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Virus Micro

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¿Qué es un virus?

Virus

 Son parásitos intracelulares obligatorios, no


pueden sintetizar ATP ni proteínas independientemente
de la celula.

 Los virus no son seres celulares.

 El genoma viral puede ser ARN o ADN, pero no ambos.

 Los virus poseen una cápside protéica y algunos una


envoltura.

 Los componentes virales se ensamblan y no se replican


por “division”.
¿Son seres vivos?
Tamaño

1 m= 0,000000001 nm
Aprox: 20 a 250 nm
Componentes del virión
Genoma viral
 DNA:
- doble cadena - lineal (Herpesvirus,
Adenovirus)
- circular (Papilomavirus, Poliomavirus)
- simple cadena - lineal (Parvovirus)
- circular (v. bacterianos)

 RNA: mayoría simple cadena y lineal


- genoma fragmentado o segmentado
Ej. Virus de la gripe (sc) Orthomixoviridae.

- doble cadena (Reovirus)


Cápside
 Es una estructura que rodea y protege al
genoma vírico y está formado por proteínas
codificadas por genes del virus.

 Estas proteínas que forman la cápside se


denominan protómeros.

 Simetría es la forma que adopta un virus en


el espacio, esta dada por la estructura de la
Nucleocápside.
Envoltura
 Es una capa membranosa que rodea la nucleocápside de
diferentes virus. Esta envoltura tiene estructura de
membrana, con bicapa lipídica con proteínas:

 Los lípidos de la envoltura proceden de las membranas


de la celula hospedadora.

 Las proteínas estan codificadas por genes del virus

- Glicoproteínas: tiene unidos azucares. Sobresalen


de
la membrana. Espículas o peplómeros.

Fn: Unión a célula hospedadora


Actividad enzimática
Clasificación viral: Criterios
1. Genoma: tipo de ácido nucléico y características del
mismo

2. Tamaño del virión

3. Cápside (simetría)

4. Envoltura: presencia o ausencia

5. Genómica: secuencia nucleotídica


Efecto de agentes fisicoquímicos
sobre los virus I
• Determinar la viabilidad de muestras
clínicas para el diagnóstico virológico.

• La conservación de vacunas virales a virus vivo.

• Estimar la infectividad a temperatura ambiente.

• Decontaminar materiales.

• Efectuar un tratamiento adecuado para el


agua potable.
Efecto de agentes fisicoquímicos
sobre los virus II
 Temperatura: los virus son lábiles al calor. En general se
inactivan 1 hs a 60ºC.

 pH y medio iónico: conservación en


isotónicos y pH fisiológico. medios Excepción:
mejor
estables a pH 3. enterovirus

 Radiaciones: UV y ionizantes (rayos X y gamma)


inactivan a los virus por su acción sobre el genoma viral.

 Solventes lípidos: los virus envueltos son sensibles a


éter, cloroformo, sales biliares, detergentes aniónicos. Los
virus desnudos son resistentes a los solventes
lipídicos. Ej. Enterovirus.
Etapas de la replicación viral I
Iniciación:

a) Adsorción: es la unión específica de la proteína viral de


superficie con el receptor de la membrana celular.

b) Penetración: Endocitosis mediada por receptor (EMR), o fusion

c) Desnudamiento: del genoma viral. Citoplasma o en los poros


de la membrana nuclear.

2. Expresión y replicación del genoma:


Genomas virales poseen diferentes estrategias de multiplicación
viral.
ARNm viral. Síntesis de proteínas virales.

a) Proteínas que interfieren con el metabolismo celular


b) Polimerasas: síntesis de ácidos nucléicos virales
c) Estructurales: formaran la estructura de los viriones
Etapas de la replicación viral II
3. Ensamble, y egreso de la
maduración célula
infectada

a) Intracelular:
- en el citoplasma celular
- núcleo celular
b) Ensamble es simultáneo al egreso de la célula.
- Membrana citoplasmática
- virus emergen por brotación.
- lisis celular

c) Ensamble en el núcleo celular: herpesvirus.


Herpesvirus
DNA, envuelto
Picornavirus: RNA (+) desnudo
Patogenia viral
Virus o Huésped

- Inoculo -Carga genética (Factores de


inicial resistencia)

- Puerta de -Edad
entrada
- Estructura genética y -Sexo
antigénica del virus
-Embarazo
- Modulación de la respuesta del -Estado de salud
huésped

Virulencia vs atenuación
Tropismo
 Célula SUCEPTIBLE y PERMISIVA

 La relación virus huésped es específica: dada


por la unión de proteínas virales a receptores de la
membrana celular.

 Virus afecta a una especie: humanos, ej,


Sarampión
 Virus que producen zoonosis: Rabia
 Virus que afectan un tejido: hepatotropos,
neurotropos
 Virus que afectan muchos tejidos pantotropos, ej:
Patogenia de las infecciones virales
Estadíos:
1. Infección inicial del huésped: el virus se
adsorbe a células susceptibles y luego
penetra en el tejido. Puertas de entrada.

2. Diseminación de la infección:
multiplicación
y diseminación local a través del cuerpo.

3. Eliminación de virus al exterior. Relacionado


con la transmisión viral.
Puertas de entrada
Organo Virus Mecanismo
Piel Rabia Mordedura por perros y zorros
Arbo=Fiebre amarilla Picadura de artrópodos (Aedes
aegypty)
HBV, HVC, HIV, EBV, Transfusiones, inyecciones
CMV
Papiloma Verruga en piel
Tracto respiratorio Influenza, Vía aerea, intensidad de las
Parainflueza, secreciones por boca o nariz,
Sarampión contaminación manos, etc
Orofaringe y EV, Rotavirus, ADV 40 Contaminación fecal-oral
tracto entérico y 41
Tracto genito- ADV 11y21, BK, HSV- Relaciones sexuales, canal de parto
urinario 1y2, HIV,
HBV,Papiloma
Vía conjuntival ADV 8, EV 70 Contacto con objetos contaminados
Vías de diseminación
Transmisión de virus al exterior del
organismo
 Liberación viral de la célula, salida del huésped,
transporte a través del medio ambiente en forma viable y
entrada apropiada a un nuevo huésped susceptible.

 Factores que intervienen:


1. Cantidad de virus.
2. Estabilidad viral en el medio ambiente
3. Presencia de vectores transmisores
4. Disponibilidad de huéspedes susceptibles
5. Constitución genética del virus y el huésped

 Fuentes de transmisión: secreciones respiratorias,


saliva, heces, orina, secreciones genitales, leche,
sangre o piel.
DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO
¿Para qué sirve?
 Diagnóstico individual en un caso clínico.

 Intervención terapéutica: tratamiento específico.

 Para definir un pronóstico en la evolución del paciente

 Indicar la necesidad de una vacunación.

 Vigilancia epidemiológica: incidencia de enfermedades,


cepas circulantes de virus.

 Para adoptar medidas de salud pública en la


comunidad.
Calidad de la Muestra
 La calidad del diagnóstico virológico está
condicionado por la calidad de la muestra.
 Tipo de muestra: depende de la patología y el
virus
 Tiempo de toma de muestra: dentro de los 7 días de
iniciado el cuadro clínico, para serología también a los 14
o 21 días.
 Calidad: -Viabilidad viral
- Integridad genoma viral
- Presencia de inhibidores
- 0,5 ul del lugar
o Cantidad:Biopsias del
- PCR foco
100-200 ul
- Cultivo 200 ul
 Tiempo y condiciones de transporte
Tipos de muestras
Manifestaciones Agentes Muestras
Infección del SNC EV, HSV, Rabia, Sarampión, LCR, orina, sangre
Arbovirus
Infección Influenza, Parainfluenza, Sincicial ANF
respiratoria baja respiratorio, ADV
Infección Rinovirus, Adenovirus, EV, H. Nasal, H. Faríngeo,
respiratoria alta Reovirus ANF, heces
Piel y mucosas Viruela, Varicela, HSV, EV H. Faríngeo, raspado
base vesícula
Exantéma Rubeóla Sangre heparinizada,
LCR, H. Faríngeo
Conjuntivitis HSV, Adenovirus, EV70 H. Ocular
Sistémica CMV, Adenovirus, CAV-B Orina, sangre, H.
Faríngeo, LCR
Diarrea infantil Rotavirus Materia fecal
Hepatitis, SIDA HAV, HBV, HIV Suero
Recolección y Conservación
Muestra Recolección
Suero, sangre entera, 3-10 ml, tubo estéril
plasma, leucocitos
Hisopados Tubo con medio de
transporte
Fluidos Tubo estéril
Biopsias y necropsias Tubo estéril con medio de
transporte
LCR Tubo estéril
Materia Fecal 4 grs, frasco limpio

Conservar en frío (4ºC). Evitar el congelamiento y


descongelamiento. Procesar en forma inmediata.
Métodos de Diagnóstico Directos
 Detectan la presencia de virus en muestras
clínicas.
1. Detección del virus como agente
infeccioso:
Aislamiento viral

2. Detección de partícula viral: Microscopía


electrónica

3. Antígenos virales: IF, IP, EIA

4. Genomas virales: PCR, rtPCR.


Métodos moleculares
Fotografía electrónica de virus
entéricos
ADENOVIRUS HERPESVIRUS

ENTEROVIRUS
ROTAVIRUS
Métodos: Inmunoflorescencia
Inmunofluorescencia
(IF): isotiocianato de
fluoresceína (FITC)

-Directa: Fácil de usar,


conjugación de cada Ac
antiviral

- Indirecta:Más
sensible
y más versátil.
- Microscopio de
fluorescencia (luz UV)
PCR: Reaccion en cadena de la Polimerasa
Amplificación enzimática in vitro de un fragmento de ADN ó
ARN en forma exponencial.

 Proceso repetitivo de ciclos


 Cada paso se produce a una temperatura determinada
Ventajas de la PCR
 Rápida: resultados en el día
 Elevada sensibilidad y especificidad
 No requiere la viabilidad del virus

Desventajas de la PCR
 RNA es fácilmente degradable
Inhibición de la reacción (falsos
negativos)
 Contaminación (falsos
positivos)
Métodos de Diagnóstico Indirectos
 Serología: detección de anticuerpos
específicos antivirales en el suero del paciente.

- Conversión serológica: aparición o aumento de 4 o


más veces del título de Ac entre 2 muestras pareadas
de suero, fase aguda y convalesciente (14 a 21 días).
IgG.

- Presencia de IgM específica: en una sola muestra de


período agudo o convalescencia temprana

- ELISA, RIA, Western Blot


Serología: Curva de detección de Ac

Diagnóstico serológico se basa en la cinética de la


respuesta de Ac a la infección viral.

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