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COPROCULTIVO

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COPROCULTIVO

COPROCULTIVO: DEFINICIÓN

• Examen de laboratorio que permite identificar diferentes organismos


causantes de enfermedades gastrointestinales

• Las bacterias más frecuentes:


• Shigella
• Salmonella
• Campylobacter
• Aeromonas
• Plesiomonas shigelloides
• Escherichia coli (EPEC, EHEC,EIEC)
• Vibrio cholerae
COPROCULTIVO: INDICACIONES

RAZONES CLÍNICAS RAZONES EPIDEMIOLÓGICAS

Gravedad del proceso Brotes epidémicos


Guarderías

Susceptibilidad del paciente Sospecha de patógenos


con potencial epidémico

COPROCULTIVO

Control de brotes epidémicos


Tx específico
Evitar difusión de patógenos
potencialmente epidémicos
COPROCULTIVO: BIOSEGURIDAD

• Uso de guantes para obtención, recepción y tratamiento


de muestras

• Lavado de manos

• Uso de indumentaria

• Considerar como material de alto riesgo


ETAPA PRE - ANALÍTICA
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA

• Durante período agudo de • Envase adecuado


enfermedad
• Muestra fresca
• Paciente sin tratamiento Diarreica: no < 2 a 5 ml
antimicrobiano
Pastosa: no < 3 a 5 g

• Hisopado rectales
RECEPCIÓN DE MUESTRA

• Número de muestras

• Identificación de la muestra

• Datos clínicos y epidemiológicos de la muestra

• Criterios de rechazo:
• Deposición formada, excepto en estudio de portadores
• Más de 1h a T° ambiente sin medio de transporte
ETAPA ANALÍTICA
EXAMEN DIRECTO

• EXAMEN MACROSCÓPICO
• Consistencia
• Color
• Olor
• Moco y/o sangre

• EXAMEN MICROSCÓPICO
• Leucocitos fecales
PROCEDIMIENTO DEL CULTIVO

EXAMEN EXAMEN
MACROSCÓPICO MICROSCÓPICO

REACCIÓN
INFLAMATORIA

Cary – Blair
Mantener en refrigeración COLORACIÓN VAGO
O
GRAM INTERRUMPIDO

SIEMBRA
PRIMARIA
COPROCULTIVO: MATERIALES

• Medio XLD
• Medio Salmonella Shigella
• Medio TCBS
• Medio para Campylobacter o filtros de 0.45 um
• Medio Mc Conkey Sorbitol
• Caldo Selenito
• Agua peptonada alcalina
• Medios diferenciales: TSI, LIA
• Reactivos: Indol, Oxidasa, Catalasa
• Sueros polivalentes y monovalentes
CULTIVO DE MUESTRA: SIEMBRA PRIMARIA

Caldo
Selenito Agar
Agar McConkey Campylobacter
Agar XLD Agar SS Agar TCBS
Sorbitol /filtrado

Incubar a 42° por


48h en
Agar SS
microaerofilia
Incubar a 35-37°
por 18 a 24h
CARACTERÍSTICAS DE COLONIAS SOSPECHOSAS

• AGAR XLD: xilosa es fermentada por los entéricos, excepto Shigella


CARACTERÍSTICAS DE COLONIAS SOSPECHOSAS

• AGAR SALMONELLA – SHIGELLA: no fermentan lactosa (colonias incoloras)


CARACTERÍSTICAS DE COLONIAS SOSPECHOSAS

• AGAR MC CONKEY SORBITOL: sorbitol no es fermentado por E. coli O157:H7


CARACTERÍSTICAS DE COLONIAS SOSPECHOSAS

• AGAR TCBS: El pH alcalino favorece el crecimiento de Vibrio cholerae


IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA PRELIMINAR
INTERPRETACIÓN
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA FINAL

• Citrato de Simmon’s
• Triple Azúcar Hierro
• Agar Lisina Hierro
• Movilidad Indol Ornitina
• Agar Urea de Christensen’s
• Voges – Proskauer
• Gelatina
IDENTIFICACIÓN DE CAMPYLOBACTER

• CULTIVO POR EL MÉTODO DE FILTRACIÓN


IDENTIFICACIÓN DE CAMPYLOBACTER

• EXAMEN DE LAS PLACAS • IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA


• Colonias sospechosas
• Tinción Gram
• Catalasa +
• Oxidasa +
IDENTIFICACIÓN DE CAMPYLOBACTER

EXAMEN MICROSCÓPICO DIRECTO

• TINCIÓN GRAM – VAGO: para identificar leucocitos y formas bacilares curvas


ANTIBIOGRAMA

• Medios de cultivo a utilizar

• Preparación del inóculo

• Inoculación de las placas

• Discos que se colocarán

• Medición de halos
ANTIBIOGRAMA

• DISCOS QUE SE COLOCARÁN:

• Ampicilina
• Sulfametoxazol – trimetoprim
• Ciprofloxacina (Campylobacter)
• Furazolidona
• Cloranfenicol
• Eritromicina (Campylobacter)
CULTIVO DE LA MUESTRA

Agar
Agar McConkey
Agar XLD Agar SS Agar TCBS Campylobacter/
Sorbitol
filtrado

COLONIAS SOSPECHOSAS
• Shigella COLONIAS SOSPECHOSAS COLONIAS SOSPECHOSAS
• Salmonella SORBITOL (-): • Campylobacter
• Plesiomonas • EHEC O157/H7 • Oxidasa +
• Aeromonas • Aeromona • Catalasa +
BUSCAR: • Gram
• Shigella
• Vibrios
• Yersinia
• Aeromonas
TSI LIA
Serie y ATB Serie y ATB
Serie y ATB ATB
Serología Serología
Serología
ETAPA ANALÍTICA

• 1º DÍA: Siembra primaria


• 2º DÍA: Selección de colonias sospechosas + identificación bioquímica preliminar
• 3º DÍA: Lectura TSI – LIA + identificación bioquímica final
• 4º DÍA: Lectura serie bioquímica final + antibiograma + confirmación serológica
• 5º DÍA: Lectura de la identificación final de enteropatógenos y su antibiograma
proveniente del agar SS con identificación presuntiva a Salmonella, Shigella y
Yersinia o Reporte final.

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