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Informe Bioquímica I

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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERÍA

ACCIÓN DE INHIBIDORES ENZIMÁTICOS EN LA CADENA


RESPIRATORIA

ASIGNATURA: Bioquímica

DOCENTE: Dr. William B. Ruiz Chang

AUTORES:
- Carrión Vega, Arleth
- Contreras Holguín, Isabel
- Jara Aguirre, Yulissa
- Pascual Luis, Yanixsa

TRUJILLO-PERÚ

2023
I. INTRODUCCIÓN
La cadena transportadora de electrones es un proceso que se produce
en la membrana interna mitocondrial, que mediante reacciones
bioquímicas de la Fosforilación Oxidativa producen adenosín trifosfato
(ATP), que es el compuesto energético que utilizan los seres vivos
mediante reacciones de óxido-reducción. Las fuentes de energía como la
glucosa son inicialmente metabolizados en el citoplasma y los productos
obtenidos son llevados a la matriz mitocondrial donde continua el
metabolismo en el ciclo de Krebs. Los electrones se transportan desde
moléculas poco oxidantes como el NADH Y FADH2 hasta el oxígeno.
Una vez que los electrones son entregados al oxígeno, se forma agua.
Debido a que la cadena sólo transporta electrones, los protones son
bombeados hacia el espacio entre las membranas, lo que crea un
gradiente de protones con una carga muy positiva fuera de la matriz y
una carga muy negativa adentro. Este gradiente obliga a los protones a
volver a entrar a la mitocondria por una enzima llamada ATP sintasa que,
con la fuerza de entrada de los protones, forma ATP y agua metabólica.
Los inhibidores de la respiración son sustancias que inhiben el transporte
de electrones en la cadena respiratoria, y de acuerdo al lugar donde
actúan pueden reunirse en cuatro grupos principales; aquellos que
bloquean el paso de electrones a nivel del complejo I (NADH-
deshidrogenasa) como los barbitúricos, piericidina A (antibiótico), rotenona
(insecticida); los que bloquean el complejo II (Succinato-deshidrogenasa),
el malonato; los bloqueadores del complejo III (citocromo b y c1) como la
antimicina y los que impiden el paso de electrones del complejo IV
(Citocromo-oxidasa) con el oxígeno, como el cianuro, monóxido de
carbono. Existen otros compuestos denominados desacopladores de la
fosforilación oxidativa. Con el desacoplamiento aumentan las velocidades
de oxidación mientras que la fosforilación disminuye, quiere decir que
disminuye la producción de ATP, lo cual da como resultado la producción
de calor extra que puede manifestarse en forma de calor, afectando de
forma indirecta a muchos procesos celulares como el transporte de iones y
la permeabilidad de la membrana. Los agentes desacopladores aumentan
la permeabilidad de las membranas mitocondriales internas frente a los
protones. Entre los desacopladores se cuentan el 2,4-dinitrofenol, la
termogenina, entre otros.
II. PROCEDIMIENTO

1. Sacrifique un cobayo y separe el hígado colocándolo en un vaso de


precipitación con solución salina a 0ºC y córtelo en trozos pequeños.
2. Coloque los trozos de hígado en un mortero conteniendo aproximadamente 1
gramo de arena y 5 mL de buffer fosfato pH 7,0. Homogenícelo hasta obtener
una pasta fina y vuelva a agregar 5 mL del mismo buffer.
3. Centrifugue el homogenizado a 4000 rpm por 5 minutos, luego separe el
sobrenadante y consérvelo en un tubo de ensayo sumergido en hielo. Rotúlelo
como HH (homogenizado de hígado).

Arme el siguiente esquema de trabajo:

Tubo II III IV V
Homogenizado de Hígado (HH) mL 1 1 1 1 1
Succinato de sodio (mL) 1 - 1 1 1
Malonato de sodio (mL) - - 1 - -
Cianuro de potasio (mL) - - - 1 -
Bicloruro de mercurio (mL) - - - - 1
Azul de metileno (mL) 1 1 1 1 1
Agua destilada (mL) 1 2 - - -

4. Agitar los tubos y añadir 0,5 mL de aceite mineral suavemente por las paredes
de cada tubo.
5. Incubar a 37°C durante 30 minutos.
6. Observar e interpretar los resultados obtenidos.

III. RESULTADO
IV. DISCUSIÓN

V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

CUESTIONARIO
1) ¿Cuál es la estructura de la cadena respiratoria y explique su funcionamiento?

2) ¿Explique el fundamento de la Teoría quimiosmótica de Mitchel?

3) Fundamente porque se usó el succinato de sodio en la práctica.

4) Explique los mecanismos de inhibición que ejercen el malonato, bicloruro de mercurio y cianuro.
5) ¿Explique el funcionamiento de la fosforilación oxidativa y cómo actúan los desacopladores?

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