Microbiología.

Concepto.
"Ciencia que estudia los microorganismos, bacterias, hongos, protistas y parásitos u
otros agentes como virus, viroides y priones".

Laboratorio de microbiología
En el Laboratorio de Microbiología se realiza el estudio de los microorganismos, de
acuerdo con estándares técnicos y de bioseguridad, para identificar el agente
etiológico de una infección y determinar la susceptibilidad a determinados agentes
antimicrobianos.

Toma de muestras
● El material recolectado debe ser representativo del proceso infeccioso
investigado.
● La recolección y el transporte inadecuados pueden provocar fallas en el
aislamiento del agente etiológico y favorecer el desarrollo de flora
contaminante

Claves para el área

1- Tomar la muestra antes de la terapia con antibióticos, de ser posible.
2- Informar claramente al paciente sobre el procedimiento
3- Observar la antisepsia de todos los materiales clínicos
4- Se debe colectar una cantidad suficiente de material para permitir un análisis
microbiológico completo.
5- La solicitud del examen debe contener, además de la identificación del paciente,
la enfermedad subyacente y la indicación del uso de antibióticos.

Criterios de rechazo
A- Discrepancia entre la identificación de la muestra y la orden médica
B- Falta de identificación de la muestra
C- Origen de la muestra o tipo de la muestra no identificada
D- No especificación de examen a ser realizado
E- Material almacenado incorrectamente en relación a la temperatura
F- Presencia de fugas, frascos rotos o destapados, contaminados en la superficie
exterior

Sistema básico de embalaje para el transporte de muestras biológicas

Se compone de:

● Recipiente primario: a prueba de filtraciones, etiquetado, que contiene la

muestra. El recipiente debe envolverse en material absorbente.
 ● Recipiente secundario: a prueba de filtraciones, que encierra y protege el
recipiente primario. Se pueden colocar varios recipientes primarios envueltos
en un recipiente secundario. Se debe usar suficiente material absorbente
para proteger a todos los recipientes primarios y evitar choques entre ellos.

● Recipiente externo de envío: El recipiente secundario se coloca en un

paquete de envío que protege al recipiente secundario y su contenido de los
elementos externos, tales como daño físico y agua, mientras se encuentra en
tránsito.

Errores generales del área

● Antisepsia: 1. Del material
2. De la zona
3. Higiene
● Muestra contaminada
● Rotulado e identificación
● Temperatura de conserva
● Tiempo de transporte
● Modo de transporte

Espermocultivo
¿Qué es?
Se trata de una prueba en la que el semen se pone en contacto (siembra) con unos
medios selectivos y no selectivos que favorecen el crecimiento de las bacterias. Si
se observa crecimiento bacteriano, diremos que el cultivo seminal ha sido positivo y
se procederá a la identificación del microorganismo. También se estudiará la
sensibilidad de dicha bacteria a diferentes antibióticos (antibiograma).

Utilidad diagnostica
Contribuye al diagnóstico de infecciones de las glándulas accesorias masculinas:
próstata, vesículas seminales, conductos deferentes, epidídimo y testículos. Las
infecciones en estos sitios pueden causar inflamaciones de tipo obstructivo,
disfunciones secretoras, adherencias de microorganismos a espermatozoides y
hasta desarrollo de anticuerpos anti-espermatozoides. Por lo que es un estudio de
utilidad de la infertilidad y esterilidad del varón. Los gérmenes a estudiar son: -
Enterobacterias - Haemophilus sp. - Neisseria gonorroheae - Streptococcus sp. -
Levaduras (Candida sp.)
Toma de muestra. Instrucciones. Indicaciones
●Deben ser claras y si es posible por escrito, debemos detallar
1. Lugar de recogida
2. Forma de recoger la muestra
3. Contenedor de recogida
4. Medidas higiénicas
5. Abstinencia
6. Tiempo de recogida-entrega laboratorio
7. Normas de transporte al laboratorio, si se recoge en casa
8. Medicación

• Mantener abstinencia sexual entre 3 y 5 días.

• Evitar el uso de cremas, pomadas, aceites, lubricantes.

• Es preferible realizar la toma de muestra antes del inicio del tratamiento antibiótico,
salvo indicación médica. En caso de encontrarse en tratamiento, por favor,
comunique al Laboratorio la medicación ingerida.

• Realizar una estricta higiene genital antes de la recogida de la muestra para evitar
su contaminación, lavándose las manos y el pene con jabón, retrayendo el prepucio
e higienizando el glande y el surco balanoprepucial. Enjuagar con abundante agua,
secar con una toalla limpia.

• La muestra será obtenida por medio de masturbación, en un frasco estéril. No la

recoja en preservativos y recolecte todo el volumen emitido.

•Orinar antes de recolectar la muestra

• En caso de que también le soliciten urocultivo de primer chorro, recolecte primero

la muestra de orina, siguiendo las indicaciones correspondientes y luego proceda a
la recolección de la muestra de esperma.

• Remita la muestra al laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de las 2 horas de

su recolección.

Errores comunes
●Toma de la muestra
●Abstinencia
●Tiempo de transporte casa-laboratorio
●Higiene del paciente
●Cantidad de muestra
●Transporte
Coproparasitológico
¿Qué es?
Es un examen de laboratorio para encontrar organismos en las heces (materia fecal)
que puedan causar enfermedad y síntomas gastrointestinales.
Las parasitosis intestinales se encuentran ampliamente distribuidas en el mundo,
con mayor prevalencia en los países en desarrollo. Principalmente afectan a los
niños, en los que provocan disminución del desarrollo físico y mental, situación que
puede agravarse cuando se suma a un estado nutricional deficiente.

Utilidad diagnóstica
Útil para el diagnóstico de infecciones parasitarias intestinales, que al analizar
aspectos macroscópicos y microscópicos podemos identificar algún problema a
nivel intestinal causado por parásitos intestinales.

Indicaciones para el paciente

•Se le brindará un frasco con formol al 5% y bajalenguas para recolectar las
muestras.

•Si el paciente se realizó estudios radiológicos ingiriendo líquido de contraste,

esperará 3 días para comenzar la recolección.

•Dieta
SI: Pan blanco, papas, fideos, fiambres poco grasos, carnes, huevos, quesos,
bananas, manzanas, ciruelas, naranjas, duraznos, peras (todas las frutas sin
cascara ni semillas), caldos colados, agua, gaseosas, café, mate, té, leche.

NO:Frutas con cáscara, verduras, hojas verdes, legumbres.

•Durante 7 días consecutivos, recolecta con el bajalenguas una pequeña fracción

(tamaño poroto/uña) de materia fecal **Se recomienda el uso de pelela** y colocarla
en el frasco con formol.

•La cantidad de materia fecal no debe ser mayor a la mitad del formol, la misma
debe estar completamente sumergida en el líquido.

•En caso de no poder evacuar diariamente, serán más días de almanaque, pero
siempre 7 días de recolección.

•En caso de evacuar más de una vez por día, se toma una muestra de cada
evacuación y se cuenta como un día
•A partir de la primera recolección, conservar el frasco en un lugar fresco, lejos del
sol.

•Al terminar la recolección, remitirse al laboratorio con el frasco rotulado (nombre y

apellido de usted). Cerciorarse de que el frasco esté bien cerrado.

Rechazo de la muestra
1. Sin rotular o mal rotulada
2. Que presente evidencia de haber sido derramada
3. Recipiente o contenedor incorrecto
4. Con la presencia de: orina, agua, hongos o cualquier otro agente químico, físico
y/o biológico
5. Cantidad inadecuada
6. Identificadas con ingestión previa de: antibióticos, antiparasitarios, bario, bismuto,
hierro o magnesio
7. Dieta no respetada

Errores comunes
● Dieta
● Recolección, lugar de recolección, tamaño de muestra
● Rótulo

Cultivo de Líquido Cefalorraquídeo

¿Qué es?
El cultivo y la observación microscópica del LCR sirven como diagnóstico del
microorganismo causante de la infección, también para monitorear la terapia.
Se realiza para buscar bacterias, hongos y virus en el líquido que circula en el
espacio alrededor de la médula espinal.

Utilidad diagnóstica
Agentes etiológicos más frecuentes:
Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae por Streptococcus pneumoniae.

Otros: Streptococcus agalactiae , (Estreptococo Beta hemolítico grupo B), Listeria

monocytógenes, Escherichia coli, Klebsiella spp, Enterobacter spp, Salmonella spp,
Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus.
Indicaciones, toma de la muestra.
Usted no necesita hacer nada para prepararse para la punción lumbar. Es posible
que se le pida confirmar que le han explicado el procedimiento y que usted
comprende los riesgos. Si usted es alérgico a medicamentos anestésicos, tales
como la lidocaína, o a agentes de limpieza, tales como Betadina, deberá aclararselo
a su médico.

•Una punción lumbar usualmente toma de 10 a 15 minutos.

Se le pedirá al paciente que se recueste sobre su costado con las rodillas en el
pecho que se siente e inclinarse hacia delante. Ambas posiciones hacen que la
espalda se arquee, lo cual abre el espacio entre los huesos de la columna,
facilitando así el procedimiento.

•Se requieren unos cuantos minutos para preparar la charola para el procedimiento.
Se le pedirá al paciente que se mantenga tan inmóvil como sea posible para
permanecer en la posición deseada.

•Se realizará la antisepsia de la espalda con un antiséptico y después se cubrirán

con paños estériles y/o campo quirúrgico.

•Se inyectará una anestesia antes de insertar la aguja para la punción. Esto
usualmente ocasionará una breve sensación de ardor.

•La aguja lumbar será insertada sobre la columna en la parte inferior de la espalda.
Se requerirán de 2 a 3 minutos para recolectar la cantidad de frascos (de 2 a 4) de
líquido cefalorraquídeo.

•Posteriormente se retira la aguja espinal y se coloca una venda sobre el sitio de

punción.

•Las muestras se remitirán inmediatamente hacia el servicio correspondiente, no así

pudiendo pasar más de 1 hora para el transporte y su debido procesamiento.

•Al laboratorio de microbiología se le suele llevar el frasco con líquido

cefalorraquídeo de aspecto más turbio.

Procesamiento de las muestras

En el estudio bacteriológico se determina el microorganismo coexistente (bacterias u
hongos, sobre todo).

En el estudio citológico: el líquido se centrifuga y se hace un botón que, por lo

general, se tiñe con hematoxilina y eosina,Papanicolau, Giemsa y White. Es
importante conservar el líquido cefalorraquídeo a 4 °C en refrigeración y hasta su
procesamiento, no fijar en formol porque degrada a las células. La temperatura baja
produce lisis y acelera el catabolismo de las células y las destruye.

Existen distintas pruebas de laboratorio para la identificación de agentes

microbiológicos, unas de detección rápida útiles para un diagnóstico inicial y otras
más tardías para un diagnóstico definitivo. Sin lugar a dudas, de todas las pruebas
que se pueden realizar en el LCR, las microbiológicas son las que tienen mayor
importancia.

Tinción de Gram: es una técnica de identificación rápida que bien realizada es

positiva en el 75–90 % de los casos. Según la morfología y el resultado de la tinción,
se puede identificar al agente etiológico. Podemos encontrar cocos gramnegativos
(meningococo), cocos grampositivos (neumococo y estafilococo), bacilos
gramnegativos (Haemophilus influenzae), bacilos grampositivos (Listeria), etc.
Otras tinciones: tinta china para la infección por criptococos, tinción de
Ziehl-Neelsen para micobacteria.

Determinación de antígenos bacterianos: técnicas rápidas de aglutinación o

aglutinación de látex. Estas técnicas permiten la detección de antígenos bacterianos
solubles en el LCR. No son diagnósticas y tienen un alto coste por lo que es dudosa
la relación coste-beneficio.

Estudios con reacción en cadena de la polimerasa (PCR): útiles para infecciones

víricas.

Serologías: estudio de anticuerpos en el LCR como en la infección por Borrelia y

VDRL para el diagnóstico de sífilis (pero puede ser negativa / no reactiva hasta en el
50 % de los casos.

Medios de cultivo e incubación. (PARA MENINGITIS BACTERIANAS AGUDAS

FRECUENTES EN NIÑOS Y ADULTOS)
Debido al tipo de bacterias implicadas en la etiología de la meningitis, para el cultivo
deben emplearse medios enriquecidos, como el agar sangre y el agar chocolate.
Las muestras NO deben ser refrigeradas, hay que tener en cuenta que el transporte
dene ser inmediato ya que existe el riesgo de lisar al microorganismo coexistente.
Además, en función de los datos aportados por el médico peticionario sobre la
muestra y el enfermo, se realizarán procedimientos adicionales si se consideran
necesarios. Las placas se incubarán a 35º-37ºC en aire y en atmósfera enriquecida
con 5% de CO2. En aquellos LCR con recuentos celulares muy elevados puede ser
útil inocular un mililitro del mismo en una botella de hemocultivo que se introducirá
en el sistema automatizado que disponga el laboratorio.
Las placas serán revisadas diariamente, manteniéndose la incubación durante 3-4
días.
Errores comunes
•Rótulo
•Tiempo de transporte/procesamiento
•Antisepsia
•No trabajar en un lugar apropiado para el manejo de muestras microbiologicas
•Agentes de contaminación externos

Urocultivo
¿Qué es?
El urocultivo es una prueba de laboratorio que analiza una muestra de orina para
detectar la presencia de microorganismos infecciosos, principalmente bacterias y
hongos, que indican una infección urinaria. El urocultivo permite identificar el tipo y
el número de microorganismos causantes de la infección.

Utilidad diagnóstica
Es una prueba que sirve para analizar y diagnosticar infección sintomática del tracto
urinario o infección asintomática (bacteriuria asintomática) en pacientes con riesgo
de infecciones.

Toma de muestra / indicaciones

Se debe indicar al paciente la correcta forma de recolección y transporte de la
muestra que debe tener un mínimo de 3 horas de retención.
Previo a la recolección se deben higienizar los genitales con agua y jabón y secar
con toalla limpia, en el caso de las mujeres se recomienda usar un tampon vaginal
al momento de la recolección de la muestra para evitar la mezcla de fluidos.
Para la recolección se debe descartar el primer “chorro” (10 ml aproximadamente) y
orinar dentro del frasco esteril la siguiente fracción de orina (mayor a 20 ml).
Para el traslado y conservación de las muestras para Urocultivo deben refrigerarse a
- 4-8° (en heladera) si el tiempo transcurrido del lugar de recolección al laboratorio
es mayor a 30 minutos se debe transportar en un contenedor con hielo.

Errores comunes
Higiene
Conservación de la muestra
Toma de muestra incorrecta (no descartar la primer fracción de orina)
Tiempo de retención
No utilizar un frasco esteril
Hemocultivo
¿Qué es?
Es una prueba para donde la sangre obtenida se coloca en un medio de cultivo
adecuado que se incuba para observar si hay crecimiento de microorganismos.

Utilidad Diagnóstica
El hemocultivo es una técnica utilizada para la detección de agentes patógenos en
el torrente sanguíneo como por ejemplo la bacteriemia, fungemia o septicemia.

Toma de muestra / indicaciones

En la orden médica debe venir especificada la cantidad de muestras que se
necesitan y el periodo de toma de las mismas.
Dichas muestras se solicitan antes de comenzar con el tratamiento antibiótico por lo
cual es importante acudir cuanto antes a la recolección de la muestra cuando el
médico lo indique.
La muestra puede ser de sangre venosa o arterial.
Si la orden pide extraer la muestra en el pico febril es imprescindible acudir para
realizar la extracción en ese momento.
Se debe desinfectar la zona de punción y extraer la sangre sin volver a palpar la
zona que se esterilizó, siempre se debe desinfectar previamente el tapón por donde
se introduce la sangre al frasco, al momento de transferir la sangre de la jeringa al
tubo asegurarse de que no quede aire (dejando un volumen de sangre dentro de la
jeringa)

Errores Comunes
No realizar una adecuada antisepsia de la piel antes de la punción
No utilizar frascos estériles para la recolección
Tomar antibióticos antes de la extracción de la muestra.
Coprocultivo
¿Qué es?
El coprocultivo es un examen de laboratorio para encontrar organismos en las heces
que puedan causar enfermedad y síntomas gastrointestinales. se realiza un cultivo
de las heces en un medio específico de cada bacteria

Utilidad Diagnóstica
Su objetivo es identificar organismos causantes de enfermedades gastrointestinales,
puede ayudar a diagnosticar enfermedades como la salmonelosis, infección por E
coli, etc.

Toma de muestra / indicaciones

No ingerir antibióticos antes de la recolección de la muestra y si ya los está tomando
suspender el tratamiento con un mínimo de 48 horas previo a la recolección.
Higienizar la zona para prevenir la contaminación con otras bacterias.
Evitar que la materia fecal se contamine con orina, papel higiénico o cualquier otra
cosa ajena a las heces.
Defecar en un recipiente limpio, seco y desinfectado.
Recoger una muestra de las heces (aproximadamente del tamaño de una nuez) en
un frasco esteril que debe estar rotulado con el nombre y apellido del paciente
además de la fecha y hora en que fue recolectada la muestra.
Entregar la muestra al laboratorio lo antes posible, con un máximo de dos horas

Errores Comunes
No higienizar
No usar un recipiente esteril
No entregar la muestra al laboratorio en el tiempo y condiciones indicadas
Tomar antibióticos
Tamaño de la muestra
No rotular o mal rótulo
Conclusión
A modo de conclusión, nos gustaría detallar el concepto más importante de todo el
trabajo, el "error".

El error se define como la diferencia entre el valor verdadero y el obtenido

experimentalmente.
Los errores no siguen una ley determinada y su origen está en múltiples causas.

Los errores se pueden clasificar en dos grandes grupos: errores sistemáticos y

errores accidentales o aleatorios, u de negligencia.

Errores sistémicos: En este tipo de error, el valor medido está sesgado debido a una
causa específica

Errores aleatorios: Este tipo de error es causado por circunstancias aleatorias

durante el proceso de medición.

Errores de negligencia: De estos se desglosan diferentes ejemplos de errores.

Algunos errores de Laboratorio:
─Errores instrumentales (de aparatos); por ejemplo, el error de calibrado de los
instrumentos.
─Error personal: Este es, en general, difícil de determinar y es debido a las
limitaciones de carácter personal. Como, por ejemplo, los errores de paralaje, o los
problemas de tipo visual.
─Errores de método de medida, que corresponden a una elección inadecuada del
método de medida; lo que incluye tres posibilidades distintas: la inadecuación del
aparato de medida, del observador o del método de medida propiamente dicho.

Seguidamente, concluimos en que los errores más comunes son:

●El rotulado/identificación de la muestra
●Recolección de muestra
●Dieta/ayuno/cumplimiento de restricciones específicas
●Transporte: tiempo y forma
Bibliografía
https://www.labmoreira.com/examenes-clinicos/index.asp?ESPERMOCULTIVO.-ES
PC#:~:text=ESTUDIO%20ESPERMOCULTIVO.-,ESPERMOCULTIVO.,conductos%
20deferentes%2C%20epid%C3%ADdimo%20y%20test%C3%ADculos.

https://www.institutobernabeu.com/es/foro/cultivo-seminal-espermocultivo/

Clase 31
Líquido Cefalorraquídeo
Procesos LAB II
Prof Pedro Nicolás Adot

https://drive.google.com/file/d/11XJcxfUZFG-hmo7CIVq0v6o0FDsaP9Ud/view?usp=
drive_web&authuser=0

https://drive.google.com/file/d/1PIshu-JA9aERyHlZsZTaa2lREi4hhSUR/view?usp=dri
ve_web&authuser=0

https://drive.google.com/file/d/1WFtlydDRZIAkbAHHYEWJ2iZrL3hys4S7/view?usp=
drive_web&authuser=0