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Infografia Extraccion de ADN

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Extracción de ADN

A partir de una muestra de sangre periférica y


utilizando un método de extracción de sales se
obtendrá ADN humano, que posteriormente se
cuantificará en electroforesis de agarosa

Objetivos Materiales Reactivos


Bata Sacarosa 0.3M
Tapabocas Trizma Base 1M
Tubos MgCl2
Vacutainer Con Triton X100
Realizar la EDTA EDTA – Na 0.1M
extracción del NaClO4-5M
ADN por Microtubos de
2.0mL SDS (Dodecil
medio de la
técnica de Puntas para Sulfato de
“Salting-Out” micropipetas Sodio) 2.5%
Identificar la (0.2-10ul, 10- Alcohol
extracción del 100ul, 100- absoluto
ADN como el Agua Ultrapura
primer paso
1000ul)
para llevar a
cabo técnicas
de
diagnóstico
molecular

Procedimiento
(Método de "Salting-Out")

FASE 1: PREPARACIÓN DE LA
MUESTRA
La sangre total se deja reposar y
se centrifuga para obtener la
capa de células blancas

Fase 2: Lisis celular


Se añaden soluciones de lisis para
romper las membranas celulares y
liberar el ADN. Este proceso
también separa las proteínas que
están unidas al ADN.

Fase 3: Purificación del ADN


mediante centrifugación
Se realizan varios ciclos de
centrifugado y lavado. Esto permite
eliminar los restos celulares y
obtener un "botón" blanco, que es
ADN limpio y sin contaminación.
Fase 4: Precipitación del ADN
con NaCl y etanol
Al agregar NaCl y etanol frío, el
ADN se precipita, formando una
estructura visible de fibras blancas
que pueden recolectarse
fácilmente.

Fase 5: Recolección y disolución


del ADN en agua ultrapura
El ADN precipitado se disuelve en agua
ultrapura para obtener una solución
lista para su uso en diagnósticos
moleculares o análisis genéticos.

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