UNIVERSIDAD NACIONAL DE FRONTERA

FACULTAD DE INGENIERÍA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

Y BIOTECNOLOGÌA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN

BIOTECNOLOGÌA

“EXTRACCIÓN DE ADN”

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO N°09

AUTORES:

● Calle Castillo Marjhy

● Calle Gómez Silvana
● Chunga Castro Daniela
● Domínguez Villegas Iris
● Godos Barrientos Marco

ASIGNATURA:
Bioquímica General

DOCENTE:
M.Sc. Andrés Amador Berrios Zevallos

SULLANA - PERÚ

2024
 RESUMEN

La extracción de ADN (ácido desoxirribonucleico) es una técnica esencial en biología molecular para
aislar y purificar material genético de las células, fundamental en investigaciones genéticas y
aplicaciones biotecnológicas. Las fresas se utilizan comúnmente en demostraciones de extracción de
ADN debido a su alto contenido de ADN y facilidad de manejo. Esta práctica no solo tiene un valor
educativo en laboratorios de biología, sino que también introduce técnicas más complejas de
investigación genética. Comprender estos principios básicos es crucial para avanzar en estudios de
genética y biotecnología, así como en aplicaciones como la identificación de organismos genéticamente
modificados, estudios de biodiversidad y desarrollo de tecnologías biomédicas.

El proceso de extracción de ADN incluye varios pasos críticos. Primero, se rompe la membrana
plasmática y la nuclear para liberar el ADN, protegiéndolo de enzimas que podrían degradarlo. La lisis
celular se logra mediante tampones con altas concentraciones de iones y detergentes como SDS
(Dodecil Sulfato Sódico) para eliminar las membranas. Las proteasas y el acetato (amónico o sódico) se
añaden para precipitar proteínas asociadas al ADN.

El ADN, insoluble en alcohol, se precipita con etanol frío o isopropanol y se recupera mediante
centrifugación. El sedimento resultante se re-suspende en agua o tampón después de secarse
completamente. La presencia de ADN se confirma mediante electroforesis en gel de agarosa, teñido
con Gel Red o Midori Green y observación con luz UV. También se puede detectar con un
espectrofotómetro mediante el espectro de absorción de 200 a 350 nm, cuantificando el ADN midiendo
la absorbancia a 260 nm de longitud de onda o utilizando un Nanodrop.
 INTRODUCCIÓN

La extracción de ADN (ácido desoxirribonucleico) es una técnica fundamental en biología molecular

que permite aislar y purificar el material genético de las células. Este proceso es esencial para

diversas aplicaciones científicas, desde la investigación genética hasta la biotecnología. En este

contexto, las fresas se utilizan comúnmente como una muestra ideal para demostraciones de

extracción de ADN debido a su alto contenido de ADN y su fácil manejo.

La extracción de ADN de fresas no solo es una práctica educativa en laboratorios de biología, sino

que también sirve como una introducción accesible a técnicas más complejas en la investigación

genética. La comprensión de estos principios básicos es crucial para avanzar en estudios más

detallados de la genética y la biotecnología, y para aplicaciones prácticas como la identificación de

organismos genéticamente modificados, estudios de biodiversidad y el desarrollo de nuevas

tecnologías biomédicas.

El proceso de extracción de pigmentos celulares generalmente implica varios pasos que aseguran la

liberación y purificación de los pigmentos de las estructuras celulares. En primer lugar, las células

deben ser disgregadas para liberar los pigmentos contenidos en los orgánulos, como los cloroplastos

en las plantas. Luego, se utilizan solventes específicos para solubilizar los pigmentos. Por ejemplo, el

etanol, la acetona y el metanol son solventes comunes para la extracción de clorofila y carotenoides,

mientras que soluciones ácidas pueden usarse para extraer antocianinas.

 FUNDAMENTO TEÓRICO CIENTÍFICO

2.1. Bases Teóricas

El ácido desoxirribonucleico (ADN) es una molécula compleja que contiene la información

genética necesaria para el desarrollo, funcionamiento y reproducción de todos los organismos
vivos. El ADN se encuentra en el núcleo de las células eucariotas y en el citoplasma de las células
procariotas. Está compuesto por dos cadenas de nucleótidos que forman una doble hélice, y cada
nucleótido está compuesto por un grupo fosfato, un azúcar desoxirribosa y una base nitrogenada
(adenina, timina, citosina o guanina).

Importancia de la Extracción de ADN

La extracción de ADN es un proceso fundamental en biología molecular y genética, ya que
permite la obtención de material genético para diversos estudios y aplicaciones, tales como:

Identificación genética.
Investigación de enfermedades genéticas.
Ingeniería genética y biotecnología.
Estudios evolutivos y de biodiversidad.
Principios de la Extracción de ADN
La extracción de ADN implica la ruptura de las células y la liberación del ADN contenido en el
núcleo o citoplasma. Los principales pasos involucrados en la extracción de ADN incluyen:

Lisis Celular:

Objetivo: Romper las membranas celulares para liberar el contenido celular, incluyendo el ADN.
Métodos: Uso de detergentes o soluciones salinas que desintegran las membranas lipídicas.
Eliminación de Proteínas y Otros Componentes Celulares:

Objetivo: Separar el ADN de otras biomoléculas, como proteínas, lípidos y carbohidratos.

Métodos: Uso de proteasas para degradar proteínas o soluciones salinas para precipitar proteínas y
otros componentes.

2.2 Bases Conceptuales

El ADN (ácido desoxirribonucleico) es una macromolécula compuesta por dos cadenas de

nucleótidos que forman una doble hélice.
Cada nucleótido consta de tres componentes: un grupo fosfato, una molécula de azúcar
desoxirribosa y una base nitrogenada (adenina, timina, citosina o guanina).
Las bases nitrogenadas se aparean de manera específica: adenina con timina y citosina con
guanina, unidas por enlaces de hidrógeno.
Función del ADN:
El ADN contiene la información genética necesaria para el desarrollo, funcionamiento y
reproducción de los organismos vivos.
Codifica las instrucciones para la síntesis de proteínas, que son esenciales para la estructura y
función celular.
Principios de la Extracción de ADN
Lisis Celular:
La lisis celular implica la ruptura de las membranas celulares y nucleares para liberar el ADN en
una solución.
Las membranas celulares están compuestas principalmente de lípidos y proteínas, que se pueden
 descomponer utilizando detergentes y soluciones salinas.
Separación de Componentes Celulares:

Una vez que las células se rompen, es necesario separar el ADN de otras moléculas celulares,
como proteínas, lípidos y carbohidratos.
Esto se logra mediante la utilización de detergentes que solubilizan los lípidos y la precipitación de
proteínas con soluciones salinas

PROBLEMA

3.1. Planteamiento del problema

El ADN (ácido desoxirribonucleico) es la molécula que contiene la información genética de los

seres vivos. Entender y manipular el ADN es fundamental en biología molecular, genética,
biotecnología y numerosas aplicaciones biomédicas. La extracción de ADN es el primer paso
crucial en muchas de estas áreas de estudio. Aunque existen métodos avanzados y complejos para
la extracción de ADN, es posible realizar este proceso utilizando materiales domésticos y técnicas
sencillas, lo que facilita la enseñanza y comprensión de conceptos genéticos básicos.

La formulación de este problema es crucial para desarrollar un método de enseñanza práctico que
permita a los estudiantes comprender conceptos fundamentales de la genética y biología molecular.
Al abordar este problema, se busca no solo facilitar el aprendizaje a través de la experiencia
práctica, sino también demostrar la omnipresencia y accesibilidad del estudio del ADN en los
organismos vivos. Esto puede inspirar a los estudiantes y educadores a explorar más en
profundidad el campo de la biología.

3.2. Formulación del problema

¿Cuál es el procedimiento paso a paso más eficaz para la extracción de ADN de fresas, garantizando la

integridad y visibilidad del ADN extraído?

4.1. Objetivo General

Identificar y describir la molécula de ADN y sus propiedades físico-químicas.

4.2. Objetivos específicos

 Realizar la extracción de ADN vegetal y reflexionar sobre la simpleza de su

composición con sencillas técnicas.

 Observar la estructura fibrilar del ADN.

 Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades químico - físicas

del ADN.
 III. METODOLOGÍA Y MATERIALES

5.1. Metodología

5.1.1. Método/procedimiento

Extracción del ADN de fresas

1) Trocear las fresas e introducirlas en una bolsa plástica con dos cucharadas de
agua y un poco de sal. Cerrar la bolsa.

Observación: Trocea las fresas en pequeños pedazos e introdúcelas en una bolsa de plástico con cierre.
Añade dos cucharadas de agua y una pizca de sal a la bolsa.
Cierra la bolsa asegurándote de que no quede aire dentro.

2) Amasar la bolsa con ambas manos hasta obtener una papilla de fresas.

Observación: Amasa la bolsa con ambas manos durante unos minutos hasta obtener una papilla
homogénea de fresas.

3) Colar la papilla con el filtro de café sobre un vaso de precipitado.

Observación: Coloca un filtro de café sobre un vaso de precipitados.

Vierte la papilla de fresas a través del filtro para separar el líquido de los sólidos. Recoge el líquido
filtrado en el vaso de precipitados.

4) Añadir 1 cucharada de detergente al filtrado y remover suavemente 30 segundos.

Observación: Añade una cucharada de detergente líquido al filtrado en el vaso de precipitados.

Remueve suavemente la mezcla durante 30 segundos, evitando formar espuma.

5) Dejar reposar 10 minutos la mezcla.

Observación: Deja reposar la mezcla durante 10 minutos para permitir que el detergente rompa las
membranas celulares y libere el ADN.

6) Añadir alcohol de 96° con mucho cuidado, dejándolo resbalar por las paredes
para que forme una capa sobre el filtrado. Dejar reposar 10 minutos. Éste crea una
capa por encima del agua, de tal forma que el ADN es capaz de flotar entre las dos
capas.

Observación: Añade alcohol de 96° frío con mucho cuidado, dejándolo resbalar por las paredes del
vaso de precipitados para formar una capa sobre el filtrado.
Deja reposar la mezcla durante 10 minutos. El alcohol creará una capa por encima del filtrado,
permitiendo que el ADN flote entre las dos capas.
7) En caso de que el ADN de la muestra vegetal no se pueda apreciar muy
claramente. Tenemos que agitar el tubo un poco para poderlo apreciarlo mejor.

Observación: Si el ADN no se puede apreciar claramente, agita suavemente el tubo o el vaso pequeño
para facilitar la observación.

8) Deberíamos obtener algo así, como un copo de algodón mojado.

Observación: Deberías observar algo parecido a un copo de algodón mojado flotando entre las capas
de alcohol y agua. Este es el ADN extraído de las fresas.

Extracción del ADN de pimiento verde

1)Cortar el pimiento en trocitos.

Observación: Cortar el pimiento verde en trocitos pequeños.

2) Colocar los trozos en el vaso de la batidora.

Observación: Colocar los trozos de pimiento en el vaso de la batidora.

3) Agregar una cucharadita de sal.

Observación: Agregar una cucharadita de sal y medio vaso de agua.

4) Añadir medio vaso de agua y batir la mezcla, debe quedarte una masa un
poco espesa.
Observación: Batir la mezcla hasta obtener una masa un poco espesa.

5) Pasar la papilla por el filtro de café y recoger el jugo en un vaso de

precipitado transparente.

Observación: Pasar la papilla de pimiento a través de un filtro de café para separar el jugo de los
sólidos.

6) Agregar dos cucharadas de lavavajillas y una de zumo de piña.

Observación: Agregar dos cucharadas de lavavajillas y una cucharada de zumo de piña al jugo filtrado.

7) Lentamente con una cuchara mezclar todo el contenido del vaso.

Observación: Mezclar lentamente todo el contenido del vaso con una cuchara, asegurándose de
hacerlo suavemente para evitar la formación de espuma.
8) Esperar 10 minutos.

Observación: Dejar reposar la mezcla durante 10 minutos

9) Lentamente agregar alcohol al vaso. Se debe agregar aproximadamente la

misma cantidad de lo que se tiene ya en el vaso. ¡Muy Importante!!! Este
paso es clave para poder tener ADN al final, se debe agregar el alcohol
cuidadosamente, y se observarán dos fases o capas... hacerlo muy
despacito.

Observación: Agregar lentamente alcohol de 96° frío al vaso, utilizando aproximadamente la misma
cantidad de alcohol que de jugo filtrado.
Verter el alcohol con mucho cuidado, dejándolo resbalar por las paredes del vaso para formar dos fases
o capas. Este paso es clave para la correcta precipitación del ADN.

10)Deberíamos obtener algo así, como un copo de algodón mojado.

Observación: Deberías observar algo parecido a un copo de algodón mojado flotando entre las capas
de alcohol y jugo. Este es el ADN extraído del pimiento verde.

5.2. Materiales

● 5.2.1 Equipos

● Batidora o licuadora: Para triturar las fresas y obtener una papilla homogénea.

● Centrifugadora (opcional): Para acelerar la precipitación del ADN durante el

proceso de extracción.

● Vasos de precipitados: Para mezclar y contener las soluciones durante la

extracción.

● Tubos de ensayo: Para contener las muestras de fresas trituradas y las soluciones
de extracción.

● Pipetas: Para medir con precisión volúmenes pequeños de líquidos, como

detergentes y alcohol.

● Microcentrífugas (opcional): Para centrifugar pequeñas cantidades de muestra y

precipitar el ADN.
 ● 5.2.2 Instrumentos

Batidora o Licuadora: Utilizada para triturar las fresas y obtener una papilla homogénea, facilitando la
liberación del ADN de las células vegetales.

Centrifugadora: Opcionalmente, se puede utilizar para acelerar la precipitación del ADN durante el
proceso de extracción, separando el precipitado de la solución.

Microcentrífuga: Similar a la centrifugadora, pero diseñada para centrifugar pequeños volúmenes de

muestras en tubos de ensayo, acelerando la separación del ADN precipitado.

Pipetas: Se utilizan para medir con precisión volúmenes pequeños de líquidos, como detergentes,
soluciones de sal y alcohol, durante las diferentes etapas del proceso de extracción.

Tubos de Ensayo: Para contener las muestras de fresas trituradas y las soluciones de extracción.
También se pueden utilizar tubos eppendorf o microtubos para volúmenes más pequeños de muestra.

Vasos de Precipitados: Utilizados para mezclar y contener las soluciones durante la extracción,
especialmente cuando se requiere un volumen mayor de muestra.

Espátulas o Palillos de Madera: Para manipular las muestras durante el proceso de extracción,
facilitando la transferencia de materiales y la mezcla de soluciones.

Filtros de Café o Gasa: Utilizados para filtrar la papilla de fresas y separar los sólidos de los líquidos,
permitiendo recuperar el líquido que contiene el ADN liberado.

IV. RESULTADOS
El éxito de la práctica se evidencia en la aparición de los filamentos de ADN en la interfase de las capas de
alcohol y el filtrado. La visibilidad de estos filamentos confirma que el procedimiento de extracción fue efectivo
y que las células de las fresas fueron adecuadamente lisadas para liberar el ADN. La adición de detergente ayudó
a romper las membranas celulares y nucleares, mientras que el alcohol permitió la precipitación del ADN, que es
insoluble en alcohol frío.

Esta práctica demuestra de manera tangible la presencia de ADN en los tejidos vegetales y proporciona una
comprensión visual de la extracción de material genético, siendo una excelente herramienta educativa para
ilustrar conceptos básicos de biología molecular.

El ADN extraído se presenta como filamentos blancos y finos que flotan en la interfase entre las capas de alcohol
y filtrado.

Estos filamentos pueden parecerse a un copo de algodón mojado, siendo visibles a simple vista.

Al agitar suavemente el tubo o el vaso, estos filamentos se agrupan más claramente, facilitando su observación y
recolección.

6.1. Organización del procedimiento de la práctica “Extracción de ADN”

Figura 1.

6.2. “Extracción de ADN”

 Instrumento Equipo Función

Batidora o Licuadora: Utilizada para triturar las fresas y obtener una papilla homogénea, facilitando la

liberación del ADN de las células vegetales.

Centrifugadora: Opcionalmente, se puede utilizar para acelerar la precipitación del ADN durante el proceso de

extracción, separando el precipitado de la solución.

Microcentrífuga: Similar a la centrifugadora, pero diseñada para centrifugar pequeños volúmenes de muestras

en tubos de ensayo, acelerando la separación del ADN precipitado.

Pipetas: Se utilizan para medir con precisión volúmenes pequeños de líquidos, como detergentes, soluciones de

sal y alcohol, durante las diferentes etapas del proceso de extracción.

Tubos de Ensayo: Para contener las muestras de fresas trituradas y las soluciones de extracción. También se

pueden utilizar tubos eppendorf o microtubos para volúmenes más pequeños de muestra.

Vasos de Precipitados: Utilizados para mezclar y contener las soluciones durante la extracción, especialmente

cuando se requiere un volumen mayor de muestra.

Espátulas o Palillos de Madera: Para manipular las muestras durante el proceso de extracción, facilitando la

transferencia de materiales y la mezcla de soluciones.

Filtros de Café o Gasa: Utilizados para filtrar la papilla de fresas y separar los sólidos de los líquidos,

permitiendo recuperar el líquido que contiene el ADN liberado.

V. ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS

1. Visualización del ADN

Observación directa: Después de añadir el alcohol frío, ¿se observaron filamentos blancos o copos de aspecto

algodonoso en la interfase entre las capas de alcohol y la solución acuosa? Esto indica la presencia de ADN

precipitado.
2. Cantidad y Calidad del ADN

Volumen y visibilidad: ¿Qué cantidad de ADN se pudo recuperar? ¿Fue visible y fácil de recolectar?

Pureza: ¿El ADN recuperado tenía un color blanco claro y una apariencia limpia, indicando poca contaminación

con proteínas u otros contaminantes?

3. Efectividad del Procedimiento

Eficiencia de lisis celular: ¿Se logró una buena ruptura de las células para liberar el ADN? Esto se puede evaluar

por la visibilidad del ADN y la cantidad obtenida.

Precipitación: ¿El alcohol frío precipitó eficazmente el ADN? ¿Hubo una separación clara entre la capa de ADN

y la solución acuosa?

4. Reproducibilidad

Consistencia de los resultados: ¿Se obtuvieron resultados similares en diferentes intentos del experimento? Esto

indica la reproducibilidad del método.

Variabilidad: ¿Hubo alguna variabilidad significativa en la cantidad o calidad del ADN entre diferentes muestras

de fresas?

5. Aplicación y Interpretación

Uso educativo: ¿El experimento fue efectivo para enseñar los principios básicos de la extracción de ADN a los

estudiantes?

Aplicaciones potenciales: ¿Cómo podrían aplicarse estos resultados en investigaciones genéticas o

biotecnológicas prácticas?

VI. CONCLUSIONES

Este procedimiento sencillo y eficaz permite observar el ADN de manera tangible. La extracción de
ADN de fresas no solo es una herramienta educativa valiosa para ilustrar conceptos genéticos, sino que
también sienta las bases para comprender técnicas más avanzadas en biología molecular y
biotecnología.

Un análisis completo de los resultados de la extracción de ADN en fresas permite evaluar la efectividad
del procedimiento, la calidad y cantidad del ADN obtenido, y la reproducibilidad del método. Estos
aspectos son fundamentales para comprender y aplicar los principios de biología molecular en un
entorno educativo y más allá, explorando las posibles aplicaciones prácticas de la técnica en la
investigación científica.

La extracción de ADN de fresas utilizando materiales comunes y métodos sencillos proporciona una
forma accesible de entender y visualizar la presencia de ADN en los organismos vivos. Este
procedimiento es una herramienta educativa valiosa para enseñar conceptos de biología molecular y
genética, demostrando cómo se puede obtener y manipular ADN con técnicas básicas.

La extracción de ADN de fresas utilizando métodos simples y accesibles permite a los estudiantes y
educadores visualizar y comprender de manera tangible la presencia de ADN en los organismos vivos.
Este procedimiento no solo facilita el aprendizaje práctico de conceptos genéticos básicos, sino que
también demuestra la versatilidad de los métodos de biología molecular aplicados en entornos
educativos.

VII. RECOMENDACIONES

Preparación de Materiales: Asegúrate de contar con todos los materiales necesarios antes de comenzar,
incluyendo fresas frescas, detergentes, alcohol, y herramientas de laboratorio como vasos de
precipitados y filtros de café.

Manipulación de Muestras: Trocea las fresas en pedazos pequeños y uniformes para facilitar la ruptura
celular durante la maceración. Mantén las muestras frescas y evita que se sequen antes de la extracción.

Lisis Celular Efectiva: Asegúrate de que el detergente utilizado sea suficiente para romper las
membranas celulares y nucleares, permitiendo la liberación completa del ADN.

Control de Contaminantes: Evita la contaminación del ADN con proteínas y otros contaminantes.
Controla la manipulación de las muestras y sigue estrictamente los pasos de precipitación con alcohol
frío.

Visualización y Documentación: Documenta adecuadamente el proceso y los resultados obtenidos,

incluyendo la observación visual del ADN precipitado. Puedes tomar fotografías para registrar los
resultados de manera clara.

IX. CUESTIONARIO

1. ¿Qué es un jabón?

El jabón generalmente es el resultado de la reacción química entre un álcali (generalmente

hidróxido de sodio o de potasio) y algún ácido graso; esta reacción se denomina

saponificación.

El ácido graso puede ser, por ejemplo, la manteca de cerdo o el aceite de coco. El jabón es

soluble en agua y, por sus propiedades detersivas, sirve comúnmente para lavar.

Por su estructura, el jabón posee doble afinidad hacia la polaridad de otras moléculas y puede

orientarse según el medio en el que se encuentre. Cuenta con 2 extremos, como una batería

(polos). En la figura siguiente se muestra

2. ¿Cuál es la función de los jabones?

Los jabones limpian debido a las afinidades diferentes de los extremos de sus moléculas. La

suciedad grasa no se elimina fácilmente sólo con agua, que la repele por ser insoluble en ella.

Sin embargo, el jabón posee una cadena larga alifática o hidrocarbonada sin carga que
interactúa con la grasa, disolviéndose, mientras que la región con carga se orienta hacia el

exterior, formando gotas. Una vez que la superficie de la gota grasa está cubierta por muchas

moléculas de jabón, se forma una micela con una pequeña gota de grasa en el interior. Esta

gota de grasa se dispersa fácilmente en el agua, ya que está cubierta por las cabezas con carga

o aniones carboxilato del jabón

3. ¿Cuáles son los jabones naturales de nuestro organismo y en qué

procesos intervienen?

No son tal cual jabones, pero si nos ayudan a remover grasa en nuestro
organismo, funcionan de manera similar que los jabones. Crean micelas y
arrastran las grasas con su cola (cadena lipofílica)

4. ¿Qué es emulsificar?
Emulsionar es el proceso de mezclar dos líquidos que son difíciles de mezclar. El enfoque
principal de emulsionar es la dispersión de la fase discontinua en gotitas preferentemente
finas

5. ¿Qué diferencia hay entre la saponificación y la hidrólisis

enzimática de un triacilglicerol?
La saponificación es un proceso de unión de los ácidos grasos y el glicerol, y la hidrólisis del triglicérido rinde el
licerol y los ácidos grasos

X. REFERENCIA

Ácido desoxirribonucleico (ADN). (s/f). Genome.gov. Recuperado el 11 de julio de 2024, de

https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/%C3%81cido-desoxirribonucleico

El ADN de las fresas. (s/f). Iciq.es. Recuperado el 11 de julio de 2024, de

http://labvirtual.iciq.es/es/expcas/ladn-de-les-maduixes/

Gómez Ochoa de Alda, J., Esteban Gallego, R., & Marcos-Merino, J. M. (2019). Extracción de

ADN con material cotidiano: diseño, implementación y validación de una intervención

activa interdisciplinar. Educación química, 30(1), 42.

https://doi.org/10.22201/fq.18708404e.2019.1.67658

ANEXO
Introducimos 2 fresas a la bolsa ziplock y procedemos a molerlas (acción mecánica) durante 5 minutos

Mientras tanto en un vaso verter agua hasta la mitad, agregando 2 cucharaditas de detergente líquido y 1

cucharada de sal, luego mezclamos el contenido.