Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Facultad de Ciencias Químicas

Laboratorio de Bioquímica ll

DETERMINACIÓN DE CUERPOS CETÓNICOS

Equipo II
• Zepeda Estrada Luis Fernando

INTRODUCCION:
Los cuerpos cetónicos son unos productos de desecho de las grasas que se producen cuando el organismo, recurre a la combustión de las grasas, en lugar
de la glucosa para generar energía.
RESULTADOS
Dónde se originan los cuerpos cetónicos
• en todos los tejidos insulino sensibles en
los que hay una disminución de la entrada de
glucosa y en el hígado, que tiene que convertir la
glucosa que almacena en azúcares más
simples que lleguen a las células y como
consecuencia, libera cuerpos cetónicos.

En el tejido graso del organismo, hay unas células muy especializadas que almacenan la energía en forma de triglicéridos. Cuando el organismo no puede
utilizar la glucosa para obtener energía, en el hígado se produce la combustión de la grasa (llamada lipólisis), apareciendo otras sustancias, entre las que se
encuentra el acido acetoacetico, la acetona y el Acido ß-hidroxibutirato. Estas sustancias se llaman cuerpos cetónicos. La existencia de niveles elevados de
cuerpos cetónicos en el organismo puede indicar cetosis o cetoacidosis por lo que se requiere atención médica inmediata. 2 1
Las causas de la formación de los cuerpos cetónicos está estrechamente relacionada con un déficit parcial o total de insulina. Esto lleva a un estado de
hiperglucemia en la persona con diabetes. OBJETIVOS
Demostrar la presencia de cuerpos cetónicos como consecuencia de un ayuno prolongado
• DÉFICIT PARCIAL O TOTAL DE INSULINA Tubo N°1.- En la orina del paciente Tubo N°2.- Se observa la presencia
• AUMENTO DE GLUCOSA EN SANGRE sano no se observa ninguna de cuerpos cetónicos en la orina
• SITUACIÓN DE HIPERGLUCEMIA coloración o precipitación en la del paciente diabético, por la
• SE EMPIEZAN A QUEMAR LAS GRASAS PARA OBTENER ENERGÍA
REACTIVOS: muestra. presencia de aro violeta en la
• Reactivo de Imbert (nitroprusiato de sodio al 5% parte superior del tubo.
• Hidróxido de amonio concentrado
Los cuerpos cetónicos se forman cuando por una situación de hiperglucemia(aumento anormal de los niveles de glucosa en sangre) , se empieza a utilizar la
grasa para obtener energía. Como consecuencia se producen en el hígado sus productos de desecho: los cuerpos cetónicos que se van acumulando en la MATERIAL : MATERIAL BIOLÓGICO DISCUSIÓN DE RESULTADOS
sangre. • 2 tubos de ensaye Orina de personas en ayuno de 8 horas (la
• 1 pipeta de 10 ml primera del día), diabética y normal.
Cuando una persona sin diabetes está en ayunas durante muchas horas o está vomitando mucho, también se pueden producir cetonas. En este caso se
• 1 pipeta de 2 ml
producen por falta de glucosa. Al faltar el azúcar las células metabolizaran las grasas para obtener la energía que necesitan.
Las muestras de orina de los pacientes en circunstancias de salud diferentes (paciente no diabético y paciente diabético), al someterlos a la
El páncreas de las personas con diabetes no produce suficiente insulina, o bien su cuerpo tiene resistencia a la acción de esta hormona, de manera que la prueba de Imbert, en la muestra de orina del paciente sano (Tubo N°1), solo se observaba la coloración amarillo claro. No hubo ningún tipo
glucosa no penetra en las células y se queda en la sangre, aumentando su nivel. Cuando esta situación de hiperglucemia se mantiene, el hígado fabrica de reacción ya que su metabolismo energético es normal.
combustibles de emergencia (lipólisis) . Estos combustibles, producidos de la grasa, se llaman cetonas (o cetoácidos) , en concentraciones elevadas son En la segunda muestra (orina de paciente diabético) se obtuvo una característica diferente, hubo formación de un anillo morado-lila en la
químicos ácidos tóxicos. El cuerpo enfermará si depende durante mucho tiempo de las cetonas para obtener energía. En la cetoacidosis diabética, las PROCEDIMIENTO:
parte superior de la muestra (Tubo N°2). Esto se debe a los cuerpos cetónicos se forman como desecho, en situaciones en las que el
cetonas se acumulan en la sangre, lo que altera seriamente la química normal de la sangre e interfiere con el funcionamiento de muchos órganos. Si el nivel metabolismo de la glucosa está comprometido, ya que los pacientes con diabetes tienen déficit de producción de insulina, hormona que
de acidez de la sangre es muy elevado, se vuelva ácida, la cetoacidosis puede producir un coma y la muerte. ayuda a la glucosa a ser metabolizada en la célula para obtener energía, por eso el paciente diabético tiende a depender más del
catabolismo de ácidos grasos.
se agregan 10 gotas de La reacción para determinar los cuerpos cetónicos, se trata de una reacción colorimétrica, donde el ferropentacianuro junto con el
PAPEL DE LOS CUERPOS CETÓNICOS EN CIERTOS TEJIDOS Y ÓRGANOS. En un tubo de ensaye se derivado isonitado de la acetona, en presencia de nitroprusiato, da lugar a un compuesto color violeta, a su vez al agitar se observaron
colocan 2.5 ml de la orina reactivo de Imbert. Se mezcla precipitados violetas. Tal como se espera esto indica una mayor concentración de cuerpos cetónicos en la orina de la persona diabética.
Cerebro: hasta hace poco tiempo se pensaba que la glucosa era el único sustrato energético utilizable por el cerebro. Hoy sabemos que en los casos de ayuno utiliza los cuerpos
cetónicos durante el periodo de la lactancia, ya que es una época de dieta rica en grasas.
Músculo: El Corazón es el músculo que más consume cuerpos cetónicos, como sustrato metabólico, mientras que en el músculo esquelético son escasos, ya que utiliza ácidos
grasos libres para sus necesidades energéticas.
Riñón: Es uno de los órganos donde los cuerpos cetónicos proporcionan una mayor aportación energética.
Tejido Adiposo: Puede metabolizar cuerpos cetónicos como sustrato energético y como precursor lipogenético.
Mención especial merece el metabolismo de los cuerpos cetónicos en las estructuras fetales especialmente durante el ayuno; aunque el feto no los sintetiza, le llegan
procedentes de la madre a través de la placenta, por la que pasan libremente.

Efectos hormonales sobre el metabolismo lipídico. Cuando la reacción es

Deslizando por las paredes CONCLUSIÓN
Insulina. Estimula la utilización de glucosa, provoca la síntesis de unos ácidos grasos, y por tanto, incrementa la lipogénesis. Por otro lado, disminuye la liberación de ácidos positiva, en el punto de
del tubo se agregan 0.5 ml de
grasos por el tejido adiposo, este fenómeno reduce la cetogénesis. (proceso metabólico por el que se producen los cuerpos cetónicos a partir del catabolismo de los ácidos contacto aparece un anillo En conclusión, la cetosis se da cuando no hay carbohidratos para metabolizar, por lo que el organismo induce el catabolismo las grasas para
grasos) Si por el contrario, falta insulina, aumenta la síntesis del colesterol, porque dispone de más acetil-CoA. hidróxido de amonio para violeta cuya intensidad es
Adrenalina. Estimula la lipasa de los adipocitos y favorece la liberación de ácidos grasos. Además, inhibe la captación de glucosa sanguínea por el músculo, que consume obtener energía y su elevada producción de Acetil-CoA produce cuerpos cetónicos, los cuales se elevan en sangre y son eliminados por la orina
preferentemente ácidos grasos.
obtener una reacción azul proporcional a la cantidad de donde se detectan fácilmente, como en orinas de diabéticos.
Glucocorticoides. Estimulan la oxidación de los ácidos grasos y la cetogénesis. cuerpos cetónicos. Se demostró la presencia de los cuerpos cetónicos, como lo muestran los resultados, en la muestra de orina de una persona con diabetes (Tubo
ACTH. Aumenta la movilización de los ácidos grasos del tejido adiposo y, con ello, la cetogénesis. N°2), se observó la formación de un anillo, el cual se esperaba, dado las reacciones que ocurren.
En el Tubo N°1, aunque la muestra se obtuvo de una persona en ayunas, favoreció un poco la formación de cuerpos cetónicos. Solo se observó
un cambio de color amarillo, esto puede deberse a la alimentación y al estado de salud, ya que las comparaciones entre una persona sana y una
con diabetes se observan resultados muy contrastantes.
SINTESIS

El lugar primario de formación de los cuerpos cetónicos es el hígado y, en menor proporción, Cuestionario:
también el riñón. El proceso tiene lugar en la matriz mitocondrial y ocurre en diferentes pasos: 1. ¿Qué nombre recibe la presencia de cuerpos cetónicos en sangre y orina cuando se encuentran en
cantidades más altas de las normales? El aumento de cuerpos cetónicos en sangre (cetonemia) y niveles altos
1.- La primera reacción es la condensación de dos moléculas de acetil-CoA para formar de cetonas en la orina (cetonuria). Cetosis el aumento de los cuerpos cetónicos tanto en sangre como en orina
acetoacetil-CoA, gracias a la acción de la enzima β-cetotiolasa. (concentración sanguínea de 90mg/100mL y una excreción urinaria de 5000 mg/24h), los valores normales son:
2.- La molécula de acetoacetil-CoA se condensa con otra molécula de acetil-CoA para formar β- sangre menor de 3mg/100mL y en excreción urinaria: menor o igual a 125mg/24h.
hidroxi-β-metilglutaril-CoA (HMG-CoA), por acción de la enzima HMG-CoA sintasa. 2. ¿En que condiciones metabólicas se acumulan cuerpos cetónicos? Se producen en circunstancias especiales
3.- Finalmente, la HMG-CoA liasa hidroliza el HMG-CoA en una molécula de acetoacetato y una como el ayuno prolongado, diabetes o cualquier situación de incapacidad de obtener glucosa. Los individuos sujetos
de acetil-CoA. a dietas muy bajas en calorías, que usan las grasas del tejido adiposo como fuente principal de energía.
3. ¿Cuál es el fundamento de la prueba de Imbert? La determinación de acetona por el Método de Imbert, es
Una parte del acetoacetato se reduce a β-hidroxibutirato en la propia mitocondria, lo que fundamentado por una formación de ferropentacianuro con el derivado isonitrato de la acetona, por una presencia
consume un equivalente de ATP (una molécula de NADH); esta reacción la cataliza la β- de nitroprusiato, cuando existe presencia de ferropentacianuro la prueba dará un color violeta, considerando la
hidroxibutirato deshidrogenasa que se encuentra estrechamente asociada a la membrana prueba como positiva.
mitocondrial interna.

En condiciones normales, una mínima proporción de acetoacetato sufre una lenta

descarboxilación espontánea, no enzimática, dando acetona

FUNDAMENTO: BIBLIOGRAFIA:
• http://www.reactivosmeyer.com.mx/pdf/reactivos/hds_2475.pdf
La determinación de acetona por el Método de Imbert, es fundamentado por una formación de ferropentacianuro con el derivado • http://iio.ens.uabc.mx/hojas-seguridad/HIDROXIDO%20de%20amonio.pdf
isonitrato de la acetona, por una presencia de nitroprusiato, cuando existe presencia de ferropentacianuro la prueba dará un color • Principios de Bioquímica 5ª edición. (2009) David L. Nelson y M. M. Cox. Editorial Omega
violeta, considerando la prueba como positiva. • http://www.solucionesparaladiabetes.com/images/Gua%20rpida%20sobre%20Cuerpos%20Cetnicos.pdf

Reacción entre los cuerpos cetónicos (Acetona y Beta-Hidroxibutirato), y el reactivo

de Imbert para generar como producto el Ferropentacianuro.