

c) Tinción Negativa.

Este tipo de técnicas se utiliza una sustancia tensa en densa en electrones

tal como: ácidos fosfotungstico el cual no penetra la célula si no que forma
depósitos en las hendiduras del mismo.
d) Técnicas de Crió Fractura.

En esta técnica la fijación del m.o. se hace a través de métodos físicos tal
como el frió.

e) Localización de Constituyentes Celulares.

Esta técnica determina el marcaje de los constituyentes mediante una

sustancia conocida como ferritina.

f) Localización de Enzimas en Cortes Finos.

 La mayoría de estas técnicas se basan en la formación de sales de plomo
insoluble generalmente del tipo fosfato de plomo

g) Auto Radiografía.

Es un método cito químico en la cual se localiza los constituyentes

celulares mediante el uso de material radioactivo

Preparación para el examen con el M.O. Óptico

Se basa de 2 usos:
1. Suspensión de los organismo en un liquido
2. Elaboración de películas o frotis fijados de la muestra

Técnicas Montaje Húmedo y Gota Pendiente

Estas técnicas tienen utilidad en las siguientes condiciones:

 Algunas bacterias en especial se deforman y alteran cuando se colorea o se

fijan
 Se requiere en algunos casos determinar si existen movilidad o no en la
bacterias en estudio
 Algunos procesos como división celular, cambios citoquimicos ocurren
cuando la célula esta viva
 Con este método se puede observar fácilmente algunas inclusiones
citoplásmica vacuolas y partículas grasas.

Frotis Fijos y Teñidos

Las ventajas son:

 1. Las células son mas visibles claramente después de ser coloreada
2. En preparación coloreada la diferencia entre las células de especie distinta y
dentro misma especie se demuestra por soluciones coloreadas apropiada
Los pasos esenciales en la preparación de los frotis fijos y teñidos son:
 Realización del frotis
 Fijación
 Aplicación de soluciones coloreadas apropiadas

Coloración Microbiológica

De acuerdo a la estructura molecular de los colorantes estos se pueden clasificar:

 Trifenilmetano
 Oxacina
 Tiacina

Con respecto a la citoquímica los colorantes se clasifican en:

 Aniónicos o Ácidos: Los cuales colorean elementos básicos

 Básicos o Cationicos: Los cuales colorean elementos ácidos
 Neutro o no Iónicos.

a) Coloración Simple: Es la aplicación de un solo colorante a las preparaciones

fijas de los m.o.
b) Coloración Diferencial: Esta coloración demuestra las diferencias es la
tinción de los diferentes organelos de las células
c) Coloración de Gram. Este tipo de coloración es compuesta por lo siguiente
colorantes:
 Cristal Violeta: Colorante principal, cuya aplicación es por 1 min.
 Lugol : Mordente, cuya aplicación es por 1min
 Alcohol – Acetona: decolorante, cuya aplicación es de 4 seg.
 Safranina: Colorante de contraste, cuya aplicación es de 10 seg.

Con la aplicación de la coloración de Gram, las bacterias, se clasifican en:

 Gram.+: Violeta / Azul
Gram.-: Rosado/ Fucsia

Las bacterias Gram.+ contiene menos lípidos en su pared celular que las
bacterias G- además las paredes celulares de las bacterias G- mas delgadas
que las bacterias G+.

Las bacterias G+ son mas susceptible a la penicilina y menos a la

desintegración por métodos mecánicos o enzimáticas.

Las bacterias G- son susceptible a la estreptomicina, es de hacer notar que

las levaduras se colorean como G+

d) Coloración de Giemsa: Se utiliza la observación de las formas microbianas

conocidas como Rickettsias además se utilizan por la coloración de algunos
protozoos sanguíneo ejemplos:
 Plasmodium vivax (malaria)
 Trypanosoma cruzi (chagas)
e) Coloración Negativa: Con este método la célula no sufre ninguna agresión
física o química , y posee la importancia en la observación de los organismos
capsulados como es el caso de lo siguiente:
 Cryptococus neoformans (levadura)
 Histoplasma capsulatum (protozoario)

Morfología y Estructura Fina de las Bacterias

(Acá van los cálculos de la relación superficie/ volumen)
Tamaño forma y Agrupación Microbiana.

Las bacterias varían desde muy pequeñas (0.01 hasta 5 m) en su forma: coco, bacilo
espiroquetas y vibriones.
La consecuencia importante del ínfimo tamaño de los m.o. es su relación superficie -
volumen si se compara con un organismo de mayor tamaño. Esta relación explica 2
fenómenos importantes:
 Elevado metabolismo
 Elevado a nivel de producción

(En este punto se deben de explicar y poner los problemas que tienen que ver con la relación del radio y la superficie-
volumen)

Muchas bacterias son móviles y esta capacidad de movilización esta determinada por la
presencia de organelos conocidos como flagelos que viene del latín flagellum = látigo.

Además los microorganismos se pueden movilizar a través de otras de otras estructuras

como los cilios los cuales son más cortos y numerosos que los flagelos. Los flagelos
según su colocación en las células se clasifican en: flagelos polares y flagelos
peritricos.

Los flagelos no poseen forma recta si no helicoidales y esta compuesta por subunidades
de una proteína conocida como flagelina. El flagelo consta de 3 partes: filamento,
gancho y estructura basal.

La función principal no esta definido pero se cree que posee las siguientes funciones:

 Adhesión a una superficie inerte para formar una película.

 Apareamiento entre las especies.

Otra estructura externa de importancia de las bacterias lo constituye la capsula y que

anteriormente se le conocía como capa mucilaginosa y que en actualidad recibe el
nombre: glucocalix. Este organelo esta constituido por polisacáridos como: Dextran,
Dextrin, Levan y Celulosa.

El glucocalix posee las siguientes funciones:

 Fijación del m.o. patógenos al huésped.

 Dificultad en el reconocimiento y por ende la destrucción por células
fagocitos del sistema inmunológico.
 Proveer resistencia a la desecación bacteriana.

PARED CELULAR

Tiene el objeto de dar rigidez a la célula bacteriana, posee la capacidad de resistir

presiones hasta 65 lb. Por pulgada, constituyendo del 10% al 40% del peso seco de la
bacteria.

COMPONENTES Q.Q. Y ESTRUCTURA PARARED CELULAR

La sustancia polimérica que le brinda rigidez a la pared celular se le conoce como:

PEPTIDOGLUCANOS.

Las bacterias Gram.-, el peptidoglucano, constituye una fracción mucho mas pequeña
de la pared celular en comparación con bacterias Gram.+. El acido teicoico en una
sustancia propia de la pared celular de las bacterias, Gram.+.

Es de hacer notar que las bacterias Gram.- posee un lipopolisacarido conocido como
ENDOTOXINA el cual es importante ya que determinan:

 Antigenicidad
 Susceptibilidad a la infección por fagos.
 Toxigenicidad.

Estructura Peptidoglucano:
Se compone de 3 bloques estructurales:

 Acetil Glucosamina
 Acido Acetil Muramico
 Un péptido que consta de 4 o 5 aminoácidos de variedad limitada.

Estructuras internas a la pared celular.

Los Protoplastos: Son cuerpos redondeados que toman una forma esférica desde el
momento que carecen de paredes celular externa. Los protoplastos poseen las siguientes
características:

a) Son esféricos.
b) Inmóviles
c) No se dividen
d) No forman nuevas paredes.
e) No son susceptibles a la infección por fagos

Los Esferoplastos: a estos se les considera como protoplastos limpios.

Membranas Citoplásmica: Inmediatamente después dentro de la pared celular existe

una membrana fina a la cual se le conoce como: membrana citoplásmica, protoplasmica o
plasmática. Esta es una estructura de de gran importancia debido a su característica de
ser semipermeable lo que permite la entrada de nutrientes y la salida de sustancias de
desecho. Además contiene las enzimas que intervienen en el transporte activo y
fosforilaciones oxidativas.

Intrusiones membranosas: La estructura de los meso somas bacterianas es de extrema

importancia ya que se encuentra asociado con varios procesos vitales de la célula, a tal
punto que se le ha llegado a considerar una extensión de la membrana citoplásmica.

Citoplasma: El material celular contenido dentro de la célula se divide en:

 1) Área citoplásmica de aspecto granular rica en ARN
2) Área cromosómica o nuclear rica en ADN
3) Parte liquida que disuelve las sustancias nutritivas

Es de hacer notar que el ARN combinado con las proteínas se le conoce como
ribosomas.

Inclusiones citoplásmicas. Los gránulos de volutina, también se le conoce como

gránulos metacromáticos y se encuentra en muchas bacterias, algas, hongos y protozoos.
Los principales constituyentes de estos gránulos son: meta fosfato, poli fosfato, gránulos
de acido Beta hidroxibutirico, almidón y azúcar.

La presencia de gránulos en la célula está determinado por

1. Edad de la célula.
2. Ambiente general en que la célula se ha desarrollado.

Se ha considerado que estos gránulos se convierten en reservas alimenticias para

la célula.

Material nuclear; En la bacteria por no ser un lugar definido se le conoce como: Cuerpo
cromático, nucleoide, equivalente nuclear y cromosoma bacteriano. No existen
evidencias de que exista la membrana nuclear.

Endosporas; Estos organelos son cuerpos esféricos y ovales de pared gruesa y que se
encuentran con mayor frecuencia como los géneros Bacillus y Clostridium.

Están constituidos por ácidos por ácidos Dipicolinicos y que junto con el calcio determina
la alta resistencia térmica de la endospora. Por su colocación en la célula, la endospora
se dividen en: Terminales, Subterminales y Centrales

II UNIDAD CONTROL DE LOS MICROORGANISMOS

Importancia del control de los microorganismos.

Las razones de importancia del control de microorganismos son:

 Prevenir la transmisión de la infección y la enfermedad.
 Prevenir la contaminación de organismos perjudiciales.
 Prevenir la destrucción de los materiales por los microorganismos

Tipos de control microbiano

Los tipos de control pueden ser mediante fundamentos químicos y físicos:

ESTERILIZACION: Se refiere a la destrucción total de los microorganismos y se basa en

2 procedimientos:

 Autoclave: cuyo mecanismo se basa en una temp. 121Cº 15min. 15 lb. .. a este se
le conoce como esterilización húmeda.
 Horno: cuyo mecanismo se basa en una 160-180 Cº Por 2 horas. A este se le
conoce como esterilización seca.

DESINFECTANTE: es un agente generalmente Químico, capaz de matar formas en

desarrollo, pero no generalmente las esporas resistentes de los microorganismos
patógenos.

ANTISEPTICO: Se refiere a toda sustancia que impide el desarrollo de microorganismos.

se aplica a sustancias que tienen contacto físico con seres animados

SANEAMIENTO: Consiste en reducir la población M.B. por medio de un agente que mata
el 99.9% de las bacterias en crecimiento, los objetos a los que se aplica el saneamiento
son inanimados.

GERMICIDAS: Es casi siempre igual a un desinfectante aunque la sustancia germicida es

para todo tipo de aplicaciones (animado e inanimado) y para todo tipo de germen
BACTERICIDAS: Agente que mata bacterias, el mismo término se puede aplicar para la
destrucción de algas, larvicidas, fungicidas.

BACTERIOSTASIS: Se define como la perdida de capacidad de desarrollo de los

microorganismos, perdida capacidad de desarrollo.

Curva de Crecimiento Microbiano

Esta curva posee tres variables:
 Concentración de nutrientes
 Población Microbiana
 Tiempo

Se divide en 4 fases: Inicial, Logarítmica, Estacionario y declinación o Muerte.

Características de las fases

Fase Inicial: (adaptación microorganismo) características microorganismo vivos

Fase Logarítmica (Elevada actividad metabólica No de microorganismos vivos> no vivos).

Fase Estacionaria (Cantidad de organismos vivos es igual a la cantidad de organismos

muertos)
Fase de Muerte (microorganismos vivos menores que microorganismos muertos).

Curva de muerte Microbiana

Esta curva posee tres variables las cuales son:

 o Concentración del agente

o Tiempo

o Población microbiana
La curva de muerte Microbios no tiene fase ni etapas.

PASOS PARA DEFINIR UNA MUERTE MICROBIANA

 Conteo celular

 Prueba de la acción microbicida

La bacteria que se elige para trabajar en el cultiva en numero de frascos una vez que la
bacteria ha crecido, colocamos solución salina estéril. Colocamos cloro en un tiempo
determinado se incuba y el m.o. y contamos que promedio de bacterias tenemos.
Lo que se valora es el tiempo.

CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA CONDICION MICROBICIDA

 TEMPERATURA: El aumento de la temperatura con otro agente que puede ser

químico puede aumentar la destrucción de los m.o.
 CLASE DE MICROORGANISMOS: Las especies de microorganismos difieren en
su sensibilidad a los agentes ya sean estos físicos o químicos.
  ESTADO FISIOLOGICO DE LOS MICROORGANISMOS: Las células jóvenes por
tener un elevado metabolismo son muy susceptibles a la acción antimicrobiana en
comparación con las células viejas ya que estas últimos poseen un metabolismo
bajo.
 AMBIENTE: Las propiedades físicas y químicas del medio o las sustancias que
contiene el medio en el que se desarrollan los microorganismos tienen una gran
influencia en la velocidad y eficacia de la destrucción microbiana por Ej.: el calor
es más eficaz un ambiente acido en comparación con un ambiente alcalino.
La presencia de materia orgánica extraña en un ambiente reduce notablemente la
acción de un agente de control.

La materia orgánica combinada con el agente de control puede llevar a los

siguientes resultados:

 Combinación de la materia orgánica con el agente de control para producir

un producto que no es microbicida.

 Combinación con el agente de control para producir un precipitado

 Acumulación de la materia orgánica en las paredes celulares del

Microorganismo evitando de esta manera el contacto del agente y la célula.

Mecanismo de acción de los agentes microorganismo

Daño a la pared celular. Algunos daños de la pared celular son producidos por enzimas
conocidas como Lisosomas las cuales provocan ruptura de la pared celular creando lo
que se conoce como protoplastos los cuales son muy sensibles lisis uno si se le proveen
las condiciones ambientales necesarias. Los lisosomas se pueden encontrar en las
lágrimas leucocitos y secreciones mucosas.

El efecto antimicrobiano de la penicilina se le atribuye a la inhibición de la síntesis de la

pared celular.
Alteración de la permeabilidad celular.
El daño a esta membrana resulta una inhibición del desarrollo o muerte celular.
Las actividades anti microbiológica de los compuestos fenólicos, jabón, detergente,
sintéticos y compuestos cuaternarias de amonio llevan como efecto la alteración de la
permeabilidad celular y de esta manera se produce la salida de los constituyentes vitales
para la célula

Alteración de las moléculas de las proteínas y ácidos nucleicos

La viabilidad de una célula esta vinculada al mantenimiento de las proteínas y ácidos
nucleicos en un estado natural.
El aumento en la temperatura y la concentración de los agentes de control produce una
coagulación de forma irreversible en los compuestos vitales para la vida M B.

Inhibición de la acción enzimática.

La disminución de las reacciones que suministran energía son particularmente dañinas.
Muchos componentes utilizados como agentes de control poseen este mecanismo.
Entre estos sistemas afectados se encuentran el sistema de ácido tricarboxilico de
Krebs, el sistema glucolítico y el sistema citocromo oxidasa.
El cianuro es un agente que altera la vía enzimática del citocromo oxidasa.
El fluoruro inhibe el sistema glucolítico. Mientras que los compuestos arsenicales
trivalentes inhibe el sistema del ácido tricarboxilico del Krebs.
Es importante hacer mención que el dinitrofenol permite el desacople de las
fosforilaciones oxidativas.

Antimetabolitos: Un ejemplo clásico es el bloqueo del acido fólico por medio de

sulfonamidas. Muchos procesos vitales pueden ser inhibidos mediante sustancias
conocidas como Antimetabolitos.

Inhibición de la síntesis de ácidos nucleicos.

Existen 2 categorías en esta inhibición:

 Compuestos que interfieren en la formación de bloques estructurales de ácidos

nucleicos, nucleótidos, purinas y piridinas.
  Compuestos que intervienen en la polimerización de los nucleótidos en ácidos
nucleicos.

Control de los microorganismos por agentes físicos.

Temperatura, agua y vida

Conforme a que la temperatura se aumenta también la enzimática celular, pero existe un
límite en el cual las enzimas y otros nutrientes sufren procesos irresistibles de
desnaturalización o muerte m b.
Es así como cada microorganismo posee lo que se conoce como: Temperatura
cardinales, las cuales se clasifican de la forma siguiente:
Temperatura máxima: Temperatura sobre la cual no existe multiplicación celular.
Temperatura óptima: Temperatura en la cual se detiene la actividad metabólica y por lo
tanto mayor multiplicación celular.
Temperatura mínima: Temperatura baja la cual no existe multiplicación celular.
De acuerdo a la temperatura óptima de crecimiento los microorganismos se clasifican en:
Termófilas: Si su temperatura optima se encuentra a temperaturas altas
Mesófilos: Si una temperatura optima de crecimiento se encuentra a temperatura
ambiente.
Psicrófilos: Si una temperatura optima de crecimiento se encuentra a baja temperatura.
En cuanto a la presencia de la necesidad del agua es necesario que esta se encuentre en
forma disponible para ejercer las reacciones metabólicas importantes para la vida
microbicida.
El agua en un ambiente microbicida puede ser reducida por dos aspectos:

Presencia de solutos afines al agua.

Presencia de artefactos que absorban agua.
La disponibilidad del agua en términos físicos se expresa como Actividad acuosa que se
conoce Activity water (Aw).
Es de hacer notar que existe un fenómeno importante que relaciona la actividad acuosa y
este se conoce con el nombre de Ósmosis, el cual a su vez se define como: el proceso
mediante el cual el soluto se difunde a través de una membrana semipermeable, este
fenómeno tiene su origen en las diferencias de los gradientes de la concentración de
solutos a ambos lados de la membrana celular.
El proceso de ósmosis conduce a una deshidratación celular y el efecto contrario conduce
a un transporte activo.

Susceptibilidad de los microorganismos a altas temperaturas:

La susceptibilidad a temperatura de los microorganismos combinadas a un alto grado de
humedad son los métodos más efectivos para destruir Microorganismos.
El calor húmedo mata los microorganismos debido a la coagulación en forma irreversible
de las proteínas indispensables para la vida microbicida este mecanismo es mas rápido y
efectivo que el calor el cual baza su mecanismo en la oxidación de las proteínas.

Punto térmico letal. Se define como la temperatura mas baja a la que una suspensión
bacteriana muere en 10 min.

Tiempo térmico letal: Se define al tiempo más corto para matar una suspensión
bacteriana a una temperatura determinada y bajo condiciones especificas.

Reducción decimal de tiempo.

Se define a la unidad de destrucción de los microorganismos mediante el uso del calor

RDT = Población inicial-Población final

Tiempo final-Tiempo inicial
Población Inicial =1*1010 ufc /ml
Población secundaria =1*108 ufc /ml
Tf =5 min.
RDT = 1*1010 ufc/ml-1*108ufc/ml =1.98*109 ufc/ml
5-0
min

Aplicación de temperatura alta para destrucción de microorganismos.

Esterilización Fraccionaria

Algunos medios bacteriológicos y sustancias químicas no pueden calentarse por enzima

de 100cº por lo que se hace uso del procedimiento conocido como: Esterilización
Fraccionada o Tindalización el cual se basa en calentamientos sucesivos a temperatura
inferiores 100 Cº seguida de un proceso en incubación por el espacio de 3 días.

Agua Hirviente.
Este proceso físico únicamente asegura el proceso de desinfección pero no de
esterilización.

Pasterización
Este método únicamente elimina ciertos tipos de Microorganismos pero no todos.
La pasterización es un proceso que emplea calor ligero para reducir las poblaciones
microbianas de algunos productos como la leche, la característica de ser termo sensibles.
Originalmente este proceso se emplea para la eliminación de algunos organismos
productores de enfermedades como: la brucelosis, tifoidea, y tuberculosis además de
eliminar todo microorganismo la pasterización mejora las condiciones de almacenamiento
de la leche.
La pasteurización por destello es un proceso que emplea una temperatura de 71Cº por
espacio de 15 segundos para posteriormente iniciar proceso de enfriamiento rápido.
La pasterización tiene algunas ventajas:
Una menor modificación del sabor
Puede llevarse a cabo en un proceso de flujo continuo

CALOR SECO

Este tipo de proceso se recomienda cuando no se desea o no se requiere que el vapor a

presión tenga contacto completo y indirecto con el material que desea esterilizar, ejemplo:
artículos de vidrio, cajas de petri, pipetas, aceites, polvos y similares.
El aparato a utilizar para este proceso es el horno eléctrico o de gas el cual llega a
alcanzar una temperatura de 160-180cº por espacio de 2 horas

Incineración: Este proceso mata todos los microorganismos y se utiliza para destruir
esqueletos materiales de laboratorio infectados y otros materiales de desecho.

Otros procesos de esterilización física

Esterilización por Filtro: Este proceso se utiliza cuando los líquidos a esterilizar son
sensibles al calor. Esta técnica se basa en dejar pasar el líquido a esterilizar por una
superficie porosa en el cual quedaran retenidos los microorganismos presentes en la
sustancia.
Existen Tres tipos de filtros
 Filtro de Profundidad: Este se define como una placa fibrosa de papel, asbesto o
fibra de vidrio, la cual se constituye en una disposición fortuita de fibras
sobrepuestas.
 Filtro de Membrana Convencional:
Este es un disco constituido por acetato de celulosa fabricado de tal forma que contenga
pequeños agujeros.
 Filtro de Huella de Nucleación: Este filtro funciona como un verdadero tamiz
pues debido a que el diámetro de los agujeros es menor el líquido a filtrar pasa
con mayor dificultad a través de este.

Desecación: Este proceso produce la detención de la actividad metabólica seguido de

la declinación de la población viable total.
La desecación depende de varios factores tales como:

 Clase de microorganismo.
 Material en el que o con el que se desecan microorganismo.
 Terminación del proceso de desecación.
 Condiciones físicas alas cuales los microorganismos son expuestos tales como:
temperatura, luz y humedad.

Al parecer algunas especie de cocos como es el caso Meningococo y Gonococo son muy
sensibles a desecación, pero otros, Streptococcus y Mycobacterium tuberculosis son
altamente resistentes a este proceso.

El fenómeno de desecación tiene aplicación en la microbiología, en el proceso conocido

como LIOFILIZACIÓN.

Bajas Temperaturas.

En conclusión las bajas temperaturas no sirven para desinfectar o esterilizar de este punto
de vista, podríamos aceptar que las bajas temperaturas tienen un efecto bacteriostático
mientras altas temperaturas tienen un efecto bactericida.

A pesar de la capacidad de unos microorganismos para sobrevivir a las temperaturas

bajas existe un límite dentro del cuál ellas mueren.

El agua pura se congela a 0Cº mientras que el agua de mar se congela a -2.5Cº, a esta
temperatura todavía existen pequeñas bolsas microscópicas de agua que hacen posible
la vida microbiana, pero a -30Cº estas reservas de agua se congelan y por lo tanto la
posibilidad de vida desaparece.

El principal daño producido por la congelación celular posiblemente sea el daño físico
causado por pequeños cristales de hielo que rompe o lesiona la membrana celular, y por
lo tanto salida de los constituyentes celulares.

Congelación rápida Utilizamos nitrógeno líquido (explicar la formación de pequeños cristales de hielo y
su consecuencias en los m.o, haciendo la transición para las células alimenticias, enfocando el impacto nutricional)

Congelación lenta: se utiliza en el hogar (explicar la formación de grandes cristales de hielo y sus
consecuencias en los m.o haciendo la transición para las células alimenticias, enfocando el impacto nutricional)

Presión Osmótica.

Se define como el paso de sustancias de dentro hacia fuera solubles en agua a través de
una membrana semipermeable por medio de una diferencia en el gradiente de
concentración solubles a ambos lados de dicha membrana.

El proceso mediante el cual el soluto sale de la célula acompañado del agua, es decir (la
célula se deshidrata) se le llama plasmólisis, mientras que el proceso inverso se le llama
plasmóptisis.

Los organismos que pueden sobrevivir en altas concentraciones de soluto como es el

caso de la sal que se le conoce con el nombre de halofilicos mientras que a los que
resisten a altas concentraciones de azúcar se les llaman sacarofilicos.

Parece ser que la inhibición por el uso de sal puede andar en una concentración de 10 a
15%, mientras que la inhibición por azúcar la concentración.
Parece ser que la inhibición por el uso de sal puede andar en una concentración de 10 a
15%, mientras que la inhibición por azúcar la concentración puede ser 50 a 70%.
15% NaCl 50 a 70% azúcar

Compuesto inorgánico Compuesto Orgánico (no actúa como inhibidor)

Es un carbohidratos y la célula la toma como
No sirve como nutriente sustrato alimenticio.
Microbicida

Radiaciones

La energía se transmite a través del espacio de una gran variedad de formas llamadas
radiaciones, un ejemplo de esto son las radiaciones electromagnéticas que poseen dos
características: Ondas continuas y partículas discontinuas.

Estas radiaciones electromagnéticas poseen partículas descontinúas a las que se les

conoce como paquetes, quantas de energía y algunas veces se les conoce como fotones.
Los rayos Gamma y rayos” x” poseen una energía de 10 electrón-voltio y por esa razón se
les conoce como radiaciones ionizantes. (Es decir que posee suficiente energía para empujar los
electrones de la molécula y por lo tanto ionizarlos).

Cuando estas radiaciones pasan a través de la célula microbiana se produce: Hidrógeno

libre y Radicales Hidroxilo (OH-)

La radiación menor energética es la luz U.V y se caracteriza por ser absorbida por
algunos constituyentes celulares.

En microbiología la aplicación de las radiaciones tiene muchos usos y se le ha llegado a

considerar como un proceso de esterilización fría esto es debido al leve incremento de la
temperatura en el material que esteriliza.

Radiación U.V

Se incluyen en este grupo las radiaciones que se encuentran en el rango siendo mas letal
150 a 3900Aº sus usos radican a nivel de quirófanos y cuartos de llenado asépticos.
MECANISMO DE ACCIÓN: las sustancias a las que más daña esta radiación son los
ácidos nucleicos específicamente a la formación de dimero de pirimidina.

FOTOREACTIVACION: este proceso se lleva a cabo por la exposición de la célula a la luz

visible, pero esta nos llega a recuperar la eficiencia total de la célula. este proceso
necesita una enzima luz dependiente.

REACTIVACION POR EXCISION: este proceso se lleva a cabo por 2 enzimas

especificas: ADN-POLIMERASA: la cual sintetiza el fragmento faltante y la enzima ADN –
LIGASA que coloca el fragmento faltante en el lugar correspondiente.

Rayos “X” (Roentgen)

Estos rayos son letales para todos los M.O y formas superiores de vida, poseen una
considerable capacidad de penetración pero presentan los sigs. Inconvenientes: cuesta
mucho producirlos en cantidades suficientes y son difíciles de utilizar de forma eficiente ya
que salen en diferentes direcciones.

Rayos Gamma:

Esta radiación tiene mucha energía y son emitidas por ciertos isótopos radiactivos como
el Cobalto 60 (Co.60)

Estos rayos tienen un comportamiento similar a los rayos X con la diferencia que poseen
una longitud de onda más corta. Presentan una ventaja ya que presentan una mayor
capacidad de penetración de los rayos “X” y es por esa razón que se utiliza en la
esterilización de materiales de considerable grosor pero posee las siguientes desventajas:

1. Existen problemas para el desarrollo de una fuente de radiación a gran escala.

2. El diseño de un equipo de protección para el operador.

Otras fuerzas físicas para el control de la Microorganismo.

Electricidad
El paso de la corriente eléctrica por un cultivo MB mata un % de los mismos el mecanismo
de acción se basa en los siguientes: Existe un aumento en la temperatura generada por el
paso a través de la célula.

Se producen algunos cambios químicos que llevan a formar cloro y ozono en pequeñas
cantidades a nivel intracelular y que eje4rcen una acción bactericida; El uso de este
agente se ve limitado aunque su uso se ha hecho industrialmente en el tratamiento de la
leche, jugos de fruta y desinfección de aguas.

Filtración

Los factores que determinan el paso de los microorganismos a través del filtro son las
siguientes: porosidad, carga eléctrica del filtro, carga eléctrica del m.o y naturaleza del
líquido que se va a filtrar.

Control de los m.o. por agentes químicos.

Características de un desinfectante ideal

 SOLUBILIDAD: Se define a que el agente debe ser soluble en H2O

 ESTABILIDAD: Se refiere a las características que define que los cambios

químicos del agente sean mínimos al entrar en contacto con una población de m.o

 NO TOXICO PARA EL HOMBRE O ANIMALES: es decir letal únicamente para

los m.o.

 HOMOGENEIDAD: Debe ser homogéneo en su composición química, no debe

reaccionar con materia orgánica extraña.
  DEBERA SER TOXICO PARA LOS m.o TANTO A TEMPERATURA AMBIENTE
COMO A TEMP CORPORAL: es decir, no debe de incrementarse la temperatura
para aumentar la acción del agente.

 CAPACIDAD DE PENETRACIÓN: Su acción germicida se limitara al sitio de

aplicación.

 EL AGENTE NO DEBERA CORROER NI TEÑIR.

 PROPIEDAD DESODORANTE: es decir deberá tener un olor agradable o inodora.

 CAPACIDAD DETERGENTE: La acción detergente aumentara la acción

desinfectante.

 DISPONIBILIDAD: Deberá ser un precio razonable.

Selección de agentes químicos antimicrobianos.

Existen tres aspectos que determinan la selección de estos agentes:

 Naturaleza del material que será tratado: Se define a que la sustancia química a
utilizar deberá ser compatible con el material el que entrara en contacto. Ej.: ácido
con el metal.

 Tipo de M.O.: Existen diferencias en la susceptibilidad de los m.o (Ejemplo

Pseudomonas que es una bacteria que puede crecer en el jabón).

 Condiciones ambientales: Se requiere saber la influencia que ejerce ciertos

factores tales como: pH, Tº, presencia de concentración y presencia de materia
orgánica extraña sobre un agente en particular.
Principales grupos de agentes Antimicrobiano

 Fenol y Compuestos Fenólicos (ácido fenico). Este tipo de agente trabaja

desnaturalizando las proteínas las células para posteriormente dañar la membrana
celular algunos de ellos Hexcilresorcinol disminuye considerablemente la tensión
superficial la actividad de estos agentes se puede disminuir por los siguientes
factores: pH alto, presencia de materia orgánica temperatura baja y presencia de
jabón.

El ácido fenico puro es cristalino e incoloro en concentración del 2 al 5% se utiliza

para desinfecto de sustancias como orina, esputo, heces, materiales e
instrumentos El Cresol es mas potente que el ácido fenico mas bien trabaja con
tres componentes que lo conforman mas bien debería llamarse tricrisol este tiene
efecto químicos limitados; solubles en agua H 2O pero no en emulsificaciones y de
jabón.

 Alcohol.

El etanol es en concentraciones que van del 50-70% es efectivo contra las células
vegetativas pero no esporas, este agente no produce condiciones de esterilidad.

El metanol es menos bactericida que el etanol que además es mas toxico que
este, en conclusión se puede decir que el poder germicida de los alcoholes se
determina especialmente por el peso molecular.

El mecanismo de acción de los alcoholes se determina por los aspectos

siguientes:

 Desnaturalización de las proteínas

 Disolución de lípidos
 Acción deshidratante
 Halógenos.

a) Iodo
Es uno de los agentes mas antiguos y eficaces en el control Microbiano es un
elemento cristalino, azúl oscuro y con brillo metálico, es poco soluble en agua pero
es muy soluble en alcohol y soluciones acuosas de yoduro de Kº y sodio el agente
germicida del yodo se le conoce como Tintura de yodo.

b) Cloro y compuesto de cloro:

El gas comprimido se emplea de forma universal de suministros de H 2O potable.
Entre estos compuestos están: El hipoclorito de calcio Ca (OCl) 2 y el hipoclorito
de sodio Na (OCl) los cuales son compuestos ampliamente utilizados en la
industria y en el hogar.

El hipoclorito de Calcio a concentración del 50-70% es utilizado por diferentes

equipos de lechería y utensilios en restaurantes.

El hipoclorito de Sodio al 1% se utiliza para la higiene personal y como

desinfectante casero mientras que en concentraciones de 5-12% será como
blanqueador.

Las Cloraminas químicamente se caracteriza por uno o mas átomos de H+ de los

grupos amino de estos compuestos esta sustituido por cloro Ej. De estos
compuestos:

 Monocloramina.
 Cloramina T
 Azocloramina

Estos compuestos presentan una mayor estabilidad que los hipocloritos.

La acción germicida de estos compuestos radica en su formación del ácido
hipocloroso tal como se determina a continuación.
 Cl2 + H2O ____ HClO (ácido hipocloroso) + HCL
HCLO HCL +O (agente oxidante)

 Metales Pesados y otros Compuestos.

Los más efectivos para el control microbiano son: Mercurio, Plata, Cobre.

Los metales pesados poseen como características en su mecanismo de acción lo

que se conoce como: OLIGODINAMICA, la cual significa que una pequeña porción
de esta sustancia eliminara una gran cantidad de organismos se cree que el
mecanismo de acción de estos compuestos se deba a la afinidad de algunos iones
metálicos.

Los metales pesados actúan contra los m.o al combinarse con las proteínas y
posteriormente desnaturalizadas. Un ejemplo de esto es el Cloruro Mercúrico el
cual actúa sobre las enzimas que poseen grupos sulfihídrilos.

 Colorantes: Los más comunes son los derivados del Trifenilmetano y Acridina.

Dentro de los derivados del primero, se tienen: Verde Brillante de Cresilo, Verde de
Malaquita y Cristal Violeta.

Como derivados de la Acridina, se tienen los colorantes: Proflavina y Acriflavina.

 Ácidos y Álcalis.

La acción desinfectante de los álcalis depende de la disociación de los iones

hidroxilo resultante.

Los álcalis son más efectivos contra bacterias Gram- y virus en comparación con
bacterias Gram + y protozoarios. En general los ácidos son más efectivos que los
álcalis.
  Glutaraldehído

El compuesto es un dialdehído que a concentraciones del 2% presenta una amplia

variedad microbicida y se utiliza en el campo de la medicina para desinfectar
instrumentos urológicos.

 Quimioesterilizadores gaseosos: se basa en exponer los materiales a un gas a

una temperatura ambiente. La aplicación de estos compuestos es para materiales
sensibles al calor, Ejemplo de estos: Oxido de etileno, Beta Propiolactona y
Formol

Antibióticos

Los agentes quimioterapéuticos son sustancias que se usan para tratamientos de

infección o ayudan a disminuir la proliferación celular malignas, a estas sustancias se les
llama antibióticos. Las características ideales de un agente quimioterapeutico son las
siguientes.

a) Deberá destruir o impedir la actividad de un parásito sin provocar daños al

huésped o que este daño sea mínimo.
b) Ser capaz de actuar sobre parásitos antes de que penetre a la célula o tejido del
huésped.
c) No alterar los mecanismos naturales del huésped como es la producción de
fagocitos y anticuerpos.

Historia (Salvarsan)
Fue el primer medicamento ideado contra la sífilis y se aplico en el año de 1495 y que
tenia una base de Hg. (Mercurio), fue hasta 1910 que Paul Erlich ideo un producto que
eliminaba dicho m.o sin producir efectos secundarios.
 QUININA.

En 1630 los europeos descubrieron la corteza de un árbol conocido como quinina, el

cual era ampliamente usado por los indios del nuevo continente para la eliminación de
la Malaria.

SULFONAMIDAS.

Estos compuestos son especialmente activos para el tratamiento de infecciones

producidas por Shigella sp, Meningococo además se utilizo para el tratamiento de
infecciones causadas por: Streptococcus sp y Staphylococcus sp, además de
infecciones causadas por bacterias Gram- en las vías urinarias. Estos antibióticos son
útiles en el tratamiento de la prevención de enfermedades tales como: Endocarditis
bacteriana, fiebre reumática e infecciones de heridas o vías urinarias producidas por
cirugías o cateterización.

Las Sulfonamidas se definen como en producto metabólico que es perjudicial o de otro

organismo en pequeñas cantidades.

Los organismos vivos se pueden proteger además de otros organismos vivos por
medio de los mecanismos siguientes:

 Por amontonarlos o eliminarlos físicamente privándolos de un alimento a utilizar

 Haciendo el medio demasiado alcalino o demasiado ácido para sus competidores
 Modificación de la presión osmótica y la tensión superficial.
 Excretando sustancias que interfieren en el metabolismo de otros impidiendo su
desarrollo Cándida sp (se encuentra en vagina de mujeres y su población se incrementa debido al

desorden hormonal producido por el proceso de menstruación).

El termino antibiosis fue creado por el francés Vuillemin (1889) . Las primeras
investigaciones sistemáticas para el estudio de los antibióticos fueron realizadas por las
investigadoras Grathia y Dath (1829) con el descubrimiento del antibiótico
ACTINOMICETINA.
En 1929 Alexander Fleming descubrió la penicilina producida por el hongo Penicillium
sp. En 1939 René Dubos descubrió que la bacteria conocida como Bacillus brevis
producía antibióticos como Gramicidina y Tirocidina a este hallazgo se unió el
descubrimiento de la Estreptomicina – Sellman Waksman.

Propiedades de un antibiótico útil.

 Ser capaz de destruir o inhibir muchos m.o. a esto se le llama: Amplio espectro.
 Debe de impedir la aparición rápida de formas resistentes de un microorganismo.
 No debe producir efectos secundarios en el huésped, es decir no debe eliminar la
flora microbiana normal para no alterar el equilibrio natural del huésped.

Tipos de antibióticos

PENICILINA: Es un antibiótico, producido por los hongos Penicillium notatun y

Penicillium crisogenum.

Este antibiótico es útil contra bacterias Gram +, espiroquetas, Bacterias Gram- y

Diplococos Gram-. Las penicilinas naturales se preparan como sales de Sodio,
Potasio, Procaínas y otros.

Las penicilinas en forma natural son cristalinas e incoloras y se inactivan con los
siguientes elementos: acido Clorhídrico, Hidróxido de Sodio, Calor, Cisteina y la
enzima Penicilinasa.

El núcleo Básico de la penicilina lo constituye el acido Aminopenicilanico.

Algunas de las penicilinas semi-sintéticas producidas para un clínico es Feniticilina

que se absorbe mas fácilmente que la penicilina V.
La Meticilina es mas resistente a la penicilinaza por lo tanto menos probable que
inactive.

La ampicilina es un antibiótico de amplio espectro y fuertemente bactericida, carece de

toxicidad pero no resiste a la penicilinasa tampoco resiste al acido clorhídrico del jugo
gástrico.

Usualmente las bacterias Gram+ son más sensibles a los antibióticos que las
bacterias Gram-, aunque existen antibióticos que únicamente actúan contra estos
últimos.

A los antibióticos que actúan contra bacterias Gram+ y Gram- se les conoce como
amplio espectro. Es importante reconocer que los blancos bacterianos de los
antibióticos son: paredes celulares, membranas celulares, procesos biosinteticos de
proteínas y síntesis de ácidos nucleicos.

RESISTENCIA A LOS ANTIBIÓTICOS: Hay varias razones por las cuales pueden
haber resistencias hacia un antibiótico estas son:

 El organismo puede carecer de la estructura a la cual el antibiótico inhibe.

 El organismo puede ser impermeable al antibiótico.
 El organismo puede ser capaz de cambiar el antibiótico a una forma inactiva.
 El organismo pude cambiar el blanco del antibiótico.
 Mediante un cambio genético puede haber una alteración en la vía metabólica
a la cual el antibiótico bloquea.

ESTREPTOMICINA:

Este antibiótico, es producido por la bacteria Streptomyces griseus el cual tiene como
hábitat el suelo.

Este compuesto es muy importante por que inhibe muchos organismos que resisten a
la penicilina y sulfonamidas. Este antibiótico es efectivo contra Salmonella y
Mycobacterium tuberculosis.
Cuando se administran por periodos prolongados de tiempo tiene un efecto adverso
en el nervio craneal produciendo sordera y Vértigo debido al daño del octavo nervio
Craneal.

Química de la Estreptomicina

Este antibiótico es soluble en H2O, pero insoluble en Eter, Cloroformo y acetona.

Es estable en forma cristalina cuando se guarda 50Cº. No afecta el suero, Plasma
sanguíneo y líquidos corporales.

ERITROMICINA: este antibiótico fue descubierto por Sellman Waksman (1952)

producida de la bacteria Streptomyces erythraeus, esta sustancia es un importante
como bactericida para bacterias Gram+, Gram-, algunas espiroquetas y bacterias
resistentes la penicilina y estreptomicina.

CLORANFENICOL: También se le conoce como: Cloromicetina y químicamente se

caracteriza por poseer un anillo nitrobencenico que posee un cloro no iónico.

TETRACICLINA: Este antibiótico posee efectos bacteriostáticos y dentro de la familia

se tiene los siguientes:

 Clortetraciclina: producida por la bacteria Streptomyces aureofasciens

 Oxitetraciclina: producida por la bacteria Streptomyces rinosus

CEFALOSPORINAS: producida por el hongo marino llamado: Cephalosporium

acremonium. Es efectivo contra bacterias Gram+, Gram-. En este grupo se tiene los
antibióticos siguientes: Cefaloridina, Cefaloglicina y Cefalexina.

NISTATINA: Es un antimicótico para infecciones no sistémicos. Producido por la

bacteria Streptomyces noursei. Fue descubierto por Elizabeth Hazen y Rachel
Brown (1950). Este antibiótico es efectivo contra hongos y levaduras siguientes:
  Candida sp (Lev).
 Botrytis sp (Lev)
 Aspergillus sp ( hongo)
 Penicillium sp (hongo)

GRISEOFULVINA: esta es una sustancia que se obtiene del hongo Penicillium

griseofulvun y se usa para el tratamiento de infecciones micoticas no sistemicas.

POLIMIXINA: Producida por Bacillus polimixa se usa para el tratamiento de

infecciones causadas por Pseudomonas sp.

Agentes Quimioterapéuticos Sintéticos

NITROFURANOS: El furfural es un aldehído derivado del furano y que químicamente

se le conoce como: el II furaldehido. Fue descubierto en1832 cuando accidentalmente
se estudiaba la azúcar.

Fue en 1844 que Dodd y Stillman dieron a conocer las propiedades antimicrobianas
de este compuesto. Esta sustancia es efectiva contra bacterias Gram+ y Gram- ,
Protozoos y hongos que causan lesiones superficiales.

Hidrazida de ácido isónicotínico

Es efectiva contra la tuberculosis humana y su efecto se aumenta cuando se combina

con la estreptomicina.

ACIDO NADILIXICO.

Es útil contra bacterias Gram- causantes de infecciones urinarias su mecanismo de

acción es a través de inhibición síntesis ADN.

Ensayo de la Potencia Antimicrobiana de los Antibióticos

La potencia de los antibióticos se determina en tres métodos:
EL ENSAYO QQ: Es el mas preciso requiere menos tiempo pero son menos
sensibles.
EL ENSAYO BIOLOGICO: Expresa las unidades de un determinado antibiótico que
ejerce un efecto bactericida o bacteriostático en una población m.b.