BIOQUIMICA

Esquejes
Aunque la palabra todavía

puede resultar extraña para
algunos, esquejar no quiere
decir otra cosa que realizar un
proceso de reproducción
asexual de las plantas
mediante el cual se separa una
pequeña parte de la planta
madre para crear un nuevo
ejemplar.
No obstante, puedes llevar a
cabo esta técnica de muy
distintas maneras…
TIPOS DE ESQUEJES DE
PLANTAS
 De hoja: se trata de cortar una hoja con peciolo y enterrar
en tierra esta última parte; no te confíes, porque en
realidad es más difícil de lo que parece a primera vista. El
nuevo ejemplar puede tardar sobre un mes y medio en
aparecer.
 De hoja y tallo: es similar a la anterior, solo que en esta
ocasión se corta un trozo del tallo con la yema axilar de
una hoja. El proceso de desarrollo del nuevo ejemplar
puede durar de unas semanas a unos meses.
 Tiernos: se toman de las plantas más jóvenes que no han
desarrollado todavía el proceso de lignificación; deben
hacerse en primavera o verano, cuando una vez cortados
crecerán rápidamente nuevos tallos. Es uno de los
sistemas más rápidos y se lleva a cabo en plantas
coníferas, perennes y semiarbustivas.
 De raíz: consiste en quitar trozos de raíces o brotes de las
raíces superficiales (chupones) y enterrarlos en una
mezcla de turba y arena. Es bueno para plantas herbáceas
de raíz carnosa y algunos árboles y arbustos.
Semileñosos: también pertenecen a los tallos
más jóvenes y suele utilizase con plantas
coníferas, arbustos de hoja caduca o perenne,
brezos y plantas trepadoras. La mejor época para
extraernos es de mediados de verano a otoño.
Leñosos: forman parte de los tallos más maduros,
por lo que lo mejor es hacerlos en las épocas más
frescas del año (no hace falta que sea pleno
invierno). Estos esquejes tardan más de 6 meses
en enraizar y se utilizan en árboles caducos,
perennes y en arbustos.
Video ESQUEJES
https://www.youtube.com/watch?v=byNKKW4i8q
c
Propagación de plantas por
cultivo in vitro
La expresión cultivo in vitro de plantas, significa cultivar
plantas dentro de un frasco de vidrio en un ambiente
artificial. Esta forma de cultivar las plantas tiene dos
características fundamentales: la asepsia (ausencia de
gérmenes, etc), y el control de los factores que afectan el
crecimiento.
La micropropagación se lleva acabo a partir de un
fragmento (explante) de una planta madre, se obtiene una
descendencia uniforme, con plantas genéticamente
idénticas, denominadas clones.
El explante más usado para los procesos de propagación in
vitro son las yemas vegetativas de las plantas. Los frascos
que contienen las plantas se ubican en estanterías con luz
artificial dentro de la cámara de crecimiento, donde se fija la
temperatura en valores que oscilan entre los 21 y 23°C,
además de controlar la cantidad de horas de luz.
Por su parte, el medio de cultivo se compone de una mezcla
de sales minerales, vitaminas reguladores de crecimiento,
azúcar, agua y agar. La composición del medio depende de
la especie vegetal y de la etapa del proceso de
micropropagación.
Con finalidad puramente descriptiva se puede clasificar los
principales factores no biológicos que afectaran al
desarrollo del cultivo in vitro , incluyendo:
 Ambiente químico
• Composición del medio de cultivo
• pH
 Ambiente físico
• temperatura
• luz y fotoperíodo
• humedad
Dentro del proceso de micropropagación diferenciamos
varias fases o etapas:
Selección y Preparación de la planta madre
Desinfección de las yemas de la planta y/o desinfección de
semilla
Introducción del material seleccionado in vitro
Multiplicación de brotes
Enraizamiento
Aclimatación
 FASE 0: PREPARACIÓN DE LA PLANTA
MADRE
Para poder establecer el cultivo en condiciones de
asepsia, se deben obtener explantes con un nivel
nutricional y un grado de desarrollo adecuado. Para
obtener estos explantes es recomendable mantener a
las plantas madre, es decir la planta donadora de
yemas, durante un período de tiempo que puede
oscilar entre unas semanas o varios meses en un
invernadero bajo condiciones controladas. En ese
ambiente se cultiva la planta en condiciones
sanitarias óptimas y con un control de la nutrición y
riego adecuados para permitir un crecimiento
vigoroso y libre de enfermedades.
 FASE 1: DESINFECCIÓN DEL MATERIAL
VEGETAL
Una vez elegida la planta madre, se extraerán los
fragmentos a partir de los cuales se obtendrán los
explantes. Los explantes pueden ser yemas, trozos
de hojas, porciones de raíces, semillas, etc. Antes de
extraer los explantes se hará una desinfección de los
fragmentos de planta madre para eliminar los
contaminantes externos. Los contaminantes más
comunes son los hongos y las bacterias que habitan
en forma natural en el ambiente. Una vez
desinfectado el material vegetal, se debe mantener
en condiciones de asepsia. A efectos de obtener las
condiciones de asepsia, se trabajará en cabinas de
flujo laminar para extraer los explantes a partir del
material vegetal. Estos explantes se introducirán en
un tubo de cultivo conteniendo medio de iniciación
para poder controlar la sanidad y la viabilidad, luego
de realizar la desinfección del material con hipoclorito
de sodio (agua clorada comercial), pura o diluída
durante un período de 5 a 15 minutos, seguido por 3
a 4 enjuagues en agua esterilizada.
 FASE 2: INTRODUCCIÓN DEL MATERIAL IN VITRO
Luego de la desinfección superficial, las semillas o las yemas dependiendo del material
seleccionado, se ponen en medio de cultivo estéril. En un período de una semana o quince días,
comienza el proceso de germinación o regeneración de nuevos tejidos vegetales, iniciando el ciclo
de cultivo in vitro.
 FASE 3: MULTIPLICACIÓN DE LOS BROTES
Durante esta fase se espera que los explantes que sobrevivieron la FASE 1 y 2 originen brotes (de
procedencia axilar o adventicia) con varias hojas. En la base de cada hoja hay una yema que se
desarrollará luego de ser puesta en contacto con el medio de cultivo. Periódicamente estos nuevos
brotes se deben subcultivar en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en tubos de
cultivo u otros recipientes adecuados. Estas operaciones se realizan en la cámara de flujo laminar o
en un lugar aislado que nos permita mantener las condiciones de asepsia. De esta forma aumenta
el número de plantas en cada repique o división de las plantas. El número de plantas que se obtiene
dependerá de la especie vegetal y de las condiciones del medio de cultivo. El número de plantas
que se obtiene por la vía de la micropropagación permite alcanzar incrementos exponenciales,
considerando que todos los factores que afectan el crecimiento hayan sido optimizados.
 FASE 4: ELECCIÓN DE UN MEDIO DE ENRAIZAMIENTO DE LOS EXPLANTOS
Para enraizar los explantes se utilizan principalmente plantines individuales de un tamaño
aproximado de 2 centímetros. Los brotes obtenidos durante la fase de multiplicación se transfieren a
un medio libre de reguladores de crecimiento o que solo contenga hormonas del tipo auxinas.
Algunas especies de plantas no necesitan pasar por esta etapa y emiten sus raíces en el mismo
medio de cultivo donde desarrollan yemas nuevas, por lo tanto el proceso de multiplicación y
enraizamiento transcurren en forma simultánea.
 FASE 5: ACLIMATACIÓN DE LOS
EXPLANTOS ENRAIZADOS
Los explantes recién enraizados son muy
sensibles a los cambios ambientales, de
manera que el éxito o el fracaso de todo
el proceso depende de la aclimatación.
En esta etapa las plantas sufrirán
cambios de diferente tipo que permitirán
la adaptación de las mismas a vivir en
condiciones naturales. En el momento en
que se extraen los explantes o plantines
enraizados de los frascos, están poco
adaptados a crecer en un invernáculo, ya
que estos explantes han enraizado y
crecido en ambientes con una humedad
relativa muy elevada y generalmente
tienen estomas (estructuras responsables
de regular la transpiración y pérdida de
agua en la planta) que no son
completamente funcionales frente a
descensos de la humedad relativa, y por
lo tanto demasiado lentos para evitar la
desecación del explante.

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