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Práctica 3 Bioquímica LLMTC

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INTRODUCCIÓN:

Los lípidos, son un grupo heterogéneo de compuestos, de naturaleza antipática, es decir que contienen regiones hidrofóbicas y regiones hidrofílicas RESULTADOS:
La mayor parte de los lípidos abundantes en la naturaleza (triacilglicerol), están formados por ácidos grasos de cadenas hidrocarbonadas pares,
saturados o insaturados. Los lípidos llevan a cabo múltiples funciones en el organismo, como: almacenamiento de energía, de transporte, cumplir
funciones hormonales, actuar como vitaminas, formar parte de las membranas celulares confiriéndoles la propiedad de permeabilidad selectiva, al
permitir el paso o no de algunas sustancias y en determinada dirección, así como la conducción nerviosa y el transporte activo como la bomba de
Na+ /K+.
En los fosfogliceridos uno de los ácidos grasos es remplazado por ácido fosfórico el cual a su vez
puede ser esterificado por otros alcoholes. Los fosfogliceridos son los principales componentes de las MATERIAL:
membranas biológicas. Los principales fosfolípidos presentes en los seres vivos son: 1 vaso de precipitado
5 tubos de ensaye
• LECITINAS: uno de los grupos OH del fosfato lleva unido el amino alcohol colina. 1 agitador REACTIVOS:
• CEFALINAS: uno de los grupos OH del fosfato lleva unido el amino alcohol etanolamina. 1 embudo  Etanol caliente
• FOSFATIDIL SERINAS: el OH del fosfato está esterificado con el aminoácido L- serina. Papel filtro  Acetona
• FOSFATIDIL GLICEROLES: el OH del fosfato se esterifica con glicerol. Pipeta 5 y 10 ml  NaOH al 10 %
1 probeta de 100 ml  HCl al 50 %
Fosfatidilcolina (lecitina)
Baño María  Agua destilada
Es el más común de los fosfolípidos. Contiene la importante sal
 Fenolftaleína Imagen 1. Imagen 2.
de amonio cuaternaria, colina, unida a un residuo de ácido Imagen 4. Imagen 5.
fosfórico mediante un enlace éster. El nitrógeno de la colina posee Al mezclar etanol caliente con la Se observó un Olor caracteristico. de Se observan gotitas
carga positiva y el fosfato, negativa, de modo que en solución, a PROCEDIMIENTO: En un vaso Se le añaden yema de huevo se obtiene una precipitado la trimetilamina y esto
de 25 ml de La mezcla se naranjas en la superficie de
casi todos los valores de pH, la lecitina existe como sal l. Aislamiento de las precipitado alcohol enfría y se mezcla heterogenea,y al filtrar se muy turbio, lo nos permitió confirmar la solución, las cuales son
interna o ion interno (zwitterion). lecitinas de la yema de se pone la caliente y se filtra en un obtuvo la mezcla de lecitina con que indica la que la hidrolisis ocurrió
mitad de mezcla con tubo de los ácidos grasos
alcohol. precipitación y .dio como resultado a
Como de la hidrólisis de la lecitina muy purificada se obtienen por huevo una yema de una varilla ensaye seco. presentes.
huevo de vidrio de la lecitina. la trimetilamina un
lo menos cinco ácidos grasos diferentes, se está tratando con una
mezcla de compuestos en lugar de uno solo. Técnicamente, componente de la
debería emplearse el plural "lecitinas" en lugar del nombre lll. Reacción de reconocimiento de lecitinas lecitina.
ll. Detección de lecitinas
singular. Sin embargo, la mayoría de autores prefieren referirse a
estos compuestos como lecitina
DISCUSIÓN:
En un tubo de ensaye seco I.-En el primer tubo, se combino la yema de huevo con etanol caliente por que se quería aislar a la lecitina y se sabe que esta es un
En un tubo de ensaye
seco vierta 5 ml de vierta 2 ml de disolución fosfolípido soluble en este solvente y al filtrar la mezcla de la yema de huevo con el alcohol caliente se obtuvo una disolución alcohólica
alcohólica de lecitina (filtrado de lecitina de color amarillo.
acetona
obtenido en el método 1) II. En el fondo de este tubo se formó un precipitado turbio, esto se debe a que se agregó acetona y la lecitina es insoluble en ella al
CONCEPTOS: menos que sean agregadas grandes cantidades. No se puede disolver en la acetona y se forman dos capas como se observó.
Lecitina: es un término genérico para designar a un amplio grupo de lípidos saponificables y con función de emulgente que se III. El reconocimiento de las lecitinas no se llevo a cabo de manera experimental (el cadmio es muy nocivo para salud), se investigo que
producen de manera natural en tejidos animales y vegetales. Engloba a cualquier grupo de sustancia grasa (de color amarillo- los resultados a los que queríamos llegar eran: el cadmio permite reconocer los fosfolípidos que contienen colina como sustituyente a
marronáceas) compuesta de ácido fosfórico, colina, ácidos grasos, glicerol, glicolípidos, triglicéridos y fosfolípidos, que se le añade gota a gota Se le añade 1 ml de solución continuación del grupo fosfato en el tercer carbono. Da un precipitado blanco, conservando el liquido de color amarillo sin descolorarla
incluye, fosfatidilcolina, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina , fosfatidilinositol y ácido fosfatídico. 1 ml del filtrado saturada de cloruro de IV. En el tubo cuatro no hubo cambio en la coloración al quedarse con su tonalidad amarilla, lo que notamos fue un olor a pescado
obtenido en el método cadmio. Esperar 20 minutos. característico de la hidrólisis de la lecitina de la yema de huevo, lo que ocurrió fue una hidrólisis básica que dio como productos las
1 sales de ácidos grasos que contiene la lecitina al reaccionar con el Na, la molécula de glicerol que reaccionó con el OH, el ácido
fosfórico al romper el enlace, el grupo fosfato lo que hace que se libere la colina que más tarde dará moléculas de trimetilamina.
V. En el procedimiento número 5 se observó el vire de color de la fenolftaleína al ir agregando gotas de HCl hasta que ya no se notaba
el color morado, quedando la solución de un color amarillento con una capa de bolitas naranjas en la parte superior, las cuales referían
Se forma un precipitado
Esperar 20 minutos. La blanco en forma de copos de a los ácidos grasos liberados al momento de hacer la titulación. Las sales de ácidos grasos, productos de la hidrólisis en el
aparición de turbidez un compuesto de cadmio de procedimiento cuatro reaccionan con el HCl. El Na del NaOH se une al Cl del HCl para formar NaCl y entra un H+ para que quede
FUNDAMENTOS: V. Detección
indica los de
la precipitación lecitina. COOH y se forme el ácido graso. Al acidificar el medio se rompe la fosfatidil-colina, quedando colina y ácidos grasos, los ácidos grasos
Fundamento 1. Aislamiento de lecitinas de la yema de huevo: de lecitina se protonan, una vez protonados los ácidos grasos suben a la superficie del tubo.
ácidos grasos
Las grasas y los aceites animales se extraen por fusión del tejido adiposo donde se encuentran: Por acción del calor se rompen las
células y las sustancias grasas se escurren. Las lecitinas son solubles en disolventes orgánicos como el éter, benceno, hexano etc., El lV. Hidrolisis de la lecitina
etanol es medianamente polar debido a su radical OH pero si se eleva su temperatura es más fácil que su parte no polar (cadena
carbonada) interaccione con los lípidos y al mismo tiempo el calor rompa células liberando lecitinas y haciendo posible su aislamiento.
CONCLUSIONES:
Diluya el hidrolizado
alcalino obtenido con En un tubo de ensaye
2 ml de agua Añada 3 ml de NaOH 10%
Fundamento 2. Detección de lecitinas. seco vierta 5 ml de I.-Las lecitinas son el componente más abundante de la fracción fosfatídica que puede extraerse tanto de la yema de huevo, como de
y ponga a hervir la mezcla
disolución de lecitina en
Las lecitinas son moléculas en forma de sales o zwiteriones ya que contienen la carga negativa del acido fosfórico y la carga positiva durante 5 min. En baño granos de soja mediante extracción mecánica, o química. Las lecitinas son solubles en alcohol, por lo que estas se pueden extraer en
alcohol (filtrado obtenido
del grupo trimetilamino de la colina, con lo que la hace dipolo, las lecitinas son solubles en los solventes ordinarios de las grasas , maría NO AGITE. la mezcla de la yema de huevo y etanol caliente.
Añada 2 gotas de en el método 1).
excepto en acetona, esta propiedad se utiliza para su aislamiento y para comprobar su presencia. La acetona es un solvente que no fenolftaleína y gota a
gota HCl 50% hasta II.- Se logro detectar a la lecitina con acetona gracias a la precipitación que se formo.
que vire el indicador
forma puentes de hidrogeno, cuando se junta con la lecitina esta interacciona entre si y forma el precipitado observándose turbia la III.-El grupo fosfato de la lecitina reaccionan con el cloruro de cadmio, formando así un complejo insoluble, el cual precipita, es así
solución, que indicaba la presencia de las lecitinas. como nos permite reconocer la existencia de este fosfolípido.
Separe los ácidos IV.-Se logro notar el olor característico de la trimetilamina, esto nos permitió confirmar que la hidrolisis alcalina (reacción de
Fundamento 3. Reacción de reconocimiento de lecitinas. grasos que sube a la
superficie por saponificación) ocurrió y dio como resultado el ácido libre en forma de sal (jabones) y a la trimetilamina un componente de la lecitina.
La reacción de Lecitina con el cloruro de cadmio, hace que se forme el ion Cd2+. El cual va a formar un complejo lípido metálico con filtración. Esta ultima posee un olor La colina que se
característico de salmuera desprende como V.-Al agregar HCl ayuda a darnos cuenta que el resultado da ácidos grasos libres en la solución que se hidrolizo alcalinamente. Al
la parte negativa de la fosfatidilcolina que es el grupo fosfato, así precipitando este complejo metálico, la captura del cadmio se de arenques y se resultado de la hidrolisis acidificar el medio los ácidos grasos se protonan, una vez protonados los ácidos grasos suben a la superficie del tubo.
incrementa por tener un metal el cual teniendo un PH básico hace que precipite aún más. El cadmio permite reconocer fosfolípidos que reconoce fácilmente por se descompone con
poseen colina como sustituyente a continuación del grupo fosfato en el tercer carbono. este indicio. formación trimetilamina.

Fundamento 4. Hidrólisis de la lecitina.


La reacción que ocurre es una hidrolisis alcalina de lípidos.
Cuando se combina una grasa con una base, como el hidróxido de sodio, se forma un hidrolizado para formar glicerol y ácidos grasos,
estos últimos interaccionan para formar la sal de sodio soluble de los ácidos grasos o jabones.

Fundamento 5. Detección de los ácidos grasos.


La separación de los ácidos grasos libres se consigue por adición de una disolución de hidróxido o carbonato sódico, a la materia CUESTIONARIO:
grasa relativamente caliente.
Los grupos gliceril-ésteres al pasar por un proceso de reflujo de álcali se hidrolizan, este es detectable con una titulación de la base con 1. Escriba la clasificación de los ácidos grasos
una acido fuerte en este caso HCl, donde la fenolftaleína nos ayuda a la visualización de la titulación. En medio ácido se pueden
producir isomerizaciones por lo que se recurre a reacciones en medio básico para evitar este fenómeno.

OBJETIVOS:
• AISLAR LECITINA DE LA YEMA DE HUEVO Y COMPROBAR SU PRESENCIA
• HIDROLIZAR LA LECITINA OBTENIDA Y DETECTAR ALGUNO DE SUS COMPONENTES 2. Escriba la formula de la fosfatidilcolina

3.Escriba en que organelos celulares se encuentran los lipidos compuestos


Aparato de Golgi, membrana plasmática, retículo endoplasmático, mitocondria, lisosoma, endosoma
BIBLIOGRAFÍA
.
· Ayudas didácticas bioquímica I. Departamento de bioquímica- alimentos. Lic. En Químico Farmarmacobiólogo (MUM) 2015.
· Ayudas didácticas bioquímica II. Departamento de bioquímica-alimentos. Lic. En Químico Farmarmacobiólogo (MUM) 2015.
· Nelson, David L., Cox, Michael M. Lenninger Principios de Bioquímica , 5a edición. 2006

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