Escuela Profesional de Ingeniería Biotecnológica: Tesis Presentada Por El Bachiller

Universidad Católica de Santa María
Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Bioquímicas y Biotecnológicas.
Escuela Profesional de Ingeniería Biotecnológica
“DISEÑO Y EVALUACIÓN DE UN BIORREACTOR UASB PARA

DEPURACIÓN BIOLÓGICA DE AGUAS RESIDUALES
PROCEDENTES DE LAVADO DE FIBRA DE ALPACA Y LA
PRODUCCIÓN DE BIOGÁS.”
Tesis Presentada por el Bachiller:

Salazar Espinoza, Ximena Guadalupe
Para optar el Título Profesional de:
Ingeniera Biotecnóloga
Asesor:
Ing. Barreda del Carpio, Jaime Ernesto
AREQUIPA – PERÚ
2017
Dedicatoria
A Dios por ser mi fuerza; a mis Padres y a mi

Hermana por todo su apoyo incondicional.
ii
Agradecimiento
A Dios. Por estar conmigo en cada uno de mis pasos; por fortalecer mi corazón e
iluminar mi mente y por haber puesto en mi camino a todas aquellas personas que han sido
un soporte y compañía durante mi vida, en especial en mi periodo de estudios.
A mis Padres. Guadalupe y Edgar; por ser el pilar de mi vida y demostrarme

siempre su cariño y apoyo incondicional sin importar nuestras diferencias de opinión; por
toda la confianza depositada en mí y enseñarme que todo lo puedo lograr de la mano de
Dios.
A mi Hermana. Michelé, por estar todos los días, por ayudarme cuando más la
necesite y por tener siempre una sonrisa a pesar de todo. Por ser más que solo una hermana.
A mi Familia. Abuelitas, Tíos, Primos y Sobrinos por tener una palabra de aliento
y un consejo para mí. A mis seres queridos en el cielo.
A la Universidad Católica Santa María. En especial a mi Escuela Profesional de

Ingeniería Biotecnológica; por todos los conocimientos impartidos a lo largo de mi carrera
profesional que permitirán que sea una persona de éxito.
Al Dr. José Villanueva Salas. Por acompañarme con consejos y enseñanzas en todo
el desarrollo de mi carrera universitaria, por ser un amigo en quien puedo confiar y por
darme la confianza para el desarrollo de esta investigación.
Al Ing. Jaime Barreda del Carpio. Por su paciencia y apoyo en el término de esta
investigación.
Al Dr. Fredy Molina y a la Ing. Cinthia. Por su tiempo, sugerencias y apoyo en la

culminación de mi tesis.
A todas las personas que de una u otra manera ayudaron en el desarrollo de esta
investigación estando en esta etapa de mi vida; brindándome sus conocimientos y apoyo
incondicional.
iii
Índice de Contenido
Resumen ....................................................................................................................... xi
Abstract ..................................................................................................................... xiii
Introducción ................................................................................................................ xv
Objetivos..................................................................................................................... xix
Objetivo general. ....................................................................................................... xix
Objetivos específicos.................................................................................................. xix
Capítulo I: Marco Teórico ........................................................................................... 1
1.1. Planta de Procesamiento de Lavado de Fibra de Alpaca. ............................... 1
1.1.1. Ubicación. ....................................................................................................... 1
1.1.2. Proceso de lavado de fibra de alpaca. .......................................................... 2
Impurezas encontradas en la fibra. ..................................................................... 2
Descripción del proceso de lavado. ...................................................................... 3
1.2. Agua Residual ...................................................................................................... 4
1.2.1. Agua residual del lavado de fibra de alpaca................................................ 5
1.3. Legislación Peruana Ambiental Vigente ........................................................... 6
1.3.1. Ley general del ambiente (Ley N° 28611). ................................................... 6
1.3.2. Decreto Supremo N° 021-2009-Vivienda, y sus modificatorias ................. 7
1.3.3. Resolución de consejo directivo N° 025-2011-SUNASS-CD. ..................... 9
1.4. Biorreactor UASB ............................................................................................. 10
1.4.1. Degradación anaerobia de materia orgánica dentro del biorreactor
UASB. ...................................................................................................................... 12
Hidrólisis. ............................................................................................................. 12
Acetogénesis. ........................................................................................................ 13
Metanogénesis. ..................................................................................................... 13
1.4.2. Ventajas del biorreactor UASB. ................................................................. 14
1.4.3. Desventajas del biorreactor UASB. ............................................................ 15
1.4.4. Diseño del biorreactor UASB...................................................................... 15
Diseño del cuerpo del biorreactor. ..................................................................... 16
Diseño campana GLS y de deflectores. ............................................................. 17
1.4.5. Factores que influyen en el funcionamiento del biorreactor UASB. ....... 21
Arranque del biorreactor UASB. .................................................................... 21
Velocidad ascensional. ...................................................................................... 22
Tiempo de residencia hidráulica (TRH). ........................................................ 23
Recirculación del efluente en el biorreactor UASB. ...................................... 23
pH. ...................................................................................................................... 23
Temperatura. ..................................................................................................... 24
1.5. Nódulos Bacterianos.......................................................................................... 25
1.5.1. Ventajas de la formación de nódulos. ........................................................ 25
1.5.2. Formación de nódulos. ................................................................................ 26
Modelos fisicoquímicos para el proceso de nodulación. ................................ 26
Modelos estructurales para el proceso de nodulación. .................................. 29
Modelo general de cuatro etapas. .................................................................... 31
1.5.3. Efecto del ion calcio (Ca+2) en el proceso de nodulación. ......................... 32
1.5.4. Características de los nódulos. .................................................................... 32
iv
Características físicas de los nódulos. ............................................................. 33
Características químicas de los nódulos. ........................................................ 33
1.6. Biogás ................................................................................................................. 33
1.6.1. Composición de biogás. ............................................................................... 34
1.6.2. Producción de metano. ................................................................................ 34
Capítulo II: Materiales y Métodos ............................................................................ 36
2.1. Materiales ........................................................................................................... 36
2.1.1. Muestra. ........................................................................................................ 36
2.1.2. Material de Laboratorio. ............................................................................. 36
Equipos............................................................................................................... 36
Material de laboratorio. ................................................................................... 37
Material de vidrio. ............................................................................................ 37
Reactivos. ........................................................................................................... 38
Medios de cultivo............................................................................................... 38
Otros. .................................................................................................................. 38
2.2. Métodos .............................................................................................................. 39
2.2.1. Aislamiento e identificación de bacterias nativas del agua residual del
procesamiento de fibra de alpaca. ........................................................................ 39
Obtención de muestra de aguas residuales de fibra de alpaca. .................... 39
Aislamiento cepas nativas en muestras de agua residual del lavado de fibra
de alpaca. ........................................................................................................... 40
Identificación de cepas con capacidad de producir biogás. .......................... 40
Elaboración de curvas de crecimiento de cepas nativas. ............................... 41
Medición de producción de biogás por bacterias nativas.............................. 41
Identificación molecular de cepas nativas anaerobias con mayor capacidad
de producción de biogás. .................................................................................. 42
2.2.2. Diseño y construcción del biorreactor UASB. ........................................... 42
2.2.3. Evaluación del proceso de nodulación en el biorreactor UASB. ............. 46
Determinación del caudal (Q). ......................................................................... 46
Determinación de la velocidad ascensional (Va). ............................................ 46
Determinación del Tiempo de residencia hidráulica (THR). ........................ 47
Determinación de cantidad de CaCl2. ............................................................. 47
Condiciones de operación del biorreactor. ..................................................... 47
Determinación del área de los nódulos respecto al tiempo. .......................... 48
Determinación de producción de nódulos....................................................... 48
Análisis de parámetros. .................................................................................... 49
2.2.4. Determinación de los parámetros de funcionamiento del biorreactor
UASB. ...................................................................................................................... 50
Evaluación de nodulación inicial y final ......................................................... 50
Evaluación de la producción de biogás. .......................................................... 50
Análisis de parámetros. .................................................................................... 51
Determinación de tiempo de digestión. ........................................................... 51
2.2.5. Evaluación de eficiencia del proceso de depuración del agua residual y la
producción de biogás. ............................................................................................ 51
Evaluación inicial de parámetros. ................................................................... 51
Evaluación de nodulación inicial y final. ........................................................ 51
v
Evaluación final de parámetros ....................................................................... 52
Evaluación de la producción de biogás. .......................................................... 52
Capítulo III: Resultados y Discusiones ..................................................................... 53
3.1. Aislamiento e identificación de bacterias nativas del agua residual del
procesamiento de fibra de alpaca. .......................................................................... 53
3.1.1. Aislamiento de cepas nativas en muestras de agua residual del lavado de
fibra de alpaca. ....................................................................................................... 53
3.1.2. Identificación de cepas con capacidad de producir biogás. ..................... 55
3.1.3. Elaboración de curvas de crecimiento de cepas nativas. .......................... 56
3.1.4. Medición de producción de biogás por bacterias nativas. ....................... 58
3.1.5. Identificación molecular de cepas nativas anaerobias con mayor
capacidad de producción de biogás. ..................................................................... 60
3.2. Diseño y construcción del biorreactor UASB. ................................................ 61
3.3. Evaluación del proceso de nodulación en el biorreactor UASB. .................. 63
3.3.1. Determinación del caudal. ........................................................................... 64
3.3.2. Determinación de la velocidad ascensional. .............................................. 64
3.3.3. Determinación del Tiempo de residencia hidráulica (THR). ................... 65
3.3.4. Determinación de cantidad de CaCl2. ........................................................ 66
3.3.5. Condiciones de operación del biorreactor. ................................................ 66
3.3.6. Determinación del área de los nódulos respecto al tiempo. ..................... 68
3.3.7. Determinación de producción de nódulos. ................................................ 71
3.3.8. Análisis de parámetros. ............................................................................... 72
3.4. Determinación de los parámetros de funcionamiento del biorreactor UASB
.................................................................................................................................... 74
3.4.1. Evaluación de nodulación inicial y final .................................................... 74
3.4.2. Evaluación de la producción de biogás. ..................................................... 76
3.4.3. Análisis de parámetros. ............................................................................... 77
3.4.4. Determinación de tiempo de digestión. ...................................................... 79
3.5. Evaluación de eficiencia del proceso de remoción de contaminación y la
producción de biogás. .............................................................................................. 80
3.5.1. Evaluación inicial de parámetros. .............................................................. 80
3.5.2. Evaluación de nodulación inicial y final. ................................................... 80
3.5.3. Evaluación final de parámetros .................................................................. 81
3.5.4. Evaluación de la producción de biogás. ..................................................... 86
Capítulo IV: Conclusiones y Recomendaciones ...................................................... 87
4.1. Conclusiones ...................................................................................................... 87
4.2. Recomendaciones .............................................................................................. 88
Referencias .................................................................................................................. 89
Anexos.......................................................................................................................... 99
vi
Índice de Figuras
Figura 1. Diagrama de flujo del procesamiento de fibra de alpaca. ............................... 4

Figura 2. Biorreactor UASB a pequeña escala. .............................................................. 11
Figura 3. Proceso de degradación anaerobia. ................................................................. 13
Figura 4. Esquema general del biorreactor UASB. ........................................................ 16
Figura 5. Esquema de la campana GLS. ......................................................................... 21
Figura 6. Modelo de crecimiento en sólidos suspendidos colonizados de Perebom. ... 27
Figura 7. Modelo de unión a iones positivos multivalentes............................................ 28
Figura 8. Modelo de las cuatro etapas. i) el trasporte de células, ii) adsorción inicial,
iii) adhesión irreversible, iv) la formación de los nódulos.............................................. 29
Figura 9. Modelo de Capetown ........................................................................................ 30
Figura 10. Modelo de Multicapa ...................................................................................... 31
Figura 11. Puntos de muestreo. ........................................................................................ 40
Figura 12. Conformación de sistema para medir producción de biogás. ..................... 42
Figura 13. Tubos con caldo tioglicolato. .......................................................................... 54
Figura 14. Placas de Agar sangre con cepas aisladas. .................................................... 55
Figura 15. Curva de crecimiento relacionando Nº de bacterias con el tiempo de la
cepa Efluente 1. .................................................................................................................. 56
Figura 16. Curva de crecimiento relacionando Nº de bacterias con el tiempo de la
cepa Lodo 2. ....................................................................................................................... 57
Figura 17. Curva de crecimiento relacionando g/mL de bacterias con el tiempo de la
cepa Efluente 1. .................................................................................................................. 57
Figura 18. Curva de crecimiento relacionando g/mL de bacterias con el tiempo de la
cepa Lodo 2. ....................................................................................................................... 57
Figura 19. Curva de crecimiento bacteriano para la cepa Efluente 1. ......................... 58
Figura 20. Curva de crecimiento bacteriano para la cepa Lodo 2. ............................... 58
Figura 21. Sistema para la medición de la producción de biogás. ................................ 59
Figura 22. Producción de biogás por las cepas y el consorcio ....................................... 60
Figura 23. Diseño 3D del biorreactor UASB y el sistema de recirculación. ................. 62
Figura 24. Arranque del biorreactor ............................................................................... 67
Figura 25. Desarrollo de nódulos en el Experimento 1 (Sin Ca+2) ................................ 68
Figura 26. Desarrollo de nódulos en el Experimento 2 (Con Ca+2). .............................. 69
Figura 27. Comparación del desarrollo nodular de las dos experimentaciones .......... 70
Figura 28. Imagen de nódulos en cada proceso luego de 25 días. ................................. 71
Figura 29. Imágenes iniciales y finales de la experimentación 1 ................................... 73
Figura 30. Imágenes iniciales y finales de cada experimentación ................................. 74
Figura 31. Biorreactor UASB con producción de biogás ............................................... 77
Figura 32. Curvas para la conductividad en las tres repeticiones. ............................... 78
Figura 33. Curvas para la salinidad en las tres repeticiones. ........................................ 78
Figura 34. Curvas para los sólidos disueltos totales en las tres repeticiones. .............. 78
Figura 35. Curvas para los sólidos suspendidos totales en las tres repeticiones .......... 79
Figura 36. Biorreactor UASB inicial y final. ................................................................... 85
vii
Índice de Tablas
Tabla 1. Relación de impurezas totales presentes en la fibra. ......................................... 2

Tabla 2. Valores máximos admisibles para descargas al sistema de alcantarillado
(Anexo N°1) .......................................................................................................................... 8
Tabla 3. Definición de rangos de parámetros. .................................................................. 9
Tabla 4. Factores de ajuste por cada rango. ................................................................... 10
Tabla 5. Principales objetivos del dispositivo GLS para sistemas UASB .................... 17
Tabla 6. Resumen de directrices provisionales para el diseño del dispositivo
separador de gas y sólidos. ................................................................................................ 17
Tabla 7. Condiciones para el funcionamiento del biorreactor UASB .......................... 48
Tabla 8. Resultados de la coloración de Gram para cada cepa aislada. ....................... 54
Tabla 9. Resultados de producción de biogás evidenciado por la ruptura del agar. .. 56
Tabla 10. Determinación de volumen de inóculo. ........................................................... 59
Tabla 11. Resultados de secuenciación de cepas ............................................................. 60
Tabla 12. Determinación de volumen de inóculo para el biorreactor. ......................... 67
Tabla 13. Volumen de nódulos generados en Experimentación 1 y 2........................... 72
Tabla 14. Porcentajes de remoción promedio de cada Experimentación .................... 72
Tabla 15. Medición de final de parámetros por experimentación ................................ 73
Tabla 16. Evaluación de nodulación inicial y final ......................................................... 75
Tabla 17. Evaluación de la producción de biogás ........................................................... 76
Tabla 18. Evaluación de los parámetros iniciales ........................................................... 80
Tabla 19. Evaluación del proceso de nodulación ............................................................ 81
Tabla 20. Evaluación de los parámetros finales ............................................................. 82
Tabla 3. Definición de rangos de parámetros ................................................................. 83
Tabla 4. Factores de ajuste por cada rango .................................................................... 83
Tabla 21. Evaluación del porcentaje de remoción .......................................................... 84
Tabla 22. Evaluación de la producción de biogás ........................................................... 86
viii
Índice de Anexos
Anexo 1. Plano de Ubicación Planta de Procesamiento de Lavado de Fibra de Alpaca

............................................................................................................................................. 99
Anexo 2. Caldo Tioglicolato. ........................................................................................... 100
Anexo 3. Agar Sangre. ..................................................................................................... 101
Anexo 4. Panel fotográfico de tinción de Gram ............................................................ 102
Anexo 5. Panel fotográfico de producción de biogás, evidenciado con la ruptura de
agar ................................................................................................................................... 103
Anexo 6. Tabla de datos para la elaboración de curvas de crecimiento para la cepa
Efluente 1. ......................................................................................................................... 104
Anexo 7. Tabla de datos para la elaboración de curvas de crecimiento para la cepa
Lodo 2. .............................................................................................................................. 105
Anexo 8. Plano del cuerpo del biorreactor UASB. ....................................................... 106
Anexo 9. Cálculos para el diseño de campana y deflectores ........................................ 110
Anexo 10. Plano de deflectores y campana ................................................................... 116
Anexo 11. Tablas de datos de medición de área de nódulos con imágenes. ............... 117
Anexo 12. Parámetros iniciales y finales de las Experimentaciones 1 y 2. ................. 121
Anexo 13. Tablas de datos de parámetros ..................................................................... 122
Anexo 14. Resultados muestras control de calidad UCSM.......................................... 124
ix
Lista de Abreviaturas
UASB: Up Flow Anaerobic Sludge Blanket – Reactor de manto de lodos de flujo

ascendente.
VMA: Valores Máximos Admisibles.
TRH: Tiempo de Residencia Hidráulica.
DQO: Demanda Química de Oxígeno.
DBO: Demanda Bioquímica de Oxígeno.
SST: Sólidos Suspendidos Totales.
A y G: Aceites y Grasas.
Campana GLS: Campana separadora trifásica Gas-Líquido-Sólido.
AGVs: Ácidos Grasos Volátiles.
VC: Velocidad de flujo en la campana.
Va: Velocidad ascensional.
Aabertura: Área de la abertura.
AR: Área del biorreactor.
ACampana: Área de la campana.
RCampana: Radio de la campana.
Rr: Radio del reactor.
Wabertura: Ancho de la abertura.
WG: Altura del tubo de salida.
HG: Altura de la campana
TV: Traslapo.
WD: Ancho de los deflectores.
ECP: Polímeros extracelulares
x
Resumen
El uso de reactores anaerobios de flujo ascendente (UASB por sus siglas en inglés)
viene demostrando gran eficiencia en la depuración de aguas residuales domésticas e
industriales; pero uno de los problemas de este tipo de biorreactores son los largos periodos
de arranque, debido a que el proceso de nodulación dentro del biorreactor es bastante lento;
el conglomerado de microorganismos que forman los nódulos son los que permiten la
descomposición de materia hasta la formación de metano y dióxido de carbono.
En esta investigación se buscó diseñar y evaluar el funcionamiento de un biorreactor

UASB para la depuración de aguas residuales procedentes del lavado de la fibra de alpaca y
medir la producción de biogás. El biorreactor diseñado tiene un volumen efectivo de 12.15
L, operó a una temperatura de 35 ºC y con una velocidad ascensional de 0.43 m/h.
Para incrementar la cantidad de bacterias dentro del reactor se aisló bacterias nativas
del agua residual, las cuales fueron identificadas molecularmente, siendo las cepas
Lysinibacillus sp. y Lysinibacillus varians las cuales tienen capacidad para descomponer
materia orgánica; se añadió el CaCl2 en una proporción de 200 mg/L de esta forma se mejoró
la adherencia entre las bacterias para disminuir el tiempo en la formación de los nódulos
xi
bacterianos. Los nódulos bacterianos llegaron a tener un área promedio de 14.3444 mm2 al
término de la última experimentación la cual tuvo un tiempo de residencia hidráulica (TRH)
de 7 días en recirculación para la depuración del agua residual del lavado de fibra de alpaca
y se obtuvo valores de 871.00 mg/L DQO, 300.00 ppm DBO, 258.00 mg/L SST y 54.00
mg/L de aceites y grasas; cumpliendo de esta forma los Valores Máximos Admisibles para
descarga de agua en el alcantarillado. De este proceso se obtuvo una producción de biogás
de 0.24 m3 CH4/Kg DQOremovido.
Palabras Claves:
Biorreactor UASB, depuración de agua residual, nodulación, biogás.
xii
Abstract
The use of up flow anaerobic sludge blanket (UASB) has been demonstrating great
efficiency purification of domestic and industrial wastewater; but one of the problems of
this type of bioreactors is the long start-up periods, due to the fact that the nodulation process
inside the bioreactor is quite slow; the conglomerate of microorganisms that form the
nodules are those that allow the decomposition of matter until the formation of methane and
carbon dioxide.
This research sought to design and evaluate the operation of a UASB bioreactor for
the purification of wastewater from the washing of alpaca fiber and to measure the
production of biogas. The designed bioreactor has an effective volume of 12.15 L, operated
at a temperature of 35 ºC and with a rising speed of 0.43 m/h.
To increase the number of bacteria inside the reactor, bacteria were isolated native
to the wastewater, which were identified molecularly, being the strains Lysinibacillus sp.
and Lysinibacillus varians which have the capacity to decompose organic matter; CaCl2 was
added in a proportion of 200 mg/L in this way the adhesion between the bacteria was
improved to decrease the time in the formation of the bacterial nodules. The bacterial
xiii
nodules reached an average area of 14.3444 mm2 at the end of the last experimentation which
had a hydraulic residence time (TRH) of 7 days in recirculation for the purification of the
residual water from the alpaca fiber wash and values were obtained of 871.00 mg/L COD,
300.00 ppm BOD, 258.00 mg/L SST and 54.00 mg/L of oils and fats; thus, complying with
the Admissible Maximum Values for the discharge of water into the sewer system. From
this process, a biogas production of 0.24 m3CH4/ KgDQOremoved was obtained.
Keywords:
UASB bioreactor, wastewater treatment, nodulation, biogas.
xiv
Introducción
La gran cantidad de aguas residuales generadas por la industria textil, requiere buscar
tratamientos que permitan la depuración de estas, la depuración biológica de aguas
residuales permite disminuir la cantidad de contaminantes en la misma; de esta forma pueda
alcanzar los valores máximos permitidos, para su descarga en el alcantarillado, sin que esta
genere un costo adicional. Existen dos formas de hacer esta depuración, aerobia es decir en
presencia de oxígeno o anaerobia en ausencia de oxígeno [1].
Cualquiera que sea la forma de hacer la depuración, al ser un tratamiento biológico

se requiere del contacto entre el sustrato, que en este caso es el agua residual, y la biomasa,
que son todos los microorganismos presentes en el sistema; es por ello del interés de
desarrollar biorreactores que aumenten el tiempo de contacto y el método para que este se
realice. Esta búsqueda dio como resultado diferentes tipos de sistemas como son los de
crecimiento suspendido, de película fija o una combinación de ambos. Los sistemas de
depuración biológica anaerobia comenzaron a usarse en el siglo XIX, donde se observó que
era un proceso que requería bastante tiempo y para la cantidad de agua que se requería
procesar lo hacía inviable, pero en cuanto al uso energético del mismo era menor que un
xv
tratamiento aerobio por esta razón se comienza a investigar más los tratamientos anaerobios
[2]
.
Es así que por los años 70 Gatze Lettinga y sus colaboradores en la Universidad
Agrícola de Wageningen – Holanda, desarrollan el reactor UASB (UpFlow Anaerobic
Sludge Blanket) un biorreactor anaerobio con manto de lodos de flujo ascendente, el
desarrollo de este biorreactor se dio al encontrar que los lodos anaerobios tienen
características que permiten su floculación y sedimentación es decir la capacidad de formar
nódulos bacterianos y albergarse en el fondo del reactor sin que requiera de un soporte [2, 3].
Los biorreactores UASB son de interés debido a que presentan varios beneficios
sobre otros tipos de sistemas, como es la ausencia de equipos de control sofisticados, la
generación de lodos no es elevada, tiene consumos energéticos bajos y durante el proceso
se genera biogás el cual tiene alto poder calorífico [3]. La particularidad del biorreactor UASB
comparado con otros sistemas anaerobios es que cuenta con una campana separadora de
gases (Campana GLS) la cual permite la colección del biogás generado por el proceso y
evita que los nódulos bacterianos salgan del biorreactor con el efluente, además de tener
deflectores antes de la campana, mejorando la separación de las tres fases dentro del
biorreactor [4].
Dentro de los biorreactores UASB se encuentran tres zonas: la zona de lecho de lodos
o cama de lodos, zona de dispersión o manto de lodos y la zona de separación gas-liquido-
solido [4]. En la zona de lecho de lodos se encuentran los nódulos bacterianos de los cuales
depende el rendimiento del biorreactor, pero para conseguir la formación de los nódulos
bacterianos se requieren de periodos de tiempo bastante largos, [5] debido a que las bacterias
anaerobias son de crecimiento lento y se necesita de la interacción de diferentes tipos de
bacterias para que puedan desarrollar cada una de las etapas de la degradación hasta lograr
la descomposición de la materia orgánica en metano principalmente y dióxido de carbono
en menores cantidades [2, 4, 6].
Para mejorar la eficiencia del biorreactor UASB es necesario disminuir el tiempo de

arranque, tomando algunas medidas para mejorar la nodulación, puede aumentarse la carga
microbiana dentro del biorreactor inoculándolo de esta forma existirá más bacterias en busca
de unirse para generar los nódulos [7]. La unión entre las bacterias se ve perjudicada por las
cargas negativas que estas tienen en sus paredes haciendo que las fuerzas de repulsión eviten
xvi
la adherencia de las bacterias, por eso se requiere de Ca+2 [8] para que suministre las cargas
positivas que neutralizaran la fuerza de repulsión existente entre las bacterias; logrando la
agregación microbiana y la formación de complejos más estables [6, 9].
Otra medida que puede ser usada para incrementar la eficiencia del proceso es la
recirculación del efluente, debido a que, al reingresar el efluente al biorreactor, pasando
nuevamente por la manta de lodos, la degradación se continuará dando, además de evitar
que los microorganismos sean lavados dando mayor oportunidad a que se adhieran para la
formación de nódulos y su desarrollo [10, 11].
Los biorreactores UASB son los más utilizados para aguas residuales industriales,
su uso se da para el tratamiento de efluentes de refinación de azúcar, cervecería, industria
del papel, plantas químicas y petroquímicas, tratamiento de lixiviados y en la industria textil
debido a que permite la conversión de materia orgánica en metano y además la recuperación
[3, 12]
de agua para el proceso industrial . Se sabe que existen unos 500 biorreactores
anaerobios en su mayoría UASB a escala real en todo América Latina como Brasil,
[13, 14]
Colombia, Argentina, México y Guatemala su uso se ve intensificado en áreas
tropicales [15, 16].
Además de presentar gran eficiencia en la depuración de aguas residuales, el

biorreactor UASB forma biogás durante el proceso, lo cual es importante debido a que
significa una producción de energía renovable. En la actualidad los requerimientos
energéticos son cubiertos por los combustibles fósiles, los cuales generan altas emisiones de
CO2 que al concentrarse en la atmósfera generan el calentamiento global. El protocolo de
Kioto establece que las emisiones de CO2 deben disminuirse en un 5 % pero esto no se viene
cumpliendo, siendo una de las medidas para disminuir estas emisiones, el uso de nuevas
fuentes de energía en especial si provienen de fuentes renovables como es el caso del
biometano producido en biorreactores anaerobios [17].
Este trabajo busca utilizar el biorreactor UASB para la depuración de agua residual
producida en la industria textil durante los procesos de lavado de la fibra de alpaca; ya que
esta tiene valores elevados de contaminación sobrepasando algunos de los Valores Máximos
Admisibles (VMA) generando un costo adicional a las empresas textiles en nuestro país por
la descarga de sus efluentes en el servicio de alcantarillado. Además, se busca la disminución
en el tiempo de arranque del biorreactor UASB mejorando el proceso de nodulación
xvii
inoculando el biorreactor con bacterias nativas del agua residual, la adición de Ca+2 y la
recirculación en el sistema; y medir la producción de biogás durante el proceso de
depuración biológica.
xviii
Objetivos
Objetivo general.
Diseñar y evaluar un biorreactor UASB para depurar biológicamente aguas

residuales procedentes de lavado de fibra de alpaca y producir biogás.
Objetivos específicos.
1. Aislar e identificar bacterias nativas del agua residual del procesamiento de

fibra de alpaca.
2. Diseñar y construir un biorreactor UASB.
3. Evaluar el proceso de nodulación en el biorreactor UASB.
4. Determinar los parámetros de funcionamiento del biorreactor UASB a nivel

piloto.
5. Evaluar la eficiencia del proceso de remoción de contaminación y la

producción de biogás.
xix
Hipótesis
Dado que la biomasa mantenida en fermentadores anaerobios permite la depuración

de aguas residuales es probable que el uso de un biorreactor UASB para el tratamiento del
agua residual del lavado de la fibra de alpaca pueda conseguir la depuración bacteriana
parcial del agua residual y la obtención de biogás.
xx
1
Capítulo I: Marco Teórico
1.1 Planta de Procesamiento de Lavado de Fibra de Alpaca.
1.1.1. Ubicación.
La planta de procesamiento de fibra de alpaca, se encuentra ubicada en la

irrigación Zamácola calle sin nombre sin número sector G en el distrito de Cerro
Colorado, provincia de Arequipa, departamento de Arequipa. Con un área total de
43,000 m2. Quedando ubicada a 3.1 Km del aeropuerto de la ciudad y con salida a la
Panamericana Sur (Anexo 1).
En esta planta se realiza el tratamiento de la materia prima que incluye el lavado

de la fibra y el acondicionamiento de la misma. Además de otros procesos dentro de la
planta como el ensimaje, blanqueamiento, cardado y el peinado.
2
1.1.2. Proceso de lavado de fibra de alpaca.
El proceso de lavado de la fibra de alpaca tiene como objetivo el eliminar las

impurezas naturales que tiene la fibra, así como las adicionales, para esto se usa agua
caliente y detergente; Wang, Wang & Xiu [18] reportan que los contaminantes de la fibra
pueden significar un 40% del peso inicial.
Impurezas encontradas en la fibra.
Las impurezas de la fibra de alpaca incluyen grasas, suint, impurezas inorgánicas,

impurezas orgánicas, material vegetal y agua [19]; las cuales deben ser retiradas durante
el proceso de lavado quedando sus restos en el agua residual que se generará. En la
Tabla 1 se muestra los tipos y clases de impurezas presentes en la fibra.
En el caso de las impurezas naturales tenemos a las grasas, las cuales podemos
dividirlas en dos grupos en oxidadas y sin oxidar. Las grasas sin oxidar durante el
proceso de lavado son removidas fácilmente, pero se reposita en la fibra, en cambio las
grasas oxidadas son difíciles de remover, pero no se repositan en la fibra quedando en
el agua residual sirviendo además para formar complejos con otros contaminantes [20].
Otra impureza natural es el suint o sudor, a este dándole las condiciones adecuadas
de pH mayor a 9 y a una temperatura mayor a 30°C puede servir como jabón; en su
composición tiene una parte soluble y otra que se disuelve más lentamente [18].
Las impurezas adquiridas son las que el animal adquiere durante el pastoreo como
el material vegetal que puede ser semillas, hojas, algunas ramas, etc; la suciedad que
trae la lana a causa de arena, partículas de arcilla, restos de materia fecal y células
muertas, todas son eliminadas con el lavado quedando los restos en el agua residual del
proceso [20]. Mientras que las impurezas aplicadas se encuentran en la fibra debido a la
aplicación por el ganadero de este tipo de sustancia en el pelaje del animal esto para
identificarlo; estas sustancias causan un problema para su retiro en el lavado por esta
razón el segmento de fibra marcado debe ser eliminada realizando el recorte [20].
Tabla 1. Relación de impurezas totales presentes en la fibra.

3
Clases de
Tipo de impurezas Observaciones
impurezas
Secreciones como: sudor o suint y Siempre están presentes en todos los

grasas o ceras. tipos de fibra.
Naturales Acreciones: fibras negras kemps y Impurezas características o por

pelos canizos. generación – fibras dañadas.
Excreciones: estiércol y orina. Siempre están presentes.
De origen animal como: insectos,

-
bichos (sarna, garrapata, piojo), etc.
De origen vegetal como: restos de Cogidos por el animal durante el

Adquiridas
hojas, semillas, paja, grama seca, etc. pastoreo.
De origen mineral: tierra, polvo, Son impurezas tomadas del medio

arena y sales. ambiente.
Brea, pintura, tizas, sellos,

Aplicadas Para identificación, como antisépticos.
insecticidas y otros.
Nota. Tomado de Fuertes (1993) (como se citó en Rosas, 2012) [19]
Descripción del proceso de lavado.
El proceso de lavado de la fibra incluye cuatro etapas desde la recepción de

materia prima por la empresa, como se describen en la Fig. 1; el procesamiento de la
fibra de alpaca se inicia con la recepción de los vellones de fibra de alpaca, los cuales
contendrán la fibra producida por el animal esquilado divididos según la finura de la
fibra la cual se determina por el grosor de esta. La siguiente etapa es la apertura, en este
proceso se busca remover el polvo de la fibra de alpaca, se realiza en un equipo de
apertura que consta de cilindros abridores a los que se debe controlar su velocidad para
evitar la ruptura de la fibra o el enredo de esta.
El proceso siguiente es el lavado en tinas, en este se cuenta con cinco tinas de

lavado por las cuales la lana ira pasando hasta conseguir que se elimine todo el material
contaminante de la misma. En la primera tina se eliminan las impurezas sólidas, suint y
algunas grasas por el uso de agua caliente; la segunda y la tercera tina se da el lavado
4
con detergente y agua caliente permitiendo la eliminación de contaminantes por

disolución y emulsificación finalmente las otras dos tinas son de enjuague para la
eliminación final de contaminantes.
Fibra de alpaca sucia
Recepción
Apertura
Agua Tierra
Detergente Vegetales
Tripolisfosfato Excremento de animales
Calor
Lavado
Tierra
Vegetales
Calor Grasa
Excremento de animales
Secado
Fibra de alpaca limpia
Figura 1. Diagrama de flujo del procesamiento de fibra de alpaca.
Nota: elaboración empresa procesadora de fibra Inca Tops S.A.
La etapa final del proceso es el secado, donde se da la evaporación del agua en la

fibra lavada usando aire caliente, se busca obtener un promedio de 13% de porcentaje
de humedad en la fibra de esta forma pasará a los demás procesos sin generar un daño
en las maquinas por oxidación o en el caso de ser necesario almacenar la fibra esta no
se vea contaminada por bacterias.
1.2 Agua Residual
El Organismo de Evaluación y Fiscalización Ambiental (OEFA) [21] define como

agua residual a cualquier agua que se le haya modificado sus características originales por
cualquier actividad humana, y antes de ser reusadas o ser vertidas a un cuerpo de agua deben
ser tratadas.
5
A esta definición podemos acotar que las aguas residuales representan un peligro ya
que las sustancias que presentan pueden tener una acción toxica en el cuerpo receptor, los
microorganismos presentes consiguen volver al agua un vehículo de infección, producir
polución térmica, eutrofización y contaminación de aguas subterráneas; además, de los
malos olores generados por estas [22].
Las aguas residuales pueden clasificarse en tres tipos según la OEFA [21]:
 Aguas residuales domesticas: son los originados en las casas y en comercios

que contienen desechos fisiológicos y otros provenientes de la actividad
humana.
 Aguas residuales municipales: son la mezcla de las aguas residuales

domésticas, aguas de drenaje pluvial y aguas residuales industriales tratadas que
puedan ser desechadas al sistema de alcantarillado
 Aguas residuales industriales: son aguas producidas por las actividades minera,
agrícola, energética, agroindustrial entre otras durante su proceso productivo.
Las aguas residuales industriales tienen composición diversa, ya que depende del
tipo del proceso productivo que se desarrolla, de las sustancias que se usan durante el
proceso y las generadas durante el mismo [22].
1.2.1. Agua residual del lavado de fibra de alpaca.
Durante el proceso de lavado de un kilogramo de fibra se genera

aproximadamente 17 litros de agua residual con alto contenido de contaminantes dando
al efluente la denominación de agua residual industrial; la cual debe ser tratada para ser
vertida al sistema de alcantarillado [23].
El efluente generado durante el proceso tendrá en sus componentes agua,

detergentes y todo el material contaminante extraído de la fibra como son componentes
orgánicos solubles, componentes orgánicos emulsionados y algunos materiales solidos
inertes [19].
6
En gran medida el efluente del proceso contendrá residuos de detergentes usados

para este proceso los cuales son no iónicos como los alcoholes etoxilados y alquilfenoles
etoxilados; además se usan algunos aditivos para que se logre emulsionar la grasa de la
fibra estos son principalmente sales inorgánicas [24]. Además, en el efluente también
habrá presencia de micro-contaminantes debido a los plaguicidas aplicados en el animal
como los organofosforados (OP), los piretroides sintéticos (SP) y los insecticidas
reguladores del crecimiento (IGR) [25].
1.3 Legislación Peruana Ambiental Vigente
Uno de los problemas de contaminación ambiental más grave en el Perú es la

contaminación del agua, como se señala en la Política Nacional del Ambiente, siendo una
de las principales causas de esta los vertimientos industriales y domésticos sin tratamiento
[26]
.
Al ser la contaminación del agua uno de los problemas más graves del Perú se
convierte de interés nacional el buscar pronta solución a este, por eso dentro de los
lineamientos de la Política Nacional Ambiental correspondientes a la contaminación del
agua en el D.S N°012-2009 MINAM establece en uno de sus apartados: “Promover la
inversión en infraestructura de saneamiento básico y de tratamiento y reúso de aguas
residuales de origen doméstico y otras actividades generadoras de efluentes” [26].
1.3.1. Ley general del ambiente (Ley N° 28611).
La ley publicada en el 2005 tiene como objeto instituir el marco normativo legal
para la gestión ambiental en el país, promoviendo la adopción y aplicación de la
Producción más limpia en las empresas como lo establece en el Art. 77 en el inciso 2:
Las medidas de producción limpia que puede adoptar el titular de operaciones

incluyen, según sean aplicables, control de inventarios y del flujo de materias
primas e insumos, así como la sustitución de éstos; la revisión,
mantenimiento y sustitución de equipos y la tecnología aplicada; el control o
sustitución de combustibles y otras fuentes energéticas; la reingeniería de
7
procesos, métodos y prácticas de producción; y la reestructuración o rediseño

de los bienes y servicios que brinda, entre otras [27].
Como es señalado en este artículo, las empresas deben aplicar y desarrollar

tecnologías limpias o producción más limpia siendo esta una forma de ayudar a
solucionar el problema de contaminación del agua, debido a las aguas residuales
industriales.
Además, en la Ley 28611 [27]

en el Art. 120 inciso 2 determina: “El Estado
promueve el tratamiento de las aguas residuales con fines de su reutilización,
considerando como premisa la obtención de la calidad necesaria para su reúso, sin
afectar la salud humana, el ambiente o las actividades en las que se reutilizarán”.
En el Art. 121 indica que para el vertimiento de aguas residuales es necesario una
autorización del Estado, donde se verifica que no causará un deterioro de la calidad de
agua del cuerpo receptor y esta cumple con los parámetros establecidos en normas
vigentes. Asimismo, en el Art. 122 inciso 3 estipula que las empresas son responsables
de realizar el tratamiento de las aguas residuales generadas por su actividad [27].
1.3.2. Decreto Supremo N° 021-2009-Vivienda, y sus modificatorias
[28]
Este D.S. Nº 021-2009-Vivienda fue modificado por el D.S. 001-2015-
Vivienda [29] y su respectivo reglamento el D.S. 003-2011-Vivienda [30] modificado por
el D.S. 010-2012-Vivienda [31] dan la normativa y detalles de su aplicación respecto a
los Valores Máximos Admisibles (VMA) para las descargas de aguas residuales no
domésticas en el sistema de alcantarillado sanitario. Esto con la finalidad de
salvaguardar tanto las instalaciones sanitarias como también los cuerpos de agua
receptores.
En el Art. 3 el Ministerio de Vivienda, Construcción y Saneamiento define los

VMA como:
(…) aquel valor de la concentración de elementos, sustancias o parámetros

físicos y/o químicos, que caracterizan a un efluente no doméstico que va a
ser descargado a la red de alcantarillado sanitario, que al ser excedido causa
8
daño inmediato o progresivo a las instalaciones, infraestructura sanitaria,

maquinarias y equipos de los sistemas de alcantarillado y tratamiento de
aguas residuales, y tiene influencias negativas en los procesos de tratamiento
de las aguas residuales [28].
La norma en el Anexo N° 1 establece los VMA para los cuatro principales

parámetros que deben ser monitoreados en el agua residual a ser descargada en el
sistema de alcantarillado como se muestra en la Tabla 2.
Tabla 2. Valores máximos admisibles para descargas al sistema de alcantarillado

(Anexo N°1)
VMA para descargas al

Parámetro Unidad Expresión
sistema de alcantarillado
Demanda bioquímica
mg/L (DBO5) 500
de oxígeno (DBO5)
Demanda química de
mg/L (DQO) 1000
oxígeno (DQO)
Sólidos suspendidos
mg/L S.S.T. 500
totales
Aceites y grasas mg/L AyG 100

Nota. Tomado de D.S. N° 021-2009-Vivienda, 2009 [28]
Además, a esto se suma el Anexo N° 2 del decreto, en el cual adiciona 19

parámetros: Aluminio, arsénico, boro, cadmio, cianuro, cobre, cromo hexavalente,
cromo total, manganeso, mercurio, níquel, plomo, sulfatos, sulfuros, zinc, nitrógeno
amoniacal, pH, sólidos sedimentables; los cuales también son de obligado
cumplimiento para las empresas.
Estos parámetros dados por el Ministerio de Vivienda, Construcción y

Saneamiento constituyen la caracterización apropiada de todo efluente no doméstico.
Al mismo tiempo, dentro del decreto se indica que en el caso que haya incumplimiento
de alguno de estos parámetros del Anexo 1 la empresa tendrá que pagar una tarifa por
estas descargas; en algunos casos puede llegar a la suspensión del servicio de
alcantarillado sanitario.
9
1.3.3. Resolución de consejo directivo N° 025-2011-SUNASS-CD.
Esta resolución se da para establecer los pagos adicionales por la descarga de

aguas residuales no domesticas en el sistema de alcantarillado cuando supera los VMA
de los principales 4 parámetros establecidos en el Anexo 1 del D.S. N°021-2009-
[28]
Vivienda y mostrado en la Tabla 2. En esta resolución establece rangos de los
[32]
parámetros para luego establecer el pago adicional , los rangos se muestran en la
Tabla 3.
Tabla 3. Definición de rangos de parámetros.
Parámetros
Rango
DBO5 DQO SST AyG
VMA (mg/L) 500 1000 500 100
Rango 1 500,1 - 550 1000,1 - 1100 500,1 - 550 100,1 - 150
Rango 2 550,1 - 600 1100,1 - 1200 550,1 - 600 150,1 - 200
Rango 3 600,1 - 1000 1200,1 - 2500 600,1 - 1000 200,1 - 450
Rango 4 1000,1 - 104 2500,1 - 104 1000,1 - 104 450,1 - 103
Rango 5 Mayor a 104 Mayor a 104 Mayor a 104 Mayor a 104

Nota. Tomado de Resolución de Consejo Directivo Nº 025-2011-SUNASS-CD, 2011 [32].
Para el cálculo del importe del pago adicional es necesario calcular el factor de
ajuste (F) para cada uno de los parámetros y según el rango en el que se encuentren para
esto se usa la Tabla 4.
Luego es necesario hacer la suma de los factores (F) por cada uno de los
parámetros y el valor resultante deberá ser multiplicado por el importe a facturar por el
servicio de alcantarillado, obteniendo de esta forma, el total del pago adicional que
10
deberán pagar las empresas por la descarga de aguas residuales no domésticas al sistema
de alcantarillado al sobrepasar los VMA establecidos [32].
Tabla 4. Factores de ajuste por cada rango.
Patrones individuales
Rango
F DBO5 F DQO F SST FAyG
TOTAL
Asignación
25% 35% 20% 20%
porcentual
Rango 1 6% 9% 5% 5% 25%
Rango 2 19% 26% 15% 15% 75%
Rango 3 25% 35% 20% 20% 100%
Rango 4 250% 350% 200% 200% 10 veces más
Rango 5 500% 700% 400% 400% 20 veces más

Nota. Tomado de Resolución de Consejo Directivo Nº 025-2011-SUNASS-CD, 2011 [32].
1.4 Biorreactor UASB
La abreviación en ingles UASB de Upflow Anaerobic Sludge Blanket, que en

español es Reactor de Manto de Lodos Anaerobio de Flujo Ascendente. Este tipo de
biorreactor fue desarrollado en Holanda a finales de 1970 por el Prof. Gatze Lettinga y su
grupo de investigación en la Universidad Agrícola de Wagenningen; siendo el primer
biorreactor en contar con lodo nodulado el cual es usado para el tratamiento de aguas
residuales con alto contenido de materia orgánica [33, 34].
El biorreactor UASB presenta tres zonas bien definidas: zona de lecho de lodos o
cama de lodos, zona de dispersión o manto de lodos y la zona de separación gas-liquido-
solido [4]. Como se muestra en la siguiente Fig. 2.
11
Figura 2. Biorreactor UASB a pequeña escala.

Tomado de: “Treatment of municipal wastewater in upflow anaerobic sludge blanket (UASB)
reactor”, de Elmitvalli, T. (2005). Alemania [35].
La zona de lecho de lodos es la fase sólida dentro del biorreactor, que se encuentra
en la parte inferior de este, en esta zona se dan todas las reacciones que dan como resultado
la descomposición completa de la materia orgánica hasta formar biogás el cual contiene CH4
[33, 36]
y CO2 , esto se debe a la presencia de los microorganismos anaerobios que realizan
esta degradación; los cuales forman nódulos bacterianos densos que les permite permanecer
sin soporte fijo dentro del biorreactor, teniendo altas velocidades de sedimentación lo que
[17, 37]
evita que sean arrastrados por el efluente ; pero, este proceso es demasiado lento
haciendo que los periodos de arranque sean bastante largos dentro de los biorreactores
[38]
UASB . Los afluentes ingresan al biorreactor por la parte inferior creando un flujo
ascendente de esta forma tienen el primer contacto con los lodos sedimentados, los cuales
12
funcionan como unos biocatalizadores muy eficientes para la realización de la degradación

anaerobia [16, 39, 40].
La zona de dispersión representa la fase líquida, siendo una zona de transición puesto
que es una zona fluidizada donde se encuentra el efluente tratado, algunos solidos no
sedimentables y partículas de biogás lo que hacen que la zona tenga mayor movimiento sin
requerir agitación mecánica [4, 17]. La tercera zona de separación gas-liquido-solido la cual
se separa las moléculas de biogás del líquido y del sólido gracias a la campana separadora
de gases (Campana GLS) ubicada en la parte superior del biorreactor [36, 41]. Como se detalló
se tiene dentro del biorreactor UASB los tres estados de la materia.
1.4.1. Degradación anaerobia de materia orgánica dentro del biorreactor UASB.
El tratamiento anaerobio de aguas residuales industriales es el proceso por el cual

en ausencia de oxígeno el gran contenido de materia orgánica presente se transforma en
biogás y lodos que pueden ser usados como biosólidos [1].
Para la realización de la degradación de materia orgánica se requiere la interacción

de diferentes grupos de bacterias anaerobias estrictas y bacterias facultativas que usen
[42]
como fuente de energía para su metabolismo la materia orgánica transformándola .
Algunas de las bacterias implicadas en el proceso son: Aciobacter, Alcaligenes,
Clostridium, Eschericha, Flavobacterium, Lactobacillus, Micrococcus, Pseudomona,
Streptococcus; las cuales son tolerantes a los cambios de pH además se tiene a las
bacterias metanogénicas [43].
La degradación anaerobia completa se realiza en cuatro etapas de manera

[44]
sucesiva, paralela, independiente y simultanea ; estas etapas son: Hidrólisis,
Acidogénesis, Acetogénesis y la Metanogénesis. El Proceso se muestra en la Fig. 3
[13,17,44]
.
Hidrólisis.
Implica la participación de bacterias hidrolíticas, las cuales hidrolizan

polisacáridos, proteínas y lípidos no solubles generando azúcares, aminoácidos, ácidos
grasos y alcoholes los cuales son solubles [17, 42, 45].
13
Figura 3. Proceso de degradación anaerobia.

Tomado de: “Effect of temperature on biogas production in anaerobic treatment of domestic
wastewater UASB system in Hammarby Sjöstadsverk”, de Zhao, C. Sweden [16].
Acidogénesis.
Las bacterias fermentativas usan los azúcares y aminoácidos para generar

compuestos intermediarios y oxidan los ácidos grasos produciendo ácidos grasos con
bajo número de carbonos como el ácido acético, ácido fórmico, ácido propiónico y ácido
butírico [17, 42, 45]. Este proceso baja el pH debido a que se generan ácidos grasos volátiles
(AGVs) [42], además se genera CO2. Esta etapa debe estar regulada para evitar que los
ácidos se acumulen a un punto que inhiba las demás etapas [18].
Acetogénesis.
Se realiza mediante las bacterias acetogénicas las cuales degradan el propianato y

butirato a acetato e hidrógeno [17, 42, 45]. El pH puede llegar a 5 [43].
Metanogénesis.
Esta parte del proceso se da a un pH entre 6.8 y 7.4 [42, 43], la metanogénesis se da
usando dos rutas para la conversión como se observa en la Fig. 3 un 30 % del metano
14
se forma al hacer uso del hidrógeno producido para reducir el CO2 esto por las bacterias
metanogénicas hidrogenofilicas la reacción se muestra a continuación [3]:
𝐶𝑂2 + 4 𝐻2 → 𝐶𝐻4 + 2𝐻2 𝑂
El otro 70 % es generado por las bacterias metanogénicas acetoclásticas las cuales

transforman el acetato en CH4 [3]:
𝐶𝐻3 𝐶𝑂𝑂− + 𝐻2 𝑂 → 𝐶𝐻4 + 𝐻𝐶𝑂3−
Al final del proceso los productos finales serán el CH4 y en menores cantidades
el CO2 que se ha producido durante todo el proceso y que no ha logrado convertirse en
metano [17, 42, 45].
1.4.2. Ventajas del biorreactor UASB.
Mecalf & Eddy [46] mencionan que el tratamiento anaerobio tiene como ventajas
el uso de menor cantidad de energía, la producción de lodos es menor, la producción de
metano durante el proceso.
Además de todas las ventajas que se tienen por ser un sistema anaerobio el
[1]
biorreactor UASB tiene otras ventajas; Márquez & Martínez mencionan como
ventajas que el 99.9 % de los lodos en suspensión se sedimentaran en el fondo del
biorreactor, los lodos pueden estar sin alimentación conservando sus propiedades
haciendo útil este tipo de biorreactores en procesos cíclicos, requiere bajos
requerimientos nutricionales, se realiza la fermentación acida y metánica dentro de un
mismo tanque reduciendo el espacio a ser usado por estas plantas de tratamiento, al no
requerir ninguna agitación mecánica el consumo de potencia es bajo y la ventaja que
resaltan es que la producción de metano es aprovechable.
Otra de las grandes ventajas del biorreactor UASB es que los tres subproductos
generados son reaprovechables; el biogás generado puede ser empleado como
combustible se reporta que 1 m3 de biogás equivale a 0.55 L de fuel-oil; los lodos que
serán retirados del biorreactor poseen alto contenido de materia orgánica y mineral
dando las características necesarias para poder ser usado como biofertilizante de suelos
[47]
y finalmente el efluente líquido, que es el que obtendrá en mayor proporción, tiene
15
alto contenido de nitrógeno que es fácilmente asimilable además de otros iones que le
dan las propiedades necesarias para ser utilizado como agua para fertiriego [47, 48, 49].
Al hacer uso de este tipo de biorreactores el aspecto económico se ve beneficiado

grandemente así por ejemplo en la construcción al no ser completa los costos son
menores, en temas de operación y mantenimiento también presenta costos relativamente
bajos. En cuanto a la disposición de lodos provenientes del biorreactor al no requerir
muchos tratamientos el costo es mínimo [36, 41].
1.4.3. Desventajas del biorreactor UASB.
Las desventajas de procesos anaerobios mencionadas por Mecalf & Eddy [46] son
principalmente los periodos de arranque bastante largos, durante el proceso se requerirá
la adición de algún ion y la sensibilidad a efectos adversos por bajas temperaturas que
afectaran las tasas de reacción.
Una de las desventajas en el uso de biorreactores UASB para tratamiento de aguas

residuales con bajo contenido de solidos es que esto impedirán la formación de nódulos
bacterianos además los tiempos de arranque del biorreactor son periodos largos que
pueden ser de 8 a 12 semanas, al requerir de microorganismos anaerobios el periodo se
hace más largo debido a que este tipo de bacterias tienen baja tasa de crecimiento [3, 42].
Es un proceso sensible a presencia de compuestos tóxicos [1, 36, 41], la eliminación

de patógenos es baja y se tiene un riesgo de tener mal olor por la reducción del sulfato
a sulfuro [17,42]. El tratamiento anaerobio requerirá de un postratamiento para lograr una
eficiente depuración de las aguas residuales, eliminando durante este proceso el amonio
y compuestos que generan mal olor; generalmente este será un tratamiento aerobio [3].
El Instituto Federal Suizo de Ciencias y Tecnología Acuáticas [49] hace referencia

que se convierte en un tratamiento inestable al tener cargas orgánicas variables durante
la operación, además se menciona que no son aptos para regiones con temperaturas
extremadamente frías.
1.4.4. Diseño del biorreactor UASB.

16
Los biorreactores UASB cuentan con tres estructuras importantes: el cuerpo del
biorreactor donde se dará la depuración del agua y la generación de gases, la segunda
son los deflectores los cuales tiene como función separar los sólidos del líquido
formando una barrera la cual evitará que los sólidos salgan del biorreactor y la tercera
estructura es la campana separadora trifásica GLS (Gas-Líquido-Sólido) que permite la
colección del gas al separar las partículas de gas de los sólidos y además ayuda a lograr
[38, 41,50]
la máxima retención de lodos durante el proceso . La estructura general del
biorreactor UASB se muestra en la Fig. 4.
Figura 4. Esquema general del biorreactor UASB.

Tomado de “Wastewater engineering. Treatment and reuse”, de Mecalf & Eddy, Inc., 2003, p. 1006
[46]
Diseño del cuerpo del biorreactor.
Los biorreactores UASB tienen dos formas tubular o rectangular; la forma tubular
presenta una estabilidad estructural mayor, pero al realizar la construcción del separador
GLS se hará técnicamente más complicada que en la forma rectangular además esta
forma tiene mayor facilidad para el escalamiento [33,47].
17
En el cuerpo del biorreactor se debe colocar llaves para poder realizar la descarga
[41]
de los lodos y también la toma de muestras, Elmitvalli considera importante tener
tres salidas la primera cerca del fondo del biorreactor, la segunda a la mitad de altura
del biorreactor y la tercera por encima de la campana, la cual funcionará para salida del
efluente tratado.
Diseño campana GLS y de deflectores.
La campana GLS tiene como función principal separar las tres fases antes de la
salida del efluente del biorreactor, permitiendo que las burbujas del biogás sean
colectadas y que los sólidos se separen del líquido quedando dentro del biorreactor
evitando en gran medida el arrastre de las partículas en el efluente [47].
La campana GLS debe cumplir con algunos objetivos mencionados por Lettinga
[50]
& Hulshoff Pol los cuales se muestran en la Tabla 5. Para la construcción de la
campana GLS se tiene algunas pautas generales descritas en la Tabla 6 [50].
Tabla 5. Principales objetivos del dispositivo GLS para sistemas UASB
Objetivos
1. Separar y descargar el biogás producido en el biorreactor.
2. Prevenir tan eficientemente como sea posible el lavado de la materia bacteria viable.
3. Permitir que el lodo vuelva a introducirse en el compartimiento del digestor
4. Servir como una especie de barrera para una expansión excesivamente rápida del manto
de lodos (que está compuesta por lodo floculento) dentro del sedimentador.
5. Proveer un efecto de "pulimento".
6. Prevenir el lavado del lodo granular flotante.

Nota. Tomado de “UASB-Process design for various types of wastewaters” de Lettinga & Hulshoff Pol, 1991, Water science and
technology, 24 (8), 87-107 [50]
Tabla 6. Resumen de directrices provisionales para el diseño del dispositivo

separador de gas y sólidos.
18
Directrices
1. El ángulo de la parte baja de la campana (pared inclinada del colector de gas) debe estar
entre 45-60º.
2. El área superficial de la abertura del colector de gas debe ser del 15-20% de la superficie
del biorreactor.
3. La altura del colector de gas debe estar entre 1.5-2 m en biorreactores de 5-7 m de
altura.
4. Debe mantenerse una interfaz líquido-gas en el colector de gas para facilitar la

recolección de burbujas de gas y para combatir la formación de capas de espuma.
5. La superposición de los deflectores instalados debajo de las aberturas debe ser de 10-20
cm para evitar que las burbujas de gas que fluyen hacia arriba entren en el
compartimiento del decantador.
6. Los deflectores de la capa de espuma deben instalarse delante de los vertederos de

efluentes.
7. El diámetro de los tubos de salida de gas debe ser suficiente para garantizar la fácil
extracción del biogás de la campana de recolección de gas, particularmente en el caso de
la formación de espuma
8. En la parte superior de la campana de gas, deben instalarse boquillas anti-espuma si el

tratamiento de las aguas residuales va acompañado de una fuerte formación de espuma.
Nota. Tomado de “UASB-Process design for various types of wastewaters” de Lettinga & Hulshoff Pol, 1991, Water science and
technology, 24 (8), 87-107 [1]
Por otro lado, Márquez & Martínez [1] dan algunas especificaciones para el diseño
básico de la campana GLS partiendo de la velocidad ascensional para obtener el valor
de la velocidad de flujo en la campana (VC).
𝑉𝐶 = 4 × 𝑉𝑎 (Ec. 1)
Donde:
Vc: velocidad de flujo en la campana (m/h)
Va: velocidad ascensional (m/h)
Luego se van hallando las diferentes medidas de la campana con las ecuaciones a
continuación especificadas:
𝑄 (Ec.2)
𝐴𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 =
𝑉𝐶
19
Donde:
Aabertura: área de abertura de la campana (m2)
Q: Caudal en el biorreactor (m3/h)
Una vez determinada el área de abertura de la campana GLS se hallará la

dimensión del área de la campana relacionando con el valor del área del biorreactor
(AR):
𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 = 𝐴𝑅 − 𝐴𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 (Ec.3)
Donde:
Acampana: área de la campana (m2)
AR: área del biorreactor (m2)
Luego se debe determinar la medida del radio de la campana:
√𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 (Ec.4)
𝑅𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 =
2
Donde:
Rcampana: radio de la campana (m)
Por la diferencia existente entre el radio del biorreactor (Rr) y el radio de la

campana (Rcampana) hallaremos el valor del ancho de la abertura (Wabertura):
𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 = 𝑅𝑟 − 𝑅𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 (Ec.5)
Donde:
Wabertura: ancho de la abertura (m)
Rr: radio del biorreactor (m)
Finalmente se debe obtener la altura del tubo de salida (WG) y la altura de la

campana (HG); para esto se debe determinar el ángulo que tendrá la apertura de la
campana que pueden ser valores entre 45° y 60°.
20
1 (Ec.6)
𝑊𝐺 = 𝑅𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 − (𝑊 )
2 𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎
𝐻𝐺 = 𝑊𝐺 𝑡𝑎𝑛 ∝ (Ec.7)
Donde:
WG: altura del tubo de salida (m)
HG: altura de la campana (m)
α: ángulo de la apertura de la campana
Todos los valores hallados corresponderán a una parte de la estructura de la

campana GLS, las cuales se muestran en la Fig. 5.
Además de la campana es importante contar con deflectores por debajo de la GLS

y antes que la salida del efluente de esta forma se evitará que los lodos flotantes salgan
del biorreactor; sin la presencia de estos es posible que incluso el lodo granular flotante
saliera del biorreactor. Estos deflectores disminuirán la turbulencia de los líquidos y por
consecuencia la formación de espuma [50 - 52].
21
Figura 5. Esquema de la campana GLS.

Nota: Tomada de “Reactores anaerobios de flujo ascendente (RAFA's o UASB)”, de Márquez, M.;
Martínez, S., 2011, México [1].
Para el dimensionamiento de los deflectores Márquez & Martínez [1] sugieren la

realización de los siguientes cálculos:
𝑇𝑉 = 1.5(𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 ) (Ec.8)
Donde:
TV: traslapo (m)
Luego se hallará los valores del ancho de los deflectores (WD) y el valor de la
longitud de los deflectores para el cual se debe considerar que está en función de un
ángulo de 45°.
𝑊𝐷 = 𝑇𝑉 + 𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 (Ec.9)
𝐿𝐷 = 2𝑊𝐷 𝑡𝑎𝑛45° (Ec.10)
Donde:
WD: ancho de los deflectores (m)
TV: traslapo (m)
Con estas relaciones se podrá construir la campana y los deflectores con las
medidas requeridas para que se dé una correcta separación del sólido, líquido y de las
partículas de gas dentro de los biorreactores UASB.
1.4.5. Factores que influyen en el funcionamiento del biorreactor UASB.
Arranque del biorreactor UASB.

22
El proceso de arranque de un biorreactor UASB es un proceso muy lento y

delicado ya que se necesita lograr una estabilidad para el crecimiento de biomasa
[53] [54]
anaerobia, por esta razón López, Morgan, y Noyola y Pacheco y Magaña
concuerdan que para disminuir el periodo de arranque del biorreactor se debe hacer un
inoculo de lodos o de biomasa anaerobia previamente acondicionada; de esta forma se
evitará que se tomen periodos largos de acondicionamiento de la biomasa con el tipo de
efluente a tratar.
Velocidad ascensional.
La velocidad ascensional es uno de los factores principales que afectan la

eficiencia del proceso dentro del biorreactor UASB [46]; ya que esta guarda relación con
la retención del lodo debido a que velocidades mínimas permiten sedimentar a los
[7, 49]
nódulos bacterianos evitando que sean lavados . Al tener velocidades mínimas
tendremos tiempos de residencia hidráulica (TRH) mayores permitiendo aumentar la
[55] [17]
eficiencia del proceso . Por el contrario, Zhao menciona que no se debe tener
velocidades mínimas debido a que esto evitará que se realice una buena mezcla entre el
efluente, el lodo y las partículas de gas impidiendo que estas se desprendan.
Sik y Cheon [11] mencionan que las altas velocidades del flujo ascendente permiten
mayor colisión entre las partículas en suspensión y el lodo logrando una mayor
efectividad en la depuración del agua residual; pero este aumento también genera mayor
movimiento en la zona de lecho de lodos provocando que las partículas sean arrastradas
con el efluente haciendo más lento el proceso de nodulación [56, 57].
Se recomienda mantener el flujo del afluente de forma constante de esta forma el

balance entre las etapas de fermentación ácida y metanogénesis no se verá afectado; ya
que al tener un aumento en la velocidad ascensional la reacciones de acidogénesis
también son más rápidas, generando la disminución del valor de pH por efecto de tener
altas concentraciones de ácidos grasos volátiles (COV’s) dando como resultado la
inhibición de la metanogénesis [1,5].
La velocidad ascensional suele estar entre 0,1 y 1,4 m/h esta velocidad permite el
correcto contacto entre el efluente y los nódulos; puede existir variación de la velocidad
dentro de un mismo biorreactor debido al efecto Venturi, este cambio de velocidades se
23
dará al pasar el lecho de lodos a la manta de lodos, generado porque en el lecho de lodos
existe menor espacio entre los nódulos para que el efluente pase aumentando la
velocidad en cambio en el manto de lodos existe mayor espacio haciendo que la
velocidad sea menor [45].
Tiempo de residencia hidráulica (TRH).
Este parámetro depende de la velocidad ascensional en una relación inversamente

proporcional. Es no solo importante para el diseño del biorreactor sino también para
lograr la máxima remoción de sólidos y materia orgánica del efluente tratado dentro del
[36]
biorreactor UASB , ya que el TRH es el tiempo que demora el afluente desde su
ingreso hasta la salida del biorreactor este debe permitir el contacto suficiente entre el
agua residual y los nódulos bacterianos [55].
Recirculación del efluente en el biorreactor UASB.
Como se vio en secciones anteriores por diversos motivos en el efluente pueden

ser lavados los microorganismos que formarían parte de los nódulos bacterianos y al
darse esta pérdida los periodos de arranque serán más largos. Por esta razón la
recirculación del efluente permite aumentar la eficiencia del proceso esto debido a que
el efluente vuelve a ingresar al biorreactor pasando otra vez por la manta de lodos
facilitando la adherencia de los microorganismos a los nódulos [10, 11].
Si se quisiera aumentar el TRH esto aumentaría significativamente el tamaño del

biorreactor que económicamente se hace insostenible, por esta razón la recirculación
permitirá que el tiempo de estadía el efluente aumente sin que el volumen del mismo se
[12]
vea afectado . O por el otro lado si quisiéramos aumentar el TRH sin afectar el
volumen haciendo que la velocidad ascensional sea menor esto también afectaría el
proceso disminuyendo la producción de gas; de igual forma al realizar la recirculación
a una velocidad constante sin que esta sea mínima aumentaremos la producción de
biogás a consecuencia que se mejorar la degradación de materia orgánica [58].
pH.
24
Para un tratamiento anaerobio es preferible mantener pH 7 o cercano a la

neutralidad para que las reacciones se den correctamente [1,17]; otros autores consideran
un rango de valores más amplio entre 6.0 y 8.0 en los cuales las bacterias anaerobias
pueden desarrollarse en condiciones óptimas [49, 59].
Si bien las bacterias acitogénicas pueden desarrollarse en un pH 5,0 las demás

bacterias presentes dentro del biorreactor UASB pueden verse inhibidas en ese pH
ocasionando interrupción en las etapas de degradación, si el pH está muy ácido puede
aumentar la toxicidad del mismo, evitando que se completen las reacciones y teniendo
altos contenidos de ácidos orgánicos volátiles los cuales tenderán a acumularse dentro
del biorreactor y la eficiencia del proceso se verá afectada [60].
Pero una vez formados los nódulos se comprobó que pueden mantenerse estables
entre pH 5.5 y 8.0 [5, 61].
Temperatura.
Según la temperatura que se dé la digestión anaerobia se puede clasificar en:

digestión psicrofilica a temperaturas menores de 25ºC, la digestión mesófila a
temperaturas entre 25ºC y 40ºC, la digestión termófila entre 40ºC y 60ºC y si la
temperatura excede los 80ºC estamos frente a una digestión hipertermófila [55, 60].
Es importante considerar que el crecimiento de las bacterias anaerobias a una

temperatura de 35ºC demora tres días aproximadamente, en cambio si la temperatura se
encuentra por debajo de los 15ºC el crecimiento de bacterias puede llegar a tomar más
de diez días [62].
Para el arranque del biorreactor se demostró que la digestión termófila requiere

[63]
mayor tiempo que la digestión mesófila por eso la temperatura a la cual se debe
mantener un biorreactor anaerobio como es el UASB es entre los valores de 25°C a
40°C ya que se reporta mejores tasas de reacción y ayudan a que el tratamiento sea más
estable [1].
Al tener temperaturas más bajas hará que la solubilidad de los gases aumente
haciendo difícil la separación de este, además la viscosidad del efluente también
25
aumentara generando requerimientos de energía mayores para mezclar y dispersar los

compuestos solubles [40, 41].
Se reporta que la velocidad de digestión disminuye en un 11% por cada grado de

temperatura y por debajo de los 15°C el proceso no será eficiente a pesar que la actividad
bacteria puede conservarse a temperaturas de 10°C [49]; además es importante mantener
la temperatura estable debido a que si bien los nódulos no se verán afectados por bajas
temperaturas si se puede provocar perdida de actividad por consecuencia disminución
en la eficiencia de la depuración del agua residual [60].
1.5 Nódulos Bacterianos.
Los nódulos bacterianos son comunidades microbianas, conformados por diferentes

microorganismos los cuales realizan cada una de las etapas de la degradación de la materia
orgánica dentro del biorreactor UASB, la formación de los nódulos es uno de los limitantes
para el arranque del biorreactor por los largos periodos que toma la formación de los
nódulos; en esto recae el interés de conocer técnicas que permitan disminuir el tiempo de
nodulación [34, 64].
El desarrollo de nódulos bacterianos implica la autoinmobilización de las bacterias

consiguiendo el aumento del área de los nódulos, entre mayor sea el tamaño de estos indicará
[9, 37]
que se tendrá mayor efectividad en el proceso de depuración del agua residual ; su
composición es dependiente del tipo de agua residual, pero en general se conoce que están
compuestos por calcio, potasio y hierro [4].
1.5.1. Ventajas de la formación de nódulos.
Se ha visto que la importancia de la formación de los nódulos dentro del

biorreactor UASB recae en la eficiencia del proceso; pero además se tiene otras ventajas
detalladas por Hulshoff Pol [64] los nódulos tienen dentro poblaciones heterogéneas de
microorganismos, permite un mayor crecimiento de los microorganismos debido a que
absorben más nutrientes, protege a los microorganismos de condiciones extremas y
facilitan la degradación de materia debido a que los productos intermediaros se
encuentran dentro del nódulo haciendo que la degradación continúe [64].
26
1.5.2. Formación de nódulos.
Los factores que tienen implicancia en la formación de nódulos son

principalmente la velocidad ascensional, TRH, las características del afluente, pH, la
cantidad de cationes divalentes y la cantidad de biogás producido [64 - 66]
Para la formación de los nódulos al inicio se debe enfrentar la alta flotabilidad de

los microorganismos haciendo que puedan perderse en el efluente, conforme pase el
tiempo los nódulos van adquiriendo la propiedad de sedimentación permitiendo que a
pesar de que la cantidad de biogás sea mayor los nódulos puedan permanecer en el fondo
del biorreactor [67, 68].
Se han desarrollado diferentes modelos para explicar el proceso de nodulación; se

cuenta con modelos fisicoquímicos, estructurales y otros modelos que surgieron
conforme pasaron los años y se realizó mayor investigación [19].
Modelos fisicoquímicos para el proceso de nodulación.
Estos modelos fueron desarrollados en base a las interacciones que se dan cuando
las bacterias interaccionan para lograr la adherencia o la autoinmobilización entre ellas
[9]
; los modelos incluidos aquí son: presión de selección, crecimiento de sólidos
suspendidos colonizados, unión a iones positivos multivalentes y unión por los
polímeros extracelulares.
Modelo de presión de selección.
Este modelo fue desarrollado en 1983, donde se observa que la nodulación dentro
del biorreactor UASB es un proceso que implica selección continua de partículas de
lodo; esto se explica por el hecho que los elementos más grandes que serán núcleos
permanecen en el sistema mientras que los más dispersos son lavados y salen con el
efluente [9].
Se sugiere que al agregar más carga microbiana dentro del biorreactor permitirá
que mayor cantidad de bacterias puedan quedarse dentro del biorreactor protegiéndose
de presiones altas generadas por el flujo ascendente [7] y por la generación de biogás [45],
pero se demostró que este flujo está a favor de la generación de nódulos de mayor
27
tamaño en cambio la baja presión tendrá como resultado una biomasa dispersa y por
ende baja producción de biogás [9].
Los nódulos se desarrollan hasta que el tamaño permita que se separa generando
nuevos núcleos los cuales permitirán la adherencia de otros microorganismos y así se
desarrollará mayor cantidad de lodo nodulado [69].
Modelo de crecimiento en sólidos suspendidos colonizados.
[70]
Este modelo desarrollado por Perebom y Vereijken en el año 1994 , informó
que para la formación de nódulos los microorganismos colonizan los sólidos
suspendidos presentes en el efluente y crecen hasta lograr mayores tamaños; en la Fig.
6 se muestra el proceso para la formación de nódulos según el modelo de Perebom.
La presión dentro del biorreactor causada por la velocidad ascensional y la

producción de gas permite que partículas pequeñas sean liberadas lo que conduce a la
formación de nuevos soportes que puedan ser colonizados por los microorganismos [45,
69]
.
Figura 6. Modelo de crecimiento en sólidos suspendidos colonizados de

Perebom.
Tomado de: “Upflow anaerobic sludge blanket reactor: Modelling”, de Rodríguez, R. (2011).
Sweden [45] .
Modelo de unión a iones positivos multivalentes.

28
La necesidad de las bacterias por unirse a iones positivos multivalentes recae en

que estos iones permiten neutralizar las fuerzas de repulsión existente entre las
bacterias, esta se origina debido a que la superficie de las bacterias está cargada
[71, 72]
negativamente , al eliminar las fuerzas de repulsión se promoverá la nodulación
anaerobia [9]. Como se observa en la Fig. 7.
Figura 7. Modelo de unión a iones positivos multivalentes.

Tomado de: “Mechanisms and models for anaerobic granulation in upflow anaerobic sludge
blanket reactor”, de Liu, Y. et al. (2003). Singapore [79].
Entre los iones multivalentes más usados son el calcio [8], aluminio [73] y magnesio
[72]
para poder acelerar el proceso de nodulación; las concentraciones que se encontraron
apropiadas fueron: 80 – 200 mg/L Ca+2, el Mg+2 entre 12 – 120 mg/L y el Al+3 en una
concentración mayor a 300 mL/L [8, 72, 74].
Modelo de microcolonia sintrófica.
Todo el proceso de degradación anaerobia implica la participación de diferentes

bacterias las cuales deben vivir en relación sinérgica para que los productos de cada
etapa de la digestión puedan transferirse a las otras bacterias y se continúe la
degradación dando origen a una microcolonia o consorcios es decir los nódulos [9, 75].
La relación sintrófica se da entre las bacterias debido al requerimiento de usar los

hidrógenos generados al romper los ácidos grasos volátiles en la acetogénesis para poder
completar el proceso de metanogénesis; al tener la cercanía entre los microorganismos
permitirá un rápido intercambio de los hidrógenos dentro del nódulo [75].
Modelo de las cuatro etapas.
[4]
Este modelo se desarrolló en el año 1996 por Schmidt y Ahring los cuales
indican que la granulación tiene cuatro etapas: la primera es el transporte de células para
29
tener contacto entre ellas, la segunda es la adsorción inicial producto de fuerzas

fisicoquímicas, la tercera etapa es la adhesión irreversible donde las bacterias se fijan
entre si, finalmente la cuarta etapa es la multiplicación de las bacterias y la formación
del nódulo [45, 76].
Figura 8. Modelo de las cuatro etapas. i) el trasporte de células, ii) adsorción

inicial, iii) adhesión irreversible, iv) la formación de los nódulos.
Tomado de: “Upflow anaerobic sludge blanket reactor: Modelling”, de Rodríguez, R. (2011).
Sweden [45].
Modelos estructurales para el proceso de nodulación.
Estos modelos relacionan la interacción entre los factores biológicos,

microbiológicos y las fuerzas fisicoquímicas para explicar cómo se forman los nódulos.
Los métodos incluidos son el de capetown, espagueti y el de multicapa [9].
Modelo de Capetown.
Este modelo propuesto en 1987 sugiere que al tener la presencia del hidrógeno
genera que las bacterias produzcan mayor cantidad de polímeros extracelulares (ECP)
que serán usados como anclajes para que otras bacterias se relacionen y puedan formar
los nódulos bacterianos [9, 45, 69].
30
Figura 9. Modelo de Capetown

blanket reactor”, de Liu, Y. et al. (2003). Singapure [79].
Modelo espagueti.
Se formuló este modelo en el año 1987 por Wiegant y de Man [65] basándose en la
observación que hicieron en el microscopio electrónico de barrido donde se pudo
observar que algunas bacterias poseen filamentos los que permitirá atrapar a otros
microorganismos ya que se forman como redes [75, 78].
Los agregados que se forman se ven favorecidos por la turbulencia producida por
la formación del biogás permitiendo que otras bacterias queden entrelazadas en los
filamentos ayudando al crecimiento de los nódulos formando como bolas de espagueti
[9, 45, 69]
.
Modelo multicapa.
[77]
MacLeod et al. propusieron en 1990 el modelo de multicapa a partir de
observaciones microscópicas, donde se pudo verificar que en cada capa del nódulo
existe diferentes tipos de microorganismos. Se indicó que las bacterias metanogénicas
son las que están en la capa interna seguidas de las acetogénicas en la capa media que
producen hidrógeno, mientras que en la capa externa de los nódulos se encuentra gran
variedad de bacterias [79].
31
En investigaciones posteriores indicaron que también existen centros oscuros, es

decir centros en los que no se observa actividad alguna; pudiendo ser cúmulos de
biomasa inactiva, en descomposición y algunos materiales inorgánicos [78].
Figura 10. Modelo de Multicapa

blanket reactor”, de Liu, Y. et al. (2003). Singapure [79].
Modelo general de cuatro etapas.
Los modelos anteriormente descriptos individualmente no terminan de explicar el

[79]
proceso de nodulación anaerobio por esta razón Liu y Tay detallan un modelo de
cuatro pasos.
Etapa 1: Movimiento de bacterias.
Este paso implica el iniciar el contacto entre bacterias o bacteria y núcleos, para
este proceso se usan diferentes fuerzas como la hidrodinámica, de difusión y la de
gravedad. El movimiento celular se da por los flagelos, cilios y pseudópodos [79].
Etapa 2: Contacto multicelular estable.
Para esta etapa se requieren de fuerzas de atracción entre las células para permitir
establecer un contacto que no pueda ser roto fácilmente; las fuerzas implicadas es la de
van de Waals y la fuerza de atracción de carga opuesta. Son importantes en esta etapa
las bacterias filamentosas que ayudan a atrapar otras bacterias [71, 74, 80]; se forman pares
iónicos, tripletes iónicos, puentes interpartículas para dar la estabilidad a la estructura
[74, 80,81]
.
32
Etapa 3. Maduración de la agregación celular.
La producción de polímeros extracelulares hace que la agregación entre las

bacterias sea más rápida y más fuerte; formando una estructura microbiana altamente
organizada [9, 74, 80].
Etapa 4. Formación del nódulo bacteriano.
En esta etapa se busca la formación final del nódulo bacteriano, está gobernada
por la fuerza hidrodinámica de cizallamiento la cual da la forma externa y el tamaño de
los nódulos, siendo aún dependiente de las especies microbianas y de la carga de
sustrato [9, 79].
1.5.3. Efecto del ion calcio (Ca+2) en el proceso de nodulación.
Para facilitar el proceso de nodulación se ha visto la importancia del Ca+2 [8] ya

que este permite una agregación microbiana basándonos en el modelo de unión a iones
positivos multivalentes, debido a que el Ca+2 puede actuar como floculante por su acción
[82, 83]
de neutralizar las cargas entre las bacterias formando complejos más estables .
Otro factor importante es que el Ca+2 forma parte de los polisacáridos extracelulares
permitiendo la formación de un material pegajoso [64].
En la forma de CaCl2 en una concentración de 150 a 300 mg/L de Ca+2 mejora el

proceso de nodulación de las bacterias [8] aumentando la densidad y por consiguiente la
[6]
propiedad de precipitación de los nódulos entre estas concentraciones no presenta
efectos perjudiciales para las bacterias [71, 84].
Otras investigaciones indican que el Ca+2 no tiene ningún efecto sobre la

nodulación o el efecto es perjudicial; en concentraciones mayores a 500 mg/L afecta la
nodulación [68, 85] ya que reduce la actividad de las bacterias que están dentro del nódulo.
1.5.4. Características de los nódulos.
Los nódulos tienen gran variedad en calidad y características dependiendo del

origen del agua que están tratando y de los microorganismos que contiene; tenemos los
33
nódulos de tipo A estos son de forma esférica y muy compactos, los nódulos de tipo B
tienen una forma más irregular y están unidos a partículas inertes y los nódulos tipo C
son esféricos, pero de menor tamaño [3].
Características físicas de los nódulos.
Los nódulos pueden tomar diferentes formas como bastones, filamentosos y con
puntas es decir una forma muy irregular además de la forma esférica; esto depende tanto
[3, 86]
de la operación como del tipo de sustrato . Se relaciona la forma esférica de los
nódulos con la formación del biogás ya que las burbujas al pasar por los nódulos
permiten que estos tomen la forma esférica [65].
El tamaño que puede tomar los nódulos dependerá de la maduración del mismo,
pero llegaran a un tamaño máximo y comenzaran a desintegrarse para iniciar nuevos
procesos de nodulación; el área de los nódulos puede estar entre 0.03 mm2 y 38 mm2 [4,
34, 87]
. La sedimentabilidad de los nódulos es de gran importancia, esta propiedad
permitirá que los nódulos se mantengan en el fondo del biorreactor [64, 68, 88].
Características químicas de los nódulos.
El contenido de los nódulos depende estrechamente por el contenido del agua

residual que se está tratando, de la edad del lodo, de compuestos que hayan sido
incorporados en el sistema. Los valores de ceniza (minerales) es del 8 al 65 %, de
materia orgánica entre 11 a 12.5 % de proteína y entre 10 y 12 % de carbohidratos [87].
El color negro que tienen los nódulos bacterianos es a consecuencia de la

presencia de sulfuros precipitados de hierro, cobalto y níquel [64], los cuales precipitan
sobre la superficie del nódulo dando también mayor estabilidad a este [89].
1.6 Biogás
El biogás se genera como resultado de la degradación anaerobio de la materia

[90]
orgánica dentro del biorreactor UASB siendo este proceso económico. La principal
ventaja de la producción de biogás es que este es una energía renovable [17, 91].
34
El biogás es una de las fuentes de energía renovable más usada, debido a que su
almacenamiento no es complicado y tiene un alto valor energético; se puede usar para la
generación de electricidad, generación de calor y como sustancia de reemplazo para
combustibles fósiles. Permitiendo además la disminución de las emisiones gaseosas de
efecto invernadero protegiendo el medio ambiente [17, 18, 44].
1.6.1. Composición de biogás.
El biogás generado por la depuración anaerobia del agua residual estará

conformado por CH4 y en menores cantidades CO2, H2S y H, aunque este último al ser
un producto intermedio es convertido en metano al reaccionar con el CO2 [18].
En general se conoce que el biogás estará compuesto de CH4 entre 55 a 75 %, 25

a 45 % de CO2 [17,18] otros autores mencionan que el CO2 al inicio de la formación de
biogás se encontrará en un porcentaje de 2 – 4 %, mientras que se tendrá mayor
contenido de nitrógeno entre 14 – 22 % el cual se verá disminuido al existir mayor
formación CH4 [51].
1.6.2. Producción de metano.
La cantidad de biogás generada dependerá directamente de la carga orgánica que

tiene el agua residual, considerando esto se tiene que por unidad de DQO convertida en
condiciones anaerobias se obtendrá 0,35 L CH4/g DQO esto en condiciones estándares
de 0°C a 1 atm [1]. Para determinar la cantidad de metano en otras condiciones se utiliza
la ley universal de los gases como se muestra en la ecuación 11 con esto obtendremos
el valor del gas ocupado por una mol de metano a la temperatura que se está dando el
proceso.
𝑛𝑅𝑇 (Ec.11)
𝑉=
𝑃
Donde:
V: volumen ocupado de gas, L
n: moles de gas, moles
R: constante universal de los gases, 0.082057atmL/molK
35
T: temperatura en kelvin, K
P: Presión absoluta, atm
Considerando que el valor de una mol de CH4 necesita de dos moles de oxígeno
es decir por cada 64 g de O2 equivale a una mol de CH4 [15]. También se conoce que a
condiciones de 20ºC y una atmosfera de presión por cada Kg de DQO removido se
generarían 350 L de metano [43].
Es importante considerar que un alto contenido de biogás puede escapar disuelto

en el efluente; aproximadamente la mitad de la generación es la que se podría recuperar
con la campana GLS [86].
36
Capítulo II: Materiales y Métodos
2.1. Materiales
2.1.1. Muestra.
Agua residual de la industria textil del proceso de lavado de lana de oveja.
2.1.2. Material de Laboratorio.
Equipos.
Autoclave.
Balanza analítica, Ohaus Adventurer AR31.
Balanza ScoutTM Pro.

37
Centrífuga de tubos eppendorf.
Conductímetro Schott Handylab LF11.
Horno de Secado, PSelecta.
Incubadora de CO2, Eppendorf New Brunswick Galaxy 48 R
Incubadora, PSelecta.
Microscopio, Labomed.
MultitecR 540.
Shaker.
Material de laboratorio.
Asa de Kohl y en punta.
Cámara de Neubauer.
Cinta indicadora de pH, Merck.
Equipo de filtración al vacío.
Espátula.
Micropipeta de 10 L - 100 L.
Micropipeta de 100 L - 1000 L.
Puntas amarillas (Para Micropipeta de 10 L - 100 L).
Puntas azules (Para Micropipeta de 100 L - 1000 L).
Tubos eppendorf de 1.5 mL.
Material de vidrio.
Frascos de vidrio de 100 mL, 1000 mL.
Láminas portaobjetos.
Matraz Erlenmeyer de 100 mL, 500 mL.
Placas Petri de 20 mL.

38
Probeta de 50mL, 100 mL.
Tubos de ensayo de 20 mL.
Reactivos.
Cloruro de Calcio dihidratado CaCl2.2H2O, Merck.
Kid para tinción de Gram.
Medios de cultivo.
Agar agar, Merck.
Agar sangre, Merck.
Caldo tioglicolato, Merck.
Otros.
Agua estéril.
Alcohol.
Algodón.
Bomba sumergible.
Calentador con termostato de 25 W, Venus Aqua.
Cocinilla.
Codo de ¼.
Depósito de plástico de 2.4 L.
Frascos para muestra de 20 mL.
Gasa.
Globos metálicos.
Jeringa de 10 mL.
Llaves de ¼.
39
Llaves de tres vías.
Manguera de ¼.
Manguera de látex.
Niples de ¼.
Pabilo.
Papel filtro de 2 m de poro.
Reducciones de ½ a ¼.
Tapones de jebe.
Tubo de PVC de ½.
Válvula scheck de ¼.
Varilla de vidrio.
2.2. Métodos
2.2.1. Aislamiento e identificación de bacterias nativas del agua residual del

procesamiento de fibra de alpaca.
Obtención de muestra de aguas residuales de fibra de alpaca.
Se hizo la obtención de las muestras del agua residual de lavado de fibra de alpaca
de una empresa textil ubicada en el sector de Zamácola - Arequipa (Anexo 1); para la
toma de muestras se usó frascos estériles de 20 mL. Las muestras fueron tomadas en
tres distintos puntos dentro de las instalaciones de la planta de tratamiento para aguas
residuales de la empresa, se tomó muestras antes de ingresar al sedimentador, a la salida
del sedimentador y muestra de los lodos extraídos del sedimentador, la distribución se
muestra en la Fig. 11. Las muestras fueron rotuladas Efluente, Sedimentador y Lodo
haciendo referencia a cada uno de los puntos de muestreo. Las muestras fueron llevadas
al laboratorio.
40
B
A C
Figura 11. Puntos de muestreo.
A. Entrada de sedimentador (Muestra Sedimentador). B. Salida del sedimentador (Muestra

Sedimentador). C. Lodos del sedimentador (Muestra Lodo).
Aislamiento cepas nativas en muestras de agua residual del lavado de fibra de

alpaca.
Se realizó la preparación de caldo tioglicolato para tres tubos de ensayo de 20 mL,

siguiendo la metodología en el Anexo 2. Pasado el tiempo de esterilización se retiró los
tubos con el caldo tioglicolato del autoclave y se dejó enfriar hasta temperatura
ambiente. Se inoculó el medio con dos gotas de las muestras llamadas Efluente y
Sedimentador directamente al ser líquidas; en el caso de los lodos se tomó una porción
y fueron disueltos en agua estéril y se realizó la siembra. Se dejó en la incubadora a
35ºC por siete días.
Se observó las zonas de crecimiento de las bacterias para realizar el aislamiento

de bacterias anaerobias las cuales se desarrollan en el fondo del tubo. Se preparó Agar
Sangre como se detalla en el Anexo 3. Se hizo la siembra de la muestra tomada del
fondo del tubo de ensayo; se deja por siete días en la incubadora que pueda dar la
atmósfera anaerobia con un 5 % de CO2 a 35ºC; se realizó varios repiques hasta
conseguir las cepas puras. A las cuales se les realizó tinción de Gram [92].
Identificación de cepas con capacidad de producir biogás.
Se preparó medio sólido de caldo tioglicolato, para lo cual se siguió el mismo

procedimiento del caldo tioglicolato como indica en el Anexo 2 pero se le añadió agar
41
agar manteniendo la relación de 15 g/L. Al termino del tiempo en el autoclave se deja

solidificar el medio para realizar la siembra por punción, se dejó los tubos en la
incubadora de CO2 a 35ºC por siete días.
Elaboración de curvas de crecimiento de cepas nativas.
Para la elaboración de las curvas de crecimiento de las bacterias que tenían la

capacidad de generar biogás, se preparó caldo tioglicolato con indica en el Anexo 2, se
sembraron en el caldo tioglicolato las cepas que tuvieron la capacidad de producir
biogás; se sellaron los frascos y se conservaron dentro de la incubadora de CO2 haciendo
toma de muestra cada 12 horas por 10 días conservando las mismas en refrigeración.
Para procesar las muestras fueron llevadas a temperatura ambiente; se pesaron tubos
eppendorf vacíos luego se midió 1 mL de muestra, se llevó a la centrífuga por 5 minutos
a 5000 rpm, se eliminó el sobrenadante y se pesó el tubo eppendorf con el pellet
formado, por diferencia de pesos se halló la masa. Por otro lado, se realizó el conteo
celular con ayuda la cámara de Neubauer en la cual se colocó 10 L de la muestra. De
esta forma se realizó las curvas de crecimiento de cada cepa.
Medición de producción de biogás por bacterias nativas.
Se prepararon sistemas que permitan medir la producción de biogás por las

bacterias que rompieron el agar; los sistemas están conformados por un frasco de 100
mL, tapón de jebe, una varilla de vidrio, llave de tres vías, manguera de látex y probeta
de 50 mL, como se muestra en la Fig. 12.
Previamente se preparó inóculos en caldo tioglicolato. Se esterilizó cada uno de

los componentes del sistema, se preparó 80 mL de caldo tioglicolato para cada uno de
los sistemas; se realizó el cálculo para inocular el mismo número de bacterias de esta
forma hacer comparables las mediciones. Se estableció otro sistema donde se inoculó
juntas las bacterias que presentan la capacidad de producir biogás. La medición se hizo
evaluando el volumen de agua desplazado en la probeta invertida en un tiempo de 10
días en el que se mantuvo los frascos en el shaker con una temperatura de 45ºC. Este
42
proceso se hizo por tres repeticiones en el caldo tioglicolato y tres repeticiones en la

propia agua residual de lavado de fibra de alpaca.
Figura 12. Conformación de sistema para medir producción de biogás.
Identificación molecular de cepas nativas anaerobias con mayor capacidad

de producción de biogás.
A las bacterias seleccionadas por su capacidad de producir biogás se les realizó la

identificación molecular. La identificación consiste en la extracción de ADN de la
muestra usando el Kit “The MasterPureTM DNA Purification Kit” que provee todos los
reactivos necesarios para la recuperación de ADN. Luego el ADN es utilizado como
molde para amplificar la región 16S RNAr mediante la tecnología de la Reacción en
Cadena de la Polimerasa (PCR). La amplificación correspondiente a la región del gen
16s RNAr se llevó a cabo usando los primer universales 27F y 1492R. Con las siguientes
condiciones de PCR: 95oC for 30 seg, 50oC for 30 seg, 72ºC for 45 seg. Los productos
de PCR fueron purificados usando el kit Qiagen PCR purification, siguiendo las
instrucciones de la compañía y finalmente secuenciados usando la técnica de Sanger
que utiliza colorantes Big Dye V3.1 y leídos en un equipo ABI 3730xl.
2.2.2. Diseño y construcción del biorreactor UASB.

43
Se realizó el diseño del biorreactor UASB, considerando una relación de 4:1 en la

altura y el ancho para un volumen total de 13.50 L. Se consideró hacer un biorreactor
rectangular [47] para que sea más fácil la construcción de la campana GLS. Se colocó
dos puntos de muestreo en una cara lateral del biorreactor.
La campana GLS se diseñó siguiendo el modelo detallado por Márquez &

Martínez [1] los cuales indican una serie de cálculos para el diseño de la campana y de
los deflectores.
Se halló la velocidad de flujo en la campana (VC), para lo cual se consideró la

[45]
velocidad ascensional de 0.4 m/h que es una de las velocidades con mejores
resultados en el procesamiento de agua residual dentro de biorreactores UASB.
𝑉𝐶 = 4 × 𝑉𝑎
(Ec.1)
Donde:
Va: velocidad ascensional (m/h)
Se halló el área de abertura de la campana,
𝑄
𝑉𝐶
(Ec.2)
Donde:
Q: caudal en el biorreactor (m3/h)
Se determinó el área de la campana relacionando con el valor del área del

biorreactor (AR):
𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 = 𝐴𝑅 − 𝐴𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎
44
(Ec.3)
Donde:
AR: área del biorreactor (m2)
A partir del área de la campana se halló la medida del radio de la campana:
√𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎
2
(Ec.4)
Donde:
Por la diferencia existente entre el radio del biorreactor (Rr) y el radio de la

campana (Rcampana) se halló el valor del ancho de la abertura (Wabertura):
𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 = 𝑅𝑟 − 𝑅𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎
(Ec.5)
Donde:
Rr: radio del biorreactor (m)
Finalmente se debe obtener la altura del tubo de salida (WG) y la altura de la

campana (HG); para esto determinó usar un ángulo de 50º.
1
(Ec.6)
𝐻𝐺 = 𝑊𝐺 𝑡𝑎𝑛 ∝
45
(Ec.7)
Donde:
α: ángulo de la apertura de la campana
Todos los valores hallados corresponderán a una parte de la estructura de la

campana GLS, las cuales se muestran en la Fig. 5.
[1]
Para el dimensionamiento de los deflectores Márquez & Martínez se halló el
valor del traslapo:
𝑇𝑉 = 1.5(𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 )
(Ec. 8)
Donde:
TV: traslapo (m)
Luego se halló los valores del ancho de los deflectores (WD) y el valor de la
longitud de los deflectores para el cual se consideró que está en función de un ángulo
de 45°.
𝑊𝐷 = 𝑇𝑉 + 𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎
(Ec.9)
𝐿𝐷 = 2𝑊𝐷 𝑡𝑎𝑛45°
(Ec.10)
Donde:
46
TV: traslapo (m)

Se consideró en el diseño un sistema adicional para que permite la recirculación

del efluente [93], se colocó dentro de este sistema una bomba sumergible y un calentador
con termostato de 25 W de marca Venus Aqua.
La construcción del biorreactor se hizo en acrílico, haciéndole una base de metal

y el sistema de recirculación en plástico. Los accesorios que se usaron fueron: niples de
¼, llaves de ¼, codo de ¼, manguera de ¼, reducciones de ½ a ¼, tubo de PVC de ½ y
una válvula scheck de ¼.
Con las medidas halladas se realizó los planos, donde se observan la localización
de todos los accesorios que tendrá el sistema.
2.2.3. Evaluación del proceso de nodulación en el biorreactor UASB.
Se establecieron algunas condiciones para el funcionamiento del biorreactor

UASB, las cuales se detallan a continuación.
Determinación del caudal (Q).
Se utilizó el método volumétrico para determinación de caudal, para lo cual en la

llave de salida del biorreactor se colocó una probeta de 100 mL y con un cronómetro se
[94]
tomó un minuto ; lo que permitió determinar el caudal en L/minuto a la más baja
velocidad que se pudo colocar para el flujo de entrada del biorreactor.
Determinación de la velocidad ascensional (Va).
La velocidad ascensional (Va) [46] está definida por la siguiente fórmula:
𝑄
𝑉𝑎 =
A
47
(Ec.12)
Donde:
Va: Velocidad ascensional (m/h)
A: Área seccional transversal del biorreactor (m2)
Determinación del Tiempo de residencia hidráulica (THR).
Para esta medición se usó los valores antes hallados y usando la siguiente ecuación
[3]
se determinó el tiempo que demora el agua residual desde el ingreso hasta la salida
del biorreactor.
𝑉
THR =
Q
(Ec.13)
Donde:
THR: Tiempo de residencia hidráulica (h)
V: Volumen del biorreactor (m3)
Determinación de cantidad de CaCl2.
Como se detalló, la presencia de Ca+2 mejora la adhesión entre las bacterias

[8]
haciendo que el tiempo en que demora la nodulación sea menor . Se buscó tener el
CaCl2 en una concentración de 200 mg/L de Ca+2 [6].
Se realizó el cálculo la cantidad de CaCl2.2H2O para que el Ca+2 este en la

concentración de 200 mg/L en el volumen total, y para cada cambio de los 2.4 L del
depósito de recirculación también tenga la misma concentración del Ca+2 manteniendo
la proporción.
Condiciones de operación del biorreactor.

48
Para la experimentación se realizó dos procesos, uno en la ausencia de Ca+2 y otro

con la presencia del Ca+2, con tres repeticiones para cada uno, para lo cual se usaron los
mismos parámetros detallados en la Tabla 7. Estos dos procesos se ejecutaron colocando
el agua residual del lavado de fibra dentro del biorreactor y del depósito de
recirculación, además se añadió inóculo de las bacterias identificadas molecularmente;
para el cálculo de la cantidad de inóculo se realizó proporcionalmente al valor que fue
utilizado para la medición de biogás en los sistemas anteriores. Además, en la salida del
gas se colocó una manguera la cual ingresaba dentro de una probeta invertida para
observar la generación de biogás. Se dejó funcionando el reactor por un periodo de 25
días cada tres días se realizó el cambio del agua en el depósito de recirculación.
Tabla 7. Condiciones para el funcionamiento del biorreactor UASB
Parámetro Experimentación 1 Experimentación 2
Proporción de Ca+2 0 mg/L 200 mg/L
Temperatura 35 ºC 35 ºC
Tiempo de procesamiento 25 días 25 días
Cambio de 2.4 L Cada 3 días Cada 3 días
Determinación del área de los nódulos respecto al tiempo.
Se tomó muestras diarias en la primera llave del biorreactor; de cada muestra se

seleccionó un nódulo aleatoriamente el cual fue llevado a una lámina porta objetos, por
debajo de esta se colocó papel milimetrado; luego se observó al microscopio y se tomó
una fotografía la cual fue exportada al programa AutoCad 2011. En el cual mediante la
herramienta área se determinó el área de cada uno de los nódulos para la elaboración de
las curvas de desarrollo de nódulos de cada experimentación con sus tres repeticiones.
Determinación de producción de nódulos.

49
Al finalizar cada uno de los procesos se midió el volumen generado de nódulos

por el volumen de agua residual tratado. Estos fueron conservados para su utilización
en los siguientes procesos.
Análisis de parámetros iniciales y finales.
En esta etapa de la experimentación únicamente se midió si existe o no producción

de gas, sin medirla debido a que se produjeron mínimas cantidades. Por otro lado, se
midió inicial y final de los parámetros de pH con cintas indicadoras de pH,
conductividad, salinidad, SDT con el uso del Conductímetro Schott Handylab LF1
digital, y SST por el método gravimétrico.
Conductividad.
Es la medida de la capacidad de una solución acuosa para transportar una corriente

eléctrica; esta capacidad es dependiente de la presencia de iones. Se expresa en micro
siemens por centímetro [95].
Solidos disueltos totales (SDT)
Materia suspendida o disuelta en un medio acuoso, se puede hallar por métodos

gravimétricos o relacionando con la conductividad [95].
Salinidad.
Es la medida de la masa de sales disueltas en un volumen de solución, es

adimensional y está relacionada con la conductividad [95].
Sólidos suspendidos totales (SST).
Son los sólidos que quedan retenidos por el filtro y que posteriormente se secan a
105ºC [95]. El método usado es el gravimétrico para lo cual se pesó un papel filtro de 2
m de poro y se filtró al vacío 50 mL de muestra luego se llevó el papel filtro a secado
a una temperatura de 105ºC por una hora y luego se pesa nuevamente el papel filtro [95].
Se aplica la siguiente fórmula para la determinación de SST en mg/L.
50
(𝐴 − 𝐵)
SST = × 1 000
V
(Ec.14)
Donde:
SST: Sólidos suspendidos totales (mg/L)
A: Peso final del conjunto con el residuo seco, en mg.
B: Peso inicial del conjunto, en mg.
V: Volumen de la muestra (mL)
2.2.4. Determinación de los parámetros de funcionamiento del biorreactor UASB.
En esta etapa se buscó determinar el tiempo necesario que debe permanecer el

agua residual de lavado de fibra de alpaca hasta lograr la máxima depuración del
sistema. Se mantuvo el valor de Va y de temperatura el proceso duró 20 días; haciendo
tres repeticiones, en este caso se colocó un globo con volumen conocido para almacenar
el biogás y poder medir la composición del mismo.
Evaluación de nodulación inicial y final
Antes de iniciar cada una de las repeticiones del proceso se incorporó los nódulos
generados en las experimentaciones anteriores, midiendo el volumen de nódulos y
tomando 3 nódulos a los cuales se les midió el área como se hizo anteriormente. Al
finalizar los procesos se midió el volumen generado de nódulos por el volumen de agua
residual tratado además de medir el área de 3 nódulos. El volumen de carga de los
nódulos fue el mismo para los tres procesos.
Evaluación de la producción de biogás.
Se contabilizó el volumen total de producción de gas, además de medir la

composición del gas con el medidor de gases MultitecR 540, el cual mide CH4, CO2,
H2O y O2.
51
Análisis de parámetros.
Se tomó muestras del agua residual tratada en la salida del biorreactor todos los
días y fue conservada en refrigeración. Para realizar la medición de la conductividad,
salinidad y SDT se tomó una porción de 25 mL y se midió con el Conductímetro Schott
Handylab LF1 digital, se realizó el mismo procedimiento para las tres repeticiones.
También se realizó la medición de SST para lo cual se usó el método gravimétrico

descrito anteriormente [95].
Determinación de tiempo de digestión.
Analizando los parámetros a lo largo de los 20 días se determinó el tiempo de

digestión necesario para tener una depuración del agua residual.
2.2.5. Evaluación de eficiencia del proceso de depuración del agua residual y la

Finalmente se determinó la eficiencia del proceso, el biorreactor fue cargado con

los nódulos formados y el agua residual del lavado de fibra de alpaca, para este proceso
se mantuvo el valor de Va y de temperatura; con el tiempo determinado con el método
anterior, de igual forma se colocó un globo con volumen conocido para almacenar el
biogás y poder medir la composición del mismo.
Evaluación inicial de parámetros.
Se tomó un litro de muestra inicial la cual fue llevada al laboratorio de control de

calidad de la UCSM para que se le realice la medida de los parámetros de DQO, DBO,
Aceites y Grasas y SST; que son los parámetros que se encuentran dentro del D.S. Nº
021-2009-Vivienda [28].
Evaluación de nodulación inicial y final.

52
Al iniciar el proceso se midió el volumen de nódulos con los cuales se cargará el

biorreactor y aleatoriamente se midió el área de tres nódulos. Al finalizar el proceso se
midió el volumen generado de nódulos por el volumen de agua residual tratado además
de medir el área de tres nódulos.
Evaluación final de parámetros
Al término de la operación del biorreactor se tomó un litro de la muestra final la

cual fue llevada al laboratorio de control de calidad de la UCSM para que se le realice
las pruebas de DQO, DBO, Aceites y Grasas y SST.
Al tener estos resultados se realizó una determinación del ahorro que se tendrá
por efecto de cumplir con la normativa vigente, este cálculo se hizo según la Resolución
de consejo directivo N° 025-2011-SUNASS-CD [32].
[3]
Además, se determinó el porcentaje de remoción para cada uno de los
parámetros.
(𝑃𝑎𝑟á𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜𝐴𝑓𝑙𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒 − 𝑃𝑎𝑟á𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜𝐸𝑓𝑙𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒 )
% Remoción = × 100
𝑃𝑎𝑟á𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜𝐴𝑓𝑙𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒
(Ec.15)
Evaluación de la producción de biogás.
Se contabilizó el volumen total de producción de gas, además de medir la

composición del gas con el medidor de gases MultitecR 540, el cual mide CH4, CO2,
H2O y O2 por cada uno de los globos llenados durante el proceso.
53
Capítulo III: Resultados y Discusiones
3.1.Aislamiento e identificación de bacterias nativas del agua residual del

procesamiento de fibra de alpaca.
3.1.1. Aislamiento de cepas nativas en muestras de agua residual del lavado

de fibra de alpaca.
La ubicación del crecimiento de las cepas en el caldo tioglicolato determina el

tipo de microorganismo; por la naturaleza del biorreactor que usamos se requiere de
bacterias anaerobias. Por esta razón luego de haber pasado los siete días dentro de la
incubadora se retiraron los tubos y se observó en cada uno el crecimiento mostrado en
la Fig. 13, tomó la muestra de la parte inferior del tubo que es donde se desarrollan las
cepas anaerobias.
Al realizar la siembra en agar sangre de cada una de las muestras, se obtuvo varias
cepas aislando dos por cada uno de los tipos de muestras que fueron procesadas de esta
54
forma se aisló seis cepas macroscópicamente diferentes: efluente 1, efluente 2,

sedimentador 1, sedimentador 2, lodo 1 y lodo 2. En la Fig. 14 se observan las placas
de agar sangre con cada una de las cepas aisladas.
Efluente Sedimentador Lodo
Figura 13. Tubos con caldo tioglicolato.
Luego, a cada una de estas cepas se les realizó la tinción de Gram obteniendo los
datos mostrados en la Tabla 8, y en el Anexo 4 se muestra el panel fotográfico de la
tinción por cada una de las muestras.
Tabla 8. Resultados de la coloración de Gram para cada cepa aislada.
Cepa Tipo/Gram
Efluente 1 Bacilo Gram +
Efluente 2 Cocos Gram -
Sedimentador 1 Cocos Gram -
Sedimentador 2 Cocos Gram -
Lodo 1 Cocos Gram -
Lodo 2 Bacilo Gram +

55
Efluente 1 Efluente 2 Sedimentador 1
Sedimentador 2 Lodo 1 Lodo 2
Figura 14. Placas de Agar sangre con cepas aisladas.
En biorreactores anaerobios, se encontró gran cantidad de bacterias Gram

[96]
positivas esto mencionado por Kröber et al. , lo que nos indicaría que las cepas
Efluente 1 y Lodo 2 podrían ser usadas dentro del biorreactor UASB para aumentar la
eficiencia del proceso.
3.1.2. Identificación de cepas con capacidad de producir biogás.
Las bacterias aisladas de la propia agua residual además de ser anaerobias deben
producir biogás por esta razón al utilizar el caldo tioglicolato y agregarle agar agar e
inocular estos tubos con las cepas aisladas, permitió observar cuales son las cepas que
producen biogás evidenciado por la ruptura del agar dentro del tubo de ensayo.
Mostrando que de las 6 cepas aisladas únicamente las cepas Efluente 1 y Lodo 2 tienen
esta capacidad como se detalla en la Tabla 9. El panel fotográfico se encuentra en el
Anexo 5.
56
Tabla 9. Resultados de producción de biogás evidenciado por la ruptura del agar.
Cepa Producción de biogás
Efluente 1 Positivo
Efluente 2 Negativo
Sedimentador 1 Negativo
Sedimentador 2 Negativo
Lodo 1 Negativo
Lodo 2 Positivo
3.1.3. Elaboración de curvas de crecimiento de cepas nativas.
Una vez seleccionadas las dos cepas que tienen la capacidad de producir biogás
se les realizó a cada una su curva de crecimiento. La Fig. 15 y la Fig. 16 muestran las
curvas de crecimiento relacionando el Nº de bacterias con el tiempo para cada una de
las cepas Efluente 1 y Lodo 2 respectivamente; en las Fig. 17 y 18 se relaciona la masa
con el tiempo para cada una de las cepas Efluente 1 y Lodo 2.
18000000
16000000
Nº de bacterias
14000000
12000000
10000000
8000000
6000000
4000000
0 50 100 150 200 250
Tiempo (horas)
Figura 15. Curva de crecimiento relacionando Nº de bacterias con el tiempo de

la cepa Efluente 1.
57
30000000
25000000
Nº de bacterias
20000000
15000000
10000000
5000000
0
0 50 100 150 200 250
Tiempo (horas)
Figura 16. Curva de crecimiento relacionando Nº de bacterias con el tiempo de

la cepa Lodo 2.
0.3
0.25
Masa (g/mL)
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 50 100 150 200 250
Tiempo (horas)
Figura 17. Curva de crecimiento relacionando g/mL de bacterias con el tiempo

de la cepa Efluente 1.
0.6
0.5
Masa (g/mL)
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 50 100 150 200 250
Tiempo (horas)
Figura 18. Curva de crecimiento relacionando g/mL de bacterias con el tiempo

de la cepa Lodo 2.
58
Ambas cepas Efluente 1 y Lodo 2 en un tiempo de 4 días y medio se observa que

las bacterias entran en la etapa estacionaria de su crecimiento; esto se puede observar
en las Fig. 19 y 20 se muestran las curvas de crecimiento por cada cepa relacionando el
Log (Nº de bacterias) con el tiempo, donde se distinguen tres de las cuatro etapas de
desarrollo bacteriano; la fase de latencia, la fase exponencial y la fase estacionaria.
7.3000
7.2000
7.1000
Log (Nº de Bacterias)
7.0000 y = 0.1174ln(x) + 6.5852

R² = 0.8701
6.9000
6.8000
6.7000
6.6000
6.5000
0 50 100 150 200 250
Tiempo (h)
Figura 19. Curva de crecimiento bacteriano para la cepa Efluente 1.
7.6000
7.4000
7.2000
Log (Nº de bacterias)
7.0000
y = 0.2349ln(x) + 6.1065
6.8000
R² = 0.9873
6.6000
6.4000
6.2000
6.0000
0 50 100 150 200 250
Tiempo (h)
Figura 20. Curva de crecimiento bacteriano para la cepa Lodo 2.
3.1.4. Medición de producción de biogás por bacterias nativas.

59
Una vez armados los sistemas como se observa en la Fig. 21, se inoculó con 3x106
bacterias para hacer las medidas comparables. Los inóculos se dejaron en la incubadora
de CO2 por 4 días, se hizo la determinación de la masa en 1 mL de inóculo y esto permite
comparar con los datos hallados en la curva y así determinar el número de bacterias.
Luego se determinó el volumen de inóculo requerido por cada uno de los sistemas
mostrado en la Tabla 10.
Tabla 10. Determinación de volumen de inóculo.
Datos de la curva Masa en el inóculo

Volumen
Nº de
Nombre Peso de Peso de requerido
Masa Nº de Masa Bacterias/mL
Eppendorf Eppendorf (mL)
(g/mL) Bacterias/mL (g/mL)
Vacío con Pellet
Efluente 1 0.1926 1.38E+07 0.7545 0.9041 0.1496 1.07E+07 0.280
Lodo 2 0.2496 1.45E+07 0.8049 0.9692 0.1643 9.51E+06 0.315
Figura 21. Sistema para la medición de la producción de biogás.
Se realizó 3 repeticiones en el caldo tioglicolato y otras 3 en el agua residual por

cada una de las cepas y otro sistema donde se inoculó ambas cepas en partes iguales es
60
decir 1.5x106 de bacterias de la cepa Efluente 1 y 1.5x106 de bacterias de la cepa Lodo

2; los resultados se exponen en la Fig. 22; se puede apreciar un descenso considerable
en la producción de biogás en el agua residual ya que esta no posee la misma cantidad
de nutrientes que el caldo tioglicolato que por su composición favorece el desarrollo de
las bacterias y en consecuencia la producción de biogás.
Caldo Tioglicolato Agua Residual

Prueba 1 Prueba 2 Prueba 3 Prueba 1 Prueba 2 Prueba 3
14
34
13
32
31
30
12
29
Volumen de biogas (mL)
Volumen de biogas (mL)

28
11
25
10
24
22
8
7
Efluente 1 Lodo 2 Consorcio Efluente 1 5
Lodo 2 Consorcio
Figura 22. Producción de biogás por las cepas y el consorcio
De la medición del gas podemos determinar que el consorcio favorece la

producción de biogás en los sistemas; lo que determinará el uso de ambas cepas para
inocular el biorreactor.
3.1.5. Identificación molecular de cepas nativas anaerobias con mayor

capacidad de producción de biogás.
Las cepas aisladas fueron secuenciadas molecularmente, la secuencia de ADN fue

comparada en BLAST de NCBI para encontrar a que bacterias presentan mayor
porcentaje de homología, los resultados se muestran en la Tabla 10. Ambas bacterias
pertenecen a la misma especie.
Tabla 11. Resultados de secuenciación de cepas

61
Cepa Género y especie con mayor homología % de Homología
Efluente 1 Lysinibacillus sp. 99
Lodo 2 Lysinibacillus varians 98
La cepa Lysinibacillus ha sido usada para el tratamiento de aguas residuales de la

[97]
industria textil presentando gran eficiencia en el proceso . Por otro lado, Kim et al.
[98]
informan que la cepa Lysinibacillus participa en la degradación de ácidos grasos de
cadena larga; justificando su participación durante el proceso de degradación anaerobia
que se da en el biorreactor UASB.
3.2.Diseño y construcción del biorreactor UASB.
Se diseñó el biorreactor UASB de forma rectangular con 150 mm de ancho y una

altura de 600 mm; esto para mantener la relación de 4:1 y obtener un volumen total
dentro del biorreactor de 13.50 L; se colocaron dos llaves para tomas de muestra una en
la parte central del biorreactor y otra a 50 mm de altura desde la base del biorreactor; el
plano se muestra en el Anexo 8.
El biorreactor cuenta con el ingreso del efluente en la parte inferior del biorreactor
usando una manguera de ¼ de pulgada; conectada al sistema de recirculación de 2.4 L
el cual con el uso de la bomba impulsa el efluente dentro del biorreactor y al cual llega
otra manguera la cual está conectada a la salida del biorreactor; como se muestra el
diseño 3D en la Fig. 23.
Para el diseño de la campana GLS y de los deflectores se siguió el método

detallado por Márquez & Martínez [1] y considerando las recomendaciones de Lettinga
[50]
& Hulshoff Pol ; partiendo de la consideración de la velocidad ascensional de 0.4
m/h se calculó la velocidad de flujo en la campana (VC) obteniendo un valor de 1.6 m/h.
62
Figura 23. Diseño 3D del biorreactor UASB y el sistema de recirculación.
Antes de hacer la siguiente determinación es necesario hallar el caudal ideal para

tener la velocidad de 0.4 m/h el cual fue de 0.009 m3/h; con este cálculo se halló la
abertura de campana dando un valor de 0.0056 m2. Para la determinación del área de la
campana se usó el valor de área del biorreactor la cual fue de 0.0225 m2 obteniendo un
valor de 0.0169 m2 para el área de la campana. Con esto se determinó el valor de radio
de campana de 0.0650 m; la diferencia entre este valor y del radio del biorreactor nos
permite hallar el ancho de la abertura el cual fue de 0.0100 m. finalmente se obtuvo el
valor de la altura del tubo de salida y la altura de la campana con un ángulo de 50º
teniendo los valores de 0.0600 m y 0.0715 m respectivamente. Todos los cálculos en el
Anexo 9 y los planos de diseño en el Anexo 10.
Los deflectores fueron diseñados siguiendo la misma metodología Márquez &

[1]
Martínez se halló el valor del traslapo de 0.0150 m; y obteniendo un ancho del
63
deflector de 0.0250 m y la longitud 0.0500 m. Con las medidas halladas se realizó los
planos, donde se observan la localización de todos los accesorios que tendrá el sistema
Anexo 10.
El biorreactor fue construido en acrílico, los accesorios usados fueron: 11 niples

de ¼, 4 válvulas de bola de ¼, 3 codos de ¼, 2 reducciones de ½ a ¼, 1 válvula de
compuerta de ½, 3 niples de ½, 1 codo de ½ y 1 válvula ckeck de ½.
3.3.Evaluación del proceso de nodulación en el biorreactor UASB.
El proceso de nodulación dentro del biorreactor se da en cuatro etapas en las

cuales también se pueden considerar los diferentes modelos: primera etapa es el
transporte o movimiento de bacterias en la cual se da el primer contacto entre las
[74]
bacterias donde también los sólidos suspendidos tienen un papel importante como
[70]
se detalló en el modelo de crecimiento en sólidos suspendidos colonizados
permitiendo que estos sirvan de primer soporte para comenzar a desarrollarse los
nódulos.
La segunda etapa la adsorción inicial o el contacto multicelular estable, donde se

establece un contacto más estable que es difícil de romper en este parte del proceso
juega un papel importante la atracción por cargas opuestas que serán dadas por un ion
positivo multivalente que neutralice las cargas de las bacterias generando que la unión
se haga más fuerte esto como fue descrito en el modelo unión a iones positivos
multivalentes (9).
La tercera etapa es la adhesión irreversible o la maduración de la agregación

celular [74]; en esta etapa la generación de polímeros extracelulares generados dentro del
mismo nódulo en consecuencia del hidrógeno que se forma durante todo el proceso de
degradación permite tener anclajes más fuertes como lo indica el modelo de Capetown
[99]
.
La cuarta etapa es la formación del nódulo bacteriano o la multiplicación de las

bacterias en esta etapa se da el crecimiento de los nódulos hasta formar uno que tenga
diferentes grupos bacterianos sean dados del inóculo o de la propia carga microbiana
64
con la que cuenta el agua residual generando un nódulo como indica el modelo de
multicapa [99] con diferentes grupos bacterianos dentro, además de ser una microcolonia
sintrofica que permite que toda la degradación se dé dentro del mismo nódulo.
3.3.1. Determinación del caudal.
Al realizar la medición con el método volumétrico colocando una probeta al final

de la manguera de la salida del efluente se encontró que se tenía un caudal de 160 mL
por minuto siendo 0.16 L/min el caudal con el cual trabajó el biorreactor.
3.3.2. Determinación de la velocidad ascensional.
Haciendo uso del caudal de 0.16 L/min que equivale a 0.0096 m3/h y el área
transversal del biorreactor que es de 0.0225 m2 se pude hallar la velocidad ascensional
con la ecuación 12.
𝑸
𝑽𝒂 =
𝐀
(Ec.12)
Donde:
Va: Velocidad ascensional (m/h)
A: Área seccional transversal del biorreactor (m2)
𝑄
𝑉𝑎 =
A
𝑚3
0.0096
𝑉𝑎 = ℎ
0.0225 𝑚2
𝒎
𝑽𝒂 = 𝟎. 𝟒𝟐𝟔𝟕
𝒉
65
Como se revisó la velocidad ascensional es uno de los factores más importantes

para el arranque del biorreactor y para la formación de nódulos; se reporta que una Va
entre 0.1 y 1.4 m/h facilitará el contacto entre el efluente y lo nódulos además de no
arrastrar a los nódulos al no representar altas velocidades [45], además Gonçalves et al.
[100]
demostraron que al aumentar la velocidad ascensional se observa una disminución
de la eficiencia en la depuración del agua residual.
[101]
Por el contrario, Wiegan explica que al aumentar la velocidad facilita la
[57]
separación de burbujas de gas. Manhmound coincide con que es mejor bajas
velocidades con el fin de proporcionar un buen contacto del sustrato con la biomasa [56].
3.3.3. Determinación del Tiempo de residencia hidráulica (THR).
El tiempo de residencia hidráulica (THR), permite conocer el tiempo que demora

el agua residual desde su ingreso hasta su salida, esto se calculó con la ecuación 13 de
Morillo y Fajardo [3]:
𝑽
𝐓𝐇𝐑 =
𝐐
(Ec.13)
Donde:
THR: Tiempo de residencia hidráulica (h)
V: Volumen del biorreactor (m3)
𝑉
THR =
Q
12.15 𝐿
THR =
230 L/d
THR = 0.05 𝑑
66
𝐓𝐇𝐑 = 𝟏. 𝟐𝟔 𝐡
Este resultado indica que en un tiempo de 1.26 horas el agua que ingresa al
biorreactor está saliendo cumpliendo un siglo de tratamiento; pero no es el tiempo total
del tratamiento debido a que el sistema se mantiene en recirculación. Para esta parte de
la experimentación se consideró un tiempo total de 20 días.
3.3.4. Determinación de cantidad de CaCl2.
La concentración de Ca+2 con la que se trabajó fue de 200 mg/L; esto debido a los
buenos resultados que presenta el añadir Ca+2 al sistema en esa proporción [8]
, esto es
para mejorar el proceso de nodulación.
Se determinó la cantidad de CaCl2.2H2O requerido para mantener la proporción

por un lado en el volumen total del biorreactor de 12.15 L y la cantidad para los 2.4 L
que estuvieron en el sistema en recirculación. Se debe considerar que esta agua que está
dentro de la recirculación será cambiada cada tres días para incorporar nuevos nutrientes
al sistema y mejorar el proceso de nodulación.
𝑚𝑔𝐶𝑎 1 𝑚𝑜𝑙 𝐶𝑎 1 𝑚𝑜𝑙 𝐶𝑎𝐶𝑙2 ∙ 2𝐻2 𝑂 147014,8 𝑚𝑔 𝐶𝑎𝐶𝑙2 ∙ 2𝐻2 𝑂

200 × × ×
𝐿 40028 𝑚𝑔 𝐶𝑎 1 𝑚𝑜𝑙 𝐶𝑎 1 𝑚𝑜𝑙 𝐶𝑎𝐶𝑙2 ∙ 2𝐻2 𝑂
𝒎𝒈 𝑪𝒂𝑪𝒍𝟐 ∙ 𝟐𝑯𝟐 𝑶
𝟕𝟑𝟒, 𝟓𝟓𝟗𝟖
𝐋
Se requirió 0.73456 g CaCl2.2H2O/L entonces para el biorreactor el cual tiene un

volumen efectivo de 12.15 L se usó 8.9249 g CaCl2.2H2O y para el sistema de recirculación
que tiene un volumen de 2.4 L se requerirá 1.7629 g de CaCl2.2H2O.
3.3.5. Condiciones de operación del biorreactor.

67
En el arranque se consideró inocular el biorreactor, como es sugerido por Noyola

[7]
y Moreno que indican que al aumentar la carga microbiana dentro del biorreactor
permitirá que al aplicarse el modelo de presión de selección no salgan todos los
microorganismos al existir más microorganismos que no estén tan dispersos.
Figura 24. Arranque del biorreactor
El inóculo fue preparado en caldo tioglicolato pasados 4 días se hizo la

determinación de la masa de 1 mL de inóculo para comparar con los datos obtenidos en
la curva de crecimiento para determinar el número de bacterias y con esto se hizo una
relación considerando que para 80 mL usados en la prueba para la producción de biogás
se usó 1.5x106 bacterias de cada cepa. Los datos son mostrados en la Tabla 12.
Tabla 12. Determinación de volumen de inóculo para el biorreactor.
Datos de la curva Masa en el inóculo

Volumen Volumen
Peso de Peso de Nº de (mL) (mL)
Nombre Masa Nº de Masa
Eppendorf Eppendorf Bacterias/mL para 80 para
(g/mL) Bacterias/mL (g/mL) mL 12150 mL
Vacío con Pellet
Efluente 1
0.1926 1.38E+07 0.7583 0.8113 0.053 3.80E+06 0.3950 59.9901
Lysinibacillus sp.
Lodo 2
0.2496 1.45E+07 0.8067 0.8829 0.0762 4.43E+06 0.3389 51.4704
Lysinibacillus varians
68
Se llenó el biorreactor con el agua residual, se inoculó el biorreactor con los

volúmenes indicados y se añadió el CaCl2.2H2O como se muestra en la Fig. 24.
3.3.6. Determinación del área de los nódulos respecto al tiempo.
Luego de hacer la medición con el AutoCad 2011 usando la herramienta área la

cual permite determinar el área de una forma demarcada. Se hizo las mediciones por
cada una de las experimentaciones y sus repeticiones se hallaron los valores que fueron
graficados y son mostrados en la Fig. 25 para el Experimento 1 sin presencia de Ca+2
en sus tres repeticiones del proceso.
0.26
0.24
0.22
0.20
Área del Nódulo (mm2)
0.18
0.16
0.14
0.12
0.10
0.08
0.06
0.04
0.02
0.00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo (Días)
Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3
Figura 25. Desarrollo de nódulos en el Experimento 1 (Sin Ca+2)
Como se observa en el experimento sin la presencia de Ca+2 se alcanzó áreas de

nódulos menores a 0.26 mm2 en la repetición 1 se alcanzó un área de 0.1649 mm2, en
el caso de la repetición 2 se alcanzó un área de 0.2532 mm2 y un área de 0.2506 mm2
en la tercera repetición.
69
En la Fig. 26 se muestra el desarrollo nodular en el Experimento 2 con la presencia

de Ca+2. En este caso se obtuvieron áreas con valores cercanos a 11.00 mm2; en la
repetición 1 el área fue de 8.1468 mm2, en el caso de la repetición 2 se alcanzó un área
de 10.5383 mm2 y en la tercera repetición se obtuvo un área de 9.6712 mm2.
La variación en el tamaño de los nódulos en las distintas repeticiones en ambos

casos se debe a que el agua residual tiene variación de composición haciendo que el
crecimiento de las bacterias inoculadas sea distinto.
11.00
10.00
9.00
8.00
7.00
6.00
5.00
4.00
3.00
2.00
1.00
0.00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo (Días)
Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3
Figura 26. Desarrollo de nódulos en el Experimento 2 (Con Ca+2).
Además, se promedió los valores de los nódulos correspondientes a cada día por
cada experimentación; para comparar los dos experimentos esto se muestra en la Fig.
27.
Existe una diferencia del tamaño de los nódulos en cada una de las
experimentaciones, esto es debido a que el incluir Ca+2 en el proceso mejoramos la
segunda etapa de la nodulación la adsorción inicial o el contacto multicelular estable;
puesto que el Ca+2 aportará las cargas positivas necesarias para neutralizar las negativas
propias de las bacterias y hacer que se unan unas con otras; actuando como un floculante
[8]
, el Ca+2 de la misma forma está implicado en la tercera etapa ya que este también está
70
presente en los polímeros extracelulares, al aumentar la cantidad del mismo hará que el
material que se forme sea más pegajoso [64].
10.00
9.50
9.00
8.50
8.00
7.50
7.00
6.50
6.00
5.50
5.00
4.50
4.00
3.50
3.00
2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo (Días)
Experimento 1 Experimento 2
Figura 27. Comparación del desarrollo nodular de las dos experimentaciones

A. Se muestra el desarrollo nodular para el Experimento 1 (Sin Ca +2) en sus tres repeticiones, B. Se
muestra el desarrollo nodular para el Experimento 2 (Con Ca+2).
En el día 25 se obtiene de la primera experimentación (sin Ca+2) un nódulo de

área promedio de 0.1978 mm2 mientras que en la segunda experimentación (con Ca+2)
se tiene un nódulo de área promedio de 8.1838 mm2, todos los datos obtenidos se
encuentran en el Anexo 11; en la Fig. 28 se muestran las imágenes del nódulo de mayor
tamaño de ambas experimentaciones.
En la experimentación sin adicionar el Ca+2 se observa un desarrollo, pero es lento

por esta razón se reportan periodos de arranque de 3 [102] hasta 5 meses [103]; siendo este
el tiempo necesario para que en el biorreactor se desarrollen los nódulos bacterianos.
71
El tamaño de nódulos al incorporar el Ca+2 es mayor; haciendo que el tiempo de

arranque sea menor; esto es semejante con los diferentes estudios en los cuales reportan
un aumento del tamaño de los nódulos al incorporar el CaCl2 en una concentración de
200 mg/L de Ca+2 en tiempos de 21 y 28 días [8]; además se indica que el calcio mejora
las propiedades de precipitación al aumentar la densidad; sin afectar el pH y la
producción de gas [104]. Se reportan nódulos de 7.0686 mm2 [2, 3] con una forma ovalada
y muy compactos.
A B
Figura 28. Imagen de nódulos en cada proceso luego de 25 días.

A. Nódulo de mayor tamaño en experimentación 1 (sin Ca +2) en cuadrícula de 1 mm2. B. Nódulo de
mayor tamaño en experimentación 2 (con Ca +2) en cuadrícula de 25 mm2.
3.3.7. Determinación de producción de nódulos.
Pasados los 25 días se dejó sedimentar los nódulos por un periodo de 3 horas
permitiendo de esta forma que los nódulos estén en el fondo del biorreactor, y poder
medir el volumen de nódulos generados al final de cada uno de las experimentaciones
y de las repeticiones. Se obtuvo volúmenes diferentes los cuales están mostrados en la
Tabla 13.
El valor de volumen de agua tratado corresponde a los 12.15 L que tiene el

biorreactor sumados con los 2.4 L del tanque de recirculación y los ocho cambios que
se hizo de estos 2.4 L.
Además del tamaño de los nódulos se observa que existe gran diferencia entre los
volúmenes generados en ambas experimentaciones debido a la incorporación del Ca+2
al sistema. Los nódulos generados durante este proceso se conservaron para ser usados
en la siguiente experimentación.
72
Tabla 13. Volumen de nódulos generados en Experimentación 1 y 2.
Experimentación 1 Experimentación 2
Parámetro
R1 R2 R3 R1 R2 R3
Volumen (L) de agua tratada 33.75 33.75 33.75 33.75 33.75 33.75
0.0337 0.0337 0.0337 0.0337 0.0337 0.0337

Volumen (m3) de agua tratada
5 5 5 5 5 5
Volumen (L) de nódulos 0.33 0.45 0.35 1.03 0.81 0.95
0.0003 0.0004 0.0003 0.0010 0.0008 0.0009

Volumen (m3) de nódulos
3 5 5 3 1 5
m3 de nódulos por m3 de agua 0.0097 0.0133 0.0102 0.0305 0.0239 0.0280

tratada 8 3 2 8 7 6
3.3.8. Análisis de parámetros.
Los parámetros iniciales y finales de cada una de las experimentaciones y de las

repeticiones se muestran en el Anexo 12; en la Tabla 14 se muestran los porcentajes de
remoción promedio en cada una de las Experimentaciones; como se observa el
porcentaje de remoción en el Experimento 2 es mayor que en el Experimento 1 esto se
debe a la mayor cantidad de nódulos que se están formando y la presencia del Ca+2.
Tabla 14. Porcentajes de remoción promedio de cada Experimentación
Parámetro Experimentación 1 Experimentación 2
Conductividad (ms/cm) 52.95% 86.41%

Salinidad 62.24% 95.05%
SDT 56.99% 86.45%
SST (mg/L) 56.55% 76.69%
73
En la Tabla 15 se muestran valores de finales de los parámetros y el pH, además,

los valores del volumen generado de biogás durante el proceso; siendo estas cantidades
bastante pequeñas, este proceso se mejora conforme se tenga mayor cantidad de nódulos
en el biorreactor.
Tabla 15. Medición de final de parámetros por experimentación
Experimentación 1 Experimentación 2
Parámetro Repetición Repetición Repetición Repetición Repetición Repetición
1 2 3 1 2 3
pH. 7 7 7 7 7 7
Conductividad (s/cm) 2358 1634 1279 464 460 466
Salinidad 1.2 0.7 0.6 0.1 0.1 0.1
SDT 987 563 543 205 204 207
SST (mg/L) 1608 1576 1560 838 804 856
Volumen del Gas (mL) 2 1 1 8.5 10 9
A B
Figura 29. Imágenes iniciales y finales de la experimentación 1

A. Inicial de la experimentación 1 (sin Ca +2). B. Final de la experimentación 1 (sin Ca +2)
Como se observa los valores iniciales se ven disminuidos por el proceso; además
de que existe una diferencia entre los procesos finales de la experimentación 1 y de la
2. Todos los parámetros disminuyen, ya que al depurar el agua residual se busca tener
74
un agua con menor cantidad de materia orgánica generando que el agua no sea buena
conductora de electricidad reflejando esto en los valores de conductividad, salinidad y
SDT.
En la Fig. 29 se muestran las imágenes del biorreactor inicial y final para la

Experimentación 1; donde se observa el aclaramiento del agua residual indicando que
se está dando una depuración biológica; pero, como se muestra en la Fig. 30 en el caso
de la imagen del biorreactor final del Experimento 2 se nota un mayor aclaramiento.
Figura 30. Imágenes iniciales y finales de cada experimentación

A. Inicial de la experimentación 2 (con Ca+2). B. Final de la experimentación 2 (con Ca+2).
3.4.Determinación de los parámetros de funcionamiento del biorreactor UASB
Las condiciones de operación se mantuvieron la Va en 0.4267 m/h y la

temperatura en 35 ºC; y se realizaron tres repeticiones del experimento por 20 días de
funcionamiento del biorreactor UASB.
3.4.1. Evaluación de nodulación inicial y final
En cada una de las repeticiones se inoculó 1.3 L de los nódulos producidos en las
experimentaciones anteriores esto para mejorar la disponibilidad de biomasa anaerobia
ya nodulada haciendo que el periodo de arranque sea menor [105]; se puede usar otro tipo
75
de lodos digeridos para mejorar el proceso solo que esto implica un tiempo de
acondicionamiento [106] por el contrario al ser los nódulos del propio experimento es que
estos nódulos ya se encuentran adaptado al sustrato.
Se tomó aleatoriamente tres nódulos en cada repetición para su medición inicial

y otros tres al finalizar la digestión es decir a los 20 días además de tomar el volumen
final de nódulos generados por m3 de agua tratada; estos datos se muestran en la Tabla
16.
Tabla 16. Evaluación de nodulación inicial y final
Parámetro R1 R2 R3
8.3979 9.1835 10.5236
Área del nódulo (mm2) 12.203

Inicial 8.4576 9.09
2
7.052 7.9989 7.5912
Promedio del área del nódulo (mm2)

9.2177 8.5467 9.0683
Inicial
17.7835 15.7788 10.6702
Área del nódulo (mm2)

Final 9.6538 9.5004 8.4083
12.2119 11.8337 15.4072

13.2164 12.3710 11.4952
Final
Volumen (L) de agua tratada 12.15 12.15 12.15
Volumen (m3) de agua tratada 0.01215 0.01215 0.01215
Volumen (L) de nódulos 2.204 2.632 2.458
Volumen (m3) de nódulos 0.002204 0.002632 0.002458
m3 de nódulos por m3 de agua

0.18140 0.21663 0.20230
tratada
Al inocular el biorreactor con los nódulos que se formaron en el proceso anterior

se puede observar como el tamaño final de los nódulos es mayor como se muestran en
76
las fotografías de los nódulos iniciales y finales por cada una de las repeticiones. La
forma de los nódulos depende del tiempo del sustrato [36]; y de la generación del gas que
[65]
como menciona Wiegant y de Man las burbujas de gas permiten que los nódulos
tomen una forma esférica.
El inocular nódulos permite que se dé un aumentando del volumen de generación

de nódulos el cual se evidencia en el valor de m3 de nódulos por m3 de agua tratada; el
aumento de nódulos ayuda a disminuir el tiempo de la depuración del agua residual.
3.4.2. Evaluación de la producción de biogás.
Durante el proceso de depuración biológica del agua se genera biogás el cual fue
almacenado en globos de aluminio con un volumen de 1.254 L, al ser retirados del
biorreactor fueron sellados hasta que se hizo la medición con el medidor de gases
MultitecR 540, el cual mide CH4, CO2, H2O y O2; se obtuvieron los resultados
detallados en la Tabla 17.
Tabla 17. Evaluación de la producción de biogás
Parámetro R1 R2 R3
Volumen de biogás (L) 1.254 1.254 1.254
CH4 (%) 4.1 2.7 4.4
CO2 (%) 8 4 10
O2 (%) 14.6 20.2 14.1
H2S (ppm) 6 34 3
El volumen de biogás aumenta según la cantidad de nódulos presentes en el

biorreactor, en la Fig. 31 se observa el globo lleno de biogás generado por el proceso de
depuración; en todas las repeticiones se llenó un globo con el biogás generado por el
proceso.
77
A C
B
Figura 31. Biorreactor UASB con producción de biogás

A. Repetición 1. B. Repetición 2. C. Repetición 3.
3.4.3. Análisis de parámetros.
En cada una de las repeticiones se hizo toma de muestras diarias para la

determinación de los diferentes parámetros como son: la conductividad, salinidad y
SDT se midió con el Conductímetro Schott Handylab LF1 digital. Para la medición de
SST se usó el método gravimétrico descrito anteriormente [95]. Los resultados para cada
uno de los parámetros se muestran en el Anexo 13.
Se realizó la gráfica de cada uno de los parámetros por cada repetición; para la
Conductividad en la Fig. 32, en la Fig. 33 se grafican los valores para la Salinidad y en
la Fig. 34 los valores para los SDT; en los tres parámetros se observa el descendimiento
de los valores.
En la Fig. 35 se muestran las curvas de las tres repeticiones para el parámetro de

SST; en el cual también se observa un descendimiento. Este parámetro es uno de los
más importantes ya que nos permite establecer con mayor exactitud el tiempo en días
necesario para la depuración del agua residual logrando que esta alcance estar por
debajo del valor máximo admisible establecido por en el decreto supremo.
78
5000
4500
4000
3500
3000
s/cm
2500 R1
2000 R2
1500
R3
1000
500
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Tiempo (días)
Figura 32. Curvas para la conductividad en las tres repeticiones.
2.5
1.5 R1
R2
1
R3
0.5
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Tiempo (días)
Figura 33. Curvas para la salinidad en las tres repeticiones.
2500
2000
1500
mg/L
R1
1000 R2
500 R3
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Tiempo (días)
Figura 34. Curvas para los sólidos disueltos totales en las tres repeticiones.
79
4000
3500
3000
2500
mg/L
2000 R1
R2
1500 R3
R1, 512
1000
R2, 506
R3, 495
500
R1, 478 R2, 487 R3, 476
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Tiempo (días)
Figura 35. Curvas para los sólidos suspendidos totales en las tres repeticiones
3.4.4. Determinación de tiempo de digestión.
Las curvas de los parámetros muestran que a partir del día siete el descenso se
hace constante y en mínimas cantidades por eso se determinó que ese tiempo era el
adecuado para que se dé la depuración del agua residual. Además, se verificó el valor
de SST que según D.S. Nº 021-2009-Vivienda [28] el VMA es de 500 mg/L y al observar
en la curva se observa que en el día seis aún el valor está por encima del VMA y ya en
el día siete está por debajo.
El tiempo de residencia hidráulica que se determinó de siete días, el cual es el

tiempo para que se dé la digestión del agua residual dentro del biorreactor hasta alcanzar
los VMA coincide con el dado por España et. al [91] los cuales indican que un tiempo de
7.5 días se da una buena depuración. Barampouti et. al [107] indican que el mejor tiempo
es de 9 días para la depuración completa del agua residual esto en sistemas pilotos de
experimentación por el contrario en biorreactores donde se trata volúmenes mayores se
deben tener menores valores de incluso 4.5 horas [17].
80
3.5.Evaluación de eficiencia del proceso de remoción de contaminación y la

Para determinar la eficiencia del proceso de depuración se realizó una prueba final
en la cual se mantuvo el valor de Va en 0.4267 m/h y la temperatura en 35 ºC; además
se consideró un TRH de siete días según lo determinado en lo experimentado
anteriormente.
3.5.1. Evaluación inicial de parámetros.
La determinación de parámetros se hizo en el laboratorio de control de calidad de

la UCSM (Anexo 13), los parámetros medidos fueron los indicados dentro del D.S. Nº
[28]
021-2009-Vivienda DQO, DBO, Aceites y Grasas y SST los valores obtenidos se
muestran en la Tabla 18.
Los resultados en todos los parámetros exceden los VMA establecidos por el
decreto supremo para la descarga de agua a la residual al alcantarillado; al tener estos
valores por encima de los establecidos por ley implica que la empresa estaría
incurriendo en un gasto por la descarga de este efluente a la red de alcantarillado.
Tabla 18. Evaluación de los parámetros iniciales
Parámetro Resultado
Demanda Química de Oxigeno (DQO, mg/L) 3551.59
Demanda Bioquímica de Oxigeno (DBO, ppm) 1321.56
Sólidos Suspendidos Totales (SST, mg/L) 3250.16
Aceites y Grasas (mg/L) 750.23
3.5.2. Evaluación de nodulación inicial y final.
Al igual que en las experimentaciones anteriores se inoculó el biorreactor con los

nódulos, con los nódulos de mayor tamaño; se inoculó con el 30 % del volumen útil del
81
[105]
biorreactor como sugiere Rico Montesa y Rico para disminuir el tiempo de
residencia y mejorar tanto la producción de gas como la depuración del agua residual.
Se hizo la medición inicial y final del área de tres nódulos, los datos son
mostrados en la Tabla 19, además de determinar el volumen final de nódulos y hacer el
cálculo de los nódulos generados por m3 de agua tratada.
Tabla 19. Evaluación del proceso de nodulación
Área del nódulo (mm2) Inicial 10.1952 9.9093 13.3456

11.15003
Inicial
Área del nódulo (mm2) Final 10.5383 12.6252 19.8698

14.3444
Final
Volumen (L) de agua tratada 12.15
Volumen (m3) de agua tratada 0.01215
Volumen (L) de nódulos 3.95
Volumen (m3) de nódulos 0.00395
m3 de nódulos por m3 de agua tratada 0.3251
3.5.3. Evaluación final de parámetros
Pasados los 7 días de procesamiento del agua residual de lavado de fibra de alpaca,
se realizó el análisis de los mismos parámetros DQO, DBO, Aceites y Grasas y SST, en
el laboratorio control de calidad de la UCSM (Anexo 14); dando los resultados
mostrados en la Tabla 20; en los cuales se observa una aparente descendimiento en los
parámetros y colocándose por debajo de los VMA esto significa que el costo por el pago
82
de descarga de efluentes que tengan los valores por encima de los establecidos en el
D.S. Nº 021-2009-Vivienda [28] se eliminaría.
Tabla 20. Evaluación de los parámetros finales
Demanda Química de Oxigeno (DQO, mg/L) 871.0
Demanda Bioquímica de Oxigeno (DBO, ppm) 300.0
Sólidos Suspendidos Totales (SST, mg/L) 258.0
Aceites y Grasas (mg/L) 54.0
Para el cálculo del ahorro que tendrán las empresas procesadoras de fibra de
alpaca al depurar sus aguas residuales del proceso de lavado se hace conforme a la
metodología de la Resolución de consejo directivo N° 025-2011-SUNASS-CD [32].
Lo primero es definir los rangos de los parámetros según la Tabla 3, esto se hace
con los valores iniciales del agua residual; teniendo de esta forma que en el DQO el
valor de 3551, 59 mg/L se encuentra en el rango 4; para el DBO el valor de 1321.56
mg/L también se encuentra dentro del rango 4; para los SST el valor de 3250.16 mg/L
se encuentra en el rango 4 y finalmente el valor de aceites y grasas es de 750.3 mg/L se
encuentra también en el rango 4.
Luego de determinar el rango en el que se encuentren cada uno de los parámetros

se debe calcular el F; para esto se usa la ecuación dada por la misma resolución en la
que indica que se deben sumar los factores de ajuste por cada rango multiplicándose
con el valor de asignación porcentual para obtener el factor F; entonces en este caso se
hace la suma de los factores para cada parámetro en el Rango 4. Los factores de ajuste
se muestran en la Tabla 4.
83
Tabla 3. Definición de rangos de parámetros
Parámetros
Rango
DBO5 DQO SST AyG
VMA (mg/L) 500 1000 500 100
Rango 1 500,1 - 550 1000,1 - 1100 500,1 - 550 100,1 - 150
Rango 2 550,1 - 600 1100,1 - 1200 550,1 - 600 150,1 - 200
Rango 3 600,1 - 1000 1200,1 - 2500 600,1 - 1000 200,1 - 450
Rango 4 1000,1 - 104 2500,1 - 104 1000,1 - 104 450,1 - 103
Rango 5 Mayor a 104 Mayor a 104 Mayor a 104 Mayor a 104

Nota. Tomado de Resolución de Consejo Directivo Nº 025-2011-SUNASS-CD, 2011[32]
Tabla 4. Factores de ajuste por cada rango
Patrones individuales
Rango
F DBO5 F DQO F SST FAyG
TOTAL
Asignación
25% 35% 20% 20%
porcentual
Rango 1 6% 9% 5% 5% 25%
Rango 2 19% 26% 15% 15% 75%
Rango 3 25% 35% 20% 20% 100%
Rango 4 250% 350% 200% 200% 10 veces más
Rango 5 500% 700% 400% 400% 20 veces más

[32]
Nota. Tomado de Resolución de Consejo Directivo Nº 025-2011-SUNASS-CD, 2011
84
𝑭 = 𝐅 𝐃𝐁𝐎𝟓 + 𝐅 𝐃𝐐𝐎 + 𝐅 𝐒𝐒𝐓 + 𝐅 𝐀𝐲𝐆
(Ec. 16)
𝐹 = 250 % (25%) + 350 % (35%) + 200 % (20%) + 200 % (20%)
250 25 350 35 200 20 200 20

𝐹= ( )+ ( )+ ( )+ ( )
100 100 100 100 100 100 100 100
𝐹 = 0.625 + 1.225 + 0.4 + 0.4
𝑭 = 𝟐. 𝟔𝟓
El factor obtenido de 2.65 implicaría un incremento de pago por el servicio de

alcantarillado de un 265 % del pago normal que es realizado por la empresa; los
parámetros finales obtenidos están por debajo de los establecidos por la norma vigente
eliminando a 0 el costo adicional por el uso del servicio de alcantarillado.
La eficiencia del proceso se determinó hallando los porcentajes de remoción [3]

para cada uno de los parámetros; los resultados son mostrados en la Tabla 21; y en la
Fig. 36 se muestran las imágenes del biorreactor inicial y final.
Tabla 21. Evaluación del porcentaje de remoción
Parámetro Inicial Final % de Remoción
Demanda Química de Oxigeno (DQO, mg/L) 3551.59 871.0 75.48
Demanda Bioquímica de Oxigeno (DBO, ppm) 1321.56 300.0 77.30
Sólidos Suspendidos Totales (SST, mg/L) 3250.16 258.0 92.06
Aceites y Grasas (mg/L) 750.23 54.0 92.80

85
El proceso tiene una eficiencia bastante alta si bien estos valores podrían
disminuir más si se somete el efluente a otro tratamiento adicional que puede ser
aerobio; se muestra en la Fig. 36 el biorreactor inicial y el biorreactor pasados los 7 días
de operación.
Los porcentajes de remoción en el caso de DQO es de 75.48 % muestra relación

con el valor de 79 % encontrado por Kwarciak-Kozlowska et. al [34] y el 70 % también
[108] [34]
reportado en otras experimentaciones el DBO reportado es de 77 % igual al
porcentaje de remoción en esta experimentación en un tiempo de 6 días de
procesamiento; además de demostrar que si se reduce el tiempo de procesamiento
también se ve reducidos los porcentajes de remoción [34].
Se determinó que la depuración también se ve mejorada conforme con el tiempo

que va funcionando el biorreactor pudiendo alcanzar valores de remoción de un 80 %
[109, 110]
a 96 % [111].
A
B
Figura 36. Biorreactor UASB inicial y final.

A. Inicial. B. Final.
86
3.5.4. Evaluación de la producción de biogás.
En esta prueba final se midió la composición del biogás almacenado en el globo

de volumen 2.147 L, la composición de este biogás se determinó por el medidor de
gases MultitecR 540; en esta experimentación se obtuvo mayor contenido de CH4 en
comparación al proceso anterior esto se debe a que la cantidad de nódulos es mayor en
consecuencia existe mayor cantidad de bacterias lo que hace que la degradación se haga
completamente y generen mayor porcentaje de CH4, los resultados se detallan en la
Tabla 22.
El proceso generó en volumen un total de 648.6340 mL CH4 que en

correspondencia al DQO removido se obtiene que se produjo 0.24 m3/Kg DQOremovido
en condiciones ideales se debería generar 0.38 m3/Kg DQOremovido este cálculo se hizo
a partir de la ecuación de los gases y la correspondencia de 64 g DQO corresponde a
una mol de CH4.
Tabla 22. Evaluación de la producción de biogás
Volumen de biogás (L) 2.267
CH4 (%) 30.2
CO2 (%) 11
O2 (%) 4.8
H2S (ppm) 74
La producción de 240 mL/ g DQOremovido después de 7 días de procesamiento tiene

relación con lo mostrado en un trabajo donde en 5 días se produce 233 mL/ g
DQOremovido [105]; Elmitwalli [112] reporta 0.21 m3/Kg DQOremovido.
En el inicio de la operación de los biorreactores el porcentaje de metano dentro

del biogás en los primeros seis días de operación es de 17 % [91] en la experimentación
realizada alcanzó el 30.2 % demostrando una eficiencia en la producción de CH4.
87
Capítulo IV: Conclusiones y Recomendaciones
4.1. Conclusiones
 Se aisló dos cepas nativas del agua residual de lavado de fibra de alpaca las
cuales tienen la capacidad de producir biogás y de depurar el agua residual;
fueron identificadas molecularmente siendo las cepas Lysinibacillus sp. y
Lysinibacillus varians.
 El biorreactor UASB fue diseñado de forma rectangular obteniendo un volumen

efectivo de 12.15 L, un área de la base de 0.0225 m2, con una altura efectiva de
0.54 m. La campana GLS tiene un área de 0.0169 m2.
 Se determinó que el uso de Ca+2 en concentración de 200 mg/L mejora el

proceso de formación de nódulos; los nódulos generados en la experimentación
que no se adicionó Ca+2 tienen un área promedio de 0.1978 mm2; mientras que
se obtuvo un área promedio de 8.1838 mm2 en la experimentación en la
88
presencia de Ca+2. En la prueba final los nódulos bacterianos alcanzaron un área

promedio de 14.3444 mm2.
 Luego de las diferentes experimentaciones y análisis de parámetros se pudo

concluir que el tiempo de residencia hidráulica (TRH) en el cual se depuraría el
agua residual hasta alcanzar los VMA es de 7 días en un proceso de
recirculación del agua. Se operó el biorreactor a una temperatura de 35 ºC y con
una velocidad ascensional de 0.43 m/h.
 Se obtuvo un porcentaje de remoción de 75.48 para el valor de DQO, en el valor

de DBO se tiene 77.30 % de remoción, un valor de 92.06 % de remoción para
SST y para el parámetro de aceites y grasas de logro un 92.80 % de remoción.
Los valores de todos los parámetros después del tratamiento se encontraron por
debajo de lo establecido en el decreto supremo. La producción de biogás
durante el proceso se ve mejorada por el volumen de nódulos dentro del
biorreactor; se produjo 0.24 m3 CH4/Kg DQOremovido.
4.2.Recomendaciones
 Se debe buscar conocer el volumen de nódulos necesario para realizar la

depuración del agua residual de lavado de fibra en menor tiempo.
 Realizar un post-tratamiento con la finalidad de disminuir el valor de los

parámetros.
 Estudiar la factibilidad de usar estos nódulos bacterianos para el tratamiento de

otros tipos de aguas residuales.
89
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aguas residuales no domésticas en el sistema de alcantarillado sanitario así
como de su Reglamento, aprobado mediante Decreto Supremo N° 003-2011
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99
Anexos
Anexo 1. Plano de Ubicación Planta de Procesamiento de Lavado de Fibra de Alpaca

100
Anexo 2. Caldo Tioglicolato.
Fundamento: El medio tiene sus aportes nutritivos en el extracto de levadura, la

glucosa da el aporte energético, la salinidad en el medio está dada por el cloruro de
sodio, mientras que el tioglicolato de sodio y la L-Cistina permiten el desarrollo de
bacterias anaerobias. Se observa que las bacterias aerobias estrictas crecen en la parte
superior, en cambio las anaerobias facultativas o las anaerobias estrictas crecen en el
fondo del medio [113].
Composición:
Tripteína 17.0 g
Peptona de soya 3.0 g
Glucosa 6.0 g
Cloruro de sodio 2.5 g
Tioglicolato de sodio 0.5 g
Agar 0.7 g
L-Cisteína 0.25 g
Sulfito de sodio 0.1 g
Preparación:
Suspender 28 g por litro de agua destilada, agitar, calentar hasta ebullición y dejar
hervir por al menos 1 minuto. Distribuir en tubos y proceder a esterilizar el medio en el
autoclave a 121 ºC, 1.5 atm por 15 minutos.
Interpretación de resultados:
Microorganismos aerobio estrictos: crecen en la parte superior del medio.

Microorganismos anaerobios facultativos: crecen en todo el medio.
Microorganismos anaerobios estrictos: crecen en el fondo del medio.
101
Anexo 3. Agar Sangre.
Fundamento: Este medio tiene alto valor nutritivo dado por la infusión de
músculo de corazón y la peptona. Permite el desarrollo de gran variedad de
microorganismo. El agregar sangre al medio de cultivo en 5 – 10 % aporta nutrientes
para el crecimiento bacteriano [114].
Composición:
Infusión de músculo de corazón 375.0 g

Peptona 10.0 g
Cloruro de sodio 5.0 g
Agar 15.0 g
Preparación:
Suspender 40 g por litro de agua destilada, agitar, calentar hasta ebullición y dejar
hervir por al menos 1 minuto. Esterilizar el medio en el autoclave a 121 ºC, 1.5 atm por
15 minutos. Dejar enfriar hasta 45 – 50 ºC y agregar sangre al 5 %, homogenizar y
distribuir en placas estériles.
102
Anexo 4. Panel fotográfico de tinción de Gram
Efluente 1 Efluente 2
Sedimentador 1 Sedimentador 2
Lodo 1 Lodo 2
103
Anexo 5. Panel fotográfico de producción de biogás, evidenciado con la ruptura de

agar
Efluente 1 Efluente 2 Sedimentador 1
Sedimentador 2 Lodo 1 Lodo 2

104
Anexo 6. Tabla de datos para la elaboración de curvas de crecimiento para la cepa Efluente 1.
N° de muestra Día Hora Tiempo Peso vacío Peso lleno Masa Conteo celular Disolución Nº de bacterias Log (N° de Bacterias)
1 12-Abr 8:00 p.m. 1 0.9357 0.9493 0.0136 104 1 5200000 6.7160
2 13-Abr 8:00 a.m. 12 0.9955 1.035 0.0395 123 1 6150000 6.7889
3 13-Abr 8:00 p.m. 24 0.9779 1.0233 0.0454 146 1 7300000 6.8633
4 14-Abr 8:00 a.m. 36 0.9261 0.9913 0.0652 165 1 8250000 6.9165
5 14-Abr 8:00 p.m. 48 0.9774 1.0671 0.0897 179 1 8950000 6.9518
6 15-Abr 8:00 a.m. 60 0.9445 1.0533 0.1088 202 1 10100000 7.0043
7 15-Abr 8:00 p.m. 72 0.926 1.0699 0.1439 236 1 11800000 7.0719
8 16-Abr 8:00 a.m. 84 0.9486 1.1359 0.1873 258 1 12900000 7.1106
9 16-Abr 8:00 p.m. 96 0.95 1.1426 0.1926 276 1 13800000 7.1399
10 17-Abr 8:00 a.m. 108 0.9533 1.1576 0.2043 293 1 14650000 7.1658
11 17-Abr 8:00 p.m. 120 0.9265 1.1476 0.2211 311 1 15550000 7.1917
12 18-Abr 8:00 a.m. 132 0.422 0.6553 0.2333 327 1 16350000 7.2135
13 18-Abr 8:00 p.m. 144 0.977 1.223 0.246 329 1 16450000 7.2162
14 19-Abr 8:00 a.m. 156 0.941 1.1988 0.2578 332 1 16600000 7.2201
15 19-Abr 8:00 p.m. 168 0.957 1.2146 0.2576 335 1 16750000 7.2240
16 20-Abr 8:00 a.m. 180 0.9695 1.2276 0.2581 336 1 16800000 7.2253
17 20-Abr 8:00 p.m. 192 0.9401 1.1979 0.2578 334 1 16700000 7.2227
18 21-Abr 8:00 a.m. 204 0.9834 1.2397 0.2563 330 1 16500000 7.2175
19 21-Abr 8:00 p.m. 216 0.9784 1.2323 0.2539 327 1 16350000 7.2135
20 22-Abr 8:00 a.m. 228 0.9432 1.1934 0.2502 325 1 16250000 7.2109
21 22-Abr 9:00 a.m. 240 0.9258 1.1767 0.2509 324 1 16200000 7.2095
105
Anexo 7. Tabla de datos para la elaboración de curvas de crecimiento para la cepa Lodo 2.
N° de muestra Día Hora Tiempo Peso vacío Peso lleno Masa Conteo celular Disolución Nº de bacterias log (N° de bacterias)
1 27-Abr 8:00 p.m. 1 0.9357 0.9593 0.0236 30 1 1500000 6.1761
2 28-Abr 8:00 a.m. 12 0.9955 1.0351 0.0396 96 1 4800000 6.6812
3 28-Abr 8:00 p.m. 24 0.9779 1.0233 0.0454 121 1 6050000 6.7818
4 29-Abr 8:00 a.m. 36 0.9261 0.9733 0.0472 151 1 7550000 6.8779
5 29-Abr 8:00 p.m. 48 0.9774 1.0771 0.0997 212 1 10600000 7.0253
6 30-Abr 8:00 a.m. 60 0.9445 1.0523 0.1078 226 1 11300000 7.0531
7 30-Abr 8:00 p.m. 72 0.926 1.0849 0.1589 256 1 12800000 7.1072
8 1-May 8:00 a.m. 84 0.9486 1.1475 0.1989 267 1 13350000 7.1255
9 1-May 8:00 p.m. 96 0.95 1.1996 0.2496 289 1 14450000 7.1599
10 2-May 8:00 a.m. 108 0.9533 1.2246 0.2713 301 1 15050000 7.1775
11 2-May 8:00 p.m. 120 0.9265 1.2676 0.3411 345 1 17250000 7.2368
12 3-May 8:00 a.m. 132 0.9422 1.2902 0.348 34 10 17000000 7.2304
13 3-May 8:00 p.m. 144 0.977 1.346 0.369 38 10 19000000 7.2788
14 4-May 8:00 a.m. 156 0.941 1.3388 0.3978 39 10 19500000 7.2900
15 4-May 8:00 p.m. 168 0.957 1.3837 0.4267 42 10 21000000 7.3222
16 5-May 8:00 a.m. 180 0.9695 1.424 0.4545 45 10 22500000 7.3522
17 5-May 8:00 p.m. 192 0.9401 1.4193 0.4792 47 10 23500000 7.3711
18 6-May 8:00 a.m. 204 0.9401 1.4266 0.4865 45 10 22500000 7.3522
19 6-May 8:00 p.m. 216 0.9834 1.4823 0.4989 50 10 25000000 7.3979
20 7-May 8:00 a.m. 228 0.9784 1.4813 0.5029 52 10 26000000 7.4150
21 7-May 8:00 p.m. 240 0.9432 1.4556 0.5124 55 10 27500000 7.4393
106
Anexo 8. Plano del cuerpo del biorreactor UASB.
Las medidas del biorreactor se muestran en la tabla a continuación:
BIOREACTOR
UASB UNIDADES
EXPERIMENTAL
MEDIDA DE LA BASE 150 mm
150 mm
0.15 m
0.15 m
MEDIDA DE CARA 600 mm
150 mm
0.6 m
0.15 m
ALTURA EFECTIVA 540 mm
0.54 m
ÁREA DE LA BASE 0.0225 m2
VOLUMEN 0.0135 m3
13.5000 L
VOLUMEN EFECTIVO 0.0122 m3
12.1500 L
Para la determinación de la altura efectiva se restó el 10 % de la altura total.

107
.24
.60
.25
.05
Escala
Biorrector UASB 1/5

108
Cámara GLS
Deflectores
.24
.60 Deflectores
.25
.05
Escala
Vista lateral y frontal

Biorrector UASB 1/5
109
CAMPANA GLS
Escala
1/5
Tapas del Biorreactor UASB
110
Anexo 9. Cálculos para el diseño de campana y deflectores
Para este diseño se fue hallando parte por parte de la campana según se muestra en
la Fig. 5.
Velocidad de flujo en la campana (Vc):
𝑽𝑪 = 𝟒 × 𝑽𝒂
(Ec.1)
Donde:
Va: velocidad ascensional (m/h)  0.4 m/h
𝑉𝐶 = 4 × 𝑉𝑎
𝑉𝐶 = 4 × 0.4 𝑚/ℎ
𝐦
𝑽𝑪 = 𝟏. 𝟔
𝐡
Caudal ideal en el biorreactor (Q):
Para determinar el caudal ideal del biorreactor se hizo a partir de la velocidad

ascensional (Va).
𝑸
𝑽𝒂 =
𝐀
(Ec.12)
Donde:
Va: velocidad ascensional (m/h)  0.4 m/h
Q: caudal en el biorreactor (m3/h)
A: área seccional transversal del biorreactor (m2)  0.0225 m2
𝑄
𝑉𝑎 =
A
111
𝑉𝑎 × A = Q
m
Q = 0.4 × 0.0225 𝑚2
h
𝒎𝟑
𝐐 = 𝟎. 𝟎𝟎𝟗
𝒉
Área de abertura de la campana (Aabertura):
𝑸
𝑨𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂 =
𝑽𝑪
(Ec.2)
Donde:
Q: caudal en el biorreactor (m3/h)  0.009 m3/h
Vc: velocidad de flujo en la campana (m/h)  1.6 m/h
𝑄
𝑉𝐶
m3
0.009
𝐴𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 = h
m
1.6
h
𝑨𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂 = 𝟎. 𝟎𝟎𝟓𝟔 𝐦𝟐
Área de la campana (Acampana):
𝑨𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂 = 𝑨𝑹 − 𝑨𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂
(Ec.3)
Donde:
AR: área del biorreactor (m2)  0.0225 m2
112
Aabertura: área de abertura de la campana (m2)  0.0056 m2
𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 = 𝐴𝑅 − 𝐴𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎
𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎 = 0.0225 𝑚2 − 0.0056 m2
𝑨𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂 = 𝟎. 𝟎𝟏𝟔𝟗 𝒎𝟐
Radio de la campana (Rcampana):
√𝑨𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂
𝑹𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂 =
𝟐
(Ec.4)
Donde:
Acampana: área de la campana (m2)  0.0169 m2
√𝐴𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎
2
√0.0169 𝑚2
2
0.13 m
2
𝑹𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂 = 𝟎. 𝟎𝟔𝟓𝟎 𝐦
Ancho de la abertura (Wabertura):
𝑾𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂 = 𝑹𝒓 − 𝑹𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂
(Ec.5)
Donde:
113
Rr: radio del biorreactor (m)  0.075 m

Rcampana: radio de la campana (m)  0. 0650 m
𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 = 𝑅𝑟 − 𝑅𝑐𝑎𝑚𝑝𝑎𝑛𝑎
𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 = 0.075 m − 0.0650 m
𝑾𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂 = 𝟎. 𝟎𝟏𝟎 𝐦
Altura del tubo de salida (WG):
𝟏
𝑾𝑮 = 𝑹𝒄𝒂𝒎𝒑𝒂𝒏𝒂 − (𝑾𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂 )
𝟐
(Ec.6)
Donde:
Rcampana: radio de la campana (m)  0. 0650 m
Wabertura: ancho de la abertura (m)  0.010 m
1
1
𝑊𝐺 = 0.0650 m − (0.010 m)
2
𝑊𝐺 = 0.0650 m − 0.005 m
𝑾𝑮 = 𝟎. 𝟎𝟔𝟎𝟎 𝐦
Altura de la campana (HG):
𝑯𝑮 = 𝑾𝑮 𝒕𝒂𝒏 ∝
(Ec.7)
Donde:
114
WG: altura del tubo de salida (m)  0.0600 m

α: ángulo de la apertura de la campana  50º
𝐻𝐺 = 𝑊𝐺 𝑡𝑎𝑛 ∝
𝐻𝐺 = 0.0600 (tan 50)
𝐻𝐺 = 0.0600 m (1.1918)
𝑯𝑮 = 𝟎. 𝟎𝟕𝟏𝟓 𝐦
Valor del traslapo en los deflectores (TV):
𝑻𝑽 = 𝟏. 𝟓(𝑾𝒂𝒃𝒆𝒓𝒕𝒖𝒓𝒂 )
(Ec. 8)
Donde:
TV: traslapo (m)
𝑇𝑉 = 1.5(𝑊𝑎𝑏𝑒𝑟𝑡𝑢𝑟𝑎 )
𝑇𝑉 = 1.5(0.0100 m)
𝑻𝑽 = 𝟎. 𝟎𝟏𝟓𝟎 𝐦
Ancho de los deflectores (WD):
(Ec.9)
Donde:
TV: traslapo (m)  0.0150 m
115
𝑊𝐷 = 0.0150 m + 0.0100 m
𝑾𝑫 = 𝟎. 𝟎𝟐𝟓𝟎 𝐦
Longitud de los deflectores (LD):
𝑳𝑫 = 𝟐𝑾𝑫 𝒕𝒂𝒏𝟒𝟓°
(Ec.10)
Donde:
LD: Longitud de los deflectores (m)
WD: ancho de los deflectores (m)  0.0250 m
𝑳𝑫 = 𝟐𝑾𝑫 𝒕𝒂𝒏𝟒𝟓°
𝐿𝐷 = 2(0.0250m)𝑡𝑎𝑛45°
𝐿𝐷 = 2(0.0250m)(1)
𝐿𝐷 = 2(0.0250m)
𝑳𝑫 = 𝟎. 𝟎𝟓𝟎𝟎 𝐦
116
Anexo 10. Plano de deflectores y campana
.13
.07
.13 .13
.15
.025
.05
0.5
Escala
Campana GLS y deflectores 1/5

del Biorreactor UASB
117
Anexo 11. Tablas de datos de medición de área de nódulos con imágenes.
Experimento 1
Tiempo Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3 Promedio

(días)
Área del nódulo Área del nódulo Área del nódulo Área del nódulo
(mm2) (mm2) (mm2) (mm2)
1 0.0017 0.0020 0.0022 0.0020
2 0.0027 0.0028 0.0032 0.0029
3 0.0022 0.0029 0.0025 0.0025
4 0.0027 0.0035 0.0038 0.0033
5 0.0028 0.0047 0.0046 0.0040
6 0.0036 0.0043 0.0033 0.0037
7 0.0036 0.0049 0.0055 0.0047
8 0.0045 0.0063 0.0063 0.0057
9 0.0046 0.0065 0.0072 0.0061
10 0.0068 0.0070 0.0079 0.0072
11 0.0083 0.0133 0.0170 0.0129

118
12 0.0077 0.0083 0.0112 0.0091
13 0.0172 0.0209 0.0087 0.0156
14 0.0235 0.0095 0.0236 0.0189
15 0.0192 0.0238 0.0239 0.0223
16 0.0200 0.0140 0.0338 0.0226
17 0.0239 0.0275 0.0366 0.0293
18 0.0381 0.0343 0.0269 0.0331
19 0.0252 0.0452 0.0428 0.0377
20 0.0288 0.0392 0.0548 0.0409
21 0.0574 0.0579 0.0612 0.0588
22 0.0571 0.1001 0.1087 0.0886
23 0.1037 0.1244 0.1752 0.1344
24 0.1043 0.2461 0.2034 0.1846
25 0.1649 0.2532 0.2506 0.2229

119
Experimento 2
Tiempo Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3 Promedio

(días)
Área del nódulo Área del nódulo Área del nódulo Área del nódulo
(mm2) (mm2) (mm2) (mm2)
1 0.0092 0.0183 0.0093

0.0123
2 0.0685 0.1422 0.0575

0.0894
3 0.1509 0.1119 0.1517

0.1382
4 0.2492 0.1564 0.2219

0.2092
5 0.4978 0.3132 0.3390

0.3833
6 0.2855 0.5617 0.7279

0.5250
7 0.8520 1.5631 1.2125

1.2092
8 1.5631 1.8221 2.5853

1.9902
9 0.8520 1.1627 2.8937

1.6361
10 0.9772 3.1178 3.4384

2.5111
11 3.1927 3.6926 3.8573

3.5809
120
12 3.2885 3.7730 4.5468

3.8694
13 4.9613 4.0345 4.5138

4.5032
14 5.0764 5.0189 5.0987

5.0647
15 5.1146 5.3291 5.5506

5.3314
16 5.2202 5.7139 5.3853

5.4398
17 6.2641 6.0852 6.3812

6.2435
18 6.0433 6.2758 6.7823

6.3671
19 6.1461 6.3067 7.0489

6.5006
20 6.2108 7.1659 6.7698

6.7155
21 6.4902 6.9718 7.5039

6.9886
22 6.6411 7.7929 7.3370

7.2570
23 6.6761 7.9198 8.2564

7.6174
24 7.5525 9.0113 8.4210

8.3283
25 8.1468 10.5383 9.6712

9.4521
121
Anexo 12. Parámetros iniciales y finales de las Experimentaciones 1 y 2.
Experimentación 1
Parámetro Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3
Inicial Final Inicial Final Inicial Final
pH. 7 7 6 7 7 7
Salinidad 2.6 1.2 2.2 0.7 1.7 0.6
SDT 1997 987 1478 563 1308 543
SST (mg/L) 3768 1608 3676 1576 3482 1560
Volumen del Gas (mL) 0 2 0 1 0 1
Experimentación 2
Parámetro Repetición 1 Repetición 2 Repetición 3
Inicial Final Inicial Final Inicial Final
pH. 7 7 6 7 7 7
Salinidad 2.1 0.1 1.6 0.1 2.6 0.1
SDT 1394 205 1325 204 1965 207
SST (mg/L) 3527 838 3503 804 3687 856
Volumen del Gas (mL) 0 8.5 0 10 0 9

122
Anexo 13. Tablas de datos de parámetros
Tiempo (días) Conductividad (s/cm) Salinidad Solidos Disueltos Totales (mg/L) Solidos Suspendidos Totales (SST) (mg/L)
R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
0 4600 4590 3060 2.7 2.7 1.7 1996 1997 1366 0 R3 1.4
1 3856 3934 2754 2.3 2.3 1.4 1694 1695 1295 3516 3423 3014
2 3321 3278 2425 1.9 1.9 1.2 1451 1427 1254 2872 2768 2613
3 2786 2010 2000 1.4 1 1 1296 899 895 2054 1992 1873
4 2010 1977 1946 1 1 0.9 897 883 868 1350 1237 1189
5 1944 1873 1826 1 0.9 0.9 873 832 810 718 694 673
6 1811 1782 1770 0.9 0.8 0.8 805 797 790 512 506 495
7 1762 1686 1663 0.8 0.8 0.8 783 726 741 478 487 476
8 1602 1577 1555 0.7 0.7 0.7 711 706 696 482 475 461
9 1532 1511 1209 0.7 0.6 0.5 681 658 541 464 461 458
123
10 1213 1198 1170 0.5 0.5 0.4 542 536 505 444 456 411
11 1164 1149 1144 0.4 0.4 0.4 517 514 512 400 403 396
12 1134 1128 1121 0.4 0.4 0.4 503 504 505 384 389 369
13 1115 1112 1093 0.4 0.4 0.4 499 499 489 368 365 358
14 1088 1022 1003 0.4 0.3 0.3 489 454 446 356 350 347
15 995 983 967 0.3 0.3 0.3 442 439 430 338 342 310
16 959 948 940 0.3 0.3 0.3 428 425 416 304 301 295
17 932 911 813 0.3 0.3 0.2 415 406 361 290 293 254
18 811 804 794 0.2 0.2 0.2 361 360 356 242 249 225
19 783 696 672 0.2 0.1 0.1 351 306 298 204 203 199
20 673 660 592 0.1 0.1 0.1 305 293 263 190 193 184
124
Anexo 14. Resultados muestras control de calidad UCSM

125

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Universidad Católica de Santa María

Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Bioquímicas y Biotecnológicas.

Escuela Profesional de Ingeniería Biotecnológica

“DISEÑO Y EVALUACIÓN DE UN BIORREACTOR UASB PARA

Tesis Presentada por el Bachiller:

A Dios por ser mi fuerza; a mis Padres y a mi

A mis Padres. Guadalupe y Edgar; por ser el pilar de mi vida y demostrarme

A la Universidad Católica Santa María. En especial a mi Escuela Profesional de

Al Dr. Fredy Molina y a la Ing. Cinthia. Por su tiempo, sugerencias y apoyo en la

Figura 1. Diagrama de flujo del procesamiento de fibra de alpaca. ............................... 4

Tabla 1. Relación de impurezas totales presentes en la fibra. ......................................... 2

Anexo 1. Plano de Ubicación Planta de Procesamiento de Lavado de Fibra de Alpaca

UASB: Up Flow Anaerobic Sludge Blanket – Reactor de manto de lodos de flujo

VMA: Valores Máximos Admisibles.

TRH: Tiempo de Residencia Hidráulica.

DQO: Demanda Química de Oxígeno.

DBO: Demanda Bioquímica de Oxígeno.

SST: Sólidos Suspendidos Totales.

Campana GLS: Campana separadora trifásica Gas-Líquido-Sólido.

AGVs: Ácidos Grasos Volátiles.

VC: Velocidad de flujo en la campana.

Va: Velocidad ascensional.

Aabertura: Área de la abertura.

AR: Área del biorreactor.

ACampana: Área de la campana.

RCampana: Radio de la campana.

Rr: Radio del reactor.

Wabertura: Ancho de la abertura.

WG: Altura del tubo de salida.

HG: Altura de la campana

WD: Ancho de los deflectores.

ECP: Polímeros extracelulares

En esta investigación se buscó diseñar y evaluar el funcionamiento de un biorreactor

Biorreactor UASB, depuración de agua residual, nodulación, biogás.

UASB bioreactor, wastewater treatment, nodulation, biogas.

Cualquiera que sea la forma de hacer la depuración, al ser un tratamiento biológico

Para mejorar la eficiencia del biorreactor UASB es necesario disminuir el tiempo de

Además de presentar gran eficiencia en la depuración de aguas residuales, el

Diseñar y evaluar un biorreactor UASB para depurar biológicamente aguas

1. Aislar e identificar bacterias nativas del agua residual del procesamiento de

2. Diseñar y construir un biorreactor UASB.

3. Evaluar el proceso de nodulación en el biorreactor UASB.

4. Determinar los parámetros de funcionamiento del biorreactor UASB a nivel

5. Evaluar la eficiencia del proceso de remoción de contaminación y la

Dado que la biomasa mantenida en fermentadores anaerobios permite la depuración

Capítulo I: Marco Teórico

1.1 Planta de Procesamiento de Lavado de Fibra de Alpaca.

La planta de procesamiento de fibra de alpaca, se encuentra ubicada en la

En esta planta se realiza el tratamiento de la materia prima que incluye el lavado

1.1.2. Proceso de lavado de fibra de alpaca.

El proceso de lavado de la fibra de alpaca tiene como objetivo el eliminar las

Impurezas encontradas en la fibra.

Las impurezas de la fibra de alpaca incluyen grasas, suint, impurezas inorgánicas,

Tabla 1. Relación de impurezas totales presentes en la fibra.

Secreciones como: sudor o suint y Siempre están presentes en todos los

Naturales Acreciones: fibras negras kemps y Impurezas características o por

Excreciones: estiércol y orina. Siempre están presentes.