ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

Curso: Biología Celular y Molecular

Unidad: IV
CLASE N° 15
Diagnostico Molecular.

Mg.
Diagnostico molecular
 DEFINICION
El concepto de “diagnóstico molecular” es un término
amplio que incluye técnicas de biología molecular en
beneficio de la salud humana, detectando y/o
cuantificando secuencias genéticas específicas de
ácido desoxirribonucleico (ADN), ácido ribonucleico
(ARN) o proteínas.
Inicialmente, el concepto de “Biología Molecular” se
aplicó a los trabajos realizados
sobre el ADNy se consideraba materia solo académica y
de investigación.
Diagnostico molecular
Vieja
Forma

Muestra de
Tejido del Patologi
paciente a
Proteomica
Proteina
Nueva s
Forma
Espectrometria de Imagen
masas Proteomica
Genomica
Muestra de
Tejido del
paciente o
muestra de
sangre Chip Imagen de
genetico microarrays
¿Cual es el futuro del diagnóstico molecular?
Microarray de genes
Paciente con
muestra patrón de proteína Durante su tratamiento,
"marcador" La quimioterapia
cancer
combinada interrumpe los patrones de
una de las redes del
cáncer.
expresión de proteínas
Paciente
debe se utilizan para
responder
a los asegurarse de que su
medicamen
tos A y B tratamiento interrumpa
Muestra de Paciente
Tejido del esta en efectivamente la vía
paciente o remision celular dirigida en su
muestra de tumor.
sangre
Microarray de proteínas Después del tratamiento,
muestra proteínas
activas más patrones de
expresión de genes y
proteínas verifican que
el cáncer está en
remisión.
¿ Por qué se han desarrollado tantas
herramientas para realizar
diagnósticos utilizando la biología
molecular?
Porque introducen un cambio
positivo en la vida de los
pacientes…….
 Diagnóstico Molecular

Proteómica
Genómica

Maldi TOF
PCR
RT-PCR
q-PCR

Microarray
FISH
Técnicas más comunes para del dx por
molecular
• FISH:
• Fluorescent In Situ Hybridization
• De gran utilidad en estudios citogenéticos.
• Detección de genes anómalos.
• Detección/diagnóstico de enfermedades congénitas.
• Detección/diagnóstico de cáncer.

Mucho procedimiento manual

Bajo grado de automatización
Buena sensibilidad y especificidad
Requiere de personal entrenado
Técnicas más comunes para del dx por
molecular
• Microarray:
• Técnica que permite la hibridación de un genoma incógnita con sondas fijas
en un dispositivo.
• Se fundamenta en la complementariedad del ADN ADN.

Enfermedades congénitas.
Mutaciones
Epidemiología
Filogenética
MicroArrays:
Es una superficie sólida a la cual se une una colección de fragmentos de ADN. Se
usan para analizar expresión diferencial de genes. Su funcionamiento consiste
en medir el nivel de hibridación entre la sonda específica, y su target, que se
refleja comúnmente mediante análisis de imágenes de la intensidad de
fluorescencia.
 Técnicas más comunes para del dx por
molecular
• PCR
• “PCR is a technique that allows chemists to easily, and inexpensively, replicate
as much precise DNA as they need”.
• La PCR es un proceso biosintético in vitro que simula los procesos naturales
de la replicación de ácidos nucleicos mediante el control de variables
básicas como tiempo, temperatura y adición de reactivos.

Grado de automatización variable

En ocasiones requiere de
personal entrenado
Infraestructura y equipamiento
PCR – Reacción en cadena de la polimerasa:
 Técnicas más comunes para del dx por
molecular
• Proteómica:
• Biotipificación de proteínas de microorganismos.
• MALDI-Toff, análisis de riboproteinas

Identificación bacteriana rápida.

Para laboratorios de alto volumen.
Permite la identificación de variados
microorganismos
Aplicaciones de Biología Molecular
PCR

Microbiología
DIGANOSTICO SEGUIMIENTO

Carga viral
DETECCIÓN/
IDENTIFICACIÓN
HIV CMV

Bacteriología Virología

Micología
Aplicaciones de Biología Molecular
PCR

Microbiología

Tecnicas directas Tecnicas indirectas

DIGANOSTICO
Consiste en la detección de un
A partir de un
gen de un patógeno
A partir de una aislamiento
muestra previo

Infecciones
respiratorias Hemocultivos
Gastrointestinales
SNC
 Microbiología

SEGUIMIENTO

Carga
viral/secuenciamient
o

CMV
HIV HCV
JC/BK

Tratamiento
Evolución patología
Implementación de corrección terapéutica
Abordaje clínico
qPCR
Aplicaciones de Biología
Molecular
Algunos ejemplos
Los avances en medicina del
Cáncer cáncer se han logrado en gran
parte gracias a BM

• Pronóstico:
• Mediante detección de mutaciones (PCR/MICRO)
• Oncogenes (met, ret)
• Genes de regulación (Rb, p53)
• Genes care giver (BRCA 1, XP)
• Diagnóstico:
• Cáncer cérvix, genotipificación de HPV detección de genotipos
de alto riesgo (PCR/LIPA/CH)
 Aplicaciones de Biología
Molecular Algunos ejemplos

Cáncer

• Seguimiento:
• Transcripción de oncogenes (ARNm) PCR/FISH
• Producción de proteínas (proteómica)

• Tratamiento:
• Cáncer de mama, tumores ErbB positivos (FISH/PCR).
 Cáncer

• En la actualidad se cuentan con diferentes kit para

diferentes aplicaciones con diferente grado de
automatización, principalmente:
• CA de mama
• CA de cuello de útero
• Muchas de estas tecnologías no están disponibles en la
región.
• Varias relacionadas con casas farmacéuticas
RT-PCR – Reacción en cadena de la polimerasa
con transcriptasa inversa:
MLPA - Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification :
MLPA es una Multiplex PCR, que permite que en una misma reacción
se pueda detectar copias anormales de secuencias genómicas
diferentes de ARN o ADN.
Diagnostico usando Biomarcadores

Ensayos tienen que ser

diseñados para acceder y
aprovechar estos
biomarcadores de proteínas
isomórficas

fosforilación, sulfatación, acetilación, metilación y hidroxilación.

V. Ramakrishna1*, P. B. Janardhan1 and L. Sudarsanareddy. Stem Cells and Regenerative

Medicine – A Review. Annual Review & Research in Biology, 1(4): 79-110, 2011 .
https://cisncancer.org/research/new_treatments/molecular_diagnostics/how_it_works.html
 Marcadores de tumores
Usos en algunos tipos de cáncer Sustancias que se encuentran en:
• Detección • Sangre
• Diagnostico de enfermedades • Orina
infecciosas (50 a 60%) • Tejidos
• Tratamiento
• Monitoreo
Palomino-Camargo Carolina, González-Muñoz Yuniesky. Técnicas moleculares para la detección e identificación de patógenos en alimentos: ventajas y limitaciones.
Rev. perú. med. exp. salud publica  [Internet]. 2014  Jul [citado  2020  Mar  08] ;  31( 3 ): 535-546. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S1726-46342014000300020&lng=es.
Palomino-Camargo Carolina, González-Muñoz Yuniesky. Técnicas moleculares para la detección e identificación de patógenos en alimentos: ventajas y limitaciones.
Rev. perú. med. exp. salud publica  [Internet]. 2014  Jul [citado  2020  Mar  08] ;  31( 3 ): 535-546. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S1726-46342014000300020&lng=es.
 En Perú, desde el 2010 se viene usando
métodos moleculares basados en el uso
del kit comercial Genotype
MTBDRplus que combina un PCR
convencional multiplex y una posterior
hibridación reversa en tira de
nitrocelulosa que hacen que la
metodología sea compleja y aplicable a
muestras de esputo con baciloscopía
mínima (1+) (53,65 USD).

Ante este precedente, el análisis de

curvas de melting resulta ser una
alternativa ideal para el diagnóstico de
TB-MDR en muestras de esputo
mediante un PCR en tiempo real, debido
a que se puede realizar en menos de 24
horas (si se trabaja un grupo reducido de
muestras); además de ser de bajo costo
y de fácil interpretación

Galarza Marco, Guio Heinner, Reques Jenny, Piscoya Omar, Rodríguez Mitzi. Diagnóstico molecular de tuberculosis multidrogorresistente en muestras de
esputo mediante el análisis de curvas de melting. Rev. perú. med. exp. salud publica  [Internet]. 2018  Jul [citado  2020  Mar  08] ;  35( 3 ): 433-440. Disponible
en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342018000300009&lng=es.  http://dx.doi.org/10.17843/rpmesp.2018.353.3402.
Bordetella pertussis
Tos ferina
El diagnóstico se realiza mediante:
• Técnicas de cultivo microbiológico (sensibilidad entre un 12-
60%, alta especificidad)
• Ensayos de inmunofluorescencia (similar al anterior, mismo
día)
• Diagnóstico molecular, principalmente PCR-TR. (sensibilidad
entre 70-99% y una especificidad de 86-100%, tiempo de
detección de 1-4 horas. (Leber, 2014).
Farfán Mauricio. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico
molecular biology in clinical diagnosis bq. REV. MED. CLIN. CONDES -
2015; 26(6) 788-793]
Linfoma Non-Hodgkin's
El linfoma no Hodgkin (también conocido como LNH o simplemente
como linfoma) es un cáncer que comienza en las células llamadas
linfocitos, La fórmula de predicción de 17
genes identificó a los pacientes con
el peor pronóstico mejor que
cualquier otro método.

Como resultado, los pacientes que

se pronostica que tienen malos
resultados pueden identificarse
correctamente al inicio del
tratamiento y recibir terapias más
agresivas de inmediato en lugar de
esperar hasta que las terapias
estándar fallen.

https://cisncancer.org/research/new_treatments/molecular_diagnostics/how_it_works.
html
 Cromosoma Filadelfia
Anomalía del cromosoma 22 en la que este recibe una parte del cromosoma 9. En la leucemia
mielógena crónica y la leucemia linfocítica aguda, con frecuencia se encuentran células de la médula
ósea que contienen el cromosoma Filadelfia. El cromosoma 22 alterado se llama cromosoma
Filadelfia

RPC-TR es
posible
monitorear la
enfermedad
cuantificando
Presente los transcritos
aproximadamente en: de la fusión
• El 95% de los casos
leucemia mieloide
BCR-ABL
fusión de genes
crónica BCR-ABL
• 25-30% de los casos
leucemia linfoblástica
aguda en el adulto El gen ABL del
cromosoma 9 se une al
gen BCR del
cromosoma 22 para
formar el gen de fusión
BCR-ABL.

Farfán Mauricio. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico molecular biology in clinical diagnosis bq. REV. MED. CLIN. CONDES - 2015; 26(6) 788-793]
 Cáncer colon rectal
El cáncer colorrectal es el que se origina en el colon o el recto. A estos cánceres también se les puede
llamar cáncer de colon o cáncer de recto (rectal) dependiendo del lugar donde se originen.

la detección de mutaciones en el gen que codifica para la proteína K-Ras (KRAS) permite determinar
la respuesta a la terapia utilizando anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico
(EGFR).
Por lo tanto, el diagnóstico molecular de mutaciones en KRAS es un test realizado en pacientes que
podrían verse beneficiados por esta terapia (Dietel y cols, 2015). Actualmente, existen varios test
diagnósticos disponibles en el mercado, la mayoría con certificación IVD que aseguran la calidad de
los resultados.

Farfán Mauricio. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico molecular biology in clinical diagnosis
bq. REV. MED. CLIN. CONDES - 2015; 26(6) 788-793]
Ejemplo de mejoramiento de la terapia
usando diagnostico molecular
La administración de Herceptina (anticuerpo desarrollado con
farmacogenómica) en la comida y medicamentos a finales de 1998 en
mujeres con altos niveles de la proteína Her-2/neu, (25 a 30 % de pacientes
con cáncer de mama de rápido crecimiento)

https://cisncancer.org/research/new_treatments/molecular_diagnostics/how_it_works.htm
l
El uso de pruebas de diagnóstico en el
punto de atención (Point-of-Care POC)

Farfán Mauricio. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico molecular biology in clinical diagnosis
bq. REV. MED. CLIN. CONDES - 2015; 26(6) 788-793]
 El uso de pruebas de diagnóstico en el punto de
atención instrumentos (Point-of-Care POC)

la FDA aprobó para su uso en

clínica el panel Filmarray
respiratorio, un sistema con la
capacidad de detectar 20
patógenos respiratorios virales y
bacterianos en una plataforma
integrada que requiere una
manipulación de dos minutos por
parte del operador y la obtención de
resultados en un lapso de una hora
(Babady, 2013)

Farfán Mauricio. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico molecular biology in clinical diagnosis bq. REV. MED.
CLIN. CONDES - 2015; 26(6) 788-793]
 El uso de pruebas de diagnóstico en el punto de
atención instrumentos (Point-of-Care POC)

(Filmarray
gastrointestinal),
microorganismo
asociados a sepsis
(Filmarray BCID) o
meningitis/encefalitis
(Filmarray ME),
El uso de pruebas de diagnóstico en el punto de
atención instrumentos (Point-of-Care POC)

 La secuenciación de
la nueva generación
(NGS: Next-
Generation sequenci)
 estudio de
polimorfismos
genéticos (SNP:
single nucleotide
polymorphisms)
 Los microareglos
La secuenciación de la nueva generación (NGS: Next-
Generation)
Genoma humano
 ¿QUÉ ES EL GENOMA HUMANO?
 Un genoma es la colección completa
de ADN de un organismo.

 El genoma humano es la suma total

de la información genética
correspondiente a nuestra especie.

GENÓMICA
Ciencia que se encarga de localizar,
dentro del ADN, secuencias que
constituyan la estructura genética de
nuestra especie.

Recuperado de: R.L. Nussbaum, R.R McInnes, H. F. Willard. (2008). Thompson & Thompson: Genética en Medicina.Editorial: ELSEVIER
MASSON.
Proyecto del Genoma humano
Who?
Consorcio HGP and Celera
Genomics

2003 versión final

del genoma
humano
2001 avance
del HGP al
97%

1990 Inicio del

proyecto
genoma
humano (HGP)
James watson
Método de Sanger
Next Generation Sequencing (NGS)
Proyecto de genoma humano
El Proyecto Genoma Humano (PGH)
(Human Genome Project en inglés) consiste
en determinar las posiciones relativas de
todos los nucleótidos (o pares de bases) e
identificar los 20.000 a 25.000 genes
presentes en él.
Objetivos
• Mapear
• Secuenciar
• Análisis funcional

https://es.slideshare.net/vinithasekar/human-genome-project-72272927
 Genoma humano

https://www2.le.ac.uk/projects/oer/oers/genetics/oers/Genomics%20and%20the%20Human%20Genome%20Project/Genomics%20and%20the%20Human%20G
enome%20Project-TRF.pdf
https://www.kaufmanhall.com/ideas-resources/article/precision-medicine-future-now
Composición y complejidad

Haploide part

1 cromosoma 5cm aprox.

1 copia del genoma 2m aprox.

https://www.lehigh.edu/~inbios21/PDF/Fall2014/Marzillier_09052014.pdf
Contenido de ADN de los cromosomas
humanos

http://genoma.unsam.edu.ar/cursos/genetica_humana/teoricas/GenHumCap7_OrgGenoma_alumnos.pdf
Tamaño promedio de exones y intrones
en genes humanos
Genes superpuestos

http://genoma.unsam.edu.ar/cursos/genetica_humana/teoricas/GenHumCap7_OrgGenoma_alumnos.pdf
Genes dentro de genes
Organización del genoma humano

https://es.slideshare.net/revil4/clase-7-organizacin-del-genoma-humano
2% son genes
 Relación entre el contenido de G +C y densidad de
genes

Venter, J. C., et al. The sequence of the human genome. Science 291, 1304–1351 (2001) 

https://science.sciencemag.org/content/sci/291/5507/1304.full.pdf
Table 10. Features of the chromosomes. De novo/any refers to the union of de novo predictions
that do not overlap Otto predictions and have at least one other type of supporting evidence; de
novo/2x refers to the union of de novo predictions that do not overlap Otto predictions and have
at least two types of evidence. Deserts are regions of sequence with no annotated genes.

Venter, J. C., et al. The sequence of the human genome. Science 291, 1304–1351 (2001) 

https://science.sciencemag.org/content/sci/291/5507/1304.full.pdf
Venter, J. C., et al. The sequence of the human genome. Science 291, 1304–1351 (2001) 
https://science.sciencemag.org/content/sci/291/5507/1304.full.pdf
Venter, J. C., et al. The sequence of the human genome. Science 291, 1304–1351 (2001) 
https://science.sciencemag.org/content/sci/291/5507/1304.full.pdf
Estudios asociados al genoma
Genoma mitocondrial
Organización de genes en familia según el
grado de homología entre las mismas
Organización de genes en familias según el
grado de homología entre las mismas
En general tienen una función similar –
genoma humano
Organización de genes en familia según el grado de
homología entre las mismas
Superfamilias de las inmunologías
 Células madre y terapia celular
Las células madre tienen el potencial de convertirse en muchos tipos diferentes de células en el cuerpo
y sirven como un sistema de reparación para el organismo. Hay dos tipos: embrionarias y adultas
Las células madre del propio tejido sirven para regenerar tejidos como hueso, cartílago, piel y
músculo, entre otros
Celulas Madre y Terapia Celular

Biología Med
Medicina
Celular Regen
Regenerativa
MEDICINA REGENERATIVA: reposición o regeneración de células, tejidos u órganos
dañados mediante, células madre, moléculas solubles con efectos sobre estas células e
ingeniería de tejidos entre otros.

PLASTICIDAD Y AUTORENOVACIÓN
CÉLULAS
MADRE CLASIFICACIÓ
N

Según su origen Según

potencial
diferenciación

ADULTAS,
EMBRIONARIAS,
iPSCs
Medicina regenerativa
• Se basa en el empleo de la terapia celular y en la
ingeniería de tejidos para sustituir las células
dañadas de un órgano por células sanas
procedentes de otros
• Se fundamenta en la capacidad de las células
madres de convertirse en células especificas de
diferentes tejidos
• Constituye una importante revolución en el campo
de la medicina.
 Células madre
La medicina regenerativa
• Reemplazo, reparación o
restauración de tejidos lesionados.
• Surge como necesidad de
reconstrucción en niños y adultos
en los que el tejido ha sido dañado
por enfermedades, traumas y
anomalías congénitas.
• La investigación con células madre
tienen un potencial ilimitado para
dividirse y esta fuerza se usa para
la regeneración y reparación de
células dentro del cuerpo durante
el daño tisular.
Ramakrishna1*, P. B. Janardhan1 and L. Sudarsanareddy. Células madre y medicina regenerativa: una revisión. Annual Review & Research in
Biology 1(4): 79-110, 2011 Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/222277556_Stem_Cells_and_Regenerative_Medicine_-
A_Review [consultado el 09 de marzo de 2020].
 Eltérmino inglés es “Stem cells”
(CÉLULAS TRONCO)
Células Troncales o Tronco.

Ha trascendido socialmente el

término Célula Madre y a ellas nos
referiremos…
¿Qué son las células madre?

Las células madre

o stem cells se
define como una
celula progenitora
autorenovable
CLASIFICACIÓN

 SEGÚN EL MOMENTO DEL DESARROLLO

– CM EMBRIONARIAS
–
CM FETALES
–
CM ADULTAS
 SEGÚN POTENCIALIDAD
– TOTIPOTENCIALES
– PLURIPOTENCIALES
– MULTIPOTENCIALES
– UNIPOTENCIALES
 TIPOS DE CELULAS MADRE
EEddaadd

·• .
.,
1

(;~
,

'Embrión

-
Embrión de
I de
6 semanas Fet Adult
5-7 día
,s o o

Células Madr C é l u l a se r m i n a l Célul Madr Célul Madr Célul Madr

e GPri esdiale a s F e t ae l P al as c e en t a r as eltas
Embrionaria mor s F
e se iPal sa c Ad
s t e u
 Tipo de
celula madre Descripción Ejemplos
elulas
Toti Cada celula puede procedentes

potente desarrollar un de embriones

nuevo individuo de 1 a 3 días

Celulas pueden Algunas

Pluri diferenciarse en células del
uno de las de 200 blastocysto (5
potente tipos de celulas a 14 días)

Celulas Tejidos
diferenciadas que fetales, cordón
Multi pueden formar umbilical y
células de otros celulas madre
potente tejidos adulto
 Tipos de células madre utilizadas
en las investigaciones
Células epiteliales amnióticas

Vadde Ramakrishna and Jana Pb L. Sudarsanareddy. Stem Cells and Regenerative Medicine –A Review. May 2011
https://www.researchgate.net/publication/222277556_Stem_Cells_and_Regenerative_Medicine_-A_Review
https://www.ddw-online.com/therapeutics/p92858-stem-cells-for-cellular-therapy-space.html
Tipos de clase terapéutica celular
abordada de todas las compañías

Vadde Ramakrishna and Jana Pb L. Sudarsanareddy. Stem Cells and Regenerative Medicine –A Review.
May 2011
https://www.researchgate.net/publication/222277556_Stem_Cells_and_Regenerative_Medicine_-A_Review
https://www.ddw-online.com/therapeutics/p92858-stem-cells-for-cellular-therapy-space.html
muestra el desglose de aproximadamente 23,000 publicaciones que se ajustan a los criterios
presentados aquí. Tenga en cuenta que los cuadrantes rojos representan áreas de concentración de
publicaciones, como las células madre hematopoyéticas para trasplante, leucemia, así como bajo los
esquemas de búsqueda de terapia celular.

https://www.ddw-online.com/therapeutics/p92858-stem-cells-for-cellular-therapy-space.html
HSCT: una plataforma de la terapia celular
Trasplante de células madre
hematopoyéticas
El trasplante de
precursores
hematopoyéticos
conocido
genéricamente
como trasplante
de médula ósea,
es un
procedimiento
mediante el cual
se destruye la
médula ósea
dañada de un
paciente y se la
reemplaza por
precursores
hematopoyéticos
nuevos y sanos.
Kitterman/Science Translational Medicine
https://stm.sciencemag.org/content/10/436/eaap9630/tab-figures-data
Kitterman/Science Translational Medicine
https://stm.sciencemag.org/content/10/436/eaap9630/tab-figures-data
 Terapia de células T en la era de la
medicina de precisión

Kitterman/Science Translational Medicine

https://stm.sciencemag.org/content/10/436/eaap9630/tab-figures-data
 Ensayos clínicos con Terapia Celular
 IAM  Ulceras de decúbito
 Insuficiencia  Enfermedad
hepática aguda inflamatoria
 Enfermedad de intestinal
injerto contra el  Lesión medular
huésped  Reparación de
 Incontinencia defectos óseos
urinaria y fecall  Fístulas bronquiales
 Reparación corneal  Fístulas digestivas
 Arteriopatias  Pie diabético
Células madre en el tratamiento de las
mayores enfermedades
1. células madre en la terapia de desordenes neurológicos
 Parkinson’s disease (PD)
 Alzheimer’s disease (AD)

2. células madre en la regeneración de células musculares

3. células madre en la reparación cardiaca

 Embrionicas
 medula ósea de Humano adulto
 Cardiacas
 Mesenquimales
 sangre del cordón Umbilical
4. células madre en la investigación de ortopedia
5. células madre en la terapia del cáncer
6. células madre en el tratamiento de la diabetes

Ramakrishna1*, P. B. Janardhan1 and L. Sudarsanareddy. Células madre y medicina regenerativa: una revisión.
Annual Review & Research in Biology 1(4): 79-110, 2011 Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/222277556_Stem_Cells_and_Regenerative_Medicine_-A_Review
[consultado el 09 de marzo de 2020].
IV.-REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• Nuffield Council on Bioethics Genome Editing and Human Reproduction: social and ethical issues (London:
Nuffield Council on Bioethics). 2018
https://www.nuffieldbioethics.org/assets/pdfs/Genome-editing-and-human-reproduction-report.pdf
• Farfán Mauricio. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico molecular biology in clinical diagnosis
bq. REV. MED. CLIN. CONDES - 26(6) 788-793] 2015
• Galarza Marco, Guio Heinner, Reques Jenny, Piscoya Omar, Rodríguez Mitzi. Diagnóstico molecular de
tuberculosis multidrogorresistente en muestras de esputo mediante el análisis de curvas de melting. Rev.
perú. med. exp. salud publica  [Internet]. 2018  Jul [citado  2020  Mar  08] ;  35( 3 ): 433-440. Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342018000300009&lng=es. 
http://dx.doi.org/10.17843/rpmesp.2018.353.3402
• Ramakrishna1*, P. B. Janardhan1 and L. Sudarsanareddy. Células madre y medicina regenerativa: una
revisión. Annual Review & Research in Biology 1(4): 79-110, 2011 Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/222277556_Stem_Cells_and_Regenerative_Medicine_-
A_Review [consultado el 09 de marzo de 2020].
• Vadde Ramakrishna and Jana Pb L. Sudarsanareddy. Stem Cells and Regenerative Medicine –A Review. May
2011 https://www.researchgate.net/publication/222277556_Stem_Cells_and_Regenerative_Medicine_-
A_Review
• Venter, J. C., et al. The sequence of the human genome. Science 291, 1304–1351 (2001) 
https://science.sciencemag.org/content/sci/291/5507/1304.full.pdf